实验七杀菌剂生物活性测定方法——抑菌圈法

实验七杀菌剂生物活性测定方法――抑菌圈法

一、实验目的

掌握抑菌圈法测定杀菌剂的生物活性的方法及步骤。

二、实验原理

本实验主要采用抑菌圈法来测定杀菌剂的生物活性。抑菌圈法是利用

杀菌剂在琼脂平板上产生的抑菌效果来对其生物活性进行测定的一种方法。通常，将杀菌剂溶液滴加到琼脂平板上，使其均匀地分布在琼脂上。然后，将含有细菌培养物的琼脂平板放入恒温箱中进行培养。在培养一段时间后，观察平板上是否出现了抑菌圈，并测量抑菌圈的直径来评估杀菌剂的生物

活性。

三、实验仪器和材料

1.显微镜

2.恒温箱

3.滴定管或移液管

4.琼脂平板

5.细菌培养物

6.杀菌剂溶液

四、实验步骤

1.准备琼脂平板。将琼脂平板置于恒温箱中，加热至溶化状态后取出，待其稍微冷却后均匀地倒入培养皿中。

2.滴加杀菌剂溶液。将杀菌剂溶液滴加到琼脂平板上，并用移液管在

平板上转动，使杀菌剂均匀地分布在琼脂上。

3.检验杀菌剂效果。取一定量的细菌培养物，将其在琼脂平板上均匀

涂布。

4.培养细菌。将含有细菌培养物的琼脂平板放入预先恒温箱中，设置

合适的温度和培养时间。

5.观察抑菌圈。在培养一段时间后，取出琼脂平板，用显微镜观察平

板上是否出现了抑菌圈。

6.测量抑菌圈直径。使用直尺或量角器等工具测量抑菌圈的直径，并

记录结果。

五、实验注意事项

1.操作时要注意无菌技术，以避免细菌污染。

2.滴加杀菌剂溶液时要均匀并轻柔，以保证杀菌剂能充分分散在琼脂

平板上。

3.培养细菌时要控制好温度和培养时间，以确保细菌能够充分生长。

4.观察抑菌圈时要注意使用合适的放大倍数，以免错过细小的抑菌圈。

抑菌圈法实验流程

（1）实验准备：准备相关菌种（二氧化硫克隆体、硝酸盐克隆体等）和试剂；准备法兰管材质的抑菌圈，在它的内部划分两个回路；抑菌圈内

装有空气泵，来实现对空气进行不同强度的抽压，以达到抑菌目的；

（2）实验方法：将抑菌圈里装有的菌种悬液加入到两个回路中，使

用空气泵来实现抽压；在调节空气流量的情况下，可以观察抑菌圈法对菌

种的抑制情况；

（3）数据分析：当抑菌圈的空气流量调节到一定程度时，可以观察

到抑菌圈内的菌种数量有明显的下降；

（4）讨论：抑菌圈法是一种新型的抑菌方法，它可以有效地抑制菌

种的繁殖，有效地减少菌种的数量，保护人类环境。但是，抑菌圈法也有

一定的缺点，抽压太大会导致菌种基因组的变异，并且会产生抗性菌株，

同时也会使抑菌方法失效。

日化产品长效抑菌效果的评价方法

一、微生物培养法

微生物培养法是通过将一定量的日化产品加入培养基中，然后接种微生物，在一定温度下培养一段时间后，观察和测量生长的菌落数来评价抑菌效果。该方法可以直观地反映微生物的生长情况，从而判断抑菌效果。

二、抑菌圈法

抑菌圈法是在琼脂平板上划线接种已知菌种，然后将待测的日化产品涂布于平板上，观察抑菌圈的大小来判断抑菌效果。该方法简单易行，适用于表面抑菌剂效果的测定。

三、重量法

重量法是通过测量抑菌前后样品的质量变化来评价抑菌效果。该方法适用于能够去除微生物的日化产品效果的测定，如某些洗手液、清洁剂等。

四、表面观察法

表面观察法是通过观察实验前后样品表面的变化来判断抑菌效果。该方法适用于表面杀菌剂效果的测定，如某些消毒液、抗菌湿巾等。

五、残留量法

残留量法是通过测量抑菌后样品中有效成分的残留量来判断抑菌效果。该方法适用于能够定量检测有效成分的日化产品效果的测定。

六、计时法

计时法是在一定的时间内，观察抑菌剂对微生物生长的抑制作用，通过比较抑菌剂处理组和对照组微生物的生长情况来判断抑菌效果。该方法适用于能够观察到微生物生长变化的抑菌剂效果的测定。

