组织及血液碱性磷酸酶试剂盒说明书
碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒(磷酸苯二钠比色法)说明书
注意：由于检测仪器和操作手法等条件的不同，参考值范围会有波动，该值仅供参考，对于 要求精确计算 ALP 含量的，可以进行多点重复测定；根据测定经验显示，标准品浓度在 5U/L 以下，标准品浓度在 100U/L 以上，标准曲线会有偏差。
以系列 Phenol 标准(1～6 号)对应的金氏单位(10、20、30、40、50U/L)为横坐标，以相应的 A 标准(1～6 号)为纵坐标，绘制标准曲线。以 A 测定-A 对照的差值为实际的吸光度，用该差 值与标准曲线进行对比，求出酶活力单位。
参考区间(37℃)：
健康成年人 健康儿童
3～13 金氏单位 5～28 金氏单位
注意事项： 1、待测样品中不能含有磷酸酶抑制剂，同时需避免反复冻融。 2、如果没有分光光度计，也可以使用酶标仪测定，但应注意 96 孔板最大检测体积。 3、所测样品的值高于标准曲线的上限，应稀释样品后重新测定。 4、空白管如果显红色，说明 ALP 显色液不可用，应丢弃。 5、加入显色基液时应迅速，并且及时混匀，否则显色不充分。 6、如无法检测 510nm，亦可检测 500～530nm 范围内吸光度。 7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存条件 4℃ 避光 4℃ 避光 4℃ 避光 4℃ 避光 4℃ 避光
自备材料： 1、离心管或小试管、水浴锅或恒温箱 2、分光光度计、比色杯 3、ddH2O、PBS 或生理盐水
操作步骤(仅供参考)： 1、准备样品： ①细胞或组织样品：取恰当细胞或组织裂解液，如果有必要可用 PBS 或生理盐水进行适当匀 浆，一般细胞数量在 106 以上，组织应在 100mg 以上，3000~4000rpm 离心取上清，-20℃ 冻存，用于碱性磷酸酶的检测。 ②血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定， 尿液通常也可以直接用于测定，-20℃冻存，但为了消除样品本身颜色的干扰，需设置加了 血浆或血清但不加底物的对照。 ③高活性样品：如果样品中含有较高活性的碱性磷酸酶，可以使用原有的裂解液或 PBS 等进 行稀释，如鸡血清、血浆可稀释 5～10 倍后检测。
碱性磷酸酶测定试剂（ALPAKP）
北京华宇亿康生物工程技术有限公司Co-Health (Beijing )Laboratories Co., Ltd. 液体生化试剂使用说明书_碱性磷酸酶测定试剂（ALP/AKP ） （IFCC ，AMP 缓冲液）【注册产品标准】YZB/国 1959-2003 ◇ 【医疗器械注册证号】京药监械（准）字2005第2400405号本试剂适用于人血清或血浆中碱性磷酸酶活性的体外定量分析。
临床意义碱性磷酸酶存在于体内多种组织和器官，其病理性变化表现在：增加：（1） 肝脏疾病如胆汁淤积和肝硬化；（2） 骨骼疾病如软骨病、佝偻病、成骨肉瘤； （3） 恶性肿瘤。
减少：（1） 停止生长（克汀氏病、软骨发育不全）； （2） 先天性低磷酸酶血症。
方法学原理磷酸对硝基苯酚（4-NPP ）在碱性磷酸酶的作用下，将其磷酸基转移到2-氨基-2-甲基-1-丙醇（AMP ）受体分子上，释放出的对硝基苯酚（4-NP ）在碱性溶液中分子重排形成黄色醌，可在405nm 下检测。
黄色醌形成速率与ALP 活力成正比。
ALP 4 -NPP + H 2O → 4 -NP + 磷酸 Mg 2+, 碱性 试剂组成试剂1（R 1） 试剂2（R 2）AMP 0.35mol/L 4 -NPP 80mmol/L MgCl 2 10.5mmol/L 稳定剂 适量 适用仪器ZYA-1003：适用于日立7060/7150、岛津7200/ 7300/8000全自动生化分析仪；ZYB-1003：适用于日立7170 A /7170、奥林巴斯AU400 /600/1000全自动生化分析；ZYC-1003：适用于日立7020全自动生化分析仪； ZYD-1003：适用于贝克曼CX 系列全自动生化分析仪；ZYE-1003：适用于东芝全自动生化分析仪；TYA-1003、TYB-1003、TYC-1003：适用于其它全自动生化分析仪及各类半自动生化分析仪。
试剂贮存及稳定性试剂自生产日期起2—8℃避光存放可稳定12个月；R 1、R 2按4:1比例混为工作液2—8℃避光可稳定4周。
BCIP NBT碱性磷酸酶显色试剂盒
仅供科研使用版本号：180718BCIP/NBT碱性磷酸酶显色试剂盒【产品组成】【保存条件】4℃,避光,12个月。
【产品概述】BCIP/NBT碱性磷酸酯酶显色试剂盒(BCIP/NBT Alkaline Phosphatase Color Development Kit)是一种用于免疫组化显色、Western等膜显色和诱导多功能干细胞iPS鉴定等的试剂盒。
BCIP/NBT是碱性磷酸酯酶的常用底物，在碱性磷酸酯酶的催化下，BCIP会被水解产生强反应性的产物，该产物会和NBT发生反应，形成不溶性的深蓝色至蓝紫色的NBT-formazan。
BCIP/NBT Alkaline Phosphatase Color Development Kit可用于细胞或组织的碱性磷酸酯酶显色包括诱导多功能干细胞iPS的鉴定，也可用于Western等结合有碱性磷酸酯酶的膜的显色检测\细胞或组织内源性的碱性磷酸酯酶显色。
【使用方法】1、对于组织切片或细胞样品或膜，在与碱性磷酸酯酶标记的抗体或其它形式的探针孵育后，用适当洗涤液洗涤3～5次，每次3～5min。
