MFC检测微小残留病变在AML中的临床应用与研究进展
微小残留病检测在儿童急性淋巴细胞白血病中的临床价值及应用
微 小 残 留病 检 测在 儿 童 急性 淋 巴细胞 白血病 中 的 临床 价值 及 应用
Ａ Ｌ儿童获 得 长期 生存 的 主要 障 碍 ， 死亡 的重 要 Ｌ 是 原因， 因而 它 已成 为儿 童 血液 肿 瘤研 究 中 的一 个 严 峻挑 战 。研究 显 示 ， 发 的 主要 原 因之 一 为化 疗 完 复
全缓解后体内残存 的微量白血病细胞即微小残留病 （ ｎｍａ Ｒ ｓ ｕｌＤｓａｅ Ｍｉ ｌ ｅｉ ａ ｉ ｓ ，ＭＲ 。这 些 微 量 白 ｉ ｄ ｅ Ｄ）
近 三十年 来 ， 联合 化 疗 方 案 的进 展 使 得 儿 童 急 性淋 巴细胞 白血 病 （ ｃｔ Ｌｍｐｏｌ ｔ ｅｋｍｉ， Ａ ｕｅ ｙ ｈｂａ ｉ Ｌ ｕｅ ａ ｓｃ
Ａ Ｌ 的疗效有 了显著提高 ， Ｌ） ５年元病生存率 （ ｖｎ Ｅ ｅｔ Ｆｅ ｕ ｉ ｌ Ｅ Ｓ 达到 ８ ％以上 ， ｒ Ｓｒ ｖ ， Ｆ ） ｅ ｖａ ０ 但仍 不能避免 ２ ％ 一２ ％ 的 患 者 最 终 出 现 复 发 ¨ 。复 发 已 是 ０ ５ 』
基金项 目： 国家科技支撑计划 项 目（０ ７ ＡＯ Ｂ ３ ； ２ ０ Ｂ Ｉ ０ ） 北京市科 ４ 技计划资助项 目（ ００ ０ １ ０ ３ ） 北京市科技新 星计 划基金 资助 Ｄ９５００ ４ １ ； ４
血病 细胞 从形 态 学上无 法辨认 ， 只能通过 免疫 学 、 分 子 生物学 等方 法 ， 采用灵 敏度 高 、 异性 强 的技 术 进 特
行检 测 。
流式细胞仪检测儿童急性髓系白血病微小残留病的研究进展
ｄｅｒ
Ｖｅｌｄｅｎ等¨６。应用ＦＣＭ对９４例ＡＭＬ儿童进行微小
残留病连续监测。结果表明，初次诱导化疗后的微小残留病 水平可以预测临床长期结果：微小残留病阴性组（微小残留 病＜０．１％），微小残留病弱阳性组（０．１％≤微小残留病 ＜０．５％）和微小残留病强阳性组（微小残留病≥０．５％）的 ３年无复发生存率分别为（８５±８）％，（６４±１０）％和（１４± ９）％（Ｐ＜０．００１）；相应的总体生存率分别为（９５±５）％， （７０±１０）％和（４０±１３）％（Ｐ＜０．００１）。在包括年龄、细胞 核型、ＦＭＳ样酪氨酸激酶３（ＦＬＴ３）基因内部串联重复（ＩＴＤ） 突变和初诊时白细胞计数在内的多因素分析表明，初次化疗 结束后的微小残留病水平是独立的预后因素。 本研究组采用四色ＦＣＭ的方法，对５５例初诊时具有异 常免疫表型的非Ｍ３型ＡＭＬ患儿的骨髓标本进行微小残留 病监测旧…。根据初次诱导（柔红霉素＋阿糖胞苷＋依托泊 苷，ＤＡＥ）化疗后的微小残留病水平，可将患者分成低风险 组（微小残留病＜０．２５％）和高风险组（微小残留病≥ ０．２５％），其５年累积复发率分别为２１．２％和６６．８％（Ｐ＝ ０．００２）。在多因素分析中，初次诱导化疗后的微小残留病水 平是其他所有研究参数（包括年龄、细胞遗传学状态、初诊白
主堡』Ｌ型苤查！！！ｊ生ｊ旦笠ｉ！鲞箜！塑￡地！』里！ｉ堕！：丛！堕！垫！！：∑！！：ｉ！：塑垒！
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．综述．流式细胞仪检测儿来自急性髓系白血病微小残留病的 研究进展
冯建华徐晓军 汤永民
ｌｅｕｋｅｍｉａ，ＡＭＬ）发病率 ＦＣＭ检测微小残留病的优点是能够准确定量残留白血 病细胞。另外，ＦＣＭ可以区分存活和凋亡细胞，并有助于了 解标本中正常造血细胞状态的概况。ＦＣＭ检测微小残留病 存在的一个问题是ＬＡＩＰ表达模式的不稳定性。研究表明， 相当高比例的ＡＭＬ患者的抗原表达模式会在疾病过程中发 生转变，即“抗原漂移”。２０“ｏ。对于医疗资源以及技术有限 的国家或地区，可以采用三色或四色ＦＣＭ集中于治疗早期 （例如诱导治疗中期；初次诱导后）检测微小残留病，从而降 低检测成本，同时可以避免因治疗后期（例如巩固治疗后） 抗原漂移或再生骨髓中正常幼稚细胞干扰而造成假阴性或 假阳性结果。然而上述操作却不利于长程随访监测。此外， 治疗早期的微小残留病水平比较适合反映“白血病细胞清 除速度”，其代表白血病细胞对化疗的敏感程度，而目前尚无 公开资料支持“快速的白血病细胞清除”与获得微小残留病 阴性结果之间存在联系嵋”…。因此用于微小残留病检测的 抗体组合不应局限于初诊时检测到的一种免疫表型，同时也 应该包括所有检测时间点的多种抗体组合Ⅲ‘２“。理论上， 所采用的每组免疫学标志物即抗体数目越多，则识别白血病 细胞的特异性就越高。有研究表明，采用６色ＦＣＭ技术分 析不仅可以提高检测敏感度，同时也可因ＬＡＩＰ组合的优化 而改善白细胞克隆定性信息的质量‘２“。采用每组８色的 ＬＡＩＰ表型，则识别白血病细胞的特异性更高，目前已经开始 采用８色ＦＣＭ进行微小残留病的监测。然而，若每组表型 使用的标记数过多，则ＦＣＭ的检测成本将超过ＰＣＲ，因此已 有研究使用标准或特异性的个体化抗体组合用于检测微小 残留病。此外，ＦＣＭ检测微小残留病的质量具有一定程度 的操作者依赖性，需要娴熟的流式细胞术分析专业技术予以 保证。为得到可靠结果，检测过程、试剂、分析必须标准化， 包括开发流式细胞数据自动分析软件’２５，同时需要各个实 验室之间的对照研究，特别是多中心研究。 二、ＦＣＭ检测微小残留病的临床应用 １．临床预后和治疗指导意义：近年来的研究证实，骨髓 中白血病细胞的动态消减和微小残留病水平可用于判断预 后、评估复发风险。Ｓｉｅｖｅｒｓ等¨４ Ｊ的回顾性研究采用标准三
急性髓系白血病微小残留病检测与临床解读
和NGS等方法在患者体内检测不到白血病细胞；部分MRD阴性患者可再 次转为MRD阳性导致晚期复发；部分患者获得临床治愈（图1）。
二、MRD的概念和检测方法
（二）分子学方法检测MRD
2．分子标志检测MRD的技术要求： 应用1 μg RNA逆转录为cDNA，每次反应的cDNA相当于100 ng RNA（约
为200 000个细胞，如果基因表达水平高则需要的细胞数量少）。 对于基于DNA的方法，每次反应需要至少100 ng DNA（约为15 000个细
此外，包括RUNX1、GATA2、CEBPA、DDX41和ANKRD26在内的某些 胚系基因突变与AML发生风险相关，如果把这些基因突变作为MRD评估 的标志，就需要应用DNA测序的方法除外它们是胚系组织（皮肤组织、 毛囊或颊黏膜）来源的突变。
多个MRD分子标志物组合应用可克服单个分子标志物评估MRD的缺陷， 该缺陷包括AML亚克隆的异质性和CHIP的存在对MRD的影响等。
二、MRD的概念和检测方法
二、MRD的概念和检测方法
二、MRD的概念和检测方法
（一）MFC检测MRD
用于MFC评估表型异常白血病细胞的单克隆免疫荧光抗体包括CD34、 CD117、CD13和CD33，跨系表达抗原CD2、CD7、CD19和CD56等。
利用MFC检测MRD的方法包括白血病相关异常表型（LAIP）以及与正常 骨髓细胞表型相鉴别（D-F-N，different from normal），前者是指初诊时 确定患者的LAIP，在随后的治疗过程中利用LAIP进行MRD检测；后者可 用于缺乏初诊LAIP的患者，也可检测治疗过程中出现的抗原漂移 （Antigen shift）。
完全缓解急性白血病患者微小残留病的监测及其临床意义的开题报告
完全缓解急性白血病患者微小残留病的监测及其临床意义的开
题报告
一、研究背景
白血病是血液系统恶性肿瘤疾病之一，特点是骨髓或淋巴组织中存在大量异常细胞，导致正常血细胞受到抑制或代偿性增生，引起贫血、感染和出血等症状，危及生命。
随着白血病治疗的进步，尤其是多种化疗药物和造血干细胞移植等技术的应用，患者的生存期有了显著的提高。
然而，治疗过程中微小残留病的监测却成为了治疗方案制定、疗效判定和预后评估的重要指标。
微小残留病是指在化疗、放疗或干细胞移植等治疗结束后，血液或骨髓中仍存在极少数的癌细胞，虽然病情已经得到缓解，但极易引起复发。
因此，准确监测微小残留病的水平对于制定个性化的治疗方案、评估疗效和预测患者预后至关重要。
二、研究目的
本文旨在探讨完全缓解急性白血病患者微小残留病的监测和临床意义，以期为临床治疗提供参考依据和理论支持。
三、研究内容
1. 微小残留病的概念、类型和分类方法
2. 微小残留病监测的方法、指标和临床应用
3. 微小残留病与疾病预后的关系及其临床意义
4. 微小残留病监测在临床治疗中的应用
5. 微小残留病监测的前景及其存在的问题与挑战
四、研究意义
本文对完全缓解急性白血病患者微小残留病的监测及其临床意义进行了系统的探讨和总结，有利于促进治疗方案的个性化，提高患者的生存率和生命质量。
同时，探索微小残留病监测技术的进展和挑战，为临床医生提供了参考依据。
为了更好地开展研究，需要进一步加强医学科研团队的协作，建立统一的检测标准和质量控制体系，推广微小残留病监测技术的应用。
急性白血病完全缓解期检测微小残留病的临床意义
