还原糖和总糖的测定

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总糖还原糖方法

3，5—二硝基水杨酸（DNS）比色法测还原糖

仪器与用具：

25ml刻度试管；离心管；100ml玻璃烧杯；100ml三角瓶；刻度吸管1ml、2ml、10ml；沸水浴；离心机；电子天平；分光光度计。

试剂：

1.1mg/ml葡萄糖标准液：准确称取100mg分析纯葡萄糖（预先在80℃烘至恒重），在小

烧杯中用蒸馏水溶解后定容至100ml，摇匀，冰箱中保存备用。

2.3,5－二硝基水杨酸(DNS)： 6.3g 3,5－二硝基水杨酸和262ml 2mol/lNaOH，加到

500ml含有185g酒石酸钾钠的热水溶液中，再加5g结晶酚和5g亚硫酸钠，搅拌溶解。

冷却后加蒸馏水定容至1000ml，贮于棕色瓶备用。

实验步骤：

1．可溶性糖的提取：准确称取烟叶样品0.100g，置于离心管中，加入8ml80%乙醇，于80℃水浴浸提30min，冷却后于4000转离心5min收集上清液，残渣再加入8ml80%乙醇，再次浸提，重复两次，将三次提取的上清液合并于100ml容量瓶中并定容至100ml。

2．还原糖的测定：取提取液1ml于试管中（空白中用1ml蒸馏水代替），加入DNS试剂1.5ml，摇匀，于沸水浴中加热5min，取出后立即浸入冷水冷却至室温定容至25ml，摇匀，然后在540nm波长处比色。

3．标准曲线的绘制：取干洁25ml试管6支，依次加入葡萄糖标准液（1mg/ml）0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml和蒸馏水1.0、0.8、0.6、0.4、0.2、0ml，再分别加入DNS试剂1.5ml，于沸水浴中加热5min，取出后立即浸入冷水冷却至室温，再用蒸馏水定容至25ml刻度处，摇匀，然后在540nm波长处比色。

DNS法测定总糖和还原糖

实验九总糖和还原糖的测定（二）

──3,5－二硝基水杨酸法

一、目的要求：

掌握还原糖和总糖的测定原理，学习用比色法测定还原糖的方法。

二、实验原理:

在NaOH和丙三醇存在下，3,5－二硝基水杨酸（DNS）与还原糖共热后被还原生成氨基化合物。在过量的NaOH碱性溶液中此化合物呈桔红色，在540nm波长处有最大吸收，在一定的浓度范围内，还原糖的量与光吸收值呈线性关系，利用比色法可测定样品中的含糖量。

黄色桔红色

三、试剂和器材

1、试剂

（1）1 mg/ml葡萄糖标准溶液：准确称取干燥恒重的葡萄糖100mg，加少量蒸馏水溶解后，以蒸馏水定容至100ml，即含葡萄糖为1.0mg/ml。

（2）3,5—二硝基水杨酸试剂：称取6.3 g 3,5—二硝基水杨酸并量取262 ml 2mol/L NaOH加到酒石酸钾纳的热溶液中（182 g 酒石酸钾纳溶于500 ml水中），再加5 g结晶酚和5 g亚硫酸氢钠溶于其中，搅拌溶解，冷却后定容到1000 ml贮于棕色瓶中。（3）碘－碘化钾溶液：称取5g碘，10g碘化钾溶于100ml蒸馏水中。

（4）6N NaOH：称取120g NaOH溶于500ml蒸馏水中。

（5）0.1% 酚酞指示剂。

（6）6 mol/L HCl溶液

2、材料

小麦淀粉或玉米淀粉。

3、器材

分光光度计，天平，水浴锅，电炉，试管若干等。

四、操作方法

1、葡萄糖标准曲线制作

取8支15mm×180mm试管，按下表加入1.0mg/ml葡萄糖标准液和蒸馏水。

管号

试剂

0 1 2 3 4 5 6 7 8

葡萄糖标准液(ml)0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6

还原糖和总糖含量的测定(3,5 一二硝基水杨酸比色法)

