苦味酸法测定血清肌酐课件

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肌酐的测定

肌酐的测定

丙酮酸 + ATP
乳酸脱氢酶
丙酮酸 + NADH +H+
乳酸 + NAD+
340nm比色
• 2.肌酐亚氨水解酶法:
肌酐酶水解
肌酐
N-甲基内酰 + NH3
溴酚蓝电极
或离子电极
测NH3
酶法优点:特异性高、准确性好
缺点:酶试剂昂贵、来源困难、不易保存
(三)高效液相色谱法:
准确性、特异性好,一般作为参考方法
• 3.速率法(动力学法): 根据肌酐和碱性苦味酸形成复合物
的速度与非肌酐干扰物的不同,且肌酐 的反应速度与浓度成正比的原理。
干扰物质:
a.快反应物质 最初30s内反应 b.慢反应物质 120s以后反应 肌酐反应:31~60s 该法有助于解决反应的特异性,可消除 某些非化学反应的干扰且简单、快速
• 4.双pH法(二次读数法):
肌酐的测定
• 血清非蛋白含氮化合物的一种,肌肉组 织中肌酸或磷酸肌酸代谢的最终产物。
• 肌酐的排出量相当恒定,不受食物蛋白 质含量及尿量的影响而与肌肉发达程度、 性别及年龄有关。
• 肌酐的测定是临床诊断的重要指标。
• 分类: (一)化学法:碱性苦味酸法
1.漂白土碱性苦味酸法 2.阳离子交换树脂法 3.速率法 4.双PH法(二次读数法) (二)酶法: 1.肌酐酰胺水解酶法 2.肌酐亚氨水解酶法 (三)高效液相色谱法
• 3. 0.75 mol/L 氢氧化钠溶液 • 提供碱性环境
• [操作步骤] 见书
• [注意事项] • 1.制备去蛋白血滤液时,钨酸溶液应缓慢
的滴入血清中,边加边摇,将试剂与血 清充分混匀以利蛋白质沉淀。
• 2.呈色后应在30分钟内比色为宜。过久会 使测定管吸光度增加,可能与标本中存 在的非特异性物质有关。

实验九血清肌酐的测定(碱性苦味酸法)

实验九血清肌酐的测定(碱性苦味酸法)
山东医学高等专科学校《生物化学检验》实验教案
教研室 生物化学 课程 内容 生物化学检验 专业 07 检验 指导教师 徐燕 学时 3 实验九 含氮化合物测定 ——两点法测定肌酐
教材 生化检验实验 教学 目的 和要 求 教学 内容 教学 重点 难点 教学 媒体 复习 旧课
掌握两点法测定肌酐的原理及操作方法。 两点法测定肌酐 重点:掌握两点法测定肌酐的原理及操作方法。 难点:把握反应时间。 学生动手操作为主,课堂演示为辅 肌酐测定方法 (一)原理 肌酐与碱性苦味酸试剂反应生成黄红色络合物,在 500nm 处选择线性较好 的两个吸光度值,与通过同样处理的标准液比较,即可计算出血中肌酐含量。 肌酐 + 苦味酸 (二)操作步骤 加入物(ml) 碱性 橙红色复合物 标准管 1.5 0.1 0.1 样品管 1.5
教 学 要 求
试剂空白 1.5
教 学 过 程
讲 授 新 课
工作试剂 标准液 样品
混匀,37 水浴 9min,用试剂空白调零,分光光度计 520nm 处,读取标准管 和样品管的吸光度。 (三)结果与分析
CT控制很重要,10℃以下会抑制 Jaffe 反应,温度升高可使碱 性苦味酸溶液显色加深。 课堂 两点法测定肌酐为什么要严格把握反应时间? 提问 课堂 两点法测定肌酐的原理及操作方法。 小节 布置 简述两点法测定肌酐的注意事项。 作业 参考 钱士匀主编.临床生物化学和生物化学检验实验指导.第 2 版,北京:人民卫生 书目 出版社,2003

