最新的分子间相互作用分析技术--微量热泳动
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18 16 14 12 10 8 0 30 60 90 120 150 180 210 电阻率 有机物 1000 800
有机物含量的指标
• •
电阻率 MΩ.cm
有机物(TOC), ppb
600 400 200 0 240
添加有机物(蔗糖) 于纯水中，做为Milli-Q的进 水后,其所产超纯水的水质变化
•应用超纯水的质谱图
水中污染物对蛋白检测的影响
颗粒、胶体堵塞色谱柱、形成柱内涡流、磨损色 谱泵 生物大分子及小分子有机物造成杂峰、峰形劣化、 保留时间偏离、基线漂移、色谱柱寿命下降、仪 器污染 离子形成加Na+或 K+ 微生物产生各种污染物，同时造成仪器堵塞，此 外还可驻留仪器内持续增殖
超纯水水质保障
一些重金属 (镉, 汞, 铅, 锌, 镍, 铬) 毒害大，即便是很低剂量 (低于0.1 ppb)
纯水水质对于动物细胞 培养的重要性
不同水质溶解无血清培养基对细胞培养的影响
Cell Number x 105
Log scale
TM3
TR-1
M2R
10
Tap water Distilled Mill-Q UF
离子含量的指标
•
•
电阻率值仅能用来表示水中离子浓度高低,与其它污染物的浓度无关
18.2 MΩ.cm超纯水之含意仅能代表水中总离子浓度在1 ppb 以下,其它污染物需以 不同的方法来检测。影响实验结果及再现性的绝不仅于离子而已。 水中有机物含量的高低用TOC（总有机碳）来表示。 单纯的电阻率值指标不能够反映水中非离子污染物的含量，无监测则无控制，从而 导致实验失败。
1
3
神经干细胞培养 经超滤的一级超纯水 无超滤的一级超纯水 二级纯水去离子处理
Countin g on day 4, n = 3 TM3: mouse Leydig cells TR-1: rat endothelial cells M2R: mouse melanoma cells
1. 2. 3.
重要用水观点（1）---即取即用
越纯的实验室用水,越不宜久放
超纯水对周围环境物质有很强的溶解能力，被称为“hungry water” 超纯水从系统中取出，运送到实验操作场所过程中，很容易受到所使用容器的 溶出或者空气中的污染物质的污染，进而影响到实验结果
即取即用是非常重要的一个观念
使用前才取水的[即取即用]方式可避免超纯水受到环境污染
Milli-Q已经成为超纯水的代名词，有超过4万多篇SCI文献提及并使用Milli-Q水
• 1973年，Merck Millipore 推出世界上第一台实验室级超纯水系
统——Milli-Q 超纯水系统。 • 1987年，首次将超滤技术应用于超纯水系统 • 1989年，Merck Millipore推出首台紧凑型台式超纯水系统，并 将双波长紫外灯技术应用于超纯水系统 • 1997年，首次将内置TOC仪应用于超纯水系统
7 Presentation title in footer | 00 Month 0000 带电粒子的电荷拮抗作用
水质保障
TOC<5ppb RNases<0.01μg/ml DNases<4pg/ml 电阻率=18.2 MΩ.cm
Rnase去除效果的挑战性实验
分别检测供水水质及产水水质，蓝柱代表供水；红柱代表产水
2012 2008 2007 2000
1970’s
1980
1985
1989
1996
为什么关注实验室用水
水中污染物
——最基础和重要的试剂
监控指标
污水/自然水体→自来水→ 2/3级纯水→1级超纯水→专业级超纯水
对各类实验产生的影响 离子