还原糖和总糖含量的测定（3，5 一二硝基水杨酸比色法）

还原糖和总糖含量的测定（3，5一二硝基水杨酸比色法）

作者：佚名文章来源：生物化学实验技术点击数：2132更新时间：2021-5-

1311:29:24

一、目的

植物体内的还原成糖，主要就是葡萄糖、果糖和麦芽糖。它们在植物体内的原产，不仅充分反映植物体内碳水化合物的运转情况，而且也就是呼吸作用的基质。还原成糖还能够构成其他物质例如有机酸等。此外，水果蔬菜中糖量的多少，也就是始终如一其品质的关键指标。还原成糖在有机体的新陈代谢中起至着关键的促进作用，其他碳水化合物，例如淀粉蔗糖等，经水解也分解成还原成糖。通过本实验，掌控还原成糖定量测定的基本原理，练比色定糖法的基本操作，热悉分光光度计的采用方法。

二、原理

各种单糖和麦芽糖就是还原成糖，蔗糖和淀粉不为还原成糖。利用溶解度相同，可以植物样品中的单糖、双糖和多糖分别抽取出，再用酸水解法并使没还原性的双糖和多糖全盘水解班莱班县还原性的单糖。

在碱性条件下，还原糖与3，5一二硝基水杨酸共热，3，5一二硝基水杨酸被还原为3-

氨基-5-硝基水杨酸（棕红色物质），还原成糖则被水解成糖酸及其他产物。一定范围内，还原成糖的量与棕红色物质颜色厚薄的程度成一定的比例关系，540nm波长下测量棕红色物质的消光值，收信标准曲线并排序，便可以分别谋出来样品中还原成糖和总糖的含量。

三、仪器、试剂和材料

1.仪器

（1）刻度试管：25mlx11

（2）离心管或玻璃圆柱形x2

（3）烧杯：1oomlx1

实验一还原糖和总糖含量的测定

（3,5-二硝基水杨酸比色法）

一．目的

1.掌握还原糖定量测定的基本原理；

2.学习比色定糖法的基本操作；

3.熟悉分光光度计的使用方法。

二．原理

在碱性的条件下，还原糖与3,5-二硝基水杨酸共热，3,5-二硝基水杨酸被还原为3-氨基-5-硝基水杨酸（棕红色物质）,还原糖的量与棕红色物质颜色深浅的程度成一定的比例关系，在540nm波长下测定棕红色物质的消光值，查对标准曲线并计算，便可分别样品中还原糖和总糖的含量。

三．仪器.试剂和材料

1.仪器：

（1）25ml刻度试管（2）玻璃漏斗（3）三角瓶（4）100ml容量瓶3个（5）刻度吸管（1ml,2ml,3ml）（6）恒温水浴（7）沸水浴（8）电子天平（9）分光光度计2.试剂；

（1）1mg/ml葡萄糖标准液（2）3,5-二硝基水杨酸试剂（3）碘碘化钾溶液（4）酚酞指示剂（5）6ml/L HCI （6）6ml/L NaOH

3.材料：食用面粉

四．操作步骤

将各管摇匀，在沸水中加热5min，取出后立即放入盛有冷水的烧杯中冷却至室温，再以蒸馏水定容至25min，用试管塞塞住试管口，颠倒混匀。在540nm波长下，用0号试管调零，分别读取1~6号管的吸光度。以吸光度为纵坐标，葡萄样毫克数为横坐标，绘制标准曲线。

2.样品中还原糖和总糖含量的测定

（1）样品中还原糖的提取：准确称取3g使用面粉，放在100ml三角瓶中，先以少量蒸馏水调成糊状，然后加50ml蒸馏水，搅匀，置于50℃恒温水中保温20min，使还原糖浸出。过滤，用20ml蒸馏水定容至刻度，混匀，作为还原糖待测液。

实验一-还原糖和总糖的测定-3-5-二硝基水杨酸比色法

实验一还原糖和总糖的测定——3,5-二硝基水杨酸比色法一、目的与要求

掌握还原糖和总糖测定的基本原理，学习比色法测定还原糖的操作方法和分光光度计的使用。

二、实验原理

还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类，单糖都是还原糖，双糖和多糖不一定是还原糖，如乳糖和麦芽糖是还原糖，蔗糖和淀粉是非还原糖。利用糖的溶解度不同，可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来，对没有还原性的双糖和多糖，可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定，再分别求出样品中还原糖和总糖的含量（还原糖以葡萄糖含量计）。

