《动物细胞工程学案》

《动物细胞工程学案》

张建尚/江苏

【学习目标】站得高——明确学习目标。

1.简述动物细胞培养的过程、条件及应用。

2.简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。

3.举例说出动物细胞融合的与单克隆抗体的原理和应用。

【重点和难点】

重点：1.动物细胞培养的过程及条件。

2.用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。

3.单克隆抗体的制备和应用。

难点：1.用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。

2.单克隆抗体的制备和应用。

【学法提示】

1.利用动物细胞培养过程示意图学习动物细胞培养过程，对每一步采取的措施要掌握其目的、原因，区分原代培养和传代培养，并与植物组织培养进行比较。

2.从植物原生质体融合入手，理解动物细胞融合的方法、过程；根据B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的特点，理解单克隆抗体制备的方法、意义和利用。

【课前预习】起步稳——知识源于生活。

1.动物细胞工程常用的技术手段有①、②、③、

④等，其中⑤技术是其他动物工程的基础。

2.动物细胞培养的流程：取动物组织块→剪碎→用①处理分散成②→制成③→放入培养瓶中进行④培养。对动物细胞进行培养时，要求培养瓶或培养皿内表面⑤。当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的⑥。贴满瓶壁的细胞需要重新用

⑦处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖，这样的培养称为⑧。

3.动物细胞培养的培养液应进行①处理，通常还要在培养液中添加一定量的②，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止③对细胞自身造成危害。合成培养基的成分主要有④等，通常还需加入⑤等天然成分。细胞培养中的O2是⑥所必需，CO2的主要作用是⑦。

4.动物细胞核移植是将动物的一个细胞的①，移入一个已经去掉细胞核的②中，使其重组并发育成一个新的③，并最终发育为动物个体。哺乳动物核移植可以分为④核移植（比较容易）和⑤核移植。

5.动物细胞融合也称①，融合后形成的具有原来②细胞遗传信息的单核细胞，称为③。动物细胞融合不同于植物原生质体融合的诱导方法是④。

6.将效应B细胞与骨髓瘤细胞进行融合，经过筛选后得到①细胞，这种细胞既能大量②，又能产生③。将这样的细胞群在④条件下或注射到⑤内增殖，就可以获得大量的单克隆抗体。单克隆抗体最主要的优点是⑥，并可能大量制备。

答案1.①动物细胞培养②动物细胞核移植③动物细胞融合④生产单克隆抗体⑤动物细胞培养2.①胰蛋白酶或胶原蛋白酶②单个细胞③细胞悬液④原代培养⑤光滑、无毒、易于贴附

⑥接触抑制⑦胰蛋白酶或胶原蛋白酶⑧传代培养3.①灭菌②抗生素③细胞代谢产物积累④糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素⑤血清、血浆⑥细胞代谢⑦维持培养液的pH

4.①细胞核②卵母细胞③胚胎④胚胎⑤体细胞

5.①细胞杂交②两个或多个③杂交细胞④使用灭活病毒诱导融合

6.①杂交瘤细胞②迅速大量繁殖③专一的抗体④体外⑤小鼠腹腔⑥特异性强、灵敏度高

【课堂探究】走得欢——探索成长快乐。

一、动物细胞培养

1.以下是动物细胞培养过程简图，据图分析：

（1）完成图中内容。

（2）选用动物胚胎或幼龄动物的组织、器官进行细胞培养的原因是 ① ， 动物细胞培养一般 ② （填需要或不需要）脱分化，因为 ③ 。用胰蛋白酶处理动物组织的目的是 ④ ，不能用胃蛋白酶处理的原因是 ⑤ 。目前使用的正常细胞通常为10代以内，原因是 ⑥ 。

（3）动物细胞培养过程中保证无菌的措施有 ① ，做到无毒的措施是 ② 。如果是哺乳动物细胞培养，培养箱中的气体环境是 ③ ，温度控制在 ④ ，pH 控制在 ⑤ 。

2.植物组织培养与动物细胞培养的比较：

二、动物体细胞核移植技术和克隆动物

体细胞核移植的大致过程是：

（1）完成图中内容。

① 期的卵母细胞细胞

早期胚胎 c b

（2）图中a 是 ① 技术，b 采取的措施是 ② ，c 是 ③ 技术。选择卵母细胞作为受体细胞的原因是 ④ 。

三、动物细胞融合

动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较：

四、单克隆抗体

右图是单克隆抗体制备过程图解，据图分析：

（1）分离小鼠B 淋巴细胞前，应给小鼠注射特定的 ① ，此时获得的B 淋巴细胞是 ② 。

（2）B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞两两融合的结果有

① 种，经过多次筛选才能选出所需要的杂交瘤细胞，这种杂交瘤细胞的特点是 ②

。第一次筛选所用的培养基是 ③

培养基。

（3）图中a 、b 、c 、d 分别是 ① 、 ② 、

③ 、 ④ 。

（4）单克隆抗体作为诊断试剂是利用了单克隆抗体

① 的特点，“生物导弹”主要用于治疗 ②

等疾病。

一、1.（1）①胰蛋白酶或胶原蛋白酶②原代③传代④

不变⑤改变（2）①幼龄动物的组织或胚胎细胞分化程

度低、增殖能力强，易于培养②不需要③动物细胞的全能性比较低，不能发育成完整的个体，只能分化成

人们需要的部分组织或器官④分解细胞间的蛋白质，

使其分散成单个细胞⑤胃蛋白酶适宜pH 为2左右，pH 超过6它就会失去活性,而大多动物细胞培养的适宜pH 为7.2~7.4⑥10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型（3）①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理，在培养液中添加一定量的抗生素②定期更换培养液③95%空气加5%CO 2④36.5±0.5⑤7.2~7.4 2.①植物细胞全能性②细胞增殖③固体培养基④液体培养基⑤形成新植株或组织⑥形成新细胞群⑦快速繁殖植物；培育脱毒植物；制造人工种子等⑧生产蛋白质等生物制品；皮肤移植材料的培育；检测有毒物质等 二、（1）①M Ⅱ②去核③重组（2）①核移植②电脉冲、钙离子载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等③胚胎移植④卵母细胞体积大，易于操作，含有促使细胞核表达全能性的物质和营养条件 三、①细胞膜的流

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