蓝莓叶总黄酮提取物的定性分析和抗油脂氧化
蓝莓花、茎、叶酚类物质含量及抗氧化活性比较
蓝莓花、茎、叶酚类物质含量及抗氧化活性比较李晓英,薛梅,樊汶樵*(重庆文理学院林学与生命科学学院,重庆 402160)摘 要:比较蓝莓花、嫩茎、嫩叶及老叶总多酚、总黄酮、原花青素的含量,并研究其抗氧化性能差异。
结果表明:嫩叶中总多酚含量最高,为43.77 mg GAE/g(以干质量计,下同),分别是花、嫩茎和老叶的3.45、1.42、1.12 倍;老叶中总黄酮、原花青素含量最高,为68.01 mg RE/g、23.29 mg CAE/g,分别是花的2.57 倍和4.61 倍、嫩茎的1.79 倍和1.23 倍、嫩叶的1.03 倍和1.98 倍。
抗氧化性能中,老叶的铁还原能力最大,其次是嫩茎和花,嫩叶较差;清除•OH的能力为嫩茎>嫩叶>花>老叶;清除DPPH自由基能力和总抗氧化能力均为嫩茎>嫩叶>老叶>花甲醇提取物,均高于对照品;蓝莓各部分提取物对DPPH自由基的清除能力最强,总抗氧化能力次之,清除•OH能力和铁还原能力较差。
关键词:蓝莓;多酚;黄酮;抗氧化活性Comparison of Antioxidant Activity and Phenolic Contents of Blueberry Flowers, Stems and LeavesLI Xiaoying, XUE Mei, FAN Wenqiao*(College of Forestry & Life Science, Chongqing University of Art & Science, Chongqing 402160, China) Abstract: Total phenolic content (TPC), total flavonoid content (TFC) and total proanthocyanin content (TAC) were determined in blueberry flowers, tender stems, tender leaves and old leaves. Antioxidant activities of acidified methanol extracts from different parts of blueberry were evaluated by ferric reducing antioxidant power (FRAP) and hydrolxyl, DPPH and ABTS+ free radicals scavenging capacity assays. Results indicated that tender leaves contained the highest level of TPC(43.77 mg gallic acid/g m d), which was increased by 3.45, 1.42 and 1.12 folds as compared to flowers, tender stems and old leaves, respectively. Old leaves contained the highest levels of TFC (68.01 mg rutin/g m d) and TAC (23.29 mg catechinic acid/g m d), which were 2.57 and 4.61, 1.79 and 1.23, and 1.03 and 1.98 folds higher than those in flowers, tender stems, and tender leaves, respectively. The FRAP activity of the extract from old leaves was the highest, followed by tender stems, flowers, and tender leaves. The hydroxyl radical scavenging activity was in the following order: tender stems > tender leaves > flowers > old leaves. Both the DPPH radical scavenging capability and total antioxidant capacity (TAC) were in the following order: tender stems > tender leaves > old leaves > flowers > VC. In summary, the DPPH radical scavenging was the strongest of the antioxidant activities for all the blueberry extracts, followed by TAC, and their antioxidant activities were the weakest in terms of hydroxyl radical scavenging capacity and FRAP activity.Key words: blueberry; flavonoids; phenolics; antioxidant activityDOI:10.7506/spkx1002-6630-201703024中图分类号:TS255.1 文献标志码:A文章编号:1002-6630(2017)03-0142-06引文格式:李晓英, 薛梅, 樊汶樵. 蓝莓花、茎、叶酚类物质含量及抗氧化活性比较[J].食品科学, 2017, 38(3): 142-147.DOI:10.7506/spkx1002-6630-201703024. LI Xiaoying, XUE Mei, FAN Wenqiao. Comparison of antioxidant activity and phenolic contents of blueberry flowers, stems and leaves[J]. Food Science, 2017, 38(3): 142-147. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/spkx1002-6630-201703024. 收稿日期:2016-04-12基金项目:重庆市基础与前沿技术研究(重点)专项(cstc2015jcyjBX0013);重庆市基础科学与前沿技术研究项目(csts2016jcyjAX0012);永川区自然科学基金项目(Ycstc,2015nc1001)作者简介:李晓英(1973—),女,副教授,硕士,研究方向为天然产物的提取与功能活性。
不同生长期蓝莓叶多酚物质含量及抗氧化活性研究
不同生长期蓝莓叶多酚物质含量及抗氧化活性研究李晓英;薛梅;樊汶樵;黄科【摘要】为了探明不同生长期蓝莓叶酚类物质变化情况及抗氧化活性,从而为蓝莓叶的适时采摘及加工利用提供参考依据,分别采集5、6和8、9月此4个生长时期的蓝莓叶,经不同方法干燥粉粹后制备蓝莓叶醇提物,测定并比较分析了不同生长时期蓝莓叶醇提物中的总酚与总黄酮含量、铁离子还原力、对DPPH自由基的清除率及总抗氧化能力(FRAP值).结果表明:微波干燥处理的蓝莓叶醇提物其总酚、总黄酮含量均高于常规热风干燥处理的,而自然干燥处理的效果较差;微波干燥处理的蓝莓叶在其4个生长期中总酚含量的变化不大,其总黄酮含量在8、9月迅速升高,显著高于5、6月的总黄酮含量,9月的总黄酮含量最高,为(96.76±2.50)mg·g-1,显著大于8月的总黄酮含量,8月其含量为(75.52±2.09)mg·g-1,P<0.05;5月采摘的叶片其铁还原能力最强,其次是9月,最差的是6月;9月蓝莓叶醇提物对DPPH自由基的清除率最高,其半数清除浓度最小,EC50值为(61.59±1.31)μg·mL-1,5、8和9月其EC50值的差异均不显著,但此3个生长期与6月的EC50值的差异显著(P<0.05);4个生长时期其叶片醇提物的FRAP值的大小顺序为9月>5月>8月>6月,但4个时期其醇提物的FRAP值均远低于对照维生素C.总体上,9月蓝莓叶的抗氧化能力(除铁还原力外)均高于其他3个生长时期的,即9月较适宜于蓝莓叶的大量采摘及开发利用.【期刊名称】《经济林研究》【年(卷),期】2018(036)004【总页数】7页(P40-46)【关键词】蓝莓叶;生长期;多酚;醇提取物;抗氧化活性【作者】李晓英;薛梅;樊汶樵;黄科【作者单位】重庆文理学院林学与生命科学学院,重庆永川 402160;重庆文理学院林学与生命科学学院,重庆永川 402160;重庆文理学院特色植物研究院,重庆永川402160;重庆文理学院特色植物研究院,重庆永川 402160【正文语种】中文【中图分类】S663.2蓝莓(blueberry)在我国有着十分丰富的资源,目前重庆已有多处蓝莓种植基地。
