沉降菌测试记录表

洁净室沉降菌的测试方法

洁净室沉降菌的测试方法本页仅作为文档封面，使用时可以删除This document is for reference only-rar21year.March1.目的：本文规定了洁净室沉降菌的测试方法，以达到对其空气洁净度的评定。

2. 适用范围：适用于洁净区中沉降菌的监测和对洁净区等级的验证。

3. 检测仪器：高压消毒锅、恒温培养箱。

4. 检测依据：GB/T 16294—2010医药工业洁净室(区)沉降菌的测试方法5. 测试前准备：洁净室的温度应控制在18℃～26℃，相对湿度应控制在45％～65％之间。

风速或压差的测试应符合要求。

静态测试时，室内测试人员不得多于2人。

对单向流测试应在洁净空气调节系统正常运行时间不少于10min后开始。

对非单向流测试应在洁净空气调节系统正常运行时间不少于30min后开始。

采样点数目见下表采样点的位置一般在离地面0.8m高度的水平面上均匀布置。

采样点的布置，见下图洁净室(区)采样点布置力求均匀，避免采样点在某局部区域过于稀疏。

下列采样点的图示可作参考。

洁净棚(层流罩)，洁净工作台等局部空气净化设施的采样点布置：1. 水平单向流2．垂直单向流最少培养皿数：见表洁净度级别所需90mm培养皿（以沉降计）10014100002100000230000026. 测试要求：将已制备好的培养皿按要求的位置放置足够的数量，打开培养皿盖，使培养皿表面暴露，再将培养皿盖盖上后倒置。

在30℃～35℃的培养箱中培养不少于48h。

每批培养基应选三只作对照培养，以鉴别培养基本身是否有污染。

菌落计数，严防遗漏。

7. 结果计算和判断：M1+M2+……Mn平均菌落数＝——————————nMn—n号培养皿菌落数n—培养皿的总数8. 结果评定：每个测点的沉降菌平均菌落数必须低于所选定的评定标准中的界限。

在静态测试时，若某测点的沉降菌平均菌落数超过评定标准，则应重新采样两次，两次测试结果均合格才能判为符合。

沉降菌测试方法..

沉降菌测试方法1、把ф90m m×15mm硼硅酸玻璃培养皿包在报纸里，放入恒温烤箱中加热至180℃后，干烤2小时。

2、取X克培养基放入X克蒸馏水，放入高压消毒锅中加热溶化，冷至45℃时，在无菌操作要求下将培养基注入培养皿，每皿约15ml。

3、待琼脂凝固后，将培养基平皿倒置于33℃恒温培养箱中培养48小时，若培养基平皿上确无菌落生长，即可采样用。

制备好培养皿宜在2—8℃环境中保存。

4、采样时，一般在100级层流罩中放置3个培养皿，在100000级，10000级按面积大小一般放2个培养皿。

打开培养皿盖，使培养基表面暴露0.5小时，再将培养皿盖上后倒置于恒温培养箱33℃培养，时间不小于48小时，采样点位置离地0.8m—1.5m左右。

5、将培养皿举起用肉眼直接计数，用记号笔点记然后用5—10倍放大镜检查是否遗漏，若培养皿上有2个或2个以上菌落重叠，分辨时仍以2个或2个以上菌落计数，不要漏计培养皿边缘生长菌落，并注意细菌菌落与培养基沉淀物区别。

6、沉降菌测试前，被测洁净室已消毒。

被测洁净室温湿度须达到规定要求，静压差、换气次数、空气流速必须控制在规定值内，测试状态有静态和动态两种，测试状态选择须符合生产要求，并在报告中注明测试状态。

7、测试人员必须穿戴符合环境洁净度级别工作服，静态测试时，室内测试人员不得多于2人。

测试时间对单向流100级净化房间及层流工作台，测试应在净化空调系统正常运行不少于10min后开始，对非单向流，100000级以上净化房间，测试应在净化空调系统正常运行不少于30min 后开始。

8、平均菌落数计算：M 1+M 2+M 3 平均菌落数=.........21nMnM M ++ n —培养皿总数 M 1—1号培养皿菌落数 M 2—2号培养皿菌落数 M n —n 号培养皿菌落数用平均菌落数判断洁净空气中微生物。

