牛乳中微生物的检测与分析

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西藏自然发酵牛乳的微生物区系分析

西藏自然发酵牛乳的微生物区系分析

采样地点 拉萨当雄 拉萨纳木错 1 米拉山 1 拉萨达孜 拉萨纳木错 2 拉萨纳木错 3 拉萨当雄 米拉山 2 山南琼结 山南隆子 山南扎囊 山南扎岗 山南贡嘎 山南琼结 山南浪卡子 八一镇菜市场
八一 日喀则江孜东郊村
日喀则谢通门 日喀则谢通门达那答
日喀则市 1 日喀则市 2 日喀则萨迦县桑木林村 日喀则岗巴县昌龙乡 昌都芒康
2 结果与分析
2.1 样品的采样地分布情况 由表1可知:29份自然发酵 牛乳样品中,有8份采自拉萨、7份采自山南、2份采自林 芝、7份采自日喀则,3份采自昌都、2份采自那曲。
作者简介:南志强(1982—),男,山西新绛人,农艺师,研究方向:农业微生物。 收稿日期:2019-08-24
25 卷 17 期
26
安徽农学通报,Anhui Agri,Sci,Bull,2019,25(17)
西藏自然发酵牛乳的微生物区系分析
南志强
(西藏自治区农牧科学院农业研究所,西藏拉萨 850032)
摘 要:为探明西藏自然发酵牛乳的微生物组成,采用传统稀释法培养发酵牛乳中的微生物,结果表明:29 份
自然发酵牛乳样品中,24 份样品的乳酸菌数在(1.10±0.20)×106~(6.78±0.04)×107CFU/g,25 份样品的酵母菌数
1 材料与方法
1.1 样品来源与采集方法 在西藏6个地市的不同地方 采集自然发酵牛乳样品29份。在发酵罐中,将发酵牛乳 充分搅拌均匀后,用已灭菌的吸管分多次吸取80~120mL 样品装入已灭菌的玻璃瓶中并塑料薄膜密封好,储藏箱 低温保存,带回微生物实验室后存放于4℃冰箱中,以待
进行微生物区系分析。 1.2 实验方法 每个样品称量5g,放入有45mL无菌水的 三角瓶中,放在70r/min的摇床上震荡15~20min,然后静静 放置10min左右,吸取1mL发酵牛乳悬浮液加入到有9mL 无菌水的试管中稀释,配成1/100倍稀释溶液,依次按照 10倍梯度稀释,依据预测结果确定每种菌培养的合适浓 度,正式进行接种培养。用MRS琼脂培养基[6]培养乳酸 菌,临用时每1000mL培养基中加入1000ppm放线菌酮液 10mL并摇匀;用酸化PDA培养基[7]培养酵母菌,临用时每 1000mL培养基中加入1%链霉素液3mL;用牛肉膏蛋白胨 培养基[7]培养芽孢菌,接种前发酵牛乳稀释溶液需80℃水 浴10min。采用稀释倾注平板法,厌氧条件下30℃恒温培 养乳酸菌48h后计数;28℃恒温培养酵母菌和芽孢菌48h 后计数。

实验一 牛乳中细菌的检查

实验一 牛乳中细菌的检查

实验一牛乳中细菌的检查一、目的要求1.了解牛乳的细菌学检查方法——显微镜直接计数法和标准平板计数法。

2.学习牛乳的巴斯德消毒法。

二、基本原理从健康母牛体内刚挤出的牛乳,含有少量的正常起始微生物。

生牛乳是一种流体,富含糖类,蛋白质,脂肪,无机盐和维生素等营养物质,其中的细菌会很快繁殖,因此,采用不同细菌学检查方法对牛乳中细菌进行卫生检查,比较得出最佳检测方法,确定不同来源的生牛乳的等级、巴氏消毒牛乳的卫生标准。

但将牛乳装入未消毒的器具和在分装、运输过程中,会被很多其他微生物甚至致病菌污染,而且牛乳含有丰富的营养物质(碳水化合物、蛋白质、脂肪、无机盐和维生素等),在其中的微生物,会很快生长繁殖,因此,一份牛乳样品的细菌含量可反映母牛的健康状况和牛乳生产与保藏的条件。

显微镜直接计数法适用于含有大量细菌的牛乳,生牛乳可用此法检查。

标准平板计数法是广泛用于牛乳微生物计数的常规方法,此法比较敏感,牛乳中含少量细菌时,能得出比较正确的结果。

三、器材及试剂生牛乳10ml,灭菌水,肉膏蛋白胨琼脂;灭菌培养皿,1ml与10ml灭菌吸管,灭菌试管,微量吸液器与吸嘴各一个,载玻片,美蓝染液,烧杯,显微镜,水浴锅,试管架,吸水纸等。

四、操作步骤1.显微镜直接计数(1)在白纸上画出1cm2的方块,然后载玻片放在纸上。

(2)用10μl的微量吸液器吸取混匀了的生牛乳样品,放在载玻片 1cm2区域的中央。

(3)用接种针将牛乳涂匀,并涂满1cm2的范围。

(4)使涂片于空气中慢慢干燥。

将铁丝试管架放在沸水浴中,然后置已干燥的涂片于试管架上,用蒸汽热固定5分钟,待干。

(5)浸于美蓝染液烧杯内染色2分钟。

(6)取出载玻片,用吸水纸吸去多余的染料,晾干。

(7)再用水缓缓冲洗,晾干。

(8)油镜下观察细菌数,共数30—50个视野。

(9)计算细菌的数目2.巴斯德法消毒牛乳(1)将水浴锅的温度调节到63℃。

(2)将生牛乳样品用力摇匀,使微生物能均匀分布。

牛乳中嗜冷菌的危害 牛乳中嗜冷菌的检测方法 - 养牛技术

牛乳中嗜冷菌的危害 牛乳中嗜冷菌的检测方法 - 养牛技术

牛乳中嗜冷菌的危害牛乳中嗜冷菌的检测方法-养牛技术嗜冷菌在-15—20℃之间最宜生长,其在保存过程中产生的大量胞外耐高温的脂肪酶和蛋白酶会分解脂肪和蛋白质,所以在高温杀菌后仍有残留,从而造成牛奶腐败变质。

为避免鲜牛乳发生变质,一般从收集到加工过程中都采取冷藏,但此时往往会导致乳中嗜冷菌占具主导地位,而其产生的耐热性酶类是主要造成鲜牛乳以及乳制品质量变差的一个主要原因.检测牛乳中细菌总数一般在37℃温度下进行48h培养,但该条件下嗜冷菌不会生长,从而往往被忽视,应加强检测。

