激光扫描共聚焦显微镜观察贲门肿瘤细胞药物诱导后ca2 浓度变化的意义_医学论文
激光共聚焦显微技术在药学研究中的应用
激光共聚焦显微技术在药学研究中的应用
激光共聚焦显微技术(CLSM)是一种高分辨率、非侵入性的镜下成像技术,被广泛应用于生物医学研究中。
在药学研究中,CLSM可以用于药物释放过程的实时监测、药物靶向性的研究、药物毒性的测试等方面,其应用越来越受到关注。
首先,CLSM可以用于药物释放过程的实时监测。
药物释放过程是药物输送系统的重要研究方向之一。
CLSM可以使用荧光标记的药物或载体材料进行成像,实时监测其释放过程。
通过定量分析释放曲线,可以评估药物的释放速率和累积释放量,从而了解药物输送系统的性能。
其次,CLSM可以用于药物靶向性的研究。
药物靶向性是提高药物治疗效果的重要手段之一。
通过制备靶向药物纳米粒子或高分子材料,并在其表面修饰靶向分子,CLSM可以直观观察药物在细胞或组织中的分布情况。
从而了解药物在靶标区域的浓度分布,为评估药效和药物的副作用提供参考。
最后,CLSM可以用于药物毒性的测试。
药物毒性评价是药物开发过程中不可或缺的一环。
CLSM可以利用涂片、细胞培养等方法,将药物暴露于细胞或组织中,通过成像分析药物诱导的生物标志物变化,确定其毒性。
同时,CLSM还可以用于药物代谢和药效动力学的研究,为药物安全性评价提供科学数据。
总之,CLSM在药学研究中的应用具有广泛的前景和应用价值。
未来,我们可以通过进一步的技术创新,不断提高CLSM的成像分辨率和成像速度,为药物研发提供更加精准、快速、可靠的检测手段。
激光扫描共聚焦显微镜技术原理及在脑血管疾病实验研究中应用
1 . 3 点 扫 描 与 成 像 技 术 的 应 用 将 标 本 分 解 成 二
维 或三维 空 间上无 数 个 点 , 用 激 光束 逐 层 逐 点 扫描 成像 , 便 将 断 层 图像 和 三 维 重 建 图 像 有 机 结 合 , 能提
当归单体 的有效 成分 , 这一 研究表 明川芎 、 当 归 有 治 疗脑 血 管 疾 病 的 作 用 。 另 外 , 庄 明 华 等[ 9 o - 运 用
光 学装 置 、 激 光 光 源 、扫
描装 置 、 荧 光显 微镜 、 计算 机处 理和控 制 系统五 部分
1 . 2 光 源 更 新 和 共 聚 焦 技 术 应 用 普 通 光 学 显 微
镜用 的是 场光 源 , 标 本 每 一 点 图像 都 受 到邻 近点 衍 射 光 或 散 射 光 的 干 扰 。 而 激 光 共 聚焦 显 微 镜 利 用 激
对 大 鼠脑 缺 血 再 灌 注 后 血 脑 屏 障 通 透 性 变 化 和 缺 血 区不 同 部 位 缝 隙 连 接 分 布 情 况 , 研究 发 现 脑 缺血 再 灌 注后 缝 隙连接 在半 暗带 区 进行 再 分 布 , 缝 隙连 接 斑 比以前更 大 的 , 来 加 强 细 胞 间 信 号 传 递 及 细 胞 间
术在脑血管疾病实验研究 中形态学变化及对细胞内 C a 2 影响。 关键词 实验研究 激光共聚焦显微镜 脑血管疾病
中 图分 类 号 : R 8 1 文献标识码 : A 文章编号 : 1 0 0 1 — 7 5 8 5 ( 2 0 1 4 ) 1 1 — 1 4 2 6 — 0 2
脑 血 管 疾 病 是 各 种 病 因 使 供 应 脑 部 血 液 的 血 管 发 生病 变所 致 的脑 部病 变 , 因其 高 发 病 率 、 高 致 残
激光扫描共聚焦显微镜原理及应用
激光扫描共聚焦显微镜原理及应用激光扫描共聚焦显微镜(Laser Scanning Confocal Microscope)是一种高分辨率的显微镜技术。
它结合了光学和计算机技术,通过使用激光扫描技术将样品的逐点扫描成像,可以获取到非常清晰的三维图像。
激光扫描共聚焦显微镜的原理是基于共焦聚焦技术。
它使用一束激光光束照射在样品表面上,并收集激光光束的反射或荧光信号。
激光光束通过一个探测镜来聚焦在样品表面上的一个非常小的点上,该点称为焦点。
通过扫描样品,系统可以获取到完整的样品图像。
1.高分辨率:激光扫描共聚焦显微镜可以获得非常高的分辨率。
由于只有焦点附近的信息被收集,所以可以消除反射和散射带来的干扰,提高图像的清晰度和分辨率。
2.三维成像:激光扫描共聚焦显微镜可以进行多个焦面的扫描,从而获取到三维样品图像。
这使得可以观察样品的内部结构和深层次的信息。
3.高灵敏度:激光扫描共聚焦显微镜可以检测到样品的荧光信号。
这在生物医学领域中非常有用,可以用于观察细胞和组织中的荧光标记物。
4.实时观察:由于激光扫描共聚焦显微镜具有快速扫描和成像的能力,因此可以进行实时观察。
这对于研究动态过程和实时观察样品的变化非常有用。
在生物医学研究中,激光扫描共聚焦显微镜被广泛应用于观察和研究活细胞及组织的结构和功能。
它可以用于观察和研究细胞器的位置和运动、细胞的分裂过程、病理细胞的形态学变化等。
在材料科学研究中,激光扫描共聚焦显微镜可以用于观察和研究材料的结构和性质。
它可以帮助研究人员观察各种材料的微观结构、表面形貌以及材料中的缺陷和分子分布等。
在纳米技术研究中,激光扫描共聚焦显微镜可以用于观察和研究纳米材料的形态和结构。
它可以帮助研究人员观察纳米粒子的形状、大小和分布,研究纳米材料的组装过程和性质等。
总之,激光扫描共聚焦显微镜是一种非常强大并且在科学研究中得到广泛应用的显微镜技术。
