呼吸道感染病原体抗体(IgM)九联检检测及应用
九项呼吸道病毒检查及临床意义
九项呼吸道病毒检查一、呼吸道九联检主要检测病原体的IgM抗体,包括嗜肺军团菌(LP)、肺炎支原体(MP)、Q热立克次体(COX)、肺炎衣原体(CP)、腺病毒(ADV)、呼吸道合胞病毒(RSV)、甲型流感病毒(IFA)、乙型流感病毒(IFB)和副流感病毒1、2和3型(PIVS)。
二、采用间接免疫荧光法，主要针对九项病原体的IgM 检测。
由于机体受到抗原刺激后最早产生的抗体是IgM，但是IgM的半衰期短（约5天）若血清中特异性IgM类抗体含量增高，表明有近期感染，这有助于感染性疾病的早期诊断。
以下是关于九项病原体名称及其潜伏期和产生IgM的时间。
九项病原体IgM抗体产生时间三、临床意义嗜肺军团菌是社区获得性肺炎的重要致病菌。
在欧洲和北美军团军肺炎占社区获得性肺炎前3,4位，ICU重症社区获得性肺炎的第三位，而医院获得性肺炎的1～5 %也由嗜肺军团菌所致。
对人致病的嗜肺军团菌有16个血清型，80%军团菌肺炎有嗜肺军团菌血清Ⅰ型引起。
然而军团菌细菌培养检出率低, 只有50%左右, 目前临床上血清特异性抗体检查是常用的诊断军团菌感染的主要手段。
肺炎支原体是目前儿童呼吸道感染的重要病原体之一，占儿童肺炎感染病原体的15%左右，由于肺炎支原体传统培养难度大，单纯凭借患儿的临床症状不易确诊是否感染，支原体抗体于感染后7～9d出现，3～4周达高峰，可持续4～6月，采用血清特异性抗体检查是常用的诊断肺炎支原体感染的主要手段。
Q热立克次体可引起Q热等全身疾病，会造成发热、非典型性肺炎、肝炎或心内膜炎等。
血清学诊断中，IFA检测是最灵敏和最具指示性的血清学诊断方法。
肺炎衣原体广泛存在于世界范围内，人类是其唯一的宿主，仅1个血清型。
实验室检测方法有分离培养、血清学检测、核酸扩增技术等，目前临床主要使用血清学检测方法。
肺炎衣原体是呼吸道感染主要病原之一，人与人之间的传播方式最有可能通过呼吸道飞沫。
肺炎衣原体感染与小儿肺炎、哮喘及慢性咳嗽等呼吸道疾病密切相关。
九项呼吸道感染病原体IgM抗体检测
近年来，随着人员在社会上的流动范围进一步扩大及频繁、现代化生活的享受及体育锻炼的减少、人口的老龄化、生活环境改变等因素所致，疾病发生的概率增加。
本文对呼吸道被九种病原体感染情况作一统计分析，并探讨其在人体感染后产生IgM抗体分布情况。
资料与方法2018年1月-2019年2月收治患者762例，年龄12～90岁，平均54.3岁。
标本采集：清晨空腹采集静脉血4mL，置于血清分离胶管(非可替)中，颠倒混匀3～5次，3000r/min，分离血清。
试剂与仪器：①试剂：郑州安图生物工程股份有限公司提供。
②仪器：免疫荧光显微镜、离心机。
检测方法：采用间接免疫荧光法(IFA)检测，按照试剂说明书进行，并用免疫荧光显微镜观察结果。
质量控制：质量控制10孔，除了嗜肺军团菌，载玻片上的所有抗原都是从细胞培养物中获得。
每1个病毒类病原体孔中都含1%～15%用甲醛灭活的感染细胞，无感染的细胞用丙酮固定。
九项呼吸道感染病原体IgM抗体阴性为正常，最后进行统计学分析。
结果762例九项呼吸道感染病原体IgM抗体检测情况，结果全阴性582例，阳性180例，占检测数的23.6%。
阳性人群中男93例(51.7%)，女87例(48.3%)。
180例阳性结果，见表1和表2。
讨论嗜肺军团菌中人最容易感染的是嗜肺军团菌血清1型，非典型性肺炎常伴随有全身症状。
据临床统计约10%的肺炎是由嗜肺军团菌血清1型引起。
临床上军团菌感染主要有肺炎型和庞蒂亚克热型两种表现形式。
现代人们无论在单位工作，还是在自己家中和娱乐场所活动，由于大量空调的使用，加之对空调的消毒及清洁保养不到位，导致空调内产生大量的细菌，随空调的气流流动而传播给人们，易感人群易发病。
其中以军团菌较为常见。
军团菌肺炎潜伏期为2～10d，IgM抗体在感染后1周出现，并可持续存在3～6个月[1]。
肺炎支原体引起的肺炎在儿童和青少年中最为常见，在季节交替时，易感人群容易发病。
特别是老年人，由于免疫力下降，也会导致肺炎支原体感染的机会增加。
呼吸道九联检(简单)
数据来源： 《各国社区获得性肺炎指南对非典型病原体的重视情况》
《肺炎的诊断与治疗研究进展》《重视非典型病原体在CAP致病中的作用》 《要重视非典型病原体在小儿呼吸道疾病中的致病作用》等
常见检测的九种非典型病原体
嗜肺军团菌
腺病毒
肺炎支原体
呼吸道合胞病毒
Q热立克次体 肺炎衣原体
质量管理体系
1999年通过ISO 9002: 1994质量认证； 2009年更新ISO 9001: 2008质量认证；
2003年获得CE认证； 2005年获得ISO 13485: 2005认证；
试剂盒的设计理念
多种病原同时联合检测，节省时间、便于 快速准确诊断；为临床呼吸道病原体鉴别、 诊断提供导向性帮助。
肺炎支原体
（3）真菌性肺炎
如：白色念珠菌、放线菌等。
（4）其他病原体所致肺炎
如：Q热立克次体、衣原体、弓形体、原虫等。
社区获得性肺炎的分类
青霉素问世前： CAP80%以上是由肺炎链球菌所致。 1928年英国科学家弗莱明发现青霉素：
拯救了千百万肺炎患者的生命，肺炎链球菌虽仍是CAP 最常见的病原体，但比例已明显下降。
果快速 5、标本为血清标本，容易采集、容易保存 6、镜下荧光形态清晰，容易判定 7、观察荧光，准确性好 8、准确检测出哪种病原体感染，能为临床诊断、治疗提供强有力的帮助
目前开展著名大三甲医院举例
北京市儿童医院
天津市儿童医院
Байду номын сангаас
北京中国人民解放军306医院 总院
北京中国人民解放军第二炮兵
上海同济医院
非典型的病原体：如：肺炎支原体、肺炎衣原体、病毒、 嗜肺军团菌等，明显上升!
