细胞融合实验报告

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细胞融合实验报告

一．实验目的1.了解并掌握细胞融合的方法2.了解细胞融合技术及其在生命科学中所起的作用3.掌握化学融合法，了解电融合法及CRY-3细胞融合仪的使用二．实验原理两个或两个以上的细胞合并成一个双核或多核细胞的现象称为细胞融合，也称细胞杂交，在自然情况下的受精过程即属这种现象。

诱导细胞融合的主要方法有：病毒诱导融合，化学融合剂诱导融合和电融合。

1. 病毒诱导融合：有许多种类的病毒能介导细胞融合，最常用的是灭活的仙台病毒（HVJ），为RNA病毒。

病毒诱导细胞融合的过程有：首先是细胞表面吸附许多病毒粒子，接着细胞发生凝集，几分钟至几十分钟后，病毒粒子从细胞表面消失，而就在这个部位邻接的细胞的细胞膜融合，胞浆相互交流，最后形成融合细胞。

2. 化学融合剂诱导融合：化学融合剂主要有高级脂肪酸衍生物、脂质体、钙离子、水溶性高分子化合物、水溶性蛋白质和多肽，其中最常用的是聚已二醇（PEG）。

PEG用于细胞融合至少有两方面的作用：①可促使细胞凝结；②破坏互相接触处的细胞膜的磷脂双分子层，从而使相互接触的细胞膜之间发生融合，进而细胞质沟通，形成一个打的双核或多核融合细胞。

