欧洲药典2.4.24残留溶剂的鉴定及控制

残留溶剂的鉴定和控制

在本章下描述的测试程序可能适用于以下几种情况：

（1）原料药、辅料以及制剂中的大多数未知一类和二类溶剂的鉴定。

（2）原料药、辅料以及制剂中的一类和二类溶剂的限度测试。

（3）对于限度大于1000ppm的二类溶剂以及三类溶剂的定量测试。

一类、二类及三类溶剂在5.4残留溶剂里面都列出来了。

样品配制的三种溶剂以及顶空进样的色谱系统条件都在本章中进行了描述。本章中规定了两个色谱系统，但是系统A是优先推荐的，系统B是用于确证同一性而使用的。样品配制程序的选择主要是根据样品本身的溶解度以及需要控制的溶剂类别来确定的。

下面几种溶剂不适合用顶空进样测定：甲酰胺、2-乙氧基乙醇、2-甲氧基乙醇、乙二醇、N-甲基吡咯烷酮以及环丁砜。其他合适的程序可以用于这些溶剂的测定。

当一种方法被用于定量控制原料药中的残留溶剂，必须进行验证。

测试程序：使用顶空进样气相色谱法进行测量。

样品制备方法1：该方法主要用于易溶于水系统的残留溶剂的测定。

样品溶液（1）将0.200g样品溶于水中，用水稀释至20ml。

样品制备方法2：该方法主要用于难溶于水系统的残留溶剂的测定。

样品溶液（2）将0.200g样品溶于DMF中，用DMF稀释至20ml。

样品制备方法3：该方法主要用于控制N，N-二甲基乙酰胺以及N，N-二甲基甲酰胺的测定。

样品溶液（3）将0.200g样品溶于1,3-二甲基-咪唑啉酮中，用1,3-二甲基-咪咪唑啉酮稀释至20ml。

某些情况下，以上的几种样品配制方法都不适用的时候，所选择的样品配制方法以及顶空条件必须证明是合适的。

溶剂溶液（a）取1.0ml一类溶剂标准品，加9mlDMSO，用水稀释至100ml。取1.0ml至10.0ml水中。

相关溶液包括以下几种：苯：2ppm，四氯化碳：4ppm，1,2-二氯乙烷：5ppm，1,1-二氯乙烷：8ppm，1,1,1-三氯乙烷：10ppm。

溶剂溶液（b）：取合适量的二类溶剂于DMSO中，用水稀释至100ml。稀释至表2（看5.4残留溶剂）给出的限度的1/20。

溶剂溶液（c）：取1.00g待测溶剂于DMSO或者是水中，如果合适，用水稀释至100ml。稀释至表1或2（看5.4残留溶剂）给出的限度的1/20。

空白溶液参照溶剂溶液（c）来进行制备，只是不添加待测溶剂。（用于证明不存在干扰峰）

测试溶液取5.0ml样品溶液和1.0ml空白溶液。

对照溶液（a）（Class 1）取1.0ml溶剂溶液a以及5ml合适的溶液稀释到进样瓶中。

对照溶液（a1）（Class 1）取5.0ml样品溶液以及1ml溶剂溶液（a）到进样瓶中。

对照溶液（b）（Class 2）取1.0ml溶剂溶液（b）以及5ml合适的溶液稀释到进样瓶中。

对照溶液（c）取5.0ml样品溶液以及1ml溶剂溶液（c）到进样瓶中。

对照溶液（d）取1.0ml空白溶液以及5ml合适的溶液稀释到进样瓶中。

将进样瓶密封，震摇得到均一的溶液。

下面的顶空进样条件有可能用到：

可能使用下面的色谱程序来进行测定：

系统A

色谱柱：30m*0.32mm或者是0.53mm的6%氰丙基苯基94%二甲基聚硅氧烷，填料为1.8um或者是3um。

载气：色谱纯的氮气或者是氦气，分流比为1:5，流速为35cm/s。

氢火焰离子检测器（同时也可以使用质谱或者是电子捕获器用于一类溶剂）程序升温：40度保持20min，以10度每分钟的速率升温至240度，在240度保持20min。进样口温度为140度，检测器为250度。或者是如果有基质干扰，用下面的程序：

系统B

色谱柱：30m*0.32mm或者是0.53mm的硅胶毛细管柱或者是大口径毛细管气相色谱柱，内含聚乙二醇20000R（0.25um）

氢火焰离子检测器（同时也可以使用质谱或者是电子捕获器用于一类溶剂）程序升温：50度保持20min，以6度每分钟的速率升温至165度，在240度保持20min。进样口温度为140度，检测器为250度。

取1ml对照溶液a在系统A下进样，记录色谱图，在此条件下的1,1,1-三氯乙烷能够被检测到，信噪比应该不低于5.典型的色谱图在图2.4.24-1中可以看到。

取1ml对照溶液a1在系统A下进样，记录色谱图，在此条件下的一类溶剂应该能够被检测到。

取1ml对照溶液b在系统A下进样，记录色谱图，在此条件下的乙腈和二氯甲烷的分离度能达到要求。如果在此条件下的色谱图和图2.4.24-2相似，乙腈和二氯甲烷的分离度可以达到1.0，则认为该方法是合适的。

取1ml样品溶液在系统A下进样，如果记录的色谱图中，没有和对照溶液a 或者对照溶液b中的溶剂一致的色谱峰，这样被测试的样品就可以符合测试要求。如果有和对照溶液a或者对照溶液b中的溶剂一致的色谱峰，应使用系统B。

取1ml对照溶液a在系统B下进样，记录色谱图，在此条件下的苯应该能够被检测到，信噪比应该不低于5。典型的色谱图在图2.4.24-3中可以看到。

取1ml对照溶液a1在系统B下进样，记录色谱图，在此条件下的一类溶剂应该能够被检测到。

取1ml对照溶液b在系统B下进样，记录色谱图，在此条件下的乙腈和三氯乙烷的分离度能达到要求。如果在此条件下的色谱图和图2.4.24-4相似，乙腈和三氯乙烷的分离度可以达到1.0，则认为该方法是合适的。

取1ml样品溶液在系统B下进样，如果记录的色谱图中，没有和对照溶液a 或者对照溶液b中的溶剂一致的色谱峰，这样被测试的样品就可以符合测试要求。如果有和对照溶液a或者对照溶液b中的溶剂一致的色谱峰，同时确认使用系统A时也是一致的，按以下程序进行。

取1ml对照溶液c在系统A或者是B下进样，如果有必要地话，调整系统的检测灵敏度以使被确定的残留溶剂的峰高不小于全量程的50%。

取1ml对照溶液d进样，应该没有干扰峰可以观察到。

取1ml测试溶液和1ml对照溶液c重复进样三次。供试溶液中的残留溶剂的峰面积的平均值应该不大于对照溶液c中的峰面积的平均值的一半。供试液和对照溶液c三次测试的相对标准偏差分别不得大于15%，否则该测试被视为是无效的。

图2.4.24-5描述了一个流程图。当一个残留溶剂（二类或者是三类），含量大于0.1%的时候，应该使用标准加入法进行定量测试。