端脑素在缺氧缺糖环境中对PAJU细胞的保护作用
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ｌ％胎 牛 血 清 、５ ｍｇ Ｌ Ｇ １ 、２ ０ ０ ／ ４ ８ ｍｍｏ／ ｌ
Ｏｊｃｖ Ｉ ｓｓ ｄ ｅｉ ｅｔａｅ ｈ ｔ ｉ ｂｅｔｅ ｎ柏ｌ ｔ ｙｗ ｖｓｇ ｔ ｔｅＷｏ￣ｔｅ ｉ￣ ｕ ｎ ｉ ｄ ｖ
ｅｆ ｔ ｏ ｅｎｅ ｌ Ｔ Ｎ ｉ ｏ ｙ ｅ一 ｌｏ ｆ ｃｓ ｆｔｌ ｃ ｈ ｉ Ｌ ）ｎ ｘ ｇｎ ｇ ｃ ｅ ｅ ｅ ｐ ｎ（ ａ － ｕｓ
（ｘ ｇ ｎ ｇｕ ｏｅ ｄ ｐ ｉａｉｎ，ＯＧ 条 ｏ ｙ ｅ — ｌｃ ｓ ｅ ｒｖ ｔｏ Ｄ）
件下对神经元凋亡的影响 ，以进 一步 了解
端脑素 ； 氧糖 剥 夺 ； 经保 护 神
Ａ 翦艺 Ｉ 嚣
＿ ｌｌ Ｉ０ ｌ１ ＿ ｊ
是 否具有 神经保护作用。 自Ｇ ｌｂ ｒ 等 ｏｄ ｅｇ 利用套 箱型缺氧 工作 室 ，成功建立 了原代培养神经细胞缺血模
『＿ ３
，
谷氯酰胺 ，高糖 （ 葡萄糖 ４ ５ ／ ） ．ｇ Ｌ 、低 糖 （ 葡萄糖 １ ０ ／Ｌ）ＤＭＥ 及 Ｆ１ ．ｇ Ｍ 自 ２购 Ｇｂｏ ｉｃ 公司 ， 蛋白酶 （ ） 二 甲基亚砜 、 胰 粉 、 Ｂ Ａ、碘化 丙啶购 自Ｓｇ 公司 ，兔抗 人 Ｓ ｉｍａ
ＨＩ —ｌ ［ 克 隆 抗体 购 自Ｊａ ｙ Ｂ ｏｅｈ Ｆ 多 ｏ ｉｍａ ｉｔｃ
ＨＩ －１ 生 理 活 性 主 要 取 决 于 ＨＩ －１Ｏ Ｆ 的 Ｆ Ｃ
Ｌ谷 氨酰胺 的高 糖 （ 葡萄 糖 ４． ｇ／Ｌ） ５ ＤＭＥ 的 全培养基Ｉ加压筛选培养 ，置 Ｍ 训
３￣ ７ Ｃ、饱 和 湿 度 、 ５ Ｏ 和 ９ ％空 气 的 含 ％Ｃ ， ５
（ＧＤ ｍ ｄｌｎｖ ｒ ｙ ｕｉ Ａ Ｕ Ｌ ｅ ＿ ０ ） ｏｅ ｉ ｉｏｂ ｓｇ Ｐ Ｊ 一丁 Ｎ ｃ¨ｌ ｔ ｎ 舱
ｔｌｎ ｅ ｈ ｌ ｅｅ ｃｐ ａｉ ｎ，ＴＬ … Ｎ） 是一种在哺育动物 端脑神经元体树突膜特异性表达的黏附分 子。目前 已知端 脑素不 仅参 与了脑内免疫 调节 ， 而且促进神 经元树 突生长【 我们的 ２ 】 。 先期 实验 已经证实端脑素可以减轻 ｐ淀粉 样 蛋白对神经母瘤细胞Ｐ Ｕ细 胞的损害 ＡＪ
型后 ，神 经 元 缺 氧 缺 糖 模 型 又称 氧 糖 剥 夺 ＩＯ 模 型 ， ￣ ＧＤ Ｐ 被广泛用于研究离体水平 脑 缺 血 损 伤 【，这 一 模 型 不 仅 能 够 模 拟 整 体 ６ １
长沙市晶益气体公 司，流式细胞计数仪购
自 Ｂ ｕ ｖ ｒ ｃ ｉ－ ａ ｓ Ｄ Ｇ ａ ａ Ｇ ａｅ Ｂｏ Ｌ ｂ 。 １２ 实 验 方 法 ． １２ １细 胞 培 养 ．． Ｐ Ｕ— Ｌ ＡＪ Ｔ Ｎ与Ｐ Ｕ－Ｎ Ｏ均 使 用 含 ＡＪ － Ｅ
院 药理教 研 室； 广 西 医科 大 学生 物 化 学教 研 室 ５
摘 ｌ 。０ ｌ 餐 ＿ 娶 ｌ ｒ ｌｉ ｌ ＿ ｌ ｌ ｌ
目的：探索端脑 素在缺氧缺 糖环境 中是 否 对神经元具有保护作 用。方法：建立直接
氧 糖 剥夺 （Ｇ ） 经 元模 型并 验 ｉ Ｏ Ｄ ＯＤ 神 ￣Ｇ模
