乳腺癌组织中Crk蛋白的表达及其临床意义

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KRT81_在乳腺癌组织中的表达及其调控AKT

[收稿日期]2022-02-14　[修回日期]2022-05-08[基金项目]蚌埠医学院自然科学研究重点项目(2020byzd148)[作者单位]蚌埠医学院第一附属医院肿瘤外科,安徽蚌埠233004[作者简介]王　腾(1988-),男,主治医师.[通信作者]张　晖,硕士,主任医师.E⁃mail:dajian0629@[文章编号]1000⁃2200(2023)11⁃1488⁃07㊃基础医学㊃KRT81在乳腺癌组织中的表达及其调控AKT /mTOR 通路影响糖代谢抑制乳腺癌细胞增殖的作用王　腾,张　晖[摘要]目的:探究KRT81在乳腺癌组织中的表达及其调控AKT /mTOR 通路影响糖代谢抑制乳腺癌细胞增殖的作用㊂方法:收集100例乳腺癌病人的病理切片,免疫组织化学检测KRT81在乳腺癌中的表达,分析KRT81表达量与临床病理特征相关性㊂同时在MCF⁃7细胞中分别转染过表达质粒㊁对照质粒㊁对照敲低质粒㊁敲低质粒,记作oeKRT81组㊁NC 组㊁Control 组及si⁃KRT81组㊂通过集落克隆形成实验检测细胞增殖,流式细胞术检测凋亡细胞,蛋白印迹实验检测AKT /mTOR 通路相关蛋白和细胞凋亡相关蛋白的表达㊂结果:免疫组织化学检测结果显示,KRT81蛋白在癌组织中阳性表达明显低于癌旁正常组织(P <0.01)㊂KRT81表达水平与Her2㊁TNM 分期㊁远处转移和组织分级相关(P <0.05~P <0.01)㊂细胞集落克隆形成实验结果显示,oeKRT81组MCF⁃7细胞集落克隆数明显低于NC 组,siKRT81组MCF⁃7细胞集落克隆数明显高于Control 组(P <0.01)㊂流式细胞术结果显示,与NC 组相比,oeKRT81组MCF⁃7细胞凋亡率明显增加(P <0.01);与Control 组相比,si⁃KRT81组MCF⁃7细胞凋亡率明显减少(P <0.01)㊂蛋白印迹实验结果显示,oeKRT81组MCF⁃7细胞中Bax 蛋白水平明显高于NC 组,Bcl2㊁GLUT1㊁LDH㊁p⁃AKT㊁p⁃mTOR 蛋白水平明显低于NC 组(P <0.01);si⁃KRT81组Bax 蛋白水平明显低于Control 组,Bcl2㊁GLUT1㊁LDH㊁p⁃AKT㊁p⁃mTOR 蛋白水平明显Control 组(P <0.01)㊂结论:KRT81低表达与乳腺癌的不良预后结局相关,其可能通过抑制AKT /mTOR 通路影响糖代谢抑制乳腺癌细胞增殖㊂[关键词]乳腺肿瘤;角蛋白81;增殖;AKT /mTOR 通路;糖代谢[中图法分类号]R 737.9 [文献标志码]A DOI :10.13898/ki.issn.1000⁃2200.2023.11.002Expression of KRT81in breast cancer tissues and its inhibitory effect on proliferation of breast cancer cells by affecting glucose metabolism through regulating AKT /mTOR pathwayWANG Teng,ZHANG Hui(Department of Tumor Surgery ,The First Affiliated Hospital of Bengbu Medical College ,Bengbu Anhui 233004,China )[Abstract ]Objective :To investigate the expression of KRT81in breast cancer tissues and its inhibitory effect on proliferation of breast cancer cells by affecting glucose metabolism through regulating AKT /mTOR pathway.Methods :The pathological sections of 100patients with breast cancer were collected,the expression of KRT81in breast cancer was detected by immunohistochemistry,and the correlation between KRT81expression level and clinical pathological characteristics was analyzed.Simultaneously,overexpression plasmids,control plasmids,control knockdown plasmids,and knockdown plasmids were transfected into MCF⁃7cells,which were recorded as oeKRT81group,NC group,Control group,and si⁃KRT81group.The cell proliferation was detected by colony formation assay,apoptosis was determined by flow cytometry,and the expression of AKT /mTOR pathway⁃related proteins and apoptosis⁃related proteins were detected by Western blotting.Results :The results of immunohistochemistry showed that the positive expression of KRT81protein in cancer tissues was significantly lower than that in normal adjacent tissues (P <0.01).The expression level of KRT81was correlated with Her2,TNM staging,distant metastasis,and tissue grading (P <0.05to P <0.01).The results of the colony formation assay showed that the number of MCF⁃7cell colonies in the oeKRT81group was significantly lower than that in the NC group,while the number of MCF⁃7cell colonies in the siKRT81group was significantly higher than that in the Control group (P <0.01).The results of flow cytometry showed that compared with the NC group,the apoptosis rate of MCF⁃7cells in the oeKRT81group was significantly increased (P <0.01);compared with the Control group,the apoptosis rate of MCF⁃7cells in the si⁃KRT81group was significantly reduced (P <0.01).The results of Western blotting indicated that the level of Bax protein in MCF⁃7cells in the oeKRT81group were significantly higher than that in the NC group,while the levels of Bcl2,GLUT1,LDH,p⁃AKT,and p⁃mTOR proteins were significantly lower than those in the NC group (P <0.01);the level of Baxprotein in the si⁃KRT81group was significantly lower than that in the Control group,while the levels of Bcl2,GLUT1,LDH,p⁃AKT,and p⁃mTOR proteins were significantly higher than those in the Control group (P <0.01).Conclusions :The lowexpression of KRT81is related to poor prognosis of breastcancer,which may inhibit the proliferation of breast cancer cells by affecting glucose metabolism through inhibiting AKT/mTOR pathway.[Key words]breast neoplasms;KRT81;proliferation;AKT/mTOR pathway;glucose metabolism 乳腺癌是全球女性最常见的致命癌症[1]㊂尽管各种治疗方法取得了进展,但乳腺癌仍然是女性肿瘤相关死亡的第二个主要原因[2-3]㊂辅助治疗㊁根治性手术和早期诊断可提高乳腺癌病人的生存时间和预后,但死亡率仍不能令人满意[4]㊂为了制定实用的治疗策略,迫切需要全面了解乳腺癌发病机制中的分子信号传导[5]㊂角蛋白是一种在特定区域的表皮细胞中表达的中间丝㊂大的角蛋白多基因家族由细胞角蛋白组成,它们在各种类型的上皮中差异表达[6-8]㊂角蛋白81(KRT81)是一种Ⅱ型头发角蛋白,是头发皮质中表达的主要头发蛋白质之一㊂据报道[9],KRT81表达在黑色素瘤组织中上调,在人黑色素瘤细胞系中也发现了KRT81的过表达,并且KRT81通过调节白细胞介素8(IL⁃8)来抑制黑素瘤的进展㊂然而,截至目前KRT81在乳腺癌组织中的表达及对乳腺癌的影响机制尚无报道㊂因此,本研究分析KRT81在乳腺癌组织中的表达及与临床病理因素的相关性,体外实验观察KRT81调控AKT/mTOR 通路影响糖代谢从而干预乳腺癌细胞的增殖,为寻找较为特异的分子标志物提供实验依据㊂1　材料与方法1.1　一般资料　收集2016-2021年就诊于我院的100例乳腺癌病人的肿瘤和癌旁组织(距离肿瘤> 4cm)的标本㊂纳入标准:(1)病理学诊断为乳腺癌;(2)术前未放化疗治疗㊂排除标准:(1)非原发性乳腺癌;(2)失访及预后信息不全者㊂根据病人信息电话随访,日期至2021年12月㊂1.2　免疫组织化学分析　病人组织经过低温保存固定后,石蜡包埋㊂并收集相关临床资料,包括年龄㊁肿瘤大小㊁雌激素受体(estrogen receptor,ER)㊁孕激素受体(progesterone receptor,PR)㊁人类表皮生长因子⁃2(epidermal growth factor⁃2,Her2)㊁TNM分期㊁淋巴结转移㊁远处转移㊁组织分级㊁生存时间和预后结局㊂肿瘤组织经过两位病理学专家诊断为乳腺癌,免疫组织化学检测KRT81的表达和位置㊂判定标准:根据染色强度和染色范围判定结果㊂其中染色强度,根据颜色分为无染色(0分),淡黄色(1分),棕黄色(2分),深棕色(3分);染色范围为0分(0~10%)㊁1分(>10%~25%)㊁2分(>25%~ 50%)㊁3分(>50%~76%)和4分(>75%~ 100%)㊂用染色强度得分和细胞数得分的作为判断表达结果,积分0~4分为阴性,>4~12分为阳性㊂本研究获得蚌埠医学院第一附属医院研究伦理委员会的批准,并且所有病人知情同意㊂1.3　细胞培养及主要试剂　乳腺癌细胞MCF⁃7㊁MDA⁃MB⁃231和人乳腺上皮细胞MCF⁃10A购自中国科学院上海细胞库㊂使用含10%胎牛血清(FBS)和1%青-链霉素的RPMI1640培养基培养㊂细胞在37℃㊁含5%CO2的培养箱中培养㊂KRT81过表达质粒(pcDNA3.1⁃KRT81⁃Flag)购自上海吉凯公司,一抗(KRT81㊁GAPDH㊁GLUT1㊁LDH㊁AKT㊁p⁃AKT㊁mTOR㊁p⁃mTOR㊁Bax㊁Bcl2)均购买于Abcam公司,二抗购于武汉三鹰生物科技有限公司,蛋白印迹试剂盒㊁BCA蛋白浓度测量试剂盒和RIPA裂解液购自碧云天生物技术公司,CCK8购自Biofroxx公司㊂Transwell购自NEST公司㊂1.4　细胞转染　取对数生长期细胞,于转染前24h 将细胞以3.0×104个/孔接种于6孔板;转染时按照脂质体Lipofectamine TM2000转染试剂说明书, MCF⁃7细胞分别转染过表达质粒㊁对照质粒㊁对照敲低质粒㊁敲低质粒,记作oeKRT81㊁NC㊁Control及si⁃KRT81组㊂转染时加入相应试剂并混合均匀,将细胞培养基换为无血清培养基,5%CO2㊁37℃培养箱培养6h后更换新鲜培养基,然后进行后续实验㊂实验分组:NC组㊁oeKRT81组㊁Control组㊁si⁃KRT81组㊂1.5　细胞集落克隆形成实验　