第3章 实验动物微生物质量控制

Hepatitis A virus
黑猩猩、械 发热、身体不适、厌食、粪便排毒、经口或胃 肠道外途径感染 猴、石蟹猕猴、恶心、腹部不适、黄疸 枭猴 大鼠、小鼠 肌痛、咳嗽，发热、腹 泻、出血、蛋白尿、肾 脏损害，严重致死 吸入感染、啮齿类动 物咬伤、伤口污染
出 血 热 (Korean Hantaan hemorrhagic fever) Virus 淋巴细胞脉络丛 脑膜炎病毒感染 症 (Lyphocytic choriomeningitis virus infection) 狂犬病 (Rabies) Lyphocytic choriomenin gitis virus Rhabdo virus
Germfree animal GF
饲养条件 隔离系统
Isolation system
悉生动物
Gnotobiotics animal GN
隔离系统
Isolation system
无特定病原体动物
Specific pathogen free animal SPF
屏障系统
Barrier system
清洁动物
第三节 清洁级动物与无特定病原体动物
一、概念
Clean animal : 除普通动物应排除的病原外，不携带对动物危害 大和对科学研究干扰大的病原。来源于SPF动物或剖腹 产动物。 血清病毒抗体检测可检测出一定滴度的抗体，病 理切片应无病变。 小鼠病原菌应排除10种，病毒5种；大鼠病原菌应 排除10种，病毒2种。
b.
大量内毒素或切除脾脏可改变吞噬细胞功能，而增加小鼠对病 毒的易感性。
仙台病毒 a. 饲养条件恶化、气温骤变或呼吸道细菌感染，可导致呼吸道疾病 流行。
b. 严重影响体液和细胞免疫应答：抑制大鼠淋巴细胞对绵羊红细胞
的抗体应答。减弱植物血凝素、刀豆素对淋巴细胞的促有丝分裂。
c. 致瘤作用的干扰：感染后的组织学改变酷似浸润性肺癌；对化学
a. b. c.
对宿主产生机械损伤 a. 虫体移行可对组织、脏器造成损伤。 b. 蛔虫幼虫移行，损伤肠壁、肺毛细血管和肺泡壁。 c. 肠道中，与粘液混合形成栓塞，引起肠梗阻或破裂。 产生毒性作用 即寄生虫分泌物、排泄物的毒性。如肝片吸虫导致胆管纤维 变性，肝脏萎缩硬化。 对生理、生化、免疫的影响
第四节 无菌动物与悉生动物
媒介动物
犬、猫、猴
人类临床症状
咳嗽、生痰、咳血、体 重减轻、无力疲倦、发 热、发冷、恶病质
传染途径
吸入传染，或经口腔、 伤口及消化道感染
呼吸道感染 ( Respiratory lnfections)
肠道感染 ( Entericlnfections) 沙 门 氏 菌 病 (Salmonellosis) Salmonella typhimuriumS．enteriti dis S．flexneri， S．Sonnei，及 S．dysenteriae Yersinia Enterocolitica 鼠类、犬、猫、急性肠胃炎，腹痛、腹 灵长类 泻、恶心、发热、厌食 经由食物、饮水感染
一、概念
悉生生物学(gnotobiology)： 1885年pasteur认为宿主动物没有肠道菌群参与，生命难以 维持。无菌动物的问世，证明肠道菌群的存在，并非完全是哺乳 动物生存所必需。 悉生生物学是以无菌隔离技术提供的各种动物为实验对象， 研究实验动物本身以及各种动物与微生物之间相互依存和制约关 系的一门综合科学。
二、人兽共患病
病毒性疾病
疾病 病原 媒介动物
猕猴类
人类临床症状
传染途径
cercopithecine 猴疱疹病毒感染 (B-Virusinfection) Herpesvirus Type 1 马尔堡病毒症 (MarburgViresdisease) Marburg-Virus
肌痛、发热、头痛；迅速发 唾液(咬伤)、抓伤 展的上行性麻痹；感觉异常、 复视、运动失调、潴尿、抽 搐、吞咽困难，直至死亡 肌痛、发热、头痛、器官 坏死、出血性休克、眼结膜 溢血、恶心、呕吐、严重下 痢、白细胞减少，急性死亡 接触、空气传染； 人类之间可经由 血液、分泌物或 精液传染
二、应用
CL动物国际上认为仅适合短期或部分科研实验；我 国认为适用于大多数科研实验，可用于生物医学研 究的各领域。 SPF动物适用于所有科研实验，是目前国际标准级别 的实验动物。
三、微生物、寄生虫潜在感染对实验研究的干扰
1. 实验动物病毒对动物和实验的干扰 鼠痘病毒
a.