蓝莓叶总黄酮的提取及其定性分析
品 与 发 醇 科 技
F o n eme t t n T c n lg o d a d F r n ai e h o o y o
第 4 8卷 ( 4期 ) V 1 8, o 第 o. N . 4
蓝莓叶总黄酮 的提取及其定性分析
李 颖 畅 , 吕艳 芳 2
( . 海 大 学 化 学化 工 与 食 品 安 全 学 院 , 宁 锦 州 1 1 1 ; 1 渤 辽 2 0 3 2辽 宁省 高 校 食 品 质 量安 全 与功 能 食 品 研 究 重点 实验 室 , 宁锦 州 1 1 1 ) . 辽 2 0 3
第 4 8卷 ( 第 1 0期 ) 总 7
一
李颖 畅 等 : 莓 叶 总 黄 酮 的 提 取及 其 定 性 分 析 蓝
3 3
定 的影 响 , 明显改 善并 提 高视 网膜功 能 , 眼睛 能 对 叶总 黄酮具 有 较强 的 清除 氧 自由基作 用 .抑 制脂 质
1 - 提取 溶剂 的选 择 .3 2
e a o c n e t t n o 7 %,r i o w ma r lt l ud o 1 0 gm ) xr i i e o 2 mi a d et c o t n l o c nr i f 0 h ao a o f r t i o i i f : (/ L ,e t t n t f 1 0 n n xr t n t a ea q 2 ao m ai
具 有 明显 的保 护 作 用 _。 颖 畅与 孟 宪 军 发 现 蓝 莓 6李 _ 过 氧 化 _。 了使蓝 莓 叶资 源得 以综合 开 发利 用 , 7为 ] 为 营养 、保 健价 值 的全 面评价 及其 深层 次加 工 成功 能 性 食 品 、 品提 供一 定 的依据 , 者对 蓝莓 叶有 效成 药 笔 分 黄酮类 化 合物 进行 了提取 和测定 ,并 对 蓝莓 叶 黄
关于蓝莓花青素提取及其抗氧化活性的分析
关于蓝莓花青素提取及其抗氧化活性的分析孙莉【摘要】采用酸化乙醇提取蓝莓鲜果中的蓝莓花青素,并通过羟自由基、DPPH 自由基、超氧阴离子自由基清除率试验评价蓝莓花青素的抗氧化能力。
实验表明,蓝莓花青素最佳提取工艺是:70%两酮,提取温度为4°C,提取时间为1.5h,料液比为1:3。
蓝莓花青素对羟自由基、DPPH自由基、超氧阴离子自由基清除率随着浓度的增大而增强,其抗氧化活性高于相同浓度的抗坏血酸。
蓝莓花青素具有很高的抗氧化活性,可以作为天然抗氧化剂进行开发。
【期刊名称】《呼伦贝尔学院学报》【年(卷),期】2016(024)001【总页数】4页(P82-84,31)【关键词】蓝莓;花青素;提取;抗氧化活性【作者】孙莉【作者单位】呼伦贝尔市食品药品监督管理局执法稽查支队内蒙古海拉尔021008【正文语种】中文【中图分类】Q946.49引言蓝莓花青素是蓝莓鲜果中最为主要的活性成分,在实际研究分析时,因蓝莓花青素比较容易氧化,所以,国内外研究并未形成统一的定性以及定量测定方法。
首先,针对花青素的定量测试方法主要包括正丁醇-盐酸法、香草酸-盐酸法、香草酸-硫酸法等。
其中,花青素结构对正丁醇-盐酸法受的影响比较大,在这种情况下,不适合测定低聚合度花青素。
香草酸-盐酸法在测定花青素含量较低的提取物水溶液时,体系透明度较低;干扰较大香草酸硫酸法时,由于硫酸的强氧化作用使得测定结果偏低。
其次,定性方法包括红外吸收光谱法、高效液相色谱法(HPLC)等。
其中,HPLC既可以对花青素定性也可以对花青素定量。
基于此,应利用此方法进行蓝莓中的花青素提取以及抗氧化活性分析。
一、蓝莓的生物活性物质实验证明,蓝莓的果实与叶子均能够入药,其果实药性酸、甘、平,能够有效防止痢疾,叶片则性比较苦、涩、温,且有小毒,能够起到利尿、解毒的功效。
蓝莓果实中包含大量的花色苷以及多酚类抗氧化活性成分,能够对人体内的自由基进行有效清除,起到预防癌症的作用。
蓝莓不同部位活性成分及抗氧化能力比较分析
蓝莓不同部位活性成分及抗氧化能力比较分析
张山佳;商银行
【期刊名称】《中国调味品》
【年(卷),期】2024(49)1
【摘要】以蓝莓全果、蓝莓果皮和蓝莓果肉为原料,采用醇提法和水提法测定其绿原酸、原儿茶酸、槲皮素、香草酸、总黄酮和总酚的含量及其抗氧化能力。
结果表明,蓝莓果实不同部位中活性成分和抗氧化能力具有显著差异(P<0.05);蓝莓果皮中
总黄酮和总酚含量最高,显著高于其他提取物中总黄酮和总酚含量,分别为32.61
mg/g和26.95 mg/g;蓝莓果实各部位醇提取物中抗氧化能力显著高于水提取物,
顺序为蓝莓果皮>蓝莓全果>蓝莓果肉;各部位主要有效成分包括绿原酸、原儿茶酸、槲皮素、香草酸,在蓝莓果皮中的含量显著高于果肉和蓝莓全果中(P<0.05),蓝莓果
实中绿原酸和香草酸含量最高。
【总页数】5页(P141-145)
【作者】张山佳;商银行
【作者单位】许昌学院
【正文语种】中文
【中图分类】TS255.1
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1.不同产地黑老虎果实不同部位抗氧成分及抗氧化活性比较
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分析比较4.有柄石韦不同部位有效成分及抗氧化活性的比较分析5.丁香不同部位挥发油的GC-MS成分分析和抗氧化活性比较
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蓝莓提取物对肝脏健康的功效
蓝莓提取物对肝脏健康的功效一、引言肝脏是人体最重要的器官之一,具有合成代谢、排泄毒素、解毒等功能。
然而,现代生活中的不良饮食习惯以及环境污染等因素,使得肝脏疾病的发病率不断上升。
为了维护肝脏的健康,人们开始寻找天然的方法来保护和促进肝脏功能,其中蓝莓提取物因其丰富的抗氧化物质而备受关注。
本文将探讨蓝莓提取物对肝脏健康的功效。
二、蓝莓提取物的抗氧化作用1. 蓝莓提取物中的花青素蓝莓中富含花青素,这些化合物具有强大的抗氧化功效。
研究表明,花青素可中和自由基,减少氧化应激对肝脏的损害,从而保护肝细胞免受损伤。
2. 蓝莓提取物中的维生素C和E蓝莓中含有丰富的维生素C和E,这些维生素也是强效的抗氧化物质。
它们能够清除自由基,减少氧化应激对肝脏的伤害,促进肝脏细胞的修复和再生。
三、蓝莓提取物的抗炎作用1. 蓝莓提取物中的类黄酮蓝莓提取物中含有丰富的类黄酮,这些化合物具有明显的抗炎作用。
研究表明,类黄酮能够抑制炎症反应的产生,减少肝脏组织的炎症损伤,从而保护肝脏健康。
2. 蓝莓提取物中的多酚类化合物蓝莓中含有多种多酚类化合物,如植物黄酮和酚酸等。
这些化合物能够抑制炎症反应的发生,缓解肝脏组织的炎症症状,降低肝脏炎症的程度。
四、蓝莓提取物的保护肝细胞作用1. 蓝莓提取物中的花青素和类黄酮蓝莓提取物中的花青素和类黄酮具有保护肝细胞的作用。
这些化合物能够减少氧化应激对肝细胞的损伤,促进肝细胞的再生和修复。
2. 蓝莓提取物中的多酚类化合物蓝莓提取物中的多酚类化合物具有显著的抗氧化和抗炎作用。
它们能够保护肝细胞免受氧化应激和炎症的损害,维持肝细胞的正常功能。
五、蓝莓提取物的减轻脂肪肝作用1. 蓝莓提取物中的花青素和类黄酮蓝莓提取物中的花青素和类黄酮能够减轻脂肪肝的发生和发展。
研究发现,这些化合物能够降低血脂和血糖水平,减少脂肪在肝脏中的积累,从而改善脂肪肝的病情。
2. 蓝莓提取物中的多酚类化合物蓝莓中的多酚类化合物具有调节脂代谢的作用。
高效液相色谱法分析定性蓝莓提取物中有关组分的研究
锦 葵色 素葡 萄糖 苷 ( C A S 一 7 2 2 8 - 7 8 — 6 )T o k i w a提供 ; 矢 车菊 素 ( C A S 一 5 2 8 — 5 8 — 5 )C y a n i d i n 、C h l o r i d e提供 ;
甲酸 1 O:甲醇 2 2 . 5:乙 腈 2 2 . 5 ) )作 流 动相 共分 离 2 3 种 花 青 素组 分 , 主 要 的前 1 3个 组分 峰 大部 分峰型 好而 均匀 , 分 离效 果 好 ;以甲醇 2 3 和3 % 磷酸 7 7 作流 动相 , 共分 离 2 4 种花 青素组 分 , 但 峰对 称 性 不好 , 大 部分 拖 尾 ; 以6 %甲酸 8 9 和 ( 甲醇 6 4:异 丙醇 3 6 )1 2 作 流 动相 共 分 离 了 1 2 种 花 青 素组 分 , 数 量少 ,分
