实验一 植物组织渗透势的测定 (质壁分离法)
植生实验 植物组织渗透势的测定
实验一、植物组织渗透势的测定（质壁分离法）一、实验原理：将植物组织分别投入一系列浓度梯度的溶液中，使细胞将要产生初始质壁分离的浓度，就等于细胞液的浓度，根据浓度可计算出渗透势。
【注：：典型植物细胞水势(Ψw)组成为：ψw=ψs+ψp+ψm （ψs 为渗透势，ψp为压力势，ψm为衬质势）。
渗透势（osmotic potential，ψs）：由于溶质的存在而使水势降低的值称为渗透势或溶质势（solute potential，ψs），以负值表示。
渗透势值按公式ψs=-iCRT来计算（C为溶液的摩尔浓度；T为绝对温度，即实验温度+273；R为气体常数，R=0.0083；i为渗透系数，表示电解质溶液的渗透压非电解质溶液渗透压的倍数，如蔗糖i=1，NaCl i=1.8）。
压力势（pressure potential，ψp）：由于细胞吸水膨胀时原生质向外对细胞壁产生膨压（turgor），而细胞壁向内产生的反作用力——壁压使细胞内的水分向外移动，即等于提高了细胞的水势。
由于细胞壁压力的存在而引起的细胞水势增加的值叫压力势，一般为正值。
当细胞失水时，细胞膨压降低，原生质体收缩，压力势则为负值。
当刚发生质壁分离时压力势为零。
衬质势（matrix potential, ψm）：衬质势是细胞胶体物质亲水性和毛细管对自由水的束缚而引起的水势降低值，如处于分生区的细胞、风干种子细胞中央液泡未形成。
对已形成中心大液泡的细胞含水量很高，ψm只占整个水势的微小部分，通常一般忽略不计。
因此一个具有液泡的成熟细胞的水势主要由渗透势和压力势组成,即ψw=ψs+ψp 】。
将细胞置于纯水或稀溶液中，外液水势高于细胞水势，外侧水分向细胞内渗透，细胞吸水，体积变大；外液水势等于细胞水势，水分进出平衡，细胞体积不变；将植物置于浓溶液中，外液水势低于细胞水势，水从细胞内向外渗透，细胞失水，体积变小。
将植物材料（带色洋葱表皮组织）置于浓溶液中，由于细胞壁的伸缩性有限，而原生质层的伸缩性较大，当细胞继续失水时，原生质层便和细胞壁慢慢分离开来，这种现象被称为质壁分离。
植物生理学实验
实验一植物细胞渗透势的测定（质壁分离法）一、原理将植物组织放入一系列不同浓度的蔗糖溶液中，经过一段时间后，植物细胞与蔗糖溶液之间将达到平衡状态。
如果在某一溶液中细胞脱水达到平衡时刚好处于临界质壁分离状态，则细胞的压力势ψp将下降为零，此时细胞液的渗透势ψπ等于外液的渗透势ψπ′，即ψπ＝ψπ′。
此溶液称为该组织的等渗溶液，其浓度称为该组织的等渗浓度，即可计算出细胞液的渗透势。
实际上临界质壁分离状态镜下很难看到，一般以初始质壁分离作为判断等渗浓度的标准。
（细胞水势=渗+压+衬，其中渗=外渗=-iCRT）（注：内外浓度差不一定质壁分离，因为外高内低才会分离）二、器材、试剂与材料1、器材：显微镜，小培养皿（60mm），载盖玻片，温度计，试剂瓶，吸水纸等。
2、试剂：1mol/L蔗糖溶液，蔗糖系列标准溶液。
3、材料：洋葱。
三、操作步骤1、取干燥、洁净培养皿9套，顺序编号，顺序加入蔗糖系列标准溶液，呈一薄层，盖好皿盖。
（为什么？）2、用镊子撕取材料内表皮（0.5cm见方即可），吸去表面水分，迅速浸入上述培养皿中，每皿4—5片。
3、经20～30min（为什么等这么长时间？因为达渗透平衡）记录室温，同时从高浓度开始依次取出材料放于载片上，滴一滴同浓度的蔗糖溶液，盖上盖片，显微镜下观察。
若所有细胞都发生质壁分离现象，则取相邻低浓度的材料观察，并记录质壁分离的相对程度。
若有50％左右细胞发生初始质壁分离(即原生质体刚从细胞壁的角隅处分离)，则该浓度就是等渗浓度。
若两个相邻浓度的材料中，一个未发生质壁分离，另一个发生质壁分离数超过50％，则两浓度平均值即为等渗浓度。
4、由所得的等渗浓度和室温计算细胞液的渗透势：ψπ＝ψπ′＝－iCRT(MPa)，其中：ψπ——细胞的渗透势，MPa；ψπ′——供试溶液的渗透势，MPa；C——供试溶液的浓度，moL/L；R——气体常数，0.008314·L·MPa／(moL·K)；T——绝对温度，(273十t℃)K；i——等渗系数，蔗糖为1。
植物生理学实验讲义最新
实验一植物组织渗透势的测定（质壁分离法）一、实验目的植物细胞的渗透势主要取决于溶液的溶质浓度，因此又称溶质势。