(Na+/Ca2+/Fe3+/S O42-/Cl-) 电阻率(M.cm@25℃) 直接影响特定离子的检测 遇高浓度有机试剂形成结垢，堵塞仪器管路和色谱柱 电导率（μS/cm@25℃） 重金属离子抑制PCR聚合酶的活性；影响电泳速度； 电导率=1/电阻率 影响细胞及微生物正常生长 滴定反应、pH值测定等实验
2
3 细胞培养用水重点！ 超滤去除痕量核酸酶和热原 超纯水确保有机物、离子、 微生物的有效去除
1. 2. 3. 脑细胞培养 经超滤的一级超纯水 无超滤的一级超纯水 二级纯水去离子处理
1
2
水质对于动物饲养的重要性
水体中对实验动物的影响因素
1.内毒素（大肠杆菌）：影响动物生理，引发一系列免
疫反应，包括发烧、发炎、血压降低、休克等 2.塑化剂（环境荷尔蒙）引起动物早熟，干扰试验结果 3.微生物（绿脓杆菌群、大肠杆菌群）：引起实验动物 免疫力低下，易受细菌感染，破坏实验动物免疫系统，
水质保障
TOC(总有机碳)<5ppb 电阻率=18.2 MΩ.cm 细菌<0.1cfu/ml
RNases<0.01μg/ml
DNases<4pg/ml
• 瓶装水体系发 现206个检测
瓶装水
Milli-Q 水
•超纯水发现407个 检测点，而且更灵敏
纯水对于蛋白检测（LC-MS/MALDI-TOF MS）的重要性
有机物（腐殖酸、 • 影响细胞培养、PCR、电泳、TOC测定等实验；
核酸酶、三聚氰 胺、PCB）
总有机碳 TOC(ppb) • 导致液相色谱基线不稳定、鬼峰增加、灵敏度下降、 Rnases(ng/ml) 色谱柱寿命缩短 Dnases(pg/μl)
细菌本身影响生物学实验和仪器分析实验，裂解释 放热原,酶等多种物质 形成菌膜堵塞色谱柱及管路，持续释放各种污染物
超纯水系统与有机溶剂等污染源隔离也是降低环境污染的重要因素
20-
电阻率值 (MΩ.cm)
10-
4-
空气中二氧化碳溶于超纯水而造成水质的劣化 •从碳酸中解离出之氢离子浓度 pH= 5.7 •氢离子及碳酸根离子增加,造成超纯水阻抗值 下降至 4 左右
20 40 60 80 100
0-
时间(分钟)
17
重要的用水观点（2）---双参数监控
6
Presentation title in footer | 00 Month 0000
实验用水对于杂交&基因芯片检测的重要性
基因芯片的主 要反应为：杂交 &荧光效应
TOC=22ppb;电阻率=18.2 MΩ.cm
TOC=3ppb;电阻率=18.2 MΩ.cm
影响因素
有机物对杂交的极性干扰 和结合位点竞争/有机物 自身荧光作用 核酸酶对杂交过程核酸的 降解作用
浓度(ppb)
0
0 1000 2000 3000 取水量(L) 4000 5000 6000 7000
超纯水取水模式的革命---空间优化
引 领 纯 水 未 来
谢谢您的关注！
联系方式：400-889-1988 Yonina.Tang@merckgroup.com
经过流量分段测量，产水1500L后未发现Rnase 出厂具备认证证书《Certificate of Quality》
1.2
1
0.8
0.6 0.4
0.2 0
100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000
Volume (L)
1100 1200
1300 1400
1500
实验室纯水应用对于2D电泳的重要性
引起炎症、发烧、菌血症等
动物饲养对于水质要求 水的硬度过高或颗粒含量高导致自动喂饲系统堵塞 细菌<100cfu/ml;病毒含量低于致病浓度 不含有过量的有毒有害、致癌物（重金属、余氯、农 兽药残留、抗生素、内分泌干扰素） 稳定的水质 大肠杆菌群 不得检出/100ml 进行免疫相关实验需要对水进行内毒素检测
18
重要的用水观点（3）---耗材需定期更换
在电阻率值及TOC值降到极低值之前,就需以定期的方式更换耗材,以确保水质.
