白细胞介素-6定量方法研究进展

I n s p e c t i o n/检验检测
白细胞介素-6定量方法研究进展
燕茹，林婧
(南京市计量监督检测院，江苏南京210049)
摘要：细胞介素-6 (IL-6)是一种重要的细胞因子，在机体病理和生理活动中发挥着多种作用。

因此需要高 准确度测定丨L-6的水平。

文章综述了近年来国内外IL-6不同定量方法的研究进展，包括酶联免疫法、免疫 放射法、电化学免疫法，讨论了 IL-6不同定量方法的特点，并展望了其发展趋势。

关键词：白细胞介素-6;检测方法
1弓丨言
白介素6 (Interleukin-6, IL-6)是一种炎症因 子，由212个氨基酸组成的糖蛋白，健康人体内一般 小于7 pg/m L,当机体受到细菌感染时，含量急剧升 高，其含量与感染程度呈正相关。

IL-6在传递信息，激活与调节免疫细胞，介导T、B细胞活化、增殖与 分化及在炎症反应中起重要作用。

检测IL-6有助于 评价糖尿病、心血管病、炎症性疾病和感染性疾病等。

患者IL-6的连续监测，有助于评估炎症反应的严重 程度，脓毒症及其预后情况；日本指南推荐将IL-6 用于脓毒症辅助诊断，IL-6可以作为脓毒症的早期 预警指标。

研究发现，2019-n C o V感染的患者血清中IL-6 等炎症细胞因子显著升高。

患者血清中IL-6的含量 有助于新型冠状病毒肺炎的临床分型及预测疾病严重 程度和患者预后。

《新型冠状病毒肺炎诊疗方法（试 行第七版）》将外周血炎症因子IL-6进行性上升作 为新型冠状病毒肺炎重型、危重型临床预警指标。

IL-6作为感染性疾病的早期诊断、病情评估、疗效监控和预后判断的诊断指标。

IL-6的准确测定 具有重要意义。

为准确地测定血清中IL-6的含量，提高检测结果准确性，本文对IL-6的定量方法进行 综述。

2丨L-6定量检测方法
根据IL-6的检测原理及方法的不同，对IL-6的 检测分为：免疫学方法、生物学检测方法。

2.1免疫学方法
免疫分析方法的原理为利用特定抗体与抗原发生 的特异性识别和结合，对待测抗体或者抗原进行分析 测定的方法。

这种方法的特点是对于待测样品的前处理要求较小，不会被待测样品中的其他物质所影响，所以特别适合于对于人体的体液和血液进行直接检 测。

常用的检测方法包括：酶联免疫法、免疫放射法、电化学免疫法、化学发光法等方法。

2.1.1 酶耳关免疫法（Enzyme-Linked Immunosorbent Assays,ELISA)
E L IS A技术是19世纪70年代发展起来的一种 免疫测定技术，其测定原理是基于抗原与抗体的特异 性结合反应，通过将待测物与酶连接，通过分析酶与 底物的反应颜色标定待测物的浓度。

IL-6酶联免疫 法测定已有商品化试剂盒供应，IL-6酶联法检测的 试剂盒一般采用双抗体夹心法，具有灵敏度高、抗干 扰性强旦不需要复杂设备的优点。

Nobuo Id3a等人 采用ELISA的方法检测了人源IL-6的含量，检测限 为9.5 n g/m L,此方法和生物测定法有良好的相关性。

2.1.2 免疫放射法（Radio Immunoassay，RIA)
免疫放射法是利用同位素标记的与未标记的抗原，同抗体发生竞争性抑制反应的方法。

邱玉华等在 对单抗识别抗原位点鉴定的基础上，建立了稳定、可 靠的IL-6免疫放射检测方法。

其灵敏度为5 pg/mL，检测范围为5~200 pg/mL。

具有灵敏度高，特异性强，用量少等优点，但同时操作时间长，仪器价格高。

2.1.3 电化学免疫法（Electrochemiluminescence Immunoassay,ECI)
E C I是将免疫技术与电化学检测技术相结合的 一种免疫分析新方法，具有灵敏度高、光信号线性 好、检测范围宽、重复性好等优点。