下面就具体来了解一下:牛乳中嗜冷菌的危害牛乳中嗜冷菌的检测方法。

1、来源鲜牛乳中的嗜冷菌具有比较广泛的来源,且可分成较多类型的菌株,其中数量较多的是微球菌、假单胞菌以及产碱杆菌。

微球菌分布比较广泛,主要存在于动物体表、空气、水源以及、设备上;假单胞菌属主要在海水、淡水、土壤以及多种植物体内存在;产碱杆菌主要在饲料、水源以及粪便中存在。

在污染嗜冷菌的途径中,主要是通过接触个人,如药浴杯污染、挤奶工双手不卫生、水清洗乳头污染、贮存及运输设备不干净或没有严格消毒等,都容易导致嗜冷菌含量过高。

2、危害鲜牛乳中主要为兼性嗜冷菌,产碱杆菌属、假单胞菌属、克雷伯氏杆菌属、黄杆菌属以及无色杆属等,是目前经常能够分离到的嗜冷菌。

通过对以上菌株进行特性分析,发现其都会影响鲜牛乳的保存。

例如,假单胞菌具有很强分解蛋白质和脂肪的能力,能够导致脂肪发生分解,从而容易形成脂肪哈败味,还能够使其中的蛋白质发生分解产生蛋白胨;产碱杆菌,自身无法使牛乳中的糖类发生分解而产酸,但能够生成棕黄色、灰黄色的色素,还能够导致牛乳中含有的有机盐发生分解而生成碳酸盐,从而导致牛乳呈碱性,能够造成乳制品发生黏性变质。

也就是说,嗜冷菌能够使牛乳中的成分被破坏,这主要是由于嗜冷菌能够分泌耐热蛋白酶、脂肪酶而导致蛋白质、脂肪发生分解。

另外,在有氧低温条件下,嗜冷菌能够引起生色反应,如黄色、奶油色、绿色、红色、金色、黑色或者棕褐色等。

乳与乳制品中微生物及其检测

乳与乳制品中微生物及其检测
可口而稍甜,无其他任何异常滋味。
❖ 次质鲜乳——有微酸味(说明乳已开场酸败), 或有其他轻微的异味。
❖ 劣质鲜乳——有酸味、咸味、苦味等。
❖ 乳是营养丰富,容易消化吸收的食品,含有
蛋白质、脂肪、糖、无机盐、维生素等多种 营养物质。其中,乳蛋白中含有人体所必需 的各种氨基酸;乳脂肪含有较多的不饱和脂 肪酸,故其熔点较低(27℃~34℃),因此, 容易被人体消化吸收。乳糖对儿童大脑的发 育是不可缺少的,它能促进脑组织中糖脂化 合物的生成,还能促进机体对食中的钙和磷 的吸收及贮存;
❖ 2、原料乳卫生状况对乳及乳制品质量的影响
❖ 原料乳卫生质量的优劣直接关系到乳及乳制 品的质量。原料的卫生质量问题主要是病牛 乳(结核病、乳房炎牛的乳)、高酸乳、胎乳、 初乳,应用抗生素五天内的乳、掺伪乳以及 变质乳等。患结核病牛的乳汁不得作消毒乳 供人饮用,只能加工成乳制品。患乳房炎牛 乳、产犊前十五天的胎乳、产犊后七天的初 乳、应用抗生素五天内的乳及变质乳既不得 作消毒乳也不得加工成乳制品。
❖ (3)湿度:对于固体、半固体的乳制品,贮藏环境湿 度不能过大,因为这些乳制品受潮后易使微生物繁 殖生长或结块等。如炼乳,乳粉的贮藏环境应通风 良好,保持枯燥。硬质干酪要求贮藏在相对湿度 80 %~85%的环境里。
❖ (4)光线:光线照射可加速乳及乳制品中一些成分 的变质,如脂肪、维生素等的氧化。因此乳及乳制 品在加工、运输、贮藏、销售等过程中均应尽量防 止光线照射。
❖ (2)时间:乳及乳制品贮藏时间过长就容易发生卫生
质量的改变。因此乳及乳制品在销售时要注意贮新
售旧,超过保存期的不得出售。消毒牛乳保存期为 24小时,酸牛乳的保存期为72小时,全脂无糖炼乳 保质期为1年,罐装的为全脂加糖炼乳保质期为9个 月,瓶装者3个月,奶油在-15℃以下冷藏保质期6 个月,4~6℃存放时间不得超过7天,乳粉有罐装 密封充氮包装时保存期为2年,罐装非充氟包装的 保存期为1年,玻璃瓶装者保存期为9个月,塑料袋 装保存期为4个月。

原料牛乳中亚硝酸盐的几种检测方法

原料牛乳中亚硝酸盐的几种检测方法

含量超过正常值 。这种方法适用于在生鲜牛乳收购 现场的简单验收 , 检测限为 0 毫克 / 。此方法操 . 5 升
作简单快速 , 能在短时间 内得 出是否合格 的结论 , 但
缺点是不能确定亚硝酸盐的含量。
3 光 度 法
测定亚硝酸盐因仪器设备简单 、 易操作 、 准确度 高而在分析 中占 据重要的地位 。其特点是灵敏度高 、 准确度高 、 相对误差较小 、 仪器价廉 、 操作简单和应 用 广泛 。 ’ 目前 , 光度法测定牛乳硝酸盐 、 亚硝酸盐的方法 除 经 典 的 “ 里斯 ” 剂 比色法 及 其 改 良法外 , 有 格 试 还 些报道 , 如催化 ( 褪色 ) 光度法 、 流动注射 系统分 光光度法 、顺序注射系统分光光度法 、导数光度法 等 。常用分光光度法主要有 3 , 目视 比色法 、 种 即 可 见分光光度法 、 紫外分光光度法。
条 件 下 , 硝 酸 盐 与 琴 亚
二酚及锆氧
处 测 吸光 度
色鳌合物 ,于 32 8 纳米 在 0 12 0 . — . 毫克 / 0 o 升范
养殖技术顾 问 21.1 011
检 疫 检 验
嗣 内与 吸光 度 呈线 性关 系 , 为 简 易 、 速 的测 定食 成 快 品 中微 量亚 硝 酸盐 的方 法 ,通 过 对 原 料 乳 及几 种 乳 制 品 样 品 中 的 亚 硝 酸 盐 进 行 测 定 具 有 良好 的 重 现 性 。该分 析方 法操 作简便 、 速 、 快 干扰 少 , 良好 的选 有 采 用 超声 萃 取 的方 法 进行 提 取 和净 化 ,用 阴离 子 交
检 疫 检 验
原 料 牛 乳 中 亚 硝 酸 盐 的 几 种 检 测 方 法
王 瑞 珍 ( 锡林郭勒职业学院 060 ) 200