3. 电融合：是指细胞在电场中极化成偶极子，并沿着电力线排列成串，然后用高强度、短时程的电脉冲击穿细胞膜而导致细胞融合。

主要过程包括：1.制备原生质体：微生物及植物细胞有坚硬的细胞壁，需要用酶将其降解，而动物细胞无需要去壁处理。

2.诱导细胞融合：两种亲本细胞的悬浮液调到一定密度，滴入高浓度的聚乙二醇（PEG）诱导融合，或用物理方法如电刺激促进融合。

3.筛选杂合细胞：在特定的筛选培养基上，让杂合细胞有选择地生长，除去其他未融合的细胞。

细胞融合技术在基因定位、基因表达产物、肿瘤诊断核治疗、生物新品种培育及单克隆抗体技术等领域有着非常广泛的应用前景。

单克隆抗体技术就是通过细胞融合技术发展起来的，在生命科学研究核应用方面产生了重大影响。

三．实验结果与分析讨论融合细胞的观察实验中发现大部分的融合都是3个细胞的融合，两个相互融合的很少基本没有找到。

细胞融合实验报告

细胞融合实验报告细胞融合是一种重要的生物学实验技术，通过将两个不同细胞的质膜融合在一起，使它们的细胞质混合，从而产生新的细胞。

本实验旨在探究细胞融合对细胞生长和功能的影响，为细胞生物学研究提供实验依据。

首先，我们选择了两种不同类型的细胞进行融合实验，一种是小鼠胚胎成纤维细胞，另一种是人类胃腺癌细胞。

这两种细胞具有不同的形态和生长特性，我们希望通过它们的融合，观察新细胞的特性变化。

实验过程中，我们采用了聚乙烯醇融合剂将两种细胞进行融合处理，然后将融合后的细胞进行培养。

在培养的过程中，我们观察到融合后的细胞呈现出明显的形态变化，细胞质内出现了新的结构，并且细胞的生长速度也有所增加。

接着，我们对融合后的细胞进行了功能性实验。

结果显示，融合后的细胞在细胞分裂和增殖方面表现出了更活跃的特性，且对外界环境的适应能力也有所提高。

这表明，细胞融合可以增强细胞的生长和功能，为细胞的应用研究提供了新的可能性。

在实验的过程中，我们还发现了一些有趣的现象。

比如，融合后的细胞在形态上呈现出了中间态，既有小鼠胚胎成纤维细胞的形态特征，又具有人类胃腺癌细胞的特性。

这为我们深入研究细胞融合的机制提供了有益的线索。

综合以上实验结果，我们得出结论，细胞融合可以显著影响细胞的形态和功能，使其表现出新的特性。

这对于细胞生物学的研究具有重要意义，也为细胞治疗和再生医学领域提供了新的思路和方法。

总之，本实验通过对细胞融合的观察和分析，揭示了细胞融合对细胞生长和功能的影响，为细胞生物学领域的研究提供了新的启示。

希望本实验结果能够为相关领域的研究工作提供参考，推动细胞融合技术的进一步应用和发展。

细胞融合实验报告

细胞融合实验报告
本实验旨在探究细胞融合对细胞生长和功能的影响，为了达到这一目的，我们进行了一系列的实验操作和数据分析。

在实验中，我们选取了两种不同类型的细胞进行融合，并观察了融合细胞的形态特征、生长情况以及功能表现。

首先，我们以显微镜观察了融合细胞的形态特征。

结果显示，融合细胞的形态呈现出明显的异质性，既有细胞A的特征，也有细胞B的特征，这表明细胞融合后细胞的形态会发生明显的改变，产生新的细胞类型。

其次，我们进行了细胞生长曲线的测定。

通过对融合细胞和单一细胞的生长情况进行比较，我们发现融合细胞的生长速度明显快于单一细胞，这说明细胞融合可以促进细胞的生长和增殖。

随后，我们对融合细胞的功能进行了评估。

实验结果显示，融合细胞在某些功能上表现出了明显的增强，例如对外界刺激的响应能力和分泌功能。

这表明细胞融合可以提高细胞的功能表现，使其具有更强的适应能力和生存竞争力。

最后，我们对融合细胞进行了基因表达谱的分析。

结果显示，融合细胞的基因表达谱发生了明显的改变，一些基因的表达水平显著上调或下调，这说明细胞融合会引起基因表达的重新编程，从而影响细胞的功能和特性。

综上所述，本实验结果表明，细胞融合对细胞的形态、生长和功能都产生了明显的影响，这为我们进一步探究细胞融合的机制和应用提供了重要的实验依据。

希望通过我们的努力，能够为细胞融合领域的研究和应用做出更多的贡献。

细胞融合实验报告讨论

一、实验目的本实验旨在通过细胞融合技术，探讨细胞融合的基本原理、方法及其应用。

通过实验，观察细胞融合过程中细胞的行为与变化，了解不同细胞类型融合的差异，以及细胞融合在生物技术领域的应用前景。

二、实验原理细胞融合是指两个或多个细胞通过质膜融合形成单个双核或多核细胞的现象。

细胞融合技术在生物技术、医学、生物工程等领域具有广泛的应用前景。

本实验采用聚乙二醇（PEG）作为细胞融合的诱导剂，通过改变细胞膜的通透性，使细胞发生融合。

三、实验材料与方法1. 实验材料（1）细胞：小鼠胚胎成纤维细胞、鸡红细胞、人骨髓间充质干细胞等。

（2）试剂：聚乙二醇（PEG）、Hanks液、生理盐水、双蒸水等。

（3）器材：显微镜、离心机、水浴箱、离心管、滴管、载玻片、盖玻片等。

2. 实验方法（1）细胞培养：将小鼠胚胎成纤维细胞、鸡红细胞、人骨髓间充质干细胞等细胞分别培养于DMEM培养基中，置于37℃、5%CO2培养箱中。

（2）细胞融合：将细胞以1×10^6个/mL的浓度接种于培养皿中，待细胞生长至约70%融合时，加入一定浓度的PEG溶液，使细胞发生融合。

（3）观察与检测：通过显微镜观察细胞融合情况，采用流式细胞仪检测融合细胞的DNA含量，分析细胞融合的效果。

四、实验结果1. 显微镜观察在显微镜下，观察到细胞融合现象明显，部分细胞出现双核或多核现象。

2. 流式细胞仪检测流式细胞仪检测结果显示，融合细胞的DNA含量与正常细胞相似，说明细胞融合成功。

五、讨论1. 细胞融合的基本原理细胞融合是细胞生物学领域的一个重要研究方向。

细胞融合的基本原理是：通过改变细胞膜的通透性，使细胞发生质膜融合，进而实现细胞内容物的相互交换。

本实验采用PEG作为细胞融合的诱导剂，其作用机理是改变细胞膜的通透性，使细胞内物质外泄，进而促进细胞融合。

2. 不同细胞类型融合的差异本实验观察到小鼠胚胎成纤维细胞、鸡红细胞、人骨髓间充质干细胞等细胞均能发生融合。

动物细胞融合实验实验报告

动物细胞融合实验实验报告
实验目的：1、了解动物细胞融合的常用方法
2、学习化学融合的基本操作过过程
3、观察动物细胞融合过程中的细胞行为和变化
实验材料：鸡血红细胞、50%PEG溶液、0.85%氯化钠溶液、显微镜、离心机、载玻片、盖玻片等
实验原理：聚乙二醇（PEG）能够改变细胞膜脂质分子的排列，在去除这些物质之后，细胞膜趋向于恢复原有的有序结构。

在恢复过程中相接触的细胞由于接口处脂质双分
子层的互相亲和与表面张力，细胞膜融合，胞质流通，发生融合。

实验步骤：1、取鸡血，离心后去除上清液，以0.85%氯化钠溶液制成5%~10%的悬液
2、加入GKN液4ml，混匀
3、加入14滴PEG液，静置3~5min后混匀，放于显微镜下观察
实验结果：显微镜下可观察到有些细胞发生质膜融合
分析与讨论：细胞融合的应用有微生物原生质体融合构成新菌株、利用原生质体融合和培养技术培育新植物、细胞杂交瘤技术与单克隆抗体、用于基因定位和绘制人类基因
图谱、用于生产树突状细胞抗肿瘤疫苗、用于动物育种、用于细胞疗法等。

细胞融合实验报告

聚乙二醇介导的细胞融合2012年2月19星期一陈倩倩（118627140313）同作者：郑梦璐谢雨后赵松1、文摘细胞能不受种属的局限可实现种间生物体细胞的融合,使远缘杂交成为可能,因而是改造细胞遗传物质的有力手段。

它的意义在于从此打破了仅仅依赖有性杂交重组基因创造新种的界限,扩大了遗传物质的重组范围。

但融合后获得的杂种细胞具有染色体异倍性,致使细胞株的遗传性不稳定、植株不育性、畸形、生育迟缓等不符合育种要求的性状出现,直接利用杂种细胞作育种材料目前还有许多障碍。

细胞融合技术避免了分离、提纯、剪切、拼接等基因操作,在技术和仪器设备上的要求不像基因工程那样复杂,投资少,有利于广泛开展研究和推广,有着重大的实践意义,正得到科学界的日益重视。

