厦门大学-HCY-染色体畸变-小鼠骨髓细胞染色体畸变讲义
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染色体变异讲课
1 12 2 3 3 4 4 5 5 单倍体（含2个染色体组）
小结：一倍体、二倍体、多倍体和单倍体
一倍体：只有一种染色体组旳细胞或体细胞 中含单个染色体组旳个体
二倍体：具有两个染色体组旳细胞或体细胞中含
由受 两个染色体组旳个体
精卵 发育
例如：人、果蝇、玉米等大多数生物
而来 多倍体：体细胞中具有三个或三个以上旳
3、易位 条非同源染色体上
a bc
def
gh
i j kl
夜来香旳变异
a bc
移接
a bc
kl
gh
i jdef
4、倒位
染色体旳某一片段 位置颠倒
abc
def
e
颠倒
f
a ed
cb f
缺失 反复 易位 倒位
果蝇缺刻翅、 猫叫综合症
果蝇棒状眼
夜来香旳 变异、 慢性粒细 胞白血病
染色体构造变异
染色体上旳基因旳数 目和排列顺序变化
2、玉米体细胞旳染色体数为10对20个，其单倍体植 株体细胞中染色体数应是（ C ） A、5对 B、10对 C、10个 D、20个
3、以E图为对照，下列A、B、C、D四图中表达有一 种染色体组旳是 （ C ）
练习：
有关单倍体旳论述正确旳是
①单倍体只有一种染色体组 ②单倍体只具有一种染色体 ③单
A、花瓣细胞
B、叶片细胞
C、花粉细胞
D、根细胞
染色体变异
复习
生物旳变异
不可遗传旳变异 （环境条件）
基因重组
可遗传旳变异 （遗传物质）
基因突变 （分子水平）
染色体畸变 （细胞水平）
染色体变异和基因突变旳区别
基因突变是染色体旳某一种位点上基因旳变化， 这种变化在光学显微镜下是看不见旳。
小鼠骨髓细胞染色体畸变实验ppt课件
实验四 小鼠骨髓细胞染色体畸变实验
1
一、实验目的
1.学习骨髓细胞制片技术 2.学习和掌握骨髓细胞染色体畸变测定方法
Байду номын сангаас
二、实验原理 同微核 微核在有丝分裂后期滞留在细胞核外的遗传物质 染色体畸变只能在细胞分裂中期相进行观察
三、实验步骤
1.染毒：CP腹腔注射（100mg/kg）一次
2.细胞周期同步化：处死前2-3小时腹腔注射秋水仙碱 400mg/L，4mg/kg
6.制片：试管内余下约0.5ml，冰冻玻片滴片，干燥。
7.染色：Giemsa染液染色3分钟。
8.阅片：油镜下计数100个中期相细胞，畸变细胞率
四.注意事项
1.骨骺端
2.滴片：距玻片5-8cm。过低染色体分散不开，过高细胞 破裂
3.低渗：时间过长染色体短胖，不清楚；时间过短染色体 不分开。
Thank You for Your Attention
3.取样：双侧股骨→PBS（pH6.8）5ml冲洗骨髓腔→离心 1500rpm/min→弃上清
4.低渗：0.075M KCl6ml,37°c孵育15分钟→加入固定液 1ml预固定1分钟→离心1000rpm/min十分钟，弃上清
5.固定：固定液4ml，37°c孵育20分钟→离心十分钟 （1000rpm/min），弃上清。重复一次步骤5.
染色体畸变的遗传分析讲课文档
减数分裂时同源染色体之间错位配对引发不等交换的结果。
34
第三十四页，共161页。
倒 位(inv)
nInversion:一条染色体发生 两次断裂，中间的断片转动
180°后重接。
v倒位不改变染色体基因的数量，只 造成基因的重排。
35
第三十五页，共161页。
1.倒位(inversion)的类型
臂间倒位(pericentric inversion)：包括着丝粒的倒 位，倒位区段涉及染色体的两 个臂。
n 这些特殊的疏松区段转录100次左右，是为了产生
幼虫期和蛹期所需要的非常大量的丝状蛋白质的 mRNA。
12
第十二页，共161页。
13
第十三页，共161页。
染色体结构变异的类型
Types of changes in chromosome structure
n 缺失 Deletion n 重复 Duplication
患儿一般表现为智力低下，生长发育迟缓，两眼距离较远、外眼角下斜、鼻梁低平、耳
位低、下颌小、喉肌发育不良，哭声轻、音调高很像猫叫，而其最明显的特征是哭声类似
猫叫，猫叫综合征由此得名；常伴有先天性心脏病，因而在婴、幼儿期就夭折，少数活至
成年。
25
第二十五页，共161页。
重 复 (dup)
Ø Duplication:两条同源染色体在
ü果蝇第2染色体上的显性基因Cy(Curly)。杂合子Cy/+表现为 双翅向背面卷曲，纯合子Cy/Cy致死。
üCy品系果蝇的第2染色体左臂(2L)和右臂(2R)均存在自发倒位
，整个第2染色体的交换几乎全被抑制。因此第2染色体上任何