2、对于检测内源性碱性磷酸酯酶的组织或细胞样品，在适当固定后，也用适当洗涤液洗涤3～5次，每次3～5min。
3、按照如下比例依次加入各溶液，混匀后即配制成BCIP/NBT染色工作液：4、洗涤完毕后，去除洗涤液。
5、加入适量BCIP/NBT染色工作液，确保能充分覆盖样品。
5、室温避光孵育5～30min或更长时间(可长达24小时)，直至显色至预期深浅。
6、去除BCIP/NBT染色工作液，用蒸馏水洗涤1～2次即可终止显色反应。
7、对于组织切片或细胞样品，显色反应终止后，如有必要可以用中性红染色液(neutral red stainingsolution)染色，以便于观察。
对于膜，显色反应终止后，可以室温晾干避光保存。
【注意事项】1、BCIP对人体有刺激性，NBT对人体有害，请注意适当防护。
骨源性碱性磷酸酶检测试剂盒(凝集素亲和法)产品技术要求北京中生金域诊断
骨源性碱性磷酸酶检测试剂盒（凝集素亲和法）适用范围：用于体外半定量检测人体全血或血清中骨源性碱性磷酸酶催化活性。
1.1 产品型号：JY–Color–BAP NB；JY–Color–BAP AB。
1.2 产品规格1.2.1 包装规格：20人份/盒、50人份/盒、100人份/盒。
1.2.2产品组成：产品主要组成成分见表1、表2。
表1 试剂盒配置表配 置 规 格 （装量）20人份/盒 50人份/盒 100人份/盒反应装置 1×20支 1×50支 5×20支显色液 JY–Color–BAP NB1ml ×1瓶3.5ml ×1瓶7ml ×1瓶 JY–Color–BAP AB洗涤液 JY–Color–BAP NB3ml ×1瓶 8ml ×1瓶 8ml ×2瓶 JY–Color–BAP AB终止液 JY–Color–BAP NB3ml ×1瓶4ml ×1瓶 8ml ×1瓶 JY–Color–BAP AB 7ml ×1瓶 7ml ×2瓶一次性定量取血管（含吸头）21支（含吸头1个）52支（含吸头1个）104支（含吸头1个）注：试剂盒中一次性定量取血管为外购有医疗器械证书的产品。
表2试剂配方和浓度配 置 组成 浓度显色液 氯化钠（NaCl） 700mmol/L氯化镁（MgCl2） 25mmol/L二甲基亚砜（DMSO）0.9%（体积比）洗涤液 氯化钠（NaCl） 13%氯化镁（MgCl2） 2.9% 聚乙二醇（PEG）13%氯化锌（ZnCl2） 7%氯化钙（CaCl2） 18%氯化锰（MnCl2） 32%迭氮钠（NaN3） 5%JY–Color–BAP NB终止液氯化钠（NaCl） 18%迭氮钠（NaN3） 25% JY–Color–BAP AB终止液 乙磺酸（MES） 9%氯化钠（NaCl） 13%迭氮钠（NaN3） 7%2.1 外观2.2.1 反应装置为白色塑料制品，结构应完整、表面光洁、无缺失、无折损、无脱落；2.2.2 测定用液体外观要求：a) 显色液为浅黄色液体，不得有任何沉淀及絮状悬浮物；b) 洗涤液为无色透明液体，不得有任何沉淀及絮状悬浮物；c) 终止液为无色透明液体，不得有任何沉淀及絮状悬浮物。
碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒标准操作程序
碱性磷酸酶(ALP)测定标准操作程序1.摘要碱性磷酸酶（ALP）存在于成骨细胞、干细胞、白细胞、肾、脾、胎盘、前列腺和小肠内。
测定血清或肝素化血浆中的碱性磷酸酶活力，做临床辅助诊断用。
2.适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测血清、血浆中碱性磷酸酶（ALP）的活力。
3.职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定碱性磷酸酶（ALP）活力的工作人员要严格按照本SOP程序进行,室负责人监督管理；本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。
4.检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的碱性磷酸酶（ALP）试剂盒采用的是AMP缓冲液法。
5.原理在AMP的缓冲环境下，磷酸对硝基苯在碱性磷酸酶的作用下，可以水解成磷酸盐和对硝基苯酚。
在一定底物浓度范围内,磷酸对硝基苯的水解产物对硝基苯酚会引起405nm处吸光度的上升，其上升速率与血清中碱性磷酸酶的活力成正比。
−→−+OH−−磷酸盐对硝基苯酚磷酸对硝基苯碱性磷酸酶+26.仪器日立7600自动生化分析仪7.试剂7.1试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供7.2试剂瓶内主要成分：R1：AMP缓冲液（PH10.50）、乙酸镁；R2：AMP缓冲液（PH8.85）、磷酸对硝基苯、乙酸镁。
AMP：2-氨基-2-甲基-1-丙醇7.3试剂稳定性：试剂在2-8℃避光保存，有效期1年。
试剂工作液在2-8℃避光保存，可稳定4周，15-25℃可保存稳定4天。
7.4试剂准备：试剂为即用式。
8.标准品和质量控制8.1校准程序：使用某某公司提供的标准品对自动分析仪进行校准。
按照公司标准品使用要求，并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白，经校准测定，仪器自动对标准品响应量通过合适的数学模型绘制校准曲线。
8.2质控品某某公司提供的生化复合定值质控血清做为室内质控品。
每日在测定前做一次质控。
该质控品为干粉包装，在2-8℃冰箱可稳定到失效期，使用前用5ml去离子水复溶，待质控物充分溶解（大约30分钟）后使用。
