bel亚型的鉴定及分析
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因bel亚型人群较稀少笔者认为应对有意愿患者或献血者开展家系调查建立其血型数据档案并由专门部门管理以便实ห้องสมุดไป่ตู้个体化血液管理从而为稀有血型患者提供输血安全保障
实用医技杂志 2019 年 11 月第 26 卷第 11 期 Journal of Practical Medical Techniques，November 2019，Vol. 26，No. 11
【Abstract】 Objective To analyze the ABO serological characteristics of a sample with discrepancies of serological tests, and to explore the molecular mechanism of ABO gene. Methods ABO phenotype of the sample was detected
1.2 试剂与仪器 单克隆抗鄄A、抗鄄B 血型正定型试剂，抗鄄H 抗体试剂，人
ABO 血型反定型用红细胞由上海血液生物医药有限责任公 司提供；人源性抗鄄A、抗鄄B 由本实验室自制；抗鄄AB 抗体试剂 由法国 Diagast 公司提供；Biospin 全血基因组 DNA 提取试剂 盒由杭州博日科技有限公司提供；人类红细胞 ABO 血型基因 分型试剂盒由天津秀鹏生物技术有限公司提供；Baso2005鄄2 型离心机由中国台湾贝索公司提供；ABI-2720 PCR 仪由美 国 ABI 公司提供；Gel DocTM XR+凝胶成像系统由美国 Biorad 提供。 1.3 方法 1.3.1 血型血清学试验：依据全国临床检验操作规程[6]进行红 细胞 ABO 血型正反定型检查，红细胞吸收放散试验。 1.3.2 ABO 血型基因分型：采用序列特异性引物-聚合酶链 式反应（PCR-SSP）方法。淤全血 DNA 提取：按照 Biospin 全血 基因组 DNA 提取试剂盒说明书提取标本基因组 DNA。提取 后检测 DNA 纯度吸光度（A）260/280 1.6~1.8，浓度 15~100 ng/滋L。 于 PCR 扩增反应：按照人类红细胞 AB0 血型基因分型试剂 盒说明书设置反应参数，在 ABI-2720 PCR 仪上进行扩增反 应。盂电泳及结果判定：将 PCR 扩增产物转移到 2.5%琼脂糖 凝胶孔中进行电泳。在凝胶成像系统下观察结果并拍摄成像。 依据试剂盒结果分型表进行特异性扩增条带结果的判读。
by serological tests. Exon 6 and 7 at ABO gene was sequenced to comfirm the genotypes. Results The sample was suspected as belonging to B subtype. The genotype was identified as Bel03O02 which with 502 C>T mutation in exon 7. Conclusion The mutation of the allele，in which the nucleotide alters from C to T at position of 502 in exon 7 results in an amino acid change from Arg to Trp，that is expected to diminish the activity of 琢鄄1，3鄄D鄄galactosyltransferase，and
result in the Bel subtype. 【Key words】 ABO blood鄄group system； HLA鄄B antigens； Serology； Sequence analysis，DNA