自从20世纪70年代Kao和Michayluk用聚乙二醇( PEG, polyethyleneglycol) 诱导大麦、大豆等植物原生质体融合后PEG 法诱导细胞融合以其容易制备、活性稳定、不需要特别的仪器设备、操作简便等优点, 被普遍地应用于生物、遗传、医药等研究领域. 高体积分数、高相对分子质量的PEG会对细胞产生毒性,是限制其被广泛应用的瓶颈, 此外,由于该方法涉及的影响因素较多, 进一步加大了获得理想细胞融合率的难度.本实验主要研究PEG的浓度和细胞浓度对细胞融合率的影响。

2、背景介绍细胞融合现象最初是在动物细胞中发现的。

1958年日本学者阅田善雄用紫外光灭活的仙台病毒在体外诱导艾氏腹水红纲胞相互融合。

1965年他和Harris等在此基础上各自分别采用灭活的仙台病毒,诱导产主了第一个种间融合并培养成活。

一年后Yerganzan又进一步使用仙台病毒获得了能够增殖的杂种细胞。

后来Littlefield 用缺陷型细胞HGPRT-XTK-细胞杂交,用HAT 选择培养基选出杂种细胞,开创了细胞工程的新纪元,继而推动了整个生物工程的发展。

1975年英国科学家Milestein 和Kohler在体细胞杂交基础上创立了B淋巴细胞杂交瘤技术,他们将在体外不能长期生存的经绵羊红细胞免疫过的小鼠脾细胞（B淋巴细胞）与在体外能迅速增殖的小鼠骨髓溜细胞在聚乙二醇（PEG）或汕台病毒的作用下融合而产生杂交瘤细胞,所得杂交瘤细咆承袭了两种亲代细胞的遗传特性,既保存了瘤细胞在体外迅速增殖传代的能力,又继承了免疫细胞合成和分泌的能力,即能分泌抗绵羊红细胞的抗体。

PEG促细胞融合实验报告

四川大学实验报告题目：PEG促细胞融合一．实验目的:1.掌握细胞融合的方法2.学习使用PEG促进细胞融合的方法和步骤二．实验原理1.细胞融合：在自然条件下或用人工方法（生物的、物理的、化学的）使两个或两个以上的细胞合并形成一个细胞的过程。

由于体外培养的细胞很少会发生自发融合融合频率?4?6之间，因此要采用生物、化学或物理的方法人为地促使细胞10融合。

10大约在 -2.促进细胞融合的方法a)生物方法：病毒（Sendai virus，Newcastle disease virus，Vaceine virus）b)化学方法：聚乙二醇、盐类融合剂、二甲亚砜（DMSO）、甘油-醋酸酯、油酸盐、脂质、Ca2+配合物等。

PEG相对分子质量在200-6000均可用作细胞融合剂。

普遍认为聚乙二醇分子能改变各类细胞的膜结构，使两细胞接触点处质膜的脂类分子发生疏散和重组，由于两细胞接口处双分子层质膜的相互亲和以及彼此的表面张力作用，从而使细胞发生融合。

在众多的化学试剂中，PEG应用最为广泛，因PEG液比病毒更易制备和控制、活性稳定、使用方便、而且促进细胞融合的能力更强。

c)物理方法：电融合:电处理融合法是20世纪80年代发展起来的细胞融合技术，是融合率大为提高。

电脉冲作用时引起膜结构局部扰乱，出现小孔洞。

而相对的脂双层间分子在范德华力作用下，形成脂分子桥。

由于连接处的细胞膜表面曲率大，处于高张力状态，在热力学上是不稳定的，所以最终导致两细胞逐渐融合成一个圆形的大球状细胞。

与ⅣG法比较，电融合法融合率高：重复性强：诱导仅发生在质膜接触部位，对细胞或原生质体伤害小：融合是在同步状态下进行，活细胞数目多；装置精巧，方法简单，可在显微镜下观察或录象融合过程：免去PEG诱导后的洗涤过程，诱导过程可控制性强。

三．实验材料及设备1.实验材料：a)50%PEG混合液1 / 7四川大学实验报告b)鸡红细胞悬液c)生理盐水d)Hanks溶液2.实验设备：a)普通光学显微镜b)载玻片若干，注射器c)酒精灯、恒温水浴锅d)离心管若干、吸水纸、滴管、剪刀、白瓷板等四．实验方法及步骤1.制取鸡血红细胞悬液2.取细胞悬液1mL，移入10mL离心管，加入4mL0.85%生理盐水混匀。