取转染的细胞消化离心后,以1000/孔的密度种植于6孔板中,加入含10%FBS的培养基,随后培养10d㊂去上清,加入4%的多聚甲醛固定30min,加入1∶8稀释的结晶紫染液,染色30min,PBS冲洗3~4遍,拍照计数㊂1.6　流式细胞术检测细胞凋亡　取处理好的细胞悬浮液,密度为40×104个/毫升,种植于6孔板中,培养24h后换液,换取不含血清的培养基并按照处理要求转染质粒后培养48h,采用不含EDTA的胰酶消化,并离心(2500r/min),收集细胞用PBS重悬后,继续离心(2500r/min),随后按照凋亡试剂盒操作指南依次加入试剂,上机检测㊂1.7　蛋白印迹实验　收集细胞,用RIPA裂解液提取总蛋白裂解物,用于蛋白印迹实验㊂使用BCA蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度㊂将等量配置好的蛋白质(40μg)加载到凝胶上,在10%凝胶上电泳分离,然后转移到聚偏二氟乙烯(PVDF)膜上㊂用TBST 洗膜5min,共3次,用5%脱脂牛奶溶液封闭1h,然后与一抗孵化,4℃孵育过夜㊂第二天用TBST溶液清洗膜3次,再与二抗在37℃下孵育1h㊂用TBST溶液清洗膜3次,曝光㊂1.8　统计学方法　采用χ2检验㊁t检验㊁方差分析和q检验㊂2　结果2.1　乳腺癌病人的组织样本中KRT81的表达情况及与病理特征的相关性　免疫组织化学检测结果显示,KRT81蛋白在癌组织中阳性表达明显低于癌旁正常组织(P<0.01)(见表1㊁图1)㊂临床资料结合免疫组织化学结果分析显示,Her2为阳性时KRT81表达升高;TNM分期越大,KRT81的表达越低;当病人有远处转移时,KRT81的表达越低;组织分级越高,KRT81的表达越低,差异均有统计学意义(P< 0.05~P<0.01)(见表2)㊂表1　KRT81在乳腺癌组织及癌旁组织中的表达(n)分组n KRT81阴性KRT81阳性χ2P癌组织癌旁组织1001007030307032.00<0.012.2　KRT81在乳腺癌细胞株中的表达水平及转染效率　相比于乳腺上皮细胞MCF⁃10A,KRT81在乳腺癌细胞株中表达下降(P<0.05)(见表3㊁图2A)㊂采用oeKRT81质粒及si⁃KRT81质粒转染乳腺癌细胞MCF⁃7,蛋白印迹实验检测转染效率,结果显示,过表达KRT81后,KRT81蛋白表达升高;敲低KRT81后,KRT81蛋白表达降低(P<0.05)(见图2B㊁2C㊁表4)㊂MCF⁃7细胞中KRT81表达水平最低,因此选用其作为后续实验细胞株㊂表2　乳腺癌病人KRT81表达与临床资料的关系(n)特征nKRT81水平　低高　χ2P 年龄/岁　<60　≥604456333711190.94>0.05肿瘤大小/cm　≤2　>219811060921 3.37>0.05 ER　阴性　阳性6040412919110.20>0.05 PR　阴性　阳性72284822246 1.36>0.05 Her2　阴性　阳性5347472362418.74<0.01 TNM分期　Ⅰ~Ⅱ　Ⅲ~Ⅳ514931392010 4.21<0.05淋巴结转移　无　有4753353512180.84>0.05远处转移　有　无3664333732712.57<0.01组织分级　G124619　G257471035.13<0.01　G319181　表3　KRT81在乳腺癌细胞株中的表达水平比较(n i=3;x±s)分组KRT81蛋白相对表达量F P MS组内MCF⁃10A细胞0.86±0.10MDA⁃MB⁃231细胞0.55±0.11*20.39<0.010.010 MCF⁃7细胞0.34±0.09*# q检验:与MCF⁃10A细胞比较*P<0.05;与MDA⁃MB⁃231细胞比较#P<0.05　表4　KRT81在乳腺癌细胞株中的转染效率(n i =3;x ±s )分组KRT81蛋白相对表达量FPMS 组内NC 组0.31±0.06oeKRT81组Control 组0.96±0.08*0.98±0.04*140.60<0.010.004si⁃KRT81组0.18±0.06*#▲ q 检验:与NC 组比较*P <0.05;与oeKRT81组比较#P <0.05;与Control 组比较▲P <0.052.3　KRT81对MCF⁃7细胞集落克隆形成能力的影响　细胞集落克隆形成实验结果显示,oeKRT81组MCF⁃7细胞集落克隆数明显低于NC 组[(31.0±8.9)个vs(85.0±16.2)个,t =4.78,P <0.01)];siKRT81组MCF⁃7细胞集落克隆数明显高于Control 组[(241.0±23.1)个vs(113.0±8.6)个,t =8.99,P <0.01)](见图3)㊂2.4　KRT81对MCF⁃7细胞凋亡的影响　与NC 组相比,oeKRT81组MCF⁃7细胞凋亡率明显增加(P <0.01);与Control 组相比,si⁃KRT81组MCF⁃7细胞凋亡率明显减少(P <0.01)(见表5㊁表6㊁图4A)㊂蛋白印迹实验结果显示,oeKRT81组MCF⁃7细胞中Bax 蛋白水平明显高于NC 组,si⁃KRT81组Bax 蛋白水平明显低于Control 组(P <0.01);oeKRT81组MCF⁃7细胞中Bcl2蛋白水平明显低于NC 组,si⁃KRT81组Bcl2蛋白水平明显高于Control 组(P <0.01)(见图4B㊁图4C㊁表5~6)㊂　表5　过表达KRT81对MCF⁃7细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的影响(n i =3;x ±s )分组Bax 蛋白相对表达量Bcl2蛋白相对表达量细胞凋亡率/%NC 组0.48±0.14 1.37±0.14 5.38±1.02oeKRT81组1.26±0.030.55±0.1015.06±3.21t9.448.43 4.978P<0.01<0.01<0.01　表6　敲低KRT81对MCF⁃7细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的影响(n i =3;x ±s )分组BAX 蛋白相对表达量Bcl2蛋白相对表达量细胞凋亡率/%Control 组0.89±0.100.36±0.087.12±0.68si⁃KRT81组0.22±0.091.52±0.15 4.11±0.11t8.1511.567.58P<0.01<0.01<0.012.5　KRT81对MCF⁃7细胞糖代谢相关蛋白表达的影响　oeKRT81组MCF⁃7细胞中GLUT1㊁LDH 水平均明显低于NC 组(P <0.01),si⁃KRT81组GLUT1㊁LDH 水平均明显高于Control 组(P <0.01)(见图5㊁表7~8)㊂2.6　KRT81对MCF⁃7细胞AKT /mTOR 信号通路相关蛋白表达的影响　蛋白印迹实验结果显示,与NC 组比较,oeKRT81组MCF⁃7细胞中p⁃AKT㊁p⁃mTOR 蛋白水平均明显下降(P <0.01),而AKT㊁mTOR 蛋白水平差异均无统计学意义(P >0.05);与Control 组比较,si⁃KRT81组p⁃AKT㊁p⁃mTOR 蛋白水平均明显升高(P <0.01),而AKT㊁mTOR 蛋白水平差异均无统计学意义(P >0.05)(见表9~10㊁图6)㊂　表7　敲低KRT81对MCF⁃7细胞糖代谢相关蛋白表达的影响(n i =3;x ±s )分组GLUT1LDH Control0.69±0.120.66±0.10si⁃KRT811.35±0.101.31±0.11t 7.487.63P <0.01<0.01　表8　过表达KRT81对MCF⁃7细胞糖代谢相关蛋白表达的影响(n i=3;x±s)分组GLUT1LDHNC组 1.13±0.21 1.31±0.11oeKRT81组0.31±0.090.25±0.19t 6.999.77P<0.01<0.01　表9　敲低KRT81对MCF⁃7细胞AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达的影响(n i=3;x±s)分组p⁃AKT p⁃mTORControl0.45±0.100.46±0.11si⁃KRT81 1.00±0.12 1.13±0.10t 6.158.38P<0.01<0.01　表10　过表达KRT81对MCF⁃7细胞AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达的影响(n i=3;x±s)分组p⁃AKT p⁃mTORNC组0.77±0.110.89±0.11oeKRT81组0.33±0.100.25±0.09t 5.277.12P<0.01<0.013　讨论乳腺癌是中国最常见的妇科肿瘤类型[10]㊂根据全球癌症项目(GLOBOCAN,2020),2020年全球约有684996例乳腺癌死亡[11]㊂尽管努力集中在诊断技术和病人管理上,但在提高乳腺癌病人的总体生存率方面进展甚微[12]㊂此外,据报道[13],乳腺癌的发病率和死亡率有明显上升的趋势㊂目前,乳腺癌治疗包括手术在内的综合治疗㊁放射疗法㊁化学疗法㊁内分泌疗法和生物靶向剂[14-15]㊂随着诊断技术和治疗方法的改进,乳腺癌相关死亡率随着生存率的总体上升而下降㊂然而,晚期乳腺癌目前几乎无法治愈,治疗的主要目标是姑息治疗,重点是控制疾病的快速进展㊁提高生活质量和延长生存期[16]㊂尽管已经开发出多种新的靶向药物来治疗乳腺癌病人;然而,特效药物尚未出现㊂因此,有必要研究乳腺癌的发生发展机制,寻找新的治疗靶点㊂本研究细胞集落克隆形成实验结果显示,过表达KRT81可抑制乳腺癌细胞增殖,敲低KRT81促进乳腺癌增殖,提示KRT81的表达水平可影响乳腺癌细胞增殖㊂流式细胞术细胞凋亡实验及凋亡蛋白表达检测结果显示,过表达KRT81可促进乳腺癌细胞凋亡,敲低KRT81抑制乳腺癌细胞凋亡㊂KRT81是一种Ⅱ型头发角蛋白,是头发皮质中表达的主要头发蛋白质之一㊂其已经被证实在多种疾病中发挥重要作用[17-18]㊂然而,其在乳腺癌中的作用尚不清楚㊂本研究收集了100例乳腺癌病人病例资料,进行免疫组织化学实验,结果显示,乳腺癌组织蜡块和与其相匹配的癌旁正常组织中,KRT81在癌组织中阳性表达明显低于癌旁正常组织㊂并且KRT81表达水平与Her2㊁TNM分期㊁远处转移和组织分级相关㊂这些结果均提示KRT81对乳腺癌的预后具有影响㊂癌细胞糖代谢的重要性主要体现在能量供应维持其生命活动;生物合成为癌细胞的生长和分裂提供原料;调节信号通路参与调节细胞生长㊁分化㊁凋亡等重要生物学过程;免疫逃避逃避免疫系统的攻击㊂这种代谢重编程的特点是,即使在存在足够氧气的情况下,癌细胞或其他高度增殖的细胞也倾向于将葡萄糖代谢成乳酸,而不是丙酮酸(有氧糖酵解)[19]㊂糖代谢与肿瘤微环境的变化㊁癌基因和肿瘤抑制基因的转录㊁线粒体功能的调节以及糖代谢酶的异常表达密切相关㊂这种现象为癌细胞提供了生长优势,帮助它们逃避凋亡并促进肿瘤转移[20]㊂本研究通过蛋白印迹实验检测糖代谢相关蛋白水平,相较于NC组,oeKRT81组MCF⁃7细胞中GLUT1㊁LDH蛋白表达均明显下降;然而,相较于Control组,si⁃KRT81组GLUT1㊁LDH蛋白表达均明显升高㊂结果说明改变KRT81的表达水平,可影响细胞糖代谢过程㊂AKT/mTOR信号通路与乳腺癌进展相关[21-22]㊂在乳腺癌中,新型锰络合物PdpaMn通过下调Akt/mTOR信号通路抑制糖酵解[23]㊂本研究中,敲低KRT81可上调Akt/mTOR 信号通路的关键蛋白p⁃AKT和p⁃mTOR表达,同时,糖代谢相关蛋白GLUT1㊁LDH的表达量升高;过表达KRT81可抑制Akt/mTOR信号通路的关键蛋白p⁃AKT和p⁃mTOR表达,糖代谢相关蛋白GLUT1㊁LDH的表达量降低㊂综上所述,KRT81在乳腺癌组织中低表达,且与乳腺癌病人的预后相关㊂同时,KRT81可能通过抑制AKT/mTOR通路影响糖代谢抑制乳腺癌细胞增殖,将为乳腺癌靶向治疗提供基础依据㊂[参考文献][1]　ZHAO Y,HU Z,LI J,et al.EZH2exacerbates breast cancer bymethylating and activating STAT3directly[J].J Cancer,2021,12(17):5220.[2]　ZHANG H,GE Z,WANG Z,et al.Circular RNA RHOT1promotes progression and inhibits ferroptosis via mir⁃106a⁃5p/STAT3axis in breast cancer[J].Aging(Albany NY),2021,13(6):8115.[3]　SUN D,LI YC,ZHANG XY.Lidocaine promoted ferroptosis bytargeting miR⁃382⁃5p/SLC7A11axis in ovarian and breastcancer[J].Front Pharmacol,2021,12:681223.[4]　GUO C,LI S,LIANG A,et al.PPA1Promotes breast cancerproliferation and metastasis through PI3K/AKT/GSK3βsignalingpathway[J].Front Cell Dev Biol,2021,9:730558. 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乳腺癌组织中sting蛋白的表达及其临床意义

