Fortebio生物分子相互作用检测平台-中文版
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Octet Solution
ForteBio Inc.—艾瑞生物技术（上海）有限公司
• 公司的历史：
• 2004年成立，在美国加州Menlo Park, 英国London, 和中国 • 上海建有生产和技术中心
• 独到的技术：
• 新一代的label-free technology • 生物膜干涉技术BioLayer Interferometry Technology（ BLI ）
两个反射表面间距的改变对干涉光强度的影响
Relative Intensity
Internal Reference (reflection surface 1)
100%
Distance between the two reflecting
ℓ surfaces =
Interface with Liquid (reflection surface 2)
Minimum Sample Volume Dynamic Range Direct Q动态 范围浓度 (At high and low flow rates) Affinity range (approximate) 亲和力分析浓度 RMS System Noise系统方差 Read Capabilities使用范围 Sample Usage样品使用 Temperature Control控温 21 CFR Part 11 Compliance
ForteBio Octet的应用
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
• Binding KD亲和力检测 • On and off rates
• 结合解离速率
• Rank order
• 比较亲和力和结合解离速率的高低
Specificity of binding 结合特异性 • Yes / No kinetic screening动力学筛选 • Epitope binning（竞争）/ mapping（定位）
octetred384qk384平台sensor位置样品板位置反应板位置biosensor回收槽自动舱门31429315ofortebiooctet检测平台双位置摆可将样品缓冲溶液buffer预湿试剂洗涤试剂分别放置在不同的微孔板中384样品板利用率100两个板位可独立使用96plate或384platefortebiooctetqk384red384平台内部ofortebiooctet检测平台octet系统与工作站联用?automateddoorandplatestage?workswitharticulatedarmandtrackstyleroboticsystems?platestagepresentsthebiosensortraysampleandreagentplatesforrobot?octetsoftwarehasautomationhooksenabledtointeractwithrobotsoftwareoctet检测平台型号差异octetqkoctetqkeoctetqk384octetredoctetred384molecularweightrange10000d5000d5000d150d150ddataacquisitionrate数据06hz03hzor06hz03hzor06hz25or10hz25or10hzspectrometers光通道112816channelsperread通道181811618116microplatepositions板位11212biosensorreracking可回收noyesyesnoyesrobotcompatible兼容性nonoyesnoyesmicroplateformats板型9696ha9696ha9696ha384384tw969696ha384384twminimumsamplevolume80?lperwell80?lperwell40?lperwell180?lperwell40?lperwelldynamicrangedirectq动态范围浓度athighandlowflowrates100ngmlto700ugml50ngmlto700ugml50ngmlto700ugml50ngmlto2mgml50ngmlto2mgmlaffinityrangeapproximate亲和力分析浓度01mmto01nm01mmt
ƒ( ) Intensity λ = λ, ℓ
nm shift
Wavelength (nm) Time
Biolayer Interferometry（BLI）技术的原理
特殊的 BLI Biosensor
• Two-dimensional binding surface 结合在二维的表面
|---- 600 µm ----|
• 16通道检测，速度更快，时间更短 • QK384: 2 个独立光谱分析检测器，每8通道共用一个; • RED384: 16个独立光谱分析检测器，每个通道独立使用一个；
• 增加Biosensors 回放功能 • 有效提高biosensor使用率； • 更加节省耗材；
• 可与多种工作站联用提高自动化程度 • 软件兼容多种类型工作站；
Expression Monitoring
表达检测 Clone selection and
ranking 克隆筛选及动力学筛选
Epitope mapping 表面抗原决定簇图谱
Small molecule or ligand screening 小分子或配体筛选 Kinetic screening of
Concentration, Kon, Koff, KD (Affinity)从浓度到亲和力 Non-destructive and recoverable无损害可回收