细胞融合实验报告

细胞融合实验报告细胞融合是一项重要的生物学实验，通过将两个或更多不同种类的细胞融合在一起，可以产生具有新特性和功能的细胞。

这项实验被广泛应用于生物技术领域，如基因工程和医药研究。

本篇文章将介绍细胞融合实验的原理、方法以及实验结果的分析。

1. 实验原理细胞融合实验的原理基于细胞膜的特性。

细胞膜是一个由脂质双层组成的结构，它具有选择性通透性，可以控制物质的进出。

当两个细胞膜相接触并施加足够的压力时，膜上的脂质双层可以融合在一起，形成一个新的融合细胞。

融合细胞中的细胞质和细胞核会混合在一起，进而导致基因和特性的交流和融合。

2. 实验步骤细胞融合实验通常包括以下几个步骤：(1) 细胞培养：融合实验需要选择要融合的细胞类型。

这些细胞可以来自同一物种，也可以来自不同物种。

首先，我们需要将这些细胞分别培养在适宜的培养基中，使它们保持健康和繁殖能力。

(2) 细胞收集：当培养细胞达到一定数量时，我们可以用细胞消化酶将其从培养器中收集出来。

这些细胞将会成为细胞融合实验的实验材料。

(3) 细胞融合：细胞融合可以通过化学物质或电脉冲等方式实现。

化学物质可以使细胞膜变得亲和，从而促进融合。

电脉冲则可以在短时间内破坏细胞膜，使融合发生。

在实验中，我们可以选择适合的方法进行细胞融合。

(4) 融合细胞培养：融合细胞在培养基中继续培养。

这个过程中，我们可以观察和记录细胞的生长和分化状况。

(5) 实验结果分析：通过观察和比较融合细胞与原始细胞的差异，我们可以得出实验结果和结论。

3. 实验结果与讨论在细胞融合实验中，我们可以观察到融合细胞和原始细胞在形态、功能和特性上是否有区别。

例如，当我们融合两种草莓品种的细胞时，发现融合细胞中既有母本细胞的特性，又有父本细胞的特性。

这表明细胞融合可以导致基因和特性的交流和融合，进而产生具有新特性的细胞。

细胞融合还可以应用于医药研究领域。

通过将人类细胞融合在小鼠胚胎细胞中，科学家们可以研究人类疾病的发生机制，寻找新的治疗方法。

细胞生物计划实验报告

实验名称：细胞骨架观察与细胞融合实验一、实验目的1. 掌握制作植物细胞骨架装片的方法。

2. 在显微镜下观察植物细胞的骨架结构，对微管、微丝、中间丝进行识别和区分。

3. 了解细胞融合的原理和过程，初步掌握利用PEG介导动物细胞融合的实验技术。

二、实验原理1. 细胞骨架是细胞内的一种网状结构，由微管、微丝和中间丝组成，对维持细胞形态、细胞运动、细胞分裂等生命活动具有重要意义。

2. 细胞融合是指两个或两个以上的细胞合并成一个具有双核或多核细胞的过程。

化学融合方法一般使用聚乙二醇（PEG）诱导细胞在体外进行融合。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 植物细胞（如洋葱表皮细胞）- 动物细胞（如小鼠成纤维细胞）- 聚乙二醇（PEG）- PBS缓冲液- 联苯胺- 碘液- 显微镜- 载玻片、盖玻片、镊子、滴管、吸水纸等2. 实验仪器：- 显微镜- 超净工作台- 离心机- 恒温培养箱四、实验步骤1. 制作植物细胞骨架装片：a. 将洋葱表皮细胞制成悬液，滴加于载玻片上。

b. 将盖玻片轻轻覆盖在细胞悬液上，用吸水纸吸取多余液体。

c. 滴加稀碘液，用吸水纸从盖玻片另一侧吸引，使染液浸润标本的全部。

d. 将载玻片放入显微镜下观察。

2. 细胞融合实验：a. 将小鼠成纤维细胞制成悬液，滴加于载玻片上。

b. 将盖玻片轻轻覆盖在细胞悬液上，用吸水纸吸取多余液体。

c. 将PEG溶液滴加于盖玻片上，静置5分钟。

d. 将载玻片放入显微镜下观察。

3. 细胞中过氧化物酶的显示：a. 将骨髓细胞制成悬液，滴加于载玻片上。

b. 将盖玻片轻轻覆盖在细胞悬液上，用吸水纸吸取多余液体。

c. 滴加联苯胺处理标本，观察细胞内过氧化物酶的反应。

4. 细胞凋亡的形态学检测与观察：a. 将细胞悬液制成涂片，滴加碘液染色。

b. 将涂片放入显微镜下观察细胞凋亡的形态学特征。

五、实验结果与分析1. 植物细胞骨架观察：a. 显微镜下观察到洋葱表皮细胞的细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核、液泡、叶绿体等结构。

细胞融合实验报告

细胞融合实验报告实验目的用化学方法诱导牛蛙红细胞融合并观察实验原理1.相关概念细胞融合：两个或多个细胞自然或经人工诱导而合并成单个细胞的过程，涉及质膜融合，核膜融合、细胞器以及各种胞质成分的混合。

人工诱导细胞融合一般另称作“细胞杂交”。

依据融合的细胞基因型分类：同种融合（基因型相同的细胞进行融合）、异种融合（来自不同基因型的细胞进行融合）根据自发或诱导处理分类：自发细胞融合（在未施加任何诱导条件的情况下所发生的细胞融合现象）、诱发融合（诱导处理才能融合）2.体外细胞融合方法生物方法（病毒，仙台病毒法）化学方法（聚乙二醇PEG）物理方法（电场诱导融合法，电转仪）3.聚乙二醇（PEG）法优点：易得，用法简单，融合效果稳定聚乙二醇（PEG）结构为：HOH2C(CH2OCH2)n CH2OH，分子量大于200小于6000者均可用作细胞融合剂。

通常用分子量低于1000的PEG作融合剂最好，50％PEG溶液能产生最多杂交细胞PEG经高压灭菌后，与温热的Engle氏液混合PEG浓度以W/W计；如将10g PEG与10mlEagLe氏液混合（假定1ml Eagle氏液为1g 重)，即成50％PEG溶液PEG溶液在pH=8.0时细胞融合率最高4.PEG诱导细胞融合原理PEG具有强烈的吸水性以及凝聚和沉淀蛋白质的作用细胞混合液中加入PEG，细胞膜脂分子排列发生改变，细胞发生凝集；在稀释和除去PEG时，质膜恢复原有的有序结构，在恢复过程中即可诱导相接触的细胞发生融合5.红细胞计数方法血细胞计数板规格0.10mm1/400mm2红细胞计数：计数小方格（红色R区域）细胞计数样液细胞浓度=小方格平均细胞数/0.004mm36.融合率计算融合率=发生融合的细胞核数/所有细胞核数×100%高倍镜下随机计数200个细胞（包括融合的与未融合的细胞），以融合细胞（含两个或两个以上的细胞核的细胞）的细胞核数除以总细胞核数（包括融合与未融合的细胞核）即得出融合率。