渗透势与植物水分代谢、生长及抗性密切相关。
在干旱、盐渍等条件下，一些植物常在细胞内主动积累溶质，以降低其渗透势，增加吸水能力，在一定程度上保持膨压，保持细胞的生长和气孔的开放，这种现象称为渗透调节作用。
渗透调节能力的大小可以用逆境条件下细胞的渗透势的降低值来表示，在水分生理与抗性生理研究中经常需要测定。
掌握质壁分离法测定植物细胞渗透势的原理和方法。
二、实验原理当植物组织细胞内的汁液与其周围的某种溶液处于渗透平衡状态，植物细胞内的压力势为零时，细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势，该溶液的浓度称为等渗浓度。
当用一系列梯度浓度溶液观察细胞质壁分离时，细胞的等渗浓度将介于刚刚引起初始质壁分离的浓度和尚不能引起质壁分离的浓度之间的溶液浓度。
带入公式即可计算出其渗透势。
三、实验材料、仪器设备和试剂1. 实验材料洋葱鳞茎（最好是紫色洋葱）2. 仪器设备光学显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、干净的小培养皿、滴瓶、吸水纸。
3. 试剂（1）1 mol/L蔗糖溶液，（2）蔗糖系列标准液以1 mol/L蔗糖溶液作为母液，配置梯度溶液: 0.20、0.30、0.35、0.40、0.45、0.5、0.55、0.60、0.65、0.70 mol/L的蔗糖溶液。
四、实验步骤1. 取10套干燥洁净的小培养皿，编号，将配制好的不同浓度的蔗糖溶液按顺序倒入各个培养皿中使成一薄层，盖好皿盖。
2. 用刀片在洋葱鳞片外表皮或其它带有色素的组织表皮上纵横划成0.5cm2左右的小块，用镊子将表皮小块轻轻撕下，依次迅速投入各浓度蔗糖溶液中，每个培养皿中放材料3个左右，使其完全浸没，并立即盖好皿盖。
浸泡10～15分钟。
3. 从0.70 mol/L 蔗糖溶液开始依次取出表皮薄片放在滴有同样溶液的载玻片上，盖上载玻片，于显微镜下观察，如果所有细胞都产生质壁分离的现象，则取低浓度溶液中的表皮做制片，进行同样观察，并记录质壁分离的相对程度。
植物生理学实验教案
植物生理学实验教案实验指导书：候书林主编. 植物生理学实验指导.科学出版社，2004 实验一、植物组织渗透势测定-质壁分离法实验二、植物组织水势测定-小液流法实验三、叶绿体色素的提取与分离及理化性质鉴定实验四、叶绿素a,b 含量测定实验五、植物体内几种呼吸酶的测定实验六、植物叶面积测定实验七、植物根系对离子的选择性吸收实验八、叶片光合速率的测定及光合仪的使用实验九、种子活力的快速测定实验十、植物组织可溶性糖含量的测定实验十一、低温对植物的伤害实验十二、丙二醛含量的测定实验一、植物组织渗透势测定-质壁分离法[原理]将植物组织置于对其无毒害的一系列不同浓度的溶液里处理一定时间，然后镜检发生质壁分离的细胞数，通常视野中有50％的细胞发生质壁分离时定为初始质壁分离，细胞初始质壁分离时压力势为零，因而可把引起细胞初始质壁分离的外界溶液称之为等渗溶液，其溶液具有的渗透势即为细胞的渗透势。
由于很难正好找到引起50％细胞发生质壁分离的浓度。
因此通常用插值法求得等渗溶液浓度，代入公式即可计算渗透势。
[器材与试剂]器材：显微镜，载玻片，盖玻片，镊子，刀片，培养皿(或具塞试管)，记号笔，滴管。
试剂：蔗糖。
[方法与步骤]1. 配制0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7mol蔗糖/L水的质量摩尔浓度，贮6个试剂瓶中，必要时配制溶液浓度的相差可≤0.05mol蔗糖/L水。
2. 取6套干净清洁的小培养皿，用记号笔编号，将配制好的不同浓度的蔗糖溶液按顺序倒入各个培养皿中使成一薄层，盖好皿盖。
3. 将带有色素的植物组织或叶片(可选用有色素的洋葱鳞片的外表皮，紫鸭跖草，蚕豆，小麦，玉米等叶的表皮)撕取表皮迅速分别投入各种浓度的蔗糖溶液中，每个培养皿中放材料3个左右，使其完全浸没，浸泡20-40分钟。
4. 到时后，取出表皮，放在载玻片上，滴一滴相同浓度的蔗糖，盖上盖玻片，在显微镜下观察质壁分离的细胞数和细胞总数，直接或间接(插值法)地找出引起50％细胞发生质壁分离的外界溶液浓度，即为细胞渗透浓度值。
实验 1 植物细胞渗透势的测定.
6. 根 据 公 式 ψs=-CiRT, 计 算 出 所 测 材 料 的 ψw (ψs).
