猪瘟实验室诊断技术
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2009 年 8 月 ， 某 养 殖 户 从 外 地 购 入 肉 雏 鸡 1 500 羽 ， 进场后，按规定的免疫程序，在 7 日龄用新支二联苗滴鼻。 10 日 龄 时 ，鸡 群出 现 甩 鼻 和 拉 稀 现 象 ，随 后 鸡 只 开 始 出 现 死亡。 因连续几天阴雨，鸡舍内潮湿，又无干燥垫料可换， 该养殖户认为是由于气候因素和接种疫苗的影响， 便自 行饲喂泰乐菌素、氧氟沙星等药物后，病情仍不见好转， 后经兽医人员对病例进行剖检，初步确诊为曲霉菌感染。 通过在饲料中投放制霉菌素，饮水中添加电解质、林可霉 素后，病情得到了有效控制 。 共死亡雏鸡 365 羽，死亡率达 24.3%。 2 临床症状
②注意防止使用发霉饲料，购进或配制的饲料应该在一 定的时间内让鸡群吃完（一般 7 d 内），饲料储存要用木板架 起放置，以防止饲料吸潮。 同时，要经常清理垫料，及时把垫 料中的饲料清除干净。
③严格做好消毒卫生工作， 可用 0.4％的过氧乙酸带鸡 消毒。 全面清理霉变的垫料，用 0.2％~0.1％的硫酸铜溶液全 面喷洒鸡舍，并更换新鲜干净的谷壳作垫料。 饮水器、料桶 等鸡接触过的用具要全面清洗 ， 并用 0.2％~0.1％的硫 酸 铜
畜牧与饲料科学
Animal Husbandry and Feed Science
2010 ，31 （3 ）:186
猪瘟实验室诊断技术
郑允志 （江苏省铜山县畜牧兽医站，江苏 铜山 221000）
摘要：猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种急性、热性、高度接触性传染病，以发病急、高热稽留和细小血管壁变性引起广泛性
出血、梗塞和坏死变化为特征。 从猪瘟病料的采集和处理、病毒分离、猪体回归感染试验、家兔交叉免疫试验、血清学诊
［1］ 亢文华.猪瘟实验室诊断技术 研 究 进 展 ［J］.兽 医 导 刊 ，2009 （10）：35-37.
［2］ 梁仕岩，汤德元，黄涛，等.猪瘟诊断技术的研 究 进 展 ［J］.猪 业 科 学 ，2009，26（4）：88-92.
［3］ 窦鹏勋，葛建强，张勇，等.3 种疫苗单独和联合免疫对猪抗 体水平的影响 ［J］. 安徽 农 业 科 学 ，2009，37 （31）：1525915261.
［14］ 汤相银. 一例疑似猪瘟病毒与猪链球菌混合感染症 的 初
步 诊 断 和 应 急 措 施 ［J］.畜 牧 与 饲 料 科学，2009，30（4）：70-
71.