肌酐生化方法学

肌酐生化方法学

肌酐生化方法学
肌酐(Creatinine)是一种由肌肉代谢产生的废物,通常通过肾脏排出体外。

肌酐生化方法学是用于测定血清或血浆中肌酐浓度的实验方法。

1. 碱性苦味酸法:这是最常用的肌酐测定方法之一。

在碱性条件下,肌酐与苦味酸反应生成红色化合物,通过比色法或分光光度法测定其吸光度,进而计算肌酐浓度。

2. 酶法:利用肌酐酶将肌酐转化为氨和肌酸,然后通过测定氨或肌酸的生成量来计算肌酐浓度。

酶法具有较好的特异性和准确性。

3. 干化学法:使用纸片或试纸等干式试剂,通过颜色变化或比色法来测定肌酐浓度。

这种方法通常用于快速检测,但准确性可能稍低。

4. 高效液相色谱法(HPLC):这是一种分离和分析化合物的技术,可以用于肌酐的定量测定。

HPLC 法具有高分辨率和准确性,但设备和操作相对复杂。

5. 质谱法:利用质谱仪对肌酐进行分析,通过检测肌酐的特定离子或碎片来确定其浓度。

质谱法具有高灵敏度和准确性,但设备昂贵。

在选择肌酐生化方法时,需要考虑实验要求、设备条件和准确性等因素。

不同方法可能在灵敏度、特异性、操作简便性和成本等方面有所差异,因此应根据具体情况进行选择。

无论使用哪种方法,都应遵循标准操作程序,并进行质量控制以确保结果的准确性和可靠性。

Roche P模块 肌酐(苦味酸)说明书

Roche P模块  肌酐(苦味酸)说明书

质控: 质控使用“订单信息”中列出的材料。 可添加其他适用的质控品。 血清/血浆 使用上面列出的未稀释血清质控材料进行 质控。 可添加其他适用的质控品。 尿液 使用上面列出的 Precinorm PUC 和 Precipath PUC 进行质控。 可添加其他适用的质控品。 应根据各实验室的具体要求采用适合的质 控间隔和限值。检测值应在设定的范围 内。若质控值在设定范围外,各实验室应 采取相应措施。 按可用的政府规章和地方法规进行质控。
稀释液 (NaCl)
6µL 144µL
2µL 180µL
10µL 115µL
cobas c 111 系统-检测设定
血清、血浆和尿液应用参数
测定模式
吸光度
Abs.计算模式
动态
反应方向
上升
波长 A/B
512/583 nm
计算结果 第一次/最后一次 21/26
血清/血浆
补偿
-18µmol/L (-0.2mg/dL)
波长(副/主) 反应方向
单位
试剂移液 R1 R3
样本 样本容量
正常 减少 增加
10µL 10µL 10µL
速率法 A
10/27-37-15-23 (STAT 4/12-19)
570/505nm
上升
µmol/L (mg/dL,mmol/L)
稀释 样本稀释
样本
30µL
样本
样本稀释
样本容量
样本
稀释液 (NaCl)
正常
10µL 6µL 144µL
减少
10µL 2µL 180µL
增加
10µL 10µL 115µL
cobas c 311 系统-检测设定 血清和血浆应用参数

