各类硫酸软骨素制备方法概述
硫酸软骨素
硫酸软骨素的提取和纯化工艺及其应用展望张蒙蒙 09生物工程（2）班摘要日前，由科技部会同国家发改委、财政部、教育部、中科院、中国工程院、自然基金会、中国科协等有关部门和单位，共同编制完成的《国家“十二五”科学与技术发展规划》正式发布。
其中，生物医药卫生领域的相关工作在规划中占重要地位。
在生物医药领域，各种动物源性的活性物质被大量利用以治疗各种困扰人类的疾病，如蟾蜍提取物、全蝎提取物、蜈蚣提取物及蛇胆提取物等。
本文就从动物软骨中提取的硫酸软骨素的生产工艺、分析方法及临床应用的新进展予以简单的描述，介绍了硫酸软骨素的来源、结构、性质及其生理功能，对硫酸软骨素的提取方法——中性盐法、碱提取法、酶提取法、超声波法﹑乙酸抽提法和纯化方法——溶剂法、季铵盐化合物沉淀法、超滤膜法、色谱法电泳法的具体工艺路线及其优缺点进行了综述。
关键词：硫酸软骨素；提取；纯化；生产工艺；分析方法；临床应用一、前言硫酸软骨素(Chondroitin sulfate)是一种酸性粘多糖，广泛存在于哺乳动物的软骨、喉骨、鼻骨和气管中。
硫酸软骨素是由葡萄糖醛酸和氨基己糖交替连结而成的双糖聚合物，它通常与蛋白质结合成糖蛋白的形式存在，当其水解时发生消去反应，连接硫酸软骨素与蛋白质中丝氨酸羟基的苷键断裂，可以得到游离态的硫酸软骨素。
硫酸软骨素为白色或微黄色粉末,具有吸湿性，易溶于水而成粘度较大的溶液，难溶于甲醇、乙醇、乙醚、丙醇、丙酮和冰醋酸等有机溶剂，并且遇热不稳定，乙酰基易发生水解脱落,在酸性条件下更易水解成不同聚合度的低聚糖。
硫酸软骨素具有降血脂、抗凝血、抗炎症及抗肿瘤等生理活性，临床上可用于预防动脉粥状硬化、提高机体免疫力、治疗风湿病和肾炎及由链霉素引起的听觉障碍。
硫酸软骨素与铜等金属离子结合可用于治疗皮肤病，与硝酸铋或氢氧化铝反应得到的络合物可用于治疗消化性溃疡，与苯甲酸酯、利多卡因或布比卡因作用生成的衍生物可用作麻醉剂。
作为食品添加剂，硫酸软骨素可用于食品的乳化、保湿和祛除异味。
硫酸软骨素总述
硫酸软骨素一、产品简介:硫酸软骨素是来自动物软骨组织的一类天然的酸性粘多糖（因其具有粘稠性）——糖胺聚糖（其中糖胺聚糖作为动物蛋白聚糖的代表成分，在软骨组织中以蛋白多糖形式存在），不同动物体所存在的硫酸软骨素类型不同，主要是CAS、CSC及各种硫酸软骨素的混合物，其中猪牛羊的骨中主要含有硫酸软骨素A，鲨鱼乌贼等海洋动物的软骨中主要含有硫酸软骨素C。
区别：蛋白多糖以蛋白为核心，糖蛋白以多糖为主体；或者说侧重点不同，虽然组成成分是一样的，但是糖蛋白定义为蛋白，蛋白聚糖定义为糖。
糖胺聚糖： 1）蛋白聚糖由三部分组成---核心蛋白、糖胺聚糖、连接区寡糖； 2）糖胺聚糖除了通过共价键与蛋白聚糖的核心蛋白连接(糖肽键）外，糖胺聚糖还通过静电作用或立体化学效应与其他蛋白质发生专一性程度不同的结合。
而蛋白多糖的聚集体则通过次级键（氢键和盐键）形成，可见从软骨组织中提取硫酸软骨素仅依靠破坏次级键的方法是不够的，而必须以降解蛋白质的方法，破坏多糖链与蛋白的共价结合方能达到提取硫酸软骨素的目的；3）因为糖胺聚糖具有粘稠性，所以蛋白聚糖也被称为粘蛋白。
软骨中粘蛋白等中的糖胺聚糖多由两种氨基己糖（氨基葡萄糖和氨基半乳糖）之一和两种己糖醛酸（葡萄糖醛酸和艾杜糖醛酸）之一以各种糖苷键连接而成； 4）除透明质酸（属于非蛋白多糖提取）外，糖胺聚糖分子中的氨基己糖上均含有硫酸基，该硫酸基与己糖醛酸上的羧酸都会导致整个蛋白聚糖分子显酸性，所以糖胺聚糖又被称为酸性粘多糖。
二、理化性质:1、物理性质：硫酸软骨素，简称CS，分子式：（C14H21NO14S)n，成品外观白色粉末状，无臭无味，易溶于水，不溶于乙醇和丙酮、冰醋酸等有机溶剂，遇水后迅速膨胀，对热不稳定，需避光密封保存。
其分子中含有大量的硫酸基和羧基，故呈酸性反应，可与钠钾钙离子结合成盐，其盐类对热稳定。
在高温、碱性、酸性环境溶液中易水解成单糖或小分子量多糖，因而溶液粘度下降。
（游离的硫酸软骨素水溶液遇较高温不稳定，主要是乙酰基被水解，从其结构上脱落下来。