□
无
无
猪瘟兔化疫苗毒
有
有
可能含有猪瘟或猪瘟兔
化疫苗毒以外的致热原
的冷冻切片。 经丙酮固定后，滴加猪瘟荧光抗体 （商品），置 湿盒内 37 ℃ 45 min 后取出， 用磷酸盐缓冲液漂洗 5 次，晾 干，用缓冲甘油 （pH 值 9.5）封片，荧光显微镜检查 。 细胞浆 中呈现黄绿色荧光，指示有猪瘟病毒抗原存在，如反差不明 显，可用 1％伊文思蓝复染（复染后脱色不要过度）。 5.2 中和试验 在被检病料制剂接种细胞培养前， 分别与 猪瘟、牛病毒性腹泻和羊边界病阳性血清等量混合，置 37 ℃ 30 min（试验设对照组），然后按荧光抗体法检查细胞培养瓶 中和盖玻片中的病毒抗原， 从而推断被检物与 3 种病毒之 间的关系。 5.3 酶标抗体法 酶标抗体有商品出售， 按生产厂家使用 说明书操作即可。 建立在猪瘟病毒糖蛋白（E2）特异性单克 隆抗体基础上的酶联免疫吸附试验早已被许多国家用于猪 瘟的血清学和流行病学调查。
断、分子生物学诊断等方面进行了介绍，以期为猪瘟实验室诊断提供参考。
关键词：猪瘟；实验室诊断
中 图 分 类 号 ：S852.651
文 献 标 识 码 ：A
文 章 顺 序 编 号 ：1672-5190（2010）03-0186-01
1 病料的采集和处理 应采集的猪瘟病理组织为扁桃体、脾、肾和回肠末段。
扁桃体是猪瘟病毒感染后最先呈现病毒抗原阳性的病料， 因而 是 急 性 病 例 的 首 选 病料 。 相 反 ，回 肠 末 段 是 慢 性病 例 的 首选病料。病料应从多个病猪采集。采集到的病料不加防腐 剂，置低温（冰盒）尽快送到实验室。 实验室通常用直接免疫 荧光法和接种细胞培养分离病毒进行病原学诊断。 用于直 接免疫荧光法的病料要求采集新鲜的病料， 用于病毒分离 的病料要求尽量无菌采集。 2 病毒分离
［11］ wk.baidu.com素芳，汤赛冬，成建忠.猪瘟诊断方法研究进展探析 ［J］.
现 代 农 业 科 技 ，2009 （5）：215 ，217.
［12］ 孙冬青. 非典型猪瘟的发生及防治 ［J］. 现代农业科技 ，
2008（23）：281.
［13］ 贾伟星，刘哲迁，付名山 ，等.一起猪瘟继发链球菌病的诊
断 试 验 ［J］.畜 牧 与 饲 料 科 学 ，2007 ，28（6）：57-58.
［4］ 李倩，姚淑霞.非洲猪瘟病毒 VP73 蛋白的 B 细胞表位预测 ［J］.安 徽 农 业 科 学 ，2008，36（18）：7680-7682.
［5］ 吕 剑 钊. 一 起 猪 瘟 的 防 制 报 告 ［J］. 现 代 农 业 科 技 ，2008 （22）：230-231.
［6］ 胡 晓 苗 ，张 丹 俊 ，汪 丽 ，等.猪 瘟 病 毒 实 验 室 诊 断 研 究 进 展
步 鉴 定 ［J］.安 徽 农 业 科 学 ，2007 ，35（25）：7841. ［9］ 李升 和.猪 瘟 的 诊 断 及 其 科 学 防 制 ［J］.畜 牧 与 饲 料 科 学 ，
2009，30（7/8）：48-53. ［10］ 杨克礼，徐涤平，梁望旺，等.猪瘟病毒检测技术研究进展
［J］.安 徽 农 业 科 学 ，2007 ，35（16）：4853-4854 ，4856.
□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□
［J］.畜 禽 业 ，2007 （3）：21-23. ［7］ 邱慧玲，陈甫.山东部分地区猪瘟与蓝耳病的流行病学调
查 ［J］.安 徽 农 业 科 学 ，2009 （18）：8491-8492 ，8550. ［8］ 杨文超，谢金文，余为一.猪瘟病毒 E2 基因的克隆及其初