实验报告
1、简述实验原理 2、简述实验步骤 3、完成植物细胞渗透势测定记载表（表中
需包括有质壁分离的细胞占总细胞的％）， 说明或计算出等渗浓度。
实验 2 叶绿体色素的提取分离 及其性质鉴定
一、目的
实验 1 植物细胞渗透势的测定 （质壁分离法）
目的
1.学会用质壁分离法测量植物细胞水势。
材料用具及仪器药品
洋葱、显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、刀 片、滴管、培养皿、蔗糖溶液
原理
植物细胞是一个渗透系统，若将植物细胞放在各种不 同浓度的蔗糖溶液中时，由于细胞液的浓度与外界溶液的 浓度（或水势）的差异。两者便会发生水分的交换。
把植物的这些必要矿质元素用适当的无机盐配 成培养液，对植物进行培养，即能使植物正常生 长发育，这种培养法叫溶液培养法。
实验材料
玉米苗
实验步骤
1. 取7个500ml培养瓶，分别装入完全培养液， 缺N、缺P、缺K、缺Ca、缺Mg、缺Fe培养液 500ml，贴上标签，写明日期。培养液配法详 见植物生理学实验指导（12页）表3-2。
计算结果：
CA = 12.7 D663 - 2.59 D645 CB = 22.9 D645 - 4.67 D663 • CT = CA + CB = 20.3 D645 + 8.04D663
• 叶绿素含量 ( mg/g 鲜重 ) =
•
• 叶绿素浓度 ( mg /l ) × 提取液总体积 (ml)
对透性。 相对电导率（％）＝R1/R2 X 100%
4、植物在不良的环境下，其电导度会增高吗？ 为什么？
植物组织水势的测定 质壁分离法
植物组织水势的测定质壁分离法水势是植物生长的一个重要指标，反映了植物内部水分的分布情况和物质运输情况。
而测定植物组织的水势对于研究植物干旱适应机制、水分调节机制等方面具有重要意义。
质壁分离法是一种常用的测定植物组织水势的方法，下面本文将详细介绍这种方法的原理、步骤和注意事项。
一、原理质壁分离法比较适用于脆性植物样品，如草本植物、叶片等。
这种方法的基本原理是利用质壁分离的原理，在未破坏细胞壁的情况下将细胞质与细胞外液分开，并通过测量两者的渗透压来计算出植物组织的水势。
二、步骤1、样品的收集与处理：首先需要收集新鲜的样品，例如嫩叶、嫩枝等，而且需避免在干燥和潮湿环境下取样。
处理时要将样品快速冷藏至4℃以下，以减缓水势的变化。
2、样品的加工：将样品进行切片、碎片或打浆处理，以使细胞破裂后自然分层。
然后取出分散的细胞组织保存备用。
3、测定细胞外液的渗透压：将所收集的分散组织放在额外的离心管中，在高速离心下分离出细胞外液，并通过比色法或折射仪测定其渗透压。
4、测定细胞液的渗透压：将分离出的细胞组织放在离心管中，离心到细胞组织形成上下两层。
收集上层细胞液，利用比色法或折射仪测定其渗透压。
5、计算水势：根据水势的公式计算样品的水势值，一般情况下使用质壁分离法测得的水势值为负值。
三、注意事项1、样品处理时需要快速，避免过度破坏细胞，导致结果偏差。
2、实验过程要保持温度和相对湿度适宜。
过高的温度或干燥的环境会影响样品的水势。
3、出于实验操作精度和结果准确度的考虑，针对实验数据要进行重复。
4、实验中所用的溶液浓度和温度要严格控制，以避免人为误差。
总之，质壁分离法是一种简单可靠的测定植物组织水势的方法，但实验操作人员需要严格控制实验条件，确保结果的准确性。
实验植物组织渗透势的测定(质壁分离法)
实验1 植物组织渗透势的测定（质壁分离法）一、实验目的观察植物组织在不同浓度溶液中细胞质壁分离的产生过程及其用于测定植物组织渗透势的方法。
二、实验原理当植物组织细胞内的汁液与其周围的某种溶液处于渗透平衡状态，植物细胞内的压力势为零时，细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势。
该溶液的浓度称为等渗浓度。
当用一系列梯度浓度溶液观察细胞质壁分离现象时，细胞的等渗浓度将介于刚刚引起初始质壁分离的浓度和尚不能引起质壁分离的浓度之间的溶液浓度。
代入公式即可计算出渗透势。
三、实验仪器、试剂、材料等显微镜；载玻片及盖玻片；镊子；刀片配成0.5—0.1mol/L梯度浓度的蔗糖溶液各50ml。
称34.23g蔗糖用蒸馏水配成100ml，其浓度为1m0le/L（母液）。
