人胚胎脑组织蛋白提取物诱导人胎盘间充质干细胞向神经细胞的分化

人胚胎脑组织蛋白提取物诱导人胎盘间充质干细胞向神经细胞
的分化
马丽君;范恒;马晓娜;魏军;李玉奎
【期刊名称】《中国组织工程研究》
【年(卷),期】2014(000)050
【摘要】背景：选择合适的诱导方法诱导人胎盘间充质干细胞分化为神经元样细
胞是临床治疗神经损伤的关键。

<br> 目的：在人胎盘间充质干细胞中加入商
品化的人胚胎脑组织蛋白提取物，观察其诱导分化为神经元样细胞的可行性。

<br> 方法：采用酶消化法分离培养人胎盘间充质干细胞，传至第3代，将人早期胚胎
脑组织蛋白提取物加入诱导培养基培养6 d，加入浓度为20 nmol/L全反式维甲
酸和500μg/L音猬因子培养3 d，换新的培养液，包含体积分数为10%胎牛血清，10μg/L脑源性神经营养因子，20μg/L神经胶质细胞源性神经营养因子，50μg/L 胰岛素样生长因子Ⅱ型继续培养3 d。

<br> 结果与结论：胎盘组织经酶消化
后获得贴壁细胞，传至第2代细胞形态为梭形，成漩涡样生长，传至第3代细胞
形态较均一。

诱导后细胞经免疫细胞化学法检测均表达神经元特异性烯醇化酶、巢蛋白、胶质纤维酸性蛋白、神经丝蛋白、神经生长相关蛋白43；ELISA法检测细
胞培养上清脑源性神经营养因子、神经营养因子3、神经营养因子4为阳性表达；RT-PCR检测细胞微管相关蛋白、神经元特异性烯醇化酶、神经丝蛋白、神经生长相关蛋白43均为阳性表达。

结果表明人胚胎脑组织蛋白提取物使人胎盘间充质干细胞诱导分化为神经元样细胞。

%BACKGROUND:It is a key to choose an appropriate method to trans-differentiate mesenchymal stem cels from human placenta into neuron-like cels for clinical treatment of neural
system injury. <br> OBJECTIVE: To observe the feasibility of the neuronal differentiation of mesenchymal stem cels from human placenta with protein extracts of human embryonic brain tissue. <br>
METHODS:Mesenchymal stem cels from human placenta were isolated and cultured using enzyme digestion method. The third passage of cels were incubated in induction medium containing protein extracts of human embryonic brain tissue for 6 days, and then cultured in culture medium containing 20 nmol/L al-trans retinoic acid and 500 μg/L sonic hedgehog for 3 days, folowed by 3-day continuous culture in 10 μg/L brain-derived neurotrophic factor, 20 μg/L glial cel line-derived neurotrophic factor, 50 μg/L insulin-like growth factor type II <br> RESULTS AND CONCLUSION:The adherent cels were obtained after enzyme digestion of placenta tissue. The passage 2 cels were fusiform-shaped and exhibited a whirlpool-like growth. The passage 3 cels were uniform
in&nbsp;morphology. After induction, immunocytochemistry assay showed that the cels expressed neuron-specific enolase, nestin, glial fibrilary acidic protein, neurofilament protein, and nerve growth associated protein 43; ELISA results showed that cels were positive for brain-derived neurotrophic factor, neurotrophin 3, neurotrophin 4; RT-PCR results showed that cels were positive for microtubule-associated protein, neuron-specific enolase, neurofilament protein, nerve growth associated protein 43. Results indicate that mesenchymal stem cels from human placenta can differentiate into neuron-like cels under induction of protein extracts of human embryonic brain tissue.
【总页数】6页(P8168-8173)
【作者】马丽君;范恒;马晓娜;魏军;李玉奎
【作者单位】宁夏医科大学总医院干细胞研究所，宁夏回族自治区银川市750004;宁夏医科大学总医院干细胞研究所，宁夏回族自治区银川市 750004;宁夏医科大学总医院干细胞研究所，宁夏回族自治区银川市 750004;宁夏医科大学总医院干细胞研究所，宁夏回族自治区银川市 750004; 宁夏医科大学生育力保持省部共建教育部重点实验室，宁夏回族自治区银川市 750004;宁夏医科大学总医院干细胞研究所，宁夏回族自治区银川市 750004; 宁夏医科大学生育力保持省部共建教育部重点实验室，宁夏回族自治区银川市 750004
【正文语种】中文
【中图分类】R394.2
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