它通过激光聚焦和扫描技术,可以获得高分辨率、三维成像和实时观察的样品图像,并且在生物医学研究、材料科学和纳米技术等领域有着重要的应用价值。
激光扫描共聚焦显微镜检测肿瘤细胞药敏的临床意义
3 讨 论
自 18 9 3年 Mom n s a n报道用 MT T比色 法研 究肿瘤 细胞 生 长与生存状况 以来 , 方法得 到迅速发 展 , 该 美国 国立 肿瘤
研 究所 已将 MT T比色法纳入抗癌 药物筛选程序。 目前 MT T 比色法 已广泛用 于临床抗癌药物筛选研究 , 并开始用于新鲜 肿瘤细胞 的药物敏感性检测 , 肿瘤化疗方案 的个体化初步 使
析, 等级资料采用秩和检验 , 00 P< .5为差异有统 计学 意义 。
医院 2 0 0 4年 1 1月—2 0 0 6年 2月 手术 切 除 的新 鲜 肿瘤 组 织, 中 3 其 0例乳腺肿瘤 、5 胃肿瘤和 5例喉肿瘤 。 o 患 2例 6例
者 中, 2 例 , 3 , 男 3 女 7例 年龄 3 ~ 8岁 , 均 5 . 。病期 57 平 5 5岁
率 <0 3 %为不敏感 。
相 对抑 制率: 对照组 A 加药组 A) ( 一 /
对 照组 Ax 0 %。相对 抑 制 率 ≥3 %为敏 感 ,相 对抑 制 10 0 1 统 计学方 法 . 4 应用 S S 00统计 软件进 行统 计学 分 P S1 .
11 标本来源 .
肿瘤细胞标本 均来 源于河北工 程大学附属
2 结 果
敏感 药物与 不敏感药 物引起 的肿瘤 细胞 C 2 a+ 浓度变 化 差别有 统计学意 义( u:2 .1P<00 )敏感 药物引起 的肿 00 , .1 ,
瘤 细胞 内 C 2 a 的浓度变化 明显 大于不 敏感药物 ,  ̄ 见表 1 。
按 T M临床分期 : 期 4例, N I Ⅱ期 2 例 。 2 Ⅲ期 2 例 , 7 Ⅳ期 7 例。
激光共聚焦扫描显微镜技术在大鼠皮层神经元细胞内钙离子浓度动态测定中的应用
·530··实验研究·激光共聚焦扫描显微镜技术在大鼠皮层神经元细胞内钙离子浓度动态测定中的应用武美娜李新毅白玮郭芬祁金顺【摘要】目的探讨激光共聚焦扫描显微镜(LCSM)技术在动态测定神经元细胞内钙离子浓度中的应用。
方法采用原代培养大鼠皮层神经元,用LCSM测定给KCI前后细胞内钙离子浓度的动态变化。
结果培养神经元状态良好。
用LCSM准确、稳定、可靠地测出细胞内钙离子浓度的动态变化。
结论LCSM在动态测定神经元细胞内钙离子浓度中具有明显优势。
【关键词】显微镜检查,共焦;细胞内钙离子浓度;皮层神经元UseofIasereonfocalscanningmicroscopyfordynamicstudyofintracellularcalciumconcentrationinratcor-ticalneuronsWUMei-na',LIXin一蚋,BAlWei,GUOFen,QIJin-shun.DepartmentofPhysiology,ShanxiMedicalUniversit)',Taiyuan030001.China【Abstract】ObjectiveTodocumentthepromisesoflaserconfocalscanningmicroscopy(LCSM)indynamicstudyofintraeellulafcalciumconcentration(『Ca邳)jnsubjeetedtodifferentdrugadministration.MethodsLCSMwasuse(1toinvestigatethedynamicchangeoffCa2qiinprimaryculturedcorticalbeforeandafterKCItreatment.ResultsTheculturedshowedgoodmorphologyandgrowthstatus.Accurate,stableandreliablemeasurementsofdynamic『Ca2+]iwereperformedusingI£SM.ConclusionLCSMtechniquemayshowpromisesformeasurementofdynamicchangeinfCa2+]i.【Keywords】Microscopy,COllfocal;IntraceUularcalciumconcentration;CortiealCa2+是细胞内最为重要的阳离子和第二信使之一。
不同接种部位肿瘤进行激光共聚焦显微镜观察的可行性
不同接种部位肿瘤进行激光共聚焦显微镜观察的可行性引言肿瘤是一种常见的疾病,对人类健康造成了严重的威胁。
为了更好地理解肿瘤的生长和发展过程,人们进行了大量的研究工作。
激光共聚焦显微镜技术已成为研究肿瘤细胞结构和功能的重要方法之一。
本文旨在探讨不同接种部位肿瘤进行激光共聚焦显微镜观察的可行性,并提出相关的研究思路。
一、激光共聚焦显微镜技术激光共聚焦显微镜是一种高分辨率的显微镜技术,其原理是利用光学共聚焦原理,将样品中的荧光信号与聚焦激光光束相交,从而获得具有优良分辨率和对比度的三维图像。
激光共聚焦显微镜技术在生物医学研究领域应用广泛,特别适用于观察细胞和亚细胞结构、蛋白质分布、细胞活动等方面的研究。
二、肿瘤在不同部位的生长特点肿瘤的生长特点在不同部位可能存在明显的差异。
