血球计数板的构造和使用
血球计数板原理

血球计数板原理一、前言血球计数板是临床实验室中常用的一种仪器,主要用于血液样本中的红细胞、白细胞和血小板数量的计数。
本文将介绍血球计数板的原理。
二、仪器组成血球计数板由两个部分组成:盖玻片和计数室。
盖玻片是一块尺寸为22×22毫米的方形玻璃,上面有一个0.1毫升容量的小孔。
计数室是一块由光学玻璃制成的方形玻璃,尺寸为3×3×0.1毫米。
在计数室内,有一个深度为0.02毫米、直径为0.05毫米的小孔。
三、原理当样本经过盖玻片上的小孔时,会在盖玻片上形成一个直径约为1.6毫米的圆形液滴。
这个液滴会被引入到计数室中,并通过小孔进入到深度为0.02毫米的区域。
此时,液滴会被压扁,并在两侧产生反射光。
四、测量红细胞数量当光线穿过压扁后的液滴时,会在液滴两侧产生反射光。
这些反射光会被透镜集中到目镜中观察。
在目镜中,可以看到一个明亮的圆环和一个暗色的中心。
这个圆环被称为“红细胞计数区”,直径约为1.6毫米。
在计数室中,红细胞密度大约为500万/毫升。
五、测量白细胞数量白细胞数量的测量需要先将样本进行稀释,并加入一种特殊的染料,使白细胞变成紫色。
当样本经过盖玻片上的小孔并进入计数室时,染料会渗透到整个液滴中,并使所有白细胞变成紫色。
此时,在目镜中可以看到一个深色的圆环和一个淡色的中心。
这个深色的圆环被称为“白细胞计数区”,直径约为1.6毫米。
在计数室中,白细胞密度大约为10000/毫升。
六、测量血小板数量血小板数量的测量需要先将样本进行稀释,并加入一种特殊的抗凝剂。
当样本经过盖玻片上的小孔并进入计数室时,抗凝剂会防止血小板凝聚。
此时,在目镜中可以看到一个深色的圆环和一个淡色的中心。
这个深色的圆环被称为“血小板计数区”,直径约为1.6毫米。
在计数室中,血小板密度大约为300000/毫升。
七、结论血球计数板通过光学原理实现对血液样本中红细胞、白细胞和血小板数量的测量。
在盖玻片上形成的液滴经过压扁后,在目镜中形成不同颜色和大小的圆环,从而实现对不同种类细胞数量的测量。
血球计数板计数法
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精度高
血球计数板由精密的网格构成,能够精确地 计算细胞数量,误差较小。
样本用量少
血球计数板计数法需要的样本量较少,适用 于珍贵样本的计数。
缺点
主观性强
血球计数板计数法需要人工识别和计数细胞,因此容易受到主观因素 的影响,不同操作者之间可能存在差异。
无法计数非网格区域细胞
血球计数板上的网格区域有限,对于非网格区域的细胞无法计数,可 能会造成计数误差。
改进样本处理方法,提高细胞分散效果,降低细胞聚集现象, 提高计数的准确性。
增加血球计数板的网格密度,以减少计数误差,提高计数的准 确性。
将血球计数板计数法与其他检测方法相结合,如染色法、流式 细胞术等,以提高计数的准确性和可靠性。
06 血球计数板计数法:血常规检测中的血细胞计数
红细胞计数降低
常见于缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血、溶血性贫血等,也 可见于慢性病、肿瘤、月经期、孕妇等生理性贫血。
白细胞计数结果解读
白细胞计数正常值
成人(4.0~10.0) × 10^9/L,新生儿 (15.0~20.0) × 10^9/L。
白细胞计数升高
常见于感染、炎症、组织损伤、恶性肿瘤等,也可 见于生理性升高,如剧烈运动、体力劳动、月经期 和排卵期等。
常见于免疫性血小板减少症、再 生障碍性贫血、骨髓增生异常综 合征等,也可见于某些药物影响 或放化疗后骨髓抑制。
05 血球计数板计数法的优缺点
CHAPTER
优点
操作简便
血球计数板计数法是一种直接、快速的细胞 计数方法,操作简便,易于掌握。
适用范围广
该方法适用于各种类型的细胞计数,包括细 菌、红细胞、白细胞等。
总结词
血球计数板计数法在血常规检测中广 泛应用,用于准确计数红细胞、白细 胞和血小板等血细胞数量,为临床诊 断提供重要依据。
血球计数板原理
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1. 血球计数板的定义和作用血球计数板是一种用于进行血液细胞计数的仪器。
通过对血液样本进行稀释并装填到计数板的特定区域,可以快速准确地计数不同类型的血细胞,包括红细胞、白细胞和血小板等。
血球计数板可用于血液疾病的诊断和监测,提供了宝贵的临床信息。
2. 血球计数板的构成和布局血球计数板通常由玻璃制成,具有特定的布局和区域划分。
它包括一个正方形计数区和周围边缘的计数区,正方形计数区上通常有25个小方格。
这些小方格被进一步划分为更小的九宫格。
3. 原理概述血球计数板使用了传统的血液计数技术,需要经过以下步骤来进行计数:•采集和稀释:从患者的静脉血中采集一定量的血液样本,然后将其稀释。
稀释是为了使血液中的细胞数量适合于计数板上的小方格。
•装填:将稀释后的血液样本装填到计数板的计数区。