再配制成下列各种浓度：0.50mol/L：吸母液25ml+水25ml0.45mol/L：吸母液22.5ml+水27.5ml0.40mol/L：吸母液20.0ml+水30.0ml0.35mol/L：吸母液17.5ml+水32.5ml0.30mol/L：吸母液15.0ml+水35.0ml0.25mol/L：吸母液12.5ml+水37.5ml0.20mol/L：吸母液10.0ml+水40.0ml0.15mol/L：吸母液7.5ml+水42.5ml0.10mol/L：吸母液5.0ml+水45.0ml四、实验方法将带有色素的植物组织（叶片），一般选用有色素的洋葱鳞片的外表皮、紫鸭跖草、苔藓、红甘蓝或黑藻、丝状藻等水生植物，也可用蚕豆、玉米、小麦等作物叶的表皮。
撕取下表皮，迅速分别投入各种浓度的蔗糖溶液中，使其完全浸入，5—10分钟后，从0.5mol/L开始依次取出表皮薄片放在滴有同样溶液的载玻片上，盖上盖玻片，于低倍显微镜下观察，如果所有细胞都产生质壁分离的现象，则取低浓度溶液中的制片作同样观察，并记录质壁分离的相对程度。
实验中必须确定一个引起半数以上细胞原生质刚刚从细胞壁的角隅上分离的浓度，和不引起质壁分离的最高浓度。
实验一植物细胞渗透势的测定
实验一植物细胞渗透势的测定（质壁分离法）植物细胞的渗透势主要取决于细胞的溶质浓度，因此又称溶质势。
渗透势与植物水分代谢、生长及抗性等有密切关系。
已知在干旱、盐渍等条件下，一些植物常在细胞内主动积累溶质，以降低其渗透势，增加吸水能力，而在一定程度上维持澎压，保障细胞的生长和气孔的开放，这种现象叫做渗透调节作用。
渗透调节能力的大小可以用逆境条件下细胞渗透势地降低值来表示，在水分生理与抗性生理研究中经常需要测定。
以下介绍两种测定方法。
[原理] 将植物组织放入一系列不同浓度的蔗糖溶液中，经过一段时间，植物细胞与蔗糖溶液间将达到渗透平衡状态。
如果在某一溶液中细胞脱水达到一平衡时刚好处于临界质壁分离状态，则细胞的压力势ψs 等与外液的渗透势ψso,即ψs=ψso，此溶液称为该组织的等渗溶度，其溶度称为该组织的等渗浓度，即可计算出细胞也渗透度（ψs0）。
实际测定时，由于临界质壁分离状态难以在显微镜下直接观察到，所以一般均以初始质壁分离作为判断等渗浓度的标准。
处于初始质壁分离状态的细胞体积，比吸水饱和时略少，故细胞也浓缩而渗透势略低于吸水饱和时的渗透度，此种状态下的渗透势称基态渗透势。
[仪器与用具] 显微镜1台；载玻片与盖玻片各若干；温度计1支；尖头镊子1把；刀片1片；100ml试剂瓶9套；500ml试剂瓶9套；烧杯、容量平、量筒、吸管等；吸水纸适量。
[试剂]1 mol浓度的蔗糖溶液（1000ml水溶解342.3g蔗糖）称取预先在60～80℃下烘干的蔗糖34.2g，溶于100ml蒸馏水中，即为1摩尔浓度的蔗糖溶液。
0.03%中性红溶液。
蔗糖系列标准液：取干燥洁净的小试剂瓶9号编号，用1摩尔浓度的蔗糖溶液依C 1V1=C2V2公式配置0.30、0.35、0.40、0.45、0.50、0.60、0.70摩尔浓度等一系列不同浓度的蔗糖溶液（具体范围可根据材料不同而加以调整），贮于试剂瓶中，瓶口加塞以防蒸发浓缩。
[方法]：1.用洋葱的外内表皮或紫色鸭跖草的表皮等作实验材料。
植物组织渗透势的测定（质壁分离法）
实验一植物组织渗透势的测定（质壁分离法）一、原理成长的植物细胞是一个渗透系统，当把细胞置于一定浓度溶液中时，当植物组织细胞内的汁液与其周围的某种溶液处于渗透平衡状态，且此时植物细胞内的压力势为零时，那么细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势。
该溶液的浓度称之为等渗浓度。
当用一系列梯度浓度溶液观察细胞质壁分离现象时，细胞的等渗透浓度将界于刚刚引起初始质壁分离的浓度和与其相邻的尚不能引起质壁分离的浓度梯级之间的溶液浓度。
代入公式即可计算出其渗透势二、仪器药品显微镜载玻片及盖玻片镊子刀片培养皿8套滤纸1M蔗糖溶液滴管三、实验步聚1．梯度浓度溶液的配制：用1M蔗糖溶液为母液，分别吸取8，7，6，5，4，3，2ml溶液于试管中，各加入蒸馏水至10ml，即成0.8，0.7，0.6，0.5，0.4，0.3，0.2M的梯度溶液。
用移液管，从0.2M依次取一定量的溶液（3ml），盛于培养皿内，盖上盖，贴上标签待用。
2．将带有色素的植物组织（叶片），一般选用有色素的洋葱鳞片的外表皮，紫鸭跖草，苔藓，红甘蓝及黑藻，丝状藻等水生植物，也可用乔豆，玉米、小麦等作物叶的表皮。
