乙醇浓度对滁菊多类成分提取率影响

乙醇浓度对滁菊多类成分提取率影响
张小倩;时维静;邓家胜;于艳;展平;张冬生
【摘要】考察不同浓度乙醇对滁菊花各类成分提取率影响.采用超声波法,提取温度70℃,提取时间为30min,提取次数为3次,料液比为1∶30,超声功率为200W;采用紫外可见分光光度法检测各类成分含量.结果表明,60％乙醇溶液提取滁菊花总得膏率最高,为47.52％;70％乙醇溶液提取滁菊花总黄酮得率最高,为10.86％;80％乙醇溶液提取滁菊花总酚得率最高,为3.02％;水溶液提取滁菊花总糖得率最高,为
4.27％.乙醇浓度对滁菊花不同成分提取率有一定影响.
【期刊名称】《安徽科技学院学报》
【年(卷),期】2013(027)006
【总页数】4页(P44-47)
【关键词】滁菊;乙醇浓度;提取率;含量测定
【作者】张小倩;时维静;邓家胜;于艳;展平;张冬生
【作者单位】安徽科技学院食品药品学院,安徽凤阳233100;安徽科技学院食品药品学院,安徽凤阳233100;安徽科技学院食品药品学院,安徽凤阳233100;安徽科技学院食品药品学院,安徽凤阳233100;安徽科技学院食品药品学院,安徽凤阳233100;安徽科技学院食品药品学院,安徽凤阳233100
【正文语种】中文
【中图分类】R282.7
滁菊为菊科植物菊(Chrysanthemum morifolium Ramat.)的干燥头状花序，是安徽省滁州地区特产，具有疏散风热、平肝明目之功效。

现被广泛用于医药卫生、食品饮料，美容保健等［1］。

“金玉滁菊”获国家绿色食品称号，成为消费者所青睐的保健饮用品［2］。

具有防治心血管疾病、抗氧化以及抗肿瘤等多种药理活性和保健作用［3］。

主要活性成分为黄酮类、酚类、糖类等物质［4－7］。

本试验采用超声波提取，考察水溶液及不同浓度乙醇对滁菊花总提取物、黄酮类、酚类、糖类等提取率的影响，为医药及保健品生产选择溶剂提供参考。

1 材料与方法
1.1 试药与仪器滁菊，2011年10月采集产于安徽省滁州市全椒县滁菊种植基地，经安徽科技学院食品药品学院时维静教授鉴定为 Dendranthema
morifolium(Ramat.)Tzvel.cv.“Chuju”。

芦丁对照品(100080－200707)、焦性没食子酸对照品(111672－200401)，购自中国药品生物制品检定所;葡萄糖、硝酸铝、硫酸、重蒸酚、福林酚等试剂均为AR级，购自国药集团化学试剂有限公司。

CP225D型准微量天平，北京赛多利斯仪器有限公司;TU－1810SPC型紫外可见
分光光度计，北京普析通用仪器有限责任公司;KQ－500DE型数控超声波清洗器，昆山市超声仪器有限公司;DZF－6050型真空干燥箱，上海三发科学仪器有限公司。

1.2 方法
1.2.1 供试品制备精密称取滁菊粗粉9份，每组10.00g置500mL锥形瓶中，分
别加入0%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%浓度乙醇
300mL。

超声波提取，功率200W，提取温度70℃，提取时间30min，各提取3次，合并3次滤液，水浴浓缩，加蒸馏水定容至50mL(0.2g生药/mL)，贮存备测。

1.2.2 浸出物的测定精密量取20mL提取液(4.00g药材量)，置已知重量，干燥至
恒重的蒸发皿中，水浴蒸干后，于105℃干燥至恒重，置干燥器中冷却30min，
迅速精密称定重量，计算各供试品浸出物的含量(%)。

提取得率计算公式:提取得率=提取物干重/原料干重。

1.2.3 总黄酮含量的测定
1.2.3.1 对照品溶液的配制精密称取芦丁对照品5mg，置25mL量瓶中，70%乙
醇溶解并定容至刻度，配制成0.200mg/mL的对照品溶液，冷藏备用。

1.2.3.2 测定波长选择以空白溶液做基线扫描，再以芦丁对照品溶液，600nm～400nm进行光谱扫描，测定最大吸收波长。

1.2.3.3 标准曲线绘制精密吸取芦丁对照品溶液 0mL，1.0mL，2.0mL，3.0mL，4.0mL，5.0 mL，分别置10 mL量瓶中，加5%亚硝酸钠溶液0.3mL，摇匀，放
置6min，加10%硝酸铝溶液0.3mL，振摇，放置6min，再加4%氢氧化钠溶液
4mL，摇匀，用蒸馏水定容至刻度，放置15 min。

最佳吸收波长处测定吸光度，以芦丁浓度(C)为横坐标，吸光度(A)为纵坐标，建立线性方程。

1.2.3.4 供试液总黄酮含量测定分别精密吸取供试液1.5mL至100mL容量瓶，30%乙醇溶液定容至刻度。

再分别精密吸取1mL于10mL试管中，按“1.2.3.3”项顺序加入亚硝酸钠等溶液，测定吸光值，计算总黄酮含量。

1.2.4 总酚含量的测定
1.2.4.1 对照品溶液的配制精密称取焦性没食子酸对照品5mg，置50mL棕色容
量瓶中，加适量蒸馏水振荡使溶解，并定容至刻度，配成0.10mg/mL的对照品溶液，冷藏备用。

1.2.4.2 测定波长选择以空白溶液做基线扫描，焦性没食子酸对照品溶液，
900nm～600nm进行光谱扫描，测定最大吸收波长。

1.2.4.3 标准曲线绘制精密吸取焦性没食子酸对照品溶液0.0mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL 分别置25mL 棕色容量瓶中，各加入福林酚试剂1.0mL，再分别加水12mL、11.0mL、10.0mL、9.0 mL、8.0mL、7.0mL。