As 1 0 2 00 A D T。
甲酸 1 O:甲醇 2 2 . 5 :乙腈 2 2 . 5 ) )为最优 流动相 。
3 )流动 相洗脱 梯度 的 比较 。
取 l J 2 . 1项 下 的 样 品 溶 液 , 按 1 ) 的 条 件 , 流 动 相 按 2 ) 项 下 确 定 的 配 比 ,在 2 6 m i n内 流 动 相 B分 别 用 ① 1 2 %一 3 5 %一 7 5 % 、 ② l 2 %一 4 0 %一 7 5 % 、 ③1 5 %一 5 0 %一 7 5 %为 洗脱 梯度 , 进行色谱 分 析 。 流 动相 B 洗 脱梯 度 为 1 2 %一 3 5 %一 7 5 %时 , 分离 2 3个花 青 素组分 , 峰 型大 部 分较 好 且 分 布均 匀 , 基 线较 为平 稳 ; 流 动 相
一
供 一定 的依据 。
蓝莓中总黄酮的提取及抗氧化活性研究
环 J 、 降低胆固醇。能降低心肌耗氧量 , 增加 冠脉、 脑血管血流量 , 明显缓解心绞痛 、 抗心律失常等 , 对 防治
心 肌梗 塞 、 心 律失 常等 也有 重要 疗 效 等诸 多功 效 , 已列 为 保健 食 品的一 类 功能 因子 。为此 , 笔 者 以蓝莓 果 实 为 原料 , 采 用超 声 一 微 波 辅助 提取 法 研 究 蓝莓 果实 中总 黄 酮 的提 取 工艺 , 优 选 蓝 莓 中总 黄酮 的提 取 工 艺 , 并 对 提取 液进 行抗 氧化 活 性研 究 , 为利 用蓝 莓工 业 化生产 黄 酮类化 合 物提供 参考 依据 。
种有效 的 自由基清除剂。
关键 词 : 蓝莓; 总黄酮; 超声一 微波辅助提取法; 抗氧 化活 性 中图分 类号 : R 2 8 4 文献 标 识码 : A 文章 编号 : 1 0 0 8 — 9 6 5 9 ( 2 0 1 5 ) 0 3 — 0 0 7 . 0 8
黄酮 类化 合 物是一 大类天 然 产物 , 是 许 多 中草 药 的有 效 成 分 J 。它 的存 在 形 式 有 两种 , 一 种是 游 离 的 苷元 , 另一 种 是 与 糖 等 结 合 的苷 _ 2 J 。黄 酮 的 功 效 是 多 方 面 的 , 它 是 一 种 很 强 的抗 氧 剂 J , 能 改 善 血 液 循
1 材 料 与 方 法
1 . 1 实验 材料
1 . 1 . 1 材料 与 试剂
蓝莓果实 ( 采自 新疆伊宁市 )、 芦丁准品 中( 国药 品生物制品检定所 ) 、 乙醇 ( 9 5 %) 、 5 %的亚硝酸钠溶 液、 1 0 %的 硝 酸 铝 溶 液 、 4 %的氢 氧化钠溶 液、 V c 、 D P P H 自 由基 、 去 离子水、 硫酸 亚铁溶 液 ( A R) 、 双 氧 水
蓝莓中黄酮化合物提取影响因素的研究
2009年 赣南师范学院学报 .6第六期 Journa l o fGannan Nor m alUn iversity Dec.2009蓝莓中黄酮化合物提取影响因素的研究*徐守霞1,王 斌2,赵志东3(1.宿迁高等师范学校生物教研室;2.宿迁学院基础教学部;3.宿迁应用职业技术学校,江苏宿迁 223800)摘 要:采用超声波法提取蓝莓中黄酮类化合物,研究了影响蓝莓黄酮类化合物提取的多种因素.试验结果表明,在温度为40 时,提取时间为40m i n且用甲醇作为提取剂时,此时的提取效率最大.关键词:蓝莓;黄酮类化合物;影响因素中图分类号:R151 文献标识码:A 文章编号:1004-8332(2009)06-0072-03蓝莓(B lueberry),又称越橘、蓝浆果,属杜鹃花科(Ericaceae),越橘属(V accinium.sp),多年生落叶或常绿灌木,分为高丛蓝莓、半高丛蓝莓、低丛蓝莓.蓝莓果实呈深蓝色,被白霜,近圆形[1].蓝莓果中含有花色素苷、黄酮等多种多黄酮类生理活性成分,是赋予蓝莓鲜艳夺目色彩的主要物质[2].联合国粮农组织将蓝莓列为人类五大健康食品之一,誉为 黄金浆果 .最有影响的健康杂志 Preventi o n 称其为 神奇果 .蓝莓果中的黄酮类能够保护人体免受自由基的损伤,增强血管弹性,改善循环系统、增强免疫力、延缓衰老、抵抗心血管疾病等方面起到多重功效.无论在临床应用还是保健类食品开发方面都有广阔的开发前景.因此蓝莓中黄酮类物质是目前国内外研究的热点之一[3-5].本实验从蓝莓黄酮类化合物提取影响因素的方面进行了研究,为蓝莓的深入研究和天然药物的开发提供一定的理论依据.1 实验方法1.1 材料蓝莓果:购于江苏省连云港百瑞蓝莓种植有限公司.1.2 主要试剂和仪器盐酸、甲醇、乙醇、丙酮,均为分析纯,由国药集团上海化学试剂公司生产,芦丁黄酮标准品(为中国药品生物制品检验所).UV-2102C型紫外分光光度计:尤尼柯(上海)仪器有限公司;FA2004N电子分析天平:上海精密科学仪器有限公司;KQ-250B型超声波清洗器,温控水浴锅,大孔吸附树脂.1.3 实验过程1.3.1 花色素苷含量的提取称取10g蓝莓果,研磨破碎后,用甲醇溶液,按1g 10mL的比例混合均匀,于40 下浸提1h后,在40 的水浴中超声波3次,每次振荡10m i n,抽滤.收集到的滤液于40 下减压浓缩得到红色粘稠的粗提液,经树脂纯化、洗脱后,再次进行减压浓缩即得到花色素苷浓缩液[6],将浓缩液用0.1%盐酸和60%的甲醇溶液配成p H3.0备用液,摇匀供分析试验用.1.3.2 花色素苷含量的测定芦丁黄酮标准储备液:称取0.0100g芦丁标准品,置于50mL的容量瓶中,加0.1%盐酸和60%的甲醇溶液使其溶解,调节pH值为3.0并稀释至刻度,摇匀备用.分别移取1.0,1.5,2.0,2.5,3.0,3.5mL的芦丁标准储备液,于10mL容量瓶中,定容.在波长 = 520n m时分别测定其吸光度并且测出A值,结果见图1.准确吸取待测蓝莓水提液的备用液2.0mL定容至50mL.在波长520n m处测其吸光度.由标准曲线回归方程计算出蓝莓中黄酮的浓度,根据稀释倍数计算出蓝莓中黄酮总含量[7-9].*收稿日期:2009-09-16 修回日期:2009-10-23作者简介:徐守霞(1972-),女,江苏宿迁人,宿迁高等师范学校讲师、硕士,主要研究方向:植物生理.图1 蓝莓花色素苷含量的标准曲线2 结果与分析2.1 蓝莓黄酮的光谱特性由吸收光谱图2可知,蓝莓黄酮在400~700nm 之间有一最大吸收峰,该最大吸收峰峰值为520n m.由于蓝莓黄酮对酸度很敏感,不同酸度会导致其最大吸收峰的移动[10-11],图2 蓝莓黄酮的紫外可见吸收光谱图因此以下各试验要在相同的条件下,选择其对应的最大吸收峰进行测定.2.2 提取剂对蓝莓黄酮提取的影响称取3份5.00g样品,分别以无水甲醇、乙醇、丙酮为溶剂,分别加入0.1%盐酸调制p H3.0的溶液50mL按上述蓝莓提取液的制取方法提取蓝莓液.各取0.1m L测其吸光度,计算提取率.表1 不同提取剂对蓝莓花色素苷的影响提取剂提取率%重复1 重复2 重复3 平均值甲醇95.2395.4596.0295.57乙醇87.5188.0688.1387.90丙醇45.7645.5246.5745.95不同提取剂对蓝莓黄酮类提取率的影响见表1.表1表明,采用含体积分数0.1%盐酸的甲醇作为提取剂,其提取效果与均含体积分数0.1%盐酸的乙醇、丙酮作为提取剂差异显著,采用甲醇为提取剂提取率最高.因此,选择含体积分数0.1%盐酸的甲醇作为提取剂.2.3 温度对蓝莓黄酮提取的影响称取6份5.00g样品研磨后,分别以甲醇为溶剂,分别加入0.1%盐酸调制p H3.0的溶液50m L于40 下浸提1h后,在分别在20、30、40、50、60、70 水浴中超声波提取2次,每次10m i n,合并滤液,得蓝莓提取液.测定并计算提取率.不同提取温度对蓝莓黄酮提取率的影响见图3.由图3可见,黄酮的提取率随提取温度的升高总体呈下降趋势,但以提取温度为40 时最高.另在试验中观察到,当提取温度分别为50和60 时,蓝莓提取液中出现白色絮状沉淀,且甲醇的沸点为64 ~65 ,在提取温度为60 时提取剂会大量挥发.分析结果明,20 , 30 ,40 处理间差异不显著,而50 和60 处理与20 ,30 ,40 处理差异显著.故选择提取温度为40.图3 不同提取温度对蓝莓花色素苷的影响表2 不同时间对蓝莓黄酮提取率影响提取时间/m i n提取率%重复1 重复2 重复3 平均值2034.9635.0432.5234.174039.4540.9239.6840.016037.4836.3035.4636.418032.3532.4332.9432.572.4 提取时间对黄酮提取率的影响称取4份5.00g样品,分别以丙酮为提取剂,分别加入0.1%盐酸调制pH3.0的溶液50mL,提取时间分别为20m in、40m i n、60m i n、80m i n按上述蓝莓提取液的制取方法提取蓝莓液.