与延长耗材寿命所得的利益相比,高纯净度的水质更为重要. 为防止耗材在物理上或化学上的劣质化,影响水质,所以要定期更换UV灯,终端滤器
25
电阻率值(MΩ･cm)
20 15 电阻率值 10 5 硼酸盐 硅酸盐
13
Merck Millipore纯水系统全景图
一体机
Milli-Q Integral 3,5,10,15 Milli-Q Direct 8/16
超纯水机
Milli-Q Advantage A10 Milli-Q Reference(A+) Synergy UV(R)
纯水机
Elix Advantage 3,5,10,15 Elix Reference3,5,10,15 Elix Essential 5,8,16,24
颗粒(> 0.2µm) <1units / mL
TOC<5ppb
电阻率=18.2 MΩ.cm
细菌<0.1cfu/ml
•含有离子的纯水质谱图
细胞培养用水要求
一定要无菌 (酵母菌, 细菌, 真菌) 无蛋白及核酸酶和内毒素 有机物阻碍细胞生长. (增塑剂, 表面活性剂，农药残留)
化学消毒剂的影响 (氯)
实验室超纯水在生物医学相关实验的应用及解决方案
实验室纯水业务部
Merck Millipore 市场部 唐 莹 400-889-1988
讲பைடு நூலகம்内容
一、实验用水对物生医学验实关相的影响
二、Merck Millipore良好用水习惯
默克密理博实验室纯水：40多年的传奇，全球最知名的品牌
不断塑造和引领实验室纯水金标准的演进和发展！
取水臂+终端滤器
一机两水，超纯六水
Q-POD Element 超痕量元素分析
VOC-Pak 去除挥发性有机物
EDS-Pak
内分泌干扰物分析
Milli-pak 经典的无颗粒和细菌 滤器 LC-Pak 去除痕量有机物 Bio-Pak 有效去除热源、 核酸酶及蛋白酶
15
Merck Millipore良好用水习惯
气体（CO2、O2） • 改变水体的pH值
• 形成气泡产生光折射效应
实验用水对验实关相物生子分的影响
不同水质对于PCR的影响
超纯水结果最接近理想曲线 核酸酶作用引致的差异 去除不完全的核酸酶、有机物、离 子引致的差异 大量的各种污染物引致实验失败
纯水
超纯水
通过电泳结果中DNA 条带颜色深浅显示应 用超纯水进行PCR获 得更多的预期DNA拷 贝
细菌
细菌总数(cfu / mL) 热源 (Eu / mL) 颗粒(> 0.2µm) (units / mL)
阻塞过滤装置、色谱柱，在柱内形成涡流效应 具有光散射作用，降低UV的杀菌作用 颗粒和胶体 （硅胶体、泥沙、 对仪器的蠕动泵造成表面磨损影响溶剂分配精确度， 灰尘、管路剥落） 严重时可造成泵的物理损坏 在培养基或染料内形成假阳性观察结果
有机物含量的指标
• •
电阻率 MΩ.cm
有机物(TOC), ppb
600 400 200 0 240
添加有机物(蔗糖) 于纯水中，做为Milli-Q的进 水后,其所产超纯水的水质变化
•应用超纯水的质谱图
水中污染物对蛋白检测的影响
颗粒、胶体堵塞色谱柱、形成柱内涡流、磨损色 谱泵 生物大分子及小分子有机物造成杂峰、峰形劣化、 保留时间偏离、基线漂移、色谱柱寿命下降、仪 器污染 离子形成加Na+或 K+ 微生物产生各种污染物，同时造成仪器堵塞，此 外还可驻留仪器内持续增殖
超纯水水质保障
一些重金属 (镉, 汞, 铅, 锌, 镍, 铬) 毒害大，即便是很低剂量 (低于0.1 ppb)
纯水水质对于动物细胞 培养的重要性
不同水质溶解无血清培养基对细胞培养的影响
Cell Number x 105
Log scale
TM3
TR-1
M2R
10
Tap water Distilled Mill-Q UF
离子含量的指标
•
•
电阻率值仅能用来表示水中离子浓度高低,与其它污染物的浓度无关
18.2 MΩ.cm超纯水之含意仅能代表水中总离子浓度在1 ppb 以下,其它污染物需以 不同的方法来检测。影响实验结果及再现性的绝不仅于离子而已。 水中有机物含量的高低用TOC（总有机碳）来表示。 单纯的电阻率值指标不能够反映水中非离子污染物的含量，无监测则无控制，从而 导致实验失败。
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神经干细胞培养 经超滤的一级超纯水 无超滤的一级超纯水 二级纯水去离子处理
Countin g on day 4, n = 3 TM3: mouse Leydig cells TR-1: rat endothelial cells M2R: mouse melanoma cells
1. 2. 3.