血清肌酐测定的两种常用方法

血清肌酐测定的两种常用方法
Me ia q i me tVo. 3, .1 d c lE u p n 1 2 No 2
反应 的 红 色产 物 是 肌 酐 与 苦 味 酸之 间生 成 1 1和 : 12 0 合物 。一 些肌 酐 的 同系物 或 衍 生 物如 胍 基 : 0络 乙酸 内酰胺 ,以及 乙酰 乙酸 、丙酮 酸 、胆 红素 、 乙 内酰脲 等物质 均能 和苦 味酸发 生反应 ,可 导致肌 酐 测定结果 偏 高 , 量 的假 肌 酐存 在 于红 细 胞 中 ,因 大
样 品 和碱性 苦 味 酸 混 合 后 8 0—10 才 开 始 反 应 。 0s 这样 ,在 2 0~8 s 0 ,出现 “ 口期 ” 窗 。在 窗 口期 内
以肌 酐 与苦味 酸 的呈 色反 应 占主导地 位 。为 了提高 速率 法测 定 的特异性 ,速 率法 测定 时间选 择在2 5—
生成橘 红色 的苦 味酸肌 酐复合 物 的反 应速 率 。该 反 应 属拟一 级反应 动力 学 。在 碱性 反应环 境 中 ,样 品
中的肌 酐或干 扰物质 与苦 味酸 的反应 速度不 同。选 择适 宜 的检测 时间 ,避开 干扰物 质对肌 酐 与苦味 酸 反应 的干 扰 ,提 高肌 酐测定 特异 性 。
Jf 在 18 a ̄ 8 6年 发现 肌 酐 和 苦昧 酸 在 碱 性环 境 中反 应 时 ,可 生 成 一 种 红 色 物 质 。 Gen a rew l 一 d第
个 系统 地研 究 了 Jf a 6反 应 的化 学过 程 ,认 为 Jf f a6
试剂 中加入 了抗 坏血 酸酶 , 有效 的消 除血 清 中小 能
1 苦 味酸速 率 法 苦 味酸速 率 法 测定 是根 据 肌 酐与 苦 味 酸反 应 ,
样品 中的肌 酐在肌 酐酶 的催 化下水 解生 成肌酸 。 在肌酸酶的催化下肌酸水解产生肌氨 酸和尿 素。肌 氨 酸在肌氨酸氧化酶的催化下氧化成甘 氨酸、甲醛 和过 氧化氢 ,最后偶联 Ti e 反应 ,比色法测定。 rdr n 酶法 除镁 离子 ( .0 m )有 明显 干 扰 ,其 4 6L o1 他物质 几乎 无干扰 。该 法采 用 双试 剂测 定 , 第一 在

酶法与苦味酸法检测血清肌酐的相关性

酶法与苦味酸法检测血清肌酐的相关性
两种方法测定肌酐的相关性分析
我院检验科近期更换了肌酐的检测方法,由原来的碱性苦味酸两点法改为肌氨酸氧化酶 终点法测定肌酐。由于方法的改变,导致测定结果以及参考范围有所改变,为此有临床医生 反应不太适应。现对两种测定方法的相关性进行分析,求出两者的线性方程,以供临床参考。
1.材料与方法 1.1 样本 依据肌酐测定的初步结果,收集 100 份我院患者血清,置-20 度冰箱保存备 用。 1.2 试剂 两种检测方法试剂均来自山东潍坊 3V 公司的试剂盒。 1.3 校正品 RANDOX 校正液,批号为 634UN 1.4 质控品 RANDOX 质控品,批号为 881UN 和 557UE 1.5 数据处理软件 Microsoft Excel 1.6 数据收集 依据 NCCLS(美国国家标准化委员会)文件 EP9-A2 要求,根据初步 检测结果,选择 40 份测定值符合分布范围要求的样本进行双份反向测定,记录检测结果。 依据 NCCLS 文件 EP9-A2 要求,对结果进行方法内离群值检查、方法间离群值检查、X 值 合适范围检验。
25 229.5
307 205
34 371.7
35 586.5
289 434.5
16
17
18
1165.0 1247.3 1020
853 887.5 753.5
26 228.5
27 210.0
28 528.3
200.5 188.5 391.5
36
37
38
489.4 103.8 70.9
373.5 115 83.5
间不足导致结果相对肌氨酸氧化酶法偏低。
通过两种方法的相关性分析,求得线性方程为 Y=0.6833X+44。笔者将以上 40 份肌氨 酸氧化酶法结果分别代入方程,求得 Y 值与碱性苦味酸两点法测定值作 T 检验分析,求得 P 值为 0.9996,P>0.05,两者无显著性差异。故如有必要,可以根据该线性方程将两者结果 进行转换,以供临床参考使用。