实验性结核、X射线、化学毒素、组织移植、肿瘤、运输可使 隐性感染病毒激活。
小鼠、仓鼠
类似流行性感冒的症状， 接 触 感 染 ( 接 触 小 鼠 头 痛 、 肌 痛 、 发 热 、 恶 粪便和尿液 ) ；吸入； 心、呕吐、喉痛、畏光。 咬伤，或由节肢动物 如蚊子、蟑螂传播 头痛、肌痛、发热、恐 咬伤、皮肤伤口或黏 水、狂妄、抽搐、昏厥、 膜感染含狂犬病毒的 死亡 唾液
所有哺乳类
Specific pathogen free (SPF) animal : 指动物体内无特定的微生物、寄生虫存在，但带 有非特定的微生物、寄生虫的动物。主要指不携带潜 在感染、条件致病和对实验干扰大的病原。来源于剖 腹产动物。 小鼠病原菌应排除16种，病毒11种；大鼠病原菌 应排除16种，病毒7种。
第三章 实验动物微生物质量控制
第一节 第二节 第三节 第四节 第五节 第六节 实验动物分级 普通级动物 清洁级动物和无特定病原体动物 无菌动物和悉生动物 实验动物微生物及寄生虫监测 生物安全
第一节 实验动物分级
国际分级法
等级 三级 种类 无菌动物
Germfree animal
饲养条件 隔离系统
Isolation system
致癌作用具有很强的影响。
d. 生殖影响：妊娠4-5天感染，胚胎被吸收；11-12天感染，妊娠期
延长，新生鼠死亡率升高。
小鼠肝炎病毒 a. 在应激条件下，引起小鼠致死性肝炎、脑炎、肠炎
b. 改变机体各种免疫应答参数：降低血清免疫球蛋白水平；影响吞
噬细胞数目。
c. 改变酶系统：增高或降低一些肝脏的酶活性。
乳酸脱氢酶病毒 a. 污染生物材料和移植肿瘤，影响机体免疫。啮齿类动物病毒对生 物材料、细胞系及可移植肿瘤的污染是一个不容忽视的问题。
b. 抑制细胞免疫应答，延缓同种异体排斥，抑制移植物对宿主的反
应。
c. 对肿瘤研究的影响：病毒慢性感染，抑制或延缓肿瘤的形成。 d. 对酶系统：小鼠感染后，一些血清酶活性升高。
志贺氏菌病 (Shigellosis) 肠道耶氏症 (Enteric Yersiniosis)
豚鼠、鼠类、 急性下痢、发热、恶 犬、灵长类 心、有时伴有呕吐、先 急后重、痛经与毒血症
接触或口腔感染
犬、猫、豚鼠、 发热、下痢、腹痛。后 接触感染动物或其粪便， 兔、灵长类 遗症有关节炎，虹膜炎、 亦可经口感染 皮肤溃疡、肝脾脓肿
三、动物烈性传染病
疾病
小鼠脱脚病 (ectromelia)
病原
Mouse virus pox
症状
传播方式
控制
脚、尾、鼻 皮肤伤口、呼吸道、消化 出现皮疹和溃疡， 道 严重出现尾坏死 脱落。
兔 出 血 症 Rabbit hemorrhagic disease
Rabbit hemorrhagic disease virus
非洲绿猴、
痘病毒症
(PoxMrusdisease) 猴痘(Monkeypox)
Pox virus
其他灵长 类
猕猴类
类似天花症状，如发热、 接 触 传 染 或 呼 吸 皮疹、头痛、咽喉痛、虚脱、道感染 偶有腹痛，严重致死
眼睑、脸部、身体或生殖 器有局部的卵圆形或圆形隆 起红斑 接触传染
Pox virus
二级
无特定病原体 动物
Specific pathogen free animal
屏障系统
Barrier system
一级
普通动物
Conventional animal
开放系统
Open system
不携带所规定的人兽共患 病病原和动物烈性传染病 的病原。
国家标准分级
等级 四级 四级 三级 二级 一级 种类 无菌动物
人类临床症状
发热、头痛、恶心、体 重减轻。有可能发生菌 血症，睾丸炎、不育等
传染途径
由接触感染，可经口、 皮肤、呼吸道、尿液、 黏膜感染
全身性感染 (Systemic infections)
精 神萎 靡、 体重减 轻 、接触感染动物的尿液， 呕吐、下痢、发热、黄 由创伤、皮肤或口腔感 疸、突发性死亡 染 淋 巴结 型鼠 疫：发 热 、由蚤传染。另外，接触 淋巴结肿大与发炎。化 受感染的动物，或吸入 脓型鼠疫：全身性尤其 带菌的空气感染。皮肤 是肺、脑膜化脓 伤口或黏膜亦可感染
续表
疾病
麻疹 (Measles； Rubeola) 甲 型 肝 (Hepatitis A) 炎
病原
Paramyxo virus
媒介动物
自然宿主为 人群，灵长类 患病后可感染 人类
人类临床症状
发热、结膜炎、鼻炎、 咳嗽、有红晕小白点于 颊部黏膜，在脸部及其 他部位出现皮疹
传染途径
空气传染、呼吸道分 泌物接触能传染
b.
c.
a.
正常菌群 正常菌群受内外环境变化发生菌群失调，将产生数量和位置的 改变，由非致病菌变为致病菌。 真菌感染对动物和实验的干扰 病原真菌大多为人兽共患病原，病原性弱，为慢性过程，以慢 性增生性炎症为主。 真菌孢子飞扬，污染环境，威胁动物和实验、饲养人员。
3.
4.
寄生虫感染对动物和实验的干扰 掠夺宿主的营养 因种类、数量、寄生部位不同，对动物影响不同。 蛔虫寄生小肠，以半消化物质为食，导致动物发育缓慢、体重 下降营养不良。 螨皮下吸血，钩虫移位吸血导致动物慢性贫血。 体表寄生虫对宿主的干扰 虱、螨吸血的同时分泌有毒素的唾液，刺激宿主神经末梢 产生骚痒。