高效液相色谱分析法在各领域的应用及发展前景

高效液相色谱分析法在各领域的应用及发展前景
摘要：高效液相色谱分析是一种高效、快速、准确的分离分析方法，在石油化工、生命科学、环境、医药及食品安全等领域有着广泛的应用。

本文旨在简要介绍液相色谱分析法在不同领域的应用情况，并从使用频度、应用范围、检测效率、检测准确度及在本领域分析方法中的重要性等角度进行阐述。

关键词：高效液相色谱仪；石油化工；食品安全
中图分类号： O657.7+2 文献标识码：A
高效液相色谱在20世纪70年代获得迅猛的发展，是一种常规的分离技术色品分析仪的应用最广是在化学领域上，食品与环境的领域上也出现多方面的应用。

其中，化合物的分析就包括高分子化合物，离子型化合物，热不稳定化合物以及生活性的化合物等都可以用不同的方式进行离子交换色谱和离子色谱，体积排除法，亲和色谱法等，进行离子分析。

一、高液相色谱分析仪发展现状
随着高效液相色谱分析仪的转换，高效液相色谱仪器成为国际分析化学界发展较快的学科，高效液相色谱是由液相系统组成，分别是检测器，色谱柱，记录仪等三个方面的部分组成，为了取得更好的效果，科研工作者需要提升准确度以及精确度和灵敏度显示科研工作的重要性。

经常采用薄层色谱法(TLC)和气相色谱法(OC)进行含量测定，而液相色谱法(LC)只是用于对组分标样的测定和分离的可能性研究。

色谱法是一
种分类和混合的开发技术，是在1913年由俄国植物学家在实验中发现并且命名的技术，将植物的叶色素和石油醚，通过装有白色的碳酸钠颗粒的玻璃管，再用石油醚进行全面的冲洗，玻璃管的内壁出现不同颜色的色带，随着冲洗剂的不断转变，色带以不同的颜色进行冲洗，不同的色带以不同的速度向下移动并且分离，色谱法由此得名。

二、色谱分析仪的使用及工作原理
色谱柱通称为不锈钢柱，内装填充剂，常用的是硅胶作为填料，用于正相色谱，化学键固定相，根据色谱化学键的固定相，可以用来作为反相或者是反高的要求。

输液系统要为 HPLC仪器提供流量恒定、准确、无脉冲的流动相，同时还要提供精度好、准确度高的多元溶剂梯度。

早在2003年国家标准中就已经规定了液相色谱法检测食品中糖精钠和安赛蜜的检测方法，在质检机构中已经将之作为一种常规检验项目的基本检测方法来进行操作。

近几年随着色谱柱填充制备技术的高速发展，已经可以一次性分离糖精钠、安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸、柠檬黄、日落黄、胭脂红。

（一）、高效液相色谱仪的工作原理
储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱(固定相) 内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程高的要求。

储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱(固定相) 内，由于样品溶液中的各组分在两相
中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。

二、高效液相色谱仪在石油化工的应用
高效的液相色谱分析仪在石油生产鉴定中占有重要的作用，在石油化工，农药，环保等方面，经常采用薄层色谱法(TLC)和气相色谱法(OC)进行含量测定，而液相色谱法(LC)只是用于对组分标样的测定和分离的可能性的研究。

近几年来，HPLC在油品分析，尤其是在石油中多环芳烃、重质烃的测定方面取得了突破性的进展。

以正己烷、二氯甲烷为流动相，用多维高效液相色谱技术及适宜的梯度，实现了烃族良好的分离和检测。

三、高效液相色谱仪在生命科学领域的应用
生命科学研究工作中，最大的难题就是基因的解密工作，从基因组DNA 序列尚不能回答某基因的表达时间、表达量、蛋白质翻译后加工和修饰的情况、以及它们的亚细胞分布等等。

这些在基因组中不能解决的问题可望在蛋白质组学（Proteome）研究中找到答案。

在所研究的细胞中会有3~5万种功能各异的蛋白质，目前蛋白质组研究所使用的双向电泳法一般只能分辨到2000~3000个蛋白质点。

现代蛋白质组的分析可尝试使用第一向是体积排阻色谱的双向HPLC高效液相色谱作预分离。

高效液相色谱和双向电泳将会成为蛋白质组学的重要分离工具。

用HPLC-NMR研究了异环磷酰胺的毒性和代谢物，用1H-NMR观察尿液中各种指标的变化，包括尿糖、组氨酸、三甲胺丁二酸盐、乳酸、乙酸盐、甘氨酸、丙氨酸的上升和柠檬
酸盐、马尿盐酸的下降。

使用HPLC-MS测定人血浆中的依那普利及相对生物利用度和人体药学动力学研究。

血浆样品中加入内标阿普仑后，经离心取上清液过固相萃取小柱，以甲醇洗脱，然后采用高效液相色谱质谱方法，电喷雾电离源正源选择离子峰检测，检测效果显著。

四、高效液相色谱仪在环境领域的应用
西方发达国家将HPLC方法作为常用的环境监测方法。

如美国EPA531方法，用高效液相色谱―荧光法测定饮用水中的N―甲基氨基甲酸酯杀虫剂； EPA605方法用HPLC/电化学法测废水中的联苯胺类化合物； EPA8310方法用LC/荧光分析固体废弃物中的多环芳烃，就连气体中的有害有机物不少也是用HPLC测定。

HPLC已在环境分析中得到广泛应用，特别适用于低挥发性、分子量大、热稳定性差的有机污染物质的分离和分析。

如多环芳烃、酚类、多环联苯、邻苯二甲酸酯类、联苯胺类、阴离子表面活性剂、有机农药、除草剂等。

五、结语
综上所述，高液相色谱法主要是采用新的科研技术，在化工生产和制药上占有领先的水平，生物化工，医学临床检验和环境监测等领域获得了广泛的应用和推广，其他方面的检测方法与高效的液相色谱法比较，会得出较好的结果，经过验证得出他们的可行性和准确性，高效液相色谱分析法不仅具有研究意义，还有相当长的发展前景。

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