洁净室内平均菌落数必须低于所选定的评定标准，（100级≤1个；10000级≤3个；100000级≤10个）。

沉降菌测试记录表
文件编号：LSSP-F-JY-13A
测试依据
国家标准GB/T 16294
测试状态
□ 动态 □ 静态
环境温度
℃
相对湿度
%
培养基批号
培养基制备及测试方法描述
称取g培养基溶于ml水中，℃min高压灭菌后分装至90mm培养皿中，待凝结后暴露放置测试点min，收集，倒置培养h。同法做空白对照。
培养
温度
℃
培养时间
月日时至月日时
皿号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
空白1
48h后
菌落数
皿号
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
空白2
48h后
菌落数
化验室
1 2
微生物操作
3 4
配料灌装
1920
17
18 21 22
材料处理间
23
24
洗手踏脚池
5 6
洗碗
7 8
配料缓冲9 10
生产缓冲间11 12
男更衣室
13 14
女更衣室
15 16
评定级别
洁净室名称
评定标准
平均菌落数
结果判定
应为
100，000
级
化验室
≤10个/皿
个/皿
□ 合格 □ 不合格
微生物操作间
≤10个/皿
个/皿
□ 合格 □ 不合格
洗手踏脚池
≤10个/皿
个/皿
□ 合格 □ 不合格

药企洁净区沉降菌测定操作规程

范围：各生产车间、化验室。

责任人：质控部检验员。

正文：1 标准依据：ISO14644-1,新版《药品生产质量管理规范》。

2 微生物监测的标准：为评估无菌生产的微生物状况，应对微生物进行动态监测，监测方法有沉降菌法、定量空气浮游菌采样法和表面取样法（如：棉签擦拭法和接触碟法）等。

动态取样应避免对洁净区造成不良影响，对表面和操作人员的监测，应在关键操作完成后进行。

在正常的生产操作监测外，可在系统验证、清洁或消毒等操作完成后增加微生物监测。

2.1 微生物监测的动态标准洁净区微生物监测的动态标准如下：（2）单个沉降碟的暴露时间可以少于4小时，同一位置可使用多个沉降碟连续进行监测并累积计数。

3 测试方法3.1 方法概述本测试方法采用沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿，经若干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数，以平板培养皿中的菌落数来判定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净室（区）的洁净度。

3.2 所用的仪器和设备3.2.1 高压消毒锅使用时应严格按照仪器标准操作维修保养规程。

3.2.2 恒温培养箱定期对培养箱进行检定。

3.2.3 培养皿一般采用 90mm×15mm的硼硅酸玻璃培养皿。

3.2.4 培养基普通肉汤琼脂培养基或其他药典认可的培养基。

其配制方法见附录A（标准的附录）。

3.3 测试步骤3.3.1 采样方法将已制备好的培养皿按4.4.1的要求放置，打开培养皿盖，使培养基表面暴露0.5h，再将培养皿盖盖上后倒置。

3.3.2 培养3.3.2.1 全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。

3.3.2.2 在30℃～35℃培养箱中培养，时间不少于48h。

3.3.2.3 每批培养基应有对照试验，检验培养基本身是否污染。

可每批选定3只培养皿作对照培养。

3.3.3 菌落计数3.3.3.1 用肉眼直接计数，标记或在菌落计数器上点计，然后用5～10倍放大镜检查，不得遗漏。

沉降菌检测规程

1目的通过对环境进行沉降菌检测，作为确认环境是否符合规定要求及改善环境的依据。

2范围沉降菌检测3职责检验人员按本规程操作，实验主管监督本规程的实施。

4程序4.1洁净（区）clean room(area)对尘粒及微生物污染规定需进行环境控制的房间或区域。

其建筑结构、装备及其使用均具有减少对该区域内污染源的介入、产生和滞留的功能。

4.2洁净工作台cleaning work station一种工作台或者与之类似的一个封闭围挡工作区。

其特点是自身能够供给经过过滤的空气或气体，如垂直层流置、水平层流罩、垂直层流洁净工作、水平层流洁净工作台、自净器等。

4.3洁净度cleanliness洁净环境内单位体积空气中含大于或等于某一粒径的悬浮粒子的允许统计数。

4.4菌落colony forming units细菌培养后，有一个或几个细菌繁殖而形成的一细菌集落，简称CFU。

通常用个数表示。

4.5沉降菌settling microbe用本标准提及的方法收集到的活微生物粒子，通过专用的培养基，在适宜的生长条件下繁殖到可见的菌落数。

4.6单向流unidirectional air flow(曾称为层流laminar flow)沿着平行流线，以单一通路以一定流速向单一方向流动的气流。

4.7非单向流nonumidirectional air flow(曾称为乱流turbulent flow)具有多个通路循环特性或气流方向不平行的，不满足单向流定义的气流。