致死基因都可以用Cy来平衡。
2021//1100//1155
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第三十四页，共161页。
倒 位(inv)
nInversion:一条染色体发生 两次断裂，中间的断片转动
180°后重接。
v倒位不改变染色体基因的数量，只 造成基因的重排。
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第三十五页，共161页。
1.倒位(inversion)的类型
臂间倒位(pericentric inversion)：包括着丝粒的倒 位，倒位区段涉及染色体的两 个臂。
n 这些特殊的疏松区段转录100次左右，是为了产生
幼虫期和蛹期所需要的非常大量的丝状蛋白质的 mRNA。
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第十二页，共161页。
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第十三页，共161页。
染色体结构变异的类型
Types of changes in chromosome structure
n 缺失 Deletion n 重复 Duplication
患儿一般表现为智力低下，生长发育迟缓，两眼距离较远、外眼角下斜、鼻梁低平、耳
位低、下颌小、喉肌发育不良，哭声轻、音调高很像猫叫，而其最明显的特征是哭声类似
猫叫，猫叫综合征由此得名；常伴有先天性心脏病，因而在婴、幼儿期就夭折，少数活至
成年。
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第二十五页，共161页。
重 复 (dup)
Ø Duplication:两条同源染色体在
ü果蝇第2染色体上的显性基因Cy(Curly)。杂合子Cy/+表现为 双翅向背面卷曲，纯合子Cy/Cy致死。
üCy品系果蝇的第2染色体左臂(2L)和右臂(2R)均存在自发倒位
，整个第2染色体的交换几乎全被抑制。因此第2染色体上任何
致死基因都可以用Cy来平衡。
2021//1100//1155
染色体畸变详解演示文稿
染色体某一区段的 正常顺序颠倒了 倒位的类型
臂内倒位 臂间倒位
倒位的细胞学效应
倒位纯合体减数分裂完全正常，只是倒位区段 上的基因与连锁群其他基因的重组值发生改变 倒位杂合体在减数分裂过程中可形成不同的联 会图像
e abcd
f ghij
abcd
Байду номын сангаасghij
fe
a
j
bcdefghi
bcdefghi
j
a
倒位的遗传学效应
3Ⅰ 3Ⅱ 3Ⅱ 3Ⅱ 3Ⅲ 3Ⅳ
(a1a1a2a2a3a3)(b1b1b2b2b3b3) 6Ⅱ
AABBEE ABE
(a1a1a2a2a3a3)(b1b1b2b2b3b3)( e1e1e2e2e3e3)
9Ⅱ
(a1a2a3)(b1b2b3)(e1e2e3)
9Ⅰ
整倍体
单倍体
体细胞中具有本物种配子染色体数目（n）的个体 单元单倍体指二倍体的单倍体 多元单倍体指多倍体的单倍体
X射线
重复
染色体上某一区 段出现两份或两 份以上 重复和缺失往往 伴随出现
重复
重复的类型
顺接重复 反接重复 错位重复
abc abc abc
rs
defdef ghi deffed ghi defghi tdefuvw
重复的细胞学效应
若重复区段较长，重复杂合体也具有特征性的 减数分裂图像——重复环 为和缺失环相区分，必须和联会染色体的正常 长度、着丝粒的正常位置等进行比较
融合
配子 配子
易位的遗传学效应
位置效应
由于基因改变了在 染色体上的位置而 带来表型效应改变 的现象
Burkitt淋巴癌的发生与易位有关
染色体数目变异
臂内倒位 臂间倒位
倒位的细胞学效应
倒位纯合体减数分裂完全正常，只是倒位区段 上的基因与连锁群其他基因的重组值发生改变 倒位杂合体在减数分裂过程中可形成不同的联 会图像
e abcd
f ghij
abcd
Байду номын сангаасghij
fe
a
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j
a
倒位的遗传学效应
3Ⅰ 3Ⅱ 3Ⅱ 3Ⅱ 3Ⅲ 3Ⅳ
(a1a1a2a2a3a3)(b1b1b2b2b3b3) 6Ⅱ
AABBEE ABE
(a1a1a2a2a3a3)(b1b1b2b2b3b3)( e1e1e2e2e3e3)
9Ⅱ
(a1a2a3)(b1b2b3)(e1e2e3)
9Ⅰ
整倍体
单倍体
体细胞中具有本物种配子染色体数目（n）的个体 单元单倍体指二倍体的单倍体 多元单倍体指多倍体的单倍体