细胞生物学实验报告——动物细胞融合

细胞生物学实验报告——动物细胞融合实验目的：通过动物细胞融合实验，研究细胞融合对细胞形态和功能的影响。

实验原理：动物细胞融合是将两个或多个不同细胞融合在一起，形成一个新的细胞。

这种细胞融合可以通过化学物质、电融合或病毒介导等方式实现。

在本实验中，我们将使用化学方法进行细胞融合。

实验材料：1.小鼠胚胎纤维化细胞2.小鼠癌细胞3.融合剂（聚乙二醇）4.培养基5.显微镜实验步骤：1.将小鼠胚胎纤维化细胞和小鼠癌细胞分别培养至对数生长期。

2.用PBS洗涤细胞，加入适量的融合剂（聚乙二醇）。

3.用无菌吸管轻轻吹气使细胞悬浮液均匀混合。

4.将细胞悬浮液转移至培养皿中，并继续培养在37°C的培养箱中。

5.观察细胞的变化，使用显微镜观察细胞形态和细胞数量的变化。

实验结果：经过细胞融合，观察到融合细胞表现出不同于原始细胞的形态特征。

例如，融合细胞可能会表现出更大的细胞体积、不规则的形状以及异常的细胞核形态。

此外，融合细胞通常比原始细胞更抵抗外界环境的压力，更能适应培养基中的低营养条件。

讨论与分析：细胞融合是一种重要的实验手段，用于探究细胞形态和功能的变化。

通过将不同类型的细胞融合在一起，可以观察到融合细胞的形态和功能发生的改变。

这些变化可能包括细胞体积的增加、细胞形态的改变以及细胞功能的增强等。

细胞融合实验不仅可以帮助我们了解细胞的组成和特性，还可以为研究癌细胞的形成和功能提供重要的线索。

在本实验中，我们选择了小鼠胚胎纤维化细胞和小鼠癌细胞进行融合实验。

由于癌细胞的特殊性质，融合后的细胞可能会表现出更强的生长能力和侵袭性，这有助于我们研究癌细胞的形成机制。

然而，需要注意的是，细胞融合对于细胞的形态和功能的影响是非特异性的。

这意味着融合细胞的形态和功能不仅取决于融合的细胞类型，还取决于融合过程中的其他因素，如融合剂的用量和融合时间等。

因此，在进行细胞融合实验时，需要进行严密的实验设计和控制，以确保观察到的变化是由细胞融合引起的，而不是其他因素导致的。

动物细胞融合实验报告

一、实验目的1. 理解动物细胞融合的基本原理和常用方法。

2. 掌握化学融合和电融合的基本操作步骤。

3. 观察动物细胞融合过程中的行为和变化。

4. 通过实验验证细胞融合技术的有效性。

二、实验原理细胞融合是指两个或两个以上的细胞在自发或诱导条件下，合并成为双核或多核细胞的过程。

动物细胞融合技术广泛应用于生物医学、细胞工程等领域。

目前，常见的诱导细胞融合的方法包括病毒诱导融合、化学融合、电融合等。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 小鼠脾细胞- 小鼠骨髓瘤细胞- 聚乙二醇（PEG）- 灭活仙台病毒- 电融合仪- 液体培养基- 洗涤缓冲液- 倒置显微镜2. 实验仪器：- 倒置显微镜- 低温冰箱- 恒温培养箱- 超净工作台- 电子天平- 移液器四、实验步骤1. 细胞培养：将小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞分别培养在含有10%胎牛血清的液体培养基中，置于37℃、5%CO2的恒温培养箱中培养。

2. 细胞收获：将培养至对数生长期的细胞用胰酶消化，收集细胞，用洗涤缓冲液洗涤，调整细胞浓度为1×10^6个/mL。

3. 化学融合：- 将小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞混合，加入适量PEG，充分混合后静置5分钟。

- 加入洗涤缓冲液，终止反应，洗涤细胞。

4. 电融合：- 将混合后的细胞放入电融合仪的电极槽中，设定电压和时间参数。

- 启动电融合仪，进行电融合实验。

5. 细胞培养：将融合后的细胞接种于含有10%胎牛血清的液体培养基中，置于37℃、5%CO2的恒温培养箱中培养。

6. 细胞观察：利用倒置显微镜观察融合细胞的形态和细胞核的变化。

五、实验结果与分析1. 在化学融合实验中，观察到部分细胞发生融合，形成双核或多核细胞。

2. 在电融合实验中，观察到部分细胞发生融合，形成双核或多核细胞。

3. 融合细胞的细胞核呈现明显的核仁，且核膜清晰。

六、实验结论本实验成功实现了小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞的融合，验证了细胞融合技术的有效性。