通常使用吸管或移液器将血液沿着边缘流入计数区,直到填满为止。
装填后应该照明相当于九个小方格的区域。
•计数:使用显微镜在倍数为400倍的条件下,通过观察计数区内的血细胞,对不同类型的细胞进行计数。
4. 红细胞计数红细胞计数是血球计数板中最常见的计数类型之一。
在计数区中,从左上方的方格开始,逐个计数。
每计数到一个红细胞时,应记录在相应的方格上。
在计算总数时,需要考虑到方格总数、稀释倍数和计数区面积。
5. 白细胞计数白细胞计数通常使用九宫格法进行。
每个小方格的九宫格内计数一次白细胞,然后根据计数区的特定规则计算白细胞的数量。
与红细胞计数类似,需要考虑到方格总数、稀释倍数和计数区面积来计算总数。
6. 血小板计数血小板计数是另一个重要的血球计数参数。
在计数区中,使用九宫格法计数血小板。
通常,每个小方格的中央九宫格内计数一次血小板,并使用特定的计算公式来计算血小板数量。
7. 计数误差和控制血球计数板的使用可能会产生一定的计数误差。
这些误差可能来自于各种原因,如技术操作、仪器精度和样本制备等。
为了控制误差,可以采取以下措施:•样本制备:严格按照标准操作进行稀释和装填,避免空气泡和污染物的影响。
血球计数板的使用
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血球计数板生物实验用具血球计数板是显微镜上的外挂物件,可用来测量细胞,细菌等一些微小物体的长度,还有就是测量数量,如单位体积细胞的数量.血球计数板的构造和使用血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台.中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网.方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用.这一大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm3.计数室通常有两种规格.一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格.但是不管计数室是哪一种构造;它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成,见图.血球计数板的使用以计数酵母菌为例(1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数.(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可.(3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片.(4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内.(5)计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数.(6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞).(7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数.3.计算公式(1)16格×25格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数(2)25格x16格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80×400×104×稀释倍数4.血球计数板的清洁血球汁数板使用后,用自来水冲洗,切勿用硬物洗刷,洗后自行晾干或用吹风机吹干,或用95%的乙醇,无水乙醇,丙酮等有机溶剂脱水使其干燥.通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物.若不干净,则必须重复清洗直到干净为止.实验六微生物的显微直接计数法一、实验目的了解血球计数板的构造、计数原理和计数方法,掌握显微镜下直接计数的技能。
细胞计数板的使用方法
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血球计数板-基本构造血球计数板是一块特制的厚型载玻片,载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间的平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各刻有一小方格网,每个方格网共分九个大格,中央的一大格作为计数用,称为计数区。
计数区的刻度有两种:一种是计数区分为16个大方格(大方格用三线隔开),而每个大方格又分成25个小方格;另一种是一个计数区分成25个大方格(大方格之间用双线分开),而每个大方格又分成16个小方格。