用镊子撕取下表皮，迅速分别投入各种浓度的蔗糖溶液中，使其完全浸入，3．5—10分钟后，从0.5M开始依次取出表皮薄片放在滴有同样溶液的载玻片上，盖上盖玻片，于显微镜下观察是否所有细胞都产生质壁分离的现象，实验中必须确定一个引起半数以上细胞原生质刚刚从细胞壁的角隅上分离的浓度，和不引起质壁分离的最高浓度。
取二者的平均值为等渗透势。
4．按照公式把等渗浓度换算成渗透势，以MPa表示之。
ψπ=－RTiCψπ表示欲测渗透势，MPa；R表示气体常数：0.008314( MPa ·L/M·K)；T表示绝对温度，即(273+t℃) K；i 表示解离系数，蔗糖等于1。
C表示等渗溶液的浓度，则：ψπ=－0.008314×(273+ t℃)×1×C测出引起质壁分离刚开始的蔗糖溶液浓度和与其相邻的不引起质壁分离最高浓度之后，可按下列公式计算在常压下该组织细胞质液的渗透势。
植物组织渗透势的测定
1.液泡（vacuole）
液泡是植物细胞的特征结构。它是由一层单位膜包 围的囊泡，其中充满细胞液（cell sap），成熟的植 物细胞有一个中央液泡，可占据细胞体积的90％， 其中除大量的水分外，还含有无机离子、有机酸、 糖类、可溶性蛋白、酶和次生代谢物质花青素、生 物碱等。由于液泡内含有的无机离子、有机酸、糖 类等，再加上液泡膜的选择性，因而会影响细胞水 势的变化，具有渗透调节能力。
液浓度之平均值的渗透势相等。
试管 载玻片
编号
取洋葱皮(3-5片) 放入试管中
配制溶液 8种(各5mL)
制片 8个
1、取载玻片； 2、滴原浓度的溶液于载玻片上，
放洋葱皮； 3、盖好盖玻片； 4、低倍镜找细胞，高倍镜下观察质壁分离情况。
找两个极限 浓度
1.引起一半细胞刚从角隅处分离的浓度 2.不引起质壁分离的最高浓度
introduction
王 钰 安徽大学生命科学院
Tel： 5108373(O)
Email：yuwang800@ wangyu@
主要研究领域：植物细胞工程 植物分子生物学 植物生理育种
感谢
研究生蒋琳、余家平、张晨晨同学协 助实验！
王丽丽老师准备实验材料！ 同学们的认真参与！
为负值。
水势＝渗透势＋压力势（＋衬质势）
ψw＝ ψs＋ ψp
细胞的水势不是固定不变得。ψw、 ψs、ψp随着含水量的增加而增
高；反之，则降低。
3.渗透势（osmotic potential）
－－溶质势（solute potrntial）
渗透势：由于溶质颗粒的存在而引起水势降低的数
值,称渗透势。用ψs（ ψπ）表示。计算公式：
计算
五、计算渗透势
质壁分离法测定植物细胞的渗透渗出势[整理版]
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质壁分离法测定植物细胞的渗透势一、实验目的1．掌握植物细胞渗透势的测定方法。
2．根据所测植物细胞渗透势的大小，对比各植物的抗盐性强弱。
二、实验原理在植物生活细胞和外界溶液构成的渗透体系中，水分总是从高水势一方流向低水势一方。
放入不同浓度蔗糖溶液中的植物生活细胞，有的吸水，有的失水，直至发生质壁分离。
当在某一浓度蔗糖溶液中的细胞发生初始质壁分离时，外界溶液渗透势等于植物细胞渗透势，所以通过计算此时的外界溶液渗透势，即得出植物细胞的渗透势。
三、实验仪器及材料1．仪器：显微镜。
2．材料：载玻片、盖玻片、镊子、刀片、称量瓶、小滴瓶（50mL 容量瓶（50mL）。
3．试剂：0.10~0.50mol/L蔗糖溶液(浓度间隔0.05mol/L)，或用NaCl溶液。
(1) 1.00mol/L蔗糖（C12H22O11）溶液：称取342g蔗糖，用蒸馏水溶于1000mL烧杯中，再转移到1000mL容量瓶中，并稀释至刻度，摇匀。
（2）0.10~0.50mol/L蔗糖溶液：分别吸取 5.0、7.5、10.0、12.5、15.0、17.5、20.0、22.5、25.0mL的1.00mol/L蔗糖溶液，转移到50mL 容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。
配成0.10、0.15、0.20、0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、0.50mol/L蔗糖溶液。
4．样品：大葱、洋葱鳞茎、大麦叶片等。
四、实验步骤1．将0.10~0.50mol/L蔗糖溶液分别注入干净带盖的称量瓶内。
2．用刀片切取样品表皮组织小片，每瓶各投放2片，使其完全浸没，置10分钟，并记录室温。