七、反复实验法

反复实验法是在相同条件下进行多次重复实验，取平均值作为实验结果，以提高实验的准确性和可靠性。该方法适用于任何需要重复实验的抑菌剂效果的测定。

八、质量控制法

质量控制法是通过建立质量控制标准，对实验全过程进行质量监控，以保证实验结果的准确性和可靠性。该方法适用于任何需要保证实验质量的抑菌剂效果的测定。

九、微生物计数法

抑菌圈实验

2.1.1制备方法：取新华1号定性滤纸，用打孔机打成6毫米直径的圆形小纸片。取圆纸片50片放入清洁干燥的青霉素空瓶中，瓶口以单层牛皮纸包扎。经15磅15-20分钟高压消毒后，放在37℃温箱或烘箱中数天，使完全干燥。

2.1.2抗菌药纸片制作：在上述含有50片纸片的青霉素瓶内加入药液0.25毫升，并翻动纸片，使各纸片充分浸透药液，翻动纸片时不能将纸片捣烂。同时在瓶口上记录药物名称，放37℃温箱内过夜，干燥后即密盖，如有条件可真空干燥。切勿受潮，置阴暗干燥处存放，有效期3-6个月。

抑菌圈实验知识点

抑菌圈实验

简介

抑菌圈实验是一种常见的微生物学实验方法，用于评估抗菌物质

对细菌生长的抑制效果。通过在寒天平板上涂布一定数量的细菌，然

后在不同的实验条件下施加待测物，观察生成的抑菌圈直径来判断其

抗菌活性强弱。

实验步骤

1.准备寒天平板：将寒天溶液煮沸，倒入培养皿中，等待冷却凝固。

2.预处理细菌：选取待测细菌培养液，进行适当稀释，利用吸管在

寒天平板上均匀涂布。

3.滴加待测物质：使用滴管将待测物质滴加到已涂布细菌的平板上。

4.孵育：将带有滴加待测物的平板倒置，放入恒温培养箱（通常在

37摄氏度）进行孵育。

5.观察抑菌圈：经过一定时间后，观察平板上的抑菌圈，通过测量

抑菌圈直径来评估待测物质的抗菌活性。

影响抑菌圈直径的因素

1.待测物质浓度：一般来说，随着待测物质浓度的增加，抑菌圈直

径也会增加，因为更高浓度的物质具有更强的抗菌活性。

2.细菌菌株的敏感性：不同的细菌对待测物质的敏感程度有所不同，

因此不同细菌菌株在相同浓度的待测物质下可能产生不同大小的

抑菌圈。

3.孵育时间：不同的细菌在不同时间内生长速度不同，所以孵育时

间对抑菌圈直径的大小有一定影响。

4.寒天平板的厚度：寒天平板的厚度越薄，细菌的扩散速度越快，

抑菌圈直径也可能相应增大。

实验应用

抑菌圈实验是一种常用的筛选抗菌物质的方法，常用于药物研发、食品安全检测和环境监测等领域。通过观察抑菌圈的大小，可以初步

了解待测物质对细菌的抑制能力，并进一步筛选出具有较强抗菌活性

的物质进行深入研究。

结论

抑菌圈实验是一种简单有效的方法，用于评估抗菌物质的抑菌活性。实验结果可以提供初步的信息，但需要进一步的实验和研究来验

实验七体外抑菌实验

抑菌效果的评价指标包括最小抑菌浓度（MIC）和抑菌圈直径。
MIC是指能够抑制病原菌生长的最低药物浓度，抑菌圈直径是指抗菌药物在培养基表面形成的抑菌圈的直径，可反映药物的抑菌强度。
实验步骤
接种病原菌
将待测病原菌接种于培养基上，形成单菌落。
培养
将培养皿放入恒温培养箱中，在适宜温度下培养一定时间。