Nhomakorabea３０４·
临床与实验病理学杂志ＪＣｌｉｎＥｘｐＰａｔｈｏｌ２０２０Ｍａｒ；３６（３）
比较用Ｒ×Ｃ列联表 χ２检验，两组之间比较用Ｆｉｓｈｅｒ精确检验；采用二元Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归模型分析各参数与乳腺癌术后是否复发之间的关联性；Ｐ＜００５为差异有统计学意义。
２结果
２．１乳腺癌及癌旁正常组织中ＳＴＩＮＧ蛋白的表达ＳＴＩＮＧ蛋白阳性定位于细胞质，本组４２例乳腺癌患者，其乳腺癌组织中ＳＴＩＮＧ蛋白阳性１０例（１０／４２，２３８％），癌旁正常组织２２例（２２／４２，５２４％），ＳＴＩＮＧ在乳腺癌组织中的阳性率低于癌旁正常组织，差异有统计学意义（χ２＝７２６９，Ｐ＜００５，图１、２）。
２．３多因素Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归模型分析对４２例乳腺癌患者术后进行随访１～５年，２３例乳腺癌患者发生肿瘤复发，１９例乳腺癌患者未发生复发。本实验选取患者年龄、分子分型、ＴＮＭ分期、ＳＴＩＮＧ蛋白表达水平等为自变量进行多因素Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归模型分析，结果显示：ＳＴＩＮＧ蛋白低表达是乳腺癌患者术后复发的独立危险因素（Ｐ＜００５，表２）。
张明珍１，胡知齐１，罗兵２，刘必勇３，开金云４
摘要：目的探讨干扰素基因刺激因子（ｓｔｉｍｕｌａｔｏｒｏｆｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ，ＳＴＩＮＧ）在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化ＳＰ法检测４２例乳腺癌及其癌旁正常组织中ＳＴＩＮＧ蛋白的表达，分析ＳＴＩＮＧ蛋白表达与乳腺癌临床病理特征的关系。结果ＳＴＩＮＧ蛋白在乳腺癌组织的阳性率（２３８％，１０／４２）低于癌旁正常组织（５２４％，２２／４２）（χ２＝７２６９，Ｐ＜００５），其表达与患者的ＨＥＲ２阳性率、Ｌｕｍｉｎａ分型相关（χ２＝８８３９，Ｐ＜００５）。ＳＴＩＮＧ蛋白低表达是乳腺癌患者术后复发的危险因素之一（ＯＲ＝７４７２，９５％ＣＩ：１２７９～４３６３７，Ｐ＝００２６）。结论乳腺癌组织中ＳＴＩＮＧ蛋白表达降低，与乳腺癌预后相关，可能参与乳腺癌的发生、发展，有望成为乳腺癌治疗的潜在靶点。关键词：乳腺肿瘤；肿瘤微环境；干扰素基因刺激因子；免疫组织化学中图分类号：Ｒ７３７９文献标志码：Ａ文章编号：１００１－７３９９（２０２０）０３－０３０３－０３ｄｏｉ：１０．１３３１５／ｊ．ｃｎｋｉ．ｃｊｃｅｐ．２０２０．０３．０１１