新疆石河子生鲜牛乳微生物污染状况分析与评价

新疆石河子生鲜牛乳微生物污染状况分析与评价

牛 乳 具 有 较 高 的营 养 价 值 , 但 溶液, 用于制备稀释液 。 菌吸管 : 无 容 琼 脂充分混 匀 , 直至液 体营养琼 脂凝 是, 生鲜牛乳安 全状况不容 忽视 。牛 量分别为 10 L和 0 1L 培养皿 : .m .m 。 经 固。最 后将培养 皿放入培 养箱 (0 3 乳 是微 生物发酵 良好 的培养 基 , 具有 预先消 毒 的一次 性塑料培养 皿 , 可 3 ℃) 或 5 培养 7h 2。 ... 易腐 的特性 , 易被微生物污 染 。微 多次使用 的玻璃培养 皿。玻璃培养 皿 2 2 2 3 计 数 极 使用前须进行消毒 。 用于孢 子生长的 从培 养箱 中取 出 已培养 的培 养 生物 的大量繁殖 , 会严重危 害消 费者 统计培养过程 中长 出的菌落数。 的身体健康 , 有加 以控制 。为此应 无 菌 固体培 养 基 ,可用 普 通营 养 琼 皿 , 必 当加强生鲜牛乳 的微生物监控 。 脂, 但最 好使用进 行孢子计 数的专用 计算 结果 : 最好选 用那 些最后 的 1 材 料 培养基 。 两个 水 浴 锅 : 个 8 ℃水 浴 , 菌 落计 数 在 3  ̄30个之 间的 培养 一 0 0 0 各 牛场 每 天 交售 的生 鲜 牛 乳及 用于 原奶 样 品的加 热 ( 溶解 固体琼 皿 。用数 出 的菌 落 数乘 以稀 释 系数 , 0 0 用于冷却 ( 稀释液 1的系数 为 l稀释液 2的系 , 实验室 常用试剂 。培养箱 、 浴锅及 脂) 一个 4  ̄5 ℃的水 浴 , 水 0 0, 实验室常用设备 。 琼脂 ,维 持 琼脂 液 体状 态 以便 倒平 数 为 1 ,稀释 液 3的系数 为 10 稀 皿 。 释液 4的系数为 1 0 ) 得 出每 m 00 , L测 2 方 法 培养箱 : 温度为 3  ̄3 ℃的培养 试样品 中的总孢子数 。 0 5 2 1 样 品的采集 . 以石河子 各规模化 牛场 、 殖小 箱 。 养 2 23 耐热 芽 孢 总 数 .. 区和 奶站 收售 的生鲜 牛 乳为 监测 对 煮开水 的壶和加热板 : 溶解 固态 目前 , 耐热芽孢 总数 ” 对“ 一词没 象 , 品的采 集应 由具 有一定 专业 技 的无菌 营养琼脂 。 样 有 明确 的解 释 ,所使用 的程序 不 同, 得 出的结果也不 同。 下面论述方法 的 术 、 传 染性疾 病 的人 员操 作 , 集 无 采 试管 : 备用 吸管 :0 L的吸管。 lm 优 点在于操 作简单 , 不需要高压 杀菌 的样 品应 能代表 该批样 品的真 实 属 性。取样 器具必须清洁干燥、 清洁、 无 温度计 :~ 10 O 0 ℃。高压灭菌器 : 程 序 , 然而 , 当与 不 同实 验室 所做 出 菌。采集 的样 品应 保存在 0 5C冷藏 用于玻璃器械 , -" 营养 基质的杀菌 。 的耐热芽孢 总数进行 比较 时, 必须注 容器 内, 运输途 中也不得超 过 8C, " 并 2 2 2 2 方 法 ... 意使用 的方法和 流程 。 由专人负责 , 保奶样在运 输途 中不 确 将 一定容 量 (~ lm ) 5 O L 的原奶 放 2 2 3 1 材 料 . . . 损坏 、 不受污 染、 不混淆 , 于 6小 时 入一个 试管 , 另一试 管中加入 与奶 应 在 吸 管 : 吸 量 分 别 为 1O L 和 .r a 内送达检验 室。 等量 的水 。将两 支试 管放 入 8 ℃水 0 1I的无 菌吸管 。 0 .Ⅱ l J 从各 规模化牛场 、 养殖 小区和奶 浴 。在 加水 的试 管 中插 入 一根 温 度 培养 皿 : 经预 先消毒 的一次 性塑 站交售 的生鲜 牛乳中 , 月随机抽样 计 , 度升 到 8 ℃, 每 温 0 再等 lm n 用冷 料培 养 皿或 可 多次 使用 的玻璃 培养 Oi , 检验 两 次 , 以此作 为 该牛 场 、 站该 水冲 , 含原奶样 品的试 管冷却 。用 皿 , 奶 使 玻璃培养皿使用前必须 消毒 。 月 的微生物检验数据 。 加热后 的原奶样 品制备稀释样 品, 在 孢 子 生长 的无 菌 固体营 养 培养 2 2 检 测 方 法 . 9m 9L无菌稀释液 ( 放入 一个无菌稀释 基 :可用 普通细 菌总数营养琼 脂 , 但 2 2 1 菌落 总数 :菌 落总数 的测定 烧瓶) 中加 入 lL己加 热 的原奶 , .. m 并 最好使用进行孢子计数专用培养基 。 按按 G 6 1— 9 6中规定执行 。 B9418 摇动 使其彻底混匀 。 用吸管将样 品加 水 浴 箱 : 温 度 设 在 4 ℃ , 以 将 O 用 2 22 芽孢 总数 .. 入 培养皿 ,每 一步骤 用一个培养 皿 , 冷却液化营养琼脂培养基 。 将 少 量原 奶 (— 0 L 在 8 ℃条 并在 培养皿上作 出标记 。 5 1m ) 0 煮开水 的壶和加热 板 : 来对原 用 件下加热 lm n O i 。这一过程可 杀死大 例如 : 号 : .m l 10 L加热 的原奶样 奶样品进行加热处理 。 多数 生长 的微生物 , 仅有耐热 的活菌 品 ; 2号 : .m 0 1L加 热 的 原 奶 样 品 ; 3 二个培养箱 : 一个温度 调至 3 ~ 0 可存 活下来 。 面对 已加热处理的奶 号 :.m 下 1 0L经稀 释 的加热 原奶 样 品 ; 3 ℃ , 一 个 调 至 5  ̄ 5 ℃ 。 4 5 另 0 5 样品进行细 菌总数 测定。 号: .m 0 1L经稀释 的加热原奶样 品。 试 管: 备用 22 2 1 材料 ... 在 每个 含 原奶 样 品 的培 养皿 中 lm OL的吸管 : 备用 。 无菌稀 释烧瓶 : 内装 9m 9L无 菌 分 别加入约 lm O L冷却 的无菌液 态营 温 度计: 测量范围为 0 0 ℃。 ~10 稀释 液。氯化钠 : 0 9 氯化 钠的水 养 琼脂 /转动 培 养基 使样 品与液 体 含 .% 高压灭菌 器 :用0 3