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在实际应用中，需要根据具体病菌和感染情况选择合适的抗菌剂及其浓度，以达到最佳治疗效果并避免耐药性的产生。
结论的应用与推广
本实验结果可为抗菌剂的研发和应用提供参考，有助于开发出更高效、广谱的抗菌药物。
对于临床医生，可根据实验结果选择针对特定细菌感染的最有效的抗菌剂及其浓度，提高治疗效果并减少耐药性的产生。
03 实验结果
抑菌圈测量
抑菌圈大小
根据实验结果，测量并记录各菌株对应的抑菌圈直径，以评估抗菌物质的抑菌效果。
抑菌圈对比
将不同菌株的抑菌圈进行对比，分析抗菌物质对不同菌株的抑制作用差异。
抑菌圈标准化
为确保实验结果的可靠性，将抑菌圈直径标准化，以消除实验操作和设备差异对结果的影响。
数据记录与分析
实验七体外抑菌实验
contents
目录
• 实验简介 • 材料与方法 • 实验结果 • 结论 • 参考文献

抑菌圈法实验流程

实验目的：通过抑菌圈法检测不同抗生素对细菌的敏感性，为临床治疗提供参考依据。

实验原理：利用纸片或圆筒在琼脂平板上制造抑菌圈，测定不同药物对细菌的抑制能力。当细菌被抗生素抑制生长时，抑菌圈周围的菌落会出现明显的清晰区域，即抑菌圈。抑菌圈大小与细菌对该药物的敏感性成正比。

实验步骤：

1. 培养细菌：选取待测菌种，在无菌条件下接种于琼脂平板上，进行预培养。

2. 制备药物纸片：将不同抗生素药物浸泡在无菌纸片中，使纸片充分吸收药物。

3. 在琼脂平板上制造抑菌圈：用无菌铁环或无菌棉签将药物纸片放置于琼脂平板表面，轻轻压实，使药物充分扩散。然后在纸片周围接种待测菌种，使其均匀生长。

4. 培养细菌：将琼脂平板倒置，放入培养箱中，在适宜的温度下培养细菌。

5. 观察抑菌圈：经过一定时间的培养，观察琼脂平板上细菌的生长状态，记录不同药物纸片周围的抑菌圈大小和形态。

6. 结果分析：根据抑菌圈的大小和形态，判断该菌株对不同药物的敏感性，为临床治疗提供参考。

实验注意事项：

1. 所有操作均在无菌条件下进行，避免外界微生物的污染。

2. 选择合适的药物浓度，避免药物过浓或过稀而影响实验结果。

3. 操作时要注意卫生，避免药物接触到皮肤或口腔。

4. 实验后应及时处理琼脂平板和药物纸片，避免造成环境污染。

实验七杀菌剂生物活性测定方法——抑菌圈法

实验七杀菌剂生物活性测定方法——抑菌圈

法

work Information Technology Company.2020YEAR

实验七杀菌剂生物活性测定方法——抑菌圈法

一、实验目的

学习并掌握杀菌剂的离体活性测定方法——抑菌圈法。

二、实验原理

抑菌圈法即水平扩散法基本原理是在已接种供试菌的琼脂培养基上施以少量抗菌性物质或杀菌剂，使之接触培养基和病菌，经定温培养一定时间后，因药剂的渗透扩散作用，施药部位周围因杀死了病菌而抑制了其在培养基上的生长，从而产生了抑菌圈。在一定范围内，抑菌圈直径的平方或面积与药剂浓度的对数呈直线函数关系，从而可比较供试样品杀菌活性大小。其最大优点是精确度高，操作简单，能较快得出结果。但测定结果受药剂溶解性和扩散能力影响很大，具一定局限性。根据药剂施加在琼脂培养基表面方式不同，又分为管碟法（牛津杯法）、滤纸片法、孔碟法、滴下法等，其中以管碟法和滤纸片法应用最广。

