文心兰切花品种南茜的组培生根诱导技术优化

文心兰切花品种南茜的组培生根诱导技术优化
刘燕;祁翔;向立容;王济红
【摘要】In order to establish the root induction technology system of Oncidium in tissue culture, taking rosette buds as materials, the effects of medium, hormone and proportion on root induction was studied. The results showed that adding cytokinin 6-BA and auxin NAA in 1/2 MS could promote root induction. 1/2MS+0. 3 mg/L 6-BA+1. 2 mg/L NAA+ activated carbon 1 g/L was the optimum rooting medium. 40 days after inoculation, the rooting rate was 98. 30%, number of roots was 3~4, root length was 0. 5~2. 5 cm and the average plant height was 3. 0 cm. The growth of buds was uniform and there were no lateral bud and protocrom-like bodies at the base of buds.%为了建立南茜文心兰切花品种组培苗的生根优化技术体系,以该品种继代培养的丛生芽为材料,研究了培养基种类、激素种类和激素浓度配比对其生根诱导的影响.结果表明:1/2MS培养基添加6-BA 细胞分裂素和NAA生长素有利于南茜文心兰的生根诱导,其最佳生根诱导培养基为1/2MS+0.3 mg/L6-BA+1.2 mg/L NAA-活性炭1 g/L,丛生芽接种40 d的生根率为98.30％,每株生根3～4条,根长0.5～2.5 cm,芽苗生长整齐,平均株高约3.0cm,芽苗基部无侧芽和类原球茎产生.
【期刊名称】《贵州农业科学》
【年(卷),期】2013(041)002
【总页数】3页(P39-41)
【关键词】文心兰;丛生芽;根诱导;技术优化
【作者】刘燕;祁翔;向立容;王济红
【作者单位】贵州省生物研究所,贵州贵阳550009;贵州省生物研究所,贵州贵阳550009;贵州省生物研究所,贵州贵阳550009;贵州省生物研究所,贵州贵阳550009
【正文语种】中文
【中图分类】S682.31
文心兰（Oncidium）是兰科中的大属之一，又名舞女兰、跳舞兰，原产于中南美洲和北美洲南部［1］，因其花形独特而具有较高的观赏价值，是洋兰类新宠，被插花界誉为五美人之一，且以切花消费为主，主要产地为泰国、新加坡和我国台湾，而消费市场主要集中于美国、日本，近年来备受国际花卉市场青睐。

南茜（OncidiumGower Ramsey）文心兰是目前市场畅销兰切花品种之一［2］，国
内文心兰切花生产主要集中在海南省，盛花期主要集中在9—11月。

目前，春节
文心兰切花品种较紧缺［2－5］，一方面是自然气候条件对秋季花芽分化有影响，花期较难调控；另一方面是我国文心兰种植多以分生繁殖为主，而长期进行分生繁殖其成花品质下降，因此，进行工厂化组培繁殖是较有效的途径。

目前，关于南茜［6－7］、金西［8］、星战［9］和蜜糖文心［10］等文心兰品种的组培育苗技
术已有部分报道，而针对南茜文心兰品种的组培育苗生根研究报道较少，仅有朱根发等［6］进行了文心兰脱毒快繁技术研究，其结果表明，在MS培养基中添加IAA有益于南茜生根，但生根率仅为85%；彭晓明等［7］的研究表明，在1／
2N6培养基中同时添加0.2mg／L的6－BA、0.2mg／L NAA和100 g／L的香
蕉浆，南茜生根诱导率可达100%，但是伴随有较多原球茎增殖，未达到规模化生根培养基的标准。

因此，在不添加任何有机物情况下，对南茜的丛生芽进行诱导生根的研究尚未见报道。

为此，笔者以南茜文心兰继代培养的丛生芽为材料，研究了培养基种类、激素种类和激素浓度配比对其生根诱导的影响，以期为南茜规模化培育提供技术参考。

1 材料与方法
文心兰继代培养丛生芽，由贵州省生物研究所提供。

1.2 方法
1.2.1 适宜激素组合筛选以常用生根培养基1／2MS为基本培养基；用0.5mg／L 的6－BA、KT和TDZ细胞分裂素与0.6～1.0mg／L的NAA和IBA生长素进行
均衡组合试验，筛选适宜生根激素组合。

1.2.2 适宜培养基筛选以 MS、1／2MS和1／4MS为基本培养基，以6－BA （0.5mg／L）和 NAA（0.2～1.0mg／L）进行均衡组合试验，筛选适宜生根的培养基。

