MTT法又称MTT比色法是一种检测细胞存活和生长的方法其检测原理
合集下载
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
MTT法又称MTT比色法是一种检测细胞存活和生长的方
法其检测原理
MTT法,即3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑(MTT)比色法,是一种常用的检测细胞存活和生长的方法。
MTT法的基本原理是通过检测细胞内的线粒体活性来评估细胞的存活
状况和生长情况。
线粒体是细胞内能量产生中心和细胞呼吸的主要场所,
其功能完整与否直接影响细胞的生活能力和活动状态。
MTT法利用MTT试
剂与细胞内的线粒体还原酶作用产生可溶性的蓝紫色产物,通过比色测定
可间接反映细胞数量和细胞代谢活性。
MTT法的操作步骤如下:
1.培养细胞:将需要检测的细胞在细胞培养板中培养至合适的生长期,使细胞处于活跃生长状态。
2.处理试样:根据实验的需要,对细胞进行不同处理,例如添加药物,感染病毒等。
3.加入MTT试剂:将MTT试剂以适当的浓度加入细胞培养板的培养液中,并保持细胞在适宜的温度和环境条件下培养一段时间,通常为2-4小时。
4.溶解MTT产物:将培养液完全移除,加入溶解剂如二甲基亚砜(DMSO),使产生的蓝紫色MTT产物完全溶解。
5. 比色测定:将溶解后的MTT产物转移至96孔板或比色皿中,利用
分光光度计在570 nm波长下测定吸光度值。
吸光度值的高低代表了细胞
的存活状况和生长活性。
MTT法的优点在于操作简单、结果读取方便、对细胞破坏小等。
同时,MTT法可以应用于不同类型的细胞,包括哺乳动物细胞、微生物细胞等。
然而,MTT法也存在一定的局限性,比如不能直接反映细胞的精细结构和
功能等。
总之,MTT法是一种常用的检测细胞存活和生长的方法,利用线粒体
活性作为指标,通过MTT试剂的比色测定来间接评估细胞的数量和代谢活性。
在细胞研究、肿瘤学和药物筛选等领域具有广泛的应用前景。