三、实验材料

供试药剂：速克灵或扑海因。供试病原菌：番茄灰霉病菌。

实验器材：无菌水、无菌接种针、灭菌三角瓶、玻璃珠、灭菌双层纱布、75%酒精棉球、消毒摄子、移液管、试剂瓶、吸耳球、超净工作台、胶头滴管、尺子。

四、实验方法

采用管碟法。将供试药剂加于放置在琼脂培养基表面的用不锈钢制成的小圆筒（又称为牛津杯，一般为外径8 mm，内径6 mm，高10 mm）内，定温培养一定时间后测量抑菌圈大小。

1．配制药液：用灭菌蒸馏水将供试药剂配成一系列梯度浓度，一般5-7个浓度。灭菌蒸馏水为对照。

2．制备一定“浓度”的供试菌悬浮液：如真菌，则宜用孢子悬浮液。在培养好的菌种上倒入10 mL灭菌水，用接种针轻轻刮动平面孢子悬浮，倾于灭菌三角瓶内（事先装数粒玻璃珠）摇动5 min，将孢子悬浮液用灭菌双层纱布过滤入另一灭菌三角瓶内。用低倍（15×20倍）显微镜检查，调节孢子浓度，每视野80-100个孢子为宜；以上操作应在无菌条件下进行，动作要迅速准确。

实验七杀菌剂生物活性测定方法——抑菌圈法

实验七杀菌剂生物活性测定方法——抑菌圈

法

work Information Technology Company.2020YEAR

实验七杀菌剂生物活性测定方法——抑菌圈法

一、实验目的

学习并掌握杀菌剂的离体活性测定方法——抑菌圈法。

二、实验原理

抑菌圈法即水平扩散法基本原理是在已接种供试菌的琼脂培养基上施以少量抗菌性物质或杀菌剂，使之接触培养基和病菌，经定温培养一定时间后，因药剂的渗透扩散作用，施药部位周围因杀死了病菌而抑制了其在培养基上的生长，从而产生了抑菌圈。在一定范围内，抑菌圈直径的平方或面积与药剂浓度的对数呈直线函数关系，从而可比较供试样品杀菌活性大小。其最大优点是精确度高，操作简单，能较快得出结果。但测定结果受药剂溶解性和扩散能力影响很大，具一定局限性。根据药剂施加在琼脂培养基表面方式不同，又分为管碟法（牛津杯法）、滤纸片法、孔碟法、滴下法等，其中以管碟法和滤纸片法应用最广。

三、实验材料

供试药剂：速克灵或扑海因。供试病原菌：番茄灰霉病菌。

实验器材：无菌水、无菌接种针、灭菌三角瓶、玻璃珠、灭菌双层纱布、75%酒精棉球、消毒摄子、移液管、试剂瓶、吸耳球、超净工作台、胶头滴管、尺子。

四、实验方法

采用管碟法。将供试药剂加于放置在琼脂培养基表面的用不锈钢制成的小圆筒（又称为牛津杯，一般为外径8 mm，内径6 mm，高10 mm）内，定温培养一定时间后测量抑菌圈大小。

1．配制药液：用灭菌蒸馏水将供试药剂配成一系列梯度浓度，一般5-7个浓度。灭菌蒸馏水为对照。

2．制备一定“浓度”的供试菌悬浮液：如真菌，则宜用孢子悬浮液。在培养好的菌种上倒入10 mL灭菌水，用接种针轻轻刮动平面孢子悬浮，倾于灭菌三角瓶内（事先装数粒玻璃珠）摇动5 min，将孢子悬浮液用灭菌双层纱布过滤入另一灭菌三角瓶内。用低倍（15×20倍）显微镜检查，调节孢子浓度，每视野80-100个孢子为宜；以上操作应在无菌条件下进行，动作要迅速准确。

抑菌试验中抑菌圈法的比较研究

抑菌圈法是一种常用的抑菌试验方法，可以用来测定样品对微生物的抑制活性。相比传统的微生物抑菌方法，抑菌圈法具有更高的敏感性和准确性。本文将对抑菌圈法和传统法进行比较研究，以期为相关领域的研究提供参考。