Elabscience碱性磷酸酶(ALP)比色法测试盒使用说明书
（本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断！）Elabscience®碱性磷酸酶(ALP)比色法测试盒Alkaline Phosphatase (ALP) Activity Assay Kit产品货号：E-BC-K091-M产品规格：48T(32 samples)/96T(80 samples)检测仪器：酶标仪（500-530 nm）使用前请仔细阅读说明书。
如果有任何问题，请通过以下方式联系我们：销售部电话************，************技术部电话131****6790具体保质期请见试剂盒外包装标签。
请在保质期内使用试剂盒。
联系时请提供产品批号(见试剂盒标签)，以便我们更高效地为您服务。
用途本试剂盒适用于检测动物血清(浆)、体液、组织及细胞中碱性磷酸酶的活力。
检测原理在pH=10的反应液中，碱性磷酸酶催化磷酸苯二钠水解，生成游离酚和磷酸。
酚在碱性溶液中与4-氨基安替吡啉结合，并经铁氰化钾氧化生成红色的醌的衍生物，根据红色的深浅计算酶活的高低。
本试剂盒检测组织和细胞样本时，需测定总蛋白浓度，推荐使用BCA法（货号：E-BC-K318-M）。
提供试剂和物品说明：试剂严格按上表中的保存条件保存，不同测试盒中的试剂不能混用。
对于体积较少的试剂，使用前请先离心，以免量取不到足够量的试剂。
所需自备物品仪器：酶标仪（500-530 nm，最佳检测波长520 nm）、涡旋混匀仪、37℃恒温箱。
耗材：枪头（1000 µL，200 µL，10 μL）、EP管（10 mL，2 mL）。
试剂：双蒸水、PBS（0.01 M，pH 7.4）或生理盐水（0.9% NaCl）试剂准备①试剂盒中的试剂平衡至室温。
②工作液的配制：按试剂一：试剂二为1:1的体积比混匀，现用现配，未用完的试剂2-8℃避光可保存1天。
③不同浓度标准品的稀释：样本准备①样本处理血清血浆等液体样本：直接测定。
碱性磷酸酶显色剂使用方法
5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl Phosphate (5-溴-4-氯-3-吲哚基-磷酸盐), BCIP/NBT (四唑硝基蓝)是碱性磷酸酶底物, 产物为深蓝色, 在碱性磷酸酯酶的催化下,BCIP被水解, 水解产物与NBT发生反应,形成不溶性的深蓝色至蓝紫色的NBT-formazan。
使用方法1. 在膜或组织切片,最后一次洗涤完毕后,加入适量BCIP/NBT染色工作液2. 室温避光孵育5-30分钟或更长时间(可长达24小时),直至显色至预期深度.3. 用蒸馏水洗涤1-2次即可终止显色反应4. 膜标本可干燥后避光保存;组织切片或细胞样品,显色反应终止后,可以用中性红复染染色干细胞成骨诱导的常用染色方法有几种碱性磷酸酶(ALP)是成熟成骨细胞的标志性酶,同时成骨细胞形成的钙结节也是成骨细胞的标记物。
成骨细胞染色方法以ALP为目标物的检测方法:1 Gomori钙钴法【染色原理】ALP在pH值9.4的环境下,以镁离子作为激活剂,能够把β-甘油磷酸钠水解出磷酸,磷酸与高浓度的钙盐结合形成无色的磷酸钙,再与硝酸钴作用形成磷酸钴,经硫化胺处理形成黑色的硫化钴沉淀在酶活性处。
【孵育液配制】3%β-甘油磷酸钠5ml2%巴比妥钠5ml蒸馏水10ml2% CaCl2 10ml2% MgSO4 1ml【步骤】(1)将无菌的玻片放入培养皿中,传代时加入适量的细胞悬液,作细胞爬片,呆细胞长满玻片后取出。
(2)PBS冲洗后用冷丙醇固定10min,蒸馏水冲洗数次。
(3)入孵育液中,37℃孵育4-6h。
自来水冲洗数次。
(4)2%硝酸钴中浸3-5min,蒸馏水洗数次。
(5)1%的硫化铵中2min,自来水冲洗,自然干燥,封固。
【结果】胞质中阳性反应呈现灰黑色颗粒或块状沉淀。
2偶氮偶联法:【孵育液配制】萘酚AS-BI磷酸盐20mgDMSO 0.5ml0.2mol/L巴比妥醋酸缓冲液(PH 9.2)50ml六偶氮副品红0.5ml1mol/L NaOH调PH 9-10,混合后过滤使用。
碱性磷酸酶测定试剂盒性能验证方案
碱性磷酸酶测定试剂盒性能验证评价方案某三甲医院一、评价目的和内容1.目的评价某公司的碱性磷酸酶测定试剂盒（以下简称ALP）的部分性能特点的验证。
2.评价内容★准确度★批内精密度★日间精密度★功能灵敏度★线性评价★参考范围验证★比对实验3.评价实验具体方法3.1 准确度根据试剂盒说明书，在仪器上编制参数。
测定科室内使用的质控高、低值，质控相对偏差应在10%内。
3.2 批内精密度选取1个样品，重复测定20次，计算20次的批内变异系数应在4.5%内。
3.3 日间精密度取科室内使用质控高、低两个浓度的质控品每天各测5次连续测4天记录数据，计算20次测定结果的CV应在6%内。
3.4 功能灵敏度3.4.1选取低浓度的样品，用生理盐水对样品分别进行不同倍数的稀释，使其最低浓度接近0浓度。
3.4.2 在仪器上分别对不同浓度的样品连续测定20次，计算其均数、标准差和变异系数，查看各样品的变异系数(CV%)，样品的变异系数≤10%时，最大稀释管平均浓度所对应的浓度及为功能灵敏度(检测低限)。
3.5线性评价3.5.1 用接近线性范围上限的高浓度样品和纯化水，按表示例混合成至少5个稀释梯度。
以此为样品，分别用对应试剂盒测定每个浓度样品，重复测定3次。
稀释比例1/16 1/8 1/4 1/2 1高浓度血清（μl）500(1/8) 500(1/4) 500(1/2) 500 1000纯化水（μl）500 500 500 500 03.5.2在说明书给定的范围内，对线性测定结果进行回归：线性相关系数（r）应≥0.990。