但是不管计数区是哪一种构造,它们都有一个共同特点,即计数区都由400个小方格组成。
计数区边长为1mm,则计数区的面积为1mm2,每个小方格的面积为1/400mm2。
盖上盖玻片后,计数区的高度为0.1mm,所以每个计数区的体积为0.1mm3,每个小方格的体积为1/4000mm3。
使用细胞计数板计数时,先要测定每个小方格中微生物的数量,再换算成每毫升菌液(或每克样品)中微生物细胞的数量。
细胞计数板-使用方法1.视待测菌悬液浓度,加无菌水适当稀释(斜面一般稀释100倍?),以每小格的菌数可数为度。
2.取洁净的细胞计数板一块,在计数区上盖上一块盖玻片。
3.将菌悬液摇匀,用滴管吸取少许,从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘滴入一小滴(不宜过多),让菌悬液利用液体的表面张力充满计数区,勿使气泡产生,并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。
也可以将菌悬液直接滴加在计数区上(不要使计数区两边平台沾上菌悬液,以免加盖盖玻片后,造成计数区深度的升高),然后加盖盖玻片(勿使产生气泡)。
4.静置片刻,使细胞沉降到计数板上,不再随液体漂移。
将细胞计数板放置于显微镜的载物台上夹稳,先在低倍镜下找到计数区后,再转换高倍镜观察并计数。
血球计数板的原理
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血球计数板的原理血球计数板是一种用于血液细胞计数的实验室工具。
它是由一个方形的玻璃板构成,上面划有网格状的线条。
血球计数板的原理是通过在网格内计数血液细胞的数量来估算整个血液样本中细胞的浓度。
血球计数板的网格通常由九个大方格组成,每个大方格又被细分为小方格。
这种网格的设计使得在计数时能够更加准确地确定细胞的数量。
每个小方格的体积和深度都是已知的,因此可以根据计数结果来估算血液中细胞的浓度。
在使用血球计数板进行计数时,首先需要将血液样本稀释至一定的浓度。
然后,取一定体积的稀释后的血液样本,将其放置在血球计数板的特定区域内。
通过显微镜观察,将细胞数目记录在相应的区域内。
为了准确计数细胞的数量,通常需要计数多个小方格。
计数时,可以选择不同的区域进行计数,以增加统计的准确性。
计数完成后,可以根据计数的小方格数量、稀释倍数和体积来计算细胞的浓度。
血球计数板的使用需要一定的技巧和经验。
首先,操作人员需要熟悉血球计数板的结构和使用方法。
其次,操作人员需要具备良好的显微镜观察和计数技巧,以确保计数的准确性和可靠性。
此外,操作过程中需要注意保持血液样本的稳定和避免气泡的干扰。
血球计数板在临床医学和科研领域具有重要的应用价值。
通过血球计数板可以对血液细胞的数量和浓度进行准确的测量和估算。
这对于疾病的诊断和监测以及药物研发和评价都具有重要意义。
血球计数板是一种用于血液细胞计数的实验室工具,通过在网格内计数细胞的数量来估算血液样本中细胞的浓度。
其使用需要一定的技巧和经验,可以应用于临床医学和科研领域。
血球计数板在血液细胞计数中扮演着重要的角色,为疾病的诊断和治疗提供了重要的依据。
血球计数板原理
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血球计数板原理
血球计数板是一种用于进行血球计数的常见实验室仪器,它采用了一种特殊的设计原理。
血球计数板由一个方形的平坦玻璃板组成,上面有许多小格子。
这些小格子被分为九个大区域,每个大区域内含有一个九宫格。
在使用血球计数板时,首先需要将一小部分稀释好的血液样本放置在计数板上。
通常,我们使用稀释液将血液样本稀释到适当的浓度。
然后,通过使用显微镜来观察放置在计数板上的血液样本。
当观察血球计数板时,我们可以看到许多小格子内部的血细胞。
散落在每个小格子内的血细胞被称为计数单元。
这些计数单元有助于我们估计整个血液样本中的血细胞数目。
使用显微镜观察时,我们可以注意到每个计数单元中的血细胞。
我们可以区分红血细胞和白血细胞,数出它们的数量,并通过乘以适当的修正因子,得出整个血液样本中的血细胞数目。
血球计数板的九宫格设计可以有助于我们进行更准确的计数,因为每个计数单元中的血细胞数量是已知的,计算起来更容易。
总之,血球计数板通过将血液样本放置在九宫格的小格子中,并使用显微镜观察和计数每个小格子内的血细胞,以估计整个血液样本中的血细胞数量。
这种计数方法可以提供血细胞计数的快速和可靠的结果,对于疾病诊断和监测非常有用。
血球计数板的计数原理
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血球计数板的计数原理
血球计数板是临床实验室中常用的一种设备,用于进行血液细胞计数。
它可以帮助医生和实验室技术人员快速、准确地获取患者的血液细胞计数数据,从而为临床诊断和治疗提供重要参考依据。
那么,血球计数板的计数原理是什么呢?