抑菌圈法具有较高的抑菌效果，能够更准确地反映样品对微生物的抑制活性。相比传统法，抑菌圈法更能敏感地检测出样品的微弱抑菌作用。这是因为抑菌圈法是通过测量抑菌圈的直径来计算抑菌效果，可以更直观地反映微生物的生长情况。

传统法操作相对简单，对实验设备要求不高，因此适用于一些条件较差的实验室。而抑菌圈法需要用到精密的培养皿和移液器等设备，操作相对复杂，但可以通过自动化设备减轻工作量。

抑菌圈法具有更高的灵敏度，能够更准确地检测出样品的抑菌效果。传统法往往需要大量的样品才能达到较好的抑菌效果，而抑菌圈法则只需要少量的样品即可。抑菌圈法还可以通过观察抑菌圈的颜色和透明度等指标来评估样品的抑菌效果。

通过对抑菌圈法和传统法的比较研究，可以得出以下抑菌圈法在抑菌

效果、操作简便性和灵敏度等方面均优于传统法。尤其是在对样品进行微弱抑菌活性检测时，抑菌圈法具有更高的准确性和可靠性。因此，在需要进行高精度和敏感度的抑菌试验时，建议采用抑菌圈法。然而，对于一些条件较差的实验室，传统法仍然是一种可行且实用的选择。在未来的研究中，可以进一步探讨抑菌圈法的应用范围和局限性，以及如何通过改进实验条件和优化实验方案来提高其准确性和可操作性。对于传统法，也可以研究如何通过改进实验设备和优化实验流程来提高其准确性和灵敏度，从而为相关领域的研究提供更多有益的信息。

抗菌实验—抑菌圈法

抑菌圈实验说明

抑菌圈法是衡量杀菌防霉剂效果的一种方式，主要用于测定杀菌防霉剂对细菌、霉菌、酵母菌的抑菌作用，是定性或半定量的方法。通过杀菌防霉剂在琼脂平板上的扩散能力来初步筛选更有效的杀菌防霉剂品种。

用具和材料

霉菌培养皿，无菌吸管（或针筒），圆片滤纸（直径2cm），带玻璃珠的无菌水，带过滤漏斗的三角牌，镊子，接种针（环），熔化状态的琼脂培养基（最好保温于45℃左右水浴中），一定浓度的药剂，供试验用的菌种。

试验过程

1.用接种环挑取各试管斜面的菌种于带玻璃珠的无菌水中，用手振荡数分钟使孢子分散，

过滤后制成混合孢子悬液。

2.用无菌吸管（或针筒）向各培养皿中注入一定浓度的混合孢子悬浮液0.5mL。

3.向各培养皿内注入15Ml~20ml的熔化状琼脂培养基（约45℃），将菌液与培养基混合均

匀，待其冷却。

4.用镊子将圆片滤纸在不同浓度的防霉剂中浸渍片刻，取出置于带菌培养基平板的中央，

盖上盖子

5.置适宜温度下，培养2~3d，观察滤纸片圆片周围抑菌圈的有无及大小。

注意事项

1.所有的操作用具和材料都要事先做灭菌处理，操作必须在无菌室（或无菌箱）内于火焰

旁进行。

2.霉菌、细菌、酵母菌等各种微生物都必须分别配置混合菌液，即这里指的混合菌液是霉

菌或酵母菌等诸种菌的分别混合液，并非霉菌、细菌和酵母菌的混合液。

3.混合菌液的浓度一般为106~108cfu/mL.