血清肌酐(Crea)测定苦味酸法标准操作程序SOP文件

血清肌酐(Crea)测定苦味酸法标准操作程序SOP文件
稳定性:2-8℃7天
-20℃长期储存
3.2 尿液:新鲜标本、不要冷冻、不要加防腐剂
稳定性:2-8℃4天
-20℃长期储存
4 试剂
4.1试剂
来源:ROCHE配套试剂(详见试剂说明书)。
贮存条件及稳定性:未打开试剂盒:2-8℃储存至效期末
R1:打开后机上稳定28天
R2:打开后机上稳定28天
准备:直接使用。
女性:28-217mg/dl(2470-19200umol/l)
8 性能指标
本法线性范围为血液:0.1-25mg/dl尿液:0.1-500mg/dl,不准确度: ±15%,不精密度血液:CV=3.4%,尿液:CV=1.9%,灵敏度为0.1mg/dl。
9 注意事项
9.1R1中含有NaOH溶液,具有腐蚀性;R2中含有苦味酸,具有毒性。如果不慎沾上,请用大量的清水清洗;如果进入眼睛应找医生处理。
9.5血清标本出现溶血、脂血或黄疸等的干扰情况参见抗干扰能力。
ABCD医院
生化实验室
文件编号:
ABCD-SOP-04-20
血清肌酐(Crea)测定苦味酸法
版序:ABCD
页码:第3页,共4页
9.6不能使用苦味算法检测婴儿的溶血标本,因为此使其HbF的浓度大于5%,在此情况下,应该使用酶法肌酐检测。
9.7 换算公式:mg/dl×88.4 =mol/l
SENSITIVITY LIMIT(HIGH) [ 1.1 ]
R.VOLUME(R1) [ 180 ]
S1 ABS(LOW) [ 0 ]
R.VOLUME(R2) [ 0 ]
S1 ABS(HIGH) [ 4000 ]
R.VOLUME(R3) [ 36 ]
9.2 由于敞开口的试剂R1会吸收CO2,致使定标不稳定。一次建议使用试剂罩隔离绝大部分试剂和空气的接触。减少吸收CO2。

苦味酸法测定血清肌酐 ppt课件

苦味酸法测定血清肌酐 ppt课件

2020/10/15
11
2020/10/15
2
精品资料
一、实验目的
1.掌握血清肌酐的测定原理和方法。 2. 了解肌酐测定的参考范围及临床意义。
2020/10/15
4
二、实验原理
在碱性条件下,血清中的肌酐(Cre)苦 味酸反应,生成橘红色的苦味酸肌酐复合物。 检测505nm波长处吸光度的变化,可知被测血 清中的肌酐的浓度。其反应式如下:
肌酐+碱性苦味酸 OH红- 色物质
2020/10/15
5
三、器材
1、主要器具
试管与试管架
微量移液器
2020/10/15
三用水浴箱
可见分光光度计
6
四、试剂
1.试剂:R1:氢氧化钠
R2:苦味酸
工作液:将R1与R2按1:1的比例混合面成。
2.肌酐标准应用液(133μmol/L)
2020/10/15
实验五 苦味酸法测定血清肌酐
2020/10/15
1
肌酐(CRE)是人体内肌酸代谢的最终产物, 由肾排出,少部分来自食物,大部分在体内生成, 血肌酐的浓度主要取决于GFR。 血肌酐的测定对中晚期肾疾病临床意义较大。 肌酐测定方法有化学法和酶法。 酶法主要有三种类型:肌氨酸氧化酶法、肌酐氨基 水解酶法和肌酐亚氨基水解酶法。
7
五、操作步骤
取试管5支,按下表操作
加入物(ml) 空白管
标管
S1
S2
测定管(U) U1 U2
血清
133μmol/L肌酐
标准应用液
—— ——
—— 0.15
—— 0.15 0.15 0.15 —— ——
生理盐水
0.15
—— —— —— ——

肌酐500讲课PPT课件

肌酐500讲课PPT课件
疗。
基因治疗:探 索基因疗法, 通过改变基因 表达来治疗肌
酐500。
干细胞治疗: 利用干细胞移 植技术,修复 受损的肾脏功
能。
综合治疗:结 合药物治疗、 基因治疗和干 细胞治疗等多 种方法,提高
治疗效果。
预防措施的研究
加强公众健康教育,提高人 们对肌酐500的认知和预防 意识
针对不同病因,制定个性化 的预防方案
肌添加酐副5标0题0讲课PPT 课件
汇报人:
目录
PART One
肌酐500的概述
PART Three
肌酐500与肾脏疾 病的关系
PART Five
肌酐500的案例分 析
PART Two
肌酐500的检测与 诊断
PART Four
肌酐500的治疗与 预防
PART Six
肌酐500的未来研 究方向
肌酐500的概述
新的检测方法研究
介绍新的检测方法,如生物标 志物检测、质谱技术等。
探讨这些新方法的优势和局限 性,以及在肌酐500检测中的 实际应用。
分析这些新方法对未来研究方 向的影响和推动作用。
展望未来可能出现的更高效、 更准确的检测方法。
新的治疗方法研究
药物治疗:研 究新的药物, 针对肌酐500 的病因进行治
肌酐500与肾小 球肾炎的病程和 预后密切相关
肌酐500与其他肾脏疾病的关系
肌酐500是肾脏疾病的重要指标之一,可以反映肾脏功能状况。 肌酐500可能与多种肾脏疾病有关,如肾小球肾炎、肾盂肾炎等。 肌酐500可能导致肾脏损伤和肾功能衰竭,需要及早诊断和治疗。 了解肌酐500与其他肾脏疾病的关系有助于更好地诊断和治疗肾脏疾病。
肾移植:通过移植健康的肾脏来替 代受损的肾脏功能,从根本上解决 肌酐升高问题。