首先,血球计数板是由一块透明的玻璃板和一定数量的小方格组成的。
每个小方格中有9个小格子,这些小格子的数量和大小是经过精确设计的。
在进行血细胞计数时,将稀释后的血液样本放在计数板上,通过显微镜观察血液细胞在小格子中的分布情况,从而进行计数。
其次,血球计数板的计数原理是基于显微镜的视野计数。
具体来说,将稀释后的血液样本放在计数板上后,通过显微镜调节到适当的放大倍数,然后在显微镜视野中观察小格子中的血细胞数量。
通常情况下,我们会选择几个小格子进行计数,然后根据计数的结果和计算公式,就可以得出血细胞的浓度。
此外,血球计数板的计数原理还涉及到了稀释因子的计算。
在进行血液细胞计数时,由于血样本的浓度较高,需要进行适当的稀
释,以便减少计数时的误差。
因此,计数原理中还包括了对稀释因子的计算和使用。
总的来说,血球计数板的计数原理是基于显微镜视野计数和稀释因子计算的。
通过精确设计的小格子和显微镜的帮助,我们可以快速、准确地获取血细胞计数的数据,为临床诊断和治疗提供重要的支持。
血球计数板在临床实验室中扮演着重要的角色,它的计数原理也是我们进行血细胞计数时需要了解和掌握的重要知识之一。
血球计数板计数实验
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环工综合实验血球计数板计数实验实验报告环境科学与工程学院实验中心使用血球计数板计数时,先要测定每个小方格中微生物的数量,再换算成每毫升菌液(或每克样品)中微生物细胞的数量。
2.血球计数板计算微生物数量的优缺点是什么?血球计数板与平板稀释法对细菌个数进行测定,结果往往差别很大。
分析原因。
答:⑴将细菌(或其他微生物)以染料(例如结晶紫)染色后,直接以显微镜观察的方式计数,再推算回细菌数,所得即为总菌数,即死菌、活菌一并计算。
优点:简单、快速、重复性高。
不足:不能区分死细胞和活细胞,应用范围较窄;一些小的细胞在显微镜下很难看到;样品中菌液浓度不能低于106个/mL;不能用于菌丝体或呈链状而不分散的微生物测定⑵血球计数板计量时所得到的结果为死菌与活菌的总数,而平板稀释法培养得到的为活菌数目,因此结果差异较大。
四、实验步骤1.稀释:取接种酵母菌的斜面一支,加入5ml无菌水,摇晃试管一分钟,使形成菌液;将菌液倒入洁净的150ml锥形瓶中,加结晶紫三滴,摇晃2分钟,再加入无菌水至50ml。
2.镜检计数室:在加样前,先对计数板的计数室进行镜检。
若有污物,则需清洗后才能进行计数。
2.加样品:将清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片,再用无菌的细口滴管将稀释的酿酒酵母菌液由盖玻片边缘滴一小滴(不宜过多),让菌液沿缝隙靠毛细渗透作用自行进入计数室,一般计数室均能充满菌液。
注意不可有气泡产生。
4.显微镜计数:静止5分钟后,将血球计数板置于显微镜载物台上,先用低倍镜找到计数室所在位置,然后换成高倍镜进行计数。
在计数前若发现菌液太浓或太稀,需重新调节稀释度后再计数。
一般样品稀释度要求每小格内约有5—10个菌体为宜。
每个计数室选5个中格(可选4个角和中央的中格)中的菌体进行计数。
位于格线上的菌体一般只数上方和右边线上的。
如遇酵母出芽,芽体大小达到母细胞的一半时,即作两个菌体计数。
计数一个样品要从两个计数室中计得的值来计算样品的含菌量。
血球计数板使用说明
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而由于仪器(计数板、盖片、吸管等)不够准确与精密带来的误差称仪器误差;
由于细胞分布不均匀等因素带来的细胞计数误差属于分布误差或计数域误差(filed error)。
仪器误差和分布误差统称为固有误差或系统误差。技术误差和仪器误差可通过规范操作、提高熟练程度和校正仪器而避免或纠正,但细胞分布误差却难于彻底消除。质量控制一般需采用以下措施。
n为测定例数,∑d2为双样之差的平方和。
3.人员质量评价一般用两差比值法或双样试验标准差评价法进行质量评价或工作人员自我考核;变异百分数法通常用于评价细胞计数的结果。
(1)两差比值法用于考核实验结果的精密度。采用同一稀释样间隔2h后进行重复计数,求出两次镜下计数值之差(取绝对值)与两次计数值标准差的比值,即两差比值(r)。
评分:score=100-20.1×r,20.1为失分系数(40/1.99)。评级:90-100为优秀,80-89为良好,70-79为中等,60-69为及格,<60时为不及格。
(2)细胞稀释液应等渗、新鲜、无杂质微粒,同时应该保证细胞没有明显的团块。
(3)严格操作,从取样、重悬、稀释、充池到计数都应规范,尤其应注意的是样品稀释及充池时既要作到充分混匀,又要防止剧烈震荡为破坏红细胞。必须一次性充满计数室,防止产生气泡,充入细胞悬液的量以不超过计数室台面与血盖片之间的矩形边缘为宜。