3.6 参考范围验证3.6.1 随机选取正常体检样品20例，分别测定ALP浓度。
3.6.2 分析20例测定结果是否在实验室采纳的正常参考范围区间内。
如果有不超过2个数据（测定结果的10%）落在采纳的参考范围界限以外，那么接受实验室采纳的参考范围。
3.7 比对实验3.7.1 本实验室做为参比实验室，三甲级医院做为对照实验室，两实验室同时测定20例在线性范围内的新鲜人血清样品中ALP的浓度。
骨碱性磷酸酶检测试剂盒(酶联免疫法)说明书
生物素、叠氮化钠（0.09%）的牛/马蛋白基质。每瓶 14mL。 2. 微孔板：板孔内包被链霉亲和素，包装于带干
燥剂的铝箔袋中。12×8 孔 3. 标准品 0/稀释液（0）：不含 BAP 的牛蛋白基质，
含叠氮化钠（0.09%）。每瓶 14mL。 4. 标准品（1-5）：含 BAP、叠氮化钠（0.09%）的
变形性骨炎是一种常见的骨骼紊乱，表现为正常骨 细胞的局灶性增生。变形性骨炎的发病率比曾一度认为 发病人群在3%-4%的中年患者和10%-15%的老年人要 高出许多。这种疾病不影响年轻人。绝大部分变形性骨 炎患者无临床症状，容易漏诊，除非在一些不相关原因 的医疗检查时出现X摄片或血清碱性磷酸酶水平异常时 才发现的。这种症状的患者最常见的症状是疼痛和畸形。
骨碱性磷酸酶检测试剂盒（酶联免疫法）说明书
【产品名称】 通用名称：骨碱性磷酸酶检测试剂盒 （酶联免疫法） 英文名称： OSTASE® BAP EIA
【包装规格】96 人份/ 盒 【预期用途】
骨碱性磷酸酶检测试剂盒（酶联免疫法）仅用于体 外诊断使用，用于定量检测人血清中骨特异性碱性磷酸 酶（BAP）。作为成骨细胞活性的指示剂，本试剂盒可作 为管理绝经后骨质疏松和变形性骨炎的辅助工具。
【检验原理】
本试剂盒是一种固相单克隆抗体酶联免疫测定。样
本中的 BAP 与含有生物素标记的 BAP 特异性单克隆抗 体的溶液进行反应。反应发生在包被了链霉亲和素的微
孔中（微孔固定于塑料板框中），形成固相/捕获抗体/BAP
复合物。微孔洗涤除去未结合的 BAP，再加入酶底物进行
孵育。终止反应后，在酶标仪 405nm 下读取吸光度。吸 光度值与待测样本中 BAP 浓度成正比。样本中 BAP 浓度 的计算基于 BAP 标准品及标准品 0/稀释液的同步检测。
AKP说明书
碱性磷酸酶 (U / gprot)
=
测定管吸光度 标准管吸光度
×
标准管含酚的量 (0.003mg)
÷
取样量中的蛋白克数
= 0.081 × 0.003 ÷ (1.29 ×10−3 × 0.03) = 32.37U / gprot 0.194
南京建成生物工程研究所 南京建成科技有限公司
地 址： 南京市中央路 258－27 号 电 话：（025）83360321
基质液(ml)
0. 5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
充分混匀,37℃水浴 15 分钟
显色剂(ml)
1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5
立即混匀,在 520nm 处,1cm 光径,0 管调零,测各管 OD 值
以所测得的吸光度为纵坐标，以相应的标准浓度单位为横坐标，绘制标准曲线。
×
100ml 0.05ml
= 0.404 × 0.005 × 100 = 16.16金氏单位 /100ml
0.250
0.05
1
本试剂盒仅用于科研、实验室
南京建成
（二）、组织匀浆中 AKP 的测定：
1、 操作表：
测定管
标准管
空白管
1%组织匀浆(ml)
0.03
0.1mg/ml 酚标准液(ml)
三、操作：
Байду номын сангаас
(一)、血清（浆）中 AKP 的测定： 1、操作表：
测定管
标准管
空白管
血
清（ml）
0.05
0.1mg/ml 酚标准应用液（ml）
0.05
双 蒸 水（ml）
0.05
碱性磷酸酶测定试剂盒(NPP底物-AMP缓冲液法)产品技术要求haomai
碱性磷酸酶测定试剂盒（NPP底物－AMP缓冲液法）适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清中碱性磷酸酶(ALP)的活性。
1.产品型号/规格及其划分说明1.1包装规格1.2主要组成成分本试剂由试剂1（R1）和试剂2（R2）组成试剂1(R1)：2-氨基-2-甲基-1-丙醇缓冲液0.35mmol/L 硫酸镁 2.0 mmol/L硫酸锌 1.0 mmol/LEDTA 1.5 mmol/L试剂2(R2)：磷酸对硝基苯酚76mmol/L试剂盒外观应整洁，文字符号标识清晰；R1为无色液体，R2为淡黄色至黄色液体。
液体试剂不得有沉淀和絮状物。
2.2 装量试剂瓶内液体装量应不少于标示值。
2.3 试剂空白2.3.1 空白吸光度以生理盐水为样品，在37℃、405nm波长、1cm光径条件下，吸光度≤1.0。
2.3.2 空白吸光度变化率以生理盐水为样品，在37℃、405nm波长、1cm光径条件下，吸光度变化率（△A/min）≤0.005。
2.4 分析灵敏度浓度为120U/L的样本，吸光度变化△A/min＞0.01。
2.5 准确性相对偏差应不大于10%。
2.6 重复性用(120±12)U/L浓度的样本进行检测，重复测试至少10次（n≥10），其批内变异系数（CV）应不超过5％。
2.7 线性2.7.1在[25，750]U/L范围内，线性相关系数r应不低于0.990；2.7.2在[25，100]U/L范围内绝对偏差不超过±10U/L；(100，750]U/L范围内相对偏差不超过±10%。
