cry基因保守序列克隆及其在大肠杆菌Rosetta(DE3)中的表达

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于 ＧＣ— ＭＳ联 用 技 术 的 毛 竹 挥 发 性 次 生
（ 广西林业科 学） ０ ９ ３ （ ： ９ ４ ． ， ０ ，８１ ３ — １ ２ ） ｆ１ ＥＺ 叶舟）ＬＮ ｗｘ 林 文雄 ）Ｃ Ｅ ９Ｙ （ ， Ｉ （ ， Ｈ Ｎ Ｗ
（ 陈伟 ）ｅ ＬＣｈ ｍｉ ｌ ｏ ｏ ｅ ｔ ｎ ， ｔ ｅ ｃ ｍｐ ｎ ｎｓａ ｄ ａ ａｃ
基 金 项 目 “ 一五” 十 国家 科技 支撑 计 划 子课 题 （０ ６ Ａ ９ ｏ ） ２ ０ Ｂ ＤｌＢ ４。
作 者 简 介 刘志明（ ７ 一 ， ， １ １ ）男 黑龙 江明水人 ， ９ 教授 ， 士 ， 博 主要从 事 生物质 材料化 学和 纳米纤 维素功能材 料研 究， － ａ ： ｈｍｎ ｉ ｈ＠１６ Ｅ ｍ ｉ ｚｉ ｉ ｕ ｙ ２ ｌ ｗ ｃｎ。 通 讯 作 者 。 ｏ
代谢产 物分 析） ］Ｅ ｏ ｏ ｃＦ ｒｓ ｅ ｆ ． ｃ ｎ ｍｉ ｏｅ ｔＲ — Ｊ ｓ ａｃ ｅ （ 济 林 研 究 ） ２ １ ， ９ ４： ｅ ｒｈ ｓ 经 ， ０ １ ２ （）
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ｍｅｈ ｄ ｆ 析 法 从 杉 木 油 中 分 离 柏 木 醇 ｔｏ 冻 的 研 究 ）Ｊ． ａ ｇ ｉ ｏ ｅ ｔ ｉｎ ｅ 『］Ｇｕ ｎ ｘ ｒｓｒ Ｓｃｅ ｃ Ｆ ｙ
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毛竹 精 油 和正 己烷 提 取物 的 ＧＣ ＭＳ分析 ．
刘志明 任海青 （． ， １ 东北林业大学材料科学与Ｔ程学院 生物质材料科学与技术教育部 重点实 验室， 黑龙江哈尔 １ ００２ 林业科学研 滨 ５ ４； 中国 ０ ．
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收 稿 日期 ２ １ —３０ ０ ２０ —９
修 回 日期
２ １—４０ ０ ２０ —５
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Ｍｅ ｉ ｎ ｄ ｉ （ ｄ ｉ Ｅ ｉ ｎ ￣南大 学学报 ： ｃｅ ｔ ｏ 自然科 学 版） １ ９ ， ８３： ５ ９ ． ， ９ ７ １ （）９ — ９
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２３ －２ ８． ９４ ３９
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ｃ ｒ 因保 守序列克隆及其在大肠杆菌 Ｒ ｓｔ （ Ｅ ） ｙ基 ｏｅｔ Ｄ ３中的表达 ａ
罗翠 平，李 金华， 谢烨明， 曾万勇 （ 武汉工业学院， 湖北武汉 ４０２） ３０３
摘 要 ［ 目的 ］ ｃ 基因保 守序列进行克隆 ， 对 ｒ ｙ 并使其在大肠杆菌 Ｒ ｓ ｔ Ｄ ３￣进行 表达。［ ｏｅ ａ Ｅ ） ｔ（ 方法 ］ 根据 Ｎ Ｂ 数据库 信息设计引物 序列 ， ＣＩ 采用 Ｐ Ｒ技术从抗虫棉基因组 Ｄ Ａ中扩增出抗虫基 因 ｃ 的保守序列 ， Ｃ Ｎ ｙ ｒ 构建重组载体并转化到大肠杆 菌 Ｒ ｓ ｔ Ｄ ３菌株中 ， ｏｅ ａ Ｅ ） ｔ（ 利用 ｐ Ｅ Ｇ Ｘ原核表达系 统诱 导蛋 白表达 。同时 ， 分析了不 同 ＩＴ Ｐ Ｇ浓度及不同诱导时间对蛋 白表达量的影响 。［ 结果 ］ 扩增 出抗虫基 因 ｃｙ的两段保守序列 ， ｒ 长度分别 为 ３４和 ８ ３ｂ ；ＤＳ Ａ Ｅ检测结果显示 ， ＩＴ ０ ５ ｐＳ Ｐ Ｇ 经 Ｐ Ｇ诱导后重组质粒 ｐ Ｅ ４１０ Ｇ Ｘ ｔ３ ４和 ｐ Ｅ ４ｌ５ Ｇ Ｘ ｔ８３成 功地表达 了大量 Ｇ Ｔ融合蛋 白， Ｓ 分子 量分别 为 ３ 和 ６ ． ｋ ａ与预期结果一致； ９ ２ Ｄ ， ４ 确定了 ＩＴ 最佳诱导浓度为 ０１ ｍ ｏ Ｌ 最佳诱导时间为 ７ ｈ 结论 ］ ＰＧ ． ｍｌ， ５ ／ 为今后检测转 基 因农作物奠定了基础 。 关键词 ＆ 基 因； 保守序列 ； 克隆 ； 原核表达
究院木材工业研究 所 ， 北京 １０ ９ ） ０ ０ １
摘
要 ［ 目的】 分析毛竹精 油和正 己烷提取物的化学组分和得率 ， 寻找潜在价值 的活性化合物。［ 方法冰 蒸 气蒸馏 和正 己烷超声波辅助 分别提取
４个不 同竹龄 毛竹精油和正 己烷提取物 ， 并进行气相 色谱／ 质谱（ ＣＭＳ分析 。结果］结果表明柏木醇（６３ ％）是 ７年毛竹 中部精油 的第一主要挥 Ｇ／ ） ［ ４． ９ 发性成分 ； 苯二甲酸二丁ｉ ５ ． ％ 是 ３ 邻 ￣（ ４ ） 年毛竹 中部正 己烷提取物的第一主要挥 发性成分 ； ９６ 毛竹正 己烷提取 物得率高于精油得率 。 ［ 结论］ 柏木醇 是一种具有潜在价值的活性化合物 。 关键词 毛竹 ； 水蒸气 蒸馏 ； 超声波辅助 ； 己烷 ； 正 气相色谱／ 质谱 （ＣＭＳ Ｇ／ ）
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