4.8静态测试at-rest test洁净室（区）净化空气调节系统已处于正常运行状态，工艺设备已安装，洁净室（区）内没有生产人员的情况下进行的测试。

4.9动态测试operational test洁净室（区）已处于正常生产状态下进行的测试。

4.10洁净室环境要求、测试项目和频次。

见表1表1洁净室环境要求、测试项目和频次4.11检测流程4.11.1检测条件4.11.2检测仪器、设备、培养基恒温培养箱、蒸汽高压消毒锅、电热恒温干燥箱、百级超净工作台、Φ90mm×15mm培养皿、胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）、沙氏葡萄糖琼脂培养基（SDA）。

洁净区沉降菌检测报告

沉降菌监测检验报告
监测车间
洁净车间
监测状态
静态
监测日期
报告日期
技术要求
微生物最大允许数
静压差Pa
监测条件
沉降菌/皿
温度
（℃）
相对湿度（%）
不同级别洁净室（区）及洁净室（区）与非洁净室（区）之间》5与室外大气》10
微生物关键操作点
□100级
《1cfu/皿
18-28
45-65
□10000级
《3cfu/皿
□100000级
《10cfu/皿
测试依据
YY0033-2000《无菌医疗器具生产管理规范》
监测结果
评定级别
所属区域
采样点数
测试次数
温度（℃）
湿度（%）
评定标准
平均菌落数
结果判定
无菌室百级工作台
《1cfu/皿
□合格□不合格
微生物室百级工作台
□合格□不合格
阳性菌室百级工作台
□合格□不合格
无菌室
《3cfu/皿
□合格□不合格
微生物室
□合格□不合格
阳性菌室
□合格□不合格
一更衣室
《10cfu/皿
□合格□不合格
二更衣室
□合格□不合格
缓冲区
□合格□不合格
洁具间
□合格□不合格
工器具清洗间
□合格□不合格
洗衣房
□合格□不合格
挤出车间
□合格□格
车间一
□合格□不合格
车间二
□合格□不合格
内包间
□合格□不合格
检测人/日期：复核人/日期：

室内浮游菌和沉降菌的检测

室内浮游菌和沉降菌的检测
微生物检测方法有空气悬浮微生物法和沉降微生物法两种，采样后的基片（或平皿）经过恒温箱内37℃、48h的培养生成菌落后进行计数。

使用的采样器皿和培养液必须进行消毒灭菌处理。

采样点可均匀布置或取代表性地域布置。

悬浮微生物发采用离心式、狭缝式和针孔式等碰击式采样器，采样时间应根据空气中微生物浓度来决定，采样点数可与测定空气洁净度测点数相同。

各种采样器应该按仪器说明书规定的方法使用。

沉降微生物法，应采用直径为90mm培养皿，在采样点上沉降30min后进行采样，培养皿最少采样数应符合下表的规定。

制药厂洁净室（包括生物洁净室）室内浮游菌和沉降菌测试，也可采用按协议确定的采样方案。

用培养皿测定沉降菌，用碰撞式采样器或过滤采样器测定浮游菌，还应遵守以下规定：
1.采样装置采样前的准备及采样后的处理，均应在设有高效空气过滤器排风的
负压实验室进行操作，该实验室的温度应为22 ±2 ℃；相对湿度应为50% ±10%；
2.采样仪器应消毒灭菌；
3.采样器选择应审核其精度和效率，并有合格证书；
4.采样装置的排气不应污染洁净室；
5.沉降皿个数及采样点、培养基及培养温度、培养时间应按有关规范的规定执
行；
6.浮游菌采样器的采样率宜大于100L/min；
7.碰撞培养基的空气速度应小于20m/s。

摘自《通风与空调工程施工质量验收规范》。

洁净车间沉降菌检测记录

洁净车间沉降菌检测记录(总3页)--本页仅作为文档封面，使用时请直接删除即可----内页可以根据需求调整合适字体及大小--沉降菌检测记录记录编号：AI/R QA-005检测依据:《GB/T16294-2010医药工业洁净室(区)沉降菌的测试方法》检测步骤：1 培养皿(￠90mm×15mm的玻璃培养皿)采样前应仔细检查每个培养皿的质量，如发现破损或污染的应剔除。