微生物检验九项呼吸道感染病原体IgM抗体检测操作规范
九项呼吸道感染病原体IgM抗体检测操作规范
一、实验目的：检测九项呼吸道感染病原体IgM抗体
二、实验原理：间接免疫荧光法（IFA）是基于待测样本中抗体与吸
附在载玻片上的抗原发生反应。
样本中存在的特异性抗体和抗原反应，未与抗原结合的免疫球蛋白在洗涤步骤中除去。
在下一步中，抗原-抗体复合物与荧光标记素标记的抗人球蛋白反应。
用荧光显微镜观察结果。
三、实验材料：1、试剂：磷酸缓冲液、吸附剂（羊抗人IgG）、结
合物（异硫氰酸荧光素）、封闭介质（甘油缓冲液）。
2、器料：载玻片（前九孔含有抗原，第十孔为质控孔）、盖玻片、37℃恒温箱、3000rpm离心机、荧光显微镜、湿盒。
四、实验步骤：1、配制PBS溶液：1瓶PBS加1L水溶解。
2、稀释血清样本：按1:1比例稀释血清样本，即15微升血清加入15微升PBS溶液中。
3、将30微升稀释后的血清样本加入150微升吸附剂，彻底混匀，离心3000rpm离心15分钟。
4、在载玻片上每孔加入15微升吸附剂处理后的血清（离心后的上清液）。
5、将载玻片放入湿盒，37℃温育60分钟。
6、用pbs溶液缓慢冲洗载玻片后，再用蒸馏水冲洗1-2次，置孵育箱内干燥。
待载玻片完全干燥后，每孔加入抗人IgMFITC结合物15微升。
7、将载玻片放入湿盒，37℃温育30分钟。
8、用PBS溶液缓慢冲洗载玻片后，再用蒸馏水冲洗1-2次，置孵育箱内干燥。
9、加适量封闭介质，盖上盖玻片。
10、尽快用荧光显微镜在100倍下观察结果。
五、实验结果：。
呼吸道感染IgM九项联检试剂使用说明终稿
呼吸道感染IgM九项联检试剂盒（间接免疫荧光法）说明书【产品名称】通用名称：呼吸道感染IgM九项联检试剂盒（间接免疫荧光法）英文名称：PNEUMOSLIDE IgM商品名称：PNEUMOSLIDE IgM【包装规格】10人份/盒【预期用途】采用间接免疫荧光法（IFA），同时检测人血清中呼吸道感染主要病原体的IgM 抗体，可检的病原体包括：嗜肺军团菌血清1型、肺炎支原体、Q热立克次体、肺炎衣原体、腺病毒、呼吸道合胞病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒和副流感病毒1、2和3型。
已报道的非典型性肺炎的病原体有很多，其中最常见的有：嗜肺军团菌人最易感染的是嗜肺军团菌血清1型，非典型性肺炎常伴随有全身症状。
10%的肺炎是由嗜肺军团菌血清1型引起的。
在血清学诊断中，间接免疫荧光法（IFA）是唯一的标准技术。
肺炎支原体肺炎支原体引起的肺炎在儿童和青少年中最为常见，由于很难将其固定在载玻片上，因此先将肺炎支原体抗原固定在细胞中。
Q热立克次体Q热是由Q热立克次体引起的全身疾病，会造成发热、非典型性肺炎、肝炎或心内膜炎。
血清学诊断中，IFA检测是最灵敏和最具指示性的血清学诊断方法。
肺炎衣原体肺炎衣原体极易造成呼吸系统感染，特别是支气管炎和肺炎。
在老年人中发病率较高，它所引起的肺炎占所有肺炎病例的10%。
微量免疫荧光法（MIF）是最灵敏和最特异的诊断方法。
腺病毒腺病毒是一种重要的呼吸道病原体，能引起上呼吸道疾病，伴随有急骤发热和轻度呼吸道感染。
呼吸道合胞病毒呼吸道合胞病毒（RSV）是两岁以下幼儿呼吸道感染的主要病原体，在冬季爆发流行。
流感病毒它是流感的病原体，在具有潜在病理学的患者中会产生严重的并发症。
由于它易于与其它呼吸道疾病混淆，所以在流行期临床诊断很困难。
因此，实验室诊断就显得非常重要。
副流感病毒副流感病毒1、2和3型在2-4岁儿童中能引起喉气管支气管炎（哮吼）。
3型具有流行性，1和2型具有地域性。
【检测原理】间接免疫荧光法（IFA）是基于待测样本中的抗体与吸附在载玻片上的抗原发生的反应。
呼吸道九联检SOP
呼吸道九联检操作程序一、呼吸道感染概述呼吸道感染是指病原体感染人体的鼻腔、咽喉、气管和支气管等呼吸系统。
分为上呼吸道感染和下呼吸道感染，上呼吸道感染常见的是急性上呼吸道感染（acute upper respir tract infection），指鼻腔、咽或喉部急性炎症的概称，是呼吸道最常见的一种传染病。
常见病因为病毒，少数由细菌引起。
患者不分年龄、性别、职业和地区。
不仅具有较强的传染性，而且可引起严重并发症。
下呼吸道感染是最常见的感染性疾患，包括急性气管——支气管炎、慢性支气管炎、肺炎、支气管扩张等，由病毒、细菌、支原体、衣原体、军团菌等微生物引起，其防治应遵循预防为主、准确诊断、及时治疗的原则，治疗时必须明确引起感染的病原体以选择有效的抗生素。
二、免疫荧光法介绍免疫荧光技术（Immunofluorescence technique ）又称荧光抗体技术，是标记免疫技术中发展最早的一种。
它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。
很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合，利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。
Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。