血球计数板的使用-图文
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对每个样品计数三次,再取其平均值。
N1=(n1-1+n1-2)/2 N2=(n2-1+n2-2)/2 N3=(n3-1+n3-2)/2
N=(N1+N2+N3) /3
N1=(n1-1+n1-2)/2
计数一个样品要从两个计数室中计得的平 均数值来计算。
n1-1
n1-2
N1=(n1-1+n1-2)/2
x个 = N/(5×16) ×16×25个
1cm3
(1mm × 1mm × 0.1mm÷1000)cm3
x = N/(5×16) ×16×25个× 1cm3 × 1000÷ (1mm × 1mm × 0.1mm)
=50000 N
②用血球计数板对藻细胞进行计数 的方法与步骤:
ⅰ检查计数室 先用显微镜对计数板的计数室进行镜检是否干净
如果规格为25格×16格的计数板统计计数池中央 大方格内四角及中央中格内(即80个小方格)的单 胞藻数,并记录。
计数时,小心移动载物台,从上到下,由左及右 又由右及左依次计数各小格内的细胞数。一般可 采取“数上线不数下线,数左线不数右线”的原则 处理。凡压方格的上线和左线的细胞,统一算此 方格内的细胞,而压方格的下线和右线的细胞, 统一不算此方格内的细胞。
。若有污物,则需用清水清洗,吹干,用擦镜纸 擦拭干净。
盖玻片使用前浸在75%的酒精溶液中,使用时用 眼科镊取出,放在滤纸上吸水,用擦镜纸擦拭干 净。
将盖有盖玻片的计数板放在显微镜的载物台上, 调焦,用低倍镜找到计数区检查是否干净。
从试管中吸出培养液进行计数之前,要将 试管轻轻震荡几下,这样使单胞藻分布均 匀,防止单胞藻凝聚沉淀,提高计数的代 表性和准确性,求得的培养液中的单胞藻 数量误差小。
血球计数板的结构与使用

血球计数板的结构与使用血细胞计数板又称血球计数器,是高中生物学实验中重要的细胞计数工具。
1血细胞计数板的结构1.1 目视信息及分析血细胞计数板是一块特制的厚型载玻片,有4 个凹槽,中间部分被一“H”型凹槽分成上、下两个相同的计数平台,每个平台中有长、宽各3 mm的计数区域,平均分为9 个大方格。
计数室(指中央的一个大方格,下同)的长和宽各是1 mm,计数板上标识的“0.1 mm”是指计数室的高度(图1)。
所以,计数室体积为1 mm × 1 mm × 0.1 mm = 0.1 mm 3 = 10-4 mL。
血细胞计数板有两种规格,一种是25 × 16 型(汤麦式,标识为XB-K-25),另一种是16 × 25 (希利格式)。
汤麦式血细胞计数板的每个计数室有25 个中方格,每个中方格又分为16 个小方格;而希利格式血细胞计数板每个计数室中有16 个中方格,每个中方格又分25 个小方格。
所以,上述两种规格的血细胞计数板的计数室都有400 个小方格,即体积为0. 1mm 3 的计数室被平分为400 个小格。
1.2 显微观察信息及分析在显微镜下,可以观察到计数室及其周围被许多线条规则地分隔成许多小室(图2)。
计数板上的线条分为单线和双线两种,双线区分不同中方格,每一中方格四周的线都是双线,计数室与周围区域的区分线也是双线;单线用于区分小方格。
计数室内的单线和双线向外延伸,因此计数室外的线也可分为单线和双线两种。
计数室周围的线并非只是起引导作用,与计数室四个顶点相邻的四个大方格,其内只有中方格而无小方格,这四个区域可用于体积较大的单细胞计数(如白细胞等)。
2 细胞计数原理由于计数室内有400 个小方格,如果对所有小方格进行细胞计数,因视野所限,不易操作,容易造成较大误差,所以一般采用定点取样计数。
不同规格的血细胞计数板取样点不同,汤麦式血细胞计数板计数室中有25 个中方格,则取计数室4 个角和中央的共5 个中方格进行观察计数;而希利格式血细胞计数板的计数室中有16 个中方格,则取计数室4 个角的中方格进行观察计数。
血球计数板的计数方法
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血球计数板的计数方法1. 什么是血球计数板?血球计数板(hemocytometer)是一种用于血细胞计数的实验室设备。
它是一个有规定格数和深度的方形玻璃片,可以用于准确计算血液中红细胞、白细胞和血小板的数量。
2. 血球计数板的结构血球计数板通常由两个玻璃板组成,其中底板具有一个中心深度为0.1毫米的四方形计数室,该计数室被细致刻划成若干方格。
玻璃板上的一个或多个分格中的每个小格通常被标记为N个正方形小方格,每个小方格都具有已知的面积和深度。
3. 使用血球计数板进行计数的步骤步骤一:预处理•必须将计数室灭菌,以确保精确的计数结果。
•清洁和干燥两个玻璃板。
•准备所需的工作液,如盐水溶液。
步骤二:装填血液和计数室•使用大口针头在计数室的两个较深的边缘处,各自放入几滴血液样本。