将培养皿121℃湿热灭菌20分钟或于180℃干热灭菌2小时，灭菌后取出备用。

2 培养基配制取适量培养基，按培养基说明书配制比例加纯化水后加热溶解，溶解后分装于烧瓶，放入高温灭菌锅，121℃高温下灭菌20分钟后取出备用。

灭菌后的培养基冷却至约60℃，在万级洁净室中的百级超净台上，无菌操作要求下将灭菌过的培养基分装于培养皿中，每个培养皿约20mL，冷却凝固后便可使用。

制备好的培养基平皿应在2℃~8℃保存，一般有效期以一周为宜或按厂商提供的标准执行，需保存的剩余培养基应采用适宜方法在平皿上做好培养基的名称及制备日期的标记。

3 采样方法将已制备好的培养皿按测点图的要求放置，打开培养皿盖，使培养基表面暴露，再将培养皿盖盖上后倒置。

4 培养全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。

在30℃-35℃培养箱中培养，时间不少于48h。

培养皿在用于检测时，为避免培养基本身污染，每次取3个对照皿同时进行对照试验，与采样皿同法操作但不需暴露采样，然后与采样后的培养皿一起放入培养箱内培养，作阴性对照培养，结果应无菌落生长。

5 菌落计数用肉眼直接计数，标记或在菌落计数器上点计，有条件的可用5-10倍放大镜检查有否遗漏。

若培养皿上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时仍以2个或2个以上菌落计数。

检测记录：注：1、结果判定栏中，用“√”表示。

2、若部分洁净区域检测不符合，则需重新打扫卫生后复测。

检测人：复核人：。

沉降菌测试方法..

沉降菌测试方法1、把ф90m m×15mm硼硅酸玻璃培养皿包在报纸里，放入恒温烤箱中加热至180℃后，干烤2小时。

2、取X克培养基放入X克蒸馏水，放入高压消毒锅中加热溶化，冷至45℃时，在无菌操作要求下将培养基注入培养皿，每皿约15ml。

3、待琼脂凝固后，将培养基平皿倒置于33℃恒温培养箱中培养48小时，若培养基平皿上确无菌落生长，即可采样用。

制备好培养皿宜在2—8℃环境中保存。

4、采样时，一般在100级层流罩中放置3个培养皿，在100000级，10000级按面积大小一般放2个培养皿。

打开培养皿盖，使培养基表面暴露0.5小时，再将培养皿盖上后倒置于恒温培养箱33℃培养，时间不小于48小时，采样点位置离地0.8m—1.5m左右。

5、将培养皿举起用肉眼直接计数，用记号笔点记然后用5—10倍放大镜检查是否遗漏，若培养皿上有2个或2个以上菌落重叠，分辨时仍以2个或2个以上菌落计数，不要漏计培养皿边缘生长菌落，并注意细菌菌落与培养基沉淀物区别。

6、沉降菌测试前，被测洁净室已消毒。

被测洁净室温湿度须达到规定要求，静压差、换气次数、空气流速必须控制在规定值内，测试状态有静态和动态两种，测试状态选择须符合生产要求，并在报告中注明测试状态。

7、测试人员必须穿戴符合环境洁净度级别工作服，静态测试时，室内测试人员不得多于2人。

测试时间对单向流100级净化房间及层流工作台，测试应在净化空调系统正常运行不少于10min后开始，对非单向流，100000级以上净化房间，测试应在净化空调系统正常运行不少于30min 后开始。

8、平均菌落数计算：M 1+M 2+M 3 平均菌落数=.........21nMnM M ++ n —培养皿总数 M 1—1号培养皿菌落数 M 2—2号培养皿菌落数 M n —n 号培养皿菌落数用平均菌落数判断洁净空气中微生物。

洁净室内平均菌落数必须低于所选定的评定标准，（100级≤1个；10000级≤3个；100000级≤10个）。

沉降菌检测

微生物检测一、沉降菌：用标准提及的方法收集到的活微生物粒子，通过专用的培养基，在适宜的生长条件下繁殖到可见的菌落数。

二、测试方法：采用沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿（一般多采用90mm直径硼硅酸玻璃培养皿，俗称沉降碟），经若干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落数进行计数，以平板培养皿中的菌落数来判定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净室的洁净度。