微生物法检测牛乳中β-内酰胺类抗生素残留的对比研究

微生物法检测牛乳中β-内酰胺类抗生素残留的对比研究
2 C l g fF o ce c n n i e r g Ha b n I d s y Unv r i , ol e o o d S in e a d E g n ei , r i n u t ie t e n r s y Ha bn 1 0 9 ; r i 5 0 0
杆 菌 ( aiu t rhr ohl ,0 4 ) 中 科 院微 生 B cl sao em p i 1 19 : l s e t s u 物研 究所 ; 霉素 G、 苄西林 、 唑西 林 、 青 氨 苯 头孢 吡林 和 青 霉 素 酶 : 国 Sg a公 司 ; 美 im 阿莫 西林 和 头孢 氨苄 : 中 国药 品生 物 制 品 检 定 所 ; 脂 乳 粉 和 全 脂 无 抗 乳 粉 : 脱
3T e xi urnie fh CtoD nnn, D n n g17 0 ) h E- mQ a t ote i f ogig og i 5 2 0 a n y n
摘要 : 对牛乳 中 B 内酰胺类抗生素残 留的三种微生 物检测法进行 比较 , 一 确定三种方法对牛乳 中常见 B .内酰胺类抗生素残 留 的检测限、 检测时间、 检测成本 、 操作难易程度等关键参数 , 同时指出 国标 T c法在检测限方面 , O C认证的 B D r A A S A法在操作难易程
李延 华 1 王伟 军 :‘ 张兰威 , 2 ・ 马微 陈 丽安
L a—u , Wa gWe- n一 Z agL nw i, MaWe a d C e i n i nh a Y n iu , h n a— e j i n h nL— a
( 1通 化 师 范 学 院 制 药 与 食 品科 学 系, 通 化 14 0 ; 3 0 2 2 哈 尔 滨工 业 大 学食 品科 学 与工 程 学 院, 哈 尔 滨 10 9 ; 50 0

生鲜牛乳检验方法

生鲜牛乳检验方法

主题:
生鲜牛奶检验方法
版号:A/0
页码:5/49 煮沸试验
1.原理
牛乳酸度升高,蛋白质稳定性下降,牛乳经过高温蛋白质就会变性,且牛乳酸度越接近蛋白质等电点,牛乳在高温情况下变性越严重。

煮沸试验就是利用牛乳经高温处理后产生的蛋白凝块的严重程度来判定牛乳的新鲜程度。

2.仪器
电炉、试管、烧杯(500mL)、三角瓶(150mL)
3.方法
3.1取约10mL牛乳,放入试管中,置于沸水浴中5min,取出在光线充足的白色背景下观察。

3.2取50mL牛乳于150mL烧杯中,置于电炉上加热至沸腾,在煮沸过程中不断摇动,待煮沸后观察三角瓶底部的颗料状况。

4.判定
4.1试管煮沸试验,新鲜牛乳管壁无絮片出现不发生凝固现象;如果产生絮片或发生凝固,表示牛乳已不新鲜。

4.2三角瓶煮沸试验的判定标准,参照附表1判定。

图中1、2、3为合格可接收;4、5、6为不合格拒收。

主题:
生鲜牛奶检验方法版号:A/0 页码:49/49
附录:
生鲜牛乳中糊精检测比色标准板
使用说明:
标准板中随糊精含量增加,1号~6号溶液颜色逐渐由无色到深红棕色,其中3号管颜色为结果判定基准颜色。

糊精检测阴性:试验结果与3号管颜色相同或浅于3号管(如1号、2号管),则判定该牛乳糊精检测阴性,检测结果合格;
糊精监测阳性:试验结果比3号管颜色深(如4号、5号、6号管),则判定该牛乳糊精检测阳性,检测结果不合格。

生鲜牛乳微生物的检测与分析

生鲜牛乳微生物的检测与分析
钟。 嗜冷菌快速检测培养基 制备 : 酵母提取 物 2 . , 5克
胰 蛋 白胨 50克 , 脂 奶 粉 1 . 脱 . , . 0克 G1 0克 , 脂 1 - 琼 0
余一 半 中菌落分 布又 很均匀 ,即可计 算半 个平 板后 乘 2以代表 全皿 菌落数 。平皿 内如有链 状 菌落 生长
琼脂 培养基 倾人加 有 1 毫升 生理盐 水 的灭 菌平皿 内 作空 白对照 。待琼脂凝 固后 , 翻转平 板 , 于 3 + ℃ 置 61
① 试验样 品
奶站、 4家 农 户 。
试验样 品来 源于 4个 奶牛 场 、 4个
保温 箱 内培养 4 + 8 2小 时。
选 取菌 落数 在 3  ̄ 0 0 3 0之 间 的乎 板 作 为 菌 落 总
时( 落 之 间无 明显 界 线 )若 仅 有 l条 链 , 视 为 1 菌 , 可 个菌 落 ; 如果 有不 同来 源 的几条 链 , 应 将 每条链 作 则
为 1个菌落计 。
l 5克 , 馏水 1 0 蒸 0毫升 。 以上 比例 配制成 嗜冷菌 0 按
快 速检 测培 养 基后 ,分 装 ,2  ̄ 5分钟 高 压灭 菌 。 11 1 C
③ 耐 热芽孢 数检 测 要 检 测原 料乳 中耐 热芽 孢
农 技 2l 1 5 村科 O( 1) 9
N g —u —C n
数 只需将 1 0毫 升原料 奶样 品加 热至 I0C 并 在此 O  ̄,
吸管 吸取 原料 乳 1 升 ,沿管 壁徐 徐注 入 含有 9毫 毫
升 灭 菌生理盐 水 的试管 内( 注意 吸管尖 记 。 在 每个 含 样 品 的培养 皿 中加 入 约 1 0毫 升冷 却 无菌 液态 营养琼 脂 ,转动培 养皿 使样 品 与液体 琼脂

微生物抑制法检测牛乳中青霉素类药物残留的研究

微生物抑制法检测牛乳中青霉素类药物残留的研究
现代食品科技
Mo d e r n F o o d S c i e n c e a n d T e c h n o l o g y
2 0 1 3 , V o 1 . 2 9 , N o . 1
微生物g p ¥  ̄ J 法检测牛乳 中青霉素类药物残 留的研 究
马 丽苹 ,纠敏 ,秦 翠丽 ,赵君 峰 ,张春 雷
豆蛋 白胨和胰蛋白胨的培养基细分更适合嗜热脂肪 芽孢杆菌生长,从而便于检 测限的测定。 关键词 :嗜热脂肪 芽孢杆菌;芽孢;青霉素;纸 片法;检测限
文章篇号:1 6 7 3 . 9 0 7 8 ( 2 0 1 3 ) 1 — 1 9 3 - 1 9 6
Mi c r o b i a l I nh i bi t i o n De t e c t i o n o f Pe ni c i l l i n - t y pe Dr ug s Re s i due i n Mi l k
抗 生素残 留菌种为嗜热脂肪 芽胞杆菌 。因此 ,本试 验 采用 嗜热脂 肪芽孢杆菌作 为指示菌 ,对 牛乳 中青霉 素 类 药物残 留进 行检测 ,采用 滤纸片法研 究 了青霉素 钠
的检 测 限以及不 同营养 组分 、不 同药物 对检测 限结果 的影响 ,以期为后续青霉 素类药物快速 检测试剂盒 的 开发提供理 论依据 。 1 材料 与方 法
Ab s t r a c t : B a c i l l u s s t e a r o t h e r mo p h i l u s wa s u s e d s a t h e i n d i c a t o r o t d e t e c t p e n i c i l l i n r e s i d u e s n i mi F i l t e r p a p r e me ho t d Wa s u s e d t o s t u d y d e t e c i t o n l i mi t o f s o d i u m p e n i c i l l i n , a n d he t e f e c t o f if d re e n t n u t i r t i o n a l c o mp o n e n t s , a n d d i fe r e n t d r u g s o n he t d e t e c i t o n l i mi t n i t h i s p a p e r . Th e es r u l s t s h o we d d e t e c i t o n l mi i t o f s o iu d m p e n i c i l l i n nd a b e n z a t h i n e p e ic n i l l n i Wa s 1 n g / m ̄ a nd 2 n g / r n  ̄r e s p e c i t v e l y , a n d c u l t u r e me iu d m r i c hi n s o yp e p t o n ea n dt r y p on t eWa s mo r e s u i t a b l ef o r h eg t r o wt ho f B a c i l l u s s t e a r o t h e r mo p h i l u s , he t eb r yf a c i l i at t i n gt h ed e t e r mi n a i t o n o f he t d e t e c i t o n l i mi t . Ke y wo r d s : Ba c i l l u s s t e a r o t h e r mo ph i l u s ; B a c i l l u s ; p e ic n i l l n; i p a p e r me ho t d ; d e t e c i t o n l i mi t