X射线
重复
染色体上某一区 段出现两份或两 份以上 重复和缺失往往 伴随出现
重复
重复的类型
顺接重复 反接重复 错位重复
abc abc abc
rs
defdef ghi deffed ghi defghi tdefuvw
重复的细胞学效应
若重复区段较长，重复杂合体也具有特征性的 减数分裂图像——重复环 为和缺失环相区分，必须和联会染色体的正常 长度、着丝粒的正常位置等进行比较
融合
配子 配子
易位的遗传学效应
位置效应
由于基因改变了在 染色体上的位置而 带来表型效应改变 的现象
Burkitt淋巴癌的发生与易位有关
染色体数目变异
染色体畸变的遗传学分析课件
在染色体复制或分离的过程中产生的错误。
Hale Waihona Puke 染色体异常的类别染色体结构异常
包括缺失、倒位、重复、互换和断裂。
染色体数量异常
包括三体性和单体性。
染色体畸变的原因
遗传因素
包括基因突变、遗传性疾病和家族史。
错误的细胞分裂
在染色体复制或分离过程中出现错误。
环境因素
如辐射、化学物质和药物的暴露。
染色体畸变的表现和症状
染色体畸变的遗传学分析 课件
染色体畸变是指染色体结构或数量的异常，有多种原因引起。本课件将介绍 染色体异常的类别、症状、诊断和治疗方法，以及预防染色体畸变的措施。
什么是染色体畸变
1 结构异常
染色体的一部分缺失、重复、倒位、互换或断裂。
2 数量异常
染色体的数量增加（三体性）或减少（单体性）。
3 细胞遗传异常
通过使用药物来减轻相关的症状。
2
手术
例如修复染色体结构异常。
3
辅助生殖技术
如试管婴儿技术来避免染色体异常。
预防染色体畸变的方法
1 健康生活方式
如合理饮食、锻炼和避免有害物质。
3 遗传筛查
提前了解携带染色体异常的风险。
2 遗传咨询
寻求专业遗传咨询师的建议。
身体特征异常
例如面部畸形、身材异常。
智力和发育延迟
如学习困难、运动发育迟缓。
其他症状
包括心脏病、免疫系统问题。
染色体畸变的诊断和检测方法
基因检测
通过分析个体的DNA确定染色 体异常。
羊水穿刺
通过取得胎儿细胞进行染色体 分析。
唾液或血液检测
通过检测细胞中的染色体异常。
染色体畸变的治疗方法
1
药物治疗
Hale Waihona Puke 染色体异常的类别染色体结构异常
包括缺失、倒位、重复、互换和断裂。
染色体数量异常
包括三体性和单体性。
染色体畸变的原因
遗传因素
包括基因突变、遗传性疾病和家族史。
错误的细胞分裂
在染色体复制或分离过程中出现错误。
环境因素
如辐射、化学物质和药物的暴露。
染色体畸变的表现和症状
染色体畸变的遗传学分析 课件
染色体畸变是指染色体结构或数量的异常，有多种原因引起。本课件将介绍 染色体异常的类别、症状、诊断和治疗方法，以及预防染色体畸变的措施。
什么是染色体畸变
1 结构异常
染色体的一部分缺失、重复、倒位、互换或断裂。
2 数量异常
染色体的数量增加（三体性）或减少（单体性）。
3 细胞遗传异常
通过使用药物来减轻相关的症状。
2
手术
例如修复染色体结构异常。
3
辅助生殖技术
如试管婴儿技术来避免染色体异常。
预防染色体畸变的方法
1 健康生活方式
如合理饮食、锻炼和避免有害物质。
3 遗传筛查
提前了解携带染色体异常的风险。
2 遗传咨询
寻求专业遗传咨询师的建议。
身体特征异常
例如面部畸形、身材异常。
智力和发育延迟
如学习困难、运动发育迟缓。
其他症状
包括心脏病、免疫系统问题。
染色体畸变的诊断和检测方法
基因检测
通过分析个体的DNA确定染色 体异常。
羊水穿刺
通过取得胎儿细胞进行染色体 分析。
唾液或血液检测
通过检测细胞中的染色体异常。
染色体畸变的治疗方法
1
药物治疗
(医学)染色体畸变详解(医学健康讲座教学培训课件)
缺失(deletion，del)
❖ 中间缺失(interstitial deletion)
4q13
4q25
46, XX(XY), del(4)(q13q25)
（医学健康讲座教学培训课件）
缺失(deletion，del)
❖ 中间缺失(interstitial deletion)
4q13
4q25
46, XX(XY), del(4)(q13q25) 46, XX(XY), del(4)(pter→q13::q25→qter)
女性间期细胞核中紧贴 核膜内缘染色较深，大 小约1um的椭圆形小体
X染色质 A、B、C、D、E：分别为含0、 1、2、3、4个X染色质
（医学健康讲座教学培训课件）
X染色体失活假说（Lyon假说） 失活发生在胚胎发育早期 X染色体失活是随机的 失活是完全的 失活是永久的和克隆式繁殖的
（医学健康讲座教学培训课件）
▪ 人类染色体的数目 ：2n=46条