三、采集的沉降菌为静态检测。

四、所需物料：（1）90mm培养皿：72个；（2）棉拭子：10个；五、沉降菌检测步骤：1、检测布点：生物安全柜（6个）；水平层流台（6个）；调配间（8个）；一更（3个）；二更（3个）；清洗间（3个）；2、通常的检测应在风机开启至少30min以上，紫外线照射30min，关闭紫外灯后开始采样。

3、将培养皿按采样点布置逐个放置，从内向外放置，摆放距离地面不低于60cm，培养皿暴露时间不得少于30min，不得大于4h。

操作台调配间一更/二更/清洗4、全部采样结束后，将二批杨敏倒置放置，随后送至检验科进行培养（2小时内送检）；每批均应有培养基对照实验，检验培养基本身是否污染，可每批做对照实验，与采样皿同法操作但不需暴露采样。

5、注意事项：（1）布置采样点时，至少应尽量避免尘粒较集中的回风口，采样时，测试人员应站在采样口的下风侧，并尽量减少走动；（2）采样前应仔细检查每个培养皿的质量，如发现变质、破损或污染的应剔除；（3）采样时摆放顺序为从里向外，净化台-调配间-二更-清洗间-一更。

回收培养皿时顺序相反。

（4）从检验科取来的培养皿不用时应在冷藏柜（2-8℃）保存。

（5）净化台沉降菌检测可轮流做，不必每个净化台都做检测；（6）二更和调配间均为万级，可轮流做检测；一更和清洗间为十万级，也可轮流做检测。

6、结果测定：（1）每个测点的沉降菌平均菌落数必须低于所选定评定标准的界限；（2）在静态测试时，若某测点的沉降菌平均菌落数超过评定标准，则应重新采样两次，两次结果均为合格才能判为符合；（3）洁净室沉降技术要求：洁净室沉降菌技术要求六、物体表面检测项目：1、物体表面检测：对静配中心洁净区内的各物体表面（操作台面、门把手、传递窗、大小推车、洁净服等）存在的病原微生物进行监控，达到规定标准，以保证所调配的输液质量。

沉降菌测试方法..

沉降菌测试方法..沉降菌测试方法1、把ф90m m×15mm硼硅酸玻璃培养皿包在报纸里，放入恒温烤箱中加热至180℃后，干烤2小时。

2、取X克培养基放入X克蒸馏水，放入高压消毒锅中加热溶化，冷至45℃时，在无菌操作要求下将培养基注入培养皿，每皿约15ml。

3、待琼脂凝固后，将培养基平皿倒置于33℃恒温培养箱中培养48小时，若培养基平皿上确无菌落生长，即可采样用。

制备好培养皿宜在2—8℃环境中保存。

4、采样时，一般在100级层流罩中放置3个培养皿，在100000级，10000级按面积大小一般放2个培养皿。

打开培养皿盖，使培养基表面暴露0.5小时，再将培养皿盖上后倒置于恒温培养箱33℃培养，时间不小于48小时，采样点位置离地0.8m—1.5m左右。

5、将培养皿举起用肉眼直接计数，用记号笔点记然后用5—10倍放大镜检查是否遗漏，若培养皿上有2个或2个以上菌落重叠，分辨时仍以2个或2个以上菌落计数，不要漏计培养皿边缘生长菌落，并注意细菌菌落与培养基沉淀物区别。

6、沉降菌测试前，被测洁净室已消毒。

被测洁净室温湿度须达到规定要求，静压差、换气次数、空气流速必须控制在规定值内，测试状态有静态和动态两种，测试状态选择须符合生产要求，并在报告中注明测试状态。

7、测试人员必须穿戴符合环境洁净度级别工作服，静态测试时，室内测试人员不得多于2人。

测试时间对单向流100级净化房间及层流工作台，测试应在净化空调系统正常运行不少于10min后开始，对非单向流，100000级以上净化房间，测试应在净化空调系统正常运行不少于30min 后开始。

8、平均菌落数计算：M 1+M 2+M 3 平均菌落数=.........21nMnM M ++ n —培养皿总数 M 1—1号培养皿菌落数 M 2—2号培养皿菌落数 M n —n 号培养皿菌落数用平均菌落数判断洁净空气中微生物。