㊃论㊀㊀著㊃∗通讯作者急性白血病完全缓解期检测微小残留病的临床意义赵㊀兰,许惠利∗(上海健康医学院附属嘉定区中心医院血液科,上海,201800)摘㊀要:㊀目的㊀探讨急性白血病(acute leukemia,AL)获得完全缓解(complete remission,CR)后检测微小残留病(minimal residual disease,MRD)的临床意义㊂方法㊀所有患者初诊时均进行骨髓免疫分型检测,从首次诱导缓解治疗结束后第14天开始,每3个月检测一次MRD,并动态监测,同时进行骨髓形态学检查㊂结果㊀MRD <10-4复发率为22．2%,MRD >10-3复发率为77．8%,MRD >10-2复发率为100%㊂结论㊀经过20例患者的MRD 检测显示:MRD <10-4的复发率低,MRD ﹥10-3的复发率高,MRD ﹥10-2提示近期复发㊂因此,MRD 对早期复发的判断㊁及早干预治疗和治疗方案的选择有着明显的指导意义㊂关键词:㊀急性白血病㊀完全缓解㊀微小残留病㊀临床意义[中图分类号]㊀R733．7㊀㊀㊀㊀[文献标志码]㊀A㊀㊀㊀㊀[文章编号]1009-6213(2021)02-0193-03Clinical Significance of Detecting Minimal Residual Diseases in Complete Remission of Acute LeukemiaZHAO Lan,XU Hui-lI ∗(Department of Hematology,Jiading District Central Hospital Affiliated Shanghai University of Medicine &Health Sciences,Shanghai,201800,China)Abstract :㊀Objective ㊀To investigate the clinical significance of detecting microresidual disease(MRD)after complete remission of acute leukemia(AL)．method ㊀All patients were tested for bone marrow immunotyping at the first consultation．From the 14th day after the first induced remission treatment,MRD was tested every 3months,and dynamically monitored．Bone marrow morphology was also performed．Results ㊀MRD <10-4relapse rate of 27%,MRD >10-3recurrence rate is 82%,MRD >10-2The relapse rate of is 100%．Conclusion ㊀The MRD test of 20patients showed that the recurrence rate of MRD <10-4was low,the recurrence rate of MRD >10-3was high,and MRD >10-2suggested a recent recurrence．Therefore,earlydiagnosis,early intervention treatment and treatment options have obvious guiding significance．Key words :㊀Acute leukemia;Complete remission;Minimal residual disease;Clinical significance㊀㊀急性白血病(acute leukemia,AL)确诊时体内的白血病细胞数量大约为1010~1012,随着支持治疗的加强㊁多药联合方案的应用㊁大剂量化疗和HSCT 推广,AL 达到完全缓解(complete remission,CR)期较前有所提高,此时体内的白血病细胞数量降至108~109㊂据国外文献报道,大剂量化疗后完全缓解率约为50%~80%㊂CR 后复发是目前急性白血病面临的难题之一㊂近年来研究发现,微小残留病(minimal re-sidual disease,MRD)与白血病复发密切相关,体内残留的白血病细胞,为疾病复发的根源㊂为争取患者长期无病生存(disease-free survival time,DFS)和痊愈,必须对AL 患者的治疗方案进行优化,同时对MRD 进行动态监测,实时评估疗效,指导治疗及评价预后[1]㊂本研究通过对20例急性白血病缓解后的病人进行MRD 动态监测及分析,评价MRD 在指导治疗及早期预测复发的意义㊂1㊀资料与方法1．1㊀一般资料㊀收集20例患者均为上海健康医学院附属嘉定区中心医院2010年8月至2012年12月住院病人,统计截止日期为2018年12月底㊂根据㊃391㊃㊀血栓与止血学2021年第27卷第2期WHO MICM分型法确诊的AL患者,其中急性髓系白血病(AML)18例,急性淋巴细胞白血病(ALL)2例,年龄17~80岁,平均年龄为44岁,男10例,平均年龄为42．6岁,女10例,平均年龄为55岁㊂1．2㊀治疗方案㊀AML诱导缓解方案采用标准DA (柔红霉素+阿糖胞苷)㊁HA(高三尖杉酯碱+阿糖胞苷)㊁IA(去甲氧柔红霉素+阿糖胞苷)方案,ALL诱导缓解方案采用CVDP方案㊂巩固化疗AML采用DA㊁MA㊁HA㊁HD-Ara-C等,ALL采用CVDP㊁MA㊁HD-MTX 等方案,缓解期定期常规鞘注预防中枢神经系统白血病(CNSL)㊂1．3㊀临床完全缓解标准参照‘实用内科学“(第十五版)急性白血病CR 标准㊁成人急性髓系白血病中国诊疗指南(2017年版)㊁中国成人急性淋巴细胞白血病诊断与治疗指南(2016年版)㊂1．4㊀研究方法1．4．1㊀标本及仪器㊀抽取诱导治疗或强化治疗后患者的骨髓液进行骨髓涂片行细胞形态学分析,同时取EDTA抗凝骨髓液约3ml进行MRD检测㊂标本统一按照要求送达上海复旦大学新培晶临床分子研究中心,仪器采用美国BD公司FACS Calibur流式细胞仪㊂1．4．2㊀主要试剂㊀单克隆抗体购自美国BD公司,利用三色荧光(PE㊁FITC㊁PerCP)抗体直接标记法标记㊂1．4．3㊀MRD检测㊀所有患者初诊时均进行骨髓免疫分型检测,从首次诱导缓解治疗结束后第14天开始,每3个月检测一次MRD,并动态监测,同时进行骨髓形态学检查,收集100000个细胞㊂1．4．4㊀检测MRD的同时测定外周血血小板(PLT)计数和骨髓巨核细胞(MK)的变化判断白血病预后㊂2㊀结㊀㊀果2．1㊀MRD水平与复发的关系(表1)表1㊀20例AL患者CR后MRD水平与复发之间的关系MRD<10-492722．2% MRD<10-392277．8% MRD<10-2220100．0%㊀㊀MRD<10-4组一例M2患者,染色体检查示t(8;21),AML1/ETO融合基因表达㊂自认为预后良好,化疗未满三年即放弃治疗,回单位上班,9个月后复发㊂另一例M4患者CR近五年,行MRD检测提示MRD> 10-2,骨髓涂片原始细胞5%,随访骨髓检查,两个月后骨髓涂片原始细胞>20%㊂2．2㊀PLT㊁MK水平与复发的关系(表2)表2㊀PLT、MK水平与复发的关系MRD水平血象WBC Hb Plt骨髓象骨髓增加度原始细胞幼巨颗粒巨产板巨MRD<10-4CR5．8121133活跃0．5122314 MRD<10-4复发9．991133极度活跃2410189 MRD<10-3CR6．1113119活跃0．8132112 MRD<10-3复发11．18579极度活跃45978 MRD<10-2CR7．0104106活跃2．5111411 MRD<10-2复发10．57665极度活跃57753㊀㊀根据表1经过20例患者的MRD检测显示:MRD <10-4的复发率低,MRD﹥10-3的复发率高,MRD﹥10-2提示近期复发㊂因此,对早期复发的判断㊁及早干预治疗和治疗方案的选择有着明显的指导意义,并初步取得了良好的效果㊂根据表2急性白血病CR期,血小板在正常值㊁巨核细胞数量明显增加,以颗粒㊁产板巨增加为主㊂复发时血小板㊁巨核细胞总数减少,以幼巨㊁颗粒巨为主,产板巨减少明显㊂3㊀讨㊀㊀论AL患者初发时体内约有1012个白血病细胞,经过化疗后杀伤4个对数级后即可达到临床完全缓解(complete remission,CR),实际体内还有约108个白血病细胞,如果白血病细胞对化疗药物敏感,体内白血病细胞可以降得更低,例如白血病细胞﹤105㊂然而,目前常规检测白血病细胞数量为骨髓涂片计数的方法,原始细胞﹤5%即认为CR,实际体内残留的白血病细胞数无法计算㊂易造成AL患者的治疗不足或过度治疗㊂治疗不足易造成复发,过度治疗易出现致命性并发症[2]㊂因此,AL治疗后体内有多少残留白血病细胞,巩固治疗如何实施成为目前AL治疗的瓶颈㊂新近提出的微小残留病(minimal residual disease, MRD)是指恶性血液病经过治疗达到血液学完全缓解㊃491㊃㊀Chinese Journal of Thrombosis and Hemostasis2021Vol27No2㊀后体内残存的通过形态学等传统方法无法检测到的任何水平的微量肿瘤状态[3-4]㊂MRD能准确定量残留白血病细胞数,敏感度达到10-4~10-5㊂而基于MRD指导下的个体化治疗可以使不同危险度分层组中的患者避免过度治疗或治疗不足,以提高患者的长期生存率[5]㊂临床根据MRD水平高低,可以判断AL 患者对治疗的反应和预后,同时能早期预测复发,为早期干预提供有力依据㊂研究表明:MRD可作为AL 缓解和治愈的标准[6]㊂本研究中,我们对AL病人进行FCM(flow cytom-etry)的白血病细胞标记,然后观察AL患者经过治疗获得CR后骨髓中MRD的变化情况,定期监测CR病人的MRD变化情况,根据其变化选用合适的治疗方案㊂MRD作为白血病独立的预后因素,使AL的缓解标准由细胞水平提升到分子水平[7]㊂本研究的目的就是探讨MRD在监测AL复发前期的改变和及时干预治疗的应用价值㊂参照国外研究现状:San Miguel等根据MRD检测水平将AML获得CR的患者分为4组,即:MRD< 10-4㊁10-4~10-3㊁10-3~10-2㊁>10-2,随访观察发现,各组3年复发率分别为:0㊁14%㊁45%㊁85%[8]㊂Coustan Smith等应用多参数FCM研究MRD与预后的关系,发现以MRD检测10-4为标准,其5年复发率<10-4以下组为6．