用三个批号的试剂盒测定同一份样本，试剂盒批间相对极差应≤10％。
2.9 稳定性试剂盒在2～8℃避光保存，可稳定15个月。
取到效期后的样品检测试剂空白吸光度、空白吸光度变化率、准确度、线性范围应分别符合2.3.1、2.3.2、2.5、2.7的要求。
碱性磷酸酶染色试剂盒(偶氮偶联法)
产品组成：
规格
名称
3×10ml 3×20ml
Storage
S0100 (A): ALP 固定液
10ml
20ml
RT 避光
S0100 (B): ALP 孵育液 B1: AS-BI 染色液
5ml
10ml
-20℃ 避光
B2: FBB 染色液
5ml
10ml
4℃ 避光
临用前，按 B1:B2=1:1 比例混合，即为 ALP 孵育液，即配即用。
染色结果：
ALP 活性部位 细胞核
蓝色 红色(核固红)或绿色(甲基绿)
血液、骨髓涂片结果判断：
一般以积分报告结果，根据 100 个中性粒细胞阳性颗粒进行 0～4+计分。
细胞分值
染色特点
0
无颗粒
1
稍有颗粒
2
中等程度颗粒
3
多数颗粒
4
充满颗粒
临床意义： 1. 类白血病反应积分明显增高，未经治疗的慢性粒细胞白血病积分明显减低。 2. 急性细菌性感染积分明显增高，病毒性感染积分多正常或减低。 3. 再生障碍性贫血积分常增高，PNH、MDS 积分常减低。
碱性磷酸酶染色试剂盒(偶氮偶联法) 也称中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)染色液，不是采 用金属沉淀法来显示碱性磷酸酶活性，而是采用偶氮偶联法(又称同时偶联法)，其原理是在 pH9.2～9.8 的碱性条件下，细胞内碱性磷酸酶可使 AB-BI 磷酸盐水解，释放出磷酸与萘酚， 后者与偶联重氮盐生成有色产物，定位于细胞质中。该染液可用于血液、骨髓或细胞涂片、 冰冻切片、梯度入水后的石蜡切片等的碱性磷酸酶染色,碱性磷酸酶活性部位呈蓝色，位于 胞桨，结果较金属盐沉淀法可靠。
碱性磷酸酶染色试剂盒(改良Gomori钙钴法)
碱性磷酸酶染色试剂盒(ALP/AKP,改良Gomori钙钴法) 产品简介：碱性磷酸酶(alkaline phosphatase，简称ALP或AKP)为一类磷酸酯酶，广泛分布于哺乳动物组织内，其活性所需最适pH 9.2~9.8。
此酶主要存在于物质交换活跃之处（细胞膜），如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮。
此酶还见于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌之细胞膜及吞饮小泡。
现用金属沉淀法来显示碱性磷酸酶活性。
此法以天然存在的β-甘油磷酸钠为底物，经酶水解释放出磷酸，立即被钙离子沉淀为磷酸钙，再依次被置换为磷酸钴和硫化钴,最终产物为黑色硫化钴沉淀。
产品组成：自备材料：1、蒸馏水2、温箱或水浴锅操作步骤（仅供参考）：(一)石蜡切片染色1、石蜡切片脱蜡至蒸馏水。
2、切片入ALP孵育液中，37℃孵育2~12h。
3、流水洗2min，入蒸馏水。
4、入硝酸钴溶液中，37℃孵育5min。
5、流水洗5min后，入蒸馏水。
6、在上述过程中，配制硫化工作液，即取试剂(C)用蒸馏水或者去离子水稀释50倍, 即为硫化工作液，即配即用。
切片入硫化工作液，孵育2min。
7、流水洗10min，入蒸馏水。
8、石蜡切片常规脱水、透明，树胶封片。
(二)冰冻切片染色1、冰冻切片在丙酮-氯仿等量混合液内，4℃固定2~5min。
2、切片入ALP孵育液，37℃孵育5~15min。
3、流水洗2min，入蒸馏水。
4、入硝酸钴溶液中，37℃孵育5min。
5、流水洗5min后，入蒸馏水。
6、在上述过程中，配制硫化工作液，即取试剂(C)用蒸馏水或者去离子水稀释50倍, 即为硫化工作液，即配即用。
切片入硫化工作液，孵育2min。
8、流水洗10min，入蒸馏水。
9、冰冻切片用甘油明胶封片。
染色结果：酶所在阳性部位黑色硫化钴沉淀阴性对照(可选)：1、试剂(D)为不含底物的孵育液。
alp试剂盒 说明书
碧云天生产的碱性磷酸酶检测试剂盒(Alkaline Phosphatase Assay Kit)是一种用于快速、便捷地检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血清、血浆、尿液等样品中内源性的碱性磷酸酶活性的试剂盒。
碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase)，也称碱性磷酸酯酶，可以在碱性条件下催化磷酸酯键的水解。
哺乳动物中，肝脏、胆管、肾脏、骨头和胎盘中的碱性磷酸酶活性比较高。
常见的碱性磷酸酶包括肠道碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, intestinal, ALPI)、非组织特异性碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, tissue-nonspecific isozyme, ALPL)和胎盘碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, placental type, 也称placental alkaline phosphatase, PLAP)。
干细胞，如iPS中，碱性磷酸酶的活性很高，常被用作iPS成功诱导的标志。