C反应蛋白对恶性肿瘤的意义

C反应蛋白对恶性肿瘤的意义高瑞;骆玉霜;尹晓菊【期刊名称】《实用肿瘤学杂志》【年(卷),期】2016(030)001【摘要】When the body is attacked by trauma and infection,the serum C-reactive protein( CRP) con-centration which is produced by the liver will increase.CRP participates in the body′s humoral immunity through regulating the phagocytic cells to clear the pathogenic bacteria and necrotic tissue.The occurrence and develop-ment of malignant tumor is associated with complex inflammatory response pathway.Serum CRP concentration will change with the progress and remission of tumor.CRP is associated with differentiation of benign and malignant, the early diagnosis,the pathological stage,the lymph node metastasis,the organizational characteristics,the prog-nosis,and the treatment of malignant tumor.It is expected to be a clinical screening indicator of malignant tumor.%机体在受到外伤、感染时,由肝脏产生的血清C反应蛋白( C-reactive protein,CRP)浓度升高,并通过调节吞噬细胞清除病原菌及坏死组织,从而参与机体的体液免疫. 恶性肿瘤的发生、发展常伴随复杂的炎症反应通路,血清CRP 浓度会随着肿瘤的进展与转归而发生变化,CRP在恶性肿瘤的良恶性鉴别、早期诊断、病理分期、淋巴结转移、组织学特点、预后、治疗等方面均有一定的相关性,从而有望成为恶性肿瘤的临床筛查指标.【总页数】4页(P84-87)【作者】高瑞;骆玉霜;尹晓菊【作者单位】青海大学附属医院肿瘤二病区西宁 810001;青海大学附属医院肿瘤二病区西宁 810001;青海大学附属医院肿瘤二病区西宁 810001【正文语种】中文【中图分类】R730.3【相关文献】1.C反应蛋白对恶性肿瘤化疗后白细胞减少伴发热的临床意义 [J], 田雪玲2.恶性肿瘤患者放疗中超敏C反应蛋白检测及其意义 [J], 王朝辉;张洁3.恶性肿瘤患者放疗中超敏C反应蛋白检测及其意义 [J], 王朝辉;张洁4.血沉、C反应蛋白、CEA检测在消化道恶性肿瘤中的意义 [J], 乔庆红;傅颖;郭春林;张柱5.超敏C反应蛋白测定在恶性肿瘤诊断中的意义 [J], 车至香;井娜;王长印;董振芳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

乳腺癌c-Met蛋白的表达及临床病理意义

作者单位：１０５北京．０８３解放军总医院病理科通讯作者：赵坡．ｍａ：ｈｏｏ０ｏｐｔ１（ｍ．ｎＥｉｚａｐ＠３１ｓｉ．・ｃｌｈａｏ
ＣｉｉａｓＥｅｔｎｃＥｉｏ）Ｊｎｌｃｎ（ｌｃｏｉｄｔｎ ’ ｎｉｒｉａ
Ｌ２！§ ：Ｑ２１：，！
化学染色方法研究解放军总医院１０例乳腺癌石蜡０标本中ｃＭｔ白的表达情况，而探讨乳腺癌组．ｅ蛋从织中（ｅ蛋白的表达与临床病理以及预后间的关：ｔ－Ｍ
ＤＯ：０３７／ｍ．．ｓｎ】７－７５２１．１００Ｉ１．８７ｅａｊｉ．６４０８．０２Ｏ．８ｓ
ｃｒｉｏｓＴｅｐｓｉｅｅｐｅｓｏｆ－ｔｒｔｉｓｓｇｉｃｎｌｏｒｓｏｄｎｍｐｏｅｍｅａｔｓｓａｃｎｍａ．ｈｏｉｖｘｒｓｉｎｏＭｅｏｅｎｗａｉｎｆａｔｃｒｅｐｎｉｇｔｌｔＣｐｉｙｏｙｈｎｄｔｓａｉ
、
临床资料
采用解放军总医院病理科１９～００年期间９８２０乳腺癌石蜡标本共１００例，均为女性；年龄２９８～２岁，中位年龄４６岁；全部患者术前未经过放化疗，均具有完整的临床和病理资料。病理诊断和分期按
照恶性肿瘤ＵＣＮＩＣＴＭ第六版分类标准。病理分级依据ＷＨＯ分级：级１例。级５Ｉ７ Ⅱ ６例， Ⅲ级２例。７临床依据ＴＭ分期：期为１，期为６例．ＮＩ６例 Ⅱ ０ Ⅲ
【关键词】乳腺肿瘤；原癌基因蛋白质ｃｅ；预后．ｔｍ

CK56在浸润性乳腺癌中的表达及预后意义

CK5/6在浸润性乳腺癌中的表达及预后意义王昭君卢鸯鸯戴燕燕许践刚马海广胡晓清摘要目的探讨细胞角蛋白(CK5/6)在乳腺癌中的表达以及与临床病理因素、预后之间的关系°方法174例浸润性乳腺癌患者经手术治疗，临床及病理资料完整，应用免疫组化法检测肿瘤组织中CK5/6及ER、PR、Her-2、Ki-67的表达情况,分析CK5/6与临床病理特征的相关性及预后意义。