1%㊁>10-4以上组高达23%[9]㊂意大利学者Renato Bassan．等根据MRD结果分为:MRD阴性(﹤10-4)㊁MRD阳性(﹥10-4)[10]㊂MRD阴性者结束巩固治疗后进入为期2年的维持治疗㊂MRD阳性患者最好接受异基因干细胞移植,不能接受干细胞移植者,可以进行强化治疗+自身外周血干细胞支持㊂国内研究现状:在过去的10年中,随着FCM水平的不断提高,特别是8~10色MP-FCM在MRD检测中体现出敏感性高㊁特异好㊁适用范围广的优势,MRD的FCM检测从小规模样本的临床研究发展到大规模样本的临床验证,目前已成为恶性血液病临床疗效判断和预后分层的重要依据㊂初治AL患者经标准化疗后,虽然5年生存率达到40%~50%,但部分患者在2~3年内相继复发,其根源是患者体内残留的白血病细胞㊂学术界一致推荐把MRD检测作为白血病个体化治疗和预后判断的重要依据㊂与传统的形态学比较其创新点是能精确地定量残存白血病细胞数,敏感度达到10-4~10-5,而且该方法具有快捷㊁简便㊁敏感㊁特异的特点,值得推广和应用㊂参考文献[1]㊀MAURILLO L,BUCCISANO F,SPAGNOLI A.Monitoring ofminimal residual disease in adult acute myeloid leukemia u-sing peripheral blood as an alternative source to bone mar-row.HAEMATOLOGICA,2007[2]㊀M.J.BOROWITZ,M.DEVIDAS,S.P.HUNGER,et al.Clinical significance of minimal residual disease in child-hood acute lymphoblastic leukemia and its relationship toother prognostic factors:a Children s Oncology Group stud-y.Blood,June15,2008;111(12):5477-5485. [3]㊀HOKLAND P,OMMEN HB,MULE MP,et al.Advancing theMinimal Residual Disease Concept in Acute Myeloid Leuke-mia[J].Semin Hematol,2015,52(3):184-192. [4]㊀OSSENKOPPELE GJ,SCHUURHUIS GJ.MRD in AML:Itis time to change the definition of remission[J].Best PractRes Clin Haemetol,2014,27(3-4):265-271.DOI:10.1016/j.beha.2014.10.008.[5]㊀WOOD BL.Principles of minimal residual disease detectionfor hematopoietic neoplasms by flow cytometry[J].Cytome-try B Clin Cytom,2016,90(1):47-53.DOI:10.1002/cyto.b.21239.[6]㊀AL-MAWALI,D.GILLIS,I.LEWIS The Role of Multipa-rameter Flow Cytometry for Detection of Minimal ResidualDisease in Acute Myeloid Leukemia Am J Clin Pathol,Janu-ary1,2009;131(1):16-26.[7]㊀D.CAMPANA Minimal Residual Disease in Acute Lympho-blastic Leukemia Hematology,December1,2010;2010(1): 7-12.[8]㊀SAN-MIGUEL JF,VIDRIALES MB,L6PEZ-BERGESC,etal.Early Immunophenotypical evaluation of minimal residualdisease in acute nueloicl.Leukemia identifies different pa-tient risk groups and may contribute to postinduction treat-ment stratification.Blood.2001,98(6):1746-1751. [9]㊀COUSTAN-SMITH E.BEHM FG,SANCHEZ J,et al.Immu-nological detection of minimal residual disease in childrenwith acute lymphoblastic ncet.1998.351(9102):550-4.[10]RENATO BASSAN.et al.Improved risk classification forrisk-specific therapy based on the molecular study of mini-mal residual disease(MRD)in adult acute lymphoblasticleukemia(ALL) 2009by The American Society of He-matology(收稿日期:2020-10-20)㊃591㊃㊀血栓与止血学2021年第27卷第2期。
急性髓细胞白血病微小残留病的不同检测方法及临床意义的研究进展
中 同医 科 大 学 附 属 第 一 医 院 Ｊ 衄液科 ，沈 阳 １ １ ０ ０ ０ １
摘 要 ：急 性 髓 细 胞 白血 病 是 一 大 类 异 质 性 疾 病 ，预 后 差 别 较 大 ，微 小 残 留病 检 测 对 该 病 的 预 后 判 断 有 重 要 意 义 。近 年 来 ，采 用 定 量 Ｐ Ｃ Ｒ方 法 检 测 融 合 基 因 和基 因突 变 、采 用 流 式 细胞 术方 法 检 测 异 常抗 原 表 达 及 染 色 体 异 常 等
１ 融 合 基 因
融合 基 因指 的是 由于染 色体 易位 ，两 段 本 不相 连 的基 因错误 相连 形成 的在 正 常情 况 下检 测 不 到 的 基 因片段 。检测 融合基 因是 目前应 用 最广泛 的 Ａ ＭＬ
Ｍ Ｒ Ｄ 的检 测 方 法 。 约 ２ ０ ％的成 人 Ａ ＭＬ患 者 有
者 并不 代表 必然 未获治 愈 。 尽 管 多数研 究 证 实 融 合 基 因可 作 为 ＭＲ Ｄ 的检 测指标 ，但 不 同研 究 采用 的标 准 和检 测 时 间 差 别较
大 。一 项 对 ５ ３例 Ｃ Ｂ Ｆ ［ ３ Ｍ Ｙ Ｈｌ １阳性 的 Ａ ＭＬ患 者 的 研 究发 现 ，在巩 固治 疗期 间 出现 至少 一 次该 融 合基
Ｒ Ｕ Ｎ Ｘ１ 一 Ｒ Ｕ Ｎ Ｘ１ Ｔ ｌ（ 既往 称 Ａ ＭＬ １ 一 Ｅ Ｔ Ｏ） 和 Ｃ Ｂ Ｆ ［ ３
Ａ ＭＬ ，不包括 Ｍ３ ） 是一 大 类 异 质 性 疾 病 ，预后 差 别较大 。获得 形 态学 的完全 缓解 是 急 性髓 细 胞 白血 病 患者 获得彻 底治 愈 的前提 ，但 仅 仅 获得 形 态 学缓 解 不能 保证 患者得 到治 愈 。潜在 的或 隐藏 的 白血病 细胞在 患 者 体 内残 留被 称 为 微 小 残 留病 （ ｍ ｉ ｎ ｉ ｍ ａ ｌ
儿童急性白血病微小残留病检测方法及临床应用的开题报告
儿童急性白血病微小残留病检测方法及临床应用的开题报告一、研究背景急性白血病（Acute Lymphoblastic Leukemia，ALL）是儿童常见的恶性肿瘤之一，治疗手段以化疗为主。
经过治疗后，大多数患者可以达到缓解状态，但是很少有患者达到完全治愈。
这是由于一些白血病细胞在化疗后没有完全清除掉，而是残留在患者体内，称为微小残留病（Minimal Residual Disease，MRD）。
MRD是衡量治疗效果和预测患者预后的重要指标，目前已被广泛应用于ALL治疗的个体化管理。
二、研究内容本研究的主要目的是探索适用于儿童ALL微小残留病检测的方法，并探讨其在临床中的应用。
具体研究内容包括：1. 系统回顾和总结目前能用于儿童ALL微小残留病检测的方法及其优缺点。
2. 研究某种新型技术在儿童ALL微小残留病检测中的可行性和准确性。
3. 设计一项前瞻性研究，评估不同检测方法在指导ALL治疗方案制定和预测患者预后方面的效果。
三、研究方法1. 系统回顾：检索PubMed、Medline等公认的生物医学数据库，收集并筛选目前能用于儿童ALL微小残留病检测的方法，同时根据构建“PICOS”问题，确定每种方法的优缺点，并对其进行归纳总结。
2. 技术研究：选取一种新型技术，对其在儿童ALL微小残留病检测中的可行性和准确性进行研究，以比较引物限制性片段长度多态性聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）和流式细胞术（flow cytometry）两种常用方法的优势和劣势。
3. 前瞻性研究：选择一组未接受治疗、一组正在接受治疗和一组曾接受治疗的患者，对比不同检测方法在指导ALL治疗方案制定和预测患者预后方面的效果，确定最可靠的检测方法，并分析其不足之处和改进方向。
四、研究意义本研究有助于探索能够更准确、更便捷地检测儿童ALL微小残留病的方法，为ALL治疗的个体化管理提供科学依据。
急性髓系白血病微小残留病灶的检测
