转基因食品检测技术探讨_高永欣

分析与检测
转基因技术通过修饰改造生物DNA 成分，对生物体遗传性状进行改变，得到营养价值、性状及品质符合目标的食品。

不同转基因食品检测技术有各自不足及特点，结合检测目标及内容，合理选择检测技术，提高检测准确性及高效性，指导检测工作顺利实施。

转基因食品蛋白质检测及核酸检测技术为以下研究的重点。

转基因食品
通过基因工程，将DNA分子在生物体外插入载体分子，实现物质重组，并转化到寄主细胞中，经过表达形成需要的物质，且稳定遗传下去，称为转基因食品。

美国于20世纪80年代初期研究转基因食品，是应用技术最多的国家。

继美国之后，阿根廷和加拿大大量应用此技术，其中阿根廷约有30%以上大豆播种使用改变基因豆种，加拿大约有50%玉米及大豆播种食用转基因种子。

当前，在世界范围内，约有50个国家进行植物田间转基因试验，且涉及植物较多，约4500种。

现阶段，油菜、大豆、棉花和玉米借助此技术已经实现了大面积商品化种植，而木瓜、西红柿、西葫芦、马铃薯等实现小面积种植。

借助该技术，粮食食品加工特性及食用品质得到改善，发酵食品品质及风味得到明显改善，附加值及营养价值大大提高。

转基因食品蛋白质检测
试纸法
将特异性抗体交联到有颜色物质和试纸条上，特异抗原与抗体互相结合后，与有颜色抗体相互反应，形成三明治机构，且带有颜色，将机构于试纸条上固定，若无抗原，则无颜色。

试纸法适用于初筛及现场检测，方法简便，无需特殊设备仪器。

ELISA
ELISA将酶对底物高效催化反应与
抗体、抗原特异性反应互相结合，利用
酶对底物产生作用，引起显色反应，抗
体与抗原互相结合时，利用荧光反应或
比色反应对GMF进行鉴定。

酶作用显色
与样品抗原含量之间有一定关系，呈正
比。

ELISA不仅能实现样品的定性检测，
也能给予定量分析。

有学者借助此方法，
对传统大豆的加工产品进行检测，测得
Roundup Ready2%大豆CP4 EPSPS蛋白
质。

ELISA检测灵敏性及选择性较强，
商业利用性强，但检测复杂基质时，检
测准确度及准确性受到一定干扰，若外
源基因表达蛋白质经热处理变性或水平
较低，则检测有效性下降。

蛋白质印迹法
此技术结合了显色酶反应灵敏性、
电泳分离能力及抗体特异性，为复杂
混合物特异蛋白质最佳检测方法，灵敏
度1-5ng，广泛用于特异目的蛋白质分
离及检测。

该技术能够确定样品中有无
超过预期限值或低于限值目的蛋白质，
尤其是分析不可溶蛋白质。

有学者对
Roundup Ready大豆CP4合成酶检测时，
运用该技术，检测限105-1%，证实此
技术可有效检测Roundup Ready大豆蛋
白质及原材料产品。

转基因食品核酸检测
多重PCR
此技术对常规PCR的改进，在同
一反应中增加多个或两个目标基因序
列，具有适应性强、可靠性强特点，
检测成本相对较低。

有研究对转基因
食品中多个目标基因序列进行同时检
验，排除假阴性，利用此技术检测转
基因大豆，试验显示，当含量0.15%时，
多重PCR鉴定可靠性较强，提示此方
法具有高度敏感性。

定性PCR
PCR将特定DNA片段作为模板，借
助寡聚核苷酸引物，底物为4种dNTP
（脱氧核苷酸），在耐高温的聚合酶
作用下，利用模板变性及退火、引物
延伸等循环，扩增模板。

一般来说，
转基因细胞的转入成分有目的基因、
启动子、终止子、报告基因，启动子、
终止子为基因表达目之必需。

常用转
基因植物为NOS、CaMV35S，通过PCR
扩增序列，为鉴定食品是否有转基因
成分常用方法。

定量PCR
PCR特异性及敏感性较强，核酸在
食品加工时的变性程度低于蛋白质，
GMF定量PCR包括定量竞争PCR、半
定量PCR、实时荧光定量PCR。

定量竞
争PCR与半定量PCR检测时，面临定
量准确度、假阳性污染两大难题。

有
学者检测转基因大豆Roundup Ready
时，运用实时荧光定量PCR，灵敏度
<0.01%，能够满足检测需要。

电化学发光PCR
电化学方法能产生特殊物质，电生
物质自身之间或与其他物质进一步反
应，形成发光现象。

此方法为电化学
方法、化学发光方法互相结合形成的
技术，首次将双探针杂交、电化学发光、
PCR技术结合到一起，对CaMV35S启动
子进行检测，判定有无转基因成分。

此方法较传统凝胶电泳法优势明显，
操作简便，且检测线性度较宽。

结语
目前，转基因食品趋于市场化发展，
必须建立有效、完善的检测方法，加强
市场监管。

转基因任一环节若出现差错，
均可影响食品安全，故需做好食品检测。

笔者借助相关文献及资料，分析试纸法、
ELISA、蛋白质印迹法、多重PCR、定性
PCR等检测技术，供学者参考。

作者简介：高永欣（1986-），女，
汉族，吉林人，硕士，吉林医药学院，
助教。

研究方向：营养与功能食品。

转基因食品检测技术探讨
□高永欣　刘　敏　王　丹　孙茂成　左丽丽　吉林医药学院DOI:10.16043/ki.cfs.2015.27.051
Sep2015 CHINA FOOD SAFETY 87。