4.倒入培养皿的琼脂培养基温度不能太高（一般为45℃左右），否则会引起微生物死亡。

也不能太低，因为琼脂会很快凝结，以致搅拌不均匀，影响试验结果。

5.各种微生物的最适生长温度不同（例如霉菌一般为25~30℃，细菌一般为32~37℃等），

抑菌圈法实验流程

抑菌圈法是一种用于评价抗菌剂和抗微生物物质活性的方法。其实验流程如下：

1. 准备培养基和细菌：选取合适的培养基，接种待测菌株，培养至适宜的生长期。

2. 稀释菌液：将培养的菌液按一定比例稀释至一定浓度，以便于后续实验操作。

3. 制备平板：将准备好的培养基倒入通气性好的培养皿中，待其凝固后，以均匀的方式涂布已稀释好的菌液，让其在平板上覆盖均匀。

4. 加入试剂：将待测药物或化合物加入到培养皿上，让其在平板上扩散均匀。

5. 孵育：将制备好的培养皿，反转放置在孵化箱中，以适合待测菌株的生长温度和时间进行孵育。

6. 读数：观察培养皿上的菌落是否受到药物或化合物的抑制，并通过测量抑制菌落周围形成的清晰区域（抑菌圈）的直径，来评价药物或化合物的抗菌活性。

需要注意的是，实验中要注意消毒操作、依照标准化操作程序进行实验、精确测量并记录数据，以得到可靠的实验结果。

实验七杀菌剂生物活性测定方法——抑菌圈法

实验七杀菌剂生物活性测定方法——抑菌圈法摘要：本实验主要研究了七杀菌剂的生物活性测定方法，抑菌圈法。

该方法通过在琼脂平板上播种细菌，再在平板上施加一定浓度的七杀菌剂，观察并测量周围的抑菌圈直径，从而评估七杀菌剂对细菌的抑制作用。实

验结果表明，抑菌圈直径与七杀菌剂浓度呈正相关关系，且抑菌圈直径越大，表示七杀菌剂的抑菌效果越好。通过该方法可以快速、简便地评估七

杀菌剂的生物活性，为进一步研究其抗菌机制和优化配方提供了参考。

关键词：七杀菌剂；抑菌圈法；生物活性；抑菌圈直径

一、引言

七杀菌剂是一类特殊作用机制的植物杀菌剂，具有广谱杀菌、低滴效、低残留、不发生抗性等优点，被广泛应用于农业防病生产中。评估七杀菌

剂的生物活性是研究抗病机理、筛选优良品种和优化配方的重要手段。目前，常用的七杀菌剂生物活性测定方法包括最小抑菌浓度法、抑菌圈法和

微量滴定法等。本实验采用抑菌圈法对七杀菌剂的生物活性进行测定，该

方法简单易行、时间短，能够客观直观地评估抗菌剂的抑菌效果，被广泛

应用于杀菌剂的筛选和评估中。

二、材料与方法

2.1实验材料

-七杀菌剂：根据实验需要选择合适的七杀菌剂；

-革兰氏染色培养基：包括琼脂和所需培养成分；

-细菌：根据实验需要选择合适的细菌菌种；

- 培养皿：直径90 mm的培养皿；

-无菌棉花：消毒后用于吸水；

-直尺：用于测量抑菌圈的直径。

2.2实验步骤

步骤一：制备琼脂平板

1)按照革兰氏染色培养基的配方将琼脂和所需培养成分溶解在适量的

蒸馏水中；

2)加热溶液，使其均匀溶解；

3)微量加热，使溶液达到沸腾状态；

抗菌实验—抑菌圈法

抑菌圈实验说明

抑菌圈法是衡量杀菌防霉剂效果的一种方式，主要用于测定杀菌防霉剂对细菌、霉菌、酵母菌的抑菌作用，是定性或半定量的方法。通过杀菌防霉剂在琼脂平板上的扩散能力来初步筛选更有效的杀菌防霉剂品种。

用具和材料精品文档，你值得期待

霉菌培养皿，无菌吸管（或针筒），圆片滤纸（直径2cm），带玻璃珠的无菌水，带过滤漏斗的三角牌，镊子，接种针（环），熔化状态的琼脂培养基（最好保温于45℃左右水浴中），一定浓度的药剂，供试验用的菌种。