急性髓系白血病微小残留病灶的检测袁靖;朱明清;戴兰;沈文红;金力蕾;白霞;阮长耿【期刊名称】《检验医学与临床》【年(卷),期】2015(12)A01【摘要】目的探讨流式细胞术（FCM）检测急性髓系白血病（AML）患者微小残留病灶的特点及临床意义。
方法对60例急性髓系白血病（AML）患者采用CD45／SSC双参数散点图设门的方法进行四色流式细胞术微小残留病灶的动态监测。
结果60例急性髓系白血病（AML）患者异常免疫表型的出现频率为：交叉系列抗原表达占35％，抗原缺失占55％，抗原过度表达占6．7％，不同期抗原共表达仅占3．3％。
结论利用流式细胞术（FCM）能够对AML患者进行MRD动态监测，对治疗评估、预测预后及提示复发有重要意义。
【总页数】3页(P163-165)【关键词】急性髓系白血病;流式细胞术;微小残留病灶;免疫表型【作者】袁靖;朱明清;戴兰;沈文红;金力蕾;白霞;阮长耿【作者单位】苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所,江苏苏州215006【正文语种】中文【中图分类】R733.71【相关文献】1.多参数流式细胞仪在检测急性髓系白血病微小残留病灶中的运用 [J], 魏佳(综述);李惠民(审校)2.CD7抗原在急性髓系白血病微小残留病灶检测中的应用研究 [J], 栾春来;孟君霞;何孜岩;张晓南;唐广;陈杰甫;武永强3.流式细胞术动态监测微小残留病灶在急性髓系白血病中的意义 [J], 孙丽丽;李慧波;孔德胜;陈文佳;徐秉岐;李英花4.急性髓系白血病微小残留病灶检测方法的建立及其应用 [J], 赵佳琪;李伟静;王旭;郑亮亮;宋玉国5.急性髓系白血病患者WT1基因表达水平及其在微小残留病灶监测中的临床意义[J], 宁可;王海峰;徐莉;李丽宁因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
微小残留病灶检测判断急性淋巴细胞白血病预后的临床研究
微小残留病灶检测判断急性淋巴细胞白血病预后的临床研究目的：探讨微小残留病灶（MRD）检测对急性淋巴细胞白血病（ALL）预后判断的临床价值。
方法：选取本院收治的120例ALL患者作为研究对象，于诱导缓解治疗第33天、维持治疗第3个月分别对患者进行骨髓MRD检测，统计MRD阳性及阴性患者不同危险度及不同治疗时期的复发情况，同时比较诱导缓解治疗第33天不同骨髓缓解状况下MRD水平。
结果：诱导缓解治疗第33天以及维持治疗第3个月，高危组的MRD阳性率均显著高于中危组及低危组，差异有统计学意义（P＜0.01）；不同治疗时期MRD阳性复发率显著高于MRD阴性复发率，差异有统计学意义（P＜0.05）；诱导缓解治疗第33天骨髓象达M1的患者MRD≥10-2比例显著低于M2与M3组，差异有统计学意义（P＜0.01）；诱导缓解治疗第33天骨髓象达M1患者的复发率显著低于M2与M3组，差异有统计学意义（P＜0.01）。
结论：MRD水平与ALL的预后有关，MRD阳性可作为ALL患者预后判断的重要因素。
近年来，随着白血病化疗、靶向治疗及干细胞移植技术的不断发展，急性淋巴细胞白血病（Acute lymphoblastic leukemia，ALL）的治愈率得到显著提高，部分发达国家已经超过80%，但仍有20%的患者存在复发，复发后的治愈率则显著下降[1]。
大量临床研究显示，微小残留病灶（minimal residual disease，MRD）水平和白血病的复发有明显关系[2-3]。
对此，本研究对本院2012年6月-2014年6月收治的120例ALL患者进行MRD检测，比较MRD阳性及阴性患者的复发情况，以探讨MRD在ALL患者预后判断中的作用，现报告如下。
1 资料与方法1.1 一般资料选取本院2012年1月-2014年6月收治的120例ALL患者作为研究对象，上述病例均经骨髓细胞形态学、免疫学、分子生物学、遗传学等确诊，且均为初发患者，其中B淋巴细胞白血病109例，T淋巴细胞白血病11例；男68例，女52例；年龄18～70岁，平均（41.3±5.6）岁。
微小残留病灶(MRD)监测在慢性淋巴细胞白血病(CLL)中的应用进展
404复2孝旅（医学版）F u d an U n iv J M ed S ci2019 May, 46(3)微小残留病灶(MRD)监测在慢性淋巴细胞白血病(CLL)中的应用进展任雨虹(综述）刘澎△(审校）(复旦大学附属中山医院血液科上海200032)【摘要】慢性淋巴细胞白血病（chronic lymphocytic leukemia,CLL)是西方国家最常见的成人白血病，在我国的 发病率也日益增加。
近年来针对CLL的新药层出不穷，微小残留病灶(minimal residual disease，MRD)监测逐渐 成为评估疗效的重要手段。
本文总结了目前常用的MRD检测方法，包括流式细胞学和基于PCR法的分子学检 测，并介绍了其在初治CLL疗效评价、预后评估和在移植后CLL复发预警方面的应用进展。
【关键词】慢性淋巴细胞白血病(CLL);微小残留病灶(MRD);监测【中图分类号】R733, 72 【文献标识码】B doi： 10. 3969/j.issn.1672-8467. 2019. 03. 019 Progress of minimal residual disease (MRD) monitoring inchronic lymphocytic leukemia (CLL)REN Yu-hong, LIU PengA(Department o f Hematology，Zhongshan H ospital，Fudan University ’Shanghai 200032,China)【Abstract】Chronic lymphocytic leukemia (CLL) is the commonest adult leukemia in Western countries. Recent years has witnessed an increasing incidence rate in China. Since new agents have been developed over the decades»minimal residual disease (MRD) monitoring became an efficient way to assess the treatment effect. Here we reviewed the common methods to test MRD including flow cytometry and molecular detection methods based on PCR technique. Also we introduced the progress of MRD monitoring in response and prognostic assessment in newly-treated CLL patients and early relapse detection in CLL patients after allogenic stem cell transplantation.【Key words】chronic lymphocytic leukemia (CLL) ；minimal residual disease (MRD) ; monitoring * This work was supported by the National Natural Science Foundation of China (81570123).慢性淋巴细胞白血病（chronic lymphocyticleukemia，CLL)是一种成熟B淋巴细胞克隆增殖性 肿瘤，以淋巴细胞在外周血、骨髓、脾脏和淋巴结聚 集为特征，在西方国家的年发病率为4.2/10万，80 岁以上人群年发病率甚至超过30/10万[1]。
急性髓系白血病患者化疗后微小残留病与多药耐药基因表达相关
急性髓系白血病患者化疗后微小残留病与多药耐药基因表达相关李丽君;刘蓓;徐茜;刘欢【期刊名称】《基础医学与临床》【年(卷),期】2017(037)001【摘要】目的：明确急性髓系白血病（ AML）中微小残留病（ MRD）与多药耐药基因表达的相关性。
方法收集初诊AML患者骨髓52例，用real-time PCR检测患者化疗前ABCB1、ABCC1、ABCC4及ABCG24种多药耐药基因的表达，同时用多参数流式细胞术（ MFC）检测患者诱导化疗后和化疗3、6和9个月后的MRD表达水平。
结果52例AML患者MRD表达水平与ABCB1（P＜0.01）、ABCC1（P＜0.01）、ABCC4（P＜0.01）和ABCG2（P＜0.01）的mRNA表达水平具有明显相关性。
持续监测9个月后，MRD再次转阳者ABC基因表达水平显著高于持续阴性者：ABCB1（ P＜0.05）、ABCC1（P＜0.05）、ABCC4（P＜0.01）和ABCG2（P＜0.01）。
结论 MRD表达水平与多药耐药基因表达水平显著正相关。
【总页数】5页(P62-66)【作者】李丽君;刘蓓;徐茜;刘欢【作者单位】兰州大学第一医院血液科，甘肃兰州730000;兰州大学第一医院血液科，甘肃兰州730000;兰州大学第一医院血液科，甘肃兰州730000;兰州大学第一医院血液科，甘肃兰州730000【正文语种】中文【中图分类】R557【相关文献】1.中老年急性髓系白血病患者异基因造血干细胞移植前微小残留病检测意义的Meta分析 [J], 冯友繁;魏小芳;张启科2.中老年急性髓系白血病患者异基因造血干细胞移植前微小残留病检测意义的Meta分析 [J], 冯友繁;魏小芳;张启科;;;3.多参数流式细胞术对急性髓系白血病微小残留病变的监测及对患者复发率的影响[J], 王升;张琰;武永强4.肝脾硬度与急性髓系白血病微小残留病的相关性研究 [J], 王宁方;赵崇山;尤月明;王毅军;蔡卓纹;张东东;刘芳5.急性髓系白血病患者WT1基因表达水平及其在微小残留病灶监测中的临床意义[J], 宁可;王海峰;徐莉;李丽宁因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