重要用水观点（1）---即取即用
越纯的实验室用水,越不宜久放
超纯水对周围环境物质有很强的溶解能力，被称为“hungry water” 超纯水从系统中取出，运送到实验操作场所过程中，很容易受到所使用容器的 溶出或者空气中的污染物质的污染，进而影响到实验结果
即取即用是非常重要的一个观念
使用前才取水的[即取即用]方式可避免超纯水受到环境污染
Milli-Q已经成为超纯水的代名词，有超过4万多篇SCI文献提及并使用Milli-Q水
• 1973年，Merck Millipore 推出世界上第一台实验室级超纯水系
统——Milli-Q 超纯水系统。 • 1987年，首次将超滤技术应用于超纯水系统 • 1989年，Merck Millipore推出首台紧凑型台式超纯水系统，并 将双波长紫外灯技术应用于超纯水系统 • 1997年，首次将内置TOC仪应用于超纯水系统
7 Presentation title in footer | 00 Month 0000 带电粒子的电荷拮抗作用
水质保障
TOC<5ppb RNases<0.01μg/ml DNases<4pg/ml 电阻率=18.2 MΩ.cm
Rnase去除效果的挑战性实验
分别检测供水水质及产水水质，蓝柱代表供水；红柱代表产水
2012 2008 2007 2000
1970’s
1980
1985
1989
1996
为什么关注实验室用水
水中污染物
——最基础和重要的试剂
监控指标
污水/自然水体→自来水→ 2/3级纯水→1级超纯水→专业级超纯水
对各类实验产生的影响 离子
(Na+/Ca2+/Fe3+/S O42-/Cl-) 电阻率(M.cm@25℃) 直接影响特定离子的检测 遇高浓度有机试剂形成结垢，堵塞仪器管路和色谱柱 电导率（μS/cm@25℃） 重金属离子抑制PCR聚合酶的活性；影响电泳速度； 电导率=1/电阻率 影响细胞及微生物正常生长 滴定反应、pH值测定等实验
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3 细胞培养用水重点！ 超滤去除痕量核酸酶和热原 超纯水确保有机物、离子、 微生物的有效去除
1. 2. 3. 脑细胞培养 经超滤的一级超纯水 无超滤的一级超纯水 二级纯水去离子处理
1
2
水质对于动物饲养的重要性
水体中对实验动物的影响因素
1.内毒素（大肠杆菌）：影响动物生理，引发一系列免
疫反应，包括发烧、发炎、血压降低、休克等 2.塑化剂（环境荷尔蒙）引起动物早熟，干扰试验结果 3.微生物（绿脓杆菌群、大肠杆菌群）：引起实验动物 免疫力低下，易受细菌感染，破坏实验动物免疫系统，
水质保障
TOC(总有机碳)<5ppb 电阻率=18.2 MΩ.cm 细菌<0.1cfu/ml
RNases<0.01μg/ml
DNases<4pg/ml
• 瓶装水体系发 现206个检测
瓶装水
Milli-Q 水
•超纯水发现407个 检测点，而且更灵敏
纯水对于蛋白检测（LC-MS/MALDI-TOF MS）的重要性
有机物（腐殖酸、 • 影响细胞培养、PCR、电泳、TOC测定等实验；
核酸酶、三聚氰 胺、PCB）
总有机碳 TOC(ppb) • 导致液相色谱基线不稳定、鬼峰增加、灵敏度下降、 Rnases(ng/ml) 色谱柱寿命缩短 Dnases(pg/μl)
细菌本身影响生物学实验和仪器分析实验，裂解释 放热原,酶等多种物质 形成菌膜堵塞色谱柱及管路，持续释放各种污染物
超纯水系统与有机溶剂等污染源隔离也是降低环境污染的重要因素
20-
电阻率值 (MΩ.cm)
10-
4-
空气中二氧化碳溶于超纯水而造成水质的劣化 •从碳酸中解离出之氢离子浓度 pH= 5.7 •氢离子及碳酸根离子增加,造成超纯水阻抗值 下降至 4 左右
20 40 60 80 100
0-
时间(分钟)
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重要的用水观点（2）---双参数监控
6
Presentation title in footer | 00 Month 0000
实验用水对于杂交&基因芯片检测的重要性
基因芯片的主 要反应为：杂交 &荧光效应
TOC=22ppb;电阻率=18.2 MΩ.cm