各取0.1mL测其吸光度,计算提取率.由表2可见,随提取时间的增加,黄酮的提取率呈先增大后减小的趋势,其中提取时间约为40m i n时提取率最大.据报道,超声波可缩短提取时间,提高提取效率,但其在一定频率和功率下也可使有机大分子降解[12].可以推断,在频率24KHZ时过长时间的超声波处理将导致黄酮分解.因此,确定提取时间约为40m i n.73第6期 徐守霞,王 斌,赵志东 蓝莓中黄酮化合物提取影响因素的研究74赣南师范学院学报2009年2.5 样品分析精密称取蓝莓10g鲜果,按1.3.1实验方法制备样品溶液,在波长520nm出侧其吸光度,分析结果蓝莓鲜果中黄酮化合物的含量为257.3m g/100g.通过实验得知,超声波提取蓝莓果实中的黄酮的最佳条件为.甲醇为溶剂pH3.0的酸性条件,提取时间为40m in,提取温度为40 ,振荡时间为10m in,振荡次数为3次.蓝莓果中含有丰富的黄酮类化合物,用超声波提取时间短,原料利用率高,是一种值得采用的方法.参考文献:[1] 凌关庭.可供开发食品添加剂( ):蓝莓提取物及其抗氧化作用[J].粮食与油脂,2003(6):45-48.[2] 孙志健,张燕,陈芳,等.对蓝莓产业化发展的思考[J].食品工业科技,2005,26(12):183-184.[3] 李亚东,姜惠铁,张志东,等.中国蓝莓产业化发展的前景[J].沈阳农业大学学报,2001,3(1):39-42.[4] 李颖畅,宣景宏,孟宪军.蓝莓果中花色素苷的研究进展[J].食品研究与开发,2007,28(1):178-180.[5] 岳辉吉,朱杰.天然色素的超声提取研究[J].现代生物医学进展,2006,6(5):11-13.[6] 向道丽.酶法提取越桔果渣花色苷酶解条件的研究[J].中国林副特产,2005,12(6):1-3.[7] Zdun czyk Z,Frej n agel S,W rob l e w skaM,et a.l B i o l og i cl acti v i ty of pol ypheno l extracts f ro m d i feren t plantsou rces[J].Food Research Inter n ati on a,l2002,35:183-186.[8] W illy Kalt,Jane E.M cDonal d.Che m i cal co m positi on of Lowbu s hB l ueberry Cu lti vars[J].J.Am er.Soc.H ort.S c.i,1996,121(1):142-146.[9] 杨桂霞,范海林,李亚东,等.RP H PLC法测定栽培种越橘果中花色素苷的含量[J].药物分析杂志,2005,25(10):1222-1224.[10] M R A,H K E,W R E.An t h ocyan i a,Ph2enolics,and Anti ox i dan tC a2pacit y i n D i verse Sm all Fru i tes Vacci n i um Rubu s,and R i bes[J].J.Agric.Food Ch en.,2002,50:519-525.[11] Sp i ers.J1M1Soil2app li ed s u lf u r af2fect s ele mental l eaf conten t andgro w t h of T i fb l ue rabb i t2eye b l ue2berry1[J]J ournal of Am erican Societ yofH orti cu lt u re Science12000,117(2):30-32.[12] 徐璐,郑建仙.欧洲越桔花色苷的研究概况[J].中国食品添加剂,2005(4):43-46.Study on F l avonoi ds Extracted Factors of B l ueberryXU Shou xia1,WANG B in2,Z HAO Zh i dong3(1.Suq i anH i gher N or m al School B iology T each i ng;2.Foundation T eac h i ng D epart m ent;3.Suq i an A pp lied Vocational technical,Suq ian223800,Ch i na)Abstrac t:Ex trac ti on usi ng u ltrasonic fl avono i ds i n bl uebe rr i es is t o study the i m pact o f blueberry flavono i ds ex tracted from a var i e ty of factors.The resu lts show tha t t he te m pe ra t ure o f40 ,ex tracti on ti m e is40m i n and ex tracted w ith m e t hano l as an agen t,the m ax i m u m extraction e fficiency at this ti m e.K ey word s:Blueberry;F l avono i ds;F actors。
蓝莓抗氧化研究
蓝莓的抗氧化性研究[摘要]本文主要介绍了蓝莓的抗氧化性,通过蓝莓的品种、蓝莓的贮藏及蓝莓中提取物等方面抗氧化性的介绍,从而我们也能知道蓝莓中不同提取物对抗氧化性的影响,让我们对蓝莓的这一特性有更清晰的认识,在生活中可以更好地利用蓝莓的抗氧化性。
[关键词]蓝莓,多糖,纤维素酶,抗氧化性,花青素,黄酮,贮藏温度蓝莓又称越橘、蓝浆果。
蓝莓是一种耐寒性极强的野生植物,原产于北美、苏格兰和俄罗斯。
在我国东北的大小兴安岭及海南等地区都有野生种分布,目前辽宁省不少地区也有了大面积的种植。
蓝莓果实不仅甜酸适度、风味好,且营养丰富,含有大量对人类健康有益的物质,包括抗氧化物、鞣酸、叶酸、抗菌成分和丰富的食用纤维等,因此,常被誉为“浆果之王”。
目前对于蓝莓中活性成分的研究还主要集中在花色苷上,研究了花色苷提取物的诸多生理功能以及一些加工处理对其抗氧化能力的影响[1];对于蓝莓中的黄酮类物质的功能性也有研究。
一.不同品种蓝莓提取物的抗氧化作用通过对不同品种的蓝莓提取物的总酚含量的测定及蓝莓提取物对DPPH自由基和超氧阴离子自由基的清除实验,可以筛选出高抗氧化性的蓝莓品种。
DPPH 自由基是一种十分稳定的自由基。
它的稳定性主要来自共振稳定作用及三个苯环的空间障碍,使其中氮原子上的不成对电子不能发挥其应有的电子配对而使吸收逐渐消失,其褪色程度与其接受的电子数呈定量关系。
从蓝莓提取物对DPPH自由基的清除实验中可以判断出不同品种的蓝莓提取物对DPPH自由基的抑制能力的强弱次序,再从蓝莓提取物对超氧阴离子自由基的清除实验判断出不同品种的蓝莓中酚含量的高低,从而得出结论。
经过实验表明蓝莓提取物的抗氧化能力与其中酚类物质的含量有相关性[2],即提取物中总酚含量越高的品种,对DPPH 自由基和超氧阴离子自由基的清除能力也越大。
二.贮藏温度对蓝莓抗氧化性的影响研究不同贮藏温度下,蓝莓果实的活性成分及抗氧化活性[3]的变化,确定蓝莓鲜果适宜的贮藏温度,并明确其主要抗氧化成分,对寻求新型高效的天然抗氧化剂,提高蓝莓的利用价值提供参考。
蓝莓叶总黄酮的微波提取及抗氧化活性研究
la e a etra t xd n cii . e v sh db te n i ia t tvt o a y
Ke r s bu b ryl a e ; a o od mirwa ee ta t n o t z t n a t xd n ywo d : le er v s f v n i ; c o v xrc i ; pi ai ; n i i a t e l o mi o o
2 1 年 3月 01
食品研究与开发
F o eerh n ee o et odR s c d vl m n a A D o 基础研 究
4 4
第3 2卷第 3期
蓝莓叶总黄酮的微波提取及抗氧化活性研究
刘小莉 , 周剑忠 , 单成俊 , 黄开红
( 江苏省农 业科学 院农产品加工研 究所 , 江苏 南 京 20 2 ) 10 4
蓝莓原产于美洲 , 是越桔酸类植物 ( ain m) V c i 中 nu
1 材 料 和方 法
的一种 , 除果实 风味独 特营 养丰 富外 , 蓝莓 叶也可人 药【 l 】 。蓝莓 叶性温 、 味苦 , 有利尿 、 毒之 功效 , 解 研究 发 现蓝莓叶中存在大量黄酮类物质。黄酮类化合物分子 中含有多 电子 的羟基部分 ,使其具有 良好的抗氧化性 能, 具有 清除人体 中超氧离子 自由基 、 抗衰老和增加机
