血球计数板的构造和使用

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血球计数板的使用

血球计数板的使用

血球计数板

生物实验用具

血球计数板是显微镜上的外挂物件,可用来测量细胞,细菌等一些微小物体的长度,还有就是测量数量,如单位体积细胞的数量.

血球计数板的构造和使用

血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台.中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网.方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用.这一大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm3.

计数室通常有两种规格.一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格.但是不管计数室是哪一种构造;它们都有一个共同的特点,即每一大方

格都是由16×25=25×16=400个小方格组成,见图.

血球计数板的使用

以计数酵母菌为例

(1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数.

(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可.

(3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片.

(4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内.

(5)计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数.

细胞计数方法

细胞计数方法

图为:25中格X16小格的细胞计数板

血球计数板

血球计数板的构造和使用

血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台.中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网.方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用.这一大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm3.

计数室通常有两种规格.一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格.但是不管计数室是哪一种构造;它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成,见图.

血球计数板的使用

以计数酵母菌为例

(1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数.

(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可.

(3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片.

(4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌

液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内.

(5)计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数;如果规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数.

(6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞).

细胞计数板的使用方法

细胞计数板的使用方法

血球计数板‎-基本构造

血球计数板‎是一块特制‎的厚型载玻‎片,载玻片上有‎四个槽构成‎三个平台。中间的平台‎较宽,其中间又被‎一短横槽分‎隔成两半,每个半边上‎面各刻有一‎小方格网,每个方格网‎共分九个大‎格,中央的一大‎格作为计数‎用,称为计数区‎。计数区的刻‎度有两种:一种是计数‎区分为16‎个大方格(大方格用三‎线隔开),而每个大方‎格又分成2‎5个小方格‎;另一种是一‎个计数区分‎成25个大‎方格(大方格之间‎用双线分开‎),而每个大方‎格又分成1‎6个小方格‎。但是不管计‎数区是哪一‎种构造,它们都有一个‎共同特点,即计数区都‎由400个‎小方格组成‎。

计数区边长‎为1mm,则计数区的‎面积为1m‎m2,每个小方格‎的面积为1‎/400mm‎2。盖上盖玻片‎后,计数区的高‎度为0.1mm,所以每个计‎数区的体积‎为0.1mm3,每个小方格‎的体积为1‎/4000m‎m3。

使用细胞计‎数板计数时‎,先要测定每‎个小方格中‎微生物的数‎量,再换算成每‎毫升菌液(或每克样品‎)中微生物细‎胞的数量。

细胞计数板‎-使用方法

1.视待测菌悬‎液浓度,加无菌水适‎当稀释(斜面一般稀‎释100倍‎?),以每小格的‎菌数可数为‎度。

2.取洁净的细‎胞计数板一‎块,在计数区上‎盖上一块盖‎玻片。

3.将菌悬液摇‎匀,用滴管吸取‎少许,从计数板中‎间平台两侧‎的沟槽内沿‎盖玻片的下‎边缘滴入一‎小滴(不宜过多),让菌悬液利‎用液体的表‎面张力充满‎计数区,勿使气泡产‎生,并用吸水纸‎吸去沟槽中‎流出的多余‎菌悬液。也可以将菌‎悬液直接滴‎加在计数区‎上(不要使计数‎区两边平台‎沾上菌悬液‎,以免加盖盖‎玻片后,造成计数区深度‎的升高),然后加盖盖‎玻片(勿使产生气‎泡)。

血球计数板及其使用方法

血球计数板及其使用方法

⾎球计数板及其使⽤⽅法

⾎球计数板及其使⽤⽅法

1、⾎球计数板的构造

⾎球计数板是⼀种⽣物学或医学仪器,⽤以对⼈体⾎液中红细胞、⽩细胞进⾏显微计数,也常⽤于⼀些细菌、真菌、酵母菌等较⼤细胞或微⽣物的计数。

⾎球计数板的形状如图1所⽰,⾎球计

数板是⼀块特制的厚载玻⽚,载玻⽚上由4

个槽构成3个平台。中间的平台较宽,其中

间⼜被⼀短横槽分隔成两半,每个半边上⾯

各刻有⼀⽅格⽹,每个⽅格⽹共分9个⼤⽅

格(⼤⽅格⽤三线隔开),中央的⼀⼤⽅格

作为计数⽤,称为计数室,如图2所⽰。

计数室的规格常有两种:⼀种叫希利格

式(16×25型),是⼀个计数室分为16个中⽅格(中⽅格之间⽤双线分开),⽽每个中⽅格⼜分成25个⼩⽅格;另⼀种叫汤麦式(25×16型),是⼀个计数室分成25个中⽅格,⽽每个中⽅格⼜分成16个⼩⽅格。

