浅议HIV检测方法及应用现状

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浅议HIV检测方法及应用现状
摘要】目的探讨人类免疫缺陷病毒(HIV)的检测方法,评价其临床应用。

方法
分析实验室检测人类免疫缺陷病毒的方法,结合相关资料评价其应用现状。

结果
检测人类免疫缺陷病毒的方法具有多样,总体分类为抗原抗体检测和病毒培养法。

结论结合检测人类免疫缺陷病毒实验室的资格认证,开展适合本实验室的检测方法,既符合人类免疫缺陷病毒检测技术规范,又对控制艾滋病流行有着重要的临
床意义。

【关键词】艾滋病毒检测方法应用现状分析
艾滋病(AIDS)又称获得性免疫缺陷综合征,是由人类免疫缺陷病毒(HIV)感染所引起的一种免疫缺陷性疾病[1]。

自1985年我国报道第一例艾滋病以来[2],艾滋
病在我国的流行趋势日趋严峻,近几年更是进入一个快速增长期[3]。

到目前为止,艾滋病尚无有效的治疗措施,因此,对可疑人群的筛查显得尤为重要。

尤其是
HIV检测是建立敏感、实用、合格的检测实验室及相应的方法的前提,对于准确
监测、诊断或血液筛查,控制艾滋病的流行显得尤为重要。

以下本文就HIV的检
测方法及应用现状做以浅议。

1 HIV检测现状
人类免疫缺陷病毒(HIV)侵入人体后,经过一系列病毒与宿主细胞接触融合变化,病毒RNA进入细胞,病毒包膜与宿主细胞膜的最终融合。

在感染后的10~
14 d内,病毒RNA水平是呈指数上升,随后下降并保持在持续稳定的水平上,进
入HIV无症状期。

在HIV感染后,由于检测方法的灵敏度不同,导致病毒检出时
间也不同。

所以从HIV感染到能够检测出HIV抗体这一时期,被称作“窗口期”。


窗口期,能够通过病毒RNA、p24抗原和CD4淋巴细胞水平来确定HIV感染,
CD4淋巴细胞水平随着感染的发展而逐渐下降,当其在血液中细胞下降到200个
/mL时,就会发生严重的免疫缺陷,患者就被确诊为艾滋病。

病毒RNA、p24抗原、HIV抗体和CD4淋巴细胞水平可以用来确定HIV感染,感染的HIV根据血清
学反应和病毒核酸序列测定。

HIV可分为2型:HIV-1型和HIV-2型[4]。

其中HIV-
1型主要分布呈全球性流行,HIV-2型主要在非洲局部地区流行。

2 HIV检测方法及应用
2.1抗体检测酶联免疫吸附分析(ELISA)方法 ELISA方法具有较高的灵敏度,
操作简单、快速,适合对大量样品的筛查检测。

因此,是目前多用于临床检验科
初筛检测方法。

ELISA也可检测P24抗原在窗口期,病毒抗体不能被检出,但可
以检测到病毒相关抗原或分离病毒。

抗原能够在个体感染后先于血清转化2~18
d被检测到。

因此,在血清转化期通过检测p24抗原有着很大的优势,可以作为
早期辅助诊断HIV感染的一种方法[5]。

此外还有IFA用于感染细胞涂片作抗原进
行抗体检测。

免疫印迹法(WB)法作为确诊实验检测方法。

2.2 病毒检测病毒检测包括细胞培养(病毒分离)、p24抗原检测和病毒核酸检测。

即用正常人外周血液分离单个核细胞,加PHA刺激并培养后,加入病人单个
核细胞诊断及艾滋病的研究中早期对HIV的诊断主要是通过血清学试验检测抗
HIV的抗体,间接地诊断HIV感染。

病毒核酸检测通常是通过检测HIV RNA水平来
反映病毒载量,具有很高的灵敏度,使用适时荧光聚合酶链反应(PCR)技术。

病毒
核酸检测方法可用于HIV的早期诊断。

2.3快速检测根据免疫层析法的原理制作的快速检测法,也称为金标法用于HIV抗体检测的快速定性检测,金标试剂条是使用胶体金免疫层析科技研发的新
一代检测试剂。

它可检测血清或血浆标本中的HIV-1/2特有性抗体。

所有操作时间仅为15分钟,动作简便、迅速、准确、自带质控对照、无需所有附加药剂。

适合感染自测,及各大医院和疾控中心快速筛查。

3 小结
目前检测HIV的方法多种多样样,但依据HIV的组成及结构不同总体可以分
为抗体检测和病毒检测两大类。

而目前国际上确认HIV试验方法包括免疫印迹试验、条带免疫试验及免疫荧光试验,目前以免疫印迹试验最为常用。

而在我国建立了由国家HIV确认中心实验室、省级HIV确认实验室、市级筛查HIV中心实验室及县级二级以上医院建立的HIV初筛实验室等构成的HIV检测实验室。

在实际检测方法中以ELISA及金标快速层析法为初筛检测方法,以免疫印迹法(WB)法作为确诊实验检测方法进行HIV筛查及检测。

总之,无论实验室开展那种检测HIV方法必须符合人类免疫缺陷病毒检测技术规范,才能规范化地为控制艾滋病
流行趋势做出积极有意义地贡献。

参考文献
[1] Gallo RC, Salahuddin SZ, Popovic M, et al.Frequent detection and isolation of cytopathic retroviruses from patients with AIDS and at risk for AIDS[J].
Science,2004,224:500-503.
[2] 陈曦,陈炎.艾滋病防治技术手册.长沙:湖南科学技术出版社,2005,14-15;151-152.
[3]强来英,林旭东,裴丽健,等.人类免疫缺陷病毒感染抗体检测窗口期血清检出.中国输血杂志,2001,14(6):341.
[4]Mylonakis E, Paliou M, Lally M, et boratory testing for infection with the human immunodeficiency virus: established and novel approaches[J]. Am J
Med,2000,109(7):568-576.
[5] 王兰兰.临床免疫和免疫学检验,第3版.北京:人民卫生出版社,2005,91-95.。

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