还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其它产物，3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系，利用分光光度计，在540 nm波长下测定光密度值，查对标准曲线并计算，便可求出样品中还原糖和总糖的含量。由于多糖水解为单糖时，每断裂一个糖苷键需加入一分子水，所以在计算多糖含量时应乘以0.9。

三、实验材料、主要仪器和试剂

1．实验材料小麦面粉(1000 g)

2．主要仪器（1）具塞玻璃刻度试管：20 mL×11 （2）滤纸（3）烧杯：100 mL ×2 （4）三角瓶：100 mL×1 （5）容量瓶：100 mL×3 （6）刻度吸管：1mL×1；2 mL ×2；10 mL×1 （7）恒温水浴锅（8）煤气炉（9）漏斗（10）天平（11）分光光度计

3．试剂

（1）1mg/mL葡萄糖标准液

准确称取80 ℃烘至恒重的分析纯葡萄糖100 mg，置于小烧杯中，加少量蒸馏水溶解后，转移到100 mL容量瓶中，用蒸馏水定容至100 mL，混匀，4℃冰箱中保存备用。

葡萄酒中总糖和还原糖的测定

六、注意事项
❖ 1．葡萄糖与斐林试剂的反应特别复杂,且随反应条件而变化,因此,不能根据化学反应方程式直接计算,而是用已知浓度的葡萄糖标准溶液标定的方法进行计算,或按编制的还原糖检索表来计算.在测定过程中要严格按照所规定的操作条件,如三角瓶规格、加热时间、滴定速度等.
六、注意事项
❖ 2．斐林试剂甲、乙液应分别贮存,用时才混合,否则酒石酸钾钠铜配合物长期在碱性条件下,会缓慢分解.
六、注意事项
❖ 4．滴定时不能随意摇动三角瓶,更不能把三角瓶从热源上取下来滴定,以防止空气进入反应液中.
ห้องสมุดไป่ตู้
六、注意事项
❖ 5．样品溶液预测的目的：一是本法对样品中还原糖浓度有一定要求,测定时样品溶液的消耗体积应与标定葡萄糖标准溶液时消耗的体积接近.通过预测可了解样品浓度是否合适,浓度过大或过小,应加以调整,才能提高测定结果的准确性；二是通过预测可知道样液大概消耗量,以便在正式测定时,预先加入比实际用量少1ml左右的样液,只留下1ml左右样液在后滴定时加入,以保证在1分钟内完成后滴定工作,提高测定的准确度.
❖ 测还原糖用试样：准确吸取一定量的样品〔V1于 100 mL容量瓶中,使之所含还原糖量为 0.2～0.4g,加水定容至刻度.
❖ 2 、样品测定
❖ 以试样代替葡萄糖标准溶液,参照费林试剂标定同样操作,记录消耗试样的体积〔V3,结果按式〔4计算.

总糖的测定

一. 总糖的测定

食品中的总糖主要指具有还原性的葡萄糖，果糖，戊糖，乳糖和在测定条件下能水解为还原性的单糖的蔗糖（水解后为1分子葡萄糖和1分子果糖），麦芽糖（水解后为2分子葡萄糖）以及可能部分水解的淀粉（水解后为2分子葡萄糖）。还原糖类之所以具有还原性是由于分子中含有游离的醛基（-CHO）或酮基(=C=O)。

测定总糖的经典化学方法都是以其能被各种试剂氧化为基础的。这些方法中，以各种根据斐林氏溶液的氧化作用的改进法的应用范围最广。在这里我们主要给大家介绍铁氰化钾法，蒽铜比色法，斐林氏容量法。斐林氏容量法由于反应复杂，影响因素较多，所以不如铁氰化钾法准确，但其操作简单迅速，试剂稳定，故被广泛采用。蒽铜比色法要求比色时糖液浓度在一定范围内，但要求检测液澄清，此外，在大多数情况下，测定要求不包括淀粉和糊精，这就要在测定前将淀粉，糊精去掉，这样就使操作复杂化，限制了其广泛应用。