收 稿 日 期 ：2010－02－26 作 者 简 介 ：郑 允 志 （1971—），男 ，助 理 兽 医 师 ，主 要 从 事 兽 医 临
床诊断和动物防疫工作。
表 1 被检样品中有或无猪瘟病毒的判定
注射被检样品 注射猪瘟兔化疫苗 后的发热反应 毒后的发热反应
判定被检样品 中含有的病毒
无
猪瘟病毒
无
有
鸡曲霉菌病的发病情况、临床症状、病理变化、实验室诊断、预防及治疗，以期为防治该病提供参考。
关键词：肉鸡曲霉菌病；预防；治疗
中 图 分 类 号 ：S858.315
文 献 标 识 码 ：B
文 章 顺 序 编 号 ：1672-5190 （2010 ）03-0187-01
肉鸡曲霉菌病，又称霉菌性肺炎，烟曲霉菌是该病主要 的 病 原 霉 菌 ，是 最 为 常见 和 致 病 力 最 强 的 霉 菌 。 烟曲 霉 菌 菌 落最初为白色致密绒毛状，菌落形成大量孢子后，其中心呈 浅蓝绿色，表面呈深绿色、灰绿色甚至为黑色丝绒状。 曲霉 菌病是平养肉鸡常见的一种真菌性疾病， 特别是南方阴雨 潮湿的春季最为常见。 1 发病情况
根据流行病学特点、 临床症状和剖检变化可作出初步 诊 断 ，特 别 是 肺 部 和 气囊 的 特 征 性 病 变 具 有 诊 断 意 义 ，最 终 确诊需要进行微生物学检查，或者接种于沙氏培养基，进行 分离培养和鉴定。 经上述检查后，确诊该病为鸡曲霉菌病。 6 防治措施 6.1 预防
①严禁使用霉变的木糠、稻草等作为垫料。 木糠必须先 在太阳下暴晒晾干后才能使用 ，30 日 龄 前 最 好 选 用谷 壳 代 替木糠。 使用垫料前可先用福尔马林熏蒸消毒。
病变主要见于患鸡肺部和气囊， 肺部见有曲霉菌菌落 和粟粒大小至绿豆大小的黄白色或灰白色干酪样坏死结 节，其质地较硬，切面可见有层状结构，中心为干酪样坏死
收 稿 日 期 ：2010－02－21 作者 简 介 ：黄 猷 军 （1977—），男 ，助 理 畜 牧 兽 医 师 ，主 要 从 事 动
物疫病防控工作。
畜牧与饲料科学
Animal Husbandry and Feed Science
2010 ，31 （3 ）:187
肉鸡曲霉菌病的诊治
黄猷军 （广西宁明县峙浪乡渔牧兽医站，广西 宁明 532508）
摘要：禽曲霉菌病是多种禽类常见的霉菌病，主要发生于 2 周龄前的幼禽，病禽以呼吸困难为主要临床特征。 介绍了肉
组织。 严重败血型病鸡， 气囊可见有同心圆状的黄色坏死 灶，甚至扩展到肝、心、肾和脾脏等器官。 除肺部和气囊外， 在气管、支气管或肠浆膜、肝脏、肾脏等处也发现有霉菌病 灶。 有神经症状的鸡，脑部可见有脑膜炎。 4 实验室诊断
取肝、脾组织抹片，革兰氏染色，镜检，未检出细菌。 取 气囊结节病灶从绿色病变区采取病理组织 （即结节中心的 绿 色 区 ）少 许 或 菌 丝团 ，置 于 载 玻 片 上 ，加 10%氢 氧 化 钾 溶 液 1 滴，压碎拌匀，盖上盖玻片，置于显微镜下检查，可见特 征性的菌丝体和孢子。 将病料浸入灭菌生理盐水中，捣碎， 接种于沙氏培养基，经培养 24~48 h 后，挑取菌落镜检，可见 有繁殖菌丝的分生孢子柄顶端膨大成顶囊，呈烧瓶状，顶囊 上部的小梗产生分生孢子，分生孢子呈球形。 5 诊断