3．按蔗糖溶液浓度由浓到稀顺序取出组织小片，放在载玻片上，加1滴原称量瓶内溶液，盖上盖玻片，置于显微镜下观察。
确定使50%的表皮组织细胞发生初始质壁分离的蔗糖溶液浓度。
如果该浓度界于两个相邻浓度之间，则取两相邻浓度的平均值。
五、结果计算ψs=- iCRT式中：ψs——渗透势，bar；i——等渗系数，i=1；C——蔗糖溶液浓度，mol/L；R——气体常数，R=0.083L·bar/M·K；T——绝对温度，T=273+t℃。
实验一 植物组织渗透势的测定 (质壁分离法)
4.实验记录 实验人
时期
材料名称
实验室温度
0.40 0.35 0.30
℃
0.25
蔗糖摩尔浓度（mol/L） 0.55 0.50 0.45
质壁分离的相对程度
5. 计算：
Ψπ =-icRT
Ψπ为细胞渗透势，一般以MPa (兆帕)为单位。 R为气体常数，为0.008314MPa.L/(mol.K) T为绝对温度，单位K，即273+t，t为实验温度（℃）。 i为解离系数，蔗糖为1。 C为等渗溶液的浓度，单位为mol/L。 则：Ψπ =-1×C×0.008314×(273+t) (MPa)
剥取洋葱鳞茎表皮05cm迅速投入各种浓度的蔗糖溶液中高到低34片510min低倍显微镜观察并记录质壁分离的相对程度高到低100个确定使细胞将要发生初始质壁分离的浓度计算渗透势
考核标准
平常技能考试占70% 实验报告占20% 考勤占（卫生+考勤）10%
实验一 植物组织渗透势的测定（质壁分离法）
五、结果与讨论 1.实验结果与预期是否相符，并说明什么原因？ 2.如何根据计算结果确定植物是否需要灌溉？ 3.注意事项
未发生质壁分离
三、材料、设备与试剂
材料：带色洋葱 设备： 50ml烧杯1个，小培养皿7个 ，镊子1把， 解剖刀1把， 10ml移液管1支，显微镜1台，载 玻片和盖玻片 试剂：1mol/L蔗糖溶液、蒸馏水
四、方法与步骤
1.母液的配制：配1mol/L蔗糖溶液50mL。 2.蔗糖梯度浓度溶液的配制：配制0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、 0.50、 0.55mol/L蔗糖溶液各10ml。 3.剥取洋葱鳞茎表皮0.5cm2→迅速投入各种浓度的蔗糖溶液中 （高到低）3-4片→ 5-10min→低倍显微镜观察并记录质壁分离 的相对程度（高到低）100个→确定使细胞将要发生初始质壁分 离的浓度→计算渗透势。
试验一植物组织渗透势的测定质壁分离法试验目的观察植物组织
[实验目的]：观察植物组织在不同浓度溶液中细胞质壁分离的产生过程及其用于测定植物组织渗透势的方法。
[实验原理]：当植物组织细胞内的汁液与其周围某种溶液处于渗透平衡状态，植物细胞内的压力势为零时，细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势，这种渗透势相等的溶液称为等渗溶液。
该溶液的浓度称为等渗浓度。
当用一系列梯度浓度溶液观察细胞质壁分离时，细胞的等渗浓度将界于刚刚引起初始质壁分离的浓度和尚不能引起质壁分离的浓度之间的溶液浓度。
代入公式即可计算出其渗透势。
[器材与试剂]：实验仪器：显微镜，载玻片及盖玻片，镊子，刀片；实验试剂：100ml 浓度为1mol/L 蔗糖溶液：用蒸馏水配成0.10、0.15、0.20、0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、0.50mol/L 的蔗糖溶液各50mL ；实验材料：洋葱鳞茎[实验步骤]：1.取带有色素的洋葱鳞茎，迅速投入各种浓度的蔗糖溶液中，使其完全浸入，约5—10min 。
2.从0.50mol/L 开始依次取出表皮薄片放在滴有同样溶液的载玻片上，盖上盖玻片，于低倍显微镜下观察，并记录质壁分离的相对程度。
3.在实验中确定一个引起半数以上细胞原生质刚刚从细胞壁的角隅上分离的浓度，和不引起质壁分离的最高浓度。
4.在找到上述浓度极限时，用新的溶液和新鲜的叶片重复进行几次，直到有把握确定为止。
在此条件下，细胞的渗透势与两个极限溶液浓度之平均值的渗透势相等。
将结果记录于表中。
测出引起质壁分离刚开始的蔗糖溶液最低浓度和不能引起质壁分离的最高浓度平均值之后，可按下列各式计算在常压下该组织细胞质液的渗透势。