1 材料和仪器 . 1 1 . 材料和试剂 .1 1
蓝莓叶样 品由南京新得力食品有限公 司提供 。芦
mir wa e p we 0 ,eh n lc n e tain 7 % ,e ta in t 0 S n h a i fm ae ilt ov n co v o r5 0 W t o a o c nr t 0 o xr t i o me 5 ,a d t e r t o tra o s le t o
蓝莓品种及提取方法对蓝莓叶生物活性的影响
蓝莓品种及提取方法对蓝莓叶生物活性的影响蓝莓(blueberry)属于杜鹃花科越橘属植物,多年生落叶或常绿灌木。
蓝莓果实含有众多功能活性物质,其营养价值日益受到人们的广泛认可。
目前我国蓝莓的种植面积逐年增大,2005年已达到667 hm22],而丰富的蓝莓叶资源并未得到良好利用。
一般当作废弃物直接丢弃,这既造成资源浪费又带来环境污染。
研究表明,蓝莓叶中含有丰富的黄酮、原花青素、花色苷等多酚类生理活性成分,还富含多种微量元素。
目前国内外对植物提取物的研究已有不少,对蓝莓叶的研究主要集中在活性物质的提取纯化、稳定性分析及其生理功能表征等方面,而对不同提取方法和成熟度对蓝莓叶生物活性的影响研究较少。
本研究对不同品种,不同成熟度和不同提取方法所得的蓝莓叶提取物的生物活性进行了对比研究,测定了蓝莓叶提取物中的总酚含量、清除自由基(DPPH)能力和还原力大小,以求对蓝莓叶生物活性有一个概括研究,为深化蓝莓叶的开发利用提供有益的实验依据。
1 材料与方法1.1 材料、试剂与仪器1.1.1 材料蓝莓叶子于2012年5月和6月采自上海市青浦区现代农业园区。
采摘后立即送往上海交通大学农业与生物学院,将茎叶分离,洗净,晾干。
用真空冷冻干燥机将鲜叶干燥后用组织捣碎机捣碎,存放在--80℃冰箱中,备用。
1.1.2 试剂无水乙醇、甲醇、氢氧化钠、盐酸、无水碳酸钠、福林酚、没食子酸、抗坏血酸、铁氰化钾、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、三氯乙酸、氯化铁国药集团化学试剂有限公司;1,1---苯基一2-三硝基苯肼( DPPH)梯希爱(上海)化成工业发展有限公司。
1.1.3仪器冷冻干燥机(Triad,美国Labconco公司)、水浴锅(2 875,美国赛默飞世尔科技公司)、恒温振荡器(420,美国赛默飞世尔科技公司)、旋转蒸发仪(RE-52AA,巩义市予华仪器有限公司)、离心机(Z236K,德国Hermle公司)、UV-1800紫外分光光度计(Shimadzu,日本岛津国际贸易(上海)有限公司)等。
蓝莓提取物中功效成分含量测定方法的探讨
2 0 1 7年 4月
第3 8卷第 8期
蓝莓提取物中功效成分含量测定方法的探讨
曾荣华 , 刘翠红 。 罗明刑 , 李菁 , 王小妹
( 中药提取分离过程现代 化国家工程研 究中心 , 广州 白云山汉 方现代 药业有 限公 司 , 广东 广 州 5 1 0 2 4 0 )
摘 要: 对蓝莓提取物开展原花青素, 前花青素 , 花青素、 花色苷含量测定。 以保健食品中原花青素、 前花青素含量测定
种生 理功效 [ 1 1 , 在食 品、 医药 、 健康 产 品等领 域 中应用
已经是热点和焦点之一 。以蓝莓 为主要 原料 开发的产 品集 中于保护视力 ,但 是功效成分报 道有 以花青素 、 1 . 1 仪器与试剂 U V 一 2 5 5 0型 紫外分光 光度计 : 日本 岛津 ; 2 6 9 5型
( Na t i o n a l E n g i n e e r i n g R e s e a r c h C e n t e r f o r Mo d e ni r z a t i o n o f E x t r a c t i o n a n d S e p a r a t i o n P r o c e s s o f T C M,
方法及 国际商务部标准测定原花 青素 , 前花青素, 花青素、 花色苷含 量。 蓝莓提取物 中测定原花青素含量是 1 2 7 . 8 %, 前 花青素含量是 2 2 6 . 8 %, 花青素含量 2 5 _ 4 %, 花色苷含量未测出, 蓝莓提取物 中以花青素类含量测定方法较合适。 关键词 : 蓝莓提取物 ; 原花青素 ; 花青素
蓝莓叶黄酮类化合物提取分离研究
瘤、 抗菌抗病毒 、 清 除 自由基 、 调 节 免疫 、 防治 血 管
硬化 、 降 血 糖 等 J . 伴 随 着 食 品工 业 的飞 速 发 展 、 人们 生活 水平 的提 高及 消费 观念 的改变 , 含 有天 然 活性 成分 的保 健 食 品成 为 现 代 人 追 逐 的 目标 . 例
・
2 9- + 0 . 01 0 2 .
/
蓝莓 叶 , 来 自麻 江蓝莓 基地 .
2 仪 器与试 剂
2 . 1 仪 器
R = O . 9 9 9 4
洗脱 黄 酮类化合 物 的最 大吸收峰 及峰 面积 大小 , 结果显 示 , 4种 不 同洗脱 液在 2 0 0— 4 0 0 n m均 出
现 2个吸收峰 , 但6 0 % 乙醇溶 液洗 脱 的峰 面积 最 大 , 确定6 O % 乙醇溶 液 为黄 酮类化 合 物 的 最佳 洗脱 剂 ; 利 用 红外光谱 法测定 不 同洗脱 液 浓缩液 , 显 示不 同洗脱 液主要 成分 为黄 酮类化 合物 .
高. 采 用 大孔 吸 附树脂 法 对 蓝 莓 叶 浓 缩提 取 液黄 酮 类化 合 物 进 行 分 离纯 化 , 用6 0 % 甲醇 溶 液 、
6 0 % 乙醇溶 液 、 6 0 % 丙酮溶 液 、 三氯 甲烷 与 甲醇( 1 : 1 ) 4种 不 同的洗 脱剂进 行 洗脱 , 比较 不 同溶 剂
关键 词 : 蓝莓叶; 黄 酮类化 合物 ; 提取 ; 分 离纯化
论文 编码 : D o i : 1 0 . 3 9 6 9 / j . i s s n . 1 6 7 3- 9 3 2 9 . 2 0 1 7 . 0 6 . 0 8
蓝莓醇提物体外抗氧化的研究
2020年 第16期 广 东 化 工 第47卷 总第426期 · 17 ·蓝莓醇提物体外抗氧化的研究劳军,王楠楠(吉林化工学院 生物与食品工程学院,吉林 吉林 132022)[摘 要]本文对蓝莓乙醇提取物进行抗氧化研究,发现在浓度1000 mg/L ,蓝莓对DPPH·自由基的清除率可达72.3 %,对ABST+达到73.6 %;对对O 2-自由基的清除率可达75.3 %。
可见蓝莓的乙醇提取物具有较好抗氧化清除自由基的能力,对常见的3种自由基(DPPH·、ABST+、O 2-)具有一定的清除能力。
[关键词]蓝莓;抗氧化;自由基;醇提物[中图分类号]TQ [文献标识码]A [文章编号]1007-1865(2020)16-0017-01Study on Antioxidation of Alcohol Extract from Blueberry in VitroLao Jun, Wang Nannan(College of Science Jilin Institute of Chemical Technology, Jilin 132022, China)Abstract: In this paper, the antioxidant activity of blueberry ethanol extract was studied. It was found that the scavenging rate of DPPH· free radical, ABST + and O 2- radical were 72.3 %, 73.6 % and 75.3 %, respectively. It can be seen that the ethanol extract of blueberry has good antioxidant and free radical scavenging ability, and has certain scavenging ability to three common free radicals (DPPH ·, ABST +, O 2-).Keywords: Blueberry ;antioxidant ;free radical ;alcohol extract蓝莓(Vaccinium Corymbosum )又称蓝浆果,越桔,是杜鹃花科越桔属(Vaccinium )的多年生绿叶或常绿灌木植物,原产地为北美,广泛分布于北半球,目前有400多个品种。
超声波辅助提取蓝莓叶总黄酮及对脂氧合酶的抑制