微小残留病变检测在急性淋巴细胞白血病治疗中的意义
微小残留病变检测在急性淋巴细胞白血病治疗中的意义摘要】微小残留病变检测（MRD）在急性淋巴细胞白血病治疗中发挥重要的作用，它可以提高临床结果的精确度。
MDR检测的目的是提高分子生物学水平的CR标准，为临床判断、治疗以及预后等方面提供正确的诊断。
微小残留病变检测在急性淋巴细胞性白血病的检查诊断中得到全面的应用，本文对白血病微小残留病的定义、方法学及临床应用进行综述，探究微小残留病变检测在急性淋巴细胞白血病治疗中的重要意义。
【关键词】微小残留病变检测急性淋巴细胞白血病临床意义【中图分类号】R55 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）19-0131-02微小残留白血病（minimal residual disease，MRD），是指经过化疗后使患者的病情处于良好的控制程度，但是骨髓中仍存在形态上不能检测到的白血病细胞，造成白血病的复发几率。
所以提高MRD的检测率才能提高治疗的成功率[1]。
目前，评价MRD的标准基本上已经一致：在AML和ALL患者形态学正常的骨髓中，通过流式细胞仪检测到的最具有评估预后价值的指标为白血病细胞数在0.028％左右。
现报道，微小残留病变检测在急性淋巴细胞白血病治疗中的意义。
1.急性淋巴细胞白血病特征急性淋巴细胞白血病的发病对象一般都是年纪比较小的儿童，男性患者居多，发病高峰年龄在四岁左右。
据研究，导致急性淋巴细胞白血病主要因素是骨髓、脾脏以及淋巴结无限增殖。
儿童白血病早期都患有严重的贫血，他们的临床症状表现为：全身发热、呕吐恶心、惊厥昏迷、口腔牙龈以及颅内大出血、肝脾和淋巴结部位肿大等。
急淋的治疗主要包括：诱导治疗、巩固治疗、庇护预防、维持和加强治疗。
我们可以根据患者病情的严重程度和转化程度，再及时选择可行性的治疗方案，提高完全缓解率[2]。
2.微小残留病变检测在急性淋巴细胞白血病中的临床应用核型分析、荧光原位杂交（FISH）、流式细胞术（FCM）以及Southern blot等方法组成MDR检测的重要方法。
急性髓细胞白血病微小残留病变检测的探讨
响,其影响程度随标准加样量的减少呈增大趋势[5]㊂在检测过程中还要及时判断设备可能出现的故障并采取相应措施,从而降低故障率,提高血液检测质量;其次应由专人负责对仪器设备进行定期维护㊁保养和校准并做好记录㊂故障设备做好标识,严禁设备 带病 作业㊂仪器设备维修后要对其进行校准和验证,建立仪器设备应急预案,备用设备要定期维护和校准㊂工作人员必须严格按照操作规程使用㊁维护和保养,确保设备处于良好的工作状态[6]㊂全自动酶免分析系统的操作人员应具备一定的专业知识和高度的责任心,明白设备日常维护和保养的重要意义,掌握日常维护保养方法和常见故障处理措施㊂在设备使用过程中要及时做好维护与保养工作,细心观察,发现故障及时处理,从而使设备始终处于良好的工作状态㊂血站实验室在不断引进和更新自动化检测设备的同时,为使仪器安全㊁高效的运行,严格遵守标准操作规程是前提,维护保养是关键,对自动酶免分析系统各部件的维护保养尤为重要㊂仪器设备的运行状态直接影响酶免检测结果的精密度和特异性,只有管理好㊁使用好㊁维护好这些检测设备,才可以最大限度的降低自动化设备检测结果的系统误差,确保检测结果的准确度和可信度,提高自动酶免分析系统检测的稳定性,最终保证血液检测质量㊂参考文献[1]黄伯泉,梁浩坚,李仲平,等.F AM E 全自动酶免分析系统的保养与故障关系探讨[J ].中国输血杂志,2013,26(10):1007-1009.[2]吴洁,潘安杰.M i c r o l a b F AM E 全自动酶免分析仪常见故障分析处理及预防[J ].临床输血与检验,2010,12(2):168-169.[3]王新波,魏哲.F AM E 全自动酶免分析系统的应用[J ].临床输血与检验,2010,12(2):187-189.[4]丁卫平,柏亮.全自动加样仪与全自动酶免仪的2个关键点监控[J ].中国输血杂志,2009,22(6):476-477.[5]袁红,毛旖,黄文芳.E L I S A 试验加样误差对试验结果的影响分析[J ].国际检验医学杂志,2009,30(9):835-837.[6]颜秀娟,李忠,李彬.血站检验科关键控制点质量管理的探讨[J ].基层医学论坛,2009,13(4):156-158.ә通信作者,E -m a i l :20070914a @163.c o m ㊂管理㊃教学急性髓细胞白血病微小残留病变检测的探讨刘宇畅1,李 芳2ә(1.天津医科大学口腔医学院,天津300070;2.宁夏回族自治区人民医院/西北民族大学第一附属医院临床医学检验诊断中心,宁夏回族自治区银川750002) 摘 要:微小残留病变(M R D )是指在白血病治疗达到形态学上的完全缓解(C R )时,在外周血内依然存在少量的显微镜检测不出的白血病细胞㊂M R D 与白血病治疗后复发密切相关,研究证明M R D 因为其存在量低,用普通的显微镜难以检出,所以临床上需要结合细胞生物学㊁细胞形态学㊁分子生物学等多学科的知识,运用更加精确的方法得以检测㊂在MR D 的检测中,目前血液病学领域提出了多种检测方法,经典的检测方法包括组织病理学㊁聚合酶链式反应(P C R )㊁实时定量聚合酶链式反应(q-P C R )㊁流式细胞术㊁多参数流式细胞术(F C M )㊁二代测序技术(N G S )等㊂本文就目前检测急性髓系白血病M R D 的检测予以阐述㊂关键词:急性髓系白血病; 微小残留病变; 实验诊断1 研究背景临床治疗AM L 往往已达到形态学上的完全缓解(C R )作为治疗目的,其中包括髓系原始细胞<5%㊂但是在现实中,有许多患者在达到C R 后,疾病依然复发㊂现有的检测技术和检测标准依然无法做到在早期有效地监测微小残留病变(M R D ),如果有一种普遍有效且无毒的策略来消除残留的白血病,那么就没有必要去识别复发可能性更大的患者㊂尽管异基因干细胞移植有治愈的潜力,但它并不总是成功的,并且可能与发病率和病死率密切相关[1-2]㊂有效检测M R D 可以判断AM L 的治疗情况,可以达到预测复发和给予患者个性化治疗的目的㊂经过几十年的发展之后,就评估要素而言,对于M R D 的评估纳入了年龄㊁M R D 出现时白细胞的计数㊁免疫标记物和细胞生物学表面标记等方法,但不足的是,国际上至今依然没有对M R D 的临床检测提出过一套确切的量化标准;而就检测方法而言,因为有少量的M R D 往往具有突变和细胞表面标记物的改变,所以现有的检测技术无法覆盖所有的遗传标记物㊂这便导致临床检测无法覆盖所有的病例,这也就为M R D 的诊断带来了难度㊂综上所述,有以下3点理由要求提高M R D 临床㊃742㊃国际检验医学杂志2020年第41卷增刊Ⅰ检测的灵敏度:(1)M R D的存在与AM L复发密切相关;(2)有效检测M R D可以将达到C R后最有可能复发的患者筛选出来,从而给予个性化治疗避免疾病复发;(3)因为M R D遗传学标志物存在突变,所以纳入更多的标准提高实验诊断的准确性势在必行㊂本文总结了几种在临床上常用的检测技术,旨在考虑在现行的检测和治疗手段下,选用更加合适的检测手段以提高诊断水平㊂2研究进展2.1细胞形态学细胞形态学在诊断M R D中一直具有指导性㊂因为细胞形态学检测具有价格相对低廉,速度快等特点,所以在白血病的检测中依然具有重要的价值[3]㊂未来的细胞形态学检测或许会与免疫标记物的检测结合起来,发挥更加强大的作用㊂数字细胞形态学是显微细胞学中一个很有前途的新工具㊂由于技术进步和新的软件开发,这种方法可以自动定位㊁计数和捕获单个细胞的数字图像㊂虽然这一方法可能已经在一定程度上用于外周血涂片的分析,但由于骨髓涂片具有更为复杂的结构,将其应用于骨髓涂片仍有许多障碍需要克服㊂2.2 P C R在检测中的应用这类技术由于价格低廉㊁方便快捷常用于临床㊂P C R方法包括使用荧光探针的经典实时荧光定量P C R(q-P C R)㊁数字P C R和分子嵌合分析㊂这种方法通常是高度敏感的,因此目前被认为是金标准㊂然而,其适用范围仅限于40%的AM L患者中[1]㊂在监测基因突变时,其准确性可以达到10-4~10-6c o p y/m L㊂对于这些检测,使用基于R N A的方法,首先进行逆转录,在q P C R步骤之前生成互补D N A[4]㊂P C R可以通过扩增D N A序列从而探测是否存在基因的突变㊁异位和重组㊂逆转录P C R(R T-P C R)通过先将R N A反转录成互补D N A(c D N A),从而达到放大突变的效果㊂在研究之中,通常认为在R T-P C R可以做到在早期基因发生突变时,就可以对其进行监测和管理[4]㊂但是P C R检测不到酪氨酸激酶-3 (F L T3)的串联重复(I T D)突变㊂此外这类方法还有的缺点是:(1)对于引物的纯度要求高,而且伴随着R N A的低表达,其检测效果也是锐减的,(2)在检测过程中对于产物要进行严格监测,这对于许多实验室很难做到[4-5]㊂然而,R T-P C R的主要局限性之一是其应用仅限于具有可用分子靶点的患者,随着全基因检测的日渐普及,需要检测的位点和平台也会越来越多㊂AM L往往伴有染色体易位㊂有研究显示,约20%的AM L患者发生几种反复出现的平衡易位,包括t(15;17)(q22;q12)[P M L-R A R A]㊁t(8;21)(q22; q22)[r u n t相关转录因子1(R U N