但是不管计数室是哪⼀种构造,它

们都有⼀个共同特点,即计数室都由

400个⼩⽅格组成。计数室的边长常为

1mm,则计数室的⾯积为1mm2,盖上盖玻

⽚后,计数室的⾼度为0.1mm,所以每

个计数室的容积为0.1mm3,每个⼩⽅格

的边长为0.05mm,每个⼩⽅格的容积为

1/4000mm3、16×25型的每个中⽅格的

边长为0.25mm,每个中⽅格的容积为

1/160mm3,25×16型的每个中⽅格的边

长为0.2mm,每个中⽅格的容积为

1/250mm3,如图3所⽰。

另外,有⾎球计数板规格为计数室边长为2mm,则计数室的⾯积为4mm2,计数室的⾼度为0.1mm,所以每个计数室的容积为

0.4mm3,每个⼩⽅格的边长为0.1mm,每个⼩⽅格的容积为1/1000mm3。16×25型的每个中⽅格的边长为0.5mm,每个中⽅格的容积为1/40mm3;25×16型的每个中⽅格的边长为0.4mm,每个中⽅格的容积为2/125mm3。

血球计数板使用ppt课件

血球计数板使用ppt课件
3
• 2.25×16型的计数板 中央大方格以双线等分成25个中 方格,每个中方格又分成16个小方格,供细胞计数用(见 图三)。一般计数四个角和中央的五个中方格(80个小方 格)的细胞数。 细胞个数/1mL=80个小方格细胞总数/ 80 ×400×10000×稀释倍数
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二、血球计数板的使用方法步骤
• 1.镜检计数室。在加样前,先对计数板的计数室进行镜 检。若有污物,则需清洗,吹干后才能进行计数;
• 2.加样品。将清洁干燥的血球计数板的计数室上加盖专 用的盖玻片,用吸管吸取稀释后的酵母菌悬液,滴于盖玻 片边缘,让培养液自行缓缓渗入,一次性充满计数室,防 止产生气泡,充入细胞悬液的量以不超过计数室台面与盖 玻片之间的矩形边缘为宜。多余培养液可用滤纸吸去;
血球计数板使用
1
一、血球计数板的规格
• 人教版建议使用2mm×2mm×0.1mm方格 • 苏教版推荐使用1mm×1mm×0.1mm方格
计数室
2
计数室两种规格
• 1.16×25型的计数板 将计数室放大,可见它含16中格, 一般取四角:1、4、13、16四个中方格(100个小方格) 计数 。 细胞个数/1mL=100个小方格细胞总数/ 100 ×400×10000×稀释倍数
解析 :根据公式:5×400×10000×10=2×108
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• 例2:检测员将1 mL水样稀释10倍后,用抽样检测的方法 检测每毫升蓝藻的数量;将盖玻片放在计数室上,用吸管 吸取少许培养液使其自行渗入计数室,并用滤纸吸去多余 液体。已知每个计数室由25×16=400个小格组成,容纳 液体的总体积为0.1 mm3。

血球计数板的使用与酵母菌数量估计

血球计数板的使用与酵母菌数量估计

血球计数板的使用与酵母菌数量估计

一、实验目的

1、为了巩固显微镜使用操作

2、学习血球计数板的使用

3、估计1克酵母溶入500ml水中后,1ml水中所含有的酵母菌数量

二、实验原理

血球计数板:是一块特制的载玻片,其上表面中央部分由四条槽分成三个平台。中间平台又被一短槽一分为二,每边各有一个方格网,每个方格网有九个大小相等的大方格,中间的一个大方格即计数室,就是计数微生物或细胞的部位。

计数室刻度一般有两种规格:

