抗体特异性选择需考虑的四个方面

抗体特异性选择需考虑的四个方面
抗体(antibody)免疫细胞分泌免疫物质，是哺乳动物适应性免疫
系统对抗病原体的核心，它是在病原体刺激下由浆细胞（效应B细胞）所分泌的一种免疫球蛋白，能够识别并结合特异的病原体抗原，随后通过介导中和作用、调理作用、效应T细胞杀伤等来清除病原体。

随着抗体制备与改造技术的飞速进展，抗体已经广泛应用于生
命科学各个领域，包括科学讨论、诊断、治疗等。

特异性（specificity）的本质含义是"Connected with one particular thing only"即只与唯yi的特定事物相关，具有专一性。

在免疫学上我们会说"抗体具有特异性"，指的就是抗体具有专一性，某一特定的抗体只能与唯yi 一种抗原结合。

其实精确来讲是一类
具有特定抗原表位的抗原，由于某些不同的抗原具有相同的抗原表
位（称为交叉抗原），也可与同一种抗体特异性结合。

科研工作离
不开抗体，WB、IP、IHC、IF、ChIP和FC都需要用到抗体，这几种
试验方法中的抗体特异性选择需要考虑的要点了解下，特异性的选
择主要需要考虑四个方面：蛋白特异性、种属特异性、试验方法特
异性、标记物的特异性。

1.蛋白特异性
针对需要检测的蛋白查找抗体，几个细节要区分：
a.重组蛋白假如不是全长表达，则需要留意抗体的免疫原区域是
否在重组蛋白区域内。

b.内源性蛋白好能清晰其剪切与修饰的方式，特别表型的蛋白需
要进行序列比对，并结合抗体免疫原序列，查看交叉反应的状况。

c.磷酸化蛋白检测需要确定详细位点，不同位点的磷酸化意味着
可能有不同的机制存在，不宜一概而论。

2.种属特异性
同种蛋白不同物种，有着或大或小的差异。

a.目前大部分商品化抗体都是以人源蛋白序列为模板重组蛋白或
设计多肽抗原的，依据蛋白的同源性的状况与其他种属发生交叉反应。

需要参照说明书注明的可反应种属信息。

b.一些稀有种属很难找到抗体，可以通过蛋白的序列比对，选择
同源序列免疫的抗体，不过一般这种状况生产商不会受理其关于质
量的申诉，假如可以申请到免费的抗体样品，则利于抗体选择。

3.试验方法特异性
目前使用抗体的试验方法有许多，不同的使用方法过程中，由于
对蛋白样品的处理方式不一样，蛋白的含量有差异，对抗体的识别
表位和效价要求都是不一样的。

4.标记物的特异性
一般基于试验操作的试验方法不会使用带有标记的一抗，比如 WB、IHC 等，都是通过二抗类的试剂标记达到结果呈现的目的。

但是基
于仪器分析的一些试验，可能就会使用到直接标记的一抗，比如流
式试验。

那么需要了解到自己将要使用的仪器能检测到的荧光范围，针对不通的参数要求选择对应的标记物。

在免疫荧光双标试验中，
需要选配不同的荧光标记物。