结果174例乳腺癌患者年龄27~85岁，平均年龄52.84±12.62岁，中位年龄52岁，体重指数(BMI)为16.3~37.58kg/m2,平均BMI为24.03±4.01kg/m2°CK5/6阳性表达者47例(27.01%),阴性表达者127例(72.99%)°CK5/6的表达与患者的年龄、肿瘤直径、腋窝淋巴结有无转移、家族史、病理类型无明显关系(P>0.05),而与乳腺癌的组织学分级、ER、PR、Ki-67、EGFR有关(P=0.000)°三阴性、Her-2阳性型.Luminal型浸润性乳腺癌中CK5/6阳性表达率为78.37%.45.00%和7.69%,各组间比较差异有统计学意义(P=0.000)°Logistic回归分析显示,高组织学分级、EGFR阳性、ER阴性是影响CK5/6表达的独立危险因素(P<0.05)°K-M生存分析及Log-Rank检验显示，CK5/6对浸润性乳腺癌患者无转移生存率(FDM)的影响比较，差异有统计学意义(P=0.020)，对总生存率比较，差异无统计学意义(P>0.05)°乳腺癌肝转移者CK5/6阳性表达为0,骨转移者CK5/6阳性表达率100%,其他转移灶CK5/6阳性表达率为42.86%’，组间比较差异有统计学意义(P=0.050)°结论CK5/6作为分子标志物具有较好的预后预测价值，临床在对乳腺癌进行分子分型的同时可常规检测CK5/6表达并评估预后°关键词乳腺癌CK5/6转移EGFR中图分类号R73文献标识码A DOI10.11969/j.issn.1673-548X.2020.12.024Expression and Prognostic Significance of CK5/6in Invasive Breast Cancer.Wang Zhao/'un,Lu Yangyang,Dai Yanyan,et al.Department of Oncological Surgery,Wenzhou Central Hospital,Zhe/'iang325000,ChinaAbstract Objective To investigate the expression of cytokeratin(CK5/6)in breast cancer and its relationship with clinicopatho-logical factors and prognosis.Methods174patients with invasive breast cancer were treated surgically with complete clinical and pathological data,and immunohistochemistry was applied to detect the expression of CK5/6and ER,PR,Her-2,Ki-67in tissues.Analysis of' the correlation between CK5/6and clinicopathological features and its prognostic significance was performed.Results174breast cancer patients were aged27一85years,mean52.84±12.62years,median52years,BMI16.3-37.58kg/m2,mean24.03±4.01kg/m2. There were47cases(27.01%)of'CK5/6positive expression,127cases(72.99%)of negative expression.The expression of CK5/6was not significantly related to the patient's age,tumor diameter,the presence of axillary lymph node metastasis,family history,or pathological type(P>0.05),whereas it was associated with breast cancer histological grade,ER,PR,Ki-67,and EGFR(P=0.000).The positive rates of CK5/6in triple一negative,Her-2-positive,luminal一type invasive breast cancer was78.37%,45.00%and7.69%,all of' which were statistically significant between groups(P= 0.000).Logistic regression analysis showed the independent risk factors affecting CK5/6expression were high histological grade,EGFR positive,and ER negative(P<0.05).K一M survival analysis and Log一Rank test showed that the effect of CK5/6on metastasis free survival(FDM)of invasive breast cancer was statistically significant(P=0.020). However,no statistically significant effect on overall survival(P>0.05).The expression of CK5/6was0in breast cancer with liver metastasis,100%in bone metastasis and42.86%in other metastasis,with a statistically significant difference between the groups(P= 0.050).Conclusion CK5/6has good prognostic value as a molecular marker,and CK5/6expression should be routinely detected and evaluated during molecular differentiation of breast cancer in clinical practice.Key words Breast cancer；CK5/6；Metastasis；EGFR乳腺癌是全世界女性最常见的癌症，也是女性癌基金项目：浙江省温州市科技局科技计划项目(Y20190754)作者单位：325000温州市中心医院肿瘤外科通讯作者：胡晓清，主任医师，电子信箱:loosewind@ 症死亡的第二大主要原因[1]。

乳腺癌组织中CHK2和pCHK2蛋白的表达及临床意义

乳腺癌组织中CHK2和pCHK2蛋白的表达及临床意义贾朝阳;冯丹;王雅杰【期刊名称】《医学研究杂志》【年(卷),期】2013(42)11【摘要】目的检测乳腺癌组织和癌旁组织中细胞周期检测点激酶2(CHK2)和磷酸化CHK2(pCHK2)蛋白的表达情况及其与乳腺癌临床病理学特征的相关性.方法制作乳腺癌组织芯片,利用免疫组化法检测261例乳腺癌组织及36例癌旁组织中CHK2和pCHK2蛋白的表达情况,并分析其与乳腺癌临床病理学特征的关系.结果CHK2和pCHK2蛋白在癌组织中的表达分别为86.2％和24.1％,明显高于癌旁组织5.6％和0(P＜0.05),且在同一病例的癌组织中表达呈正相关(r=0.226,P=0.023),CHK2和pCHK2与肿瘤病理类型、大小、淋巴结转移数目、TNM分期、ER、PR、Her-2等临床病理特征相关性无统计学差异(P＞0.05).结论CHK2和pCHK2可能在乳腺癌的发生、发展中发挥着一定作用,可作为乳腺癌基因研究和治疗的靶点.【总页数】4页(P40-43)【作者】贾朝阳;冯丹;王雅杰【作者单位】200433 第二军医大学长海医院肿瘤科;200433 第二军医大学长海医院肿瘤科;200433 第二军医大学长海医院肿瘤科【正文语种】中文【相关文献】1.膜细胞骨架连接蛋白及基质金属蛋白酶-2在乳腺癌组织中的表达及其临床意义[J], 郭艳峰;王如美;邵海琴;高建洲;聂栓锁;董超颖2.DNA损伤修复通路相关蛋白ATM、pCHK2在乳腺癌中的表达及临床意义 [J], 冯丹;王宁;贾朝阳;王雅杰3.α平滑肌肌动蛋白、波形蛋白与陷窝蛋白1在乳腺癌组织中的表达及临床意义[J], 李秀清;路兰红4.mTOR蛋白和Beclin1蛋白在三阴性乳腺癌组织中的表达及临床意义 [J], Jing Wenjiang;Zhao Xinhan;Ma Wu;Wang Juanyi;Zhang Shulian;Ma Jun;Li Shuo5.扭曲蛋白、波形蛋白、血管生成拟态在三阴性乳腺癌组织中的表达及临床意义[J], 郭彬彬;郭满;刘明;张浩因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

免疫组化alk蛋白表达

免疫组化alk蛋白表达
免疫组化（Immunohistochemistry, IHC）是一种常用的生物学和病理学研究方法，用于检测组织切片中特定蛋白质的表达情况。

ALK是“间变性淋巴瘤激酶”（Anaplastic Lymphoma Kinase）的缩写，它是一个受体酪氨酸激酶，在多种肿瘤的发生发展中起到重要作用。

在肺癌等恶性肿瘤的研究和诊断中，通过免疫组化技术检测ALK 蛋白的表达水平有助于判断是否存在ALK基因的异常表达或重排。

如果ALK基因发生融合或其他变异形式，可能导致ALK蛋白过度激活，进而促进肿瘤细胞的增殖和存活。

具体流程上，免疫组化检测ALK蛋白通常包括以下步骤：
1. 制备含有待测肿瘤组织的石蜡切片。

2. 通过脱蜡、水化等预处理步骤恢复组织的抗原活性。

3. 应用针对ALK蛋白的特异性抗体进行孵育，让抗体与组织中的ALK蛋白结合。

4. 使用标记有显色剂的二抗识别并结合一抗，通过显色反应显现ALK蛋白在组织中的分布和表达强度。

5. 经过一系列染色后处理及封片，由病理专家在显微镜下观察并解读ALK蛋白的表达状态，如阳性表达的程度、分布区域以及是否具有临床意义。

BRCA1、Ki67在不同分子分型乳腺癌中的表达及临床病理意义

BRCA1、Ki67在不同分子分型乳腺癌中的表达及临床病理意义张科;梅金红;蔡勇;王立超【摘要】目的探讨BRCA1、Ki67在不同分子分型乳腺癌进展中的作用、临床病理意义.方法应用荧光原位杂交技术(FISH),对免疫组化方法检测Her2为2+以上(包含2+)的肿瘤蜡块做进一步检测,FISH检测出阳性表达的肿瘤蜡块定义为Her2最终阳性表达,并依据《2013版中国抗癌协会乳腺癌诊治指南与规范的标准》对乳腺浸润性导管癌进行分子分型,依据分子分型将乳腺癌分为五类Luminal A型,Luminal B like型,Luminal B样型,Her2过表达型和基底细胞样型,各分型分别选取20例,总共100例乳腺浸润性导管癌病例.采用免疫组化二步法对入选病例的肿瘤组织进行BRCA1及Ki67蛋白的检测.结果 BRCA1蛋白阳性表达率在Luminal A型组,Luminal B like型组,Luminal B样型组,Her2过表达型组,基底细胞样型组中差异具有明显显著性(P＜0.05);BRCA1蛋白表达与年龄、肿瘤大小、肿瘤距乳头距离、组织学分级、腋窝淋巴结转移情况、ER/PR状态、Her2状态均无关(P均＞0.1);Ki67高指数表达率在Luminal A型组,Luminal B like型组,Luminal B样型组,Her2过表达型组,基底细胞样型组中差异具有明显显著性(P ＜0.05);年龄组≤59岁的Ki67高指数表达率较年龄组≥60岁的增高,差异有统计学意义(P＜0.1);ER/PR阴性组和Her2阳性组的Ki67高指数表达率较ER/PR阳性组和Her2阴性组增高,差异具有统计学意义(P＜0.1);Ki67表达与肿瘤大小、肿瘤距乳头距离、组织学分级、腋窝淋巴结转移等临床病理指标无相关性(P均＞0.1);BRCA1与Ki67在各亚型乳腺癌中的表达呈负相关性(P＜0.05).结论联合检测BRCA1和Ki67对不同分子分型乳腺癌有一定的预测预后价值.【期刊名称】《实用癌症杂志》【年(卷),期】2016(031)010【总页数】5页(P1582-1586)【关键词】乳腺肿瘤;不同分子分型乳腺浸润性导管癌;BRCA1;Ki67;免疫组织化学;FISH检测【作者】张科;梅金红;蔡勇;王立超【作者单位】330029 江西省肿瘤医院;330000 南昌大学第一附属医院;330029 江西省肿瘤医院;330000 南昌大学第一附属医院【正文语种】中文【中图分类】R737.9乳腺癌是严重威胁女性健康最常见的恶性肿瘤之一。