A、大方格分成16个中方格,而中方格又分成25个小方格的一种(图上)

B、大方格分成25个中方格,而中方格又分成16个小方格的一种(图上)。

但两种规格的计数板均有400个(16×25 或25×16)小方格。

计数室容积一定,将待测标本的均匀悬液放在计数室中并在显微镜下计数,就可算出单位体积内的微生物总数目。

计数室容积为1×1×0.1=0.1mm3=10-4ml

计数公式:1ml悬液中的微生物总数(个) = A×B×n×104

A为每个中方格中的微生物数平均值,B为稀释倍数,n为每大方格中的中方格数。

三、实验器材

1台显微镜、1块血球计数板、500ml的酵母菌溶液、滴管、盖玻片数块、吸水纸。

四、实验步骤

(1)称取1克酵母加入500ml的水中,配制成酵母菌使溶液。

(2)镜检、加样前,先要检查计数室内有无污物,若有则需清洗后烘干使用。

(3)加样、血球计数板上盖上清洁干燥的盖玻片,用无菌的细口滴管将稀释的微生物悬液从盖玻片边缘滴一小滴(不宜过多)。这样通过毛细渗透作用液体可沿缝隙进入计数室,注意要使计数室中不产生气泡并且充盈稀释液。

血球计数板使用

血球计数板使用
一、血球计数板的规格
• 人教版建议使用2mm×2mm×0.1mm方格 • 苏教版推荐使用1mm×1mm×0.1mm方格
计数室
计数室两种规格
• 1.16×25型的计数板 将计数室放大,可见它含16中格, 一般取四角:1、4、13、16四个中方格(100个小方格) 计数 。 细胞个数/1mL=100个小方格细胞总数/ 100 ×400×10000×稀释倍数
• 2.25×16型的计数板 中央大方格以双线等分成25个中 方格,每个中方格又分成16个小方格,供细胞计数用(见 图三)。一般计数四个角和中央的五个中方格(80个小方 格)的细胞数。 细胞个数/1mL=80个小方格细胞总数/ 80 ×400×10000×稀释倍数
二、血球计数板的使用方法步骤
• 1.镜检计数室。在加样前,先对计数板的计数室进行镜 检。若有污物,则需清洗,吹干后才能进行计数;
• 2.加样品。将清洁干燥的血球计数板的计数室上加盖专 用的盖玻片,用吸管吸取稀释后的酵母菌悬液,滴于盖玻 片边缘,让培养液自行缓缓渗入,一次性充满计数室,防 止产生气泡,充入细胞悬液的量以不超过计数室台面与盖 玻片之间的矩形边缘为宜。多余培养液可用滤纸吸去;
• 3.计数。稍待片刻(约5min),待酵母菌细胞全部沉降 到计数室底部后,将计数板放在载物台的中央,先在低倍 镜下找到计数室所在位置后,再转换高倍镜观察、计数并 记录。

血球计数板

血球计数板

血球计数板法

一、基本原理

利用血球计数板在显微镜下直接计数,是一种常用的微生物计数方法。此法的优点是直观、快速。将经过适当稀释的菌悬液(或孢子悬液)放在血球计数板载玻片与盖玻片之间的计数室中,在显微镜下进行计数。由于计数室的容积是一定的( 0.1mm 2),所以可以根据在显微镜下观察到的微生物数目来换算成单位体积内的微生物总数目。由于此法计得的是活菌体和死菌体的总和,故又称为总菌计数法。

血球计数板,通常是一块特制的载玻片,其上由四条槽构成三个平台。中间的平台又被一短横槽隔成两半,每一边的平台上各刻有一个方格网,每个方格网共分九个大方格,中间的大方格即为计数室,微生物的计数就在计数室中进行。

每一个大方格边长为1mm ,则每一大方格的面积为1mm 2,盖上盖玻片后,载玻片与盖玻片之间的高度为0.1mm ,所以计数室的容积为0.1mm 3。

计数室的刻度一般有两种规格,一种是一个大方格分成16个中方格,而每个中方格又分成25个小方格;另一种是一个大方格分成25个中方格,而每个中方格又分成16个小方格。但无论是哪种规格的计数板,每一个大方格中的小方格数都是相同的,即16×25=400小方格。