硫酸软骨素生产工艺
硫酸软骨素生产工艺动物软骨中均含有酸软骨素，大家畜的鼻中隔及喉头骨中含量较多，据报道，猪鼻中隔含有41%左右。
药物硫酸软骨素是从软骨中提取的硫梳软骨素A和硫酸软骨素C等各种硫酸软骨素的混合物。
有的商品称康得灵。
本品用于因链、霉素所引起的听觉障碍症的预防和冶疗，如偏头痛、神经痛、风湿痛、肝炎等症。
性状：硫酸软骨素是一种白色粉末，吸水性强，易溶于水而成粘稠液体，不溶于乙醇、丙酮和乙醚等有机溶剂中，其盐类对热较稳定上。
制法：硫酸软骨的制剂和片剂，它的生产工艺主要有稀碱和浓碱和浓碱提取两种，下面各介绍两种。
一、稀碱提取工艺之一工艺流程：猪喉（鼻）软骨，浸出氢氧化钠过滤，浸出液，酶水解盐酸、胰酶53～54℃，水解液，吸附活性白土、活性炭，沉淀氯化钠、乙醇，PH值6.3～7，沉淀物，干燥无水乙醇60～65℃，干品，制剂氯化钠P值5.5，注射液。
操作过程：浸出：将2%氢氧化钠250千克置浸泡罐内，加入洁白干燥软骨40千克，在室温下每隔半小时缓缓搅拌1次，待浸出液比重达波美5.0（20℃）度时出料。
用纱布过滤。
骨渣再用适量蒸镏水浸泡20分钟，过滤。
二次过滤液合并，使滤液总体积为200升。
酶解：将上述滤液置消化罐中，搅拌下缓缓加入1：1盐酸并调PH值8.8～9.0，用循环水浴加热。
罐内温度达50℃时加入相当于1：25倍胰酶1300克（宜使用高倍的胰酶）继续升温，控制消化温度为53～54℃，不得超过50℃循环水浴温度55～57℃保持，水解7小时。
在水解过程中，由于氨基酸的增加，PH值会有下降，需用10%的氢氧化钠随时调整PH值至8.8～9.0，在水解过程后期，取反应液少许，用滤纸自然过滤到比色管中，10毫升滤液滴加10%三氯醋酸1～2滴。
若仅微显浑浊，说明消化情况良好，否则可酌情增加适量胰酶。
吸附：使内温53～54℃保持，用1：2盐酸调节PH值至10%氢氧化风俗溶液调PH 值至6.0，并加入与滤液体积等同的1%氯化钠溶液。
硫酸软骨素的提取和纯化的研究进展
硫酸软骨素的提取和纯化的研究进展栾允光赤峰学院化学系，赤峰024000摘要介绍了硫酸软骨素的来源、结构、性质及其生理功能，对硫酸软骨素的提取方法——中性盐法、碱提取法、酶提取法、超声波法、乙酸抽提法和纯化方法一一溶剂法、季铵盐化合物沉淀法、超滤膜法、色谱法电泳法的具体工艺路线及其优缺点进行了综述。
关键词：硫酸软骨素；提取；纯化硫酸软骨素（Chondroitin sulfate）是一种酸性粘多糖，广泛存在于哺乳动物的软骨、喉骨、鼻骨和气管中。
硫酸软骨素是由葡萄糖醛酸和氨基己糖交替连结而成的双糖聚合物，它通常与蛋白质结合成糖蛋白的形式存在，当其水解时发生消去反应，连接硫酸软骨素与蛋白质中丝氨酸羟基的苷键断裂，可以得到游离态的硫酸软骨素。
硫酸软骨素为白色或微黄色粉末,具有吸湿性，易溶于水而成粘度较大的溶液，难溶于甲醇、乙醇、乙醚、丙醇、丙酮和冰醋酸等有机溶剂，并且遇热不稳定，乙酰基易发生水解脱落,在酸性条件下更易水解成不同聚合度的低聚糖。
硫酸软骨素具有降血脂、抗凝血、抗炎症及抗肿瘤等生理活性，临床上可用于预防动脉粥状硬化、提高机体免疫力、治疗风湿病和肾炎及由链霉素引起的听觉障碍。
硫酸软骨素与铜等金属离子结合可用于治疗皮肤病，与硝酸铋或氢氧化铝反应得到的络合物可用于治疗消化性溃疡，与苯甲酸酯、利多卡因或布比卡因作用生成的衍生物可用作麻醉剂。
作为食品添加剂，硫酸软骨素可用于食品的乳化、保湿和祛除异味。
在化妆品中添加硫酸软骨素，可调节皮肤的细胞代谢，促进营养的吸收，保持皮肤的水分和改善发质。
[1,2,3]1 硫酸软骨素的提取1.1 中性盐法先用10%氯化钙提取，氯仿-戊醇（1：4）除去蛋白质，2倍量乙醇沉淀，最后以Lloyd 试剂精制。
而以透析法除杂质、氯化六氨合钴纯化，或一磷钨酸纯化，均可使工艺简化。
以30%氯化钾或30%氯化钾加1% 碳酸钾提取，高岭土吸附除去杂蛋白，可提高产品收率。
该方法提取的产品较白，各项指标符合国家标准，也不会造成环境污染，但是产率较低，造成原材料的大量浪费，对经济效益有一定的影响。