4°C above ambient to 40°C
Available as option for all systems 完全符合相应标准
实时无标记生物分子相互作用检测平台
Fortebio Octet 检测平台
ForteBio Octet QK、Qke、RED平台内部
Fortebio Octet 384全自动检测平台
• 使用96或384不同的微孔板类型 • 通量更高，样品消耗更少； • 384 tilted well 使用384微孔板，反应体系更小；
Direct Q 96 HA 384 TW
Detection of Human IgG on Protein A biosensors 96 well microplate with half-area well size ForteBio 384 tilted-well microplate
Octet RED384
生物分子结合后的 BLI Biosensor
任何分子的结合和解离都会引起不同波长光的干涉光强 度变化
Fortebio Octet 检测平台
Octet检测平台产品系列
• Octet Qk • Octet QKe • Octet QK384 • Octet RED • Octet RED384
Fortebio Octet 检测平台
抗原表位决定簇
Protein Concentration • Pico gram to milli gram dynamic range
• 皮克到毫克级的动态范围
• Contaminant testing 污染物检测
Signal
Concentration
Fortebio Octet 检测平台
ForteBio Octet 平台的应用
> 5000 D
0.3 Hz or 0.6 Hz 2
1 - 16 2 Yes Yes
96 / 96HA 384 / 384TW 40 µL per well
> 150 D 2, 5, or 10 Hz
8 1-8
1 No No
96
180 µL per well
100 ng/ml to 700 ug/ml
Data Acquisition Rate数据 # Spectrometers光通道 # Channels per Read 通道 Microplate Positions板位 Biosensor Reracking可回收 Robot Compatible兼容性
Microplate Formats板型
Fortebio Octet 检测平台
选择ForteBio Octet的理由
• 快——
• 减少样品制备时间 • 避免长时间的孵育和洗涤步骤 • 简化分析、开发 步骤
• 省—— • 样本无需标记，减少标记成本减少标签试剂 • 抗体使用对 • 使用前无需对仪器进行预热，通量高。减少实验分析时间
• 准——测量准确，精度高
• Biocompatible Matrix
- minimizes non-specific binding
具有生物亲和性的表面基团阵列 极小的非特异性结合
• Uniform 一致性高
• Non-denaturing 不会使结合上的蛋白或抗体变性
Biolayer Interferometry（BLI）技术的原理
• 广泛的应用： • 接近300台仪器 在全球各地广泛使用 • 生产并销售了超过2,500,000 个Biosensors
• 广阔的前景：
• 2nd in label-free detection system market share
•
HTStec March 2008 survey
/wiki/Interference
> 150 D 2, 5, or 10 Hz
16 1 - 16
2 Yes Yes 96 / 96HA 384 / 384TW 40 µL per well
50 ng/ml to 2 mg/ml
1 mM to 10 pM 2, 3, or 6 pM
Fortebio Octet 检测平台
Affinity characterization
• 检测直接结合的生物分子 • 能够进行实时检测并得到高质量的信息 • 消除由于标记产生的错误结果干扰
hybridomas 肿瘤融合细胞动力学
筛选 Secondary hit confirmation
二代验证
Affinity measurement
亲和力检测 On and off-rates
结合解离效率 Binding affinity
ranking 亲和力排序
Kinetic profiling of immunotherapeutics 免疫抑制动力学图谱 Rapid concentration
measurements 快速浓度定量
Immunogenicity 至免疫性
21CFR Compliant 符合FDA的 21CFR标准
Production monitoring
产品检测 Process optimization 条件优化 Protein and small molecule therapeutics 蛋白及小分子治疗 Fast and accurate concentration measurements 快速精确地浓度测定
50 ng/ml to 700 ug/ml
50 ng/ml to 700 ug/ml
50 ng/ml to 2 mg/ml
0.1 mM to 0.1 nM
0.1 mM to 0.1 nM
0.1 mM to 0.1 nM
1 mM to 10 pM
15 pM
2.5 or 6 pM
2.5 or 6 pM
2, 3, or 6 pM
Octet QK
Octet QKe
Octet QK384
Octet RED
> 10,000 D 0.6 Hz 1 1-8 1 No No
96, 96 HA
80 µL per well