第七章、乳与乳制品中的微生物及其检验

第七章、乳与乳制品中的微生物及其检验

课程编号:教案、讲稿总学时:30学时食品卫生检验第七章乳与乳制品中微生物及其检测(2学时)第一节鲜乳中的微生物及其检测第二节消毒乳中的微生物及其检测第三节乳制品中的微生物及其检测适用专业:食品工程与科学授课班级:食工2003(3)授课教师:王长远黑龙江八一农垦大学食品学院2005年2月22日教学基本信息第七章乳与乳制品中微生物及其检测1、乳及乳制品的感官鉴别要点?感官鉴别乳及乳制品,主要指的是眼观其色泽和组织状态、嗅其气味和尝其滋味,应做到三者并重,缺一不可。

对于乳而言,应注意其色泽是否正常、质地是否均匀细腻、滋味是否纯正以及乳香味如何。

同时应留意杂质、沉淀、异味等情况,以便作出综合性的评价。

对于乳制品而言,除注意上述鉴别内容而外,有针对性地观察了解诸如酸乳有无乳清分离、奶粉有无结块,奶酪切面有无水珠和霉斑等情况,对于感官鉴别也有重要意义。

必要时可以将乳制品冲调后进行感官鉴别。

2、原料乳卫生状况对乳及乳制品质量的影响原料乳卫生质量的优劣直接关系到乳及乳制品的质量。

原料的卫生质量问题主要是病牛乳(结核病、乳房炎牛的乳)、高酸乳、胎乳、初乳,应用抗生素五天内的乳、掺伪乳以及变质乳等。

患结核病牛的乳汁不得作消毒乳供人饮用,只能加工成乳制品。

患乳房炎牛乳、产犊前十五天的胎乳、产犊后七天的初乳、应用抗生素五天内的乳及变质乳既不得作消毒乳也不得加工成乳制品。

高酸乳不得作消毒乳和良质乳品原料。

对掺伪的乳要分清情况处理,对加入了水、蔗糖、食盐、豆浆、淀粉等物的牛乳不得作消毒乳供人饮用,可用于加工乳制品。

对掺入了非食用物质的乳,不得食用或加工乳制品。

3、微生物污染对乳及乳制品质量的影响微生物的污染是引起乳及乳制品变质的重要原因。

在乳及乳制品加工过程中的各个环节如灭菌、过滤、浓缩、发酵、干燥、包装等,都可能因为不按操作规程生产加工而造成微生物污染。

所以在乳及乳制品的加工过程中,对所有接触到乳及乳制品的容器、设备、管道、工具、包装材料等都要进行彻底的灭菌,防止微生物的污染,以保证产品质量。

牛乳中酸度的测定

牛乳中酸度的测定

牛乳中酸度的测定
答:牛乳中酸度的测定主要包括以下步骤:
1. 原理:牛乳中酸度的增加主要是由于微生物活动产生的乳酸。

因此,可以通过测定牛乳中的乳酸来确定其酸度。

这通常是通过加入氢氧化钠溶液,并观察所需的氢氧化钠量来实现的。

2. 所需试剂:0.1N的氢氧化钠溶液。

3. 所需设备:滴定管、滴定计、烧杯。

4. 步骤:
a. 在烧杯中取一定量的牛乳样品。

b. 用滴定管加入0.1N的氢氧化钠溶液,直到牛乳中的乳酸被完全中和。

c. 记录所需的氢氧化钠溶液的体积。

5. 结果计算:根据滴定时所需的氢氧化钠溶液的体积,可以计算出牛乳中的酸度。

通过上述步骤,可以测定牛乳中的酸度,以判断其新鲜程度。

如需更多信息,建议咨询专业人员或查阅专业书籍。

乳中微生物

乳中微生物

乳酸链球菌
乳链球菌(Streptococcus lacti ) 保加利亚乳杆菌 (L.bulgaricus)
嗜热链球菌(Str.thermophilus)
干酪乳杆菌
乳脂链球菌
嗜热乳杆菌
粪链球菌
嗜酸乳杆菌等等
噬柠檬酸链球菌
2. 丁酸菌
1. 分解碳水化合物产生丁酸、碳酸气和氢。 2.来自质量不良饲草和卫生不良的牛场。 3.认证种类:产气夹膜杆菌等20多种,无运动性嫌
牛乳贮罐用不锈钢制造。 每罐的装乳能力可为5、10 或30吨,现代化大规模乳 品厂的贮奶罐可达32~ 202吨。
(四)运输
防止中途升温 严格杀菌并保持清洁 “夏满冬余”加绝缘层。
思考题
1.乳中微生物的来源及控制方法 2.乳中微生物生长变化规律 3.原料乳的质检和质控包括哪几个方面? 4. 简述异常乳的种类及特性.其产生的原因及控制。 5.请写出乳中丙酸发酵的作用和反应式。
二、原料乳质量控制
(一)过滤与净化 将乳从一个地方送至另一个地方,从一个工序到
另一个工序,或一个容器转移至另一个容器时都应进 行过滤。
使用清洁的砂布、过滤器等 净化时利用分离钵产生强大的离心力,将机械杂
质留在内壁上,达到净化目的。
(二)冷却
乳的冷却与乳中细菌数的关系
品名 冷却乳
时间/h
0
3
6
11500 11500 8000
12
7800
24
62000
未冷却乳 11500 18500 102000 114000 1300000
(三)贮存
原乳运到工厂后应及时验收,进行冷却贮藏。同时, 根据收奶状况安排开始加工生产。一槽车牛乳到厂后 应于20分钟内卸完。