•使用吸引力将血液吸入计数室中。
步骤三:均匀分布血细胞•轻轻倾斜和旋转计数室,以确保血液在计数室中均匀分布。
•这有助于避免细胞堆积,确保一个合适的血样。
步骤四:开始计数•将计数室放在显微镜上,并使用10倍或40倍增大放大率观察计数室中的血细胞。
•确保血细胞清晰可见,并避免过大的增大放大率,以免难以计数。
步骤五:计数规则•在计数室的每个小方格中计数所选的细胞类型,例如红细胞、白细胞和血小板。
•进行计数时,只计数完全在所选小方格内或者仅靠着四角的细胞。
•对每个细胞类型重复计数多个小方格,以获得更准确的统计结果。
步骤六:计算计数结果•根据所选细胞类型,确定每个小方格中的细胞数。
•使用统计公式计算细胞浓度:细胞数/已知的标定小方格数/标定小方格的面积。
4. 使用血球计数板的注意事项和技巧•需要精确的盖玻片技巧,确保计数室中没有气泡。
•观察血细胞时,确保不受外界因素干扰,如光线、尘埃等。
•避免在计数室内使用过多的血液,以免细胞重叠。
•进行计数时,要细心、耐心,并进行多次重复计数以确保准确性。
•定期校准计数室,以确保精确的计数结果。
5. 血球计数板的应用血球计数板广泛应用于临床诊断、疾病监测和实验室研究等领域。
血球计数板实验报告
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一、实验目的1. 熟悉血球计数板的使用方法。
2. 学习微生物计数的基本原理和操作技巧。
3. 通过计数,了解酵母菌种群数量的变化规律。
二、实验原理血球计数板是一种常用的微生物计数工具,其计数原理是将一定稀释度的微生物悬液滴入计数室中,在显微镜下直接计数。
血球计数板通常由厚玻璃制成,中间有两个计数池,每个计数池内画有9个大方格,大方格内再分为25个中方格,每个中方格又分为16个小方格。
通过计数大方格内的微生物数量,可以计算出单位体积内微生物的总数。
三、实验材料1. 血球计数板2. 显微镜3. 酵母菌悬液4. 稀释液5. 移液器6. 试管7. 玻璃棒四、实验步骤1. 将血球计数板和盖片用擦试干净,并将盖片盖在计数板上。
2. 用移液器吸取适量酵母菌悬液,滴入计数池边缘,使悬液自行渗入计数池中。
3. 待悬液稳定后,将计数板置于显微镜载物台上,调整显微镜焦距,使计数室清晰可见。
4. 选择计数室中的一个大方格,按照从左上角到右下角的顺序,依次计数大方格内的微生物数量。
5. 计数完成后,计算每个大方格的平均微生物数量。
6. 根据稀释倍数,计算出单位体积内微生物的总数。
五、实验结果与分析本次实验共计数了5个大方格,每个大方格的平均微生物数量分别为:200、250、300、350、400。
根据稀释倍数,计算出单位体积内酵母菌的总数约为2.5×10^6个/mL。
从实验结果可以看出,酵母菌种群数量在一定时间内呈现增长趋势,这与酵母菌的生长特性相符。
六、实验总结1. 血球计数板是一种简单、方便、准确的微生物计数工具。
2. 在进行微生物计数时,应注意操作规范,避免误差。
3. 通过本次实验,加深了对微生物计数原理和操作技巧的理解。
七、注意事项1. 计数前应确保血球计数板和盖片干净、无尘。
2. 滴加悬液时,应避免产生气泡。
3. 计数时,应尽量保持显微镜焦距不变。
4. 计数过程中,应避免人为误差。
通过本次实验,我们掌握了血球计数板的使用方法,并了解了酵母菌种群数量的变化规律。
血球计数板的计数方法
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血球计数板的计数方法血球计数板是一种用于计数血液中各种细胞数量的仪器。
它是由一块玻璃板和一根计数棒组成的。
玻璃板上有许多小方格,每个小方格的大小和深度都是固定的。
计数棒是一根细长的棒状物,一端有一个小圆球,可以吸取血液样本。
使用血球计数板进行计数时,需要按照一定的步骤进行操作。
需要准备好血液样本。
通常情况下,血液样本是从患者的静脉中抽取的。
抽取血液时需要注意卫生和安全,避免感染和交叉感染的发生。
抽取的血液样本需要用抗凝剂进行处理,以防止血液凝固。
接下来,需要将血液样本放在计数棒上。
将计数棒的小圆球轻轻地放在血液样本上,让血液自然吸入计数棒中。
吸入的血液量应该是适量的,不要过多或过少。
过多的血液会使计数棒上的血液过于密集,难以进行计数;过少的血液则会导致计数不准确。
然后,需要将计数棒上的血液样本滴在玻璃板上。
将计数棒的小圆球轻轻地触碰玻璃板上的小方格,让血液样本自然滴落在小方格中。
每个小方格中应该只有一滴血液,不要让血液溢出或者混合在其他小方格中。
接着,需要进行计数。
使用显微镜观察玻璃板上的小方格,计数板上的小方格通常是由9个大方格组成的。
在显微镜下,可以看到每个小方格中的血细胞数量。
根据每个小方格中的血细胞数量,可以计算出每个大方格中的血细胞数量。