实验十二去蛋白苦味酸法测定血清肌酐-副本

实验十二去蛋白苦味酸法测定血清肌酐-副本
回收率 受无蛋白滤液PH影响,滤液PH在3~4.5时,回 收率为85%~90%,PH在2以下时,回收率为 100%
线性范围 肌酐含量在1320μmol/L以内线性良好
苦味酸一定要纯,否则要纯化。若含有杂质, 则使试剂空白吸光度增加而影响测定结果。
评价
特异性 血浆中的蛋白质和糖、丙酮、维生素C、丙酮 酸、乙酰乙酸等均能与碱性苦味酸发生非特异 性反应,反应速度稍慢。红细胞中这类物质最 多,约有60%,血浆或血清约20%,尿约5%, 故血清和血浆需制备无蛋白滤液后测定。
过程
结果计算: 肌酐浓度(umol/L)= (△A测定 / △A标准) ×C标准 (其中△A为吸光度的变化,C标准为标准品浓度。)
注意事项
必须严格的控制反应的时间,以尽量避免 快速或慢速反应假肌酐物质的干扰
溶血产生的红细胞内非特异性物质将干扰 反应
胆红素可引起负偏差。某些全自动生化分 析仪,能设置空白速率参数,能去除胆红 素负干扰。
速率法和苦味ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ法测定 血清肌酐比较
速率法原理
肌酐在肌酸脒基水解酶作用下生成肌氨酸, 肌氨酸在肌氨酸氧化酶作用下生成过氧化氢, 后者在过氧化氢酶作用下与4-氨基安替比林、 ESPAS反应生成呈色产物紫红色醌亚胺,在 546nm处引起吸光度增高,通过监测546nm 处吸光度值的上升来测定肌酐的浓度
过程
评价
特异性 本法基本上可消除生理浓度的葡萄 糖、维生素C和蛋白质等的干扰。回收试验 96.7% ~100.4%,平均98.5%。
线性范围 肌酐在1760μmol/L范围内线性良 好。
去蛋白苦味酸法测定 血清肌酐
去蛋白苦味酸法原理
血浆或血清标本经除蛋白处理后,肌酐与 碱性苦味酸产生Jaffe反应,生成橙红色的苦 味酸肌酐复合物,在510nm和520nm间测定 吸光度,与肌酐含量呈正比。尿液标本可 稀释后直接测定。