自 Landsteriner 于 1900 年发现人类第 1 个血型 系统，至今已发现 36 个血型系统。其中 ABO 血型系 统是人类最重要的红细胞血型系统之一，也是最早 被发现的血型系统。该血型系统最常见且比较复杂， 其在临床输血、器官移植、新生儿溶血病诊断及法医 学鉴定中具有非常重要的意义[1，2]。ABO 血型通常分 为 A、B、AB、O 4 种表型，此外在人群中还存在许多 亚型或变异型，表现为红细胞上 A 或（和）B 抗原强 度减弱或正反定型不符[3]。依据血清学特征，A 亚型 分 为 A2、A3、Aend、Ax、Am、Ay、Ael 等 [4]，Salmon [5] 依 照 A 亚型的分类标准，将 B 亚型分为 B3、Bx、Bm、 Bel，同时将不符合这 4 类亚型标准的其他弱表型归 为 Bw。Bel 亚型是 B 抗原强度减弱的亚型或变异 型，目前有关该亚型的报道较为少见。近日，我科室 收到血液中心送检的 1 例正反定型不符的标本，其 正定型检测疑为“O”型，反定型检测疑为“B”亚型， 经血型血清学、ABO 血型基因分型、ABO 基因测序 确认为 Bel 亚型，现报告如下。
【关键词】 ABO 血型系统； HLA鄄B 抗原； 血清学； 序列分析，DNA
Identification and analysis of Bel subgroup of the ABO blood group Sun Jiafeng*，Zhang A i，Y ang Xiaojun，Cai Pengwei，Chen Fawen. *Department of Clinical Laboratory，Fujian Provincial Hospital South Branch，Fuzhou 350008， China
DOI：10.19522/ki.1671鄄5098.2019.11.003 作者单位：350008 福州，福建省立医院南院检验科（孙嘉峰、蔡鹏 威、陈发文）；福建省血液中心检验科（张爱）；福建医科大学省立临床 医学院（杨晓俊、陈发文） 通信作者：陈发文
1 材料与方法
1.1 标本来源 2018 年 7 月 26 日福建省血液中心送检标本。
窑1375窑
Bel 亚型的鉴定及分析
孙嘉峰 张 爱 杨晓俊 蔡鹏威 陈发文
【摘 要】 目的 分析 1 例 ABO 正反定型不符标本的血型血清学特征，并探讨其 ABO 基因的分子机制。方 法 采用血型血清学试验分析该例标本 ABO 表型，通过 ABO 基因第 6、7 外显子测序确定其基因型。结果 血型血 清学试验检测疑为 B 亚型。ABO 血型基因测序分析发现第 7 外显子 502 位存在 C>T 突变，基因型为 Bel03O02。结 论 ABO 基因第 7 外显子 502 C>T 突变导致 168 位精氨酸被色氨酸替换，可能使 琢鄄1，3鄄D鄄半乳糖基转移酶活性降 低，从而形成 Bel03 亚型。
实用医技杂志 2019 年 11 月第 26 卷第 11 期 Journal of Practical Medical Techniques，November 2019，Vol. 26，No. 11
【Abstract】 Objective To analyze the ABO serological characteristics of a sample with discrepancies of serological tests, and to explore the molecular mechanism of ABO gene. Methods ABO phenotype of the sample was detected
1.2 试剂与仪器 单克隆抗鄄A、抗鄄B 血型正定型试剂，抗鄄H 抗体试剂，人
ABO 血型反定型用红细胞由上海血液生物医药有限责任公 司提供；人源性抗鄄A、抗鄄B 由本实验室自制；抗鄄AB 抗体试剂 由法国 Diagast 公司提供；Biospin 全血基因组 DNA 提取试剂 盒由杭州博日科技有限公司提供；人类红细胞 ABO 血型基因 分型试剂盒由天津秀鹏生物技术有限公司提供；Baso2005鄄2 型离心机由中国台湾贝索公司提供；ABI-2720 PCR 仪由美 国 ABI 公司提供；Gel DocTM XR+凝胶成像系统由美国 Biorad 提供。 1.3 方法 1.3.1 血型血清学试验：依据全国临床检验操作规程[6]进行红 细胞 ABO 血型正反定型检查，红细胞吸收放散试验。 1.3.2 ABO 血型基因分型：采用序列特异性引物-聚合酶链 式反应（PCR-SSP）方法。淤全血 DNA 提取：按照 Biospin 全血 基因组 DNA 提取试剂盒说明书提取标本基因组 DNA。提取 后检测 DNA 纯度吸光度（A）260/280 1.6~1.8，浓度 15~100 ng/滋L。 于 PCR 扩增反应：按照人类红细胞 AB0 血型基因分型试剂 盒说明书设置反应参数，在 ABI-2720 PCR 仪上进行扩增反 应。盂电泳及结果判定：将 PCR 扩增产物转移到 2.5%琼脂糖 凝胶孔中进行电泳。在凝胶成像系统下观察结果并拍摄成像。 依据试剂盒结果分型表进行特异性扩增条带结果的判读。