（医学健康讲座教学培训课件）
▪ 人类染色体的结构、形态
▪ 根据人类染色体着丝粒的位 置可将染色体分为3种类型
▪ 中着丝粒染色体（metacentric chromosome）
▪ 亚中着丝粒染色体 （submetacentric chromosome）
▪ 近端着丝粒染色体 （acrocentric chromosome）
2N
2N 2N＋1 2N－1
（医学健康讲座教学培训课件）
染色体数目异常
染色体丢失(loss)
（医学健康讲座教学培训课件）
染色体结构畸变
染色体结构畸变：指染色体部分片段的缺失、 重复或重排。
基础：染色体断裂和/或断裂后的异常连接 简式
❖ 中间缺失(interstitial deletion)
4q13
4q25
46, XX(XY), del(4)(q13q25)
（医学健康讲座教学培训课件）
缺失(deletion，del)
❖ 中间缺失(interstitial deletion)
4q13
4q25
46, XX(XY), del(4)(q13q25) 46, XX(XY), del(4)(pter→q13::q25→qter)
女性间期细胞核中紧贴 核膜内缘染色较深，大 小约1um的椭圆形小体
X染色质 A、B、C、D、E：分别为含0、 1、2、3、4个X染色质
（医学健康讲座教学培训课件）
X染色体失活假说（Lyon假说） 失活发生在胚胎发育早期 X染色体失活是随机的 失活是完全的 失活是永久的和克隆式繁殖的
（医学健康讲座教学培训课件）
▪ 人类染色体的数目 ：2n=46条
（医学健康讲座教学培训课件）
▪ 人类染色体的结构、形态
▪ 根据人类染色体着丝粒的位 置可将染色体分为3种类型
▪ 中着丝粒染色体（metacentric chromosome）
▪ 亚中着丝粒染色体 （submetacentric chromosome）
▪ 近端着丝粒染色体 （acrocentric chromosome）
2N
2N 2N＋1 2N－1
（医学健康讲座教学培训课件）
染色体数目异常
染色体丢失(loss)
（医学健康讲座教学培训课件）
染色体结构畸变
染色体结构畸变：指染色体部分片段的缺失、 重复或重排。
基础：染色体断裂和/或断裂后的异常连接 简式
人类染色体染色体畸变讲课课件
染色体畸变可以发生在任何时候，从受精卵分裂到胚胎发育过程中，都可能发生染 色体畸变。
染色体畸变可能是由于遗传因素或环境因素引起的，如辐射、化学物质、病毒等。
染色体畸变的类型
染色体数目异常
染色体异常的遗传方式
如唐氏综合征、威廉姆斯综合征等， 是由于染色体数目异常引起的。
包括常染色体显性遗传、常染色体隐 性遗传、性染色体遗传等。
致癌物质
长期接触某些致癌物质，如亚硝胺、 多环芳烃等，会增加染色体畸变的几 率。
生物因素
病毒
某些病毒如巨细胞病毒、风疹病毒等，能引起染色体的畸变。
细菌
某些细菌及其毒素，也可能导致染色体畸变。
遗传因素
遗传疾病
某些遗传疾病，如唐氏综合征、威廉姆斯综合征等，是由于 染色体畸变引起的。
基因突变
某些基因突变可以影响染色体的稳定性，导致染色体畸变。
04
染色体畸变的后果
遗传性疾病
唐氏综合征
由于21号染色体多了一条 ，导致智力低下、生长发 育迟缓等症状。
威廉姆斯综合征
7号染色体片段缺失，表现 为心血管疾病、智力障碍 等。
囊性纤维化
由于CFTR基因突变，导致 肺部和消化道问题。
生长发育异常
先天性畸形
如先天性心脏病、先天性肾脏疾 病等。
身材矮小
03
染色体畸变的表现
数量畸变
染色体数目异常
多一条或少一条染色体，如唐氏综合征（21号染色体多一条）。
染色体片段重复或缺失
染色体上某一片段多出或缺失，如威廉姆斯综合征（7号染色体缺失片段）。
染色体某一段倒转180度 ，如9号染色体臂间倒位 。
易位
染色体某一段交换位置， 如罗伯逊易位（13号染色 体长臂与14号染色体短臂 易位）。
染色体畸变可能是由于遗传因素或环境因素引起的，如辐射、化学物质、病毒等。
染色体畸变的类型
染色体数目异常
染色体异常的遗传方式
如唐氏综合征、威廉姆斯综合征等， 是由于染色体数目异常引起的。
包括常染色体显性遗传、常染色体隐 性遗传、性染色体遗传等。
致癌物质
长期接触某些致癌物质，如亚硝胺、 多环芳烃等，会增加染色体畸变的几 率。
生物因素
病毒
某些病毒如巨细胞病毒、风疹病毒等，能引起染色体的畸变。
细菌
某些细菌及其毒素，也可能导致染色体畸变。
遗传因素
遗传疾病
某些遗传疾病，如唐氏综合征、威廉姆斯综合征等，是由于 染色体畸变引起的。
基因突变
某些基因突变可以影响染色体的稳定性，导致染色体畸变。
04
染色体畸变的后果
遗传性疾病
唐氏综合征