食品研究与开发F ood Research And Development圆园20年4月第41卷第8期DOI :10.12161/j.issn.1005-6521.2020.08.009基础研究基金项目:2017年度贵州省教育厅青年科技人才成长项目(黔教合KY 字[2017]349);2017年黔南民族师范学院校级重点项目(qnsy2017002)作者简介:吴桂玲(1985—),女(汉),副教授,硕士,研究方向:天然产物的开发与应用。
超声波辅助提取蓝莓叶总黄酮及对脂氧合酶的抑制吴桂玲,胡丽,冯定坤,邢焰(黔南民族师范学院化学化工学院,贵州都匀558000)摘要:以蓝莓叶为原料,采用超声波辅助提取黄酮类化合物,用正交试验对提取工艺进行优化,并考察提取物总黄酮对毛尖茶叶脂肪氧合酶(lipoxygenase )的抑制作用。
结果表明:超声波辅助提取总黄酮的优化条件为乙醇体积分数60%,料液比1∶50(g/mL ),提取温度70℃,提取时间30min ,优化条件下蓝莓叶总黄酮提取率为9.56%。
蓝莓叶中黄酮类化合物对毛尖茶叶脂氧合酶有一定的抑制作用,IC 50为22.3μg/mL 。
关键词:蓝莓叶;黄酮;优化;毛尖茶叶;脂氧合酶;抑制作用Ultrasonic-assisted Extraction of Total Flavonoids from Blueberry Leaves andIts Inhibition on LipoxygenaseWU Gui-ling ,HU Li ,FENG Ding-kun ,XING Yan(School of Chemistry and Chemical Engineering ,Qiannan Normal University for Nationalities ,Duyun 558000,Guizhou ,China )Abstract :Using blueberry leaves as raw material ,the flavonoids was extracted by ultrasonic-assisted method ,and the extraction process was optimized by orthogonal test ,and the inhibitory effect of total flavonoids on the lipoxygenase of Maojian tea was studied.The results showed that the optimal conditions for ultrasonic-assisted extraction of total flavonoids were :the volume fraction of ethanol was 60%,the ratio of material to liquid was1∶50(g/mL ),the extraction temperature was 70℃,and the extraction time was 30min ,under the optimizedconditions ,the extraction yield of total flavonoids was 9.56%.Flavonoids in blueberry leaves had a certain inhibitory effect on lipoxygenase in Maojian tea ,the IC 50was 22.3μg/mL.Key words :blueberry leaves ;flavonoids ;optimization ;Maojian tea leaves ;lipoxygenase ;inhibitory effects引文格式:吴桂玲,胡丽,冯定坤,等.超声波辅助提取蓝莓叶总黄酮及对脂氧合酶的抑制[J].食品研究与开发,2020,41(8):55-60WU Guiling ,HU Li ,FENG Dingkun ,et al.Ultrasonic-assisted Extraction of Total Flavonoids from Blueberry Leaves and Its Inhibition on Lipoxygenase[J].Food Research and Development ,2020,41(8):55-60蓝莓,又名越橘,属杜鹃花科(Ericaceae )越桔属(Vaccinium L.),为常绿灌木。
蓝莓花色苷提取物抗油脂氧化能力的研究
蓝莓花色苷提取物抗油脂氧化能力的研究
李颖畅;马春颖;孟宪军;于娜
【期刊名称】《中国粮油学报》
【年(卷),期】2010(025)002
【摘要】以乙醇为溶剂从圣云蓝莓果中提取得到蓝莓花色苷.研究蓝莓花色苷对猪油和脂质体的抗氧化活性.结果表明蓝莓花色苷对猪油具有较强的抗氧化,且具有剂量效应关系,以添加0.4%精制花色苷抗氧化效果最佳,但不如BHT效果好;另外抗坏血酸等对蓝莓花色苷具有明显的协同抗氧化作用.蓝莓花色苷对脂质体过氧化有显著的抑制作用,并且高于抗坏血酸对脂质体过氧化的抑制作用,精制蓝莓花色苷的IC_(50)为165.97μg/mL,粗蓝莓花色苷的IC_(50)为278.16μg/mL.
【总页数】4页(P92-95)
【作者】李颖畅;马春颖;孟宪军;于娜
【作者单位】渤海大学生物与食品科学学院,锦州,121000;渤海大学生物与食品科学学院,锦州,121000;沈阳农业大学食品学院,沈阳,110161;沈阳农业大学食品学院,沈阳,110161
【正文语种】中文
【中图分类】TS20
【相关文献】
1.红腰豆黄酮提取物分离及其抗油脂氧化研究 [J], 黎英;刘春艳;李子月;曾珍清;郑兰香
2.蓝莓叶总黄酮提取物的定性分析和抗油脂氧化 [J], 李颖畅;孙建华;孟宪军
3.连翘叶提取物抗油脂氧化作用的实验研究 [J], 刘静;杨建雄;李小丹
4.显齿蛇葡萄提取物抗油脂氧化作用研究 [J], 王文龙;田宗城;熊大胜;张伏安
5.蓝莓花色苷提取物干预人肝癌细胞对葡萄糖消耗的作用研究 [J], 张森;吴莹;张久亮
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蓝莓叶总黄酮的体外抗炎功效评价
蓝莓叶总黄酮的体外抗炎功效评价赵丹;苏宁;杨丽;郑洪艳;霍彤;王昌涛【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2015(036)017【摘要】目的:通过体外实验方法从分子水平对蓝莓叶总黄酮的抗炎功效进行评价.方法:建立人永生化表皮细胞HaCaT与蓝莓叶总黄酮的共培养体系,利用反转录实时荧光定量聚合酶链式反应检测在不同培养时间点(0、15、30、60、120 min)白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-8、干扰素诱导蛋白-10(interferon-inducible protein-10,IP-10)等炎症细胞因子相关基因表达情况,观察蓝莓叶总黄酮的添加对这些基因表达的影响,并探讨蓝莓叶总黄酮在分子水平上的抗炎机理.结果:蓝莓叶总黄酮的添加能够提高抗炎因子IL-6、CXCR-2基因的表达量(P<0.05),降低促炎因子IL-8、IP-10基因的表达量(P<0.05),对CXCR-1基因的表达呈复杂型调节.结论:蓝莓叶总黄酮通过对炎症相关因子表达量产生影响,从而减弱促炎症反应,增强抗炎症反应,最终发挥抗炎功效.【总页数】5页(P231-235)【作者】赵丹;苏宁;杨丽;郑洪艳;霍彤;王昌涛【作者单位】北京工商大学理学院,北京 100048;中国检验检疫科学研究院,北京100176;中国检验检疫科学研究院,北京 100176;中国检验检疫科学研究院,北京100176;北京工商大学理学院,北京 100048;北京工商大学理学院,北京 100048【正文语种】中文【中图分类】R966【相关文献】1.蓝莓叶总黄酮的提取及其定性分析 [J], 李颖畅;吕艳芳2.蓝莓叶总黄酮的纯化及抗脂质过氧化能力研究 [J], 郑洪艳;苏宁;霍彤;赵丹;王昌涛;杨丽3.超声波法提取蓝莓叶总黄酮的工艺优化 [J], 李月;刘戈;胡佳4.超声波辅助提取蓝莓叶总黄酮及对脂氧合酶的抑制 [J], 吴桂玲; 胡丽; 冯定坤; 邢焰5.蓝莓叶总黄酮对LPS/D-GalN诱导小鼠急性肝损伤的保护作用 [J], 焦豪妍;许梦怡;师大智;汤庆发因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
蓝莓叶黄酮类化合物提取分离研究