这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术（fluorescent antibody technique）。
用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法；用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称荧光抗原法。
这两种方法总称免疫荧光技术，因为荧光色素不但能与抗体球蛋白结合，用于检测或定位各种抗原，也可以与其他蛋白质结合，用于检测或定位抗体，但是在实际工作中荧光抗原技术很少应用，所以人们习惯称为荧光抗体技术，或称为免疫荧光技术。
用免疫荧光技术显示和检查细胞或组织内抗原或半抗原物质等方法称为免疫荧光细胞（或组织）化学技术。
荧光免疫法按反应体系及定量方法不同，还可进一步分做若干种。
呼吸道九联检病原体检测及其临床意义
肺炎衣原体
肺炎衣原体是一种比细菌小但比病毒大的生物，专性细 胞内寄生 感染方式：人与人可通过呼吸道分泌物传播 8岁以上儿童易被感染，尤其是人群聚集处。肺炎衣原 体肺炎占社区获得性肺炎比例的10%左右 多数起病缓慢，潜伏期30天左右，IgM抗体在发病2-3周 出现，一般来说可持续存在2-6个月。临床开始出现流感 样的症状如咽痛、头痛、发热。 阳性率一般在1-5%左右
据统计，90%以上急性呼吸道感染由病毒引 起
一种病原体可引起多种临床症状，同一临 床表现可由多种病原体引起
呼吸道病原体感染概况
一、典型“致病菌” 细菌：肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、流感
嗜血杆菌、卡他莫拉菌等 症状：典型，咳嗽、脓性痰、胸膜炎性胸痛，
一般都伴有发热，或有脓血痰 病史：①悠久，古代的“瘟疫”很多细菌性
能低下者。 流行：夏秋季节。尤其是在装有中央空调的封闭空间
内易爆发。 军团菌肺炎潜伏期为2-10天，症状：发冷、不适、肌
痛、头晕、头痛，并有烦躁、呼吸困难、胸痛。IgM抗 体在感染后1周左右出现，并可持续存在3-6个月。 我国各省市每年均有病例报告。阳性率2%-5%
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ 肺炎支原体
肺炎支原体，是介于病毒与细菌之间的一种没有细胞 壁的病原体 经14-21天的潜伏期开始发病，患者有头痛、乏力、无 力干咳等症状 IgM抗体一般在感染后1周出现，3-4周达到高峰，可持 续存在3-6个月 学龄儿童、婴幼儿、青少年患病较多，儿童中最典型的 综合症是气管支气管炎，许多成年感染者是无临床症状的 社区获得性肺炎患者中由肺炎支原体引起的达40% 冬季较多，地区性流行
1周左右 1周左右 2周左右
2-3周 1周左右 1周左右 1周左右 1周左右
呼吸道感染IgM九项联检试剂说明书终稿
呼吸道感染IgM九项联检试剂盒（间接免疫荧光法）说明书【产品名称】通用名称：呼吸道感染IgM九项联检试剂盒（间接免疫荧光法）英文名称：PNEUMOSLIDE IgM商品名称：PNEUMOSLIDE IgM【包装规格】10人份/盒【预期用途】采用间接免疫荧光法（IFA），同时检测人血清中呼吸道感染主要病原体的IgM 抗体，可检的病原体包括：嗜肺军团菌血清1型、肺炎支原体、Q热立克次体、肺炎衣原体、腺病毒、呼吸道合胞病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒和副流感病毒1、2和3型。
已报道的非典型性肺炎的病原体有很多，其中最常见的有：嗜肺军团菌人最易感染的是嗜肺军团菌血清1型，非典型性肺炎常伴随有全身症状。
10%的肺炎是由嗜肺军团菌血清1型引起的。
在血清学诊断中，间接免疫荧光法（IFA）是唯一的标准技术。
肺炎支原体肺炎支原体引起的肺炎在儿童和青少年中最为常见，由于很难将其固定在载玻片上，因此先将肺炎支原体抗原固定在细胞中。
Q热立克次体Q热是由Q热立克次体引起的全身疾病，会造成发热、非典型性肺炎、肝炎或心内膜炎。
血清学诊断中，IFA检测是最灵敏和最具指示性的血清学诊断方法。
肺炎衣原体肺炎衣原体极易造成呼吸系统感染，特别是支气管炎和肺炎。
在老年人中发病率较高，它所引起的肺炎占所有肺炎病例的10%。
微量免疫荧光法（MIF）是最灵敏和最特异的诊断方法。
腺病毒腺病毒是一种重要的呼吸道病原体，能引起上呼吸道疾病，伴随有急骤发热和轻度呼吸道感染。
呼吸道合胞病毒呼吸道合胞病毒（RSV）是两岁以下幼儿呼吸道感染的主要病原体，在冬季爆发流行。
流感病毒它是流感的病原体，在具有潜在病理学的患者中会产生严重的并发症。
由于它易于与其它呼吸道疾病混淆，所以在流行期临床诊断很困难。
因此，实验室诊断就显得非常重要。
副流感病毒副流感病毒1、2和3型在2-4岁儿童中能引起喉气管支气管炎（哮吼）。
3型具有流行性，1和2型具有地域性。
【检测原理】间接免疫荧光法（IFA）是基于待测样本中的抗体与吸附在载玻片上的抗原发生的反应。
9项呼吸道病原体检测在呼吸道感染病因分析中的应用
9项呼吸道病原体检测在呼吸道感染病因分析中的应用摘要：目的分析在呼吸道感染病因分析中应用9项呼吸道病原体检测的临床价值。