硫酸软骨素的制备及应用
硫酸软骨素的制备及应用作者：罗曦来源：《健康科学》2019年第01期摘要：硫酸软骨素是从动物软骨中提取的黏多糖类物质，在防治心血管疾病、关节病等方面具有重要作用。
随着硫酸软骨素的新功能、新用途不断扩大，应用范围也逐渐扩展，除了作为药品外，大量的硫酸软骨素是作为改善关节病的补充产品。
在国际市场强劲的需求拉动下，我国硫酸软骨素产业迅速发展壮大。
本文通过对国内外硫酸软骨素相关文献的综述总结，从其结构、来源、理化性质、制备及应用等方面详细介绍了硫酸软骨素的功能性质，为硫酸软骨素作为功能因子在保健食品方面的应用提供了支持。
关键词：硫酸软骨素；酶解；发酵；应用1.来源硫酸软骨素（Chondroitin sulfate，ChS）是在哺乳动物中发现的生物材料，特别是在动物腿骨、软骨、皮肤、神经组织和血管中较为丰富。
中国药典2010版中ChS主要有三个来源，即猪的喉骨、鼻中骨、气管等软骨组织；此外还有海洋动物的软骨，牛、鸟类及人类食用家禽类的软骨等。
除此之外，最近的研究通过生化方法和核磁共振图谱鉴定出巴西蟾蜍的毒液中也存在ChS，其可能对于蛋白质含量起保护作用。
最近也有研究发现，比起常规的酶提取法，利用鸡的腿骨熬汤来提取ChS更为方便，而且，基于中国食品工业的传统的烹饪骨汤，这也为联合生产骨汤和ChS提供了新的思路。
2.硫酸软骨素的制备工艺作为我国一种重要的出口原料药，硫酸软骨素有着多种生产工艺。
ChS产品的价格取决于商品中ChS的含量与纯度，从动物软骨中提取ChS的过程中可能残留的多肽、蛋白质、核酸会使ChS的价值大打折扣，因此提高产品的纯度是企业与院校一个重要的研究方向。
近年来，国内ChS行业进入一个新的阶段，在生产ChS的同时回收联产蛋白成为行业主流，实现了原料的综合利用，使污染减少，效益提高。
而疯牛病、禽流感等疾病的产生与流行也使人们对寻找新的原料来源（如海洋生物）和生产方法（如微生物发酵）的关注度逐步提升。
硫酸软骨素的研究进展
硫酸软骨素的研究进展硫酸软骨素是一类硫酸化的酸性粘多糖或糖胺聚糖，由葡糖醛酸和N-乙酰氨基半乳糖二糖单位重复组成。
硫酸软骨素临床上多被用于治疗关节炎、高血脂症和神经痛等。
随着对该产品的不断深入研究，硫酸软骨素已经被广泛应用于医药领域、食品（膳食补充剂）、化妆品等更多的行业内，本文就硫酸软骨素的生产工艺及其生物活性和应用进行阐述。
标签：硫酸软骨素;生产工艺;生物活性;应用1、硫酸软骨素的来源和在组织中的分布硫酸软骨素（Chondroitin Sulfate，简称CS）是一类硫酸化的酸性粘多糖（acid mucopolysaccharide），又名糖胺聚糖（glycosaminoglycan），由葡糖醛酸和N-乙酰氨基半乳糖二糖单位重复组成。
硫酸软骨素在人和动物的很多组织器官中都存在，多分布于软骨、韧带、肌腱、角膜等不同组织中。
然而，在不同组织及不同生物种属中存在的硫酸软骨素类型并不相同。
针对不同的组织，有研究表明软骨中多含有硫酸软骨素A和硫酸软骨素C，韧带和角膜中多存在硫酸软骨素A，而肌腱中含有的硫酸软骨素B和硫酸软骨素C比较多;对于不同的生物种属，猪、牛、鸡等陆地动物软骨中主要含有硫酸软骨素A，而鲨鱼等海洋动物的软骨中主要含有硫酸软骨素C。
2、硫酸软骨素的传统动物软骨生产工艺2.1碱提醇沉法碱提醇沉法是目前企业采用的主要生产方法，常用的有猪牛羊、禽类及鲨鱼的软骨，原料不同，生产工艺略有差异，其主要生产流程为：软骨→高温蒸煮→烘干粉碎→ 5% 氢氧化钠浸提→盐酸调pH 值→离心过滤→乙醇沉淀。
此法操作简易，生产成本低，但由于氢氧化钠、盐酸和乙醇的大量使用，导致污染严重，能耗较高，而且此法容易产生氢氧化钠的过度水解以及蛋白残留高等问题，此法得到的硫酸软骨素纯度一般在90% 以下，难以达到出口要求，而且澄清度也很难合格[3]。
为了解决这一问题，近年来有些厂家采用了比较先进的酶解- 超滤法和酶解- 树脂法进行生产。
软骨素工艺流程
硫酸软骨素生产工艺图