-Φs=RTiC1式中：-Φs 为细胞渗透势；R 为气体常数=0.083×105L ·Pa/mol ·K ；T 为热力学温度，单位K ；i 为解离常数，蔗糖为1；C 1为等渗溶液的质量摩尔浓度，单位是mol/kg ；则-Φs==0.083×105×(273+t)×1×C由于实验用的蔗糖溶液浓度单位为mol/L ，因此需要按下式对其浓度进行修正。
植物组织渗透势的测定
实验一植物组织渗透势的测定
实验目的：
1.观察植物组织在不同浓度溶液中细胞质壁分离的产生过程;
2.熟悉用质壁分离法测定植物组织渗透势。
实验仪器：
洋葱、显微镜、镊子、载玻片、盖玻片、刀片、培养皿、移液管、蔗糖。
实验原理：
生活细胞的原生质膜是一种选择透性膜，可以看作是半透膜，它对于水是全透性的,而对于一些溶质如蔗糖的透性较低。
因此当把植物组织放在一定浓度的外液中，组织内外的水分便可通过原生质膜根据水势梯度的方向而发生水分的迁移，当外液浓度较高时（高渗溶液），细胞内的水分便向外渗出，引起质壁分离；而在外液浓度低时（低渗溶液），外液中的水则进入细胞内。
当细胞在一定浓度的外液中刚刚发生质壁分离时（初始质壁分离，仅在细胞角隅处发生），细胞的压力势等于零，细胞的渗透势等于细胞的水势，也就等于外液的渗透势。
该溶液即称为细胞或组织的等渗溶液，其浓度称为等渗浓度。
实验注意事项：
1.观察时要在载玻片上滴1滴同浓度的蔗糖溶液。
2. 实验用洋葱以紫色的最易于观察质壁分离，其他材料如紫鸭跖草、红甘蓝叶可以代替。
实验内容：
1. 配制一系列不同浓度的蔗糖溶液，浓度分别为0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6mol/L。
2．取6个培养皿，编号，分别吸取上述浓度的蔗糖溶液各10ml放于培养皿内。
3. 用镊子撕取洋葱的外表皮投入各浓度的蔗糖溶液中，使其完全浸没。
投入时先从高浓度开始，每隔5min向下一浓度放2~3片洋葱表皮。
4. 在洋葱表皮在各浓度的蔗糖溶液中平衡30min后，从高浓度开始依次取出放入显微镜下观察质壁分离的情况（低倍镜即可），记录观察结果。
实验一 植物组织渗透势的测定
实验一植物组织渗透势的测定一．实验目的1、了解渗透势及其测定方法；2、了解渗透势对植物生长的影响；3、了解水势和渗透势的关系及计算方法；成熟植物细胞水势的组成。
二．实验原理生活细胞的原生质膜是一种选择透性膜，可以看作是半透膜，它对于水是全透性的,而对于一些溶质如蔗糖的透性较低。
因此当把植物组织放在一定浓度的外液中，组织内外的水分便可通过原生质膜根据水势梯度的方向而发生水分的迁移，当外液浓度较高时（高渗溶液），细胞内的水分便向外渗出，引起质壁分离；而在外液浓度低时（低渗溶液），外液中的水则进入细胞内。
当细胞在一定浓度的外液中刚刚发生质壁分离时（初始质壁分离，质壁分离仅在细胞角隅处发生），细胞的压力势等于零，细胞的渗透势等于细胞的水势，也就等于外液的渗透势。
该溶液即称为细胞或组织的等渗溶液，其浓度称为等渗浓度。
三．实验设备与材料显微镜；镊子；载玻片；盖玻片；刀片；培养皿；蔗糖；洋葱四．实验步骤1．配制一系列不同浓度的蔗糖溶液，浓度分别为0.1、0.2、0.3M。
2．取3个培养皿，编号，分别吸取上述浓度的蔗糖溶液各10ml放于培养皿内。
3．用镊子撕取洋葱的内/外表皮投入各浓度的蔗糖溶液中，使其完全浸没。
投入时先从高浓度开始，每隔5min向下一浓度放2~3片0.5cm2洋葱表皮。
4．在洋葱表皮在各浓度的蔗糖溶液中平衡30min后。
30分钟之后，从高浓度开始依次取出表皮放入显微镜下观察，表皮放在载玻片上，滴上同样浓度的溶液1滴，盖上盖玻片，在显微镜（低倍镜即可）下观察细胞产生质壁分离的情况，记录数据。
5. 清洗3个培养皿，再配制一系列不同浓度的蔗糖溶液，浓度分别为0.4、0.5、0.6M。
6. 重复步骤2—4。
7. 测量室温。
8. 根据公式ψs=-CiRT,计算出所测材料的ψw (ψs)。
五．实验现象与结果实验结果记录表：由所得到的等渗浓度和测定的室温，计算洋葱表皮细胞液的渗透势（ψs）。
T=273+24.3=297.3 i=1 c=0.3 根据Ψs =﹣icRT可算:Ψs=-1*0.3*0.0083*297.3≈-0.74MPa六．分析和讨论1.要计算洋葱表皮细胞液的渗透势得先找出分离情况最接近50%的蔗糖浓度,由于很多时候实验操作并不易直接得出质壁分离为50%的结果,所以需要设计一系列的蔗糖浓度梯度,数据统计出来后若没有接近50%的数据则取一个低于而又最接近50%的相应浓度,和一个高于而又最接近50%的相应浓度,取两个浓度的平均值为计算渗透势中的c。