最后,根据每个大方格中的血细胞数量,可以计算出整个计数板中的血细胞数量。
在进行计数时,需要注意以下几点:1. 计数时需要仔细观察,避免漏计或重复计数。
2. 计数时需要按照一定的规律进行,避免出现计数错误。
3. 计数时需要注意计数板上的各种细胞数量,包括红细胞、白细胞、血小板等。
4. 计数时需要注意计数板上的各种细胞形态和大小,以便进行鉴别诊断。
5. 计数时需要注意计数板上的各种细胞分布情况,以便进行统计分析。
血球计数板是一种非常重要的医疗仪器,它可以帮助医生进行血液检查和诊断。
使用血球计数板进行计数时,需要仔细操作,遵循一定的规律,以保证计数的准确性和可靠性。
血球计数板
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血球计数板血球计数板被用以对人体内红、白血球进行显微计数之用,也常用于计算一些细菌、真菌、酵母等微生物的数量,是一种常见的生物学工具1含义血球计数板用优质厚玻璃制成。
每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数池。
计数池两侧各有一支持柱,将特制的专用盖玻片覆盖其上,形成高0.10mm的计数池。
计数池画有长、宽各3.0mm的方格,分为9个大方格,每个大格面积为1.0毫米X1.0毫米=1.0平方毫米;容积为1.0平方毫米X0.1毫米=0.1立方毫米。
其中,中央大方格用双线分成25个中方格,位于正中及四角5个中方格是红细胞计数区域(图中浅红色区域),每个中方格用单线划分为16个小方格。
四角的4个大方格是白细胞计数区域(图中浅蓝色区域),每个大方格用单线划分为16个中方格。
根椐国际标准局(NBS)规定,大方格每边长度允许误差为±1%。
说明:上图红色方框代表一个大方格;绿色方框代表一个中方格,两种中方格的面积不一样大;蓝色方框代表一个小方格。
2基本构造血球计数板是一块特制的厚型载玻片,载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间的平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各刻有一小方格网,每个方格网共分九个大方格,中央的一大方格作为计数用,称为计数区。
计数区的刻度有两种:一种是计数区分为16个中方格(大方格用三线隔开),而每个中方格又分成25个小方格;另一种是一个计数区分成25个中方格(中方格之间用双线分开),而每个中方格又分成16个小方格。
但是不管计数区是哪一种构造,它们都有一个共同特点,即计数区都由400个小方格组成。
计数区边长为1mm,则计数区的面积为lmm2,每个小方格的面积为1/400mm2。
盖上盖玻片后,计数区的高度为0.1mm,所以每个计数区的体积为0.1mm3,每个小方格的体积为1/4000mm3。
使用血球计数板计数时,先要测定每个小方格中微生物的数量,再换算成每毫升菌液(或每克样品)中微生物细胞的数量。
血球计数板及其使用方法
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血球计数板及其使用方法1、血球计数板的构造血球计数板是一种生物学或医学仪器,用以对人体血液中红细胞、白细胞进行显微计数,也常用于一些细菌、真菌、酵母菌等较大细胞或微生物的计数。
血球计数板的形状如图1所示,血球计数板是一块特制的厚载玻片,载玻片上由4个槽构成3个平台。
中间的平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各刻有一方格网,每个方格网共分9个大方格(大方格用三线隔开),中央的一大方格作为计数用,称为计数室,如图2所示。
计数室的规格常有两种:一种叫希利格式(16×25型),是一个计数室分为16个中方格(中方格之间用双线分开),而每个中方格又分成25个小方格;另一种叫汤麦式(25×16型),是一个计数室分成25个中方格,而每个中方格又分成16个小方格。
但是不管计数室是哪一种构造,它们都有一个共同特点,即计数室都由400个小方格组成。
计数室的边长常为1mm,则计数室的面积为1mm2,盖上盖玻片后,计数室的高度为0.1mm,所以每个计数室的容积为0.1mm3,每个小方格的边长为0.05mm,每个小方格的容积为1/4000mm3、16×25型的每个中方格的边长为0.25mm,每个中方格的容积为1/160mm3,25×16型的每个中方格的边长为0.2mm,每个中方格的容积为1/250mm3,如图3所示。
另外,有血球计数板规格为计数室边长为2mm,则计数室的面积为4mm2,计数室的高度为0.1mm,所以每个计数室的容积为0.4mm3,每个小方格的边长为0.1mm,每个小方格的容积为1/1000mm3。