用猪肾和睾丸的原代、次代或传代细胞均可。 病料经研磨、离心、除菌滤过后接种细胞培养，如果细 胞不出现病变， 通常用荧光抗体法可测出细胞培养中盖玻 片上细胞浆内的病毒抗原。 亦可用鸡新城疫病毒强化试验 检测猪瘟病毒的存在，方法是将被检材料先接种细胞培养， 于 37 ℃培养 4 d 再接种新城疫病毒并继续培养 3 d，如细胞 出现病变，则指示被检材料含猪瘟病毒。 3 猪体回归感染试验 用易感幼猪 ，试验分 3 组 ，每 组 3～5 头 ，其 中 一 组 接 种 猪 瘟 疫苗 ，另 一 组 注 射 猪 瘟 抗 血清 （1 mL/kg 体 重 ），第 3 组 为未免疫组。 1 周后 3 组同时接种被检材料（血毒或病料乳 剂 1 mL/头），继续饲养 2～3 周，疫苗和抗血清免疫组试验猪 不发病，未免疫组表现临床症状和病理变化，即可确诊。 该 试验最为敏感和最有诊断价值，但需要严格的隔离条件，并 且耗资费时。 4 家兔交叉免疫试验 选用体重 2 kg 左右的健康家兔 5～10 只， 每只耳静 脉 注射被检病料制剂 1 mL，注射后每天测家兔体温 3～4 次。 1 周后每只兔可静脉接种 100 个兔体半数热反应剂量， 继续 测温 5～7 d。 据资料统计， 家兔接种猪瘟兔化弱毒后 48，72 和 96 h 呈 现 热 反 应 的 百 分 率 依 次 为 77％、16％和 7％； 体 温 超 过 41 ℃ （稽留 24 h 以上为典型热反应）的占 65％，40.5～41 ℃占 28.5％，不敏感者占 6.5％。 具体判定见表 1。 5 血清学诊断 5.1 荧光 抗 体 法 用 于 检 测 细 胞 培 养 或 病 料 中 的 病 毒 抗 原。 前者在接种后 6～8 h 的盖玻片上进行 ，后者用 5～7 μm
雏鸡开始精神不振，两翅下垂，羽毛松乱，缩颈呆立，闭 目嗜睡，食欲减退，饮水增加。 后期伴有顽固下痢 ，粪便呈灰 褐色或黄绿色，摇头甩鼻，伴有浆液性鼻漏，仰头张口，呼吸 困 难 ，呈 腹 式 呼 吸 。 部分 病 例 在 眼 角 膜 下 形 成 黄色 的 干 酪 样 小球状物 。 有的病鸡出现神经症状 ，有的出现一侧或两侧眼 睑肿胀，瞬膜下形成干酪样的小球状分泌物。 3 病理变化
建立在猪瘟特异性单克隆抗体基础上的酶标方法可用 于检查病料冷冻切片中的猪瘟病毒抗原， 也可用于区分猪 瘟流行野毒或疫苗病毒。 6 分子生物学诊断
分子生物学为猪瘟的诊断提供了基因分析的多种方法， 在有条件的诊断实验室可用逆转录和聚合酶链式反应，以及 限制性内切酶谱等对病毒特定基因节段及其相对应的蛋白 质进行分析，即可快速确定被检病毒在猪瘟病毒属中的位置 。 参考文献：
②注意防止使用发霉饲料，购进或配制的饲料应该在一 定的时间内让鸡群吃完（一般 7 d 内），饲料储存要用木板架 起放置，以防止饲料吸潮。 同时，要经常清理垫料，及时把垫 料中的饲料清除干净。
③严格做好消毒卫生工作， 可用 0.4％的过氧乙酸带鸡 消毒。 全面清理霉变的垫料，用 0.2％~0.1％的硫酸铜溶液全 面喷洒鸡舍，并更换新鲜干净的谷壳作垫料。 饮水器、料桶 等鸡接触过的用具要全面清洗 ， 并用 0.2％~0.1％的硫 酸 铜
畜牧与饲料科学
Animal Husbandry and Feed Science
2010 ，31 （3 ）:186
猪瘟实验室诊断技术
郑允志 （江苏省铜山县畜牧兽医站，江苏 铜山 221000）
摘要：猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种急性、热性、高度接触性传染病，以发病急、高热稽留和细小血管壁变性引起广泛性
出血、梗塞和坏死变化为特征。 从猪瘟病料的采集和处理、病毒分离、猪体回归感染试验、家兔交叉免疫试验、血清学诊
［1］ 亢文华.猪瘟实验室诊断技术 研 究 进 展 ［J］.兽 医 导 刊 ，2009 （10）：35-37.
［2］ 梁仕岩，汤德元，黄涛，等.猪瘟诊断技术的研 究 进 展 ［J］.猪 业 科 学 ，2009，26（4）：88-92.