（一）铁氰化钾法

1.原理

样品中原有的和水解后产生的转化糖都具有还原性质，在碱性溶液中能将铁氰化钾还原，根据铁氰化钾的浓度和检验滴定量可计算出含糖量。其反应为下：

C6H12O6+6K3[Fe(CN)6] + 6KOH →(CHOH)4·(COOH)2 + 6K4［Fe(CN)6］+ 4H2O

滴定终了时，稍过量的转化糖即将指示剂次甲基兰还原为无色的隐色体。

2．试剂

1）1％的次甲基兰指示剂2)盐酸（水解作用）3）10％和30％的NaOH溶液4）1％铁氰化钾（贮存特色瓶，临用前标定）

3．标定步骤

称蔗糖1.0000g→定容500ml→取此液50ml→于100ml容量瓶→加hcl5ml→摇匀→65-7 0℃水裕15分钟→取出冷却→用30％NaOH中和→加水于刻度→倒入滴定管中→取10ml1％铁氰化钾于锥形瓶中→加10％NaOH2.5ml加12.5ml的水加玻璃珠颗粒→加热至沸→保持一分钟→加次甲基兰1滴→立即以糖液滴足至蓝色退去为止，记录用量。

DNS法测定总糖和还原糖

实验九总糖和还原糖的测定（二）

──3,5－二硝基水杨酸法

一、目的要求：

掌握还原糖和总糖的测定原理，学习用比色法测定还原糖的方法。

二、实验原理:

黄色桔红色

三、试剂和器材

1、试剂

（1）1 mg/ml葡萄糖标准溶液：准确称取干燥恒重的葡萄糖100mg，加少量蒸馏水溶解后，以蒸馏水定容至100ml，即含葡萄糖为1.0mg/ml。

（4）6N NaOH：称取120g NaOH溶于500ml蒸馏水中。

（5）0.1% 酚酞指示剂。

（6）6 mol/L HCl溶液

2、材料

小麦淀粉或玉米淀粉。

3、器材

分光光度计，天平，水浴锅，电炉，试管若干等。

四、操作方法

1、葡萄糖标准曲线制作

取8支15mm×180mm试管，按下表加入1.0mg/ml葡萄糖标准液和蒸馏水。

管号

试剂

0 1 2 3 4 5 6 7 8

葡萄糖标准液(ml)0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6

总糖和还原糖的测定

X =
V空－V标
X（V空－V未知）
单糖和某些寡糖含有游离的醛基或酮基，有还原性，属于还原糖； COOK COOK 而多糖和蔗糖等属于非还原性糖。单糖和某些寡糖含有游离的醛基或酮基，有还原性，属于还原糖；分别在每个试管中加入2mL 2％碘化钾溶液和2mL 1 mol/L H2SO4，以洗涤管中的残留物，并转入相应的三角瓶中，最后再用1mL蒸馏水洗涤试管2次；实验二总糖和还原糖的测定分别在每个试管中加入2mL 2％碘化钾溶液和2mL 1 mol/L H2SO4，以洗涤管中的残留物，并转入相应的三角瓶中，最后再用1mL蒸馏水洗涤试管2次；（CHOH）4+ 2 H2O = 2 分别在每个试管中加入2mL 2％碘化钾溶液和2mL 1 mol/L H2SO4，以洗涤管中的残留物，并转入相应的三角瓶中，最后再用1mL蒸馏水洗涤试管2次； 005 mol/L Na2S2O3滴定至碘颜色接近消失时加入淀粉指示剂5滴，继续滴定至蓝色消失为止。试剂实验二总糖和还原糖的测定还原糖的测定方法多种，本实验采用间接滴定法。其原理是：在碱性溶液中，二价铜离子被还原糖还原成一价的氧化亚铜，氧化亚铜在酸性环境中与一定量的过量碘起反应，再用标准硫代硫酸钠滴定剩余的碘，即可算出还原糖的含量。总糖水解液(待测葡萄糖溶液）因此，用硫代硫酸钠滴定剩余的碘，在有已知浓度的标准还原糖浓度时，可以间接地计算出未知样品的还原糖的含量。在用碘化钾和硫酸洗涤试管时要洗净，否则会影响滴定结果的准确性。试剂沸 15 分试剂