乳腺癌、肺癌、胃癌等肿瘤在相应的器官中生长发展具有一定的特殊性。
对不同部位肿瘤的研究对于阐明肿瘤发病机制、制定个体化治疗方案具有重要的意义。
1.技术可行性激光共聚焦显微镜技术具有高分辨率、优良对比度等优势,可以对细胞和亚细胞结构进行精细化的观察分析。
对不同接种部位的肿瘤样本进行激光共聚焦显微镜观察是完全可行的。
2.研究意义通过激光共聚焦显微镜技术,可以观察不同部位肿瘤细胞的结构和功能变化,揭示其生长和扩散机制的差异,为肿瘤的预防和治疗提供重要参考。
3.研究方法在进行不同接种部位肿瘤的激光共聚焦显微镜观察时,需要选择合适的标记物标记细胞或细胞器,以便观察其在不同条件下的变化。
还需要准备好相应的肿瘤样本,进行适当的前处理工作,以保证观察的准确性和可靠性。
四、研究思路1.选择适当的肿瘤模型和接种部位,例如乳腺癌、肺癌等常见肿瘤。
2.选择合适的标记物,如细胞膜标记物、核染色素、蛋白质标记物等,标记细胞或细胞器。
3.进行激光共聚焦显微镜观察,获取不同接种部位肿瘤细胞的三维结构图像。
4.分析观察结果,对比不同接种部位肿瘤细胞的结构和功能特点,揭示生长和扩散机制的差异。
共聚焦激光显微内镜对早期上消化道肿瘤的诊断价值
ma nf a in vr a i oo ia ma e f te s ra e a d t e u d r e t is e o a t i tsi a r c d r g r u i e g i c t i u lh s lgc l i g s o h u fc n h n e n ah t u f g s o ne t lta t u i o t i o t t s r n n n e d s o y a d t e e y p o tsd a n s c a c r c . W e r ve d t e a p ia in o o f c lls re d mir s o yf r n o c p , n r b r moe ig o t c u a y h i e iwe h p l t fc n o a a e n o c o e p o c o t e e r i g o i f p e a ton e t a t mo s h a l d a n sso p rg sr it si l u r . y u n Ke r s C n 0 a e d mir s 0 y Ga t i t s n l r c; N o ls ; Eal a n s y wo d o fc l s r aL En o c o c p ; s o n e t a a t r i T e p a ms r Dig o i y s
共聚焦激光显微 内镜对 早期上 消化道肿瘤 的诊 断价值
张建 娜 李延 青 山东大 学齐鲁 医院 消化 内科 ( 5 0 2 20 1 )
摘要 上 消 化道 肿 瘤 的早 期 诊 断对 改 善 患 者 的预 后 至 关 重 要 。 共 聚 焦激 光 显 微 内镜 是 新 近 发 展 起 来 的新 型 内
激光共聚焦显微镜在肿瘤治疗研究中的应用
激光共聚焦显微镜在肿瘤治疗研究中的应用【摘要】激光扫描共聚焦显微镜是一种新的分子细胞生物学分析仪器,因其能迅速、直观、定量的检测到细胞内部微细结构的荧光图像,已经广泛应用于肿瘤的相关研究中。
本文综述了对激光共聚焦显微镜在肿瘤的治疗中的应用进展。
【关键词】激光扫描共聚焦显微镜;肿瘤;治疗1前言激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)是二十世纪80年代发展起来的新一代分子细胞生物学分析仪器,比传统的光学显微镜和荧光显微镜分辨率高,可广泛引用于用于观察固定细胞、活细胞或组织内部微细结构的荧光图像,在亚细胞水平上观察诸如Ca 2 +、pH 、膜电位等生理信号及细胞形态的动态变化。
LSCM通过检测与肿瘤相关生理信号的变化,可以从细胞和分子水平上为肿瘤的早期诊断和治疗提供一个强有力的研究工具,下面对近年来LSCM在肿瘤研究中的应用进行简要综述。
2 肿瘤药物作用机制研究光动力疗法(PDT)是一种新的癌症治疗方法,利用光敏剂破坏肿瘤组织。
研究表明,光敏剂的亚细胞定位特点与靶细胞光敏损伤位点高度相关,是PDT 损伤效应的重要影响因素。
Trivedi NS等[1]利用双光子LSCM发现光敏剂Pc 4在小鼠淋巴瘤(LY-R)细胞中优先与线粒体和高尔基体紧密结合。
周园[2]用LSCM 观察到,荧光基团FITC标记的抗肿瘤药物PHⅡ-7在肿瘤细胞系K562及其耐药肿瘤细胞系K562/A02中,其分布均由细胞质逐渐向细胞核转移,说明PHⅡ-7的作用靶点为细胞核。
3 肿瘤药物在细胞内的动态追踪有些自发荧光的抗肿瘤药物如阿霉素,可以在LSCM下动态追踪到药物在肿瘤细胞内的实时分布及定位的情况,这样就为肿瘤药物作用机制的研究提供了更加直观的证据。
Feofanov[3]等应用CSI技术定量分析技术,对MITOX在人类白血病K562细胞内的吸收进行定量分析和亚细胞定位。
结果发现MITOX在细胞内的环境中高度倾向于自聚集,这种积聚可能是药物在能持续并长期作用于细胞的决定因素。
激光扫描共聚焦显微镜