［3］ 窦鹏勋，葛建强，张勇，等.3 种疫苗单独和联合免疫对猪抗 体水平的影响 ［J］. 安徽 农 业 科 学 ，2009，37 （31）：1525915261.
［14］ 汤相银. 一例疑似猪瘟病毒与猪链球菌混合感染症 的 初
步 诊 断 和 应 急 措 施 ［J］.畜 牧 与 饲 料 科学，2009，30（4）：70-
71.
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无
无
猪瘟兔化疫苗毒
有
有
可能含有猪瘟或猪瘟兔
化疫苗毒以外的致热原
的冷冻切片。 经丙酮固定后，滴加猪瘟荧光抗体 （商品），置 湿盒内 37 ℃ 45 min 后取出， 用磷酸盐缓冲液漂洗 5 次，晾 干，用缓冲甘油 （pH 值 9.5）封片，荧光显微镜检查 。 细胞浆 中呈现黄绿色荧光，指示有猪瘟病毒抗原存在，如反差不明 显，可用 1％伊文思蓝复染（复染后脱色不要过度）。 5.2 中和试验 在被检病料制剂接种细胞培养前， 分别与 猪瘟、牛病毒性腹泻和羊边界病阳性血清等量混合，置 37 ℃ 30 min（试验设对照组），然后按荧光抗体法检查细胞培养瓶 中和盖玻片中的病毒抗原， 从而推断被检物与 3 种病毒之 间的关系。 5.3 酶标抗体法 酶标抗体有商品出售， 按生产厂家使用 说明书操作即可。 建立在猪瘟病毒糖蛋白（E2）特异性单克 隆抗体基础上的酶联免疫吸附试验早已被许多国家用于猪 瘟的血清学和流行病学调查。
断、分子生物学诊断等方面进行了介绍，以期为猪瘟实验室诊断提供参考。
关键词：猪瘟；实验室诊断
中 图 分 类 号 ：S852.651
文 献 标 识 码 ：A
文 章 顺 序 编 号 ：1672-5190（2010）03-0186-01
1 病料的采集和处理 应采集的猪瘟病理组织为扁桃体、脾、肾和回肠末段。
扁桃体是猪瘟病毒感染后最先呈现病毒抗原阳性的病料， 因而 是 急 性 病 例 的 首 选 病料 。 相 反 ，回 肠 末 段 是 慢 性病 例 的 首选病料。病料应从多个病猪采集。采集到的病料不加防腐 剂，置低温（冰盒）尽快送到实验室。 实验室通常用直接免疫 荧光法和接种细胞培养分离病毒进行病原学诊断。 用于直 接免疫荧光法的病料要求采集新鲜的病料， 用于病毒分离 的病料要求尽量无菌采集。 2 病毒分离
［11］ wk.baidu.com素芳，汤赛冬，成建忠.猪瘟诊断方法研究进展探析 ［J］.
现 代 农 业 科 技 ，2009 （5）：215 ，217.
［12］ 孙冬青. 非典型猪瘟的发生及防治 ［J］. 现代农业科技 ，
2008（23）：281.
［13］ 贾伟星，刘哲迁，付名山 ，等.一起猪瘟继发链球菌病的诊
断 试 验 ［J］.畜 牧 与 饲 料 科 学 ，2007 ，28（6）：57-58.
［4］ 李倩，姚淑霞.非洲猪瘟病毒 VP73 蛋白的 B 细胞表位预测 ［J］.安 徽 农 业 科 学 ，2008，36（18）：7680-7682.
［5］ 吕 剑 钊. 一 起 猪 瘟 的 防 制 报 告 ［J］. 现 代 农 业 科 技 ，2008 （22）：230-231.
［6］ 胡 晓 苗 ，张 丹 俊 ，汪 丽 ，等.猪 瘟 病 毒 实 验 室 诊 断 研 究 进 展
步 鉴 定 ［J］.安 徽 农 业 科 学 ，2007 ，35（25）：7841. ［9］ 李升 和.猪 瘟 的 诊 断 及 其 科 学 防 制 ［J］.畜 牧 与 饲 料 科 学 ，
2009，30（7/8）：48-53. ［10］ 杨克礼，徐涤平，梁望旺，等.猪瘟病毒检测技术研究进展
［J］.安 徽 农 业 科 学 ，2007 ，35（16）：4853-4854 ，4856.