试验过程

1.用接种环挑取各试管斜面的菌种于带玻璃珠的无菌水中，用手振荡数分钟使孢子分散，

过滤后制成混合孢子悬液。

2.用无菌吸管（或针筒）向各培养皿中注入一定浓度的混合孢子悬浮液0.5mL。

3.向各培养皿内注入15Ml~20ml的熔化状琼脂培养基（约45℃），将菌液与培养基混合均

匀，待其冷却。

4.用镊子将圆片滤纸在不同浓度的防霉剂中浸渍片刻，取出置于带菌培养基平板的中央，

盖上盖子

5.置适宜温度下，培养2~3d，观察滤纸片圆片周围抑菌圈的有无及大小。

注意事项

1.所有的操作用具和材料都要事先做灭菌处理，操作必须在无菌室（或无菌箱）内于火焰

旁进行。

2.霉菌、细菌、酵母菌等各种微生物都必须分别配置混合菌液，即这里指的混合菌液是霉

菌或酵母菌等诸种菌的分别混合液，并非霉菌、细菌和酵母菌的混合液。

3.混合菌液的浓度一般为106~108cfu/mL.

4.倒入培养皿的琼脂培养基温度不能太高（一般为45℃左右），否则会引起微生物死亡。

也不能太低，因为琼脂会很快凝结，以致搅拌不均匀，影响试验结果。

抑菌试验方法

抑菌圈测量是微生物分析的经典方法。它是利用抑菌物质在涂布特定试验菌的琼脂培养基内成球形立体状扩散，抑制试验菌的繁殖，在抑菌物质的周围形成透明圈，即抑菌圈。

管碟法测定生物效价：利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用，采用量反应平行线原理的设计，比较标准品与供试品两者对接种的试验菌产生抑菌圈的大小，以测定供试品效价的一种方法。

制药企业，药检所常常进行抗生素的效价测定，最普遍的方式就是管碟法测定生物效价。管碟法测定生物效价实验中存在大量抑菌圈测量工作，常规都是用游标卡尺手工测量抑菌圈的直径，如今可以用仪器自动进行分析，提高检测精度，减少测量误差。

迅数-自动抑菌圈测量系统是通过CCD 采集数字图像后，进行自适应差分滤波预处理，采用改进的四叉树交叉熵分割算法进行准确快速的分析，精确检测出抑菌圈直径数据，最后对数据建模统计，自动得到分析结果。所有分析过程只要一秒就可以完成。

手动测量存在的问题有：

1. 重现性差，准确性不够：同一培养皿，不同的人测量结果有差异；

2. 当抑菌圈呈卵原形、边缘模糊或出现双层圈时，边界确

定的人为误差大；

3. 一个培养皿内有大量抑菌圈时，如做菌种筛选时，无法人工测量；

自动抑菌圈测量的好处在于：快速、精度高、重现性好、操作简单。

示意;将试样剪成直径为2-3公分的园片,紧紧平贴在已接种试验菌种的FDA琼脂培养基表面上,经37℃24小时培养,培养基表面上长出密密麻麻的菌落,?而试样周围有一个不长菌落的"

晕圈".测量晕圈环的宽度,用毫米表示.(如果没有晕圈?,应揭开试样,检查样品复盖若无菌落可视为样品具有非溶出性抗菌作用.应进一步用

抑菌试验测定方法

抑菌试胡定方法

纸片法、牛津杯法等，但原理都是一样的，纸片法做起来比较简单，不用特殊的材料，可能比较适合你：

1.把实验室用的普通滤纸用打孔器打成0.5cm直径的圆片，装在试管中密封灭菌（121度，20分钟）o

2.将已经培养好的菌制成一定浓度的悬浮液，取lml该菌悬液至灭过菌的（121 度，20分钟）培养皿中，倒入适量（约4毫米厚吧）已灭菌的培养基（温度约45度，用手摸瓶壁不感觉烫手即可）,轻轻转动培养皿，使培养基与菌液混匀，静置凝成平板。

3•将用于试验的农药配制成儿个所需的浓度，用无菌银子夹起一片滤纸放入药液中浸透，夹岀时在容器边缘停靠片刻，滤掉多余的药液，把滤纸片放在平板中凝好的培养基的中心，用银子稍用力按一下，使之与培养基充分紧贴。

4•按上述方法，每个浓度做3个重复，以灭菌水浸湿的滤纸片做空白对照。5•在适当温度下培养一定时间后观察，用直尺或游标卡尺测量抑菌圈的大小，计算抑菌率就OK 了 !

希望能对你有帮助，有什么问题可以短消息我：）

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