方法择取2015年1月至2017年12月我院收治的4112例呼吸道感染患者，所选患者均在空腹状态下采集静脉血，通过间接免疫荧光法联合检测9项呼吸道病原体：LP1（呼吸道嗜肺军团菌1型）、COX（Q热立克次体）、ADV（腺病毒）、IFA（甲型流感病毒）、PIV（副流感病毒）、MP（肺炎支原体）、CP（肺炎衣原体）、RSV（呼吸道合胞病毒）、IFB（乙型流感病毒）。
结果4112例患者血清IgM（免疫球蛋白M）总阳性率为35.02%（1440/4112），IFB阳性率最高，MP阳性率次之。
484例患者为病原体合并感染，阳性率为11.77%（483/4112）。
结论在呼吸道感染病因分析中应用9项呼吸道病原体检测具有显著临床价值，病毒与MP是呼吸道感染的主要病原体，应在检测中重点关注。
关键词：呼吸道病原体；呼吸道感染；病因分析【Abstract】 Objective：To analyze the clinical value of detecting 9 respiratory pathogens in the etiological analysis of respiratory tract infection. Methods：From January 2015 to December 2017，4112 patients with respiratory tract infection admitted to our hospital were enrolled. All patients were selected to receive venous blood under fasting condition. Nine respiratory pathogens were detected by indirectimmunofluorescence：LP1 Legionella pneumophila type 1），COX（fever zoster virus），ADV（adenovirus），IFA（influenza A virus），PIV（parainfluenza virus），MP（Mycoplasma pneumoniae），CP（Chlamydia pneumoniae），RSV （respiratory syncytial virus），IFB（influenza B virus）. Results：The total positive rate of serum IgM（immunoglobulin M）in 4112 patients was 35.02%（1440/4112）. The positive rate of IFB was highest and the positive rate of MP was second. 484 patients with pathogen infection，the positive rate was 11.77%（483/4112）. Conclusion：The detection of 9 respiratory pathogens has significant clinical value in the etiological analysis of respiratory tract infection. Virus and MP are the main pathogens of respiratory tract infection and should be focused on the detection.【Key words】 Respiratory pathogens；Respiratory tract infections；Etiology analysis 呼吸道感染属于临床常见疾病之一，通常是因细菌、病毒、衣原体、支原体等导致感染。
呼吸道感染病原体抗体检测及应用PPT课件
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1.检测样本要求 本试剂盒仅适用于检测人血清。其血液采集需由 专业人员无菌静脉穿刺采集。建议使用消毒或无菌技 术，以保持样本的完整性。血清样本采集后如不在8小 时内检测应2～8 ºC冷藏，如7天内不检测，则应冷冻 （-20ºC）保存。不要反复冻融以防止免疫球蛋白滴度 降低，特别是IgM。不要使用高血脂或污染的血清。若 样本中含有微粒要离心使之澄清。
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2）阴性结果：可观察到军团菌、肺炎衣原体和立克 次体无荧光，支原体、腺病毒、甲型和乙型流感病毒、 呼吸道合胞病毒和副流感病毒的细胞呈现红色。
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6.注意事项 1）每一次试验都应设立阳性和阴性对照，以确认试 验和试剂盒的有效性。观察到的荧光模式应与说明书 要求相符合，否则检验无效。 2）洗涤时注意不要直接对着孔直接冲洗，以免冲洗 掉已经固化反的应复合物。 3）单一样本抗体检测结果不能帮助作出近期感染的 诊断。应采集双份样本（急性期和康复期）同时检测 来观察血清转化或抗体水平的明显升高。 4）载玻片上病人样本交叉污染会导致错误结果，要 小心操作防止发生。 5） 吸附剂加入样本后要注意观察是否有明显的沉 淀出现。
混合荧光模式（细胞核和胞浆或胞膜）