由于21号染色体多了一条 ，导致智力低下、生长发 育迟缓等症状。
威廉姆斯综合征
7号染色体片段缺失，表现 为心血管疾病、智力障碍 等。
囊性纤维化
由于CFTR基因突变，导致 肺部和消化道问题。
生长发育异常
先天性畸形
如先天性心脏病、先天性肾脏疾 病等。
身材矮小
03
染色体畸变的表现
数量畸变
染色体数目异常
多一条或少一条染色体，如唐氏综合征（21号染色体多一条）。
染色体片段重复或缺失
染色体上某一片段多出或缺失，如威廉姆斯综合征（7号染色体缺失片段）。
染色体某一段倒转180度 ，如9号染色体臂间倒位 。
易位
染色体某一段交换位置， 如罗伯逊易位（13号染色 体长臂与14号染色体短臂 易位）。
染色体变异PPT培训资料.ppt
普通小麦是六倍体等
单倍体：由配子或未受精的卵细胞发育而成的个体。 如：蜂群中的雄蜂是单倍体
单倍体与二倍体、多倍体的区别：
受精卵 发育 配子 发育
二倍体或多倍体 单倍体
课件
几乎全部动物以及过半数的高等植物是 二倍体(如：番茄、人、玉米、果蝇)
课件
常见二倍体
课件
马铃薯是四倍体
香蕉是三倍体
普通小麦是 六倍体
课件
受精卵
卵细胞
受精卵
（32）
（16）
（32）
思考:
1、雄峰的体细胞内含有1几6 条染色体? 2、本物种（蜂王）的配子中含有1几6 条染色体？
课件
受精卵 未受精的卵细胞
蜂王（二倍体）（体细胞中有 2个染色体组，共 3条2染色体） 工蜂（二倍体）（体细胞中有 2个染色体组，共 3条2染色体） 雄蜂（单倍体）（体细胞中有 1个染色体组，共 1条6染色体）
ⅣⅣ
Ⅱ Ⅱ
ⅢⅢ 体细胞
Ⅹ Y （精原细胞）
♂减数分裂
Ⅳ卵
生殖细胞
Ⅱ Ⅹ
Ⅲ
细 胞
Ⅳ 精Ⅳ
Ⅱ Ⅲ 子Ⅱ Ⅲ
Ⅹ
Y
课件
细胞中的一组非同源染色体，在形态和功能上各不相同， 携带着控制生物生长发育的全部遗传信息，这样的一组 染色体叫做一个染色体组。
课件
思考?
(１)雄果蝇的体细胞中共有哪几对同源 染色体？ 答：Ⅱ和Ⅱ，Ⅲ和Ⅲ，Ⅳ和Ⅳ， X和Y。
1、一个染色体组不含有同源染色体 2、一个染色体组中所含的染色体形态、大 小和功能各不相同 3、一个染色体组中含有控制生物性状的一 整套基因，但不能重复。
课件
染色体组数目的判断方法
1、根据染色体形态判断 细胞内形态相同的染色体有几条，则
厦门大学-实验五.小鼠骨髓细胞微核试验(讲义)
1小鼠骨髓细胞微核试验(Bone marrow cell micronucleus test)⏹指存在于细胞中主核之外的一种颗粒，大小相当于细胞直径的1/20~1/5，呈圆形或杏仁状，其染色与细胞核一致，在间期细胞中可以出现一个或多个。
2微核(micronucleus ，MN)细胞核微核⏹细胞有丝分裂后期染色体有规律地进入子细胞形成细胞核时，仍然留在细胞质中的染色单体或染色体的无着丝粒断片/环，也可以是纺锤体受损而丢失的整个染色体。
⏹它在末期以后，单独形成一个或几个规则的次核，被包含在细胞的胞质内而形成，由于比核小得多故称微核。
⏹一般认为微核是细胞受到染色体断裂剂或纺锤体毒物作用的结果。
3微核(micronucleus ，MN)小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验⏹嗜多染红细胞(polychromatic erythrocyte ，PCE)细胞质内仍含有核糖体的未成熟红细胞。
4⏹正染红细胞(normochromatic erythrocyte ，NCE)核糖体已消失的成熟红细胞。
为何选择PCE (polychromatic erythrocytes)⏹PCE ：指在红细胞成熟之前，最后一次分离后数小时将主核排出的细胞，而微核仍保留在细胞质中。
⏹微核可以出现在多种细胞，但在有核细胞中难与正常核的分叶及核突出物区别。
5为何选择PCE ？⏹PCE ：Giemsa 染色呈灰蓝色(胞质内含核糖体)⏹NCE(正染红细胞/成熟红细胞，normochromatic erythrocyte ，NCE))：淡桔红色⏹骨髓中PCE 数量充足，微核容易辨认，且微核自发率低，因此，成为微核试验的首选细胞群。
6一.实验目的和意义⏹1.了解小鼠骨髓嗜多染红细胞(PCE)微核试验的实验原理及毒理学意义。
⏹2. 掌握小鼠骨髓嗜多染红细胞(PCE)微核测定方法。
7二.实验原理⏹微核试验检测外源化学物诱导产生的染色体完整性改变和染色体分离改变这两种遗传学终点。
染色体畸变与染色体病_培训课件-PPT精选文档
2
染色体畸变原因
年龄过大
放射线 病毒感染 化学药物 母亲妊娠 遗传因素
3
（一）染色体数目异常类型及其产生机制
以二倍体为标准，如果体细胞染色体数目超出或少于
2n=46，称为染色体数目畸变。
主要包括： 整倍体畸变 非整倍体畸变 嵌合体