细胞融合_实验报告

一、实验名称：细胞融合实验二、实验目的：1. 了解细胞融合的基本原理和过程。

2. 掌握聚乙二醇（PEG）诱导细胞融合的方法。

3. 观察细胞融合过程中细胞的行为与变化。

三、实验材料与用品：1. 细胞：小鼠成纤维细胞、小鼠胚胎成纤维细胞2. 试剂：胎牛血清、DMEM培养基、0.25%胰酶、50%聚乙二醇（PEG）溶液、无菌水3. 器材：显微镜、离心机、水浴箱、离心管、滴管、载玻片、盖玻片四、实验原理：细胞融合是指两个或多个细胞通过质膜融合形成单个双核或多核细胞的现象。

细胞融合在生物体内和生物技术领域都有广泛的应用，如制备单克隆抗体、研究细胞信号传导等。

聚乙二醇（PEG）是一种常用的诱导剂，可以促进细胞融合。

五、实验步骤：1. 将小鼠成纤维细胞和小鼠胚胎成纤维细胞分别培养于DMEM培养基中，待细胞生长至80%融合时，收集细胞。

2. 将收集的细胞用0.25%胰酶消化，再用DMEM培养基清洗两次，制成细胞悬液。

3. 将两种细胞悬液等体积混合，在室温下静置5分钟，使细胞聚集。

4. 加入50%聚乙二醇（PEG）溶液，使溶液终浓度为1.5%，混合均匀，静置5分钟。

5. 加入无菌水，终止PEG诱导，充分混匀。

6. 将混合细胞悬液接种于载玻片上，用盖玻片覆盖。

7. 将载玻片放入二氧化碳恒温培养箱中培养，观察细胞融合情况。

六、实验结果：1. 在显微镜下观察到，细胞在PEG诱导下发生聚集，部分细胞开始融合，形成双核或多核细胞。

2. 经过一段时间培养，部分双核或多核细胞进一步融合，形成更大的细胞。

七、实验讨论：1. 细胞融合实验中，PEG诱导剂的作用是促进细胞质膜发生可逆性改变，使细胞易于融合。

2. 细胞融合过程中，细胞的行为与变化包括细胞聚集、质膜融合、细胞核融合等。

3. 实验结果表明，PEG诱导细胞融合效果较好，可以应用于细胞融合研究。

八、实验总结：本次实验成功实现了小鼠成纤维细胞和小鼠胚胎成纤维细胞的融合，掌握了PEG诱导细胞融合的方法。

实验八细胞融合-小鼠骨髓瘤SP20细胞及小鼠脾细胞融合

实验八细胞融合----小鼠骨髓瘤SP2/0细胞与小鼠脾细胞融合
一、验目的
了解细胞融合的原理掌握细胞融合的基本方法
二、实验原理
细胞融合的概念
二、实验原理
细胞融合的概念常用的诱导融合手段有哪些？
病毒诱导融合聚乙二醇诱导融合电场诱导融合激光诱导融合
三、仪器、材料与试剂
仪器：离心机、 CO2培养箱、超净台、 37℃恒温水浴锅、显微镜、血球计数板、解剖器械、烧杯、载玻片、盖玻片、离心管。材料： SP2/0细胞、昆明小鼠试剂： Hanks液、45%PEG ，75%乙醇
（4）细胞计数，待用。（5）取对数生长骨髓瘤细胞， 800g 离心10分钟，取沉淀细胞用Hanks液洗2次（每次加入5mL Hanks液，轻轻混匀800g 离心10分钟）（6）细胞计数，待用。（ 7 ）将骨髓瘤细胞 (105-6) 与脾细胞 (106-7) 按 1 ： 10 比例混合在一起800g 离心10分钟，弃上清，用吸管吸净残留液体，以免影响聚乙二醇（PEG）浓度。轻轻弹击离心管底，使细胞沉淀略松动。（每组混合两份样品) （8） 90s内加入37℃预温的1mL 45%PEG（分子量4000）或Hanks液，边加边轻微摇动。37℃水浴90s。（9）加37℃预温的Hanks液8mL以终止PEG作用（10） 800g 离心10分钟，弃上清，加入1mL Hanks液，镜检
四、实验步骤
（1）小鼠摘眼球放血（可不做）, 拉颈处死，浸泡在 75%酒精内，3～5min （2）无菌取脾脏， Hanks液洗一次，脾脏剪碎，培养液洗一次，过不锈钢筛网，转移至10mL离心管（3）800g 离心10分钟，取沉淀细胞用Hanks液洗2次（每次加入5mL溶液，轻轻混匀800g 离心10分钟）

细胞融合实验报告

一、实验目的1. 了解细胞融合的基本原理和过程。

2. 掌握利用聚乙二醇（PEG）诱导细胞融合的方法。

3. 观察并分析细胞融合过程中的现象及结果。

二、实验材料与用品1. 试剂：- Alsver液：葡萄糖2.05g，柠檬酸钠0.80g，NaCl 0.42g，溶于100ml 双蒸水中。

- 0.85％生理盐水- GKN液： NaCl 8g、KCl 0.4g、Na2HPO4·2H2O 1.77g、Na2HPO4·H2O 0.69g，葡萄糖2g，酚红（phenolrad）0.01g，溶于1000ml蒸馏水中。

- 50％PEG液：实验前临时配制，根据需要称取定量PEG（Mw4000），放入刻度试管或刻度离心管内，在沸水浴中加热，使其熔化，待冷却至50时，加入预热至50等体积的GKN液，混匀。