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5.结果判读 1）阳性结果：可以观察到腺病毒、流感病毒、呼吸 道合胞病毒或副流感病毒对阳性血清的1-15%细胞的细 胞核、胞浆或胞膜出现苹果绿色荧光（在副流感病毒 和呼吸道合胞病毒中能同时观察到着色的合胞）；军 团菌、衣原体或立克次体中所有的细菌呈现出苹果绿 色荧光；支原体对阳性血清在细胞外围呈现苹果绿色 荧光。
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谢谢！
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呼吸道感染病原体抗体 检测及应用
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一、呼吸道感概述
二、九项呼吸道感染病原体IgM抗体检测
九项呼吸道感染病原体IgM抗体早期检测的临床应用
九项呼吸道感染病原体IgM抗体早期检测的临床应用目的：对九项呼吸道感染病原体IgM抗体早期检测的临床意义进行探究。
方法：从2014年9月-2017年8月笔者所在医院收治的疑似呼吸道感染患者中抽取9 432例为研究对象，抽取静脉血检测九项呼吸道感染病原体IgM抗体，并对结果与意义进行分析。
结果：9 432例疑似呼吸道感染患者的检出率为26.59%（2 508/9 432），其中嗜肺军团菌血清1型-IgM（LP）阳性占阳性病例百分率为0，肺炎支原体-IgM（MP）为67.26%、Q热立克次体-IgM（COX）为0.56%、肺炎衣原体-IgM（CP）为1.48%、腺病毒-IgM（ADV）为1.24%、呼吸道合胞病毒-IgM （RSV）为1.87%、甲型流感病毒-IgM（IN-FA）为0.60%、乙型流感病毒-IgM （IN-FB）为7.41%、副流感病毒-IgM（PIV）为19.58%。
结论：九项呼吸道感染病原体IgM抗体早期检出阳性率高，病原体种类多，对呼吸道感染的诊断与治疗具有重要临床意义。
标签：呼吸道感染；病原体；荧光抗体技术；间接；IgM抗体呼吸道感染在临床上具有较高的发病率，主要诱因为细菌等病原体感染。
临床资料证实，超过90%的上呼吸道感染患者发病原因为病毒感染[1-2]。
该病病原学比较复杂，并且具有季节流行特征。
探究更为迅速、准确的检测方式对于呼吸道感染的诊断与治疗意义重大。
本次研究将笔者所在医院9 432例疑似呼吸道感染患者作为研究对象，对九项呼吸道感染病原体IgM抗体早期检测的临床意义进行探究，现报告如下。
1 资料与方法1.1 一般资料于2014年9月-2017年8月笔者所在医院收治的疑似呼吸道感染患者中抽取9 432例为研究对象，所选患者均有明显呼吸道感染的临床表现，排除合并严重心肝肾等器官功能障碍患者。
患者均知悉采集数据的目的和用途，研究获得患者同意，研究经医院伦理委员会批准。
其中男5 561例、女3 871例，年龄60 d～105岁，平均（23.6±0.9）岁。
九种病原体IgM抗体联合检测在小儿呼吸道感染中的临床实验研究
九种病原体IgM抗体联合检测在小儿呼吸道感染中的临床实验研究目的：通过对呼吸道感染患儿的血清样品测定，了解南阳地区小儿呼吸道感染情况。
方法：采用间接免疫荧光法，对3286例呼吸道感染患儿的九种病原体IgM抗体同时进行检测。
结果：3286例患儿中检出IgM抗体阳性者1154例，阳性率35.1%，其中，一种病原体阳性633例，占19.3%；两种病原体阳性345例，占10.5%；三种及以上病原体阳性176例，占5.36%。
肺炎支原体、乙型流感、腺病毒、呼吸道合胞病毒、副病毒五种病原体多发。
结论：呼吸道感染病原体IgM抗体九联检对于病原学的诊断，有着重要的临床指导意义。
标签：呼吸道感染；IgM；间接免疫荧光呼吸道感染是儿科常见病和多发病，可由多种细菌、病毒等病原体引起，一种病原体可引起多种临床表现，同一种临床表现又可由多种病原体引起，同时可并发多系统、多器官的损害[1]。
为了了解本市儿童呼吸道感染状况，明确诊断，指导临床用药，笔者对2011年10 -2012年5月在本院儿科诊治的3286例呼吸道感染患儿进行九种病原体IgM抗体联合检测，现将结果报道如下。
1 资料与方法1.1 一般资料选择2011年10月-2012年5月本院门诊及住院患儿3286例，年龄1个月～6岁，均存在呼吸道感染的临床表现：持续性咳嗽、发热、呼吸急促或呼吸困难；肺部听诊可闻及细湿啰音等；实验室检查白细胞增高或正常。
其中男1799例，女1487例。
2.2 方法与试剂采取静脉血3.0 ml，离心分离后，提取血清测定。
采用间接免疫荧光法（IFA）。
待测样本中的抗体与吸附在载玻片上的抗原发生反应，洗去未与抗原结合的免疫球蛋白，抗原-抗体复合物与荧光色标记的抗人球蛋白发生反应，用免疫荧光显微镜观察结果。
每次实验均设定阳性和阴性对照，保证试剂的有效性。
呼吸道联检试剂PNEUMO-SLIDE-M，用于检测IgM 抗体，为西班牙Vircell公司生产，购自郑州安图绿科生物工程有限公司。
呼吸道九联检在儿童呼吸道感染性疾病诊断中的应用及意义
呼吸道九联检在儿童呼吸道感染性疾病诊断中的应用及意义王生清;杨小兰
【期刊名称】《实用医技杂志》
【年(卷),期】2016(023)008