乳腺癌中SPARC基因表达及临床意义

乳腺癌中SPARC基因表达及临床意义车轶群;王海;齐军【期刊名称】《实用癌症杂志》【年(卷),期】2005(020)002【摘要】目的探讨乳腺癌组织和血浆中富含半胱氨酸的酸性蛋白(SPARC)的表达在乳腺癌的增殖、侵润和转移中的作用及指导意义.方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析SPARC在乳腺癌组织和其相邻的正常乳腺组织的差异表达量.采用ELISA法检测正常对照组和乳腺癌患者术前术后血浆中的SPARC水平,探讨SPARC变化的趋势.结果 RT-PCR分析SPARC在24对配对(48例)乳腺癌组织中的表达,其中17例的表达明显高于其相应的正常乳腺组织,在7例中差异表达不明显,R=70.8%(有差异的例数/总例数).SPARC基因在不同分化程度的乳腺癌组织中的表达阳性率基本相同(P>0.05).而在有淋巴结转移的乳腺癌与无淋巴结转移的乳腺癌组织的表达之间的差异有显著意义(P<0.05).采用ELISA法检测40例正常人和32例乳腺癌患者术前术后血浆SPARC水平.正常人血浆SPARC水平为(644±124) ng/ml.乳腺癌患者术前血浆中的SPARC水平(625±117) ng/ml.正常人和乳腺癌患者术前血浆中的SPARC水平无显著性差异(P>0.05),乳腺癌患者术前比术后血浆中的SPARC水平(611±142) ng/ml略高,但两者无显著性差异(P>0.05).结论 SPARC和乳腺癌的发生与发展密切相关.乳腺癌淋巴结转移时SPARC表达升高.【总页数】4页(P120-122,130)【作者】车轶群;王海;齐军【作者单位】100021,中国医学科学院、中国协和医科大学肿瘤医院检验科;130000,吉林大学中日联谊医院检验科;100021,中国医学科学院、中国协和医科大学肿瘤医院检验科【正文语种】中文【中图分类】R737.9【相关文献】1.抑癌基因PTEN在三阴性乳腺癌及非三阴性乳腺癌中的表达及临床意义 [J], 陈亮;崔国忠;杨猛;丁明剑;李铁军2.SPARC蛋白在乳腺癌组织中的表达及临床意义 [J], 徐东旭;徐璐;李彦君;李朝辉;李智;滕月娥3.乳腺癌组织中SPARC和Notch-1的表达及其临床意义 [J], 陈悦;刘淑真;张盼4.DLL1基因在乳腺癌及三阴性乳腺癌中的表达及其临床意义 [J], 吴珏堃;熊志勇;阮莹;刘宇5.基于基因表达数据库分析EZH2基因在乳腺癌中的表达及其临床意义 [J], 张宝贵因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

FAK与肿瘤关系的研究进展

Ｐ５３
Ｍｉｋｏｌｏｎ等研究表明，晚期癌中存在ＦＡＫ
的高表达，但是在进行性肿瘤中ＦＡＫ的信号作用还不明确。在乳腺癌中抑制ＦＡＫ活性导致ＦＡＫ
Ｙ９２５
磷酸化降低、Ｇｒｂ受体蛋白与ＦＡＫ结合减少以及ＭＡＰＫ信号的减弱。ＦＡＫ—Ｇｒｂ２一ＭＡＰＫ连接的减少并不影响４Ｔ１细胞的增生和生存，但是通过抑制ＦＡＫ，可减少血管内皮生长因子的表达并且在小鼠中产生无血管小肿瘤。用Ｓｒｃ转化无ＦＡＫ的成纤维细胞显示，点突变影响ＦＡＫ催化活性或者Ｙ９２５磷酸化削弱ＦＡＫ促进ＭＡＰＫ和ＶＥＧＦ介导的肿瘤增长，表
ａｄｈｅｓｉｏｎ
ＲｈｏＡ等多条信号通路广泛参与细胞的多种生物学过程，并参与肿瘤的发生、发展、侵袭与转移…。三、ＦＡＫ的磷酸化和激活ＦＡＫ能被整合素磷酸化而激活，从而激活一系列下游信号分子如Ｓｒｃ家族ＰＴＫｓ、ｓｈｅ、Ｇｒｂ２、ＰＩｓＫ和桩蛋白，最终导致细胞外信号调节激酶（ＥＲＫ）活化，从而促进细胞增生、迁移或抑制细胞凋亡¨。。ＦＡＫ通过其多个位点的酪氨酸、丝氨酸、赖氨酸磷酸化与含有Ｓｒｃ同源序列２（ＳＨ２）或Ｓｒｃ同源序列３（ＳＨ３）
结构域的蛋白质结合，介导整合素、ＦＡＫ／Ｓｒｅ、ＦＡＫ／
ＪＡＫ／ＦＡＫ／Ｒｈｏ及ＦＡＫ／Ｐ１３Ｋ等多条信号转导通路。ＦＡＫ分子中有多个酪氨酸残基可被磷酸化，其磷酸化程度随整合蛋白在细胞表面聚合而升高一１。ＦＡＫ被激活时磷酸化氨基酸作为与含ＳＨ２结构域蛋白相结合的位点。ＦＡＫ氨基端和催化功能域连接处为Ｔｙｒ３９７，是自身磷酸化和酪氨酸的磷酸化、去磷酸化部位。磷酸化的酪氨酸残基以及它周围的氨基酸残基能与Ｓｒｃ癌基因家族的ＳＨ２结构域相结合。Ｓｒｅ与ＦＡＫ结合后能够相互激活，使ＦＡＫ完全活化，活化的
Ｆｉｎｃｈ等研究表明，在肿瘤

【浙江省自然科学基金】_表达特征_期刊发文热词逐年推荐_20140812

2008年序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45
科研热词推荐指数淋巴瘤 3 肝细胞生长因子 2 突变 2 免疫表型分型 2 鸡细胞 1 重链 1 逆转录聚合酶链反应 1 转染 1 语义差异 1 表达 1 胃肿瘤 1 肿瘤转移 1 肌肉生长抑制素基因 1 聚合酶链反应 1 群体文化学 1 结合分析 1 细胞凋亡/药物作用 1 细胞,培养 1 组织表达 1 神经元/药物作用 1 神经元/细胞学 1 眼斑拟石首鱼 1 白血病,粒细胞,慢性 1 白血病,淋巴细胞,慢性 1 淋巴瘤,大细胞,弥漫型 1 淀粉样β 蛋白/药理学 1 气味结合蛋白 1 微rna-21 1 微rna 1 工蜂触角 1 实时荧光定量pcr 1 大脑皮质/细胞学 1 基因重排,b淋巴细胞,重链 1 基因重排,b淋巴细胞 1 因子分析 1 原核表达 1 免疫组织化学 1 克隆 1 人参二醇/药理学 1 产品设计 1 乳腺肿瘤 1 中华蜜蜂 1 pten磷酸水解酶 1 nf-κ b 1 mxa基因 1
2009年序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52
2010年序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52

干扰素介导的信号传导

干扰素介导的信号转导学院：生命科学学院专业：发育生物学姓名：***导师：张*学号：**********联系方式：***********************干扰素介导的信号转导摘要:IFN-α／β是一类重要的细胞因子,在体内外可介导多种生物学活性,包括抗病毒、抗肿瘤和免疫调节作用。

近来研究表明, IFN-α／β与细胞表面的特异性受体结合,除了诱导经典的JAK-STAT途径外,还能诱导IRF途径、p38MAPK 途径、IRS-PI3K 途径、CrKL途径等。

而且不同的信号途径有一定的交互反应。

明确各种信号传导途径及其介导的生物学效应,有助于了解IFN的作用机制,本文综述了IFN-α／β发挥其生物学效应所历经的不同信号转导途径。

关键词：IFN-α／β，细胞因子，信号途径1.前言干扰素（interferon,IFN）是细胞对相关刺激反应时所产生的细胞信号蛋白质，是细胞因子超家族中一个糖蛋白类同源细胞因子家族，称为IFN家族。

已鉴定出该家族中的3个主要成员：IFN-α、IFN-β和IFN-γ[1]。

干扰素通过不同的信号传导通路发挥不同的生物活性, 其中Ⅰ型干扰素通过含JAK-STAT,MAPK-p38 和 PI3K 这 3 条通路发挥抗病毒、抗细胞增殖及免疫调节等重要作用, 而Ⅱ型干扰素则通过 JAK-STAT 和 MAPK-p38 路径发挥生物学作用, Ⅲ型干扰素则仅通过 PI3K 通路发挥生物学作用; 这 3 条传导通路包含 98 个基因和19 693 个 SNPs, 组成了复杂的基因间相互作用网络[2]。