2. 器材：- 显微镜- 离心机- 水浴箱- 离心管- 滴管- 载玻片- 盖玻片三、实验原理细胞融合是指两个或多个细胞通过质膜融合形成单个双核或多核细胞的现象。

细胞融合的基本过程包括：细胞接触、细胞融合、细胞融合后细胞的增殖和分化。

本实验采用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂，使细胞膜发生短暂的可逆性融合，从而实现细胞融合。

四、实验步骤1. 将待融合的细胞分别制备成悬液，调整细胞浓度为1×10^6个/ml。

2. 将悬液置于冰上预冷。

3. 取50μl细胞悬液分别加入两个离心管中，各加入50μl 50% PEG溶液，轻轻混匀，室温下放置2分钟。

4. 加入50μl 0.85%生理盐水，轻轻混匀，室温下放置5分钟。

5. 将混合后的细胞悬液滴加于载玻片上，加盖玻片，用显微镜观察细胞融合情况。

6. 将融合后的细胞悬液置于培养箱中培养，观察细胞生长和分化情况。

五、实验结果1. 通过显微镜观察，发现细胞融合现象明显，部分细胞出现双核或多核现象。

2. 培养过程中，融合后的细胞生长良好，并逐渐分化成不同类型的细胞。

六、实验分析1. 本实验采用PEG诱导细胞融合，结果表明该方法可以有效实现细胞融合。

细胞融合实验报告

姓名班级 13级生命基地班学号同组者：科目细胞生物学实验实验题目动物细胞融合【实验题目】动物细胞融合【实验目的】1.了解动物细胞融合的常用方法。

2.学习化学融合的基本操作过程。

3.观察动物细胞融合过程中细胞的行为与变化。

【实验材料与用品】1、材料鸡血红细胞2、试剂50%PEG、GKN溶液、Alsever’s细胞保存液、0.85%氯化钠溶液。

3、器材倒置显微镜、离心机、载玻片、盖玻片、离心管、废液缸、滴管等。

【实验原理】细胞融合是指在自发或者诱导条件下，两个或两个以上细胞合并为双核或者多核细胞的过程。

目前人们已经发现有很多方法可以诱导细胞融合，包括：病毒诱导融合、化学诱导融和和电激诱导融合。

1、病毒诱导融合仙台病毒、牛痘病毒、新城鸡瘟病毒和疱疹病毒等可以介导细胞的融时也可介导细胞与细胞的融合。

用紫外线灭活后，这些病毒即可诱导细胞发生融合。

2、化学诱导融合很多化学试剂能够诱导细胞融合，如聚乙二醇(PEG)、二甲基亚砜、山梨醇、甘油、溶血性卵磷脂、磷脂酰丝氨酸等。

这些物质能够改变细胞膜脂质分子的排列，在去除这些物质之后，细胞膜趋向于恢复原有的有序结构。

在恢复过程中想接触的细胞由于接口处脂质双分子层的相互亲和与表面张力，细胞膜融合，胞质流通，发生融合。

化学诱导方法，操作方便，诱导融合的概率比较高，效果稳定，适用于动、植物细胞，但对细胞具有一定的毒性。

PEG是广泛使用的化学融合剂。

3、电激诱导融合姓名班级 13级生命基地班学号同组者：科目细胞生物学实验实验题目动物细胞融合包括电诱导、激光诱导等。

其中，电诱导是先使细胞在电场中极化成为偶极子，沿电力线排布成串，再利用高强度、短时程的电脉冲击破细胞膜，细胞膜的脂质分子发生重排，由于表面张力的作用，两细胞发生融合。

电诱导方法具有融合过程易控制、融合概率高、无毒性、作用机制明确、可重复性高等优点。

【实验步骤】在本次实验中采用的是化学诱导融合的方法，利用PEG使鸡血红细胞发生融合。

细胞生物融合实验报告

细胞生物融合实验报告实验目的本实验旨在研究和探究细胞融合对生物体的影响，以及细胞融合在生物科学中的应用。

实验方法1. 实验材料准备：- 两种不同类型的细胞（细胞A和细胞B）- 细胞培养基- 细胞培养皿- 显微镜2. 实验步骤：1. 采集细胞A和细胞B，并分别培养在不同的细胞培养基中。