激光扫描共聚焦显微镜是二十世纪80年代发展起来的一项具有划时代的高科技新产品,它是在荧光显微镜成像基础上加装了激光扫描装置,利用计算机进行图像处理,把光学成像的分辨率提高了30%~40%,使用紫外或可见光激发荧光探针,从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像,在亚细胞水平上观察诸如Ca 2+ 、pH值,膜电位等生理信号及细胞形态的变化,成为形态学,分子生物学,神经科学,药理学,遗传学等领域中新一代强有力的研究工具。
激光共聚焦成像系统能够用于观察各种染色、非染色和荧光标记的组织和细胞等,能够进行活体细胞中离子和PH值变化研究(RATIO),神经递质研究,荧光原位杂交研究(FISH),细胞骨架研究,基因定位研究,原位实时PCR产物分析,荧光漂白恢复研究(FRAP),胞间通讯研究,蛋白质间研究,膜电位与膜流动性等研究,完成图像分析和三维重建等分析。
2003年3月份我院购进了一台日本OLYMPUS生产的FLUOVIEW FV500型激光扫描共聚焦显微镜,是我院投资最大的科研仪器,为我院科研水平的提高,提供了崭新的、强有力的技术手段。
FLUOVIEW FV500型激光扫描共聚焦显微镜目前主要应用的研究范围: 细胞形态学分析【观察细胞或组织内部微细结构,如:细胞内线粒体、内质网、高尔基体、微管、微丝、细胞桥、染色体等亚细胞结构的形态特征;半定量免疫荧光分析】;荧光原位杂交研究;基因定位研究及三维重建分析。
1. 基本原理传统的光学显微镜使用的是场光源,标本上每一点的图像都会受到邻近点的衍射或散射光的干扰;激光扫描共聚焦显微镜利用激光束经照明针孔形成点光源对标本内焦平面的每一点扫描,标本上的被照射点,在探测针孔处成像,由探测针孔后的光电倍增管(PMT)或冷电耦器件(cCCD)逐点或逐线接收,迅速在计算机监视器屏幕上形成荧光图像。
照明针孔与探测针孔相对于物镜焦平面是共轭的,焦平面上的点同时聚焦于照明针孔和发射针孔,焦平面以外的点不会在探测针孔处成像,这样得到的共聚焦图像是标本的光学横断面,克服了普通显微镜图像模糊的缺点。
激光共聚焦显微镜在肿瘤研究方面的应用
激光共聚焦显微镜在肿瘤研究方面的应用激光共聚焦显微镜(LSCM)是当今世界上最先进的分子细胞生物学分析仪器。
它在荧光成像基础上加装激光扫描装置,利用计算机进行图像处理,利用紫外光激发荧光探针,从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像。
目前在形态学、分子细胞生物学、神经科学、药理学、遗传学都有广泛地应用,在肿瘤研究中更是成为新一代强有力的研究工具。
标签:激光共聚焦显微镜;肿瘤学;应用激光共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope,LSCM)是在荧光成像基础上加装激光扫描设备,利用计算机进行图像处理,使用紫外光激发荧光探针,以得到细胞或组织内部细微结构的荧光图像。
激光共聚焦显微镜(LSCM)目前在形态学、分子生物学、神经科学、药理学、遗传学、肿瘤学等医学领域中得到了很好的应用,本文主要概述其在肿瘤学中的应用。
1基本原理激光共聚焦显微镜(LSCM)利用激光扫描束经照明针孔形成点光源,对标本内平面上的每一点扫描,标本上的被照射点在探测针孔成像,由探测针孔后的光电倍增管或冷电耦合器件逐点或逐线接受,迅速在计算机监视器屏上形成荧光图像,焦平面上的点同时聚焦于照明针孔,得到的共聚焦图像是标本的横断面,此外在显微镜的载物台上加一个微量步进马达,使载物台上、下移动,最小步进距离0.1μm,这样细胞或组织各横断面的图像都能清楚地显示,实现”光学切片”的目的。
2荧光定性、定量普通光学显微镜及电子显微镜仅能对肿瘤抗原进行定性分析,而对多标记细胞、组织标本的抗原表达、细胞结构特征以及抗肿瘤药的作用机制等方面进行定量的观察和监测,只能借助激光共聚焦显微镜来实现。
Raucher等[1]在研究Skov-3,HELA和FaDu细胞对于热反应性ELP(由重复的VPGXG组成的弹性蛋白样多肽)的收时,以荧光标记3个细胞系中热反应性ELP,通过LSCM定量观察其吸收,发现当温度高于其转运温度时,细胞对于ELP的吸收度增加,通过调节转运阶段的环境温度来调控细胞对于ELP的吸收。
激光扫描共聚焦显微镜在药物制剂学中的应用
共聚焦激光扫描显微镜在药剂学中的应用赖丽芳,郭红霞*(山东大学药学院药物制剂研究所,济南 250012)摘要:目的介绍共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)的基本原理和CLSM在药剂学研究中的应用。
方法参阅具有代表性的最新文献,分析和讨论CLSM在药剂学领域的应用。
结果与结论CLSM是一项新的、近年来发展较快的对样品无损害的成像技术,它在药学研究领域必将得到更加广泛和深入的应用。
关键词:共聚焦激光扫描显微镜;经皮和粘膜吸收;细胞水平;微粒结构;药物成型机制和释药机制The application of confocal laser scanning microscope in pharmaceuticsLai Lifang, Guo Hongxi a*自从1980年Petran等[1]发明共聚焦激光扫描显微镜以来,CLSM受到了广泛的关注,其在医学、生物学、药学研究等方面得到了广泛应用。
CLSM的主要原理[2,3]是:利用激光扫描束通过光栅针孔形成点光源,在荧光标记标本的焦平面上逐点扫描,采集点的光信号通过探测针孔到达光电倍增管(PMT),再经过信号处理,在计算机监视屏上形成图像,其结构图见图1。