TOC=3ppb;电阻率=18.2 MΩ.cm
影响因素
有机物对杂交的极性干扰 和结合位点竞争/有机物 自身荧光作用 核酸酶对杂交过程核酸的 降解作用
浓度(ppb)
0
0 1000 2000 3000 取水量(L) 4000 5000 6000 7000
超纯水取水模式的革命---空间优化
引 领 纯 水 未 来
谢谢您的关注！
联系方式：400-889-1988 Yonina.Tang@merckgroup.com
经过流量分段测量，产水1500L后未发现Rnase 出厂具备认证证书《Certificate of Quality》
1.2
1
0.8
0.6 0.4
0.2 0
100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000
Volume (L)
1100 1200
1300 1400
1500
实验室纯水应用对于2D电泳的重要性
引起炎症、发烧、菌血症等
动物饲养对于水质要求 水的硬度过高或颗粒含量高导致自动喂饲系统堵塞 细菌<100cfu/ml;病毒含量低于致病浓度 不含有过量的有毒有害、致癌物（重金属、余氯、农 兽药残留、抗生素、内分泌干扰素） 稳定的水质 大肠杆菌群 不得检出/100ml 进行免疫相关实验需要对水进行内毒素检测
18
重要的用水观点（3）---耗材需定期更换
在电阻率值及TOC值降到极低值之前,就需以定期的方式更换耗材,以确保水质.
与延长耗材寿命所得的利益相比,高纯净度的水质更为重要. 为防止耗材在物理上或化学上的劣质化,影响水质,所以要定期更换UV灯,终端滤器
25
电阻率值(MΩ･cm)
20 15 电阻率值 10 5 硼酸盐 硅酸盐
13
Merck Millipore纯水系统全景图
一体机
Milli-Q Integral 3,5,10,15 Milli-Q Direct 8/16
超纯水机
Milli-Q Advantage A10 Milli-Q Reference(A+) Synergy UV(R)
纯水机
Elix Advantage 3,5,10,15 Elix Reference3,5,10,15 Elix Essential 5,8,16,24
颗粒(> 0.2µm) <1units / mL
TOC<5ppb
电阻率=18.2 MΩ.cm
细菌<0.1cfu/ml
•含有离子的纯水质谱图
细胞培养用水要求
一定要无菌 (酵母菌, 细菌, 真菌) 无蛋白及核酸酶和内毒素 有机物阻碍细胞生长. (增塑剂, 表面活性剂，农药残留)
化学消毒剂的影响 (氯)
实验室超纯水在生物医学相关实验的应用及解决方案
实验室纯水业务部
Merck Millipore 市场部 唐 莹 400-889-1988
讲பைடு நூலகம்内容
一、实验用水对物生医学验实关相的影响
二、Merck Millipore良好用水习惯
默克密理博实验室纯水：40多年的传奇，全球最知名的品牌
不断塑造和引领实验室纯水金标准的演进和发展！
取水臂+终端滤器
一机两水，超纯六水
Q-POD Element 超痕量元素分析
VOC-Pak 去除挥发性有机物
EDS-Pak
内分泌干扰物分析
Milli-pak 经典的无颗粒和细菌 滤器 LC-Pak 去除痕量有机物 Bio-Pak 有效去除热源、 核酸酶及蛋白酶
15
Merck Millipore良好用水习惯
气体（CO2、O2） • 改变水体的pH值
• 形成气泡产生光折射效应
实验用水对验实关相物生子分的影响
不同水质对于PCR的影响
超纯水结果最接近理想曲线 核酸酶作用引致的差异 去除不完全的核酸酶、有机物、离 子引致的差异 大量的各种污染物引致实验失败
纯水
超纯水
通过电泳结果中DNA 条带颜色深浅显示应 用超纯水进行PCR获 得更多的预期DNA拷 贝
细菌
细菌总数(cfu / mL) 热源 (Eu / mL) 颗粒(> 0.2µm) (units / mL)
阻塞过滤装置、色谱柱，在柱内形成涡流效应 具有光散射作用，降低UV的杀菌作用 颗粒和胶体 （硅胶体、泥沙、 对仪器的蠕动泵造成表面磨损影响溶剂分配精确度， 灰尘、管路剥落） 严重时可造成泵的物理损坏 在培养基或染料内形成假阳性观察结果