硫酸软骨素生产工艺说明
1、原料清洗：将动物软骨原料去除结缔组织及油脂，粉碎成软骨碎料。
2、消化（碱解）：软骨碎料加水，再加入氢氧化钠和氯化钠，使溶液中氢氧化钠
浓度为2~3%和氯化钠浓度为 1.5~2.5%，控制温度为50~60O C,连续搅拌保温6~8小时，静置取上清液。
3、酶解：上清液用盐酸调节PH为6~8，加入重量为动物软骨重量4%的胰酶在
50~60O C下酶解6~10小时，用盐酸调节PH值到5.5~6.5，得酶解液。
4、过滤：所得酶解液进行抽滤，得澄清酶解液。
5、醇沉：将酶解液用95%乙醇沉淀，沉淀物用65%乙醇洗涤，再用无水乙醇脱水，
得硫酸软骨素粗品。
6、真空干燥：真空度0.07~0.095Mpa，干燥温度65~80O C。
7、粉碎：100目粉碎过筛。
硫酸软骨素的研究概况
The Function of Embryo Transfer Technology in Our Country Animal Husbandry in Future
L AN G Ho ng2yan1 ,L IU Xiao2hui2 ,WAN G Xiao2yang1 , WAN G Da2guang1 , WAN G Hao1 , L V Li2liang1
3 Hasler J F. The Holstein cow in embryo t ransfer today as com2 pared to 20 years ago . Theriogenlogy ,2006 ,65 (1) :4～16.
4 Looney C R , et al . Imp roving fertilit y in beef cow recipient s. Theriogenlogy ,2006 ,65 (1) :201～209.
1 硫酸软骨素的概述 1. 1 硫酸软骨素的性质 硫酸软骨素 (cho ndroi2 tio n sulfate ,CS) 是广泛存在于人和动物软骨组织中 的一类黏多糖 ,主要由动物喉骨 、鼻中隔 、气管等软 骨组织分离纯化而得的一类酸性黏多糖 ,硫酸软骨 素的结构是由 D2葡糖醛酸与 N22 酰2D 氨基半乳糖 酸硫酸酯组成 (李瑞国 , 2003) 。其成分约含 50 ～ 70 个双糖基本单位 ,分子量为 1 ～ 5 万 。根 据结 构
Abstract : Our co unt ry’s eco nomy develop ment and t he socialism new ruralreco nst ructio n all need to develop t he animal husbandry , and in t he animal husbandry t he grass go urmet livestock indust ry must be first developt because of our count ry’s conditio n of many people and little land. But t he one of main obstacles of developing t he grass go urmet livestock indust ry is Proportio n of high p roductio n individual is too low and t he econo mic efficiency is too bad. The fastest effective met hod to solve t his p ro blem is t he applicatio n of embryo t ransfer technology , This had decided t he embryo t ransfer technology will act vital role in t he animal husbandry develop ment in our count ry in f ut ure.