酶法、苦味酸法及干化学法测定血清肌酐的方法学分析

酶法、苦味酸法及干化学法测定血清肌酐的方法学分析
1 沈晓明 ,-J 7 儿科学. ]  ̄. 北京 : 民卫生 出 人 版 社 ,0 8:. 20 1
酶 法 、 昧酸 法及 干化 学 法测 定血 清肌 酐 的方 法 学分 析 苦
孔凡 斌
资 料 与 方 法 仪器 : 湿 化 学 分 析 仪 : L M U ① OY PS
4 6 1 ,=0 7 8 , . 1 1r .7 0 两法 无 显著 性差 异 ;
0 9 氯 化 钠 注 射 1 8 ×3. 3 = .% 60 33% 5 99 mI 5 碳 酸 氢 钠 注 射 液 约 5 .4 , %
7 .6 l如需 要 制 一 组 30 l 3 84 m , 0 m 的 :2 :1 静滴 , 液 则按 以 卜 公式估算 出 3 : :2 1的』 量分别是糖 :0 6 % , :0 f 】 30× 2 盐 30X 3 . 3 , :0 4 6 % , 33 % 碱 30X .7 临床上可按此 公式类推 计算使用 。 常 I 腹 { t f 剑 "J 水 小 Jl i 儿, …丁 没 脱 成 的 12张 液 体 , r / 临 f 他 J 盐 水 或林 氏 液进 行补 液 , l卜 j 补 液 难 以计算 , 也 符合 治疗规 程 , 儿窬 易f现 他 l题。新版 的《 l I l J 儿科 》 小 儿腹泻 脉 溶 液 t 选抒 l 剑 : ・ 类 捉
公 式 方 法 : 过 仔 细 的 计 算 , 临 床 使 通 经 用 没 有任 何 不 良反 应 结 果 : 基 层 医 院 使 液体 疗 法 简便 易行 , 量 准确 , 全有 效 。 补 安 关键 词 基 层 医 院 配 制 12张 液 体 / 简 易方 法
d i 1 . 9 9 j i n 1 0 —6 4 . 0 0 o:0 3 6/.s . 07 s 1x 2 1.

测定血清肌酐酶法和Jaffe反应(国产苦味酸法)比较

测定血清肌酐酶法和Jaffe反应(国产苦味酸法)比较

测定血清肌酐酶法和Jaffe反应(国产苦味酸法)比较医学研究杂志年月第卷第期 ?论善起的剖宫产率升高的源头。

疼痛、情感、睡眠及身体活动方面均优于对照组。

本研究结果表明经过医护人员的合力心理干预综上所述,经过医护协同模式干预的孕产妇及其后的孕妇及其家属在人院分娩时自愿选择的分娩方家属通过对孕产知识的充分理解在分娩方式的选择式中剖宫产率明显低于对照组,阴道分娩率明显高于上极大降低了不必要的社会因素剖宫产率及由此带对照组,心理评分时焦虑指数明显低于对照组,差异来的对孕产妇本人、家庭的损害及社会资源的浪费;有显著性意义。

在医护人员对孕妇进行干预的过程医护协同模式是一种值得推广的能有效降低社会因中,孕妇及其家属已经认识到阴道分娩利大于弊,对素剖宫产率的方法。

但在其运作中我们已发现一些分娩过程中将面临的问题包括分娩疼痛、与医护人员问题:①样本量需要进一步加大;②运作周期相对较配合等方面都已有了初步了解,因此不再惧怕和焦短、分组不够细致,下一步我们将对纳入研究的女性虑,能从心理上了解阴道分娩是一个瓜熟蒂落的过进行进一步细化分组、并跟踪随访;③目前我国孕妇程,从而坦然面对。

普遍存在营养过度化问题,该问题造就了许多巨大儿研究结果显示干预组孕产妇及围生儿的结局均及孕期并发症,变相增加的剖宫产率,而孕期营养的优于对照组,这主要得利于医患的充分沟通后在有效指导对于产科医生来说并非专业,因此有待于专业的降低社会因素造成的剖宫产率的同时还能使孕妇在营养医生的加盟,下一步我们将就以上问题进行一步产程中配合医护人员的必要治疗,从而从心理上减少研究,以共同打造幸福家庭、苗条妈妈和健康宝贝。

参考文献了由于精神高度紧张引起的产程停滞、产后出血及在王临虹,赵更力,鲍月琴年初产妇剖宫产率及适应征的变化产程出现轻度异常时由孕妇及其家属提出的社会因分析,中华围产医学杂志,, : :素剖宫产的发生,及由剖宫产而引发的切口感染、静谭卫强.剖官产率升高的原因分析及对策.中国妇幼保健, ,脉血栓形成、湿肺、喂养困难等母婴并发症的发生。

苦味酸法测定血清肌酐ppt课件

苦味酸法测定血清肌酐ppt课件
9
八、临床意义
肌酐经肾小球滤过后不被肾小管重吸收,通 过肾小管排泄。只有当GFR下降到正常的1/3时, Scr才明显上升,是反眏GFR减退的后期指标。
增高:见于各种原因引起的肾小球滤过功能减退: 各种肾病,急慢性肾衰竭、重度充血性心力衰竭、 心肌炎等。
降低:见于尿崩症、进行性肌萎缩、白血病、贫血