1概述2食品中还原糖的测定3总糖的测定

F =c •V
式中：F--------10mg碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量，mg; C-------葡萄糖标准溶液的浓度， mg/ml； V---------标定时消耗葡萄糖标准溶液的总体积，ml。
③
样品溶液预测
吸取碱性酒石酸铜甲液及乙液各 5 ml ，置于 250ml 锥形瓶中，加水 10ml ，加玻璃珠3粒。加热使其在2分钟内沸腾，准确沸腾30秒钟，趁沸以先快后慢的速度从滴定管中滴加样品液，须始终保持溶液的沸腾状态，待溶液蓝色变浅时，趁热以每 2 秒一滴的速度滴定，直至溶液蓝色刚好褪去为终点。记录消耗溶液的体积。
② 碱性酒石酸铜溶液的标定

准确吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各5ml，置于250ml锥形瓶中，加水10ml，加玻璃珠3粒。
从滴定管滴加约9ml葡萄糖标准溶液，加热使其在2分钟内沸腾，准确沸腾30秒，趁热以每2秒一滴的速度滴加葡萄糖标准溶液，直至溶液蓝色刚好图褪去为终点。记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积。平行操作3次，取其平均值。
④
样品溶液测定
吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各5ml，置于250ml锥形瓶中，加水10ml，加玻璃珠3粒。从滴定管加入比预测时样品溶液消耗总体积少1ml的样品液，使其在2分钟内加热至沸，准确沸腾30秒钟，趁热以每2秒一滴的速度继续滴定，直至蓝色刚好褪去为终点。记录消耗样品液的体积。平行操作3次，取其平均值

总糖和还原糖的测定

──3,5－二硝基水杨酸法

目的要求：

掌握还原糖和总糖的测定原理，学习用比色法测定还原糖的方法。

实验原理:

黄色桔红色

试剂和器材

一、试剂

3,5－二硝基水杨酸（DNS）试剂：称取6.5g DNS溶于少量热蒸馏水中，溶解后移入1000ml容量瓶中，加入2mol/L氢氧化钠溶液325ml，再加入45g丙三醇，摇匀，冷却后定容至1000ml。

葡萄糖标准溶液：准确称取干燥恒重的葡萄糖200mg，加少量蒸馏水溶解后，以蒸馏水定容至100ml，即含葡萄糖为2.0mg/ml。

6mol/L HCl：取250ml浓HCl（35%～38%）用蒸馏水稀释到500ml。

碘－碘化钾溶液：称取5g碘，10g碘化钾溶于100ml蒸馏水中。

6N NaOH：称取120g NaOH溶于500ml蒸馏水中。

0.1% 酚酞指示剂。

二、材料

藕粉，小麦淀粉或玉米淀粉。

三、器材

723PC、S22型分光光度计，天平，水浴锅，电炉，试管若干等。

一、葡萄糖标准曲线制作

取5支15mm×180mm试管，按下表加入2.0mg/ml葡萄糖标准液和蒸馏水。

管号葡萄糖标准液蒸馏水葡萄糖含量OD

540 /ml /ml /mg

0 1 0

0.2

0.8

0.4

2 0.4 0.6 0.8

3 0.6 0.

总糖和还原糖的测定

概述

“总糖”是指所有能产生糖酸的物质组成的糖，其总量包括还原糖、酮糖和酸、葡萄糖酸、乳酸等。还原糖是指可以被还原成糖醇的糖类物质。在食品工业中，常用的还原糖为蔗糖、葡萄糖、果糖等。“还原糖量”是指在一定条件下，还原糖产生的还原能力的测定值。

总糖检测的目的是了解食品中糖类物质的含量，在食品的研究、加工和贮藏过程中，有助于保证品质和控制产品的营养成分

测定方法

1. 材料准备

（1）准确称取样品。

（2）为确保分析的精确性和可靠性，建议重复3次测定，然后求取平均值。

（3）测定仪器和设备。

2. 测定步骤

（1）将样品加入锥形瓶中，加入10ml水，摇匀；

（2）加入50%的硫酸，总体积到25ml；

（3）恒温1小时；

（4）取出，冷却至室温；

（5）加少量洛丹酮酸钠蓝指示剂；

（6）滴加NaOH溶液至紫红色转黄色，继续滴加至蓝色出现；

（7）测量所需的NaOH用量（毫升）。

3. 计算公式

总糖（％）=（所用的NaOH的毫升数×16.5） / (样品的克数×10)