计数室

计数时,如果使用16格×25格(希利格式)规格的计数室,要按对角线位,取左上、右上、左下、右下,4个中格(即100个小格)的酵母菌数。

如果规格为25格×16格(汤麦式)的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数。

二、血球计数板的使用(计数酵母菌为例)

(1)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片。

血球计数板及其使用方法

血球计数板及其使用方法

血球计数板及其使用方法

血球计数板是一种用于细胞计数和分类的实验工具,在医学、生物学等领域具有广泛的应用。它对于研究细胞生长、增殖和凋亡等生命活动具有重要意义,也是疾病诊断和治疗的重要依据。本文将详细介绍血球计数板的定义、原理和使用方法,并通过应用实例阐述其重要性和应用前景。

血球计数板的定义与原理

血球计数板是一种用于细胞计数的实验工具,通常由一块载玻片和一块盖玻片组成。载玻片上具有方格状沟槽,便于细胞分布和计数。盖玻片则具有与载玻片相匹配的沟槽,可防止细胞逸出。使用时,将样本溶液滴加在载玻片上,盖上盖玻片,然后在显微镜下观察和计数。血球计数板的工作原理基于以下步骤:

将样本溶液滴加在载玻片上;

盖上盖玻片,确保没有气泡;

将血球计数板置于显微镜下观察;

根据方格状沟槽对细胞进行计数和分类。

血球计数板的使用方法

使用血球计数板进行细胞计数和分类的步骤如下:

样本处理:将待测样本溶液进行适当稀释,以便在显微镜下观察到单个细胞。一般情况下,使用生理盐水或无血清培养液进行稀释。

仪器调试:将血球计数板放在显微镜下,调整显微镜焦距,使视野清晰。同时,确保盖玻片与载玻片之间的密封性,以避免细胞逸出。数据读取:在显微镜下逐个方格计数细胞。根据细胞大小、形状和染色等特点对其进行分类。通常情况下,血球计数板可分为白细胞计数板和红细胞计数板。

结果分析:根据计数结果,计算细胞浓度。细胞浓度(个/mL)=方格内细胞数 /方格个数 /稀释倍数。

应用实例

血球计数板在医学和生物学领域具有广泛的应用。例如,在医学领域中,血球计数板可用于血常规检查,以监测白细胞、红细胞和血小板等血液细胞的数量和变化。在生物学领域中,血球计数板可用于研究细胞生长、增殖和凋亡等生命活动。例如,通过对比不同药物对肿瘤

血球计数板使用方法

血球计数板使用方法

血球计数板介绍

用优质厚玻璃制成.每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数池.计数池两侧各有一支撑柱,将特制的专用盖玻片笼罩其上,形成高的计数池.计数池画有长.宽各的方格,分为9个大方格,每个大格面积为.容积为(ul),个中,中心大方格用双线分成25个中方格,位于正中及四角5个中方格是红细胞计数区域,用单线划分为16个小方格.四角的4个大方格是白细胞计数区域,用单线划分为16个中方格.根椐国际尺度局(NBS)划定,大方格每边长度许可误差为±1%.

应用办法

1.视待测菌悬液浓度,加无菌水恰当稀释(斜面一般稀释100倍),以每小格的菌数可数为度.

2.取干净的血球计数板一块,在计数区上盖上一块盖玻片.

3.将菌悬液摇匀,用滴管汲取少许,从计数板中心平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边沿摘入一小滴(不宜过多),让菌悬液应用液体的概况张力充满计数区,勿负气泡产生,并用吸水纸吸去沟槽中流出的过剩菌悬液.也可以将菌悬液直接滴加在计数区上(不要使计数区双方平台沾上菌悬液,以免加盖盖玻片后,造成计数区深度的升高),然后加盖盖玻片(勿使产朝气泡).

4.静置少焉,使细胞沉降到计数板上,不再随液体漂移.将血

球计数板放置于显微镜的载物台上夹稳,先在低倍镜下找到计数区后,再转换高倍镜不雅察并计数.因为生涯细胞的折光率和水的折

光率邻近,不雅察时应削弱光照的强度.