CLSM采用共聚焦技术在物镜的焦平面上放置了一个带有小孔的挡板,平面以外的杂散光被挡住,消除了球差,并进一步消除了色差,且可将样品分解成二维或三维空间上的无数点,用十分细小的激光束(点光源) 逐点逐行扫描成像,再通过微机组合成一个平面的或立体的图像。
CLSM的主要优点有[4]:共聚焦图像具备高反差、高清晰度、定位准确的优点,克服了荧光显微镜照射面积大、层面不清、定位不准等缺点。
使用共聚焦激光扫描显微镜不会损坏样品,可用于活细胞的研究,不需进行样品前预处理,能很好地再现样品的真实情况。
而且CLSM对于相对较厚的样品可以逐层地获得物体光学横断面的图像,得到样品的三维图像,提供比传统显微镜更详尽的样品信息。
目前在药剂学领域主要应用于药物经皮和粘膜吸收的研究、粘膜吸收促进剂作用机制的研究、药物的细胞摄取、穿透性能及与细胞相互作用的机制研究和载药微粒结构观察、药物成型机制及释药机制等方面的研究。
不同接种部位肿瘤进行激光共聚焦显微镜观察的可行性
不同接种部位肿瘤进行激光共聚焦显微镜观察的可行性激光共聚焦显微镜(LCM)是一种先进的生物显微镜技术,具有高分辨率、高灵敏度和三维成像的优势,被广泛应用于肿瘤研究领域。
而肿瘤在不同部位的生长和发展过程中可能存在一些差异,因此对不同接种部位的肿瘤进行激光共聚焦显微镜观察,有助于更全面地了解肿瘤的生物学特性和发展规律。
本文将从实验目的、方法步骤、实验设计和结果分析等方面探讨不同接种部位肿瘤进行激光共聚焦显微镜观察的可行性。
实验目的1. 研究不同接种部位的肿瘤组织结构和细胞形态的差异;2. 观察肿瘤在不同部位的微环境对肿瘤细胞行为的影响;3. 探讨激光共聚焦显微镜技术在肿瘤研究中的应用前景。
方法步骤1. 建立不同接种部位的肿瘤模型。
选择适合的肿瘤细胞系,并分别在小鼠的皮下、肌肉和内脏等不同部位进行注射,建立肿瘤模型。
2. 采集肿瘤组织标本。
在肿瘤生长到一定大小后,取出肿瘤组织标本进行后续实验。
3. 离心制备组织切片。
将肿瘤组织标本进行离心处理,得到适合激光共聚焦显微镜观察的组织切片。
4. 激光共聚焦显微镜观察。
使用激光共聚焦显微镜对肿瘤组织切片进行观察和成像,记录不同接种部位肿瘤的结构和细胞形态特征。
实验设计1. 对照组设计。
选择同一肿瘤细胞系,在不同接种部位分别建立肿瘤模型,作为对照组进行观察。
2. 实验组设计。
选择不同肿瘤细胞系,在相同部位建立肿瘤模型,作为实验组进行观察。
3. 重复实验。
为了提高实验结果的可靠性,应进行多次重复实验,保证观察结果的一致性。
总结通过不同接种部位肿瘤进行激光共聚焦显微镜观察的实验,可以更全面地了解肿瘤的生物学特性和发展规律,为肿瘤研究提供新的信息和思路。
激光共聚焦显微镜技术的应用将有助于揭示肿瘤在不同部位的微环境对肿瘤细胞行为的影响,为肿瘤的预防、诊断和治疗提供新的理论和实验依据。
这一研究方向具有很大的应用前景和临床意义,值得进一步深入开展。
在未来的研究中,可以进一步探讨不同接种部位肿瘤的免疫学特征、药物敏感性和治疗效果等方面,以期为精准医学和个性化治疗提供更多的信息和依据。
《细胞外Ca诱导拟南芥根细胞质Ca2+浓度升高的细胞学机制研究》范文
《细胞外Ca诱导拟南芥根细胞质Ca2+浓度升高的细胞学机制研究》篇一一、引言在植物生长与发育过程中,细胞内钙离子(Ca2+)的浓度调控扮演着至关重要的角色。
尤其是当植物面对环境变化时,如受到细胞外钙(Ca)的刺激,植物通过调整其根细胞质中Ca2+的浓度来应对环境变化。
本篇论文主要探讨了细胞外Ca如何诱导拟南芥根细胞质中Ca2+浓度升高的细胞学机制。
二、材料与方法(一)材料实验选取拟南芥为研究对象,选用其根细胞作为主要观察对象。
(二)方法采用激光共聚焦显微镜技术对拟南芥根细胞进行实时观察和测量,同时结合分子生物学技术,对相关基因进行表达分析。
三、实验结果(一)细胞外Ca对拟南芥根细胞质Ca2+浓度的影响实验结果显示,当细胞外Ca浓度升高时,拟南芥根细胞质中Ca2+的浓度也相应升高。
这一现象在多种浓度的Ca处理下均得到验证。
(二)细胞外Ca诱导Ca2+浓度升高的细胞学机制通过激光共聚焦显微镜观察,我们发现细胞外Ca诱导的Ca2+浓度升高是通过一种信号转导途径实现的。
具体来说,当细胞外Ca浓度升高时,会触发一种信号分子(如IP3)的释放,该信号分子进一步激活了细胞膜上的钙通道,使得Ca2+从细胞外进入细胞内。
此外,我们还发现这一过程受到一系列相关基因的调控。
四、讨论(一)信号转导途径的分析根据实验结果,我们推测细胞外Ca诱导的Ca2+浓度升高可能通过IP3信号途径实现。
IP3作为一种重要的第二信使,在植物应对环境变化时起着关键作用。
它能够激活细胞膜上的钙通道,从而使得Ca2+从细胞外进入细胞内。
此外,其他信号分子和途径也可能参与这一过程,共同构成了一个复杂的信号转导网络。
(二)基因调控的作用实验发现,相关基因的表达在细胞外Ca诱导的Ca2+浓度升高过程中起着关键作用。
这些基因可能编码信号分子、钙通道蛋白等关键蛋白,对细胞的钙离子平衡进行调控。
进一步研究这些基因的功能和相互作用,将有助于我们更深入地理解这一过程的分子机制。
不同接种部位肿瘤进行激光共聚焦显微镜观察的可行性
不同接种部位肿瘤进行激光共聚焦显微镜观察的可行性激光共聚焦显微镜(CFSM)是一种高分辨率的显微镜技术,能够实现对活体细胞和组织的高清晰度成像。