蓝莓叶黄酮类化合物提取分离研究王小连;文正康;蒋向辉【摘要】以蓝莓叶为原料,采用60%甲醇溶液、60%乙醇溶液、60%丙酮溶液、乙酸乙酯4种不同的提取剂提取黄酮类化合物,提取条件为1:20的料液比,75 ℃恒温回流提取1h,研究不同提取剂对蓝莓叶黄酮类化合物提取率的影响,结果显示60%甲醇溶液提取黄酮类化合物的提取率最高.采用大孔吸附树脂法对蓝莓叶浓缩提取液黄酮类化合物进行分离纯化,用60%甲醇溶液、60%乙醇溶液、60%丙酮溶液、三氯甲烷与甲醇(1:1)4种不同的洗脱剂进行洗脱,比较不同溶剂洗脱黄酮类化合物的最大吸收峰及峰面积大小,结果显示,4种不同洗脱液在200 ~ 400 nm均出现2个吸收峰,但60%乙醇溶液洗脱的峰面积最大,确定60%乙醇溶液为黄酮类化合物的最佳洗脱剂;利用红外光谱法测定不同洗脱液浓缩液,显示不同洗脱液主要成分为黄酮类化合物.【期刊名称】《凯里学院学报》【年(卷),期】2017(035)006【总页数】5页(P29-33)【关键词】蓝莓叶;黄酮类化合物;提取;分离纯化【作者】王小连;文正康;蒋向辉【作者单位】凯里学院,贵州凯里556011;凯里学院,贵州凯里556011;凯里学院,贵州凯里556011【正文语种】中文蓝莓又称越橘、蓝浆果,为杜鹃花科越橘属,其果为扁圆形,成熟后呈深蓝色[1].蓝莓大数多生长在海拔600~1 400 m处,耐水湿,非常喜光,在光照充足的空旷地、林缘中生长得非常茂盛,其中,在腐殖质含量多的酸性土壤中生长得最好.蓝莓抗寒能力强,零下40 ℃的严寒均可抵御,是一种珍贵的抗寒能力极强的野生浆果.我国蓝莓主要分布在西南、华南与东北地区,根据《中国植物志记》记载,我国的越橘属植物品种很多,但多数是野生品种,引种栽培的极少[2].因蓝莓果具有保健作用、食疗价值及其广阔的商业前景受到人们越来越多的关注[3].近年来,世界各地对蓝莓的关注程度越来越高,我国对蓝莓的研究也越来越深入,对其种植方式、药物作用、营养价值以及引种栽培等方面都有比较详细的研究和报道[4].蓝莓叶、果渣中存在大量的黄酮类物质,是蓝莓的生物活性成分[5].大量的研究表明,黄酮类化合物安全、无毒,具有广谱的药理作用 [6],可以抗氧化、抗辐射、抗突变、抗肿瘤、抗菌抗病毒、清除自由基、调节免疫、防治血管硬化、降血糖等 [7].伴随着食品工业的飞速发展、人们生活水平的提高及消费观念的改变,含有天然活性成分的保健食品成为现代人追逐的目标.例如,檞皮素、芦丁等具有扩冠作用,水飞蓟宾有保肝作用[8],黄酮类化合物则因具有纯天然、高活性、见效快、作用广泛等特点日益受到人们的关注.蓝莓作为一种保健食品已广泛得到人们的认可,在国内外有很多学者对其成分及其药理作用进行较多研究,并且有广阔的发展前景,蓝莓叶作为蓝莓产业的一种副产品,人们对它的开发与利用尚少.蓝莓叶中含有大量的黄酮类物质,具有多种生物活性,在食品、医疗等方面都有广泛的应用.但大多数蓝莓叶都被遗弃,浪费了大量资源,为了让蓝莓叶资源得到充分利用,探究不同溶剂提取蓝莓叶黄酮类化合物的提取率及探究不同溶剂纯化蓝莓叶黄酮类化合物的纯化效果有重大意义,对后人研究蓝莓叶中黄酮类化合物提供了重要依据.蓝莓叶,来自麻江蓝莓基地.2.1 仪器高速万能粉碎机(FW-8,北京市永光明医疗仪器有限公司),恒温水浴锅(XMTD-204,常州翔天实验仪器厂),旋转蒸发器(巩义市予华仪器有限责任有限公司),循环水真空泵(SHB-111,巩义市城区众合仪器供应站),紫外—可见光谱仪(UV-2550,岛津消耗品销售公司),傅里叶红外光谱仪(360型,Nicolet公司),电子分析天平,层析柱,冷凝管,圆底烧瓶,布氏漏斗,抽滤瓶,滤纸,pH试纸,层析柱,玻璃棒,烧杯,容量瓶,分样筛.2.2 试剂甲醇(AR),乙醇(AR),乙酸乙酯(AR),丙酮(AR),三氯甲烷(AR)盐酸(AR),氢氧化钠(AR),芦丁对照品,硝酸铝(AR),亚硝酸钠(AR),蒸馏水,大孔吸附树脂D101.3.1 标准曲线的绘制称取10 mg芦丁标准品,用60%的乙醇溶液定容于50 mL的容量瓶中,得到0.2 mg/mL的芦丁标准溶液,分别取0,1,2,3,4,5 mL标准溶液于6个25 mL 的容量瓶中,分别在容量瓶中加入0.5 mL 5%的亚硝酸钠溶液后摇匀,放置6min 后,加入5%的硝酸铝溶液各0.5 mL,摇匀,放置10 min后,再加入10%的氢氧化钠溶液各5 mL,分别用60%的乙醇溶液定容至容量瓶刻度线并摇匀,以不加芦丁标准品的溶液为空白对照,在400~600 nm处进行扫波长,得到最大吸收波长为509.8 nm;不同质量浓度的芦丁溶液吸光度的测定波长以509.8 nm为标准.以芦丁质量浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制出标准曲线,如图1所示,得到芦丁质量浓度C(mg/ml)与吸光度A之间的线性回归方程为y=9.8138x+0.010 2,相关系数R2=0.999 4,说明芦丁质量浓度与吸光度之间有较好的线性关系.3.2 不用溶剂提取蓝莓叶黄酮类化合物将一定量干燥后的蓝莓叶于粉碎机中粉碎,过40筛目后,称取5 g蓝莓叶粉末4份于4个圆底烧瓶中,按1:20的料液比分别加入60%的甲醇溶液、60%乙醇溶液、60%丙酮溶液、乙酸乙酯,在75℃恒温水浴锅中回流提取1 h,分别抽滤后得到蓝莓叶粗提取液并比较不同溶剂提取液的颜色,将粗提取液在40℃,80转/min的条件下减压浓缩至10 mL后,分别吸取1 mL浓缩液用60%乙醇溶液稀释200倍,按3.1的方法进行显色处理,在509.8 nm处分别测定不同提取剂的吸光度,不同溶剂提取黄酮类化合物的质量浓度可根据标准曲线计算出来,从而计算提取率.不同溶剂提取黄酮类化合物的提取率计算公式为:W%=CVK/(1 000M)×100%,其中: C为根据标准曲线算出的浓度(mg/mL) ,V为提取剂的体积(mL),K为测定时稀释的倍数,M为蓝莓叶的质量(g).3.3 不同溶剂洗脱蓝莓叶粗提取液黄酮类化合物蓝莓叶经粉碎机粉碎后,过40目筛,称取10 g蓝莓叶粉末,用60%乙醇溶液按1∶20的料液比在75 ℃恒温水浴中回流提取1 h,将提取液浓缩至20 mL并分成4等份后,以60%甲醇溶液、60%乙醇溶液、60%丙酮溶液、三氯甲烷与甲醇(1∶1)为洗脱液,利用大孔吸附树脂D101对蓝莓叶粗体液黄酮类化合物进行分离纯化.3.3.1 大孔树脂的预处理用无水乙醇将大孔树脂浸泡24 h,使其充分膨胀,然后用无水乙醇洗大孔树脂,直至流出液加入适量蒸馏水无白色浑浊现象,接着用蒸馏水洗大孔树脂至无醇味,再用5%盐酸溶液浸泡3 h,蒸馏水洗至中性,最后用5%氢氧化钠溶液浸泡3 h,蒸馏水洗至中性,备用.3.3.2 装柱纯化及不同洗脱液紫外光谱的测定用蒸馏水将预处理好的D101大孔吸附树脂装入柱内,使层析柱内的树脂紧密,树脂体积大约为层析柱体积的2/3,装好柱之后,取蓝莓叶提取液5 mL 4份别倒入4支层析柱中,让大孔吸附树脂吸附蓝莓叶提取液中的黄酮类化合物0.5 h后,分别用蒸馏水洗层析柱中的树脂至流出液为无色为止,倒掉蒸馏水洗脱液,再分别用树脂2倍体积的60%甲醇溶液、60%乙醇溶液、60%丙酮溶液、三氯甲烷与甲醇(1∶1)洗脱,分别收集不同溶液洗脱液,40 ℃、80/min的条件下减压浓缩至体积后,取4种不同溶剂的洗脱液各0.5 mL 分别于4个25 mL 容量瓶中,用60%甲醇溶液分别稀释至刻度线,以不加提取剂的60%甲醇溶液为空白,在200~800 nm 之间进行基线扫描后,在200~800 nm对4种不同的洗脱液进行峰值检测,并比较其峰面积的大小.3.3.3 不同洗脱液黄酮类化合物红外光谱检测将3.2 中不同溶剂洗脱浓缩液用于红外检测,检测时,设定其波数范围为650~400 0 cm-1,分辨率为4 cm-1,扫描次数为32次,扫描前,先扫空白峰,以排除干扰.经过数据调整及光谱图标准化处理后即可得到不同溶剂洗脱黄酮类化合物的红外图谱.4.1 不同溶剂提取黄酮类化合物的结果分析经过过滤后,4种不同溶剂的提取液颜色如图2.从图2可知,乙酸乙酯的提取液呈浅绿色,60%丙酮、60%乙醇、60%甲醇的提取液均呈红棕色,其中,60%乙醇和60%丙酮的提取液颜色相近,为深红棕色,60%甲醇的提取液的红棕色比60%乙醇溶液、60%丙酮溶液提取液的颜色浅一些.乙酸乙酯提取液呈浅绿色的可能原因是提取物中含有大量的叶绿素,据此推断,乙酸乙酯提取液中的黄酮类化合物的含量比其他3种提取剂的黄酮类化合物的含量少.不同溶剂提取液经紫外吸光度测定及相关计算后,得出4种不同溶剂提取黄酮类化合物的提取率结果如图3.从图3可知, 60%甲醇溶液的提取率为4.30%,60%丙酮溶液提取率为4.1%,60%乙醇溶液的提取率为3.7%,乙酸乙酯提取率仅为2.3%.