2
一、实验目的
• 1.掌握血清肌酐的测定原理和方法。 • 2. 了解肌酐测定的参考范围及临床意义。
3
二、实验原理
在碱性条件下,血清中的肌酐(Cre) 苦味酸反应,生成橘红色的苦味酸肌酐复合 物。检测505nm波长处吸光度的变化,可知 被测血清中的肌酐的浓度。其反应式如下:
肌酐+碱性苦味酸OH- 红色物质
血清
—— —— —— 0.15 0.15
133μ mol/L肌
酐标准应用液
——
0.15 0.15 —— ——
生理盐水
0.15 —— —— —— ——
R1
0.75 0.75 0.75 0.75 0.75
混匀后,37度R2水浴箱放置,0.27分5钟后,0波.7长5 5050nm.7处5,0空.7白5管调0.零75,
4
三、器材
1、主要器具
试管与试管架
微量移液器
三用水浴箱
可见分光光度计
5
四、试剂
• 1.试剂:R1:氢氧化钠

R2:苦味酸
• 工作液:将R1与R2按1:1的比例混合面成。
• 2.肌酐标准应用液(133μ mol/L)
6
五、操作步骤
• 取试管5支,按下表操作
加入物(ml) 空白管
标准管
S1
S2

血清肌酐苦味酸法测定

血清肌酐苦味酸法测定

血清肌酐(Creatine)苦味酸法测定1.实验原理不去除蛋白的Jaffe碱性苦味酸连续监测比色法。

肌酐与苦味酸在碱性条件下形成橙红色复合物,在固定的时间内吸光度增加速率与样品中肌酐浓度呈正比。

肌酐+ 苦味酸肌酐苦味酸复合物2. 标本采集2.1 病人准备:早晨空腹采血(空腹12小时左右),静脉采血。

2.2 类型:血清,肝素血浆,尿液。

3. 标本存放:血清、血浆的稳定性:4~25℃保存可稳定7天;-20℃保存至少可稳定3个月。

尿液的稳定性:20~25℃保存可稳定2天;4~8℃保存可稳定6天;-20℃保存可稳定6个月对尿液用蒸馏水作1:49稀释后检测,结果乘50后报告。

4. 标本运输:常温条件下运输5. 标本拒收的标准:细菌污染的标本不能作测定。

6. 实验材料6.1 上海申能肌酐检测试剂盒(142 1717170 1 试剂1:6×64ml+试剂2:6×16ml)。

6.1.1 试剂组成:试剂1(R1):氢氧化钠0.16mol/L试剂2(R2):苦味酸 4.0mmol/L6.1.2 试剂准备:试剂为即用式。

6.1.3 试剂稳定性与贮存:试剂保存于2~25℃,若无污染,可稳定至失效期。

试剂不可冰冻。

6.1.4 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不能继续使用。

6.1.5 注意事项:试剂1中含氢氧化钠。

请按以下条例处理:R36/38: 刺激眼睛和皮肤。

S26:如与眼睛接触应立即用大量水冲洗并请医生诊视。

S37/39:戴上手套并采取合适的眼/脸的防护。

S45:如发生事故或感觉不适立即请医生诊视。

试剂2中含苦味酸。

吸入、接触皮肤、吞咽将会中毒。

戴上手套并采取合适的眼/脸的防护。

如与皮肤接触应立即用聚乙二醇400(DAB8)或大量水冲洗。

如情况严重,立即请医生诊视。

使用实验室试剂应采取必要的预防。

6.2 校准品:使用DiaSys公司提供的TruCal U校准品对自动分析仪进行校准,具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。