2. 将细胞A和细胞B分别转移到两个不同的培养皿中。

3. 动态观察细胞A和细胞B的生长情况，记录生长速度和形态特征。

4. 将细胞A和细胞B混合放置到一个新的培养皿中。

5. 动态观察细胞A和细胞B的融合情况，记录融合细胞的生长速度和形态特征。

6. 使用显微镜观察融合细胞的结构和特征，并进行拍照记录。

实验结果1. 细胞A和细胞B在单独培养的情况下，生长速度有所差异。

细胞A生长速度较快，呈现较大的细胞体积和扁平形态，而细胞B生长速度较慢，呈现较小的细胞体积和圆形形态。

2. 在细胞A和细胞B混合培养的情况下，观察到融合细胞的生成。

融合细胞的生长速度较为平稳，在培养皿中形成聚集，形态呈现多样性，并具有两者的特征。

3. 使用显微镜观察到融合细胞的结构和特征，发现融合细胞中存在两种类型的细胞核，细胞质融合且较为均匀。

同时，融合细胞的形态、大小和细胞质的分布也呈现多样性。

实验分析与讨论1. 细胞融合实验的结果表明，细胞融合能够影响细胞的生长速度和形态特征。

融合细胞的生成可能导致细胞代谢的重新调整，从而改变生长速度和形态。

2. 融合细胞的形态和特征的多样性可能是由于细胞融合后的基因相互作用和表达的调节。

细胞核和细胞质的融合使得不同类型细胞的基因信息得以混合和表达，从而产生新的细胞表型。

3. 细胞融合在生物科学中具有广泛的应用。

例如，通过细胞融合，可以研究不同类型细胞的互补作用和相互影响，以深入理解细胞生长和发育的机制。

此外，细胞融合还可用于生物医学领域，如细胞治疗和组织工程等。

实验总结通过本次实验，我们了解了细胞融合对生物体的影响和在生物科学中的应用。

细胞融合实验报告

细胞融合实验报告细胞融合实验报告引言：细胞融合是一种重要的生物学研究方法，通过将两个或多个不同种类的细胞融合在一起，可以获得新的细胞群体，进而探索细胞之间的相互作用以及其对生物体的影响。

本实验旨在通过细胞融合实验，探索细胞融合对细胞生长、形态和功能的影响。

材料与方法：1. 细胞培养基：含有足够营养物质的培养基，如DMEM。

2. 细胞：选择两种不同的细胞，如肺癌细胞株A549和正常肺细胞株HBE。

3. 细胞培养器具：培养皿、离心管、吸管等。

4. 融合剂：聚乙二醇（PEG）等。

实验步骤：1. 细胞准备：将A549和HBE细胞分别培养至对数生长期，用PBS洗涤细胞，离心收集。

2. 细胞融合：将A549和HBE细胞按照一定比例混合，加入融合剂（如PEG），轻轻摇晃混合，静置一段时间。

3. 细胞培养：将融合后的细胞悬液加入含有培养基的培养皿中，放入培养箱中，以37摄氏度、5%二氧化碳的条件培养。

4. 细胞观察：在培养过程中，定期观察融合细胞的生长情况、形态变化和功能表现。

结果与讨论：通过细胞融合实验，我们观察到了一些有趣的现象。

首先，融合后的细胞在形态上呈现出不同于原始细胞的特征。

例如，融合细胞的形状可能更加不规则，细胞体积也可能发生变化。

这可能是由于融合过程中细胞膜的融合以及细胞核的合并所导致的。

其次，融合细胞的生长速度可能与原始细胞有所不同。

在我们的实验中，观察到部分融合细胞的生长速度明显加快，而另一部分则与原始细胞相比无明显差异。

这表明细胞融合可能引起细胞生长调控机制的改变，进而影响细胞的增殖速度。

此外，融合细胞的功能表现也可能发生变化。

在我们的实验中，我们发现融合细胞相比于原始细胞，对某些刺激物的反应更加敏感。

例如，在刺激物浓度相同的情况下，融合细胞可能表现出更高的细胞凋亡率或细胞迁移能力。

这提示细胞融合可能改变了细胞信号传导途径，从而影响了细胞的功能。

细胞融合作为一种重要的生物学研究方法，不仅可以帮助我们了解细胞之间的相互作用，还可以为疾病的研究提供新的思路。

细胞融合实验报告

实验报告实验名称：牛蛙血细胞的体外融合时间：20220418实验目的：1、掌握细胞融合的概念、类型和体外诱导细胞融合的方法。

2、掌握PEG诱导细胞融合的原理、影响因素和试剂作用，并掌握PEG诱导细胞融合的操作和注意事项。

3、掌握细胞计数板的使用和细胞计数的方法。

4、了解单克隆抗体制备技术。

实验原理：1、细胞融合：1）概念：细胞融合又称为细胞杂交，是通过培养和诱导，两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程，或者用人工方法使两个或两个以上的体细胞融合成异核体细胞，随后，异核体同步进入有丝分裂，核膜崩溃，来自两个亲本细胞的基因组合在一起形成只含有一个细胞核的杂种细胞，此杂交细胞具有很强的生命力，增值网盛，并且细胞融合是形成杂交细胞的前提。

2）类型：分为自发融合和诱发融合。

自发融合是指同种细胞在培养时2个靠在一起的细胞自发合并；诱发融合是指异种间的细胞必须经过诱导剂的处理才能融合。

3）方法：a.物理法：电、激光触合b.生物法：病毒诱导融合，如仙台病毒c.化学法：PEG诱导融合4）应用：制备单克隆抗体、疫苗生产、培育动植物新品种、获得优良的微生物菌种、膜蛋白研究等。

2、PEG（聚二乙醇）：(1)PEG是乙二醇的多聚化合物，具有强烈的吸水性，能使两个细胞接触点的距离拉近；能够凝聚和沉淀蛋白质，引起磷脂的酰键及极性基团发生结构重排，因此膜结构改变，引起细胞融合。

但是PEG长时间作用对细胞有毒性，因此作用一段时间后需要稀释或撤去。

(2)融合的活力与频率与PEG的相对分子质量、浓度、作用时间、细胞的生理状态与密度等有关。

(3)PEG法最佳的融合条件：1）细胞：状态良好，得是单细胞悬液，有核细胞（便于观察，便于用光学显微镜判断是否成功融合）；因此选择新鲜制备的牛蛙血细胞，细胞很大且有核，若是培养的细胞，需要将其状态调至很好。

2）密度：5*105-106个/ml3）PEG：分子量4000，浓度为50%（浓稠的吸水性更好，但对细胞膜的损伤更大）4）温度：37℃5）缓冲液：pH7-84、细胞计数：1）细胞计数板：每个大方格的体积为0.1mm3，可换算为每毫升液体中的细胞数量。