4
1. 整倍体畸变
体细胞中染色
形成： 单倍体 三倍体 四倍体 多倍体等
染色体畸变与 染色体病
1
一、染色体畸变的概念
染色体畸变是由于染色体数目异常和（或）结 构畸变使其携带的基因在数目上或排列顺序上发生改变。
类型：
数目畸变：指染色体偏离正常数目，少于 或超出二倍体。是细胞有丝分裂机制被损 伤的结果。包括整倍体和非整倍体。
结构畸变：是染色体断裂后发生非正常的 重接的产物。种类较多。
30
核型：三种 游离型：47，XX（XY），+21。 占95% 易位型：46，XX（XY）， - 14，+t（14q21q）。 占3%～4% 嵌合型：46，XX（XY）/47 ，XX（XY），+21。
占1%～2%
31
原因： 1）减数分裂不分离 母 95% 2）卵裂过程中不分离——嵌合体 3）双亲之一是平衡易位携带者，核型为：45，XX（XY）， -14，-21，+t（14q；21q）。 4）高龄孕妇危险率增高， 20岁，1/1550， 30岁，1/700， 40岁，1/100， 45岁，1/25。
• 核型： • 46, XX(XY),del(5)(p15)
17
2. 倒位
(1)臂内倒位
1 2 3 4 5 6 7 1
2 3
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4
染色体皱缩 形态明显
5
小鼠染色体数目、核型
6
端着丝粒染色体
7
实验目的及意义
目的：
掌握动物骨髓细胞染色体标本制作方法 了解动物体内染毒及染色体畸变常见类型
意义：
检测受试物导致动物染色体畸变的能力和 畸变类型
8
实验动物选择与处理
1.动物 一般选用成年大鼠或小鼠，每组6-10只，最好雌雄各半；
本试验：PBS
15
1.移液器吸取5mlPBS置于 离 心管中 2. 注射器反复吸取PBS冲洗 3. 第二只股骨用同一PBS
16
滴片
自-20冰箱60%乙醇溶液中，取出玻 片
25-40cm高度滴片，玻片倾斜30° 每个标本制备2-3张片 染 滴自做染色，取然好色立吉晾（标即姆干同记取萨（微B染液可 核液，以 试A顺液验借序，）助滴滴吹加加风1载机6滴玻），片吸1 耳 水阅观背球片察面吹：记冲匀一录洗AB只畸载液小变玻，鼠种片静找类，置到，晾102计干m00算in分—畸裂—变相自率，来
9
实验流程总图
收获细胞：处死，取股骨， 4ml PBS 冲 洗 ， 1500r/min×10min，弃 上清，轻轻倒置沥干
2-4h前腹腔注射秋水仙素
24h前腹腔注射受试物
24.5h称重、分组
阅片：低倍镜 找良好视野， 换油镜观察
重要
KCl需要 提前预热
低渗：轻柔打散，加入0.070mol/L KCl 6ml，37℃低渗30-35min，第 10min，以枪头吹气泡的方式再次混 匀细胞悬液，加2ml固定液， 1000r/min×10min，弃上清，余 0.2ml液体
配枪头一盒
100ml量筒
1支/组，配固定液
1ml注射器
1人/支
载玻片（冰片） 45张，60%酒精浸泡，-20℃备用
胶头滴管
2支/组
玻璃染色缸及片架 2个，浸泡冰片用
晾片架
一组学生共用一个，全班5个
玻璃铅笔
1支/组
25ml滴瓶
2瓶/组，A\B液
洗耳球
3个/组，共12个
120mm培养皿 2个/组，共8个
22
22
乳胶手套
1副/人
器具
酒精棉球及干棉球 若干
搪瓷盘
1个/人
直头眼科剪1把/人Fra bibliotek眼科镊
1把/人
动物天平3台；
滤纸 10ml离心管
若干 1支/人，PBS用
50ml离心管
1支/组，固定液新鲜配制
光学显微镜，20台； 离心管架
15ml离心管
水浴锅一台； 15ml离心机2台； 100-1000ml移液器，
• 思考题： • 1. 比较染色体畸变和微核试验两者目的意义和方法上的异同
24
25
实验流程总图
收获细胞：处死，取股骨， 5ml PBS 冲 洗 ， 1500r/min×5min，弃 上清，轻轻倒置沥干
2-4h前腹腔注射秋水仙素
24h前腹腔注射受试物
24.5h称重、分组
阅片：低倍镜 找良好视野， 换油镜观察
固定：4ml固定液轻柔混匀，室温静 置15min，1000r/min离心10min， 再重复一次，留约0.1-0.2ml液体
制片染色：混匀细胞，悬滴于冰冻载 玻片，晾干，姬姆萨快速染色试剂盒 10 染色，清洗晾干
体重、分组和注射体积表
11
腹腔注射要点？
12
13
尽量向脊 柱处剪断
14
也可用：滤纸
重要
KCl需要 提前预热
低渗：轻柔打散，加入0.070mol/L KCl 6ml，37℃低渗30-35min，第 10min，以枪头吹气泡的方式再次混 匀细胞悬液，加2ml固定液， 1500r/min×5min，弃上清，余 0.2ml液体