另外，分化的结肠癌细胞中碱性磷酸酶的活性也会显著升高，被当作结肠癌细胞分化程度定性和定量的指标。
此外，血清中碱性磷酸酯酶的升高，被称作高碱性磷酸酶血症(hyperalkalinephosphatasemia)，被认为和恶性胆管阻塞(malignant biliary obstruction)、原发性胆管硬化(primary biliary cirrhosis)、原发性硬化胆管炎(primary sclerosing cholangitis)、肝淋巴瘤(hepatic lymphoma)和肝肉瘤(hepatic sarcoidosis)等肝胆疾病密切相关。
血清中碱性磷酸酶活性升高还和骨头生成密切相关，因为碱性磷酸酶是成骨细胞的副产物。
血清中碱性磷酸酶活性过低也和一些疾病相关。
儿童和孕妇血清中的碱性磷酸酶活性较普通人高一些。
血清中碱性磷酸酶活性范围在20-140U/L。
碱性磷酸酶检测试剂盒
碱性磷酸酶检测试剂盒产品简介：碧云天生产的碱性磷酸酶检测试剂盒(Alkaline Phosphatase Assay Kit)是一种用于快速、便捷地检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血清、血浆、尿液等样品中内源性的碱性磷酸酶活性的试剂盒。
碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase)，也称碱性磷酸酯酶，可以在碱性条件下催化磷酸酯键的水解。
哺乳动物中，肝脏、胆管、肾脏、骨头和胎盘中的碱性磷酸酶活性比较高。
常见的碱性磷酸酶包括肠道碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, intestinal, ALPI)、非组织特异性碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, tissue-nonspecific isozyme, ALPL)和胎盘碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, placental type, 也称placental alkaline phosphatase, PLAP)。
干细胞，如iPS中，碱性磷酸酶的活性很高，常被用作iPS成功诱导的标志。
另外，分化的结肠癌细胞中碱性磷酸酶的活性也会显著升高，被当作结肠癌细胞分化程度定性和定量的指标。
此外，血清中碱性磷酸酯酶的升高，被称作高碱性磷酸酶血症(hyperalkalinephosphatasemia)，被认为和恶性胆管阻塞(malignant biliary obstruction)、原发性胆管硬化(primary biliary cirrhosis)、原发性硬化胆管炎(primary sclerosing cholangitis)、肝淋巴瘤(hepatic lymphoma)和肝肉瘤(hepatic sarcoidosis)等肝胆疾病密切相关。
血清中碱性磷酸酶活性升高还和骨头生成密切相关，因为碱性磷酸酶是成骨细胞的副产物。
血清中碱性磷酸酶活性过低也和一些疾病相关。
儿童和孕妇血清中的碱性磷酸酶活性较普通人高一些。
组织及血液碱性磷酸酶(AKP ALP)活性测定试剂盒说明书
货号：MS2002 规格：100管/48样组织及血液碱性磷酸酶（AKP/ALP）活性测定试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：AKP/ALP是一种含锌的糖蛋白酶，在碱性环境中可水解各种天然及人工合成的磷脂单酯化合物。
AKP/ALP广泛分布于人体各脏器中，以肝脏为主。
测定原理：在碱性环境中，AKP/ALP催化磷酸苯二钠生成游离酚；酚与4-氨基安替比林和铁氰化钾反应红色亚醌衍生物，在510nm有特征光吸收；通过测定510 nm吸光度增加速率，来计算AKP 活性。
自备实验用品及仪器：可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、台式离心机、水浴锅、可调式移液器和蒸馏水。
试剂组成和配制：试剂一：液体×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体×1瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体×1瓶，4℃避光保存。
试剂四：液体×1瓶，4℃避光保存，未变成蓝绿色之前均可使用。
标准品：液体×1支（EP管中），2 μmol/mL酚标准液，4℃保存。
粗酶液提取：1.组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆，4℃、8000g离心10min，取上清液待测。
2.细菌或细胞：按照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后8000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
3.血液可直接测定，或者适当稀释后测定。
测定步骤：1. 分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长到510 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂三置于37℃水浴中预热30 min。
3. 空白管：取EP管，加入4μL蒸馏水，40μL试剂二，40μL试剂三，混匀后置于37℃水浴中保温15min；加入试剂四120μL，混匀后于510nm测定吸光度，记为A空白管。