【摘要】小儿急性呼吸道感染包括上呼吸道感染与下呼吸道感染，上呼吸道感染也简称上感，小儿发病率较高。
病毒、细菌、非典型病原体是三大类主要致病源。
呼吸道病原体一般感染人体1~2周后，血清中特免疫球蛋白（Ig）M抗体急剧升高，3~4周后可达到高峰。
因此，检测血清中特异IgM抗体可作为急性感染期的主要指标[1]。
选用间接免疫荧光法检测呼吸道常见的9种病原体的IgM抗体，明确小儿急性呼吸道感染的致病源，为儿科医生临床治疗及合理用药提供可靠的理论依据。
【总页数】2页(P867-868)
【作者】王生清;杨小兰
【作者单位】甘肃省白银市第一人民医院 730900;甘肃省白银市第一人民医院730900
【正文语种】中文
【相关文献】
1.普洱市儿童呼吸道感染病原体IgM抗体九联检临床应用分析 [J], 罗丹;张晓阳;高向阳;周春红;元帮
2.呼吸道九联检试剂在儿童呼吸道感染病原体检测中的临床意义探讨 [J], 王洪建
3.痰培养联合呼吸道IgM九联检及血清PCT水平检测在下呼吸道感染患儿诊断中
的应用及临床意义探讨 [J], 郭瑞娟
4.呼吸道九联检在儿童呼吸道感染疾病诊断中的临床应用研究 [J], 贾红丽
5.呼吸道九联检试剂在儿童呼吸道感染病原体检测中的应用价值 [J], 陈文锋;阮永钦;李桦
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呼吸道病原体IgM抗体联合检测在呼吸道感染诊断中的应用
呼吸道病原体IgM抗体联合检测在呼吸道感染诊断中的应用李琰【期刊名称】《中国卫生标准管理》【年(卷),期】2017(008)001【摘要】目的：探究呼吸道感染中呼吸道病原体IgM抗体联合检测的价值。
方法选取呼吸道感染患者2000例，采用IFA（间接免疫荧光法）对9种呼吸道病原体IgM抗体进行检测。
结果肺炎支原体抗体的检测阳性率与其他抗体相比较高（P＜0.05），肺炎衣原体感染较为少见，多数患者为单一感染。
结论呼吸道病原体IgM抗体联合检测可以为呼吸道感染患者的治疗提供依据。
%Objective To explore the respiratory tract infection in respiratory tract pathogen IgM antibody the value of combined detection. MethodsChose 2 000 patients with respiratory tract infection, IFA (indirect immunofluorescence) of 9 kinds of respiratory pathogens IgM antibody testing.Resultscompared with other antibodies, inlfuenza a virus antibody detection positive rate was higher (P<0.05), pneumonia chlamydia was relatively rare, most patients for a single infection.Conclusion The detection of respiratory pathogens IgM antibody joint can provide the basis for the treatment of patients with respiratory tract infection.【总页数】2页(P103-104)【作者】李琰【作者单位】吉林省通化市中心医院检验科，吉林通化 134001【正文语种】中文【中图分类】R446.1【相关文献】1.呼吸道病原体IgM抗体联合检测在呼吸道感染诊断中的应用 [J], 廖冰洁;周迎春;李翠;何惠;梁淑慧;朱海龙2.呼吸道病原体IgM抗体联合检测运用于呼吸道感染诊断的临床分析 [J], 文海军;谢珊;岳梦婷;陈培培;周绮娴3.呼吸道病原体IgM抗体联合检测在1236例呼吸道感染中的应用 [J], 文金谦4.呼吸道病原体IgM抗体联合检测在1236例呼吸道感染中的应用 [J], 文金谦;5.呼吸道病原体谱抗体IgM检测在呼吸道感染诊断中应用价值 [J], 张英辉;王玉红;韩笑;董喆;刘静因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
检验与临床通讯(呼吸道九联检)
检验与临床通讯科室：检验科编辑：审核：2016年第1期九项呼吸道感染病原体IgM检测及临床意义呼吸道感染是指病原体感染人体的鼻腔、咽喉、气管和支气管等呼吸系统。
分为上呼吸道感染和下呼吸道感染，上呼吸道感染常见的是急性上呼吸道感染，是呼吸道最常见的一种传染病。
常见病因为病毒，少数由细菌引起。
下呼吸道感染是最常见的感染性疾患，包括急性气管——支气管炎、慢性支气管炎、肺炎、支气管扩张等，由病毒、细菌、支原体、衣原体、军团菌等微生物引起，其防治应遵循预防为主、准确诊断、及时治疗的原则，治疗时必须明确引起感染的病原体以选择有效的抗生素。
尽管呼吸道病原的检测方法多种多样，但确诊感染病原仍非常困难。
细菌的病原体分离培养及病毒的培养组织细胞培养法过去常作为“金标准”，但因其操作复杂、培养时间长、技术难度大、阳性率低等缺点而很难实现。