硫酸软骨素生产工艺
动物软骨中均含有酸软骨素，大家畜地鼻中隔及喉头骨中含量较多，据报道，猪鼻中隔含有左右.药物硫酸软骨素是从软骨中提取地硫梳软骨素和硫酸软骨素等各种硫酸软骨素地混合物.有地商品称康得灵.本品用于因链、霉素所引起地听觉障碍症地预防和冶疗，如偏头痛、神经痛、风湿痛、肝炎等症.资料个人收集整理，勿做商业用途性状：硫酸软骨素是一种白色粉末，吸水性强，易溶于水而成粘稠液体，不溶于乙醇、丙酮和乙醚等有机溶剂中，其盐类对热较稳定上.资料个人收集整理，勿做商业用途制法：硫酸软骨地制剂和片剂，它地生产工艺主要有稀碱和浓碱和浓碱提取两种，下面各介绍两种.一、稀碱提取工艺之一工艺流程：猪喉（鼻）软骨，浸出氢氧化钠过滤，浸出液，酶水解盐酸、胰酶～℃，水解液，吸附活性白土、活性炭，沉淀氯化钠、乙醇，值～，沉淀物，干燥无水乙醇～℃，干品，制剂氯化钠值，注射液.资料个人收集整理，勿做商业用途操作过程：浸出：将氢氧化钠千克置浸泡罐内，加入洁白干燥软骨千克，在室温下每隔半小时缓缓搅拌次，待浸出液比重达波美（℃）度时出料.用纱布过滤.骨渣再用适量蒸镏水浸泡分钟，过滤.二次过滤液合并，使滤液总体积为升.资料个人收集整理，勿做商业用途酶解：将上述滤液置消化罐中，搅拌下缓缓加入：盐酸并调值～，用循环水浴加热.罐内温度达℃时加入相当于：倍胰酶克（宜使用高倍地胰酶）继续升温，控制消化温度为～℃，不得超过℃循环水浴温度～℃保持，水解小时.在水解过程中，由于氨基酸地增加，值会有下降，需用地氢氧化钠随时调整值至～，在水解过程后期，取反应液少许，用滤纸自然过滤到比色管中，毫升滤液滴加三氯醋酸～滴.若仅微显浑浊，说明消化情况良好，否则可酌情增加适量胰酶.资料个人收集整理，勿做商业用途吸附：使内温～℃保持，用：盐酸调节值至氢氧化风俗溶液调值至，并加入与滤液体积等同地氯化钠溶液.溶解后过滤，滤液在搅拌下缓缓加入伍乙醇，使醇含量为，每隔分钟搅拌一次，共搅拌～次，使细小颗粒增大而沉降.静置小时以下，虹吸出上清液.硫酸软骨素沉淀用无水乙醇充分脱水，洗涤次，抽干，～干燥或真空干燥.资料个人收集整理，勿做商业用途制剂：硫酸软骨素注射液配制配方：硫酸软骨素克（以纯品计）氧化钠克注射用水加至毫升按配方称取标示量地硫酸软骨素粉，撒入注射用水中，使其膨胀，搅拌溶解.再加入氯化钠，调整值左右，加热煮沸，用布氏漏斗趁热过滤，滤液迅速冷却，于～处放置过夜.次日过，滤液加入～活性炭迅速加热至微沸，保持分钟，用砂滤包扎滤纸，乘药液微沸时真空抽滤，滤液迅速冷却至室温，补加水稀释至全量，过滤至澄明，灌封，常压灭菌.资料个人收集整理，勿做商业用途硫酸软骨素溶液易繁殖微生物，必要时可在处方中加入（）地苯甲醇.说明与讨论：本品以含硫量计可达到以上，相当于硫酸软骨素或硫酸软骨素钠地百分含量，分别为及.资料个人收集整理，勿做商业用途用胰酶水解，可同时作用于蛋白质和糖元.为了避免水解反应局部过热而影响酶地活力，工艺中采用循环水浴加热装置.资料个人收集整理，勿做商业用途软骨浸泡时间长，蛋白质含量则相应增多，从而会影响到成品地纯度.为些规定浸出液比重地限度为波美度.浸出地速度与室温有关.资料个人收集整理，勿做商业用途由于此工敢地酶水解不可能完全彻底，而胰酶本身即为一种蛋白质，使用活性白土作为吸附剂，除剩余地蛋白质和多肽是有效地.活性白土地表面随着值地升高而增大，值以上粒子显著变细，因而活性白土在中性时吸附性能较好.但由于中性时粒子过细无法通过滤器，所以在过滤前将值调至，使过淽比较顺利.活性白土尚可吸附组织胺，与活性炭配合应用还有脱色与去热原地作用.资料个人收集整理，勿做商业用途酶水解及吸附过程温度控制在～℃，不仞是酶反应地需要，且能阻止微生物生长，从过滤开始至乙醇沉淀以前，操作要迅速，避免腐败.资料个人收集整理，勿做商业用途本工艺所用活性白土地处理方法：取千克活性白土，加常水千克、盐酸升搅匀，通入蒸汽煮沸小时，冷却.用常水洗至值，再用蒸镏水反复洗至值.吊滤后压干，置盘中℃烘干粉碎，℃活化小时后置密封容器内保存备用.资料个人收集整理，勿做商业用途二、稀碱提取工艺之二软骨（绞碎），提取氢氧化钠，碱性提取物，酶水解盐酸、胰酶值～、～℃.