牛乳中的抗生素及检测

牛乳中的抗生素及检测
生索 产 生 抗 药性 而 给 临 床 治疗 带 来 一 定 的 难度 。
我 国 乳 制 品 国 标 原 斟 乳 收 购 标 准 中却 没有 对 牛 乳 中 的 抗 生 索 含 量 做 任 何 限 定 。 对 泌 乳 牛 疾 病 的 治 疗 和 预 防 都 会 导 致 药 物 在 牛 乳 中残 留 一 段 时 间 , 高 浓 过 度 的 残 留与 乳 品 业 相 关 的特 定 情 况 从 健 康 和 技 术 角 度 考 虑 都 是 不 应 出现 的 乳 品 企 业 和 奶 农 为 防 止 它
维普资讯
【 疆奶 业 】 新
新疆 畜 牧业
20 0 2年 第 2期
牛 乳 中 的抗 生素 及 检 测
萨 丽3 0 7
( 疆 乳 品检 测 中 心 乌 鲁 木 齐 新
80 1) 3 0 7
牛 乳 中 的抗 生 索 吉 量 不 像 农 药 残 留可 以通 过 某 种方 法 除 去 。 有关 试 验 证 明 , 牛 乳 房 灌 入青 链 霉 据 奶 索 后 还 可 测 出抗 生 索 残 留量 . 有 青 霉素 残 留 的 古 牛 乳 加 热 至 l0 3 mi 青 霉 素 没 有 完 全 被 破 坏 , 0 C、 o t l 青 霉 素 残 留 为 阳 性 的牛 乳 经 加 工 后 制 成 的消 毒 奶 、 奶 粉 等 乳 及 乳 制 品 中青 霉 素 残 留量 仍 为 阳性 , 说 这 明 青 霉 索 在 加 工 过 程 中 不 会 被 破 坏 青 霉 索还 对 乳 酸 发 酵 有 抑 制 作 用 . 这 些 污 染 的 牛 乳 可 能 会 用 来 而 生 产 发 酵 产 品 如 : 奶 、 酪 和 黄油 等 。乳 酸 菌 对 青 酸 干 霉 素 的 感 受 性 为 : 热 链 球 菌 最 强 . .0 嗜 0 1~ 00 U/ 浓 度 即 有 抑 制 作 用 .. U/ 浓 度 时 则 无 2 ml O 5 m] 法 产 酸 。 酸链 球 菌 与 乳酪 链 球 菌 感 受 性 相 同 + 加 乳 保 利 亚 乳 杆 菌 与 嗜 酸 乳 杆 菌 对 青 霉 素 的 感 受 性 园 菌种 不 同而 存 在 个 体 差 异 。乳 酸 菌 对抗 生 素 的 耐受 性 一 般 以青 霉 索 最 大 . 趺 为 四环 素 , 霉 素 + 霉 素 。 其 链 氯 在 国 外 很 早 以 前 就 耐 乳 品 中的 抗 生 素 含量 有规 定 . 允 许 生 产 和 出售 吉抗 生 素 的 乳 及 乳制 品 。 不 而在

牛乳微生物的污染来源(新)

牛乳微生物的污染来源(新)

牛乳微生物的污染来源
一、乳房中的微生物
在一般健康乳牛的乳房内,总有一些细菌存在。

由于这些细菌能适应乳房的环境而生存,因此,就把这些细菌统称为乳房细菌。

乳房内细菌主要存在于乳头管及其分枝处。

其中以小球菌属和链球菌属最为常见,其它棒状杆菌属和乳杆菌属等也可出现。

二、挤乳过程中的微生物
1.环境:牛舍空气、垫草、饲料、牛的粪便和土壤等,都含有大量的微生物。

2.不洁的牛体附着的尘埃和牛粪:含菌量可达几亿到几百亿,挤乳时它们极易散落到牛乳中。

多数属于带芽孢杆菌、大肠菌群等。

3.乳房、乳头的清洗程度:挤乳时都要用温水彻底清洗乳房。

未清洗7058个/ml、已清洗718个/ml。

4.挤乳用具和盛乳容器:附着的细菌多为耐热球菌,还有八叠链球菌和杆菌。

5.挤乳工人和其他管理人员也会把微生物带入乳液。

如:挤乳前,工人的手未严格清洗消毒,可能将微生物带入乳液;工作人员如是呼吸道或肠道传染病的带菌者,可能将病原菌传播到乳液中。

三、挤乳后微生物的污染和繁殖
1.乳液挤出后,应进行过滤、冷却,在此过程中所接触的空气、过滤器、容器等,都可能使其再污染微生物。

2.原料乳如果不及时加工或冷藏,乳液中的微生物就会增殖。

四、控制环境
1.挤乳前应将牛舍通风,并用清水喷洒地面,以减少舍中的尘埃。

挤乳后再进行喂饲。

2.清洗:在挤乳前,牛的乳房和乳头、挤乳工人的手应经严格的清洗消毒。

贮奶桶在使用后应及时进行清洗消毒。

3.挤乳:挤乳时要弃去最先挤出的少数乳液。

4.设备与运输:管道、设备、滤布等应定时清洗杀菌。

牛乳质量与微生物安全:关键注意事项

牛乳质量与微生物安全:关键注意事项

牛乳质量与微生物安全:关键注意事项牛乳是我们日常生活中非常重要的食品之一,无论是直接饮用还是加工制品,都一直受到人们的喜爱。

然而,牛乳作为生鲜食品,微生物污染是一项重要的安全隐患,因此,保证牛乳质量与微生物安全至关重要。

以下是牛乳质量与微生物安全的关键注意事项:1.原料选择:牛奶的质量与安全始于牛奶的原料,即乳源。

优质的原料保证了乳制品的品质和安全性。

因此,选用优质的乳源,严禁使用受污染的乳液,以确保牛乳的质量和微生物的安全。

2.贮存温度:牛乳在贮存过程中需要保持适宜的温度,一般要求在4摄氏度以下。

过高的储存温度会促使微生物繁殖,从而导致牛乳质量下降和微生物污染风险增加。

因此,要合理规划储存温度,保持低温贮存。

3.消毒操作:在乳品加工过程中,消毒是保证产品微生物安全性的重要环节。

消毒操作包括消毒剂的使用、物体表面的清洁和消毒、通风与干燥等。

通过合理的消毒操作,可以有效杀灭牛乳中的微生物,保证产品的质量和安全。

4.加工工艺:牛乳的加工工艺也是确保微生物安全的关键环节。

加热、杀菌和冷却是常见的加工工艺步骤,可以有效杀灭牛乳中的有害微生物,同时保持产品的滋味和风味。

因此,合理选择加工工艺,并加强工艺控制是保证牛乳质量和微生物安全的关键。

5.交叉传染防控:在牛乳加工和销售过程中,交叉传染是一项常见的微生物污染因素。

为了防止交叉传染,必须做好加工和销售场所的卫生管理,规范操作流程,加强员工培训,做好卫生防护工作。

此外,还应定期检测和评估牛乳和生产环境中的微生物水平,及时采取相应措施。

6.包装和储存:牛乳的包装和储存也与微生物安全密切相关。

运输过程中,应注意牛乳的温度控制,避免温度过高或过低导致微生物的繁殖。

此外,包装材料应具备良好的密封性和抗菌性,以防止外部微生物的侵入。

总之,牛乳质量与微生物安全是牛乳生产和加工过程中的重要问题。

为了保证牛乳的质量和安全性,我们要从源头抓起,选择优质的乳源,严格控制贮存温度,加强消毒操作和加工工艺控制,防止交叉传染,注意包装和储存等。

牛乳中的微生物群落研究

牛乳中的微生物群落研究

牛乳中的微生物群落研究近年来,微生物群落的研究备受关注,它涉及到各种领域的研究,包括食品科学领域。

牛奶是日常生活中不可或缺的重要食品,其中微生物群落如何影响牛奶的质量和健康价值备受关注。

牛乳中微生物群落的研究对于优化乳制品生产和保障消费者健康具有重要价值。

一、牛乳中的微生物群落概述牛乳中的微生物可以分为两大类:有益微生物和有害微生物。

有益微生物包括乳酸菌、双歧杆菌和酵母菌等,它们可以促进牛奶中乳糖的转化,产生对人体有益的乳酸、乳酸盐和其他有机酸等物质。

有害微生物包括大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌等,如果牛乳中这些微生物数量过多,会导致牛奶的质量下降,对人体健康产生危害。