3
染色体畸变试验原理
观察染色体形态结构和数目改变称为染色体畸变分析，又称 细胞遗传学试验。
优点：将观察细胞停留在细胞分裂中期相，用显微镜直接检 查染色体畸变和染色体分离异常。可以观察到裂隙、断裂、 短片、无着丝粒环、染色体环、双或多着丝粒染色体、染色 体粉碎等。
缺点是分裂中期相分析耗时并且需要熟练技巧
毒理学动物实验进展和趋势： 转基因动物模型
微核试验 染 色体畸变试验 精子畸形试验
从体内试验(in vivo) 体外试验(in vitro) Ames试验，等
从整体动物试验3R替代试验
2
微核试验回顾——
1 讨论微核试验结果：重点（数了PCE/NCE、多少PCE有微核） 2 骨髓采集问题 3 染色问题，比值偏高 4 固定的问题，细胞数量太少 5 针对结果要进行分析 6 思考题要认真对待
2.染1. 毒共与2取0只样昆时明间雌鼠（20g左右） 一般染毒一次或多次，多次更合理。末次染毒后24h处死
动物，2. 阳收性获物细：胞环磷酰胺，40mg/kg 3. 剂受量试物：丙烯酰胺1/8, 1/4, 1/2 LD50 (180mg/kg) 以最最大3. 一高给次剂药染量量毒为或1最人4:大使00耐用、受剂腹剂量腔量的注或5射03-，100%204倍-h80。后%处L死D小50 。鼠低毒物质应 射溶设剂4.分3或-组5生个：理剂分盐量5水组组；，每阳剂组性量4只对阔小照度鼠注在，射10230名0--15学000m生0或g共/k更一g环大只磷。酰阴胺性，对经照腹注 腔注射1或2次。 4. 给药途径 原则上采用与人体接触化学毒物相同的途径。
17
阅片观察
低倍 镜
高倍 镜
油镜
低倍镜下选择分散良好，细胞未破裂的中期分 裂相，油镜下观察并记录染色 结构异常和数 目异常细体
胞。
18
19
20
染色体数目计数
21
试剂
环磷酰胺：40mg/kg （2mg/ml） 秋水仙素：4mg/kg (0.2mg/ml)
缓冲液：PBS（pH7.4） 低渗液： 0.07mol/L KCl 固定液：甲醇3份＋冰醋酸1份（30ml甲醇+10ml冰醋酸） 染色剂： 姬姆萨快速染色试剂盒
小鼠骨髓细胞染色体畸变
1
毒理学动物实验的背景
毒理学——实验学科——整体动物实验 原则：对实验动物的作用可以外推于人；
暴露剂量(高剂量阳性模型)； 暴露途径(与人实际相同/相似)。
应用：毒性评价试验 一般毒性试验：急性毒性，局部毒性，慢性毒性等；
特殊毒性试验：致癌，致畸，致突变等
机制研究(转基因动物)
60ml滴瓶23
2瓶，香柏油、拭镜液
镜头纸
1本，全班
实验报告
• 1. 实验目的意义； • 2. 实验动物情况、受试物名称、浓度； • 3. 实验动物体重、随机分组、注射体积和时间； • 4. 实验操作步骤； • 5. 记录染色体畸变的种类和计算每张片子、每组平均畸变率； • 6.讨论实验中关键步骤和细节对结果的影响。
染色体皱缩 形态明显
5
小鼠染色体数目、核型
6
端着丝粒染色体
7
实验目的及意义
目的：
掌握动物骨髓细胞染色体标本制作方法 了解动物体内染毒及染色体畸变常见类型
意义：
检测受试物导致动物染色体畸变的能力和 畸变类型
8
实验动物选择与处理
1.动物 一般选用成年大鼠或小鼠，每组6-10只，最好雌雄各半；
本试验：PBS
15
1.移液器吸取5mlPBS置于 离 心管中 2. 注射器反复吸取PBS冲洗 3. 第二只股骨用同一PBS
16
滴片
自-20冰箱60%乙醇溶液中，取出玻 片
25-40cm高度滴片，玻片倾斜30° 每个标本制备2-3张片 染 滴自做染色，取然好色立吉晾（标即姆干同记取萨（微B染液可 核液，以 试A顺液验借序，）助滴滴吹加加风1载机6滴玻），片吸1 耳 水阅观背球片察面吹：记冲匀一录洗AB只畸载液小变玻，鼠种片静找类，置到，晾102计干m00算in分—畸裂—变相自率，来
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实验流程总图
收获细胞：处死，取股骨， 4ml PBS 冲 洗 ， 1500r/min×10min，弃 上清，轻轻倒置沥干
2-4h前腹腔注射秋水仙素
24h前腹腔注射受试物
24.5h称重、分组
阅片：低倍镜 找良好视野， 换油镜观察
重要
KCl需要 提前预热
低渗：轻柔打散，加入0.070mol/L KCl 6ml，37℃低渗30-35min，第 10min，以枪头吹气泡的方式再次混 匀细胞悬液，加2ml固定液， 1000r/min×10min，弃上清，余 0.2ml液体
配枪头一盒
100ml量筒
1支/组，配固定液
1ml注射器
1人/支
载玻片（冰片） 45张，60%酒精浸泡，-20℃备用