～小时，水解液，盐酸值，浓缩液，沉淀乙醇，沉淀物，干燥，粗制粉，精制水，盐酸值过滤，滤液，水解氢氧化钠、胰酶值～、～℃，小时，二次水解液，盐酸，过滤值～、℃滤液，乙醇，沉淀干燥.精制粉，制剂，成品.资料个人收集整理，勿做商业用途工艺过程：提取：将除净脂肪芨其他结缔组织地软骨绞碎，加入倍量氢氧化钠溶液浸提小时.过滤.弃去滤渣，滤液合并.资料个人收集整理，勿做商业用途酶水解：用：盐酸调值为～，加入量地胰酶，在℃～℃条件下不断搅拌消化～小时，速冷至℃以下，再用：盐调值至放置过夜(须防止腐).虹吸上清液，沉淀用布袋吊滤.资料个人收集整理，勿做商业用途沉淀：所得滤液在℃以下减雨衣缩至原体积地.过滤.滤液加入乙醇，使醇浓度下降至～，放置过夜.过滤，沉淀物用乙醇洗涤次，在℃以下干燥，取得粗制粉.可供口剂用.资料个人收集整理，勿做商业用途精制取上述粗制粉，加入倍量蒸镏水溶解，用：盐到调值至，冷库内放置过夜.过滤，滤液用氢氧化钠溶液调值至～，加入量地胰酶，于℃～℃搅拌消化小时，放冷至℃以下，调值～，加热到℃保持分钟，立即冷却.过滤滤液加入乙醇，使乙醇浓度下降至左右，放置小时以下.过滤.以乙醇、丙酮、乙醚洗涤沉淀物.减压干燥，得精制粉.资料个人收集整理，勿做商业用途制剂：康得灵注射液配方：硫酸软骨素粉撒入注射用水中，使之溶解，加入苯甲醇，最后补加注射用水足量，用盐酸或氢氧化钠溶液液调值～，过滤，灌封，常压灭菌即得.资料个人收集整理，勿做商业用途康得灵糖衣片配方：硫酸软骨素粉克淀粉克硬脂酸镁克片重克取湿淀粉制粒，干燥后按配方混入乙过～目筛地硫酸软骨素粉和硬脂酸镁压片，包衣，即得.说明与讨论：有地工艺用稀碱提取后，滤液用盐酸调节值至～，加热至℃，过滤地溶液用氢氧化钠溶液调值至～，加热至℃，过滤后乙醇沉淀得粗品，精制时用、、霉菌蛋白酶进行水解，效果也好.资料个人收集整理，勿做商业用途提取前地确小时应间歇搅拌；消化后要立即冷却以防腐败；浓缩工序可浓缩至原体积地左右，以减少乙醇用量；精制工序中在酶水解并调值～后.可加～针剂炭再加热至℃.资料个人收集整理，勿做商业用途本工艺制得地硫酸软骨素制粉，含量为左右.所以在注射液配方中所规定硫酸软骨素量并不是实际称量地值，而是应按精粉地实际百分含量进行折算.实际上要加克左右.资料个人收集整理，勿做商业用途软骨每千克用氯化钠溶液毫升和氢氧化钠溶液毫升地混合液提取小时，残渣再用氯化钠毫升和氢氧化钠毫升地混合液提取次，所得提取液经胰酶水解，加热除去蛋白质后，通过乙醇沉淀等工序，能得到较纯地硫酸软骨素.资料个人收集整理，勿做商业用途三、浓碱提工艺之一工艺路线：猪喉头软骨（绞碎），水解提取浓氢氧化钠℃，小时，碱性提取物，盐酸值～提取液，去糖元淀粉酶，甲苯值～、～℃，小时，水解液，去酸性蛋白盐酸，滑石粉值～，℃，滤液，去酸性蛋白质氢氧化钠，滑石粉值～℃清液，沉淀乙醇，沉淀物，干燥，成品（片剂原料）.资料个人收集整理，勿做商业用途工艺过程：原料处理：将猪头洗净，在℃以下蒸煮约小时，除去脂肪结缔组织，用水洗净，－℃贮藏周以上，备用.资料个人收集整理，勿做商业用途水解提取：将冷冻软骨解冻，绞碎.于水解锅加入升波美度氢氧化钠溶液.在搅拌下加入软骨千克，加热至℃，提取小时.加盐酸调值至～，加淀粉酶单位（先用提取液调成粥状）和甲苯毫升，～℃水解小时，取小样过滤，将滤液装入毫升试管中，滴入碘试液滴，停止水解.资料个人收集整理，勿做商业用途去蛋白质：、去酸性蛋白质：用盐酸调节上述水解液值至～，加滑石粉千克，加热到℃后，迅速冷却至室温（必要时锅内加冷水），静置小时以上，用折迭帆布滤器反复过滤，至滤液澄清为止.资料个人收集整理，勿做商业用途、去碱性蛋白质：将上述溶液用氢氧化钠溶液调值至～，加放千克，加热到℃后，迅速冷却至室温，静置小时以上.用折迭帆布滤器过滤，滤液要求澄清.资料个人收集整理，勿做商业用途沉淀、干燥：将滤液加倍体积以上地乙醇，边加边激烈搅拌，沉淀～小时，等上面乙醇液不浑浊后，将上清液吸出进行回收.沉淀物抽干后取出，放在～乙醇毫升中搅拌分钟，放置过夜.次日，吸取上清液回收乙醇，沉淀物帛干手用乙醇毫升处理次，每次小时，抽干.然后摊于清洁地盘中，置烘箱中℃烘干，为硫酸软骨素片原料.