1.2.3 激素组合的适宜浓度筛选为降低生根培养过程中的原球茎分化率，提高生根率，以1／2MS和最佳激素组合6－BA＋NAA进行激素浓度水平的微调节试验，筛选最佳生根诱导培养基配方。

1.3 试验设计
每种试验按要求各处理均接种10株丛生芽，3次重复。

40d后统计丛生芽的生根情况，计算生根率（生根率＝丛生芽生根株数／10）。

1.4 培养条件
以上所有培养基均加入蔗糖20g／L、琼脂8g／L和活性炭1g／L，pH 均为5.8，光照时间14h／d，光照强度1 500～2 000lx，温度（25±2）℃。

1.5 数据处理
采用SAS分析系统和Excel进行数据统计分析。

2 结果与分析
2.1 激素对生根诱导的影响
由表1可知，3种细胞分裂素（6－BA，KT，TDZ）与2种生长素（NAA和IBA）各处理组合间的丛生芽生根率差异显著。

其中，生长素NAA处理的整体效果优于IBA处理，NAA处理与3种细胞分裂素组合的平均生根率为49.42% 而IBA与3
种细胞分裂素组合的平均生根率为39.82%。

说明，NAA较IBA更适宜南茜的生
根诱导。

细胞分裂素TDZ与2种生长素各处理组合的效果均较差，生根率最高仅为33.3%；细胞分裂素6－BA和KT与1.0 mg／L NAA或IBA组合处理间的差
异不显著，生根率为68.3%～88.3%；总体以0.5mg／L 6－BA＋1.0mg／L
NAA组合的生根效果最好，生根率为88.3%，因而6－BA与 NAA组合比 KT、TDZ与NAA组合更适宜用于南茜丛生芽生根诱导。

2.2 培养基对生根诱导的影响
由表2看出，在0.5mg／L 6－BA浓度水平下，MS、1／2MS和1／4MS培养
基与1.0mg／L NAA各组合的生根率均较与0.6mg／L NAA各组合高，其中，1／2MS＋0.5mg／L 6－BA＋1.0mg／L NAA 组合丛生芽的生根率最高，为
91.70%，且与所有组合的生根率差异达极显著。

3种培养基对根系萌发和根长生
长的影响不大，平均每株长根2～4条，根长为0.5～1.5cm（表2）。

表1 不同激素组合对南茜文心兰丛生芽的生根诱导情况Table 1 Root induction status of Oncidiumwith different combination of hormone注：同列不同大
写字母表示在0.01水平上差异显著（下同）。

Note：Different letters in the same column indicated the significance of difference at 0.01leve1.The same below.细胞分裂素0.5／（mg／L）Cytokinin生长素／（mg／L）Auxin
生根率／%Rooting rate生根情况Rootingstatus NAA TDZ 0.6 21.7±0.044DE
根长0.2～0.5cm，0～1条／株0.8 28.3±0.101CDE 根长0.2～0.5cm，0～1条／株1.0 33.3±0.017CDE 根长0.2～0.5cm，0～1条／株KT 0.6
33.3±0.088CDE 根长0.2～0.5cm，0～1条／株0.8 50.0±0.104BCD 根长0.5～1.0cm，1～2条／株1.0 68.3±0.101AB 根长0.5～1.5cm，3～4条／株6－BA 0.6 53.3±0.073BC 根长0.5～1.0cm，1～2条／株0.8 68.3±0.130AB 根长
0.5～1.5cm，3～4条／株1.0 88.3±0.073A 根长0.5～1.5cm，3～4条／株IBA TDZ 0.6 6.7±0.044E 根长0.2～0.5cm，0～1条／株0.8 20.0±0.087DE 根长0.2～0.5cm，0～1条／株1.0 28.3±0.088CDE 根长0.2～0.5cm，0～1条／株KT 0.6 30.0±0.116CDE 根长0.2～0.5cm，0～1条／株0.8 65.0±0.116AB 根长0.5～1.0cm，1～2条／株1.0 70.0±0.132AB 根长0.5～1.0cm，2～3条／株6－BA 0.6 26.7±0.073CDE 根长0.2～0.5cm，0～1条／株0.8 41.7±0.088BCD 根长0.5～1.0cm，1～2条／株1.0 70.0±0.104AB 根长0.5～1.5cm，3～4条／株
表2 添加不同浓度激素培养基的南茜文心兰丛生芽的生根情况Table 2 Rooting status of Oncidiumon media added with various proportions of hormone 培养基Medium status MS 0.5 0.6 63.3±0.044C 根长0.5～1.0cm，2～3条／株6－BA／（mg／L）NAA／（mg／L）生根率／%Rooting rate生根情况Rooting 1.0 66.7±0.044BC 根长0.5～1.0cm，2～3条／株1／2MS 0.5 0.6 71.7±0.044BC 根长0.5～1.0cm，2～3条／株1.0 91.7±0.033A 根长0.5～1.5cm，3～4条／株1／4MS 0.5 0.6 66.7±0.017BC 根长0.5～1.0cm，2～3条／株1.0 76.7±0.044B 根长0.5～1.0cm，2～3条／株
表3 不同激素浓度组合的南茜文心兰丛生芽生根情况Table 3 Rooting status of Oncidiumon media added with different combinations of hormones注：同列不同字母表示在0.05水平上差异显著。