5.计数时若计数区是由16个大方格构成,按对角线方位,

数左上.左下.右上.右下的4个大方格(即100小格)的菌数.

假如是25个大方格构成的计数区,除数上述四个大方非分特别,还需数中心1个大方格的菌数(即80个小格).为了包管计数的精

血球计数板的结构与使用

血球计数板的结构与使用

血球计数板的结构与使用血细胞计数板又称血球计数器,是高中生物学实验中重要的细胞计数工具。

1血细胞计数板的结构

1.1 目视信息及分析

血细胞计数板是一块特制的厚型载玻片,有4 个凹槽,中间部分被一“H”型凹槽分成上、下两个相同的计数平台,每个平台中有长、宽各3 mm的计数区域,平均分为9 个大方格。计数室(指中央的一个大方格,下同)的长和宽各是1 mm,计数板上标识的“0.1 mm”是指计数室的高度(图1)。

所以,计数室体积为1 mm × 1 mm × 0.1 mm = 0.1 mm 3 = 10-4 mL。

血细胞计数板有两种规格,一种是25 × 16 型(汤麦式,标识为XB-K-25),另一种是16 × 25 (希利格式)。汤麦式血细胞计数板的每个计数室有25 个中方格,每个中方格又分为16 个小方格;而希利格式血细胞计数板每个计数室中有16 个中方格,每个中方格又分25 个小方格。

所以,上述两种规格的血细胞计数板的计数室都有400 个小方格,即体积为0. 1mm 3 的计数室被平分为400 个小格。

1.2 显微观察信息及分析

在显微镜下,可以观察到计数室及其周围被许多线条规则地分隔成许多小室(图2)。

计数板上的线条分为单线和双线两种,双线区分不同中方格,每一中方格四周的线都是双线,计数室与周围区域的区分线也是双线;单线用于区分小方格。计数室内的单线和双线向外延伸,因此计数

室外的线也可分为单线和双线两种。计数室周围的线并非只是起引导作用,与计数室四个顶点相邻的四个大方格,其内只有中方格而无小方格,这四个区域可用于体积较大的单细胞计数(如白细胞等)。

血球计数板使用方法

血球计数板使用方法

血球计数板介绍之蔡仲巾千创作

用优质厚玻璃制成。每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数池。计数池两侧各有一支持柱,将特制的专用盖玻片覆盖其上,形成高的计数池。计数池画有长、宽各的方格,分为9个大方格,每个大格面积为.容积为(ul),其中,中央大方格用双线分成25个中方格,位于正中及四角5个中方格是红细胞计数区域,用单线划分为16个小方格。四角的4个大方格是白细胞计数区域,用单线划分为16个中方格。根椐国际尺度局(NBS)规定,大方格每边长度允许误差为±1%。

使用方法

1.视待测菌悬液浓度,加无菌水适当稀释(斜面一般稀释100倍),以每小格的菌数可数为度。

2.取洁净的血球计数板一块,在计数区上盖上一块盖玻片。

3.将菌悬液摇匀,用滴管吸取少许,从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边沿摘入一小滴(不宜过多),让菌悬液利用液体的概况张力充满计数区,勿使气泡发生,并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。也可以将菌悬液直接滴加在计数区上(不要使计数区两边平台沾上菌悬液,以免加盖盖玻片后,造成计数区深度的升高),然后加盖盖玻片(勿使发生气泡)。

4.静置片刻,使细胞沉降到计数板上,不再随液体漂移。将血球计数板放置于显微镜的载物台上夹稳,先在低倍镜下找到计数区后,再转换高倍镜观察并计数。由于生活细胞的折光率和水的折光率相近,观察时应减弱光照的强度。

5.计数时若计数区是由16个大方格组成,按对角线方

位,数左上、左下、右上、右下的4个大方格(即100小格)

的菌数。如果是25个大方格组成的计数区,除数上述四个大方格外,还需数中央1个大方格的菌数(即80个小格)。为了包管计数的准确性,防止重复计数和漏记,在计数时,对沉降在格线上的细胞的统计应有统一的规定。如菌体位于大方格的双线上,计数时则数上线不数下线,数左线不数右线,以减少误差。即位于本格上线和左线上的细胞计入本格,本格的下线和右线上的细胞按规定计入相应的格中。见右图:即本格中计数细胞为3个。