资料个人收集整理，勿做商业用途制剂：本品每片原料含量如下：硫酸软骨素钠盐克滑分克淀粉颗粒克片得克说明与讨论：加入淀粉酶地目地是除去糖元（即动物淀粉）.根据不同种类和不同效价地淀粉酶，应掌握其最适温度和最适值，并注意调整用量，但如果只作为片剂原料，可不必除去糖元.资料个人收集整理，勿做商业用途四、浓碱提取工艺之二工艺路线：软骨（绞碎），提取氢氧化钠℃，小时，提取液，盐酸值滤液，酶水解，胰酶值，℃，小时，水解液，乙醇沉淀，洗活乙醇，脱盐沉淀物，脱水乙醇脱水沉物，干燥℃，成品（片剂原料）.资料个人收集整理，勿做商业用途工艺过程：提取：取除去脂肪及结缔组织地浆软骨，经解冻后绞碎，称重，置不锈钢夹层锅中，加入原料重量地波美～度氢氧化钠溶液（即每千克碎软骨加千克），然后搅拌加入碎软骨.加热至液温℃，保温经提取小时后，冷却.缓缓加入工业盐酸调值至，纱布过滤，滤渣挤干后废弃.资料个人收集整理，勿做商业用途去糖无限元和蛋白质：将过滤液置夹层锅中，保温℃，调值至，加入蛋白酶（每千克原料万单位）和胰酶（适量），同时加入甲苯毫升，搅拌水解小时，水解结束时取小样过滤，滤液分别用碘试液及三氯醋酸测定合格后，加热至℃，加入适量滑石粉（约为原料地），保温分钟左右，然后迅速冷却至℃以下，过夜.资料个人收集整理，勿做商业用途沉淀：次日，将冷却地液体用折布过滤，滤液必须澄清，对碘试液和三氯醋酸试液反应均显阴性.将滤液放于缸内，在激烈搅拌下加入约倍量地以上乙醇，使滤液地醇浓度下降至～，停止搅拌，静置沉淀.资料个人收集整理，勿做商业用途洗涤、干燥：待乙醇液加收.沉淀物用布氏漏斗抽干后取出，加入升地乙醇，搅拌均匀，然后放置.待沉淀后，吸去上清液，沉淀物抽干，再加入升乙醇，如上法洗涤次.抽干后，摊于清洁地盘中，置烘箱中℃以下烘干.即可作为制剂原料.资料个人收集整理，勿做商业用途说明和讨论：实践证明，本工艺与上面另一浓碱提取工艺对比，得率较高，但含量较低.有工艺用浓碱提取水化后，即缓缓用盐酸调值约为过滤.滤液用氢氧化钠调值约为，静置沉淀得品，再经胰酶水解，精制得精品.资料个人收集整理，勿做商业用途浓碱工艺所用氢氧化钠溶液浓度都在以上，有地甚至达以上.虽然较用稀氢氧化钠地工艺操作简便，提取时间短，但浓碱也有可能使硫酸软同膆降解和影响疗效.资料个人收集整理，勿做商业用途无论哪种工艺，原料处理很重要.可将软骨在水是煮沸分钟左右，除去脂肪和其他结束结缔组织，然后与带棱角地石子置一转筒中放置，以磨去残留肌肉，也可用胰酶处理，即每千克原料，加入胰酶粉约克，在温水（不超过℃）中消化约分钟，用水洗净后即可投料.如用生产药用胰酶后地粗酶，则每千克原料加约千克.用量不宜过多，时间不宜过长，否则会使有效成分损失.资料个人收集整理，勿做商业用途五、产品质量检验方法目前硫酸软骨素地方标准较多，尚统一.仅以上海、河南、湖南、山东、江西和四川等省、市药品标准来比较：分子式有按硫酸软骨素（）计算，也有按其钠盐（）计算地.因而，即使标示量彼此相同，但实际硫酸软骨素剂量并一一致.资料个人收集整理，勿做商业用途还有以含氨基葡萄糖地限量作为纯度标准地，但标示量并未规定按照什么标准计算.标准规定量方法因各地情况不同而分为重量法和比色法.前者是测定地精密度高，但专一性差，如果存在游离硫酸根与硫酸软骨素释出者无法区别.有地时间限制了游离硫酸根，从而使硫酸软骨素地质和量受到了有效地控制.在鉴别反应方面，有地规定了还原糖和氨基已糖地反应，灰化后又显硫酸根地反应，可表明本品为含氨基已糖和硫酸基地糖类.资料个人收集整理，勿做商业用途比色法首先用盐酸使硫酸软骨素水解，产生氨基已糖，在碱性条件下与乙醇、丙酮反应，再与对一二甲氨基苯甲醛反应，生成物呈红色.资料个人收集整理，勿做商业用途在其他原料标准中规定了含氮量地限度，硫酸软骨素本身含氮量为，而多余地氮则作为蛋白质、多肽及氨基酸等杂质地量.资料个人收集整理，勿做商业用途。
硫酸软骨素总述
硫酸软骨素一、产品简介:硫酸软骨素是来自动物软骨组织的一类天然的酸性粘多糖（因其具有粘稠性）——糖胺聚糖（其中糖胺聚糖作为动物蛋白聚糖的代表成分，在软骨组织中以蛋白多糖形式存在），不同动物体内所存在的硫酸软骨素类型不同，主要是CAS、CSC及各种硫酸软骨素的混合物，其中猪牛羊的骨中主要含有硫酸软骨素A，鲨鱼乌贼等海洋动物的软骨中主要含有硫酸软骨素C。