ｗｈｃ ｘ １ ｓ ｎｒ ￣ Ｔ Ｎ ａｄ Ｐ Ｊ —ＮＥ ｅ ｉ ｉ ｅ ｐ ￣ ０ｆ Ｉ Ｌ ｎ Ａ Ｕ ｈ ％ ０ ｃｌ ｎ Ｉ】ｅ
ｄｐｖｔ ｎ（Ｇ ）ｎｕｏａ ｍ ｄ１ ｅｈｄ： ｅｒ ａｉ Ｏ Ｄ ｅｒ ｌ ｏｅ．Ｍ ｔｏｓ ｉ ｏ ｎ
Ｅｓａ ｌｈ ｎ ｆ ｎｕ ｏ ｘ ｇ ｎ ｇｕ ｏｅ ｄｐｉａ ｉ ｔｂｉ ｍｅｔ ｏ ｅ ｒｎ ｏ ｙ ｅ ｌｃｓ ｅ ｒ ｔ ｎ ｓ ｖ ｏ
水平脑缺血 损伤 ， 并且还是 离体水平 评价 药物神经保护作用 的有效手 段。脑组织对 氧的需求量高 ，对缺血 缺氧非常敏感 ，缺 氧诱导 因子 （ ｙ ｏ ｉ ｎ ｕ ｉｌ ｆｃｏ ， ｈ ｐ ｘ ａ ｉｄ ｃ ｅ ａ ｔｒ ｂ ＨＩ Ｆ）为氧调节性蛋 白，其 蛋白稳定性和 转 录活性 均受 细胞 内氧浓 度 的调节 ，
Fra Baidu bibliotek
在单纯缺血清状态下对Ｐ Ｕ细胞有保 ＡＪ 护 作 用 ［１ ４ ，因 此 ，研 究 其 在 氧 糖 剥夺
公司 ，羊抗 兔荧光标记二抗 ＩＧ Ｉ ｇ —ＦＴＣ购 自Ｓ ｎａ Ｃ ｕ 公司 ， Ｏ， ａ ｔ ｒ ｚ Ｃ 培养 箱购 自德 国
Ｈｅ ａ ｓ 司，荧光 倒置相差光学显微镜 ｒｕ 公 （ ＴＳ１ ０ ０ ）购 自Ｎｉ ｏ ｋ ｎ公 司，９ ％ Ｎ， ３ 、 ２ Ｏ， ％Ｃ 混 合气又称标准 气体购 自 ％ ￣５ Ｏ，
神经保护疗法是治疗缺血性脑血 管病
胞瘤细胞 Ｐ Ｕ细胞 株 （ ＡＪ ＰＡＪ ＴＬ Ｕ— Ｎ） 由芬兰 赫 尔辛 基大 学 生命 科学 院 惠赠 ； 无端脑素表达且转染空载体具有 ｎ ｏ 性 ｅ抗
的 Ｐ Ｕ 细 胞 株 （ ＡＪ ＮＥ ＡＪ Ｐ Ｕ— Ｏ）为 我 们
有前途的方法之一 ，可以与其他治疗方法 同时进行 ，并 增强疗效 。因此 ，探索新的
神 经 保 护 因子 一 直 是 神 经 科 学 研 究 的 热 点 之 一 。 细 胞 间黏 附 分 子 ５ （ｎ ｅ ｃ ｌ ｌｒ Ｉ ｔｒ ｅｌ ａ ｕ
ａｄｈｅ ｉ ｎ ｍ ｏ ｅ ｕ ｅ－５， Ｉ ｓｏ ｌｃ ｌ ＣＡ Ｍ 一５，
在 中南大学湘 雅二 医院基 因中心建立 。
１ １２试 剂 与 仪 器 ．． 胎牛 血 清 ， １ ， Ｇ４ ８
Ｄ Ｉ ０ ３６ ／ ． ｓ ．０ １ ８ ７ ．０ ０ １ ．０ Ｏ ：１ ．９ ９ ｊｉ ｎ １ ０ — ９ ２ ２ １ ．８ １５ ｓ
端脑素在缺氧缺糖环境 中
对 Ｐ Ｕ细胞 的保 护作 用 ＡＪ
杨和平 ・ 彭熠 。 杨力强 苏上贵 。 农田泉’ ， １ 西中医学院附属瑞康 医院神经 内科 ；２中南大学 湘雅二 医院神经 内科 ；５湖南省人 民医院神 经 内科 ；４广西 中医学 广
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谷氯酰胺 ，高糖 （ 葡萄糖 ４ ５ ／ ） ．ｇ Ｌ 、低 糖 （ 葡萄糖 １ ０ ／Ｌ）ＤＭＥ 及 Ｆ１ ．ｇ Ｍ 自 ２购 Ｇｂｏ ｉｃ 公司 ， 蛋白酶 （ ） 二 甲基亚砜 、 胰 粉 、 Ｂ Ａ、碘化 丙啶购 自Ｓｇ 公司 ，兔抗 人 Ｓ ｉｍａ