近期研究表明，IFN-α与其受体结合后，可激活多种信号转导途径，从而发挥其抗病毒、抗肿瘤（抗增殖）及免疫调节等多种生物学功能。

本文综述IFN-α／β发挥其生物学效应所历经的不同信号转导途径及其信号转导分子的近期研究进展。

IFN-α／β及其受体IFN和靶细胞上的受体结合介导其生物学效应。

IFN-α、IFN-β共用一个受体即IFNAR,它由IFNARⅠ和IFNARⅡ两个亚单位组成。

三阴性乳腺癌中ITGβ1与MAPK蛋白的表达与临床意义研究

三阴性乳腺癌中ITGβ1与MAPK蛋白的表达与临床意义研究摘要】目的：探讨三阴性乳腺癌患者中ITGβ1 与MAPK表达水平与患者病情及预后的关系。

方法：收集2005年全年盐城市区（主要标本来源：盐城市第一人民医院与盐城市第三人民医院）三阴性乳腺癌病人为研究对象，并按照年龄等人口学特征选取同期20例正常乳腺组织作为对照，比较ITGB1与MAPK表达增高组与正常组患者疾病状况、预后情况的差异。

结果：两组肿瘤直径的差异具有统计学意义，可以认为ITGB1与MAPK表达增高的患者其肿瘤直径的大于正常患者；而相关分析结果显示，患者肿瘤组织的ITGB1与MAPK表达水平与其组织中淋巴管生产相关因子（Fas、NF-κB、COX-2）水平呈正相关，两组生存曲线的差异具有统计学意义，可以认为增高组患者的同期生存概率低于对照组。

结论：ITGB1以及MAPK表达程度高的患者，其肿瘤组织大于表达正常组的患者，并且其发生淋巴转移的风险也较高，同时其预后情况也更差。

【关键词】三阴性乳腺癌；ITGβ1；MAPK乳腺癌是威胁女性健康的主要原因之一，相关数据显示，我国每年新发乳腺癌人数呈上升趋势[1].预计到2030年，新发乳腺癌数将达到264万例，死亡170万例[2]，三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer, TNBC) 是一种特殊类型乳腺癌，占全部乳腺癌的16%[3]，指ER，PR，HER-2均为阴性表达的乳腺癌，具有侵袭性强、复发率高、生存期短预后差等生物学行为和临床病理特征。

ITGβ1 与MAPK蛋白都是信号传导通路的重要相关因子，与乳腺癌的恶性生物学行为有重要的相关性。

本研究探讨了三阴性乳腺癌患者中ITGβ1 与MAPK表达水平与患者病情及预后关系，为发病机制的研究及相关药物的研发提供了依据。

1. 材料与方法1.1 研究对象的选取收集2005年全年盐城市区（主要标本来源：盐城市第一人民医院与盐城市第三人民医院）三阴性乳腺癌病人为研究对象，并按照年龄等人口学特征选取同期20例正常乳腺组织作为对照。

c—Met蛋白在乳腺癌中的表达及临床病理意义

c—Met蛋白在乳腺癌中的表达及临床病理意义目的探讨乳腺癌中c-Met蛋白的表达情况及其临床病理意义。

方法收集我院病理科2011年10月～2012年10月150例乳腺癌石蜡标本，采用免疫组织化学方法对其c-Met蛋白的表达情况进行检测，以统计分析软件SPSS17.0对其与年龄、肿瘤大小、病理分级、淋巴结是否转移、TNM分期之间的关系进行评价。

结果c-Met阳性表达及阴性表达的例数为62（41.33%）、88（58.67%）。

c-Met 在正常乳腺组织中为阴性表达。

淋巴结转移的患者的阳性表达率明显高于无淋巴结转移组；TNM分期中，Ⅲ～Ⅳ组中的阳性表达率明显高于Ⅰ～Ⅱ组，差异有统计学意义（P 5 cm 13例；其中发生淋巴结转移的患者数为78例，没有发生淋巴结转移的患者数为72例。

对乳腺癌患者中c-Met的表达情况、c-Met的表达与乳腺癌各项临床病理观察指标的关系进行分析。

1.2 研究方法将研究标本切片后进行脱蜡和水化处理，将内源性过氧化物酶灭活，抗原的修复使用微波法进行，将抗原修复液在室温条件下向其加入10 min，正常山羊血清封闭液在室温条件下加入20 min，将多余液体甩去，不洗。

加入美国Zymed 公司提供的兔抗人c-Met多克隆抗体，加入时进行稀释，其比例为1∶100，在37°C条件下湿盒温育半小时后存放于4°C冰箱内放置过夜。

第二天将其切片恢复温度，分别将二抗滴加到各个切片上，滴加量为50 μL，在37℃条件下湿盒温育40 min，DAB显色液在洗涤后加入，信号的观察在显微镜下进行并终止显色，苏木素衬染，脱水、透明、封片[3]。

1.3 结果判断以参考文献[4]中的标准作为c-Met染色阳性表达的判断依据：将每张切片的200高倍视野进行随机选取，对其中的3个具有代表性的进行肿瘤细胞计数，阳性细胞着色强度要在40低倍视野下进行观察，对每张切片的阳性细胞率及阳性细胞着色强度参照相关文献采用半定量积分法分别进行分级计分，阳性强度的评定以两项之积的平均数为评定标准。

CXCR3在乳腺癌中的表达及其临床意义

资料采用－Ｉ－ｓ表示，组间比较采用ｔ检验，计数资料以
百分率表示，组问比较采用检验。Ｐ＜０．０５为有统计学差异。
２结果
御趋化因子。ＣＸＣ族又根据是否有谷氨酸－亮氨酸精氨酸（ＥＬＲ）基序分为２类：ＥＬＲ — ＣＸＣ趋化因子和非ＥＬＲ．ＣＸＣ趋化因子，研究标明，ＥＬＲ — ＣＸＣ趋化因子是有效的血管生长因子，如白细胞介素Ｌ一８、生长相关性
５０％，一７５％，＞７５％分别记０，１，２，３，４分。染色结
少发现６Ｏ多个趋化因子，属于细胞因子中的一个超家族，依其分子结构中氨基酸半胱氨酸（ｃｙｓｔｅｉｎｅＣ）残基排列顺序分４类：ＣＸＣ（ｏ【），ｃＣ（ｐ），Ｃ（），ＣＸ３Ｃ（６）
癌基因仅、生长相关性癌基因Ｂ、单核细胞趋化蛋白一１（ＭＣＰ一１）等。而非ＥＬＲ — ＣＸＣ趋化因子则是抑制血管生长的因子，如血小板因子＿４（ＰＦ－４）、诱导蛋白一１Ｏ
ＣＸＣＲ３在乳腺癌、乳腺纤维腺瘤及正常乳腺组织中的表达水平与临床病理特征关系多数正常乳腺组织、乳腺纤维腺瘤ＣＸＣＲ３为阴性表达。乳腺癌组的
ＣＸＣＲ３表达的总阳性率为９０．Ｏ％（７２／８０），显著高于

乳腺癌外周血角蛋白-19的检测及其临床意义

ＡｂｓｒｃＯｂｅｔｅＴｏｅｐｏｅｔｅｆａｉｉｔｆｕｉｇｔｅｒｖｒｅｔａｓｒｐａｅｐｌｍｅａｅｃａｎｒａｔｎ（ｔａｔｊｃｉ：ｘｌｒｈｅｓｂｌｙｏｓｎｈｅｅｓｒｎｃｉｔｓ— ｏｙｒｓｈｉｅｃｉｖｉｏＲＴ— ＣＲ）ｔｃ — Ｐｅｈ
周坚倪泉兴邹强任长才王红鹰顾斐
摘要目的：究反转录酶链聚合反应（ＴＰＲ）测乳腺癌患者外周血角蛋白一９Ｋｅａｉ一９Ｃ一９的临床意义。方法：研Ｒ —Ｃ检１（ｒｔ１，Ｋ１）ｎ
ＣｎｅＺＨｏＵａＮｌＱｕｎｉＺ０ＵａｇＲＥＮａｇａＷＡＮＧｏｇｙｎＧＵｉＤｅａｃｒＪｉｎｔａｘｎＱｉｎＣｈｎｃｉＨｎｉｇＦｅ —
ｐｒｍｅｔｆＳｒｅｙ，ＨｕｎｈｎＨｏｐｔｌｕａｎｖｒｉＳａｇａ２０４ａｔｎｕｇｒｏａｓａｓｉ，ＦｄｎＵｉｅｓｙ，ｈｎｈｉ０００ａｔ
ｉｅｈｓ，ｔｒａｐｉｎｓｉｓａｉｇ０，２３ａｉｎｔｎｓａｎｇｏｎｅ２ｐｔｅｓｉｔｇｉｗｏａａｉｎｔｎｓａｎｎｇｍｔｏｄｈｅｅｗｓ１ａｔｅｔｎｔｇｎｐｔｅｓｉｔｇｉ，２ａｉｎｔｎｓａｎｇｔｎｄ７ｐｔｅｓｉｔｇｉｇ
２００２牟９月一２）３年ｉ（００月，共入选５３例乳腺癌患者。分别在术前、术后、１次化疗结束后以及术后９１第～２个月，用反转应录酶链聚合反应（ —ＣＲＴＰＲ）检测血中的Ｃ９结果：３例乳腺癌患者中，Ｉ期、Ｋ１。５ Ⅱ期和 Ⅲ期患者Ｃ１阳性率分别为Ｋ一９