血球计数板及其使用方法

血球计数板及其使用方法

血球计数板及其使用方法

1、血球计数板的构造

血球计数板是一种生物学或医学仪器,用以对人体血液中红细胞、白细胞进行显微计数,也常用于一些细菌、真菌、酵母菌等较大细胞或微生物的计数。

血球计数板的形状如图1所示,血球计

数板是一块特制的厚载玻片,载玻片上由4

个槽构成3个平台。中间的平台较宽,其中

间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面

各刻有一方格网,每个方格网共分9个大方

格(大方格用三线隔开),中央的一大方格

作为计数用,称为计数室,如图2所示。

计数室的规格常有两种:一种叫希利格

式(16×25型),是一个计数室分为16个中方格(中方格之间用双线分开),而每个中方格又分成25个小方格;另一种叫汤麦式(25×16型),是一个计数室分成25个中方格,而每个中方格又分成16个小方格。

但是不管计数室是哪一种构造,它

们都有一个共同特点,即计数室都由

400个小方格组成。计数室的边长常为

1mm,则计数室的面积为1mm2,盖上盖玻

片后,计数室的高度为0.1mm,所以每

个计数室的容积为0.1mm3,每个小方格

的边长为0.05mm,每个小方格的容积为

1/4000mm3、16×25型的每个中方格的

边长为0.25mm,每个中方格的容积为

1/160mm3,25×16型的每个中方格的边

长为0.2mm,每个中方格的容积为

1/250mm3,如图3所示。

另外,有血球计数板规格为计数室边长为2mm,则计数室的面积为4mm2,计数室的高度为0.1mm,所以每个计数室的容积为0.4mm3,每个小方格的边长为0.1mm,每个小方格的容积为1/1000mm3。16×25型的每个中方格的边长为0.5mm,每个中方格的容积为1/40mm3;25×16型的每个中方格的边长为0.4mm,每个中方格的容积为2/125mm3。

血小板计数法

血小板计数法

计数室刻度有2种: 16中格x25小格 25中格x16小格 它们都是由400各小格组成。 每个大方格边长为1mm,则每个大方格面积为 1mm2 。盖上盖玻片后,载玻片与盖玻片之间的 高度为0.1mm,所以每个计数室的体积为 0.1x1x1=0.1mm3 , 每个大格有400个小格,所以每个小格的体积为 0.1/400=1/4000mm3 =1/4000,000ml
4、位于格线上的酵母菌一般只计此格的上方线及 左方线的菌体。 5、计数方法: 样品中菌wenku.baidu.com/ml =每小格平均菌数x4000,000x稀释倍数
本实验采用25x16规格,要求数80个小格。 设:每个中格的菌数为A,则 每个小格平均菌(A1+A2+A3+A4+A5)/80
样品中菌数/ml = (A1+A2+A3+A4+A5)/80 x4000,000x稀释倍数
血球计数板的分区与分格
例一 1大格=16中格 =16X25小格 =400小格 数25x4=100小格
例二 1大格=25中格 =25X16小格 =400小格 数16x5=80小格
材料与仪器
1、待测样品:酵母菌悬液 2、仪器:显微镜,血球计数板,接种环, 盖玻片等
方法与步骤
1、取洁净的血球计数板,在计数室上面盖 上盖玻片。 2、取稀释到一定程度(5-10个酵母/小格) 酵母菌液,从盖玻片边缘滴一小滴,使菌 液自行渗入,计数室内不能有气泡。先在 低倍镜下找到小方格网后,再转换高倍镜 观察并计数。 3、每个样品重复计数2-3次,计数时应不 时调节焦距,才能观察到不同深度的菌体。
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血球计数板的构造和使用

血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台.中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网.方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用.这一大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm3.

计数室通常有两种规格.一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格.但是不管计数室是哪一种构造;它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成,见图.

血球计数板的使用

以计数酵母菌为例

(1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数.

(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可.

(3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片.

(4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内.

(5)计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数.

(6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞).

(7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数.

3.计算公式

(1)16格×25格的血球计数板计算公式:

酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数

(2)25格x16格的血球计数板计算公式:

酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80×400×104×稀释倍数

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