实验1 植物组织渗透势的测定
实验1 植物组织渗透势的测定实验1植物组织渗透势的测定实验1植物组织渗透势的测定一、质壁分离法【实验目的】掌控用质壁分离法测量植物非政府扩散势的原理，学会观测质壁拆分现象，并展开细胞扩散势的排序。
【实验原理】将植物组织细胞浸泡在某种外界溶液中时，植物细胞内汁液与外液之间因渗透势存在差异会发生渗透作用。
当细胞汁液的浓度大于外界溶液时，细胞失水，会发生质壁分离；当细胞汁液的浓度小于外界溶液时，细胞吸水；当细胞汁液与外液之间处于渗透平衡状态时，植物细胞内的压力势为零，细胞汁液的渗透势等于该溶液的渗透势。
该外界溶液的浓度成为等渗浓度。
【实验仪器与材料、用品】显微镜载玻片盖玻片镊子刀片1mol/l的蔗糖母液（称取34.23g的蔗糖用蒸馏水配置成100ml的溶液）移液器带有色素的洋葱或紫鸭趾草【主要内容】设计并酿制一系列浓度梯度的蔗糖溶液，通过实验找到并使细胞出现起始质壁拆分的浓度，排序植物非政府的扩散势。
【实验步骤】1、按下表配制一系列浓度的蔗糖溶液，放入小烧杯中。
2、挑一层洋葱鳞片（或青色鸭趾草叶片、蚕豆、玉米等作物的叶片表皮），出外表皮上用刀片切成约0.5-0.8×0.5-0.8的小方快，用小镊子从一角开始撕取表皮，迅速分别投入各种浓度的蔗糖溶液中，使其完全浸入5-10分钟。
3、从高浓度的外液即为0.5mol/l蔗糖溶液已经开始依次抽出表皮薄片，放到几滴存有相同溶液的载薄片上，盖上盖玻片于低倍显微镜观察，并记录质壁分离的相对程度。
4、确定使细胞发生初始质壁分离的浓度，即一个引起半数以上细胞原生质体刚刚从细胞壁角隅处为拆分的浓度，和不引发质壁拆分的最低浓度。
两个音速溶液浓度的平均值即为与细胞的扩散势成正比。
酿制新鲜溶液和撕取新鲜叶的表皮，重复将以上步骤，直到有把握确认年才，结果记录在表中-2中。
表中-2实验结果记录表实验人日期材料名称实验室室温oc蔗糖的终浓度（mol/l）渗透势（巴，bar）0.50.450.40质壁分离的相对程度（作图表示）0.350.300.250.200.150.105、排序细胞质液的扩散势测出以上两个极限溶液浓度的平均值后，代入以下公式，计算出常压下该组织细胞质液的渗透势。
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4.实验记录 实验人
时期
材料名称
实验室温度
0.40 0.35 0.30
℃
0.25
蔗糖摩尔浓度（mol/L） 0.55 0.50 0.45
质壁分离的相对程度
5. 计算：
Ψπ =-icRT
Ψπ为细胞渗透势，一般以MPa (兆帕)为单位。 R为气体常数，为0.008314MPa.L/(mol.K) T为绝对温度，单位K，即273+t，t为实验温度（℃）。 i为解离系数，蔗糖为1。 C为等渗溶液的浓度，单位为mol/L。 则：Ψπ =-1×C×0.008314×(273+t) (MPa)
高渗溶液 等渗溶液 低渗溶液
角隅处发生初始质壁分离
未发生质壁分离
三、材料、设备与试剂
材料：带色洋葱 设备： 50ml烧杯1个，小培养皿7个 ，镊子1把， 解剖刀1把， 10ml移液管1支，显微镜1台，载 玻片和盖玻片 试剂：1mol/L蔗糖溶液、蒸馏水
四、方法与步骤
1.母液的配制：配1mol/L蔗糖溶液50mL。 2.蔗糖梯度浓度溶液的配制：配制0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、 0.50、 0.55mol/L蔗糖溶液各10ml。 3.剥取洋葱鳞茎表皮0.5cm2→迅速投入各种浓度的蔗糖溶液中 （高到低）3-4片→ 5-10min→低倍显微镜观察并记录质壁分离 的相对程度（高到低）100个→确定使细胞将要发生初始质壁分 离的浓度→计算渗透势。
五、结果与讨论 1.实验结果与预期是否相符，并说明什么原因？ 2.如何根据计算结果确定植物是否需要灌溉？ 3.注意事项
考ห้องสมุดไป่ตู้标准
平常技能考试占70% 实验报告占20% 考勤占（卫生+考勤）10%
实验一 植物组织渗透势的测定（质壁分离法）
一、实验目的： 观察植物组织在不同浓度中细胞质壁分离的产生过程；理解实
验原理；掌握测定方法 二、实验原理： 将植物组织分别投入一系列浓度梯度的溶液中，达到渗透平 衡状态，使细胞将要产生初始质壁分离的外液浓度，就等于细 胞液的浓度。根据浓度可计算出渗透势。