洁净室内平均菌落数必须低于所选定的评定标准，（100级≤1个；10000级≤3个；100000级≤10个）。

沉降菌测试原始记录

RSB60-00 微生物检验室沉降菌测试原始记录测试依据SPG108-01 测试状态环境温度°C 相对湿度%培养基批号培养温度°C静压差检测日期报告日期评定标准十万级≤10CFU/皿；万级≤3CFU/皿；百级≤1CFU/皿结论检验者复核者RSB64-00 固体制剂车间沉降菌测试原始记录（2）测试依据SPG108-01 测试状态环境温度°C 相对湿度%培养基批号培养温度°C静压差检测日期报告日期评定标准：十万级≤10CFU/皿；万级≤3CFU/皿；百级≤1CFU/皿结论检验者复核者RSB63-00 固体制剂车间沉降菌测试原始记录（1）测试依据SPG108-01 测试状态环境温度°C 相对湿度%培养基批号培养温度°C静压差检测日期报告日期评定标准：十万级≤10CFU/皿；万级≤3CFU/皿；百级≤1CFU/皿结论检验者复核者RSB61-00 原料车间沉降菌测试原始记录测试依据SPG108-01 测试状态环境温度°C 相对湿度%培养基批号培养温度°C静压差检测日期报告日期评定标准：十万级≤10CFU/皿；万级≤3CFU/皿；百级≤1CFU/皿结论检验者复核者RSB62-00 原料车间沉降菌测试原始记录测试依据SPG108-01 测试状态环境温度°C 相对湿度%培养基批号培养温度°C静压差检测日期报告日期评定标准：十万级≤10CFU/皿；万级≤3CFU/皿；百级≤1CFU/皿结论检验者复核者RSB61-01原料车间沉降菌测试原始记录编号测试单位测试依据 SPG108-01 测试状态环境温度 °C 相对湿度% 培养基批号培养温度 °C静压差检测日期报告日期评定标准：十万级≤10CFU/皿；万级≤3CFU/皿；百级≤1CFU/皿结论检验者复核者。

洁净室沉降菌测试方法

洁净室沉降菌测试方法
洁净室沉降菌测试是对洁净室环境中空气中悬浮微粒的数量和种类进行评估的方法之一。

沉降菌测试是通过将培养基暴露在空气中，使空气中的微生物落到培养基上生长，然后计数和鉴定这些微生物来评估洁净室的微生物污染。

以下是一般的洁净室沉降菌测试方法：
1. 准备培养基：选择适用于微生物生长的培养基，如营养琼脂培养基。

按照培养基说明制备培养基。

2. 制备沉降皿：将培养基倒入锅中，加热至液态，然后倒入含有适量培养基的沉降皿中。

3. 安置沉降皿：在洁净室中的代表性位置放置沉降皿，如工作台面、天花板等。

4. 收集样品：根据需要和测试目的，选择适当时间段收集样品。

可以采用定期采样或连续采样的方式。

5. 培养：将采集的样品放置在培养箱中，以合适的温度和湿度条件孵育。

通常情况下，温度为30-37摄氏度，孵育时间为24-48小时。

6. 计数和鉴定：在孵育结束后，观察培养皿中的菌落形成情况，并进行计数。

可以根据菌落的形态和特征，使用显微镜和生化试剂等进行鉴定。

7. 报告结果：根据实验结果，记录沉降菌的数量和种类，并参考相关标准，如ISO 14698等，评估洁净室的微生物污染级别。

需要注意的是，洁净室沉降菌测试方法可能因测试目的、要求和标准的不同而有所差异。

在进行实际测试之前，最好参考相关的测试标准和指南，并根据具体情况进行适当的调整和验证。

沉降菌监测规程

沉降菌监测规程一、目的建立沉降菌监测方法，规范沉降菌监测操作。

二、范围适用于西厂区车间洁净室、无菌检查室、阳性室、洗衣房、取样间、微生物室的沉降菌监测。

三、职责检验中心人员负责车间洁净室、洗衣房、取样间的采样工作；负责各部分所需的材料准备、培养、菌落计数，以及无菌检查室、阳性室、微生物室监测的采样内容的执行。

质量中心负责人负责本规程执行情况的监督检查。

四、内容：1.仪器与用具1.1 培养皿（φ90mm）1.2 恒温培养箱1.3 高压蒸汽灭菌锅2.监测程序2.1 将已准备好的合格的空白培养皿放入物料缓冲间。

2.2 检测人员按人员进入洁净区的要求穿好洁净服，戴好口罩进入洁净室。

2.3 按此《沉降菌监测规程（西厂区）》对环境进行监测。

3.测试规则3.1测试条件3.1.1温度和相对湿度沉降菌测试前，被测试洁净室（区）的温度和相对湿度应与生产工艺等要求相适应（温度控制在18～26℃，相对湿度控制在45%～65%之间）。