（3）送样、取样。

（1）样品制备：取适量样品称入烧杯中，加入适量水，搅拌均匀；过滤，保留滤液；

（2）分装样品：取1ml样品分装至小孔量筒中；

（3）加入试剂：将0.5ml盐酸、1ml氰化钠、1ml表面活性剂加入量筒中。

（4）后续操作：

(1)小孔量筒体积调至50ml，在加0.1%碱液调整pH至8.5左右；

(2)标准糖称定：取不同浓度的葡萄糖溶液，重复进行范围内可行的浓度测定和平均值；

(3)比色：用还原糖标准曲线计算出样品中还原糖的含量；

还原糖含量 (mg/ml)=[(标准吸光度-样品吸光度)×标准体积]/样品体积×

总糖测定的原理和方法

一、糕点、糖果中还原糖的测定

1、直接滴定法

1）原理：样品经除去蛋白质后，在加热条件下，直接滴定经标定的碱性酒石酸铜溶液，还原糖将二价铜还原为氧化亚铜。以亚甲基蓝为指示剂，在终点稍过量的还原糖将蓝色的氧化型亚甲基蓝还原为无色的还原型亚甲基蓝，依据试样所消耗的体积计算还原糖的含量。直接滴定法已经过多次改进，只要严格遵守试验条件，分析结果的精确度和重现性是能够满意定量分析的要求。

2）试剂

①费林氏剂甲液：称取15g硫酸铜（CuSO〔（1000mv〕＝m

二、糕点、糖果中总糖的测定

测定总糖通常以还原糖的测定方法为基础，将食品中的非还原性双糖，经酸水解成还原性单糖，再按还原糖的测定法测定，测出以转化糖计的总糖量。

若需要单纯测定食品中的蔗糖量，可分别测定样品水解前的还原糖量及水解后的还原糖量，两者之差再乘以校正系数0.95即为蔗糖量，即1g转化糖量相当于0.95g蔗糖量。

在食品加工生产过程中，也常用相对密度法、折光法等简易的物理

方法测定总糖量。

1、原理

样品除去蛋白质后，加入稀HCl，在加热条件下使蔗糖水解转化为还原糖，再以直接滴定法或高锰酸钾法测定。

2、仪器

1）恒温水浴箱

2）其他仪器同还原糖的测定

3、试剂

1）6mol/LHCl溶液

2）甲基红指示剂：称取0.1g甲基红溶于100ml60%（体积分数）乙醇中

3）200g/LNaOH溶液

4）转化糖标准溶液：精确称取1.0526g纯蔗糖用100ml水溶解，置于具塞三角瓶中加5mlHCl（1：1），在68~70℃水浴中加热15min。冷却至室温后定容至1000ml。此溶液每ml标准溶液相当于1.0mg转化糖。

总糖和还原糖的测定及葡萄糖标准曲线的绘制-3,5-二硝基水杨酸法

管号
试剂
标准葡萄糖溶液 /ml
0
1
2
3
4
5
6
7
0
1.0 2.0
0.2
0.8 2.0
0.4
0.6 2.0
0.6
0.4 2.0
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
0.8
0.2 2.0
1.0
0 2.0
1.0
0 2.0
1.0
0 2.0
蒸馏水/ml DNS试剂/ml
沸水浴中准确煮沸5min，取出，用自来水冷却至室温蒸馏水/ml 葡萄糖含量/mg A540nm 9.0 0 9.0 0.2 9.0 0.4 9.0 0.6 9.0 0.8 9.0 1.0 9.0 C1 a 9.0 C2 b
2、样品中总糖的水解、提取
准确称取0.2g山芋粉置于100ml三角烧瓶中
加3ml蒸馏水，调成糊状
取1～2滴于六凹反应盘中，加1滴 I2-KI溶液，如果完全不显蓝色，即可进行下面的操作。
再加12ml蒸馏水，5ml 6mol/L HCl
沸水浴，30min (不时搅拌) 冷却至室温用6mol/L NaOH调pH7.0（ pH试纸）蒸馏水定容至100ml,混匀
六、计算
C1V1 ω(还原糖)=——×100% m1
C2V2
ω(总糖)=——×0.9×100% m2