近年来由于免疫技术的发展，特别是免疫标记技术的广泛应用，如直接、间接免疫荧光法、抗碱性磷酸酶桥联酶标法等标记技术，检测方便，快速且成本低廉适，适合于临床要求，因此在临床上有重要意义。
各检测指标临床意义、采血要求和发检测报告时间如下：嗜肺军团菌（LP）测定（间接免疫荧光法）预期用途人最易感染的是嗜肺军团菌血清1型，非典型性肺炎常伴随有全身症状。
10%的肺炎是由嗜肺军团菌血清1型引起的。
在血清学诊断中，间接免疫荧光法（IFA）是唯一的标准技术。
临床上军团菌感染主要有两种表现形式：肺炎型和庞蒂亚克热型。
军团菌肺炎潜伏期为2~10天，IgM抗体在感染后1周左右出现，并可持续存在3~6个月。
参考范围：正常参考值：阴性肺炎支原体（MP)测定（间接免疫荧光法）预期用途：肺炎支原体引起的肺炎在儿童和青少年中最为常见，由于很难将其固定在载玻片上，因此先将肺炎支原体抗原固定在细胞中。
肺炎支原体可在呼吸道黏膜上皮内潜伏，部分患者无明显症状；但大部分患者为显性感染。
在3岁以下儿童以上呼吸道感染多见，成人以肺炎表现为主。
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腺病毒
3．急性呼吸道疾病（acute respiratory diseases，ARD） 这一综合征由咽炎、发 热、咳嗽和全身不适为特点，常在军队的新兵 中流行，多因突然紧张、劳累、聚集等所致。 此感染多由腺病毒4、7型引起，也可见于3型。 4、腺病毒肺炎约占儿童期肺炎的10%，多由 腺病毒3、7型引起；在青年人腺病毒肺炎的病 死率为8%～10%；肺炎也是新兵急性呼吸 道疾病的一种严重表现。
社区获得性肺炎
社区获得性肺炎（community-acquired pneumonia, CAP）是指在非医院环境中 受感染因子侵袭所发生的肺部炎症，以 及住院后48小时内或特殊病原菌在潜伏 期10天内所患肺炎，又称院外获得性肺 炎。 CAP的发病率为4.7%-11.6%，其中22%51%的CAP需住院治疗；住院CAP死亡率7%， 重症CAP死亡率29%。
病原体
腺病毒 立克次体
方法
ELISA IFA
厂家
Virotech Biomerieux
衣原体
甲型流感病毒 乙型流感病毒 嗜肺军团菌 支原体 副流感病毒 呼吸道合胞病毒
IFA
ELISA ELISA IFA ELISA ELISA ELISA
FOCUS
Virotech Virotech MarDX VIRCELL Virotech Virotech
腺病毒
腺病毒对呼吸道、胃肠道、尿道和膀胱、眼、肝脏等均 可感染 呼吸道感染的典型症状是咳嗽、鼻塞和咽炎，同时伴有 发热、寒战、头痛和肌肉 痛等，包括以下4种不同的 综合征。 1．急性发热性咽喉炎 通常为婴儿和儿童发病， 由C组病毒引起，出现咳嗽，鼻塞、发热和咽喉部溃 疡等症状，这些表现难以与其他病毒引起的轻型呼吸 道感染鉴别。 2．咽结膜热（pharyngoconjunctival fever） 症状与急性发热性咽喉炎相似，但常同时发生结膜炎。 咽结膜热有暴发流行倾向，如游泳池结膜炎，多由B 组腺病毒3和7型所致，愈后尚好，一般无后遗症。
概述
呼吸道感染的病原体种类多且临床症状 相似难以区分，因而快速检测、诊断、 明确病原体感染对临床诊治工作有很大 的帮助。应用呼吸道联合检测试剂盒可 以提供快速诊断，对加强呼吸道疾病病 原学诊断和合理使用抗生素可起到很好 的指导作用。
概述
我科在实际检测和应用中积累了一定的 心得和体会：各种病原体感染的临床意 义，抗体检测的最佳时间，试剂的灵敏 度、特异性、精密度，交叉反应和检测 中的技巧等，希望能和广大同行进行交 流和学习。
病原体
嗜肺军团菌 肺炎支原体 Q热立克次体
潜伏期
2-10天 14-21天 12-19天
IgM产生时间
1周左右 1周左右 2周左右
Igm存在 时间
3-6个月 3-6个月 3-4个月
肺炎衣原体
腺病毒 呼吸道合胞 流感病毒 副流感
30天左右
2-14天 3-7天 1-7天 2-7天
2-3周
1周左右 1周左右 1周左右 1周左右
2-6个月
2-3个月 2-3个月 2-3个月 2-3个月
试剂性能指标
灵敏度和特异性： 验证方法：方法学对比； 灵敏度：检测感染样本的阳性率 DS (%)= (TP/TP+FN) x 100 ； 特异性：检测未感染样本的阴性率 ED (%)= (TN/TN+FP) x 100 ；
对比试剂及样本数量
腺病毒
腺病毒是一种重要的呼吸道病原体，可 引起低龄儿童的肺炎和细支气管炎。 在集体儿童机构中往往同时发生腺病毒 上呼吸道感染及肺炎。腺病毒肺炎80%发 于7～24月婴幼儿。腺病毒肺炎约占病 毒性肺炎的20%～30%。
建议抗病毒药物治疗并注意继发细菌感染的防 治。
呼吸道合胞病毒
呼吸道合胞病毒是导致婴幼儿下呼吸道 感染的重要原因，大约有65%的1岁儿童 感染了呼吸道合胞病毒，几乎所有儿童 在2岁时至少感染过1次，呼吸道合胞病 毒感染引发的支气管炎的住院儿童可增 加其以后发生反复喘息和哮喘的风险， 而且，感染后机体获得的免疫反应维持 时间不长，仍可再次感染。
社区获得性肺炎的分类
（一）细菌性肺炎 1.需氧革兰染色阳性球菌，如肺炎链球菌 （即肺炎球菌）、金黄色葡萄球菌、甲 型溶血性链球菌等。 2．需氧革兰染色阴性菌，如肺炎克雷白 杆菌、流感嗜血杆菌、埃希大肠杆菌、 绿脓杆菌、军团菌等。 3．厌氧杆菌如棒状杆菌、梭形杆菌等。