X1)-R U N X1T1或AM L1-E T O]和i n v(16)(p13.1q22)[C B F B-MY H11]㊂这几种易位在诊断和复发的时候非常稳定㊂这些易位可以运用P C R㊁R T-P C R检出,甚至有学者针对常见的几种易位与预后的关系进行了实验㊂使用q P C R对37例白血病患者治疗期间不同时间点的R U N X1-R U N X1T1和C B F B-MY H11进行M R D 水平评估,M R D水平低于诊断值1%的患者在诱导治疗后的复发风险明显低于M R D值ȡ1%的患者(P< 0.001)[2]㊂这提示:运用P C R和R T-P C R检测易位的染色体对于判断疾病预后有重要的作用㊂尽管F L T3基因的内部串联重复(I T D)是AM L 患者最常见的预后不良的驱动因素[2],但其仍是一个具有挑战性的目标,其异质性使得传统的基于P C R 的方法要么不敏感,要么费力[6]㊂F L T3-I T D突变预后较差㊂虽然异基因移植可能改善预后,但复发却经常发生[7]㊂有学者报道了串联重复P C R(T D-P C R)可以用于检测F L T3-I T D突变,从而提高治疗的效果㊂2.3数字微滴P C R 数字微滴P C R(d d P C R)已被用于以较低的错误率更精确地测量突变㊂d d P C R可以针对单个的核苷酸变异进行检测㊂其基本原理是将单个P C R反应分离成包含单个或多个目标核酸拷贝的数百万滴㊂随后,每一个液滴都发生P C R反应,在液滴阅读器中自动测量荧光信号,这种分离可以可靠地收集和高灵敏度地测量核酸的量㊂大量实验和临床应用已经证明d d P C R在检测M R D时非常有效㊂但是,因为d d P C R检测每种基因突变时都需要一种特定的方法,所以这项检测技术昂贵且费用较高㊂目前,建议可以将这项技术应用于对相关基因的周期性突变进行检测[4]㊂2.4多参数流式细胞仪F C M检测M R D F C M提供了一种相对快速和廉价的M R D检测方法,适用于绝大多数AM L患者[8]㊂F C M检测M R D的原理是白血病相关免疫表型L A I P与正常情况不同㊂其灵敏度为1/103至104个细胞㊂这种方法也一般通过检测C D34和C D117作为早期标志物和骨髓谱系相关标志物㊂英国国家癌症研究所曾经就M F C检测M R D结果与患者预后的关系进行了一项调查,调查结果显示F C M-M R D阳性的患者在结束一轮治疗之后复发的风险明显高于F C M-M R D阴性的患者,二者之间具有统计学差异㊂这项实验说明F C M检测M R D具有前瞻性,可以应用于评估AM L患者在接受一轮化疗之后的预后并准确预测其是否在达到C R 后复发[9]㊂通过流式细胞术,一些被认为形态缓解的患者有超过5%的白血病母细胞㊂相反,根据流式细胞术,67%根据形态学分类为部分反应的患者(5%~ 15%的细胞)和26%被分类为耐药的患者(15%的细胞)实际上有很好的反应,没有可检测到的M R D[5]㊂F C M在临床实践中面临着以下几个需要解决的㊃842㊃国际检验医学杂志2020年第41卷增刊Ⅰ问题:(1)AM L患者中往往存在多个表型不同的L A I P,为检测和诊断带来了一定的难度;为克服这种困难,可以应用多抗体的面板进行测试㊂(2)对于复发时M R D的检测也有不确定性;使用3个抗体组成的9个面板,对136例AM L患者的诊断和复发进行了检查,发现91%的患者的白血病细胞发生表型改变;类似地,大约20%的AM L s存在L A I P的完全改变,80%的患者至少存在一个与初次诊断相似的L A I P[3]㊂这表明,复发患者中的L A I P大多存在突变,这为确定基线L A I P带来了一定的难度;复发患者中总有与首次确诊时相同的L A I P,可以利用这一特性确定基线L A I P,从而简化诊断流程,提高诊断的效率㊂复发时白血病细胞的免疫表型不一致,专家建议在诊断和M R D检测中使用综合抗体来识别基线L A I P s,然后在治疗后监测中尽可能多的检测保守的和新出现的L A I P s[4]在检测中很难有一个所有实验室共识的标准㊂也就是说异常细胞占到被检测的百分比为多少才能称结果为阳性目前是没有标准的[2]㊂随着抗体试剂日新月异地进展,不同的实验室会选用不同的抗体组合[2]㊂在成人和儿童中进行了大量的研究,这些研究证明F C M检测到M R D对几乎所有AM L患者的预后均有显著影响㊂然而,这些研究的直接比较受限于方法学㊁阳性阈值㊁患者群体和治疗策略的差异㊂在诸如测量的最佳时间,例如:诱导后与巩固后,以及M R D阳性的截止值等问题上也有一些相互矛盾的发现㊂2.5二代测序技术(N G S) N G S越来越多地被用作M R D的检测方法㊂N G S检测MR D的灵敏度特别高,与其他传统的检测例如P C R合用往往可以达到出乎意料的效果㊂已经证实,应用N G S检测R U N X1的改变可以有效检出并且评价患者预后㊂因为R U N X1往往预示着耐药和预后不良[10]㊂但N G S 的广泛使用目前受到高成本的限制[11]㊂其他限制因素包括克隆或亚克隆的稳定性(如R T-P C R检测)和解释数据[8]㊂3讨论细胞形态学㊁免疫表型㊁细胞遗传学和P C R技术现在广泛用于临床诊断M R D,并且这些技术仍将是未来的基础,其中P C R等分子技术依然是现在确诊的金标准㊂这些方法的优点是可以在入院后数小时内立即诊断,并且价格相对低廉㊂随着N G S的出现,这些技术甚至可以与N G S联合应用,阐明并解释更多的发现㊂但是新技术的应用方面至今没有一个确定且有效的标准,下一代测序是具有临床应用前途的检测方法,它显著且持续地增加了对AM L发病机制的理解,并且其具有高度的灵敏度㊂预处理分子分析检测到的突变可能对预后分层和治疗策略产生重大影响,这已导致世卫组织疾病分类的变化㊂M R D反应评估优于形态学评估,可以帮助临床医生指导治疗选择㊁起始时间点和/或强化治疗的决定㊂为了在日常临床实践中得到广泛应用,基于N G S的治疗策略和监测标准必须在未来进一步被定义,包括但不限于:(1)在治疗过程中应在什么时间点进行N G S分析;(2)N G S小组应包括哪些靶基因,应使用哪些测序覆盖范围㊂未来血液肿瘤学家和血液学家将继续在白血病和M D S诊断中发挥中心作用㊂综上所述,AM L和M D S的诊断学正在发生巨大的变化,越来越多的数字化支持技术被整合到常规诊断工作中㊂这种将新技术整合到已建立的骨髓恶性肿瘤诊断中的做法对血液肿瘤学家和实验室专家来说是一个挑战,但同时也提供了改进鉴别诊断㊁预后预测㊁治疗规划和随访期间疾病监测的机会㊂在血液学诊断中,应将最大的精力放在定义和建立新的诊断算法上,以最终服务于髓系恶性肿瘤患者㊂参考文献[1]S C HU U R HU I S G J,H E U S E R M,F R E E MA N S,e t a l.M i n i m a l/m e a s u r a b l e r e s i d u a l d i s e a s e i n AM L:a c o n s e n-s u s d o c u m e n t f r o m t h e E u r o p e a n L e u k e m i a N e t M R D W o r k i n g P a r t y[J].B l o o d,2018,131(12):1275-1291.[2]J A S O J M,WA N G S A,J O R G E N S E N J L,e t a l.M u l t i-c o l o r f l o w c y t o m e t r i c i mm u n o p h e n o t y p i n g f o rde t e c t i o n of m i n i m a l r e s i d u a l d i s e a s e i n AM L:p a s t,p r e s e n t a n d f u-t u r e[J].B o n e M a r r o w T r a n s p l a n t.2014;49(9):1129-1138.[3]S HUM I L O V E,F L A C H J,K OH L MA N N A,e t a l.C u r-r e n t s t a t u s a n d t r e n d s i n t h e d i a g n o s t i c s o f AM L a n d M D S[J].B l o o d R e v,2018,32(6):508-519.[4]R A V A N D I F,J O R G E N S E N J L.M o n i t o r i n g m i n i m a l r e-s i d u a l d i s e a s e i n a c u t e m y e l o i d l e u k e m i a:r e a d y f o r p r i m e t i m e[J].J N a t l C o m p r C a n c N e t w,2012,10(8):1029-1036.[5]G R I MWA D E D,F R E E MA N S D.D e f i n i n g m i n i m a l r e s i d-u a l d i s e a s e i n a c u t e m y e l o i d l e u k e m i a:w h i c h p l a t f o r m s a r e r e a d y f o r"p r i m e t i m e"[J].B l o o d,2014,124(23): 3345-3355.[6]B L A T T E T J,S C HMA L B R O C K L K,S K AM B R A K S S,e t a l.G e t I T Df o r F L T3-I T D-b a s e d M R D m o n i t o r i ng i nAM L[J].L e u k e m i a,2019,33(10):2535-2539. 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多参数流式细胞术检测急性髓系白血病微小残留病的研究进展