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［J］.畜 禽 业 ，2007 （3）：21-23. ［7］ 邱慧玲，陈甫.山东部分地区猪瘟与蓝耳病的流行病学调
查 ［J］.安 徽 农 业 科 学 ，2009 （18）：8491-8492 ，8550. ［8］ 杨文超，谢金文，余为一.猪瘟病毒 E2 基因的克隆及其初
收 稿 日 期 ：2010－02－26 作 者 简 介 ：郑 允 志 （1971—），男 ，助 理 兽 医 师 ，主 要 从 事 兽 医 临
床诊断和动物防疫工作。
表 1 被检样品中有或无猪瘟病毒的判定
注射被检样品 注射猪瘟兔化疫苗 后的发热反应 毒后的发热反应
判定被检样品 中含有的病毒
无
猪瘟病毒
无
有
鸡曲霉菌病的发病情况、临床症状、病理变化、实验室诊断、预防及治疗，以期为防治该病提供参考。
关键词：肉鸡曲霉菌病；预防；治疗
中 图 分 类 号 ：S858.315
文 献 标 识 码 ：B
文 章 顺 序 编 号 ：1672-5190 （2010 ）03-0187-01
肉鸡曲霉菌病，又称霉菌性肺炎，烟曲霉菌是该病主要 的 病 原 霉 菌 ，是 最 为 常见 和 致 病 力 最 强 的 霉 菌 。 烟曲 霉 菌 菌 落最初为白色致密绒毛状，菌落形成大量孢子后，其中心呈 浅蓝绿色，表面呈深绿色、灰绿色甚至为黑色丝绒状。 曲霉 菌病是平养肉鸡常见的一种真菌性疾病， 特别是南方阴雨 潮湿的春季最为常见。 1 发病情况
根据流行病学特点、 临床症状和剖检变化可作出初步 诊 断 ，特 别 是 肺 部 和 气囊 的 特 征 性 病 变 具 有 诊 断 意 义 ，最 终 确诊需要进行微生物学检查，或者接种于沙氏培养基，进行 分离培养和鉴定。 经上述检查后，确诊该病为鸡曲霉菌病。 6 防治措施 6.1 预防
①严禁使用霉变的木糠、稻草等作为垫料。 木糠必须先 在太阳下暴晒晾干后才能使用 ，30 日 龄 前 最 好 选 用谷 壳 代 替木糠。 使用垫料前可先用福尔马林熏蒸消毒。
病变主要见于患鸡肺部和气囊， 肺部见有曲霉菌菌落 和粟粒大小至绿豆大小的黄白色或灰白色干酪样坏死结 节，其质地较硬，切面可见有层状结构，中心为干酪样坏死
收 稿 日 期 ：2010－02－21 作者 简 介 ：黄 猷 军 （1977—），男 ，助 理 畜 牧 兽 医 师 ，主 要 从 事 动
物疫病防控工作。
畜牧与饲料科学
Animal Husbandry and Feed Science
2010 ，31 （3 ）:187
肉鸡曲霉菌病的诊治
黄猷军 （广西宁明县峙浪乡渔牧兽医站，广西 宁明 532508）
摘要：禽曲霉菌病是多种禽类常见的霉菌病，主要发生于 2 周龄前的幼禽，病禽以呼吸困难为主要临床特征。 介绍了肉
组织。 严重败血型病鸡， 气囊可见有同心圆状的黄色坏死 灶，甚至扩展到肝、心、肾和脾脏等器官。 除肺部和气囊外， 在气管、支气管或肠浆膜、肝脏、肾脏等处也发现有霉菌病 灶。 有神经症状的鸡，脑部可见有脑膜炎。 4 实验室诊断