二、微生物群落对牛乳质量的影响微生物群落对牛乳的质量和营养成分的影响十分重要。

正常情况下,牛奶中的乳酸菌数量越多,奶质越纯,口感和营养价值就越高。

相反,如果牛奶中的有害微生物和腐败细菌数量增多,牛奶的口感和营养价值就会下降,带来负面影响。

此外,不同地区和季节对微生物群落的影响也不同。

研究表明,不同季节的牛奶微生物群落差异较大,夏季的牛奶中有更多的有害微生物和腐败细菌。

三、牛乳中微生物群落的研究方法对牛乳中微生物群落的研究可以采用传统培养方法和分子生物学方法。

传统培养方法是指将样本涂抹在培养基上,培养并筛选微生物形态、生理生化特性等。

分子生物学方法是指利用DNA序列差异,通过PCR、DGGE、T-RFLP等技术对微生物群落进行分析。

传统培养方法具有简单、成本低的优点,但是因为有些菌株难以培养、生存时间较短或存在恶劣环境适应性等问题,有时不能准确判断微生物群落的多样性和复杂性。

分子生物学方法则能够在短时间内鉴定、定量、分离和鉴定微生物群落,但是花费高昂而且需要复杂的实验操作。

四、微生物群落研究对牛乳加工和质量管控的意义微生物群落研究对于保证牛奶的质量和卫生具有重要意义。

如何控制牛乳中的微生物群落,对于牛奶的加工处理和质量管控是一个重大问题。

生鲜乳检测技术的

生鲜乳检测技术的
重要性
随着人们对食品质量和安全的关注度不断提高,生鲜乳检测技术在保障生鲜牛乳质量、安全和稳定市场价格等方 面发挥着至关重要的作用。通过检测技术,可以及时发现并控制潜在的风险,确保消费者购买到放心、安全、营 养的生鲜牛乳产品。
检测技术的目的和意义
目的:生鲜乳检测技术的目的是对生鲜牛乳中的各种成 分进行定量和定性分析,以了解其质量状况,预测其保 质期,并监控其生产过程中的卫生和质量。
符合相关法规和标准,提高产品质量和安全性。
预防质量问题
02
通过对生产过程中的数据进行实时分析,发现潜在的质量问题
,及时采取措施进行干预,避免产品出现质量问题。
提高员工责任感
03
通过质量控制和监督,使员工更加了解生产过程中的关键点,
提高员工的责任感和积极性。
产品的质量评估和市场监管
确保产品质量
通过生鲜乳检测技术对产品进行质量评估,确保产品符合市场标 准和客户需求,提高产品市场竞争力。
及时调整生产过程
通过实时监控技术,及时发现生产过程中的问题,如温度、压力等 参数异常,及时进行调整,避免产品不合格。
提高生产效率
在线检测和实时监控技术可以提高生产效率,减少人工检测和监督的 成本,降低生产成本。
生产过程的质量控制和监督
确保生产过程合规
01
通过对生产过程中的关键控制点进行实时监控,确保生ATALOGUE
目 录
• 生鲜乳检测技术概述 • 生鲜乳常规检测技术 • 生鲜乳快速检测技术 • 生鲜乳检测技术的实际应用 • 生鲜乳检测技术的发展趋势和展

01
CATALOGUE
生鲜乳检测技术概述
定义和重要性
定义
生鲜乳检测技术是一种对生鲜牛乳进行全面检测分析的方法,主要检测其中的营养成分、微生物、污染物等指标 ,以确保产品的质量和安全。
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牛乳中微生物的检测与分析张月月刘敏王荣峰王君孙鹏郭海萌张帅(山东农业大学生命科学学院,泰安271000)摘要:【目的】了解牛乳的消毒和细菌学检查的重要性,及其卫生质量的判断标准。

学习牛乳的巴斯德消毒法和细菌学检查的方法。

【方法】采用显微镜计数法、美蓝还原酶实验法、标准平板计数法进行测定,确定不同来源的生牛乳的等级、巴氏消毒牛乳的卫生标准。

【结果】微生物显微镜直接计数法随机性大,对茵体数量不能做出较为宏观,全面的反应.优点是计数快速;美蓝还原酶实验法是用于测定牛乳质量的一种定性检测法,操作简便,不需特别设备。

它不能做为定量检查;平板茵落计数法速度慢,需要平板上长出茵落一段时后才能计数。

【结论】由于平板茵落计数法通常做梯度稀释,所以计数的线性范围大.由于是茵悬液涂布,所以比较均匀,能较好的反应茵落的疏密程度。

重复性,平行性很好。

是经典的计数方法。

关键词:牛乳;微生物;检测;分析Detection and analysis of microorganisms in milkYueyue Zhang,Min Liu,Rongfeng Wang,Jun Wang,Peng Sun,Haimeng Guo,Shuai Zhang (College of Life Sciences, Shandong Agricutual University, Tai’an, 271000, China)Abstract:【Purpose】to understand the milk sterilization and bacteriological examination of importance, and its hygienic quality judgment standard. Learning milk Pasteur disinfection method and bacteriological examination method. 【MEFHOD】Uses the microscope count the methylene blue reductase method,the standard plating count method to carry on the determination of the number of bacteria,determined different origin the fresh COWS milk rank,pasteurized milk hygienic standard.【RESULTS】Microorgaism microscope direct countmethod 。

It has big ran domness cannot make comparatively macroscopic ,overall comprehensive for milk quantity .But the advantages are coninung and fast for counting of bacteria ;The methyrlene blue reductases method is used in determining the COW'S milk quality.It is simple.No special equipments needed.But it cannot use for the quantitative examination ;The plating colony count methods is relatively slow,needs the growth of bacteria on the plate and colonies can be counted.【CONCLUSION】Because the plating count method usually makes the gradient to dilution,therefore the counting linear scope is broad .Because bacterium suspended solution is poured out on the culture of bacterium uniformly .The bacterial colony density degree can obtain .The retentiveness,parallelism is very good.It is the classical method of counting bacteria .Key words: milk ;microbial ;detection;analysis;前言牛乳是一种营养全面的液态天然饮料,含有人体所需的碳水化合物、蛋白质、脂肪、各种矿物质和维生素[1] 。