随着CFSM技术的不断发展,其在肿瘤研究中的应用也日益广泛。
接种部位对肿瘤生长具有重要影响,但目前对不同接种部位肿瘤的CFSM观察尚未有较为系统的研究。
本文将探讨不同接种部位肿瘤进行CFSM观察的可行性,并讨论其在肿瘤研究中的潜在应用。
一、不同接种部位肿瘤的研究意义不同接种部位对肿瘤生长具有重要的影响。
通过改变肿瘤接种部位,可以模拟不同的微环境,从而研究肿瘤细胞在不同环境中的生长和转移特性。
皮下接种和内脏器官接种的肿瘤组织,其环境差异会导致肿瘤细胞表型和基因表达的差异,从而影响肿瘤的生长和转移特性。
研究不同接种部位的肿瘤对于揭示肿瘤生长和转移机制具有重要意义。
二、CFSM技术在肿瘤研究中的应用三、不同接种部位肿瘤CFSM观察的可行性分析1. 样品制备:不同接种部位的肿瘤模型可以通过动物实验建立。
可以选择小鼠为实验动物,分别在其皮下、肝脏等部位接种不同类型的肿瘤细胞,建立不同接种部位的肿瘤模型。
随后将实验动物进行活体成像,通过CFSM技术对肿瘤进行高清晰度的成像观察。
2. 成像参数优化:在进行CFSM观察时,需要对成像参数进行优化,以获得高质量的肿瘤成像结果。
可以通过调整激光功率、焦距、扫描速度等参数,优化CFSM成像条件,以获得清晰的肿瘤细胞结构和血管生成等信息。
3. 数据分析和解读:CFSM成像获得的数据需要进行系统的分析和解读。
通过对CFSM 成像数据的分析,可以揭示不同接种部位肿瘤的生长特性、血管生成情况、细胞形态特征等重要信息,从而为肿瘤生长和转移机制的研究提供重要参考。
不同接种部位肿瘤的CFSM观察具有重要的应用前景。
可以通过CFSM技术研究不同接种部位肿瘤的生长特性和转移机制,揭示肿瘤在不同微环境中的适应策略和生长机制。
可以利用CFSM观察数据为肿瘤治疗提供重要参考,例如优化肿瘤微环境治疗策略、开发靶向肿瘤转移的新药物等。
激光扫描共聚焦显微镜观察贲门肿瘤细胞药物诱导后Ca2+浓度变化的意义
激光扫描共聚焦显微镜观察贲门肿瘤细胞药物诱导后Ca2+浓度变化的意义张向阳;门金娥;郑海萍;田珂;刘建霞【期刊名称】《第四军医大学学报》【年(卷),期】2007(028)003【摘要】引言激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)是当今世界上最先进的分子细胞生物学分析仪器,使用钙高度特异性荧光指示剂Flou-3/Am能观察到细胞内Ca2+浓度变化.大量实验证明,在多种刺激因子作用不同细胞诱导凋亡或病理条件下细胞自发凋亡的过程中,都普遍存在胞质钙的持续升高.我们通过LSCM检测化疗药物引起贲门肿瘤细胞Ca2+浓度的变化,并同用MTT法测得的药敏结果比较,以探讨Ca2+浓度变化与药敏的关系.【总页数】1页(P262-262)【作者】张向阳;门金娥;郑海萍;田珂;刘建霞【作者单位】河北工程大学临床医学院,河北,邯郸,056029;河北工程大学临床医学院,河北,邯郸,056029;河北工程大学临床医学院,河北,邯郸,056029;河北工程大学临床医学院,河北,邯郸,056029;河北工程大学临床医学院,河北,邯郸,056029【正文语种】中文【中图分类】R513.7【相关文献】1.飞秒激光LASIK与飞秒激光基质透镜切除术后角膜神经再生的激光扫描共聚焦显微镜观察 [J], 赵静静;王锐;陈元兵;付梦军;张浩润2.应用激光扫描共聚焦显微镜观察药物对软骨细胞内游离钙的影响 [J], 刘湘源3.激光扫描共聚焦显微镜检测肿瘤细胞药敏的临床意义 [J], 张向阳;门金娥;郑海萍;田珂;刘建霞4.高糖高脂诱导的H9c2细胞活性氧产物和线粒体功能障碍的激光扫描共聚焦显微镜观察 [J], 林敏;李素菡;杨静莹;周武雄5.激光共聚焦显微镜观察光敏剂ALA和HMME在肿瘤细胞的胞内分布 [J], 肖卫东;陈炜;葛海燕;陈祖林因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
激光扫描共聚焦显微镜术检测单个血小板钙波动方法的探讨
激光扫描共聚焦显微镜术检测单个血小板钙波动方法的探讨蔡应木;焦晓阳;吴映娥;霍霞;苏永忠【期刊名称】《激光生物学报》【年(卷),期】2002(011)003【摘要】目的探讨血小板贴壁的简易方法,同时,观察单个血小板激活前后细胞内钙波动及形态变化的规律.方法采用多种粘附剂固定血小板,利用钙荧光探针(Fluo-3/AM)(终浓度10~20μmol)进行染色,在激光扫描共聚焦显微镜检测下加入二磷酸腺苷,观察和分析血小板内Ca2+浓度及形态变化.结果多聚赖氨酸促进血小板贴壁固定的效果最佳;单个血小板激活后细胞内Ca2+浓度为激活前的128%,形态由圆形或椭圆形转为不规则形,有空泡、突起形成.结论多聚赖氨酸是血小板贴壁的理想粘附剂,本方法能简易、快捷地监测血小板激活过程中胞浆内钙离子动态变化及形态改变,有助于血小板功能的深入研究.【总页数】3页(P233-235)【作者】蔡应木;焦晓阳;吴映娥;霍霞;苏永忠【作者单位】汕头大学医院第一附属医院血液室,中国广东汕头,515041;汕头大学医院第一附属医院血液室,中国广东汕头,515041;汕头大学医院第一附属医院血液室,中国广东汕头,515041;汕头大学医学院中心实验室,中国广东汕头,515031;汕头大学医院第一附属医院血液室,中国广东汕头,515041【正文语种】中文【中图分类】Q631;Q336【相关文献】1.对激光扫描共聚焦显微镜观察血小板钙波动方法的改进 [J], 金朝;李向飞;丛玉隆2.用激光扫描纤维直径分析仪检测山羊绒细度的方法探讨 [J], 郭天芬;高雅琴;牛春娥;李维红3.流式细胞术定量检测外周血单个核细胞NF-κB的方法探讨 [J], 郭晓红;贾永平;姚海东;刘志苹4.激光扫描共聚焦显微镜检测Fluo-3 AM负载大鼠心肌微血管内皮细胞最佳浓度和时间的探讨 [J], 冯波;董虹;张涛;胡格;房克凤;穆祥5.激光扫描共聚焦显微镜和Fluo-3/AM检测细胞内游离钙 [J], 霍霞;鲍永耀;黄辉;黄行许;朴英杰因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