碱性磷酸酶染色
产品简介： 碱性磷酸酶（简称 ALP 或 AKP）为一类磷酸酯酶，广泛分布于哺乳动物组织内。细胞
中的碱性磷酸酶，在碱性的缓冲液中，催化底物水解，生成物进而与一种稳定的黑色沉淀。 经本试剂盒染色后，阳性者胞浆中出现棕褐色或咖啡色颗粒。
本试剂盒采用金属沉淀法来显示碱性磷酸酶活性。此法以天然存在的 beta-甘油磷酸钠 为底物，经酶水解释放出磷酸，磷酸根与钙离子结合为磷酸钙沉淀，再依次被置换为磷酸钴 和硫化钴，最终产物为黑色硫化钴沉淀。
结果分析： 酶活性部位：
黑色沉淀
对照片处理方法： 切片入孵育液前，先经碘、5%硫代硫酸钠溶液各 3 分钟，充分水洗后，用试剂 D 取代
试剂 A，按上述步骤处理即可。
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试剂盒以外自备试剂和仪器
● 蒸馏水
● 温箱或水浴锅
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咨询邮箱：bestbio@
电话：021-33921235
本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！
产品说明书
使用方法： 1、 石蜡切片脱蜡至蒸馏水。 2、 冰冻切片在丙酮-氯仿等量混合液中 4℃固定 2-5 分钟。 3、 切片入试剂 A，37℃孵育。冰冻切片 5-15 分钟，石蜡切片 2-12 小时。 4、 流水冲洗 2 分钟后入蒸馏水。 5、 入试剂 B，37℃，5 分钟。 6、 流水冲洗 5 分钟后入蒸馏水。 7、 试剂 C 用蒸馏水 50 倍稀释，即配即用。 8、 切片入试剂 C 稀释液 2 分钟。 9、 流水冲洗 10 分钟后入蒸馏水。 10. 冰冻切片用甘油明胶封片；石蜡切片常规脱水，透明，树胶封片。
大鼠骨特异性碱性磷酸酶BALP
大鼠骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：96T0.6μg/L -16μg/L使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)水平。
用纯化的大鼠骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)，再与HRP标记的骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中大鼠骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)浓度。
试剂盒组成1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
检验科生化碱性磷酸酶测定的标准规程
碱性磷酸酶测定的标准规程【目的】体外检测血清中碱性磷酸酶（ALP ）的含量。
【职责】1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP ，室负责人监督落实。
2.本SOP 的改动，可由任一使用本SOP 的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
【标本类型及实验前准备】1.受检者的准备病人空腹12h ，不饮酒24h 后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。
注意有无应用影响测试项目的药物。
此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。
对于体检对象抽血前应有2周时间保持平时的饮食习惯，应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.静脉采血除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。
【仪器设备】东芝TBA-FX8全自动生化分析仪，低速离心机一、检测原理本试剂方法学原理以IFCC 推荐的方法为基础。
该方法采用对-硝基苯磷酸盐为底物，在最适反应条件下，样本中的碱性磷酸酶（ALP ）催化下述转磷酸反应：磷酸硝基酚-对O H 硝基苯磷酸盐-对2++−−→−ALP在上述反应中，对-硝基酚的生成速率与样本中碱性磷酸酶的活力成正比，通过在405nm 波长处测定吸光度的上升速率，即可测得样本中碱性磷酸酶的活力1.试剂本科使用上海复星长征医学科学有限公司ALP试剂盒，为液体双试剂，其各组分如下：试剂1（R1）乙酸镁 3.0 mmol/L硫酸锌 1.5 mmol/LHEDTA 3.0 mmol/LAMP缓冲液420 mmol/L试剂2（R2）对 - 硝基苯磷酸盐 81.5 mmol/LAMP缓冲液420 mmol/LEDTA 5.0 mmol/L2.校准要求2.1校准品：使用与试剂配套使用的复星长征临床化学校准血清（货号：4490050/4590050）对测定进行校准。
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货号: QS2002 规格：50管/24样碱性磷酸酶（alkaline phosphatase ，AKP/ALP）
活性测定试剂盒说明书
可见分光光度法
注意：正式测定之前选择 2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
AKP/ALP是一种含锌的糖蛋白酶，在碱性环境中可水解各种天然及人工合成的磷脂单酯化合物。