16×25型的每个中方格的边长为0.5mm,每个中方格的容积为1/40mm3;25×16型的每个中方格的边长为0.4mm,每个中方格的容积为2/125mm3。
2、血球计数板的使用方法(以计数酵母菌为例)(1)用血球计数板计数培养液中的酵母菌个数。
血球计数板的实验使用流程
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血球计数板的实验使用流程简介血球计数板是用于血细胞计数和分类的实验室设备。
它主要由一个方形计数室和一个覆盖玻片构成。
血球计数板广泛应用于医学、疾病诊断、生化实验等领域,可以对患者的血细胞数量和类型进行检测和分析。
实验使用流程下面将介绍血球计数板的使用流程,包括准备实验室设备、样本采集和准备、计数板的使用、结果记录和分析等环节。
1. 准备实验室设备首先,确保实验室设备齐全,并进行必要的校准和检查。
包括血球计数板、显微镜、调焦器、实验用玻片、草酸染液、盖玻片、计数盘、移液管、吸球、橡皮球、标本架等。
确保实验室无菌,并根据实验所需准备相应的试剂和药品。
2. 样本采集和准备从受试者身体部位提取血液样本,并将其转移到一个干净的离心管中。
轻轻倒置离心管,以使血液均匀混合。
然后使用移液管将血液样本转移到计数板中,并保持试剂和标本的适当比例。
3. 计数板的使用将血液样本滴在计数板的计数室中。
注意不要溢出计数室,以免影响计数的准确性。
然后,在计数室的覆盖玻片上均匀涂抹血液样本。
避免气泡和杂质进入计数室。
将计数板放入显微镜下,并调节显微镜的焦距。
4. 观察和计数使用10倍或40倍的放大倍数观察计数板上的血细胞。
同时使用计数盘,选择一个特定的区域进行观察和计数。
注意区分不同类型的血细胞,如红细胞、白细胞和血小板。
对每个类型的血细胞进行计数,并记录在实验记录表中。
5. 结果记录和分析将观察到的血细胞计数数据记录在实验记录表中,并进行数据分析。
根据计数结果,可以评估患者的血细胞数量和类型是否正常。
根据需要,可以进行进一步的实验和分析,如细胞形态学分析、细胞寿命研究等。
注意事项•在操作过程中保持实验环境的清洁和无菌。
•严格按照操作步骤进行操作,避免任何污染和误差。
•根据实验需求,选择适当的放大倍数进行观察和计数。
•注意样本的准确采集和制备,避免样本不足或过多。
•在观察和计数过程中,注意细胞的形态和颜色变化,避免误判。
血球计数板是实验室常用的设备,通过以上的使用流程,可以准确地进行血细胞计数和分类实验。
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血球计数板的构造和使用
血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台.中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网.方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用.这一大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm3.
计数室通常有两种规格.一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格.但是不管计数室是哪一种构造;它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成,见图.
血球计数板的使用
以计数酵母菌为例
(1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数.
(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可.
(3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片.
(4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内.
(5)计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数.
(6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞).
(7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数.
3.计算公式
(1)16格×25格的血球计数板计算公式:
酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数
(2)25格x16格的血球计数板计算公式:
酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80×400×104×稀释倍数。