席杰等人利用将 标本、生物素化的IL-6单克隆抗体和三联吡啶钌标 记的IL-6单克隆抗体反应以形成抗原抗体夹心复合 物，然后与加入的链霉素和亲包被的磁微粒，形成
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链霉亲和素磁颗粒-生物素抗体-抗原-钌抗体复合物，通过磁场洗涤将未结合物冲洗除去，根据三 联吡啶钌在电极上发生的光强度检测样本中IL-6水 平。

该方法的最低检测限为1.5 pg/m L,线性范围为 1.5~5000 pg/m L，准确度为 0.900~1.100,批内变异小于8%，批间变异小于10%。

2.1.4 化学发光免疫分析法（Chemiluminescence immunoassay,CLIA)
C LIA包含两个部分，即免疫反应系统和化学发 光分析系统。

免疫反应系统是将发光物质（在反应剂 激发下生成激发态中间体）直接标记在抗原（化学发 光免疫分析）或抗体（免疫化学发光分析）上，或酶作 用于发光底物，通过测定发光强度的对待测物进行定 量的形式。

C LIA具有灵敏度高、选择性好、检测范 围广等特点。

Lirong L u o等人采用化学发光免疫方 法检测人源IL-6的含量。

IL-6检出限为0.5 pg/mL,检测范围为4~625 pg/mL,临床血清中的添加回收 实验范围为91.5% ~ 109.4%。

2.1.5量子点免疫层析技术
量子点（Q uantum dots,QDs)以其受激发光照射发出荧光的特性本被视为新的理想的免疫标记物。

程云龙等人建立了一种基于量子点标记技术和免疫层析技术的IL-6的检测方法，在 偶联剂碳二亚胺（ED C)和N-羟基琥珀酰亚胺(N-hydroxysuccinimide,NHS )作用下，使 抗IL-6单克隆抗体I(A b l，小鼠）与羧基量子点 (CdSe/Z e S)偶联，制备量子点标记物；以抗IL-6 单克隆抗体II(Ab2,小鼠）作为捕获抗体，建立双 抗体夹心量子点免疫层析法试纸条检测IL-6,灵敏 度为2.0 pg/m L;检测限为0.79 pg/m L,线性范围 为 2.0~5 000 pg/mL。

2.2生物学检测方法
生物学检测是一测定IL-6依赖性细胞株的增值 情况的检测方法，细胞的增值与IL-6的浓度水平呈 比例关系，根据增值情况测得IL-6的浓度。

汪革非 等人根据IL-6依赖细胞株7TD1的特性采用MTT 比色法与X T T方法进行比较检测IL-6的生物学活性，根据吸收值得出对应IL-6的浓度。

X T T法测得样品 活性为 3.48 x1〇6 U m l。

3展望
蛋白质测量技术已相对成熟，免疫学方法和质谱 测量方法已广泛应用于蛋白质的定量检测。

其中肽或 蛋白质的同位素稀释质谱法是一种潜在的计量基准方 法。

但还未有同位素稀释质谱法应用于IL-6定量研 究的报告，同位素稀释质谱法具有准确度高、适用范 围广、灵敏度高旦测量结果可溯源至国际基本单位等诸多优点，是IL-6定量研究的趋势。

作者简介：燕茹（1986-),女，籍贯：山东菏泽，学历：
硕士研究生，职称：工程师，研究方向：蛋白质标准
物质研究。

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综上所述，高校学风建设水平与高校教育价值的 实现程度密切相关。

因此，在高校学风建设过程中，高校应针对学风建设中的具体问题，如高校方面的问 题、学生学习方面的问题等，基于协同创新角度采取 协同创新校规校纪和科学管理、协同创新班风建设和 教风建设、协同创新家校教育等良策，以促进高校学 风建设水平的进一步提高，为促进高校教育价值的实 现奠定良好的基础。

作者简介：张思（1994-），女，籍贯：四川绵阳，学历：硕士研究生，职称：助教，研究方向：思想政治教育。

基金项目：西南石油大学辅导员科研基金项目(2020RW012 )研究成果。

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