AKP/ALP广泛分布于人体各脏器中，以肝脏为主。
测定原理：
在碱性环境中，AKP/ALP催化磷酸苯二钠生成游离酚；酚与4-氨基安替比林和铁氰化钾反应红色亚醌衍生物，在510nm有特征光吸收；通过测定510 nm吸光度增加速率，来计算AKP 活性。
自备仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：液体×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体×1瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体×1瓶，4℃避光保存。
试剂四：液体×1瓶，4℃避光保存，未变成蓝绿色之前均可使用。
标准品：液体×1支（EP管中），2 μ mol/mL酚标准液，4℃保存。
粗酶液提取：
1.组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加
入1mL试剂一）进行冰浴匀浆，4℃、8000g离心10min，取上清液待测。
2.细菌或细胞：按照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建
议500万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后8000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
3.血液可直接测定，或者适当稀释后测定。
测定步骤：
1. 分光光度计预热30min，调节波长到510 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂三置于37℃水浴中预热30 min。
3. 空白管：取EP管，加入20μL蒸馏水，200μL试剂二，200μL试剂三，混匀后置于37℃水浴中保温15min；加入试剂四600μL，混匀后于510 nm测定吸光度，记为A空白管。
4. 标准管：取EP管，加入20μL标准品，200μL试剂二，200μL试剂三，混匀后置于37℃水浴中保温15min；加入试剂四600μL，混匀后于510 nm测定吸光度，记为A标准管。
5.对照管：取EP管，加入20μL上清液，200μL蒸馏水，200μL试剂三，混匀后置于37℃水浴中保温15min；加入试剂四600μL，混匀后于510 nm测定吸光度，记为A测定管。
6. 测定管：取EP管，加入20μL上清液，200μL试剂二，200μL试剂三，混匀后置于37℃水浴中保温15min；加入试剂四600μL，混匀后于510 nm测定吸光度，记为A测定管。
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注意：空白管和标准管只需测定一次。
每个测定管设一个对照管。
AKP/ALP活性计算：
1.血液中AKP/ALP活力计算
活性单位定义：37℃中每毫升血液每分钟催化产生1μmol酚定义为1个酶活单位。
AKP/ALP活力(μmol/min /mL)= [C标准品×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)×V 反总] ÷V样÷T=6.8×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)
2.组织、细菌或细胞中AKP/ALP活性计算
（1）按照蛋白浓度计算
活性单位定义：37℃中每毫克蛋白每分钟催化产生1 μ mol酚定义为1个酶活单位。
AKP/ALP(μmol/min/mg prot)=[C标准品×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)×V反总]÷(Cpr×V样)÷T=6.8×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管) ÷Cpr
（2）按照样本质量计算
活性单位定义：37℃中每克组织每分钟催化产生1 μ mol酚定义为1个酶活单位。
AKP/ALP(μmol/min/g 鲜重)=[C标准品×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)×V反总]÷(W×V样÷V样总)÷T=6.8×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管) ÷W
（3）按照细菌或细胞数量计算
活性单位定义：37℃中每104个细菌或细胞每分钟催化产生1 μ mol酚定义为1个酶活单位。
AKP/ALP (μmol/min/104 cell)= [C标准品×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)×V 反总]÷(细胞数量×V样÷V样总)÷T= 6.8×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管) ÷细胞数量
C标准品：2μmol/mL；V反总：反应体系总体积（mL），1020μL=1.02 mL； V样：加入反应体系中上清液体积（mL），0.020mL；V样总：加入提取液体积，1mL；T：反应时间（min），15 min。
注意事项：
1.试剂二、试剂三和试剂四均需避光保存。
2.试剂四变蓝绿色后不能再使用。
3.加入试剂四后必须立即混匀，否则显色不完全。
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