胶头滴管
2支/组
玻璃染色缸及片架 2个，浸泡冰片用
晾片架
一组学生共用一个，全班5个
玻璃铅笔
1支/组
25ml滴瓶
2瓶/组，A\B液
洗耳球
3个/组，共12个
120mm培养皿 2个/组，共8个
22
22
乳胶手套
1副/人
器具
酒精棉球及干棉球 若干
搪瓷盘
1个/人
直头眼科剪1把/人Fra bibliotek眼科镊
1把/人
动物天平3台；
滤纸 10ml离心管
若干 1支/人，PBS用
50ml离心管
1支/组，固定液新鲜配制
光学显微镜，20台； 离心管架
15ml离心管
水浴锅一台； 15ml离心机2台； 100-1000ml移液器，
• 思考题： • 1. 比较染色体畸变和微核试验两者目的意义和方法上的异同
24
25
实验流程总图
收获细胞：处死，取股骨， 5ml PBS 冲 洗 ， 1500r/min×5min，弃 上清，轻轻倒置沥干
2-4h前腹腔注射秋水仙素
24h前腹腔注射受试物
24.5h称重、分组
阅片：低倍镜 找良好视野， 换油镜观察
固定：4ml固定液轻柔混匀，室温静 置15min，1000r/min离心10min， 再重复一次，留约0.1-0.2ml液体
制片染色：混匀细胞，悬滴于冰冻载 玻片，晾干，姬姆萨快速染色试剂盒 10 染色，清洗晾干
体重、分组和注射体积表
11
腹腔注射要点？
12
13
尽量向脊 柱处剪断
14
也可用：滤纸
重要
KCl需要 提前预热
低渗：轻柔打散，加入0.070mol/L KCl 6ml，37℃低渗30-35min，第 10min，以枪头吹气泡的方式再次混 匀细胞悬液，加2ml固定液， 1500r/min×5min，弃上清，余 0.2ml液体
3
染色体畸变试验原理
观察染色体形态结构和数目改变称为染色体畸变分析，又称 细胞遗传学试验。
优点：将观察细胞停留在细胞分裂中期相，用显微镜直接检 查染色体畸变和染色体分离异常。可以观察到裂隙、断裂、 短片、无着丝粒环、染色体环、双或多着丝粒染色体、染色 体粉碎等。
缺点是分裂中期相分析耗时并且需要熟练技巧
毒理学动物实验进展和趋势： 转基因动物模型
微核试验 染 色体畸变试验 精子畸形试验
从体内试验(in vivo) 体外试验(in vitro) Ames试验，等
从整体动物试验3R替代试验
2
微核试验回顾——
1 讨论微核试验结果：重点（数了PCE/NCE、多少PCE有微核） 2 骨髓采集问题 3 染色问题，比值偏高 4 固定的问题，细胞数量太少 5 针对结果要进行分析 6 思考题要认真对待
2.染1. 毒共与2取0只样昆时明间雌鼠（20g左右） 一般染毒一次或多次，多次更合理。末次染毒后24h处死
动物，2. 阳收性获物细：胞环磷酰胺，40mg/kg 3. 剂受量试物：丙烯酰胺1/8, 1/4, 1/2 LD50 (180mg/kg) 以最最大3. 一高给次剂药染量量毒为或1最人4:大使00耐用、受剂腹剂量腔量的注或5射03-，100%204倍-h80。后%处L死D小50 。鼠低毒物质应 射溶设剂4.分3或-组5生个：理剂分盐量5水组组；，每阳剂组性量4只对阔小照度鼠注在，射10230名0--15学000m生0或g共/k更一g环大只磷。酰阴胺性，对经照腹注 腔注射1或2次。 4. 给药途径 原则上采用与人体接触化学毒物相同的途径。
17
阅片观察
低倍 镜
高倍 镜
油镜
低倍镜下选择分散良好，细胞未破裂的中期分 裂相，油镜下观察并记录染色 结构异常和数 目异常细体
胞。
18
19
20
染色体数目计数
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试剂
环磷酰胺：40mg/kg （2mg/ml） 秋水仙素：4mg/kg (0.2mg/ml)
缓冲液：PBS（pH7.4） 低渗液： 0.07mol/L KCl 固定液：甲醇3份＋冰醋酸1份（30ml甲醇+10ml冰醋酸） 染色剂： 姬姆萨快速染色试剂盒
小鼠骨髓细胞染色体畸变
1
毒理学动物实验的背景
毒理学——实验学科——整体动物实验 原则：对实验动物的作用可以外推于人；
暴露剂量(高剂量阳性模型)； 暴露途径(与人实际相同/相似)。
应用：毒性评价试验 一般毒性试验：急性毒性，局部毒性，慢性毒性等；
特殊毒性试验：致癌，致畸，致突变等
机制研究(转基因动物)
60ml滴瓶23
2瓶，香柏油、拭镜液
镜头纸
1本，全班
实验报告
• 1. 实验目的意义； • 2. 实验动物情况、受试物名称、浓度； • 3. 实验动物体重、随机分组、注射体积和时间； • 4. 实验操作步骤； • 5. 记录染色体畸变的种类和计算每张片子、每组平均畸变率； • 6.讨论实验中关键步骤和细节对结果的影响。