基因串联原核高效表达胸腺肽α1

基因串联原核高效表达胸腺肽α1
金明飞;徐伟东;黄静;金丽;王嘉;叶海峰;吴自荣
【期刊名称】《中国生物工程杂志》
【年(卷),期】2007(27)1
【摘要】人工合成含有SD序列、胸腺肽α1(Tα1)基因、纯化标签和酶切位点的DNA序列作为构建元件,利用同尾酶将其依次克隆到pET-32a(+)中,得到含有1～8个不同重复数目的含SD序列基因的串联表达载体,利用PCR初步鉴定和进一步的测序证实序列完全正确。

进而利用lacZ基因作为指示基因,将带有SD序列的lacZ基因克隆到不同Tα1基因串数载体末尾,利用蓝白斑实验验证启动子后不同SD序列的效率,证实串联载体中的各个SD序列均能有效启动翻译。

在此基础上对各串表达载体进行摇瓶发酵,SDS-PAGE电泳检测证实各串均可正确表达Tα1,且为可溶性表达,为小肽原核高效表达提出了新方法,有望成为小肽高效表达的新途径。

【总页数】5页(P11-15)
【关键词】SD序列-基因串联;高效表达;小肽;胸腺肽α1
【作者】金明飞;徐伟东;黄静;金丽;王嘉;叶海峰;吴自荣
【作者单位】华东师范大学生命科学学院;上海市药品检验所
【正文语种】中文
【中图分类】Q81
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