其中的细菌会很快繁殖,因此,采用不同细菌学检查方法对牛乳中细菌进行卫生检查,比较得出最佳检测方法,确定不同来源的生牛乳的等级、巴氏消毒牛乳的卫生标准。

现今常用显微镜计数法、美蓝还原酶实验法、标准平板计数法进行测定,切入点不同的方法各有优缺。

随着人们生活水平的提高,对乳制品的需求亦不断上升。

目前国内对乳制品的研究主要集中在发酵酸奶上,但由于国人习惯消费短期内的乳制品,故巴氏杀菌乳在整个消费中仍占主导地位。

牛乳的细菌学检查一般有显微镜直接计数法、检测大肠菌群、美蓝还原酶试验和标准平板计数法[2],现通过试验来了解掌握牛乳的巴斯德消毒方法以及微生物细菌学检测方法,试验通过美蓝还原酶试验和标准平板计数法分别定性、定量检测牛乳样品的细菌数含量,同时通过对照试验,确定在牛乳消毒中被广泛应用的巴斯德消毒法的卫生标准是否达标。

1材料与方法1.1实验器材1.1.1培养基和牛乳样品亚奥特巴氏消毒牛奶样品亚奥特巴氏消毒变质牛奶样品牛肉膏蛋白胨培养基:牛肉膏3g 蛋白胨10g 氯化钠5g 琼脂15~20g 水1000ml PH 7.0~7.2 121℃灭菌20nin1.1.2溶液和试剂美兰溶液(1:250 000)无菌水1.1.3主要仪器和其他用品超净工作台,水浴锅,高压灭菌锅,酒精灯,恒温培养箱,9 cm无菌培养皿,无菌18×180mm试管,试管架。

无菌250ml三角瓶,无菌棉塞,移液枪与相应规格的无菌枪头1.2试验方法1.2.1材料预算,培养基配制,无菌水分装,高压灭菌。

1.2.2美兰还原酶试验法1)标记3个无菌试管1、2、32)分别向3个试管中加入10ml不同品牌的生鲜牛乳样品(1号变质亚奥特牛奶,2亚奥特纯牛奶,3号亚奥特纯牛奶)3)分别向试管中各加入1ml美兰,盖紧管塞4)轻轻倒转试管约4次,置于37℃水浴中,并记录培养时间5)测试管在水域中稳定5min中后,取出,轻轻倒转一次后再放回水浴中6)每隔30min观察记录试管中美兰颜色的变化,直至3~6h1.2.3巴斯德法消毒牛乳1)将水浴锅的温度调至80℃2)将牛乳样品用力摇匀,使微生物能均匀分布3)用灭菌的10ml吸管吸取5ml生牛乳样品放入灭菌试管内,然后将试管放入调好温度的水浴锅中,水面要超过牛乳表面4)保持15min,并不时摇动5)一到15min立刻取出试管,用流水冲试管外壁,使其中的牛乳迅速冷却。

1.2.4标准平板计数法1)将巴氏消毒的牛乳样品充分摇匀,系列稀释至10-2、10-3和10 -4。

2)用1ml无菌吸管从三个梯度分别取1ml注入空白平板内3)各平板倾注约15ml已经融化并冷却至45 ℃左右的牛肉膏蛋白胨培4)凝固后,倒置于37 ℃培养箱内,培养24h。

5)选择长有30~300个菌落的平板计数,并计算出1ml牛乳中的细菌总数。

6)普通生牛乳样品中的检查同上法,但稀释度为10﹣3、10 -4和10-5。

2实验结果与分析2.1 实验结果2.1.1美蓝还原酶试验法结果见表1。

2.1.2 标准平板计数法结果见表2。

“﹨”表示无该梯度浓度,“——”表示没有菌落。

2.2结果分析2.2.1美蓝还原试验法1号试管为变质亚奥特牛奶还原时间为90min,所以牛乳质量为“四级奶”;2号试管为亚奥特纯牛奶还原时间为330min,故牛乳质量为“二级奶”。

3号试管为亚奥特纯牛奶未加美蓝溶液,作为观察颜色变化的对照实验组。

2.2.2标准平板计数法从实验结果来看,对于巴氏消毒后牛乳的标准平板计数,平行实验平板间菌落个数不相近,存在误差;梯度浓度间菌落个数差别较为明显。

未经巴氏消毒牛乳梯度浓度间菌落数目差别不明显。

3讨论3.1结果分析美蓝还原酶试验中三支试管中美蓝的还原时间与牛乳的质量较匹配,实验结果可度较高。

而标准平板计数法中由于各种原因导致实验数据较真实情况有较大差异,实验结果不准确,可信度不高。

3.2标准平板计数法试验失败原因分析1)未做空白平板的对照,导致培养皿菌落数无法对照2)无菌操作不到位,尤其是在接种和倒平板时,操作未在无菌圈内进行,导致培养皿污染,使实验结果不准确3)在培养时,未倒置培养4)由于没搞清楚牛乳中细菌的生长条件,在培养时用报纸包裹培养皿培养,导致实验结果与实际差异较大3.3 讨论美蓝还原酶实验法是用于测定牛乳质量的一种定性检测法,操作简便,不需特别设备。

它不能作为定量检查;平板菌落计数法速度慢,需要平板上长出菌落一段时后才能计数。

由于平板菌落计数法通常做梯度稀释,所以计数的线性范围大。

由于是菌悬液涂布,所以比较均匀,能较好的反应菌落的疏密程度。

重复性,平行性很好,是经典的计数方法。

巴氏消毒后1ml牛奶中含菌数不超过30000符合我国消毒牛乳的卫生标准。

未经消毒的牛奶在培养基没长出菌落理论上是不应该的,首先因试验中每支试管中无菌水装了4.5ml,系列稀释时移液枪不够长很难吸取前一稀释度的溶液到后一试管,接下来也很难吸1ml稀释的溶液到培养皿进行培养,无法做3个平行,每个稀释度只做了一个平板,而且没做对照,无法确定培养基及操作方面的原因。

无菌水少也导致溶液混合不均匀,可能使加入培养皿的溶液含菌数少甚至不含菌。

其次,倒此组试验平板的培养基放置时间久,温度降低导致最后在三角瓶的培养基凝成块状,制出的培养基不均匀,不适宜细菌生长。

导致平板不长菌落还可能是系列稀释操作时枪头靠近酒精灯温度高把溶液中的细菌杀死了。

4. 结论牛乳的细菌学检查方法常用的有显微镜直接记数法、美蓝还原酶实验法、标准平板记数法。

显微镜记数法适用于含有大量细菌的牛乳, 生鲜牛乳可用此法检查。

如果显微镜检查,每个视野只有1~3 个细菌左右,此牛乳为一级牛乳; 如果牛乳中有很多长链球菌和白细胞,通常来自乳房炎的母牛;若一个视野中有很多不同的细菌,则往往是使用了脏器具保存的牛乳。

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