取肝、脾组织抹片，革兰氏染色，镜检，未检出细菌。 取 气囊结节病灶从绿色病变区采取病理组织 （即结节中心的 绿 色 区 ）少 许 或 菌 丝团 ，置 于 载 玻 片 上 ，加 10%氢 氧 化 钾 溶 液 1 滴，压碎拌匀，盖上盖玻片，置于显微镜下检查，可见特 征性的菌丝体和孢子。 将病料浸入灭菌生理盐水中，捣碎， 接种于沙氏培养基，经培养 24~48 h 后，挑取菌落镜检，可见 有繁殖菌丝的分生孢子柄顶端膨大成顶囊，呈烧瓶状，顶囊 上部的小梗产生分生孢子，分生孢子呈球形。 5 诊断
用猪肾和睾丸的原代、次代或传代细胞均可。 病料经研磨、离心、除菌滤过后接种细胞培养，如果细 胞不出现病变， 通常用荧光抗体法可测出细胞培养中盖玻 片上细胞浆内的病毒抗原。 亦可用鸡新城疫病毒强化试验 检测猪瘟病毒的存在，方法是将被检材料先接种细胞培养， 于 37 ℃培养 4 d 再接种新城疫病毒并继续培养 3 d，如细胞 出现病变，则指示被检材料含猪瘟病毒。 3 猪体回归感染试验 用易感幼猪 ，试验分 3 组 ，每 组 3～5 头 ，其 中 一 组 接 种 猪 瘟 疫苗 ，另 一 组 注 射 猪 瘟 抗 血清 （1 mL/kg 体 重 ），第 3 组 为未免疫组。 1 周后 3 组同时接种被检材料（血毒或病料乳 剂 1 mL/头），继续饲养 2～3 周，疫苗和抗血清免疫组试验猪 不发病，未免疫组表现临床症状和病理变化，即可确诊。 该 试验最为敏感和最有诊断价值，但需要严格的隔离条件，并 且耗资费时。 4 家兔交叉免疫试验 选用体重 2 kg 左右的健康家兔 5～10 只， 每只耳静 脉 注射被检病料制剂 1 mL，注射后每天测家兔体温 3～4 次。 1 周后每只兔可静脉接种 100 个兔体半数热反应剂量， 继续 测温 5～7 d。 据资料统计， 家兔接种猪瘟兔化弱毒后 48，72 和 96 h 呈 现 热 反 应 的 百 分 率 依 次 为 77％、16％和 7％； 体 温 超 过 41 ℃ （稽留 24 h 以上为典型热反应）的占 65％，40.5～41 ℃占 28.5％，不敏感者占 6.5％。 具体判定见表 1。 5 血清学诊断 5.1 荧光 抗 体 法 用 于 检 测 细 胞 培 养 或 病 料 中 的 病 毒 抗 原。 前者在接种后 6～8 h 的盖玻片上进行 ，后者用 5～7 μm
雏鸡开始精神不振，两翅下垂，羽毛松乱，缩颈呆立，闭 目嗜睡，食欲减退，饮水增加。 后期伴有顽固下痢 ，粪便呈灰 褐色或黄绿色，摇头甩鼻，伴有浆液性鼻漏，仰头张口，呼吸 困 难 ，呈 腹 式 呼 吸 。 部分 病 例 在 眼 角 膜 下 形 成 黄色 的 干 酪 样 小球状物 。 有的病鸡出现神经症状 ，有的出现一侧或两侧眼 睑肿胀，瞬膜下形成干酪样的小球状分泌物。 3 病理变化
建立在猪瘟特异性单克隆抗体基础上的酶标方法可用 于检查病料冷冻切片中的猪瘟病毒抗原， 也可用于区分猪 瘟流行野毒或疫苗病毒。 6 分子生物学诊断
分子生物学为猪瘟的诊断提供了基因分析的多种方法， 在有条件的诊断实验室可用逆转录和聚合酶链式反应，以及 限制性内切酶谱等对病毒特定基因节段及其相对应的蛋白 质进行分析，即可快速确定被检病毒在猪瘟病毒属中的位置 。 参考文献：