医学检验·检查项目:血清肌酐_课件模板

医学检验·检查项目:血清肌酐_课件模板
正常值: 男:44~133μmol/L,女:70~
106μmol/L。
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相关检查: 尿碱性磷酸酶(UALP)、尿谷氨酰转肽酶 (UGGT)、尿总氮、唾液肌酐、刚果红试验、 已糖胺全酶。
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相关症状: 下肢弥漫性水肿、呈肾上腺素能依赖性、 抗利尿激素(ADH)分泌增多、间歇性血尿、 慢性肾功能不全、肾病性浮肿面容。
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相关疾病: 盂输尿管连接部梗阻、小儿肾病综合征、 小儿IgA肾病、小儿肾小管-间质肾炎、小 儿多囊肾。
谢谢!
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相关疾病:
肾小管间质性肾炎葡萄膜炎综合征、出血 性休克和脑病综合征、老年人高血压、疝 气、妊娠期急性肾功能衰竭、挤压综合征、 小儿糖原贮积病Ⅶ型、小儿遗传性大疱性 表皮松解症、小儿透析失衡综合征、巴特 综合征、高钙血症肾病、白血病肾损害、 冷球蛋白血症肾损害、尿毒症性心包炎、 利德尔综合征、小儿先天性肾
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临床意义:
mol/L,病情继续恶化,有发展为尿毒症 的趋势;>400μmol/L则预后较差。如仅 BUN升高,而Cr正常,则可能为肾外因素 引起,如消化道出血或尿路梗阻。 (2)血 肌酐减少,主要见于进行性肌肉萎缩、贫 血、白血病等。
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临床意义:
(1)血肌酐增高:由于肾脏储备和代 偿能力很强,故早期或轻度肾小球滤过功 能受损时,血肌酐正常。只有当肾小球滤 过功能降至正常人1/3时,血肌酐才明显 增高,故不能反映早期肾功能受损,对晚 期肾病临床意义较大。与BUN同时测定意 义更大,二者同时升高,说明肾功能严重 受损,当Cr>200μ
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肌酐(CRE)是人体内肌酸代谢的最终产物, 由肾排出,少部分来自食物,大部分在体内生成, 血肌酐的浓度主要取决于GFR。 血肌酐的测定对中晚期肾疾病临床意义较大。 肌酐测定方法有化学法和酶法。 酶法主要有三种类型:肌氨酸氧化酶法、肌酐氨基 水解酶法和肌酐亚氨基水解酶法。
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一、实验目的
1.掌握血清肌酐的测定原理和方法。 2. 了解肌酐测定的参考范围及临床意义。
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二、实验原理
在碱性条件下,血清中的肌酐(Cre)苦 味酸反应,生成橘红色的苦味酸肌酐复合物。 检测505nm波长处吸光度的变化,可知被测血 清中的肌酐的浓度。其反应式如下:
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九、方法学评价
1.化学法:即苦味酸法,该法成本低廉,方法简便, 但试剂具毒性和腐蚀性。
2. 酶法:准确度和灵敏度高,采用两点速率法,适合 于自动生化分析仪检测。
七、注意事项
1.血标本无溶血,应及时处理。 2.工作液开盖混合后,应置2-8度避光保存,稳定期3天。
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八、临床意义
肌酐经肾小球滤过后不被肾小管重吸收,通过肾 小管排泄。只有当GFR下降到正常的1/3时,Scr才明 显上升,是反眏GFR减退的后期指标。 增高:见于各种原因引起的肾小球滤过功能减退:各种 肾病,急慢性肾衰竭、重度充血性心力衰竭、心肌炎 等。 降低:见于尿崩症、进行性肌萎缩、白血病、贫血有不当之处,请联系网站或本人删除。
六、计算
血清肌酐(mmol/L)= ΔAU/ΔAS×133μmol/L
参考区间:男性:62-115μmol/L 女性:53-97μmol/L
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工作液:将R1与R2按1:1的比例混合面成。
2.肌酐标准应用液(133μmol/L)
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五、操作步骤
取试管5支,按下表操作
加入物(ml) 空白管
标准管
S1
S2
测定管(U) U1 U2
血清
133μmol/L肌酐
标准应用液
—— ——
—— 0.15
—— 0.15 0.15 0.15 —— ——
生理盐水
0.15
—— —— —— ——
R1
0.75
0.75 0.75 0.75 0.75
R2
0.75
0.75 0.75 0.75 0.75
混匀后,37度水浴箱放置,2分钟后,波长505nm处,空白管调零,
先读取S1、U1吸光度,5分钟后再读取S2、U2吸光度。
肌酐+碱性苦味酸 OH红- 色物质
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三、器材
1、主要器具
试管与试管架
微量移液器
三用水浴箱
可见分光光度计
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四、试剂
1.试剂:R1:氢氧化钠
R2:苦味酸
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