共聚焦激光显微内镜对幽门螺杆菌感染及其相关性胃炎的诊断价值的开题报告
共聚焦激光显微内镜对幽门螺杆菌感染及其相关性胃炎的诊断价值的开题报告一、研究背景胃炎是一种广泛存在于人群中的胃部疾病,其发病率和死亡率一直居高不下。
其中最主要的病因之一,是幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,简称Hp)的感染。
未治疗的Hp感染可引起胃黏膜炎、消化道溃疡、胃肠道恶性肿瘤等多种严重后果。
目前治疗它主要通过药物、细菌学、免疫学等多方面手段,其中诊断是治疗的重要环节之一。
共聚焦激光显微内镜(confocal laser endomicroscopy,CLE)技术是一种高分辨率显微镜。
它可以在局部麻醉条件下,直接观察和评价消化道上皮细胞的细微变化。
CLE协同荧光探针示踪Hp感染和胃黏膜炎症反应,可以提供更加直观精准的疾病诊断。
二、研究目的本研究旨在探讨CLE技术在幽门螺杆菌感染与其相关性胃炎的诊断中的价值,以及其与其他临床诊断手段的比较。
三、研究内容及方法3.1 CLE技术的基本原理CLE技术利用激光与荧光标记物相互作用以产生荧光信号的原理,对进入人体内腔的激光进行聚焦,生成一条较为清晰的光纤束,在显微镜的镜头中将荧光标记物的信号高分辨率记录下来,生成3D图像,得以实时监测靶组织和器官的病理变化。
3.2 研究方法通过检索相关文献,收集并整理CLE技术在胃炎和Hp感染中的应用案例,并分析其诊断价值及优劣。
结合目前公认的Hp感染和胃炎的确诊标准,比较CLE结果与其他常规手段的差异并进行分析。
四、预期结果CLE技术是一种无创、局部麻醉条件下即可应用的诊断手段。
它可通过检测胃黏膜炎症、Hp的定位和荧光标记物的表达等特性,为胃炎和Hp感染的诊断和疾病进展的评估提供高精度、高度重复性的方法。
相对于当前其他诊断方法,CLE 技术的主要优势在于其显微镜图像的高清晰度,可以有效地减少患者检查的费用和检测时间,同时提高评估的准确性和可靠性。
总之,本研究的目的是为了探讨CLE技术在胃炎和Hp感染的诊断中具有的优势和潜力,为胃病诊疗技术的发展提供新的思路和启示。
对激光扫描共聚焦显微镜观察血小板钙波动方法的改进
对激光扫描共聚焦显微镜观察血小板钙波动方法的改进
金朝;李向飞;丛玉隆
【期刊名称】《现代仪器与医疗》
【年(卷),期】2001(000)004
【摘要】对激光扫描共聚焦显微镜观察血小板钙波动的方法进行了改进.解决了血小板贴壁不牢,加入的诱导剂混和不够充分等问题,大大提高了实验的成功率
【总页数】2页(P12-13)
【作者】金朝;李向飞;丛玉隆
【作者单位】航空医学研究所,北京,100036;空军第四六六医院,北京,100036;解放军总医院,北京,100853
【正文语种】中文
【中图分类】TH74
【相关文献】
1.激光扫描共聚焦显微镜观察细菌生物膜形成的方法学研究 [J], 陈景祥;孙凤军;刘松青;夏培元
2.飞秒激光LASIK与飞秒激光基质透镜切除术后角膜神经再生的激光扫描共聚焦显微镜观察 [J], 赵静静;王锐;陈元兵;付梦军;张浩润
3.应用激光扫描共聚焦显微镜观察药物对软骨细胞内游离钙的影响 [J], 刘湘源
4.激光扫描共聚焦显微镜术检测单个血小板钙波动方法的探讨 [J], 蔡应木;焦晓阳;吴映娥;霍霞;苏永忠
5.激光共聚焦显微镜观察前胡丙素对新生大鼠缺氧再灌注心肌细胞内游离钙的影响[J], 于晓由页; 祝宝华; 王金桂
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激光扫描共聚焦显微镜观察贲门肿瘤细胞药物诱导后ca2
浓度变化的意义_医学论文
激光扫描共聚焦显微镜观察贲门肿瘤细胞药物诱导后Ca2+浓度变化
的意义_医学论文
激光扫描共聚焦显微镜观察贲门肿瘤细胞药物诱导后Ca2+浓度变化的意义_医学论文
作者:张向阳门金娥郑海萍田珂刘建霞【关键词】激光扫描共聚焦显微镜;肿瘤;消化道
【关键词】激光扫描共聚焦显微镜;肿瘤;消化道
0引言
激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)是当今世界上最先进的分子细胞生物学分析仪器,1,.使用钙高度特异性荧光指示剂Flou3/Am能观察到细胞内Ca2+浓度变化.大量实验证明,在多种刺激因子作用不同细胞诱导凋亡或病理条件下细胞自发凋亡的过程中,都普遍存在胞质钙的持续升高,2,.我们通过LSCM检测化疗药物引起贲门肿瘤细胞Ca2+浓度的变化,并同用MTT法测得的药敏结果比较,以探讨Ca2+浓度变化与药敏的关系.