Note：Different letters in the same
column indicated the significance of difference at 0.05leve1.6－BA／（mg
／L）status 0.3 0.8 85.0±0.577a 根长0.5～1.5cm，3～4条／株，NAA／（mg ／L）生根率／%Rooting rate生根情况Rooting无侧芽和类原球茎产生1.0 91.7±1.202a 根长0.5～2.0cm，3～4条／株，无侧芽和类原球茎产生1.2
98.3±0.333a 根长0.5～2.5cm，3～4条／株，无侧芽和类原球茎产生0.5 0.8 90.0±1.155a 根长0.5～1.5cm，3～4条／株，有2～3侧芽或类原球茎1.0
93.3±0.882a 根长0.5～1.5cm，3～4条／株，有2～3侧芽或类原球茎1.2
98.3±0.333a 根长0.5～2.0cm，3～4条／株，有2～3侧芽或类原球茎
2.3 激素组合适宜浓度的确定
接种40d时观察发现，不同激素浓度处理间的丛生芽生根率差异不显著（表3），生根率为85.00%～98.30%。

说明，南茜文心兰适宜的6－BA细胞分裂素浓度为0.3～0.5mg／L，NAA生长素的浓度为0.8～1.2mg／L时，细胞分裂素和生长素浓度对丛生芽生根诱导的影响不大。

其中，0.3mg／L 6－BA与0.8～1.2mg／L NAA所有处理芽苗的基部都未见侧芽和类原球茎分化，0.5mg／L 6－BA与
0.8～1.2mg／L NAA所有处理均有20%～30%芽苗根系分化2～3个侧芽或类原球茎。

综合表现以0.3mg／L 6－BA＋1.2mg／L NAA 的芽苗生长最好，平均苗
高3.5cm，每株长根3～4条，根长0.5～2.5cm，没有侧芽和类原球茎产生。

3 结论与讨论
1）研究结果表明，1／2MS培养基添加6－BA细胞分裂素和NAA生长素较有利于南茜文心兰的生根诱导，其最佳生根诱导培养基为1／2MS＋0.3 mg／L 6－BA ＋1.2mg／L NAA＋活性炭1g／L；丛生芽接种40d的生根率为98.30%，每株
生根3～4条，根长0.5～2.5cm，芽苗生长整齐，平均高约3.0cm，芽苗基部无
侧芽和类原球茎产生。

该培养基配制简便，适于规模化操作。

2）大部分研究结果［6，8－18］表明，培养基中单独添加生长素NAA或IBA或
IAA均能诱导文心兰生根，但其生根质量多不佳，NAA诱导出的根系较细，IAA
和IBA诱导出的根系容易结合在一起［18］，均不利于移栽；少量研究用6－BA
与NAA组合也能诱导文心兰生根［7］，但诱导效果不理想。

本研究结果表明，
在生长素中添加细胞分裂素更有利于南茜文心兰的生根，并能提高其生根质量，同时6－BA较KT和TDZ细胞分裂素、NAA较IBA生长素更适宜南茜文心兰丛生
芽的生根诱导，二者组合培养的丛生芽生根率与大部分激素组合培养的丛生芽生根率差异显著，而且根较粗壮，易分离，适宜移栽。

3）MS系列培养基较适于文心兰生根诱导培养，但不同品种对培养基无机盐浓度
的要求不同［6，8－13，15－18］。

朱根发等［6］研究表明，在 MS 培养基中添加1.0mg／L IAA有利于丛生芽生根，但生根率仅为 85%；彭晓明等［7］用 1／2N6＋0.2mg／L 6－BA＋0.2mg／L NAA＋100g／L香蕉泥进行壮苗生根培养，70d后生根率达100%，但存在侧芽或类原球茎增殖，芽苗不整齐现象。

本研究也发现，添加不同浓度无机盐的各处理MS培养基的丛生芽生根诱导率差异显著，
并以1／2MS培养基的生根诱导效果最好。

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