多参数流式细胞术检测急性髓系白血病微小残留病的研究进展【摘要】本文通过综述多参数流式细胞术检测急性髓系白血病微小残留病的研究进展，进而得出结论：多参数流式细胞术检测微小残留病对急性髓系白血病的治疗具有重要的指导意义。
建立MFC检测MRD的标准化是今后研究发展的方向。
标签：微小残留病;多参数流式细胞术;研究;检测随着化疗方法的改进、造血干细胞移植技术的进步，急性白血病患者的完全缓解率和5年生存率已经得到显著性的提高。
然而还是有部分患者达到完全缓解后会出现复发情况，进而对患者的长期生存率造成影响。
通过研究复发的原因，发现患者体内存在的微小残留病（minimal residual disease，MRD）是导致患者复发的主要原因。
因此，MRD正逐渐成为急性白血病评价预后的独立指标。
为此，寻找最佳的检测技术对MRD进行检测十分重要。
现本文结合实际对参数流式细胞术检测急性髓系白血病微小残留病进行研究，以期为实践提供参考依据。
1多参数流式细胞术（MFC）检测MRD的优势和其他检测技术相比，MFC可以对处于快速直线流动状态中的单个细胞进行形态、大小及荧光特征进行识别，从而区分白血病细胞和正常细胞[1]。
其每秒可检测成千甚至上万个细胞，并对检测的细胞进行快速多参数定量分析，灵敏度达10-4-10-5。
MFC通过对白血病相关免疫表型检测，比RQ-PCR技术更广泛、直观地对残留白血病细胞进行准确定量[2]，目前MRD已经可用于大于90%以上的急性髓系白血病的免疫表型检测。
因此，MFC是急性髓系白血病MRD的检测中最有前景的一种检测方法。
2多参数流式细胞术（MFC）检测MRD的方法白血病相关免疫表型（LAIPs）是在正常血液细胞或骨髓细胞表面不表达或非常罕见的表型，诊断是通过比较白血病细胞与正常骨髓细胞表面标志确定的，是MFC检测MRD的基础。
根据异常抗原的表达主要将LAIPs分为四类：（1）不同步抗原表达;（2）谱系失真/跨系抗原表达;（3）抗原表达量的异常;（4）荧光表达强度的变化。
多发性骨髓瘤微小残留病检测的研究进展
多发性骨髓瘤微小残留病检测的研究进展丁凯;付蓉【摘要】近年来随着新药物的临床应用,多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者的预后有了根本性的改善,但目前仍不能达到临床治愈.主要障碍为微小残留病(minimal residual diseases,MRD)的存在,其对于患者无进展生存期(progression-free survival,PFS)和总生存期(overall survival,OS)具有重要影响.考虑到患者的克隆异质性、基因不稳定性和无效免疫监视,准确定义和精准检测MRD对制定临床治疗决策十分重要,同时MRD阴性也是患者维持治疗的理论终点和新药临床试验的重要研究终点之一.迄今为止,在检测精度、标准化和普遍适用性方面尚缺乏完美的MRD检测手段.本文综述包括流式细胞术和各种分子生物学检测方法在内的检测MM患者MRD的主要技术,对其各自的优缺点和未来发展方向予以阐述.【期刊名称】《中国肿瘤临床》【年(卷),期】2018(045)014【总页数】5页(P745-749)【关键词】多发性骨髓瘤;生存期;残留病;流式细胞术;测序【作者】丁凯;付蓉【作者单位】天津医科大学总医院血液内科天津市300052;天津医科大学总医院血液内科天津市300052【正文语种】中文近十几年来，得益于多种新型药物的临床应用，多发性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）患者的预后获得根本性改善，总生存期（overall survival，OS）和无进展生存期（progression-free survival，PFS）均有所提高［1-3］。
MM患者诱导治疗后的完全缓解率（complete remission，CR）从10%提高至80%［4-5］。
患者治疗后能否达到并保持CR直接影响PFS和OS［6］，然而，由于微小残留病（minimal residual diseases，MRD）的存在，使部分已获得CR但MRD持续阳性的MM患者早期复发，相比于MRD持续阴性的患者其PFS和OS 明显缩短［7-9］。
急性早幼粒细胞白血病微小残留病检测方法的研究进展
急性早幼粒细胞白血病微小残留病检测方法的研究进展
刘妍;严智昌
【期刊名称】《亚太传统医药》
【年(卷),期】2009(5)9
【摘要】尽管目前急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)的诊断及治疗水平已十分成熟,但复发仍不可避免.近20年来国内外研究发现,APL 患者体内微小残留病(MRD)不但能反映个体对治疗的反应情况,且与预后密切相关.【总页数】3页(P156-158)
【作者】刘妍;严智昌
【作者单位】内蒙古医学院附属第三医院;内蒙古医学院附属第三医院
【正文语种】中文
【中图分类】R733.71
【相关文献】
1.应用RT-PCR和荧光原位杂交监测急性早幼粒细胞白血病微小残留白血病 [J], 张济;李羿;李君君;颜家运;刘静
2.急性髓细胞白血病微小残留病的不同检测方法及临床意义的研究进展 [J], 潘登
3.急性白血病微小残留病检测方法临床应用的研究进展 [J], 王卫国
4.RT—PCR检测急性早幼粒细胞白血病微小残留病 [J], 冯长伟;陈学良
5.PML/RARa 融合基因监测急性早幼粒细胞白血病微小残留病的临床意义 [J], 黎承萍;李淑娈;李维佳
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流式细胞术动态监测AML完全缓解后微小残留病的临床意义
流式细胞术动态监测AML完全缓解后微小残留病的临床意义侯丽雪;任翠爱;张磊;李亚茹;李银柱【期刊名称】《辽宁医学院学报》【年(卷),期】2014(35)1【摘要】目的应用流式细胞术(FCM)动态监测经诱导治疗后达完全缓解(CR)的急性髓细胞白血病(AML)微小残留病(MRD)与复发及预后的关系,探究其临床意义.方法收集2012年2月至2013年8月在潍坊市人民医院血液科确诊并达到CR的43例初诊AML(M3除外)患者,行骨髓细胞形态学检测的同时,应用FCM动态监测MRD,追踪至复发或随访结束.得出完全缓解后患者的平均微小残留水平.并同时监测CR后及巩固化疗1个疗程后2个不同时间点微小残留与复发的关系,以MRD＞10-4为阳性.并对CR后MRD(+)患者中出现复发的病例数按10-4＜MRD＜10-3,10-3≤MRD≤10-2,MRD＞10-2分为3组,观察其与形态学复发的时间关系.结果43例CR后的患者中,测得MRD最小值为0.006%,最大值为4.96%,平均值为0.52%.完全缓解后MRD(+)者复发率57.14%(8/14),MRD(-)者复发率13.8%(4/29),MRD(+)者复发率高于MRD(-)者(P=0.009).巩固治疗1个疗程后的41例骨髓标本,MRD(+)者复发率为50.0%(5/10),MRD(-)者复发率为12.9%(4/31),MRD(+)者复发率高于MRD(-)者(P=0.025).且CR后检测MRD(+)并出现复发的8例患者均在6个月内出现了形态学的复发.结论应用FCM检测AML完全缓解后的MRD值差异较大,范围在10-5~10-2,不能作为判断完全缓解的单一指标.完全缓解后及巩固治疗后MRD(+)者复发率均高于MRD(-)者,且MRD 值越高,越容易早期出现复发.较常规骨髓细胞形态学检测相比,敏感性更高,可以尽早预测复发,为个体化治疗提供重要的理论依据.【总页数】5页(P14-17,后插2)【作者】侯丽雪;任翠爱;张磊;李亚茹;李银柱【作者单位】潍坊医学院;潍坊市人民医院,山东,潍坊,261042;石河子大学,新疆,石河子,832003;潍坊医学院;寿光市人民医院,山东,寿光,262700【正文语种】中文【中图分类】R552【相关文献】1.流式细胞术和RT-PCR检测APL完全缓解患者微小残留病 [J], 武超;翟志敏;徐修才;汪健;李庆;邬志伟;徐静玮2.动态监测微小残留病变在急性白血病治疗完全缓解后的临床意义 [J], 李冰3.流式细胞术动态监测急性白血病微小残留病的临床意义 [J], 刘方久;蒋琴;李凤;唐雪梅4.流式细胞术动态监测微小残留病在急性髓系白血病治疗中的临床意义 [J], 陈晓红;吴广胜;农卫霞;潘歆;王燕;张红霞;章大谦;龙珍珠玛5.流式细胞术动态监测微小残留病在急性髓系白血病治疗中的临床意义 [J], 陈晓红;吴广胜;农卫霞;潘歆;王燕;张红霞;章大谦;龙珍珠玛因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
多参数流式细胞仪检测急性髓细胞白血病微小残留病:挑战与对策
多参数流式细胞仪检测急性髓细胞白血病微小残留病：挑战与
对策
常英军;赵晓甦
【期刊名称】《临床荟萃》
【年(卷),期】2016(31)6
【摘要】多参数流式细胞仪(FCM)是急性白血病微小残留病(MRD)检测的重要手段之一,但在检测急性髓细胞白血病(AML) MRD方面还存在诸多问题.本文讨论了FCM检测AML MRD面临的挑战,并提出相应的对策.