> 5000 D 0.3 Hz or 0.6 Hz
1 1-8
1 Yes No
96, 96 HA
80 µL per well
- 384样品板利用率100%
- 两个板位可独立使用96-plate或 384plate
Octet 系统与工作站联用
• Automated door and plate stage • Works with articulated arm and
track-style robotic systems • Plate stage presents the biosensor
Wide Fit Within Discovery and Development Process
Research 研究
Screening 筛选
Lead Characterization
Preclinical and Clinical临床前
期及临床
Manufacturing and QC
生产及质控
Assay development 实验发现
tray, sample and reagent plates for robot • Octet software has automation hooks enabled to interact with robot software
Octet 检测平台型号差异
Molecular Weight Range
Fortebio Octet 检测平台
Octet RED384/QK384 平台
Sensor 位置 自动舱门
样品板位置 反应板位置
31.5”
Biosensor 回收槽 29”
31.4”
Fortebio Octet 检测平台
ForteBio Octet QK384、RED384平台内部 - 双位置摆可将样品、缓冲溶液 buffer、预湿试剂、洗涤试剂分 别放置在不同的微孔板中
Biolayer Interferometry（BLI）技术的原理
什么是光干涉现象
Biolayer Interferometry（BLI）技术的原理
干涉作用中的相互加强与相互抵消
a b
Two waves in phase Constructive interference
Two waves 180° out of phase Destructive Interference
0
Wavelength (nm)
ƒ( ) Intensity λ = λ, ℓ
Biolayer Interferometry（BLI）技术的原理
可实时检测到两个反射表面间距的改变
100%
Relative Intensity
0
Distance between the two reflecting
ℓ surfaces =
/wiki/Interference
Biolayer Interferometry（BLI）技术的原理
改变膜厚度对干涉光的影响
100% 0
Wavelength
Relative Intensity
Biolayer Interferometry（BLI）技术的原理
ForteBio Inc.—艾瑞生物技术（上海）有限公司
• 公司的历史：
• 2004年成立，在美国加州Menlo Park, 英国London, 和中国 • 上海建有生产和技术中心
• 独到的技术：
• 新一代的label-free technology • 生物膜干涉技术BioLayer Interferometry Technology（ BLI ）
两个反射表面间距的改变对干涉光强度的影响
Relative Intensity
Internal Reference (reflection surface 1)
100%
Distance between the two reflecting
ℓ surfaces =
Interface with Liquid (reflection surface 2)
Minimum Sample Volume Dynamic Range Direct Q动态 范围浓度 (At high and low flow rates) Affinity range (approximate) 亲和力分析浓度 RMS System Noise系统方差 Read Capabilities使用范围 Sample Usage样品使用 Temperature Control控温 21 CFR Part 11 Compliance
ForteBio Octet的应用
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
• Binding KD亲和力检测 • On and off rates
• 结合解离速率
• Rank order
• 比较亲和力和结合解离速率的高低
Specificity of binding 结合特异性 • Yes / No kinetic screening动力学筛选 • Epitope binning（竞争）/ mapping（定位）