1材料和方法
1.1材料标本均来源于河北工程学院附属医院手术切除的贲门肿瘤组
织;MTT(Sigma公司);RPMI1640(Gibco公司);Flou3/Am(Biotium
公司);顺铂(山东省德州制药厂);甲氨蝶呤(北京医科大学实验药厂);阿霉素(明治医药有限公司);丝裂霉素(上海新亚药业有限公司);5氟尿嘧啶(上海旭东海普药业有限公司);
LSCMMRC1024(BioRad);二氧化碳培养箱(Sanyo公司).
1.2方法将肿瘤组织置入含RPMI1640培养液的无菌器皿中,机械方法制成细胞悬液,调整细胞密度为(1,3)×108/L.将细胞悬液接种于96孔培养板(90μL/L),置50mL/LCO2,37?二氧化碳孵箱内培养4h,分2组分别加入顺铂、甲氨蝶呤、阿霉素、丝裂霉素和5氟尿嘧啶5种化疗药物(10μL/孔),并设空白孔和对照孔.继续培养12h后取一组96孔板,收集细胞液,加入50μLFluo3/AM(10μmol/L),继续
孵育1h,洗去多余的Fluo3/AM,用LSCM检测细胞内Ca2+浓度变化.细胞培养72h 后,取一组96孔板,弃去上清,每孔加入
2g/LMTT20μL,继续培养4h,每孔加入二甲基亚砜150μL,室温振荡10min,
用酶标仪(λ=550nm)测定每孔吸光度(A)值.相对抑制率(%)=(对照组A-加药组A)/对照组A×100%,相对抑制率?30%为敏感,相对抑制率,30%为不敏感.数据采用PEMS3.1软件进行Wilcoxon秩和检验.
2结果
化疗药物引起的贲门肿瘤细胞内Ca2+浓度变化与药敏关系见表1.敏感药物与
不敏感药物引起的贲门肿瘤细胞Ca2+浓度变化之间具有显著差别(0.05),敏感药物引起的贲门肿瘤细胞内Ca2+的浓度变化明显大于不敏感药物. 表1贲门肿瘤细胞
内Ca2+浓度的变化与MTT药敏结果比较(略)
3讨论
研究证明,目前使用的许多抗癌药均可在不同类型的敏感肿瘤细胞中诱导凋亡.药物的抗肿瘤效果不仅取决于药物对靶细胞的直接作用,更在于其诱导敏感肿瘤细胞凋亡的能力.化疗诱导细胞凋亡的机制分三个阶段,在最后一个阶段,化疗药物仅能使对其敏感的细胞而非耐受细胞产生凋亡的bax基因表达,最后导致凋亡发生,选择敏感药物诱导细胞凋亡成为化疗的目的.Ca2+作为参与许多生命活动的关键第二信使,在细胞凋亡中的作用受到普遍关注,3,.Ca2+本身就是一种诱导细胞凋亡的信号,已得到多方面的证实.
临床抗癌药物筛选常用MTT比色法,但MTT比色法需3d时间,在药敏结果出来之前,患者的用药在很大程度上尚靠经验去选定化疗药物.发生凋亡的细胞最早可以测及的生物变化是细胞内快速持续的Ca2+浓度的升高,我们使用化疗药物作用贲门肿瘤细胞后,将LSCM检测的Ca2+浓度变化与MTT法测得的药敏结果相比较,结果显示与不敏感药物相比,敏感药物能引起贲门肿瘤细胞Ca2+浓度的更大变化,通过LSCM检测化疗药物诱导后贲门肿瘤细胞Ca2+浓度变化,可以在MTT药敏结果出来之前为临床用药提供参考.
【参考文献】
,1,王春梅,黄晓峰,李玉松,等.激光共聚焦显微镜与荧光显微镜在医学研究中的比较,J,.第四军医大学学报,1997,12:62-63.
,2,NicoteraP,OrreniusS.Theroleofcalciuminapoptosis,J,.CellCalcium,19 98,23(23):173-180.
,3,
RizzutoR,PintonP,FerrariD,etal.Calciumandapoptosis:factsandhypothese s,J,.Oncogene,2003,22(53):8619-8627.。