【总页数】4页(P581-584)
【作者】常英军;赵晓甦
【作者单位】北京大学人民医院北京大学血液病研究所造血干细胞移植治疗血液病北京市重点实验室,北京100044;北京大学血液协同创新中心,北京100044;北京大学人民医院北京大学血液病研究所造血干细胞移植治疗血液病北京市重点实验室,北京100044
【正文语种】中文
【中图分类】R733.72
【相关文献】
1.流式细胞术检测儿童急性髓细胞白血病微小残留病研究进展 [J], 杜春燕
2.急性髓细胞白血病微小残留病的不同检测方法及临床意义的研究进展 [J], 潘登
3.流式细胞仪检测急性白血病微小残留病的意义 [J], 叶海燕;陈焯文;肖平;李精明
4.微小残留病指导的急性髓细胞白血病个体化治疗和干预策略 [J], 常英军; 李思琦; 魏辉
5.WT1基因在急性髓细胞性白血病微小残留病检测中的应用 [J], 李乾鹏;曹荣旋;张俊英;孙艳花;王宝宏;冉学红
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非霍奇金淋巴瘤微小残留病变检测的方法及临床意义的开题报告
非霍奇金淋巴瘤微小残留病变检测的方法及临床意义的开题报告一、研究背景非霍奇金淋巴瘤（NHL）是常见的一种恶性肿瘤，由淋巴细胞恶性增生形成，常见的类型包括弥漫大B细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、外周T细胞淋巴瘤等。
目前，NHL的治疗方式主要包括化疗、放疗和干细胞移植等。
然而，即使是经过全面治疗，部分患者仍然会出现微小残留病变（minimal residual disease，MRD），也就是说在显微镜下无法检测到的极小的肿瘤细胞。
MRD是导致NHL患者复发和转移的主要原因之一，因此如何准确地检测MRD成为NHL治疗的重要问题。
二、研究目的本研究旨在探讨NHL MRD的检测方法及临床意义。
具体包括：1. 分析NHL MRD检测方法的优缺点，评估它们在临床应用中的可行性和准确性；2. 探讨MRD在NHL治疗中的预后价值和指导作用；3. 提出一种适合国情的NHL MRD检测方案。
三、研究内容本研究将通过文献调研和数据分析，探讨以下方面的内容：1.检测方法NHL MRD的检测方法包括流式细胞术（FCM）、定量PCR（qPCR）、数字PCR （dPCR）、NGS等。
本研究将对不同方法的原理、优缺点、适应症等方面进行分析，为选择最佳的检测方法提供科学依据。
2.预后价值MRD已被证明是NHL患者预后的重要指标。
本研究将统计分析MRD检测结果与患者预后的关系，探究不同MRD水平与预后的关联性。
此外，还将观察MRD动态变化与NHL复发和转移之间的关系。
3.指导作用MRD检测结果可指导NHL治疗方案的调整和选择，如加强化疗、移植干细胞等。
本研究还将探讨MRD检测结果对治疗方案调整的影响，并提出相应建议。
四、研究意义1. 提高NHL治疗效果通过MRD检测，及时发现未被治愈的肿瘤细胞，可避免误判疗效，及时调整治疗方案，提高患者生存率。
2.谨慎使用免疫抑制药物MRD检测结果显示轻度免疫抑制药物可增加疾病复发的风险，提示医生在选择免疫抑制药物治疗时需要更加谨慎。
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MFC检测微小残留病变在AML 中的临床应用与研究进展
目 录
WHY？
MRD检测的临床应用及意义
MRD检测方法比较 MFC检测MRD在AML中研究进展 存在的问题和研究方向
HOW?
NOW? THEN?
1
MRD检测的临床应用及意义
抗白血病治疗
诱导缓解治疗（Induction） 目标是使患者迅速获得完全缓解（Complete remission，CR）。 此时，AL体内白血病细胞的数量大约由初诊时的1010-1012降至108109 。诱导缓解获CR后，体内残留的白血病细胞，称之为微小残留 病灶（Minimal residual disease，MRD）。
定义病人特异性的白血病相关免疫表型LAPs。
在完全缓解时和后续治疗中用病人特异性的LAPs追踪MRD。
白血病相关免疫表型（leukemia-associated phenotypes，LAPs）是在 正常血液细胞或骨髓细胞表面不表达或非常罕见的表型。而在白血病细 胞上大多数可以找到LAPs的存在。 对于AML病人，最初描述的异常包括以下： 不同步抗原表达（1个细胞上同时表达早期和晚期抗原，如CD34和 CD15的共表达）； 谱系失真，即髓系白血病细胞表达淋系相关标记，如，在髓系原始 细胞上表达CD2，CD3，CD5，CD7，CD10和CD19； 抗原过度表达，每个细胞上某些抗原的异常表达增加； SSC信号改变，包括在原始细胞上的淋系相关抗原显示比正常髓系 细胞相对高的FSC信号和SSC信号； 谱系特异性抗原的丢失，包括应该表达的抗原的丢失，如CD13和 CD33在髓系原始细胞上的丢失。
Al-Mawali A, Gillis D, Lewis I, et al. The Role of Multiparameter Flow Cytometry for Detection of Minimal Residual Disease in Acute Myeloid Leukemia. Am J Clin Pathol 2009;131:16-26
M. Uzunel. Chapter 37 Minimal Residual Disease. © Springer Science + Business Media, LLC 2003, 2010
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MFC检测MRD的研究进展
目前应用MFC检测MRD的研究策略主要遵循以下几步：
通过多色方案鉴别独特的表型。
MRD在AML的临床应用
AML的MRD检测中FCM应用较多。可采用的抗体组合亦因分析方 法和实验室的不同而相差较大,难以一概而论。≥80%。
只有少部分AML具有白血病特异融合基因和抗原受体基因重排 ,因 此限制了 PCR在 AML中 MRD检测的广泛应用。常用的特异融合基 因包括 PML - RARα(M3)、AML1-ETO(M2b )、CBFβ-MYH11 (M4EO)等，除 AML1-ETO外，在形态学缓解期检测到的相关基因 的表达水平，大多与复发率成正相关。AML1-ETO预测复发意义的 不确定性可能与该融合基因转录本也表达于正常单核细胞、B淋巴 细胞、造血干细胞，以致无t(8, 21)而PCR阳性等有关。
缓解后治疗（Consolidation） 诱导治疗达到CR后，大剂量巩固和强化治疗在AML的后续治疗中 有重要的地位，它在很大程度上将决定AML的持续缓解时间患者生 存率及复发的时间，主张缓解后治疗应该是强烈的巩固治疗。
疗效标准
完全缓解(Complete Remission，CR)： ①临床无白血病细胞浸润所致的症状和体征生活正常或接近正常。 ②血象：Hb≥100g/L或≥90g/L(女性及儿童)，中性粒细胞绝对值≥ 1.5×109/L，血小板≥100×109/L。外周血白细胞分类中无白血病细胞。 ③骨髓象：原粒细胞Ⅰ＋Ⅱ型(原始单粒＋幼稚单核细胞或原始淋巴＋ 幼稚淋巴细胞)≤5%,红细胞及巨核细胞系正常。 M2b型原粒细胞＋早幼粒细胞≤5%，中性中幼粒细胞比例正常范围 M3型原粒细胞＋早幼粒细胞≤5%。 M4型原粒细胞Ⅰ、Ⅱ型＋原始及幼稚单核细胞≤5%。 M5型原单核Ⅰ型＋Ⅱ型及幼稚单核细胞≤5%。 M6型原粒细胞Ⅰ型＋Ⅱ型，原红细胞及幼红细胞比例基本正常。 M7型粒细胞、红细胞二系正常原巨核细胞＋幼稚巨核细胞基本消失。
部分缓解(PR)： 骨髓原粒细胞Ⅰ型＋Ⅱ型(原单核＋幼稚单核细胞或淋巴母细胞＋幼稚淋 巴细胞)＞5%而≤20%；或临床、血象项中有一项未达完全缓解标准。 白血病复发有下列三者之一者称为复发： ①骨髓原粒细胞Ⅰ型＋Ⅱ型(原单+幼单或原淋巴＋幼淋)＞5%,≤20%，经 过有效抗白血病治疗一个疗程仍未能达到骨髓象完全缓解者。 ②骨髓原粒细胞Ⅰ型＋Ⅱ型(原单＋幼单或原淋＋幼淋)＞20%者。 ③骨髓外白血病细胞浸润。 持续完全缓解(CCR)： 指从治疗后完全缓解之日起计算其间无白血病复发达3～5年以上者。 长期存活： 急性白血病自确诊之日起存活时间(包括无病或带病生存)达5年或5年以 上者。 临床治愈：指停止化学治疗5年或DFS达10年者。
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MRD检测方法比较
MRD检测方法比较
Al-Mawali A, Gillis D, Lewis I, et al. The Role of Multiparameter Flow Cytometry for Detection of Minimal Residual Disease in Acute Myeloid Leukemia. Am J Clin Pathol 2009;131:16-26
Байду номын сангаас
MRD检测意义
监测白血病的复发，DFS/RFS,OS；
指导白血病的临床治疗，根据体内白血病细胞多少以决定是继续 化疗、加强治疗抑或停止治疗； 有利于较早发现白血病细胞是否耐药(MRD)，并依此指导临床选 用更敏感、更具杀伤力的治疗措施；
有助于评价自体造血干细胞移植(AuSCT)的净化效果。