by serological tests. Exon 6 and 7 at ABO gene was sequenced to comfirm the genotypes. Results The sample was suspected as belonging to B subtype. The genotype was identified as Bel03O02 which with 502 C>T mutation in exon 7. Conclusion The mutation of the allele，in which the nucleotide alters from C to T at position of 502 in exon 7 results in an amino acid change from Arg to Trp，that is expected to diminish the activity of 琢鄄1，3鄄D鄄galactosyltransferase，and
result in the Bel subtype. 【Key words】 ABO blood鄄group system； HLA鄄B antigens； Serology； Sequence analysis，DNA
自 Landsteriner 于 1900 年发现人类第 1 个血型 系统，至今已发现 36 个血型系统。其中 ABO 血型系 统是人类最重要的红细胞血型系统之一，也是最早 被发现的血型系统。该血型系统最常见且比较复杂， 其在临床输血、器官移植、新生儿溶血病诊断及法医 学鉴定中具有非常重要的意义[1，2]。ABO 血型通常分 为 A、B、AB、O 4 种表型，此外在人群中还存在许多 亚型或变异型，表现为红细胞上 A 或（和）B 抗原强 度减弱或正反定型不符[3]。依据血清学特征，A 亚型 分 为 A2、A3、Aend、Ax、Am、Ay、Ael 等 [4]，Salmon [5] 依 照 A 亚型的分类标准，将 B 亚型分为 B3、Bx、Bm、 Bel，同时将不符合这 4 类亚型标准的其他弱表型归 为 Bw。Bel 亚型是 B 抗原强度减弱的亚型或变异 型，目前有关该亚型的报道较为少见。近日，我科室 收到血液中心送检的 1 例正反定型不符的标本，其 正定型检测疑为“O”型，反定型检测疑为“B”亚型， 经血型血清学、ABO 血型基因分型、ABO 基因测序 确认为 Bel 亚型，现报告如下。
【关键词】 ABO 血型系统； HLA鄄B 抗原； 血清学； 序列分析，DNA
Identification and analysis of Bel subgroup of the ABO blood group Sun Jiafeng*，Zhang A i，Y ang Xiaojun，Cai Pengwei，Chen Fawen. *Department of Clinical Laboratory，Fujian Provincial Hospital South Branch，Fuzhou 350008， China
DOI：10.19522/ki.1671鄄5098.2019.11.003 作者单位：350008 福州，福建省立医院南院检验科（孙嘉峰、蔡鹏 威、陈发文）；福建省血液中心检验科（张爱）；福建医科大学省立临床 医学院（杨晓俊、陈发文） 通信作者：陈发文
1 材料与方法
1.1 标本来源 2018 年 7 月 26 日福建省血液中心送检标本。
窑1375窑
Bel 亚型的鉴定及分析
孙嘉峰 张 爱 杨晓俊 蔡鹏威 陈发文
【摘 要】 目的 分析 1 例 ABO 正反定型不符标本的血型血清学特征，并探讨其 ABO 基因的分子机制。方 法 采用血型血清学试验分析该例标本 ABO 表型，通过 ABO 基因第 6、7 外显子测序确定其基因型。结果 血型血 清学试验检测疑为 B 亚型。ABO 血型基因测序分析发现第 7 外显子 502 位存在 C>T 突变，基因型为 Bel03O02。结 论 ABO 基因第 7 外显子 502 C>T 突变导致 168 位精氨酸被色氨酸替换，可能使 琢鄄1，3鄄D鄄半乳糖基转移酶活性降 低，从而形成 Bel03 亚型。