区别：蛋白多糖以蛋白为核心，糖蛋白以多糖为主体；或者说侧重点不同，虽然组成成分是一样的，但是糖蛋白定义为蛋白，蛋白聚糖定义为糖。
糖胺聚糖：1）蛋白聚糖由三部分组成---核心蛋白、糖胺聚糖、连接区寡糖；2）糖胺聚糖除了通过共价键与蛋白聚糖的核心蛋白连接(糖肽键）外，糖胺聚糖还通过静电作用或立体化学效应与其他蛋白质发生专一性程度不同的结合。
而蛋白多糖的聚集体则通过次级键（氢键和盐键）形成，可见从软骨组织中提取硫酸软骨素仅依靠破坏次级键的方法是不够的，而必须以降解蛋白质的方法，破坏多糖链与蛋白的共价结合方能达到提取硫酸软骨素的目的；3）因为糖胺聚糖具有粘稠性，所以蛋白聚糖也被称为粘蛋白。
软骨中粘蛋白等中的糖胺聚糖多由两种氨基己糖（氨基葡萄糖和氨基半乳糖）之一和两种己糖醛酸（葡萄糖醛酸和艾杜糖醛酸）之一以各种糖苷键连接而成；4）除透明质酸（属于非蛋白多糖提取）外，糖胺聚糖分子中的氨基己糖上均含有硫酸基，该硫酸基与己糖醛酸上的羧酸都会导致整个蛋白聚糖分子显酸性，所以糖胺聚糖又被称为酸性粘多糖。
二、理化性质:1、物理性质：硫酸软骨素，简称CS，分子式：（C14H21NO14S)n，成品外观白色粉末状，无臭无味，易溶于水，不溶于乙醇和丙酮、冰醋酸等有机溶剂，遇水后迅速膨胀，对热不稳定，需避光密封保存。
其分子中含有大量的硫酸基和羧基，故呈酸性反应，可与钠钾钙离子结合成盐，其盐类对热稳定。
在高温、碱性、酸性环境溶液中易水解成单糖或小分子量多糖，因而溶液粘度下降。
（游离的硫酸软骨素水溶液遇较高温不稳定，主要是乙酰基被水解，从其结构上脱落下来。
硫酸软骨素的提取
硫酸软骨素的提取蛋壳膜硫酸软骨素的提取工艺及其优化摘要：以蛋壳膜为原料，采用稀碱与酶解相结合的方法提取硫酸软骨素。
以胰蛋白酶、胃蛋白酶分解去除杂蛋白，经酒精沉淀并干燥后得到产品。
实验得到的最佳提取工艺为：料液比１：１．５，碱浓度５％，碱提温度４０℃，胰蛋白酶、胃蛋白酶的用量分别为１．５％、０．８％，ｐＨ值分别为８．２和５．５，酶的各自最适条件作用时间均为２．０ｈ。
关键词：硫酸软骨素；蛋壳膜；胰蛋白酶；胃蛋白酶Optimization of Extraction Technology of Chondroitin Sulfate from Eggshell MembraneLIU Guo-qing，LING Qing-zhi，SUN Jun-fei(School of Biotechnology and Food Engineering, Hefei University of Technology, Heifei 230009, China)Abstract ：Chondroitin sulfate was extracted from the eggshell membrane with a method of dilute alkali-enzyme hydrolysis.The product of chondroitin sulfate was gotten after ethanol disposition and desiccation by eliminating the protein with trypsinand pepsin. The resultsshowed the optimumconditions of weight proportion 1:1.5 (material:liquid), alkali concentration 5%,temperature 40 ℃. Dosage of trypsin and pepsin 1.5% and 0.8% respectively, pH value 8.2 and 5.5 respectively and reactiontime 2.0 h respectively.Key words：chondroitin sulfate；eggshell membrane；trypsin；pepsin硫酸软骨索(chondroitin sulfate，简称CS)是来自于动物软骨和鸟类卵的壳膜等组织的一类重要的酸性粘多糖即糖胺聚糖[1]。