社区获得性肺炎的分类
（二）病毒性肺炎 如腺病毒、呼吸道合胞病毒、 流感病毒、麻疹病毒等。 （三）支原体肺炎 由肺炎支原体引起。 （四）真菌性肺炎 如白色念珠菌、曲菌、放线 菌等。 （五）其他病原体所致肺炎 如立克次体（如Q 热立克次体）、衣原体（如鹦鹉热衣原 体）、弓形体（如鼠弓形体）、原虫（如 卡氐肺孢子虫）、寄生虫（如肺包虫、肺 吸虫、肺血吸虫）等。
MP肺炎在全球范围内均有发生，有年龄分布特征和季 节高峰等。是各年龄段儿童急性呼吸道感染的常见病 原，在我国社区获得性肺炎（CAP）中占据重要地位。 儿童社区获得性肺炎（CAP）中MP病原可占70%，国外 有文献报道为9.6%-66.7%，在我国流行期间占小儿肺 炎总数的20%-30%，另外有报道CAP患儿MP感染阳性率 与年龄关系：0~6月1.21%，~1岁5.08%，~3岁14.23%， ~5岁18.95%，~10岁28.13%，>10岁30.27%。总体以学 龄儿童为主，但现在年幼儿发病率有所增加。MP主要 通过呼吸道飞沫传播。MP感染暴发流行多见在一个密 闭环境中，如学校、幼托机构、夏令营等，密切接触 是重要因素。而且临床症状不典型，MP感染重症病人 增多，难治性MP肺炎增多。
呼吸道合胞病毒
呼吸道合胞病毒是一种RNA病毒，属于副 粘液病毒。 感染后临床症状不典型。 建议抗病毒治疗，重症病人可以使用三 氮唑核苷做雾化治疗。
流感病毒
该病毒呈季节性周期性流行爆发（12月4月） 甲型流感的流行每年都会发生。 乙型流感的流行只在每3-6年爆发一次， 感染人数超过总人口的25%。 流感病毒降低了人体抵御呼吸道感染的 能力，因此流感经常会造成继发性感染。 建议使用干扰素、金刚烷胺、奥司他韦 等药物进行治疗。
肺炎支原体
小龄儿童（〈5岁〉中肺炎支原体感染经常无 症状而消失或只导致轻度呼吸道感染。由于感 染后没有足够的免疫力存在，会出现需要长时 间康复期并不断加重的再感染（多次）。
肺炎支原体
支原体肺炎后遗问题是由于疾病的严重损害， 致使气道、肺组织的完全修复已不可能而造成 的，已逐渐引起人们的重视。后遗问题最严重 的是出现弥漫性肺间质纤维化、肺功能衰竭。 其他后遗问题还有反复呼吸道感染、支气管哮 喘等。
检测原理
载玻片
检测注意事项
1.试剂复温 2.血清IGG吸附 3.加样 4.温育 5.荧光二抗 6.封片
检测注意事项
检测结果出现假阴现象： （1）检查阴阳性对照实验结果，以确认试剂 盒是否在有效期； （2）检查实验记录，是否严格按照操作规程， 是否漏加、错加酶结合物或样本； （3）是否洗涤时正对孔冲洗、水流过猛，使 固相化的复合体被冲洗掉； （4）加样量、反应时间、温度不够； （5）没有及时观察结果或判断有误。
副流感病毒
副流感病毒1、2和3型在2-4岁儿童中能 引起喉气管支气管炎（哮吼）。血清3型 是引起1岁以下儿童肺炎的重要病原体， 且具有流行性；血清1型和血清2型常与 哮吼有关。 建议使用病毒唑、双黄莲抗病毒治疗。
诊断总则
对于肺炎的诊断，血清学检测是所有实 验室诊断的一部分，其他诊断还包括培 养和抗原或核酸检测。每种方法都是对 其它诊断方法的一种证实和有效的确认。 像肺炎这样难以诊断的临床病例，应该 使用不同的诊断方法同时检测，以获得 最佳的诊断结果，各种方法之间是一种 互补的关系。
嗜肺军团菌
LP是社区获得性肺炎的重要致病菌。在欧洲和 北美军团军肺炎占社区获得性肺炎前3，4位， ICU 重症社区获得性肺炎的第三位。 对人致病的LP有16个血清型，军团菌肺炎8O% 由LP1引起。 美国每年新发军团菌肺炎病例1万例，我国各 省市均有散发病例报告。 夏秋季为军团菌肺炎流行高峰季节，散发病例 全年均有发生。
嗜肺军团菌
人感染军团菌主要是通过吸入被军团菌污染的 气溶胶而导致的，气溶胶是军团菌传播、感染 的重要载体。目前尚无人—人之间直接接触传 播军团菌病的报道。与其他介水传播疾病不同 的是军团菌没有粪－口传播途径，人们也不会 由于饮用了含有军团菌的水而感染。
嗜肺军团菌
军团菌病因其无典型临床特征，很难与其他病 原体所致的肺炎相区别，又因其多系统受累还 需与相关疾病鉴别，故临床诊断比较困难，早 期常被误诊，导致病死率较高。因此早期诊断 对于疾病的转归具有重要的意义。应结合流行 病学资料、临床表现和实验室检查结果进行综 合分析。 治疗建议使用红霉素治疗
Q热立克次体
Q热是由Q热立克次体引起的全身疾病，会造成 发热、非典型性肺炎、肝炎或心内膜炎。由于 从临床标本中分离病原体困难，其诊断基于血 清学方法。常用的检测方法是补体结合（CF） 和IFA。IgM检测中IFA是特异性最好的。 绵羊，牛和少数的山羊是人类的主要传染源。 感染的污染物的吸入是人类接触到Q热立克次 体病菌的主要方式。 大部分病例发于春天或是初夏。
肺炎支原体
潜伏期约为2～3周，一般起病较缓慢，但亦有 急性起病者，常以发热、热型不定、热程1～3 周、多为弛张热及不规则发热，平均4-5 d； 刺激性咳嗽为突出表现，有的酷似百日咳样咳 嗽，多见干 咳，可咳少量黏稠痰，甚至痰中 带血丝。伴喘息。婴幼儿起病急、病程长，可 表现喘憋、呼吸困难；年长儿可伴咽痛、胸闷、 胸痛等症状，肺部常在整个病程中无任何阳性 体征，这是本病的特点之一。少数病例呼吸音 减弱，双肺可闻及干湿性音，这些表现常在X 线改变之后发现.