3.1.2压差沉降菌测试前，洁净区与非洁净区之间、不同级别洁净室（区）之间的压差应当不低于10帕斯卡，空气洁净度级别要求高的洁净室（区）对相邻的空气洁净级别低的洁净室（区）一般要求相对正压。

3.1.3换气次数、空气流速3.2测试状态静态测试：静态测试时，室内测试人员不得多于2人。

动态测试：洁净室（区）已处于正常生产状态下进行的测试。

测试状态有静态和动态两种，测试状态的选择必须符合生产的要求，并在报告中注明测试状态。

（在正常的生产操作监测外，可在系统验证、清洁或消毒等操作完成后增加微生物监测。

）3.3测试时间3.3.1对单向流，如C级背景下的局部A级净化房间及层流工作台，测试应在净化空调系统正常运行不少于10min后开始。

3.3.2 对非单向流，如C级、D级以上的净化房间，测试应在净化空调系统正常运行不少于30min后开始。

3.4测试方法采用沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿，经若干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数，以平板培养皿中的菌落数来判定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净室（区）的洁净度。

沉降菌测定

GB/T 16294--1996 医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法前言本标准依照国内外药品生产管理规范(GMP)的要求,非等效采用美国国家航空及宇宙航行局NASA标准NHB5340--2关于洁净室和洁净工作台微生物的控制标准&;,并参考JGJ--90洁净室施工验收规范制定。

悬浮粒子和微生物的测试是评价医药工业洁净室和洁净区空气洁净度的主要指标.本标准用沉降菌评价洁净室和洁净区空气中的微生物。

医药工业洁净室（区）沉降菌的测试应采用本标准的规定。

本标准的附录A、附录B、附录C都是标准的附录。

本标准的附录D是提示的附录。

本标准由国家医药管理局提出并归口。

本标准起草单位：上海市医药管理局药品测试所。

本标准主要起草人：钱周、步伯荪、沈建华、顾锋、唐小珍。

1、范围本标准规定了医药工业洁净室和洁净区中沉降菌的测试条件、测试方法。

本标准适用于医药工业洁净室和洁净区，无菌室或无菌区域（包括洁净工作台）的沉降菌的测定和环境的验证。

2、引用标准下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。

本标准出版时，所示版本均为有效。

所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。

YY/T0188.6---1995药品检验操作规程第6部分：药品生物测定法3、定义本标准采用下列定义。

3.1 洁净室(区) clean roon(area)对尘粒及微生物污染规定需进行环境控制的房间或区域。

其建筑结构、装备及其使用均具有减少对该区域内污染源的介入、产生和滞留的功能。

3.2 洁净工作台cleaning work station一种工作台或者与之类似的一个封闭围挡工作区。

其特点是自身能够供给经过过滤的空气或气体，如垂直层流置、垂直层流洁净工作、水平层流洁净工作台、自净器等。

3.3 洁净度 cleanliness洁净环境内单位体积空气中含大于或等于某一粒径的悬浮粒子的允许统计数。

3.4 菌落colony forming units细菌培养后，由一个或几个细菌繁殖而形成的一细菌集落，简称CFU。

QR-QC-001沉降菌监测记录表-超净工作台

采样点9
采样点10
采样点11
采样点12
采样点13
采样点14
平均数(CFU/皿)
级别
结果判定
□合格□不合格
□合格 □不合格
□合格□不合格
判定标准
百级≤1CFU/皿，0.5h；万级≤3CFU/皿，0.5h；十万级≤10CFU/皿，0.5h
测试结论
□合格□不合格
报告日期
检测人
复核人
沉降菌监测记录
测试区域
超净工作台及生物安全柜
培养基批号
监测方式
□静态测试□动态测试
测试依据
GB/T16294
测试日期
测试时间
培养温度
36℃
培养时间
48h
测试数据
区域
超净工作台1
超净工作台2
生物安全柜
培养皿菌落数（CFU/皿，0.5h）
采样点1
采样点2
采样点3
采样点4
采样点5
采样点6
采样点7
采样பைடு நூலகம்8