CXCL9、CXCL10 及CXCL11 在乳腺癌中的作用

World Latest Medicine Information (Electronic Version) 2021 Vo1.21 No.8投稿邮箱：sjzxyx88@64·综述·CXCL9、CXCL10及CXCL11在乳腺癌中的作用白钰明(内蒙古医科大学,内蒙古呼和浩特 010000 )摘要：趋化因子是一组低分子量的多肽。

它们的主要功能是将白细胞募集到炎症部位，但它们在肿瘤生长，血管生成和转移中也起着关键作用。

其中CXCL9、CXCL10及CXCL11在乳腺癌中的表达可能与肿瘤的发生、发展及预后密切相关。

探究其作用机制可为乳腺癌的诊断及治疗提供新的手段与策略。

关键词：趋化因子；乳腺癌；CXCL9；CXCL10；CXCL11中图分类号：R73 文献标识码：A DOI ：10.3969/j.issn.1671-3141.2021.08.023本文引用格式：白钰明.CXCL9、CXCL10及CXCL11在乳腺癌中的作用[J].世界最新医学信息文摘,2021,21(08):64-66.0 引言乳腺癌（breast cancer，BC）是目前世界上最常见的恶性肿瘤，是一种具有不同形态，表型和分子特征的肿瘤[1]。

其预后在很大程度上取决于传统的临床病理参数和基因表达谱，包括TNM(原发肿瘤，区域淋巴结，转移)分期，肿瘤分级，淋巴结状态，激素受体状态和人表皮生长因子受体(HER)-2的表达。

趋化因子是一类与癌细胞增殖、迁移和转移相关的重要调节性因子[2]。

近年来，越来越多的研究表明，趋化因子可能在乳腺癌细胞进出肿瘤微环境、调节肿瘤行为以及影响肿瘤预后等方面起着至关重要的作用。

现就CXCL9、CXCL10及CXCL11在乳腺癌中的研究进展作一综述。

1 趋化因子趋化因子是分子量( Mr) 8 ~ 10 的小分子多肽，其氨基酸组成包含特异的半胱氨基酸残基(Cys)，可特异性激活和募集白细胞[3]。

Vinculin蛋白在乳腺癌中的表达与临床意义

南通大学学报(医学版)Journal of Nantong University (Medical Sciences) 2021 : 41 (1)34・DOI:10.16424/32-1807/r.2021.01.008Vinculin 蛋白在乳腺癌中的表达与临床意义张秀梅**,丛林,周永华* ［基金项目］泰州市科技支撑计划社会发展(指导性)项目2020-30** ［作者简介］张秀梅，女，汉族，生于1974年5月，江苏省泰州市人，副主任医师，研究方向:乳腺、消化、泌尿系统病理诊断,(江苏省兴化市人民医院病理科，兴化225700)［摘要］目的:探讨Vinculin 蛋白在乳腺癌中的表达变化及临床意义遥方法:应用免疫组织化学法检测106例乳腺癌组织及癌旁组织中Vinculin 蛋白的表达情况，并分析其表达与癌临床特征及预后的关系遥结果：在癌组织中Vinculin 蛋白高表达率为22.64%，显著低于癌旁组织(92.45%, P<0.05)； Vinculin 蛋白高表达与TNM 分期、淋巴结转移呈负相关(r=-0.25、-0.20,均P<0.05)，与癌分化程度呈正相关(r=0.37, P<0.05)曰乳腺癌患者3年无疾病进展，平均生存期在Vinculin 蛋白高表达患者中为34.25个月(95%CI: 32.28〜36.22)，显著高于低表达患者(28.10个月，95%CI: 26.63~29.57) (P<0.05)遥结论:Vinculin 蛋白表达与乳腺癌分化程度、TNM 分期及淋巴结转移密切相关，影响患者的预后,可能是判断乳腺癌病理分级和预后的生物学指标遥［关键词］乳腺癌； Vinculin 蛋白；预后［中图分类号］ R737.9 ［文献标志码］ A ［文章编号］ 1674-7887(2021)01-0034-03The expression and clinical significance of Vinculin protein in breast cancer*ZHANG Xiumei **, CONG Lin, ZHOU Yonghua (Department of Pathology, the People's Hospital of Xinghua City, JiangsuProvince, Xinghua 225700)[Abstract] Objective: To investigate the expression and clinical significance of Vinculin protein in breast cancer. Methods:Immunohistochemical methods were used to detect the expression of Vinculin protein in cancer tissues and paracancer tissues, and to analyze the relationship between the expression of Vinculin protein and the clinical characteristics or prognosis ofbreast cancer patients. Results : The high expression rate of Vinculin protein in cancer tissues was 22.64% , which was significantly lower than 92.45% in paracancer tissues(P<0.05); the high expression rate of Vinculin protein was negatively correlated with TNM staging and lymph node metastasis(r=-0.25-0.20, P<0.05), and the positive rate of Vinculin protein waspositively correlated with the degree of differentiation(r=0.37, P<0.05); the average 3 -year progression-free survival of breast cancer patients with Vinculin protein high expression was 34.25 months(95%CI: 32.28-36.22), which was significantly higher than that of patients with Vinculin protein low expression(28.10 months, 95%CI: 26.63-29.57)(P<0.05). Conclusion: Theexpression of Vinculin protein is closely related to the degree of breast cancer differentiation, TNM staging and lymph nodemetastasis. It affects the prognosis of patients and may be a biological indicator for judging the pathological grade and prognosis of breast cancer.[Key words] breast cancer; Vinculin protein; prognosis目前在全球范围内，女性乳腺癌的发病率及致死率一直居高不下,且发病呈年轻化趋势［1-3］。

RACK1对人乳腺癌增殖、迁移和侵袭转移的影响及相关机制的研究的开题报告

RACK1对人乳腺癌增殖、迁移和侵袭转移的影响及相关机制的研究的开题报告
1. 研究背景和意义
人乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一，对女性的健康和生命造成严重威胁。

目前，乳腺癌的研究中发现了许多潜在信号通路和靶点，其中RACK1作为一个细胞信号传导蛋白，在癌症中发挥着重要作用，因此了解RACK1在人乳腺癌中的作用和机制具有重要的学术和临床意义。

2. 研究目的
本研究旨在探究RACK1在人乳腺癌中的作用及相关机制，包括其对癌细胞的增殖、迁移和侵袭转移的影响，并深入分析其参与的信号通路和调控机制，为进一步深入研究乳腺癌的发病机制提供帮助。

3. 研究内容和方法
本研究将应用细胞生物学、分子生物学、免疫学等技术手段，包括Western blot、实时荧光定量PCR、细胞增殖、迁移和侵袭转移实验等，探究RACK1在人乳腺癌中的作用及相关机制。

具体研究内容包括：
（1）利用人乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-231进行细胞增殖、迁移和侵袭转移实验，探究RACK1对癌细胞的影响以及其与乳腺癌的关系。

（2）应用Western blot和实时荧光定量PCR技术，分析RACK1与与其相关的信号通路因子（如AKT、ERK、NF-κB等）的表达水平，揭示其调控机制。

4. 研究意义和预期结果
通过本研究的探究，可深入研究RACK1在人乳腺癌中的作用及相关机制，为更好地了解乳腺癌的发病机制提供理论基础和实验数据支持。

同时，该研究可为寻找乳腺癌的新靶点和治疗途径提供参考，对改善乳腺癌患者的治疗效果具有重要的临床应用前景。