octetred384qk384平台sensor位置样品板位置反应板位置biosensor回收槽自动舱门31429315ofortebiooctet检测平台双位置摆可将样品缓冲溶液buffer预湿试剂洗涤试剂分别放置在不同的微孔板中384样品板利用率100两个板位可独立使用96plate或384platefortebiooctetqk384red384平台内部ofortebiooctet检测平台octet系统与工作站联用?automateddoorandplatestage?workswitharticulatedarmandtrackstyleroboticsystems?platestagepresentsthebiosensortraysampleandreagentplatesforrobot?octetsoftwarehasautomationhooksenabledtointeractwithrobotsoftwareoctet检测平台型号差异octetqkoctetqkeoctetqk384octetredoctetred384molecularweightrange10000d5000d5000d150d150ddataacquisitionrate数据06hz03hzor06hz03hzor06hz25or10hz25or10hzspectrometers光通道112816channelsperread通道181811618116microplatepositions板位11212biosensorreracking可回收noyesyesnoyesrobotcompatible兼容性nonoyesnoyesmicroplateformats板型9696ha9696ha9696ha384384tw969696ha384384twminimumsamplevolume80?lperwell80?lperwell40?lperwell180?lperwell40?lperwelldynamicrangedirectq动态范围浓度athighandlowflowrates100ngmlto700ugml50ngmlto700ugml50ngmlto700ugml50ngmlto2mgml50ngmlto2mgmlaffinityrangeapproximate亲和力分析浓度01mmto01nm01mmt
ƒ( ) Intensity λ = λ, ℓ
nm shift
Wavelength (nm) Time
Biolayer Interferometry（BLI）技术的原理
特殊的 BLI Biosensor
• Two-dimensional binding surface 结合在二维的表面
|---- 600 µm ----|
• 16通道检测，速度更快，时间更短 • QK384: 2 个独立光谱分析检测器，每8通道共用一个; • RED384: 16个独立光谱分析检测器，每个通道独立使用一个；
• 增加Biosensors 回放功能 • 有效提高biosensor使用率； • 更加节省耗材；
• 可与多种工作站联用提高自动化程度 • 软件兼容多种类型工作站；
Expression Monitoring
表达检测 Clone selection and
ranking 克隆筛选及动力学筛选
Epitope mapping 表面抗原决定簇图谱
Small molecule or ligand screening 小分子或配体筛选 Kinetic screening of
Concentration, Kon, Koff, KD (Affinity)从浓度到亲和力 Non-destructive and recoverable无损害可回收
4°C above ambient to 40°C
Available as option for all systems 完全符合相应标准
实时无标记生物分子相互作用检测平台
Fortebio Octet 检测平台
ForteBio Octet QK、Qke、RED平台内部
Fortebio Octet 384全自动检测平台
• 使用96或384不同的微孔板类型 • 通量更高，样品消耗更少； • 384 tilted well 使用384微孔板，反应体系更小；
Direct Q 96 HA 384 TW
Detection of Human IgG on Protein A biosensors 96 well microplate with half-area well size ForteBio 384 tilted-well microplate
Octet RED384
生物分子结合后的 BLI Biosensor
任何分子的结合和解离都会引起不同波长光的干涉光强 度变化
Fortebio Octet 检测平台
Octet检测平台产品系列
• Octet Qk • Octet QKe • Octet QK384 • Octet RED • Octet RED384
Fortebio Octet 检测平台
抗原表位决定簇
Protein Concentration • Pico gram to milli gram dynamic range
• 皮克到毫克级的动态范围
• Contaminant testing 污染物检测
Signal
Concentration
Fortebio Octet 检测平台
ForteBio Octet 平台的应用
> 5000 D
0.3 Hz or 0.6 Hz 2
1 - 16 2 Yes Yes
96 / 96HA 384 / 384TW 40 µL per well
> 150 D 2, 5, or 10 Hz
8 1-8
1 No No
96
180 µL per well
100 ng/ml to 700 ug/ml
Data Acquisition Rate数据 # Spectrometers光通道 # Channels per Read 通道 Microplate Positions板位 Biosensor Reracking可回收 Robot Compatible兼容性
Microplate Formats板型
Fortebio Octet 检测平台
选择ForteBio Octet的理由
• 快——
• 减少样品制备时间 • 避免长时间的孵育和洗涤步骤 • 简化分析、开发 步骤
• 省—— • 样本无需标记，减少标记成本减少标签试剂 • 抗体使用对 • 使用前无需对仪器进行预热，通量高。减少实验分析时间
• 准——测量准确，精度高
• Biocompatible Matrix
- minimizes non-specific binding
