正交设计法优化枸杞多糖的提取工艺

正交设计法优化枸杞多糖的提取工艺
作者：陈靖庞燕军曹春英张悫
来源：《中国医药导报》2009年第02期
[摘要] 目的：确定枸杞多糖的最佳提取条件。

方法：分别以多糖得率及多糖含量为考察指标，以正交试验法确定枸杞多糖的最佳提取工艺。

结果：枸杞多糖的最佳提取工艺为：取枸杞药材，加水6倍量，共冷浸3次，每次冷浸8 h。

结论：本法为枸杞多糖水提工艺的确定提供实验依据。

[关键词] 枸杞多糖；提取工艺；正交试验
[中图分类号] R917[文献标识码]A [文章编号]1673-7210（2009）01（b）-016－０2
Study on the extraction process of polysaccharide from lycium barbarum L.
CHEN Jing1, PANG Yan-jun2, CAO Chun-ying1, ZHANG Que1*
(1.Shenyang Broadcast Television University, Shenyang110003, China; 2.Institute for Food and Drug Control of Liaoning Province, Shenyang110023, China)
[Abstract] Objective: To choose the optimum extraction process of polysaccharide from lycium barbarum L.. Methods: The yield and the content of polysaccharide were respectively used to evaluate the factor levels. The optimal water extraction process was selected with the orthogonal design. Results: The ideal extraction process was: the polysaccharide was extracted with water for 3 times, with solvent volume 6 times amount each time, extraction time 8 h each time. Conclusion: The experimental results provide the basis for the water extraction process of polysaccharide from lycium barbarum L.
[Key words] Polysaccharide from lycium barbarum L.; Extraction process; Orthogonal design
枸杞为茄科植物宁夏枸杞（lycium barbarum L.）的干燥成熟果实。

传统的中医理论认为：其味甘，性平，具有补肝肾、益精血、明目之功能[1]。

现代科学研究证明，枸杞具有调节免疫功能、降血糖、降血脂、抗衰老、抗肿瘤等作用，而其药理作用与其生物活性成分枸杞多糖（LBP）密切相关[2-5]。

LBP是由阿拉伯糖、鼠李糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖及半乳糖醛组成的酸性杂多糖的糖链与蛋白质的肽链以共价键的形式结合的含肽多糖，相对分子量在1.0万～8.8万之间。

近年来，LBP的研究已成为枸杞研究的热门话题，但大多数是对其药理作用的研究，而对其多糖提取工艺的研究却少有报道。

由于LBP是一种蛋白多糖，若用水煮加热提取会使其变性而导致药效降低，为了科学地利用枸杞药材资源，确保其有效成分的药效，本实验采用水冷浸的方法提取，以多糖得率及多糖含量为考察指标，采用正交试验法来优化提取条件。

1仪器与材料
枸杞（宁夏中宁）；葡萄糖对照品（中国药品生物制品检定所）；离心机、旋转蒸发仪（上海亚荣）；循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）；粉碎机、DZ-1BC型真空干燥箱（天津泰斯特仪器有限公司）；UV-754分光光度计（上海精密科学仪器有限公司分析仪器总厂）。

所用试剂均为分析纯。

2方法与结果
2.1正交试验设计
根据预实验，选择对水冷浸提取工艺有影响的主要因素(加水量、提取时间及提取次数)，按三因素三水平表进行L9（34）正交试验。

各因素水平见表1，每个实验重复3次，对正交试验所得的最佳提取工艺进行验证性试验。

2.2枸杞多糖含量测定
采用苯酚－硫酸比色法测定枸杞多糖粗品中的多糖含量[6]。

配制葡萄糖溶液绘制标准曲线，求得枸杞多糖粗品中多糖的含量。

表1 因素水平表
Table 1 Factors and levels
3讨论
多糖收率方面：从表2可知，RC＞RB＞RA，以最小的RA做误差估计，RC、RB分别是RA的5.1倍和3.2倍。

因此，C、B是影响多糖得率的主要因素，A则是次要因素，结合各因素的K值（越大越好）可得出：最佳组合为A3B3C3。

而提取物的多糖含量方面，从表2可知，RC＞RA＞RB，以最小的RB做误差估计，RC、RA分别是RB的2.2倍和1.23倍。

因此，C是影响多糖含量的主要因素，A、B是次要因素，结合各因素的K值（越大越好）可得出：最佳组合为A3B1C2。

根据正交试验的观点，只选取有显著性意义因素的最好水平搭配，确定出最佳方案。

而对于不显著性的因素，原则上可以由实际条件酌情处理。

因此，综合上述分析可知：以多糖得率为指标时，A因素是不具有显著性影响的，从后期处理和能耗的角度来考虑选A1。

B因素为非显著性的影响因素，考虑到多糖的含量是提取多糖的主要目的，故选B2。

以多糖得率和多糖含量为指标时，C因素均为显著性的影响因素故选C3。

最后可得出最佳组合为A1B2C3。

即枸杞多糖的最佳提取工艺为：取枸杞药材，加6倍量水，冷浸3次，每次冷浸8 h。

[参考文献]
[1]江苏新医学院.中药大辞典(下册)[M].上海:上海科技出版社,1975.1518.
[2]倪慧,卿德刚,凯撒·苏来曼,等.枸杞基础研究进展[J].新疆中医药,2005,23(5):72.
[3]薛立文,李以暖.枸杞子营养和保健功能[J].广东微量元素科学,2000, 6:189-192.
[4]刘杰麟,章灵华,钱玉昆.枸杞多糖对S180荷瘤小鼠的免疫抑瘤作用[J].中国免疫学杂
志,1996,12(2):15.
[5]王汉中,张民.枸杞多糖延缓衰老的作用[J].营养学报,2002,24(2):189-192.
[6]邬卫东,张晓文.硫酸-苯酚法测定枸杞多糖含量[J].中草药,2003,3:38.
（收稿日期：2008-10-16）。