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长沙市晶益气体公 司，流式细胞计数仪购
自 Ｂ ｕ ｖ ｒ ｃ ｉ－ ａ ｓ Ｄ Ｇ ａ ａ Ｇ ａｅ Ｂｏ Ｌ ｂ 。 １２ 实 验 方 法 ． １２ １细 胞 培 养 ．． Ｐ Ｕ— Ｌ ＡＪ Ｔ Ｎ与Ｐ Ｕ－Ｎ Ｏ均 使 用 含 ＡＪ － Ｅ
院 药理教 研 室； 广 西 医科 大 学生 物 化 学教 研 室 ５
摘 ｌ 。０ ｌ 餐 ＿ 娶 ｌ ｒ ｌｉ ｌ ＿ ｌ ｌ ｌ
目的：探索端脑 素在缺氧缺 糖环境 中是 否 对神经元具有保护作 用。方法：建立直接
氧 糖 剥夺 （Ｇ ） 经 元模 型并 验 ｉ Ｏ Ｄ ＯＤ 神 ￣Ｇ模
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水平脑缺血 损伤 ， 并且还是 离体水平 评价 药物神经保护作用 的有效手 段。脑组织对 氧的需求量高 ，对缺血 缺氧非常敏感 ，缺 氧诱导 因子 （ ｙ ｏ ｉ ｎ ｕ ｉｌ ｆｃｏ ， ｈ ｐ ｘ ａ ｉｄ ｃ ｅ ａ ｔｒ ｂ ＨＩ Ｆ）为氧调节性蛋 白，其 蛋白稳定性和 转 录活性 均受 细胞 内氧浓 度 的调节 ，
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在单纯缺血清状态下对Ｐ Ｕ细胞有保 ＡＪ 护 作 用 ［１ ４ ，因 此 ，研 究 其 在 氧 糖 剥夺
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Ｈｅ ａ ｓ 司，荧光 倒置相差光学显微镜 ｒｕ 公 （ ＴＳ１ ０ ０ ）购 自Ｎｉ ｏ ｋ ｎ公 司，９ ％ Ｎ， ３ 、 ２ Ｏ， ％Ｃ 混 合气又称标准 气体购 自 ％ ￣５ Ｏ，
神经保护疗法是治疗缺血性脑血 管病
胞瘤细胞 Ｐ Ｕ细胞 株 （ ＡＪ ＰＡＪ ＴＬ Ｕ— Ｎ） 由芬兰 赫 尔辛 基大 学 生命 科学 院 惠赠 ； 无端脑素表达且转染空载体具有 ｎ ｏ 性 ｅ抗
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有前途的方法之一 ，可以与其他治疗方法 同时进行 ，并 增强疗效 。因此 ，探索新的
神 经 保 护 因子 一 直 是 神 经 科 学 研 究 的 热 点 之 一 。 细 胞 间黏 附 分 子 ５ （ｎ ｅ ｃ ｌ ｌｒ Ｉ ｔｒ ｅｌ ａ ｕ
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在 中南大学湘 雅二 医院基 因中心建立 。
１ １２试 剂 与 仪 器 ．． 胎牛 血 清 ， １ ， Ｇ４ ８
Ｄ Ｉ ０ ３６ ／ ． ｓ ．０ １ ８ ７ ．０ ０ １ ．０ Ｏ ：１ ．９ ９ ｊｉ ｎ １ ０ — ９ ２ ２ １ ．８ １５ ｓ
端脑素在缺氧缺糖环境 中
对 Ｐ Ｕ细胞 的保 护作 用 ＡＪ
杨和平 ・ 彭熠 。 杨力强 苏上贵 。 农田泉’ ， １ 西中医学院附属瑞康 医院神经 内科 ；２中南大学 湘雅二 医院神经 内科 ；５湖南省人 民医院神 经 内科 ；４广西 中医学 广