具有生物亲和性的表面基团阵列 极小的非特异性结合
• Uniform 一致性高
• Non-denaturing 不会使结合上的蛋白或抗体变性
Biolayer Interferometry（BLI）技术的原理
• 广泛的应用： • 接近300台仪器 在全球各地广泛使用 • 生产并销售了超过2,500,000 个Biosensors
• 广阔的前景：
• 2nd in label-free detection system market share
•
HTStec March 2008 survey
/wiki/Interference
> 150 D 2, 5, or 10 Hz
16 1 - 16
2 Yes Yes 96 / 96HA 384 / 384TW 40 µL per well
50 ng/ml to 2 mg/ml
1 mM to 10 pM 2, 3, or 6 pM
Fortebio Octet 检测平台
Affinity characterization
• 检测直接结合的生物分子 • 能够进行实时检测并得到高质量的信息 • 消除由于标记产生的错误结果干扰
hybridomas 肿瘤融合细胞动力学
筛选 Secondary hit confirmation
二代验证
Affinity measurement
亲和力检测 On and off-rates
结合解离效率 Binding affinity
ranking 亲和力排序
Kinetic profiling of immunotherapeutics 免疫抑制动力学图谱 Rapid concentration
measurements 快速浓度定量
Immunogenicity 至免疫性
21CFR Compliant 符合FDA的 21CFR标准
Production monitoring
产品检测 Process optimization 条件优化 Protein and small molecule therapeutics 蛋白及小分子治疗 Fast and accurate concentration measurements 快速精确地浓度测定
50 ng/ml to 700 ug/ml
50 ng/ml to 700 ug/ml
50 ng/ml to 2 mg/ml
0.1 mM to 0.1 nM
0.1 mM to 0.1 nM
0.1 mM to 0.1 nM
1 mM to 10 pM
15 pM
2.5 or 6 pM
2.5 or 6 pM
2, 3, or 6 pM
Octet QK
Octet QKe
Octet QK384
Octet RED
> 10,000 D 0.6 Hz 1 1-8 1 No No
96, 96 HA
80 µL per well
> 5000 D 0.3 Hz or 0.6 Hz
1 1-8
1 Yes No
96, 96 HA
80 µL per well
- 384样品板利用率100%
- 两个板位可独立使用96-plate或 384plate
Octet 系统与工作站联用
• Automated door and plate stage • Works with articulated arm and
track-style robotic systems • Plate stage presents the biosensor
Wide Fit Within Discovery and Development Process
Research 研究
Screening 筛选
Lead Characterization
Preclinical and Clinical临床前
期及临床
Manufacturing and QC
生产及质控
Assay development 实验发现
tray, sample and reagent plates for robot • Octet software has automation hooks enabled to interact with robot software
Octet 检测平台型号差异
Molecular Weight Range
Fortebio Octet 检测平台
Octet RED384/QK384 平台
Sensor 位置 自动舱门
样品板位置 反应板位置
31.5”
Biosensor 回收槽 29”
31.4”
Fortebio Octet 检测平台
ForteBio Octet QK384、RED384平台内部 - 双位置摆可将样品、缓冲溶液 buffer、预湿试剂、洗涤试剂分 别放置在不同的微孔板中
Biolayer Interferometry（BLI）技术的原理
什么是光干涉现象
Biolayer Interferometry（BLI）技术的原理
干涉作用中的相互加强与相互抵消
a b
Two waves in phase Constructive interference
Two waves 180° out of phase Destructive Interference
0
Wavelength (nm)
ƒ( ) Intensity λ = λ, ℓ
Biolayer Interferometry（BLI）技术的原理
可实时检测到两个反射表面间距的改变
100%
Relative Intensity
0
Distance between the two reflecting
ℓ surfaces =
/wiki/Interference
Biolayer Interferometry（BLI）技术的原理
改变膜厚度对干涉光的影响
100% 0
Wavelength
Relative Intensity
Biolayer Interferometry（BLI）技术的原理