用29%碳酸钠
溶液稀释至刻度，摇匀，放置30min。

最大吸收波长处测定吸光度。

以没食子酸浓度(C)为横坐标，吸光度(A)为纵坐，建立线性方程。

1.2.4.4 供试液总酚含量测定精密吸取供试液1mL，置10mL量瓶中，用蒸馏水定容至刻度。

精密吸取供试液4.0mL置25mL棕色量瓶中，按“1.2.4.3”项顺序加入福林酚等溶液，测定吸光度，计算总酚含量。

1.2.5 总糖含量的测定
1.2.5.1 对照品溶液的配制精密称取干燥至恒重的葡萄糖对照品10mg，置于100mL容量瓶中，加蒸馏水使溶解并定容至刻度。

配制成0.10mg/mL的对照品溶液，备用。

1.2.5.2 测定波长选择以空白溶液做基线扫描，葡萄糖对照品溶液，从600nm～400nm进行光谱扫描，测定最大吸收峰波长。

1.2.5.3 标准曲线的绘制精密吸取葡萄糖对照品溶液 0.0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mL，分别置于 25mL容量瓶中，蒸馏水定容至刻度。

各取0.5mL溶液置
10ml容量瓶中，加浓硫酸7.5mL和5%苯酚1.5mL，于40℃保温30min。

于最大吸收波长处测定吸光度，以葡萄糖浓度(C)为横坐标，吸光度(A)为纵坐标，建立线性方程。

1.2.5.4 供试液总糖含量测定精密吸取供试液1mL置于500mL容量瓶中，蒸馏水定容，再精密吸取0.5mL置于10mL容量瓶中，按“1.2.5.3”项顺序操作。

于最大吸收波长处测定吸光度，计算总糖含量。

2 结果与分析
2.1 不同浓度乙醇对菊花的总提取物影响
从图1看出，不同乙醇浓度对菊花总物质提取有较大影响，60%乙醇提取得率最高，超过90%后提取率明显下降。

图1 不同浓度乙醇对菊花提取得率的影响Fig.1 Effects of total extraction yield
by different concentrations ethanol
2.2 不同浓度乙醇对菊花总黄酮提取率影响
芦丁对照品最大吸收波长为509nm，所得线性方程为A=0.01098C+0.02223，
R2=0.9990，表明芦丁在0～100μg/mL浓度范围内与吸光度值呈良好线性关系。

从图2可以看出，乙醇浓度达到70%时，菊花总黄酮的提取率最高。

乙醇浓度继
续增大，总黄酮提取率反而下降。

图2 不同浓度乙醇对菊花总黄酮提取的影响Fig.2 Effects of total flavonoids extraction rate by different concentrations ethanol
2.3 不同浓度乙醇对菊花总酚提取率影响
焦性没食子酸对照品最大吸收波长为760nm。

线性方程为A=0.1215C+0.0575，R2=0.9993，表明焦性没食子酸在4～20μg/mL浓度范围内与吸光度呈现良好线性关系。

由图3可知，乙醇浓度在80%时菊花总酚提取率最高。

图3 不同浓度乙醇对菊花总酚提取的影响Fig.3 Effects of total polyphenols extraction rate by different concentrations ethanol
2.4 不同浓度乙醇对菊花多糖提取率影响
葡萄糖对照品最大吸收波长为490 nm，线性方程为C=0.0025A－0.00978，
R2=0.9994。

表明在4～20μg/mL的浓度范围内具有良好的线性关系。

从图4可以看出，随着乙醇浓度的增高，总糖提取率呈下趋势，提示菊花总糖以水提最佳。

图4 不同浓度乙醇对菊花总糖提取的影响Fig.4 Effects of total sugar extraction rate by different concentrations ethanol
3 讨论
对菊花等用于保健食品的原料提取，为避免有机溶剂的残留，常用水及不同浓度的乙醇作为提取溶媒。

水可与乙醇按不同比例混合而配成梯度浓度溶剂，不同浓度梯度的乙醇溶液对植物中化学物质溶出度有一定影响。

本次试验结果表明，60%乙
醇溶液提取滁菊花总提取物的干浸膏得率最高，为47.52%;70%乙醇溶液提取滁
菊花总黄酮得率最高，为10.86%;80%乙醇溶液提取滁菊花总酚得率最高，为
3.02%，水溶液提取滁菊花总糖得率最高，为
4.27%。

试验结果提示，提取滁菊
的目标物质不同，选择不同乙醇浓度，可获得较高的提取效率。

参考文献:
［1］时维静.菊花鉴别与活性成分检测的研究进展［J］.中国医药科学，2012，
2(15):9－11.
［2］王龙，王德群，韩邦兴.滁菊茶用与药用的发展变化［J］.安徽中医学院学报，2010，29(6):75－77.
［3］付为琳，孙桂菊.菊花的有效成分、功效、提取工艺及开发前景［J］.食品工
业科技，2008，29(3):296－299.
［4］张建勇，江和源，袁新跃，等.菊花总黄酮、多酚及水浸出物含量分析［J］.
中国农学通报，2010，26(9):102－105.
［5］张桂青，李雪玲，夏涛.菊花多糖最佳提取工艺研究［J］.安徽农业大学学报，2006，33(4):555－559.
［6］刘利军，于艳，时维静.安徽省3种药用菊花总黄酮含量比较［J］.安徽科技学院学报，2012，26(4):47－50.
［7］程宏英.菊花活性成分测定与指纹图谱研究［D］.无锡:江南大学，2007.。