MFC检测微小残留病变在AML中的临床应用与研究进展

部分缓解(PR)： 骨髓原粒细胞Ⅰ型＋Ⅱ型(原单核＋幼稚单核细胞或淋巴母细胞＋幼稚淋 巴细胞)＞5%而≤20%；或临床、血象项中有一项未达完全缓解标准。 白血病复发有下列三者之一者称为复发： ①骨髓原粒细胞Ⅰ型＋Ⅱ型(原单+幼单或原淋巴＋幼淋)＞5%,≤20%，经 过有效抗白血病治疗一个疗程仍未能达到骨髓象完全缓解者。 ②骨髓原粒细胞Ⅰ型＋Ⅱ型(原单＋幼单或原淋＋幼淋)＞20%者。 ③骨髓外白血病细胞浸润。 持续完全缓解(CCR)： 指从治疗后完全缓解之日起计算其间无白血病复发达3～5年以上者。 长期存活： 急性白血病自确诊之日起存活时间(包括无病或带病生存)达5年或5年以 上者。 临床治愈：指停止化学治疗5年或DFS达10年者。
定义病人特异性的白血病相关免疫表型LAPs。
在完全缓解时和后续治疗中用病人特异性的LAPs追踪MRD。
白血病相关免疫表型（leukemia-associated phenotypes，LAPs）是在 正常血液细胞或骨髓细胞表面不表达或非常罕见的表型。而在白血病细 胞上大多数可以找到LAPs的存在。 对于AML病人，最初描述的异常包括以下： 不同步抗原表达（1个细胞上同时表达早期和晚期抗原，如CD34和 CD15的共表达）； 谱系失真，即髓系白血病细胞表达淋系相关标记，如，在髓系原始 细胞上表达CD2，CD3，CD5，CD7，CD10和CD19； 抗原过度表达，每个细胞上某些抗原的异常表达增加； SSC信号改变，包括在原始细胞上的淋系相关抗原显示比正常髓系 细胞相对高的FSC信号和SSC信号； 谱系特异性抗原的丢失，包括应该表达的抗原的丢失，如CD13和 CD33在髓系原始细胞上的丢失。
MRD在AML的临床应用
AML的MRD检测中FCM应用较多。可采用的抗体组合亦因分析方 法和实验室的不同而相差较大,难以一概而论。≥80%。
只有少部分AML具有白血病特异融合基因和抗原受体基因重排 ,因 此限制了 PCR在 AML中 MRD检测的广泛应用。常用的特异融合基 因包括 PML - RARα(M3)、AML1-ETO(M2b )、CBFβ-MYH11 (M4EO)等，除 AML1-ETO外，在形态学缓解期检测到的相关基因 的表达水平，大多与复发率成正相关。AML1-ETO预测复发意义的 不确定性可能与该融合基因转录本也表达于正常单核细胞、B淋巴 细胞、造血干细胞，以致无t(8, 21)而PCR阳性等有关。
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MRD检测方法比较
MRD检测方法比较
Al-Mawali A, Gillis D, Lewis I, et al. The Role of Multiparameter Flow Cytometry for Detection of Minimal Residual Disease in Acute Myeloid Leukemia. Am J Clin Pathol 2009;131:16-26
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MFC检测微小残留病变在AML 中的临床应用与研究进展
目 录
WHY？
MRD检测的临床应用及意义
MRD检测方法比较 MFC检测MRD在AML中研究进展 存在的问题和研究方向
HOW?
N源自文库W? THEN?
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MRD检测的临床应用及意义
抗白血病治疗
诱导缓解治疗（Induction） 目标是使患者迅速获得完全缓解（Complete remission，CR）。 此时，AL体内白血病细胞的数量大约由初诊时的1010-1012降至108109 。诱导缓解获CR后，体内残留的白血病细胞，称之为微小残留 病灶（Minimal residual disease，MRD）。
MRD检测意义
监测白血病的复发，DFS/RFS,OS；
指导白血病的临床治疗，根据体内白血病细胞多少以决定是继续 化疗、加强治疗抑或停止治疗； 有利于较早发现白血病细胞是否耐药(MRD)，并依此指导临床选 用更敏感、更具杀伤力的治疗措施；
有助于评价自体造血干细胞移植(AuSCT)的净化效果。
Al-Mawali A, Gillis D, Lewis I, et al. The Role of Multiparameter Flow Cytometry for Detection of Minimal Residual Disease in Acute Myeloid Leukemia. Am J Clin Pathol 2009;131:16-26
M. Uzunel. Chapter 37 Minimal Residual Disease. © Springer Science + Business Media, LLC 2003, 2010
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MFC检测MRD的研究进展
目前应用MFC检测MRD的研究策略主要遵循以下几步：
通过多色方案鉴别独特的表型。
缓解后治疗（Consolidation） 诱导治疗达到CR后，大剂量巩固和强化治疗在AML的后续治疗中 有重要的地位，它在很大程度上将决定AML的持续缓解时间患者生 存率及复发的时间，主张缓解后治疗应该是强烈的巩固治疗。
疗效标准
完全缓解(Complete Remission，CR)： ①临床无白血病细胞浸润所致的症状和体征生活正常或接近正常。 ②血象：Hb≥100g/L或≥90g/L(女性及儿童)，中性粒细胞绝对值≥ 1.5×109/L，血小板≥100×109/L。外周血白细胞分类中无白血病细胞。 ③骨髓象：原粒细胞Ⅰ＋Ⅱ型(原始单粒＋幼稚单核细胞或原始淋巴＋ 幼稚淋巴细胞)≤5%,红细胞及巨核细胞系正常。 M2b型原粒细胞＋早幼粒细胞≤5%，中性中幼粒细胞比例正常范围 M3型原粒细胞＋早幼粒细胞≤5%。 M4型原粒细胞Ⅰ、Ⅱ型＋原始及幼稚单核细胞≤5%。 M5型原单核Ⅰ型＋Ⅱ型及幼稚单核细胞≤5%。 M6型原粒细胞Ⅰ型＋Ⅱ型，原红细胞及幼红细胞比例基本正常。 M7型粒细胞、红细胞二系正常原巨核细胞＋幼稚巨核细胞基本消失。