在这4种提取剂中,60%甲醇溶液提取黄酮类化合物的提取率最高,乙酸乙酯提取黄酮类化合物的提取率最低.4种不同提取剂的平均提取率为3.6%.4.2 不同洗脱剂洗脱黄酮类化合物紫外光谱检测结果分析4种不同洗脱液在甲醇溶液中的紫外吸收峰如图4.检测发现,不同的洗脱液在200~400 nm之间均出峰2个吸收峰,其中,吸光度较大的峰出现在288 nm左右,吸光度较小的峰出现在320 nm左右.在稀释相同倍数的条件下,60%乙醇洗脱液的吸光度最大,为1.811,其次是60%甲醇洗脱液,为1.810,三氯甲烷与甲醇(1∶1)混和洗脱液吸光度比60%甲醇洗脱液和60%乙醇洗脱液小一些,为1.628,60%丙酮洗脱吸光度最小,仅0.86;在稀释相同倍数的条件下,60%甲醇洗脱的峰面为103.64,60%乙醇洗脱的峰面积为127.709,是稀释相同倍数条件下的最大峰面积,60%丙酮洗脱的峰面积为53.066,是稀释相同倍数条件下最小的峰面积,三氯甲烷和甲醇混合(1∶1)洗脱的峰面积为95.33.表1为不同溶剂洗脱液稀释相同倍数的最大吸收波长及吸光度和峰面积表.4.3 不同洗脱剂洗脱黄酮类化合物红外光谱检测结果分析经过数据处理及图谱标准化后,得不同溶剂洗脱黄酮类化合物的红外图谱如图5.从红外检测图谱中,发现4种不同洗脱剂的红外光谱的出峰位置基本一致,只是透过率稍有差异,由图5观察到,比较明显的峰出现的大概位置有:3342,2922 ,2852 ,1691 ,1506 ,1448 ,1372 ,1280 ,1258 cm,1047 cm-1.经分析,3342 cm-1的大峰为羟基的特征吸收峰,2922 cm-1和2852 cm-1分别亚甲基的反对称与对称伸缩振动吸收峰,1691 cm-1为芳酮羰基的伸缩振动特征吸收峰,1506 cm-1、1448 cm-1为苯环骨架伸缩振动的吸收峰,这是黄酮类化合物的特征吸收峰.1280 cm-1为-CH3基团的变形振动吸收峰,1258 cm-1C-O伸缩振动吸收峰,综合各个范围的吸收特点,即可确定4种不同洗脱剂洗脱出的主要物质含有黄酮类化合物且4种洗脱剂洗脱出的黄酮类化合物基本相同.研究结果表明,以60%甲醇、60%乙醇、60%丙酮及乙酸乙酯提取黄酮类化合物,60%甲醇的提取率最高,其次是60%丙酮,乙酸乙酯的提取率最低.以60%甲醇溶液、60%乙醇溶液、60%丙酮溶液及三氯甲烷与甲醇(1∶1)洗脱同一条件提取出来的蓝莓叶浓缩提取液,经60%乙醇洗脱出的紫外峰面积最大,吸光度最大,利用红外光谱检测不同溶剂洗脱液,证明了4种不同洗脱剂中均含有黄酮类物质,且不同溶剂洗脱出的蓝莓叶黄酮类化合物基本相同,但含量不同,其中以60%乙醇溶液为最佳洗脱剂.李颖畅[9]等人采用相同的溶剂提取蓝莓叶中的黄酮,结果是不同提取剂的提取率均高于本研究的提取率(除丙酮提取率相近外),其中60%乙酸乙酯的提取率最高,达到6.29%,然后依次为是60%乙醇、60%甲醇与60%丙酮,提取率分别是6.21%、5.88%、4.01%.本研究中黄酮类化合物的提取率比李颖畅等人研究的提取率低的可能原因是本研究提取的时间比较短,黄酮类化合物没有完全被浸提出来,而乙酸乙酯与其提取率相差较大的可能原因是本研究采用的乙酸乙酯不加其他溶剂的,而李颖畅等人采用的是60%的乙酸乙酯.本研究的不足之处是提取及纯化蓝莓叶黄酮类化合物所设定的方法比较单一,得出的结果也比较单一,为了得到更高的提取率及更好的纯化效果,为以后的研究者提供更好的参考依据,在提取时,应该对提取时间、提取温度、料液比等进行研究,综合各个最优条件以确定最佳的提取条件,进而使提高提取率;对黄酮类化合物进行纯化时,应该对洗脱剂的种类、洗脱液的浓度,洗脱剂的体积、洗脱时间等方面研究,以确定最优的纯化条件.其次,本研究的另一个不足之处是因检测条件的制约,无法确定本研究所提取出的黄酮类化合物具体是哪一类.【相关文献】[1] 陈健,孙爱东,高雪娟.蓝莓花青素的提取及抗氧化性的研究 [J].食品工业科技, 2011,35(6):101-105.[2] 李颖畅,王亚丽.蓝莓叶多酚研究进展及其在食品中的应用[J].食品与发酵科技,2013,49(6):99-104.[3] 刘军波,赵芸.中国蓝莓产业化发展的前景[J].沈阳农业大学学报,2012,13(1): 52-56.[4] 李颖畅,吕艳芳.蓝莓叶总黄酮的提取及其定性分析[J].食品与发酵科技,2012,48(4):32-364.[5] 王鑫.蓝莓提取物及其应用研究[J].高师理科学刊,2013,33(6): 64-78.[6] 周慧恒,杨胜敖,欧阳吉德.蓝莓浸提工艺研究[J].食品与发酵科技,2013,50(179):69-71.[7] 刘星雨,周敏,孙体健.天然黄酮类化合物的药理活性及分离提取[J].中国药物与临床,2014,14(5): 622-624.[8] 巫秀美,刘光明,冯玉冰.水飞蓟宾类黄酮木质素衍生物的研究进展[J].国际药学研究杂志,2010,37(3):187-197.[9] 李颖畅,吕艳芳.蓝莓叶总黄酮的提取及其定性分析[J].食品与发酵科技,2012,48(4):33-36.。
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extract from blueberry leaves and its refined counterpart for the protection against lipid peroxidation were 67.46μg/mL
and 121.65 μg/mL, respectively. Total flavonoids derived from blueberry leaves are a potential natural antioxidant.
from lipid oxidation in a dose-dependent manner and presented the highest protecting effect at the dosage of 0.4%, which,
however, was slightly lower than that of BHT. Synergistic protecting effects between ascorbic acid or citric acid and the extract
食品科学
2010, Vol. 31, No. 13 97
源,但对蓝莓叶的加工利用极少,大部分当做废弃物, 造成资源浪费和环境污染。目前蓝莓叶总黄酮的研究主 要集中在提取和抗肿瘤等方面[11-12],但作为油脂的抗氧 化剂尚未见报道,研究开发高效、安全、保健的天然 抗氧化剂,使其在食品工业得到广泛应用具有重要意义。 本实验重点研究蓝莓叶总黄酮抗油脂和脂质体氧化能力, 旨在为进一步利用蓝莓叶资源提供有益的实验依据。
铝盐反应:向蓝莓叶乙醇提取液中加入质量分数为 1% 三氯化铝溶液,有一种黄色可溶性物质生成,可使 溶液吸光度增大,说明有黄酮类物质存在。
铁盐反应:向蓝莓叶乙醇提取液中加入氯化铁溶液 后,生成了墨绿色的沉淀, 放置一段时间之后溶液的颜
98 2010, Vol. 31, No. 13
食品科学
※基础研究
protecting effects against the lipid oxidation in lard and soybean lecithin liposomes prepared in our laboratory were investigated.
The major components in the blueberry extract obtained were flavonoid compounds. The extract could effectively protect lard
Ac - As 抑制率 /%= ————× 100
Ac
式中:A c 为对照吸光度;A s 为蓝莓叶总黄酮样品 吸光度。
2 结果与分析
2.1 黄酮类物质定性检验 氨显色反应:将蓝莓叶乙醇提取液滴于滤纸上风
干,以挥发氨熏滤纸,立刻产生了深黄的颜色,当滤 纸放置久后,因氨的挥发而褪色,这是黄酮类化合物 的典型反应。
猪油:新鲜猪板油熬制。 无水乙醇 北京化学试剂公司;柠檬酸、柠檬酸 钠、盐酸 沈阳化学试剂厂;磷酸二氢钠、磷酸氢二 钠、硫代巴比妥酸、抗坏血酸、三氯甲烷、冰乙酸、 碘化钾、硫代硫酸钠、芦丁标准品(纯度大于 95.5%) 国 药集团化学试剂有限公司;大豆卵磷脂(生化试剂) 北 京奥博星生物技术有限责任公司;BHT(食品级) 济南 世纪联兴经贸有限公司;HPD-600 大孔树脂 河北宝恩 化工有限公司。 7200 可见分光光度计 上海尤尼柯有限公司;UV1600 型紫外 - 可见分光光度计 北京瑞利分析仪器公司; PHS-25 型酸度计 上海理达仪器厂;电热恒温水浴锅 常州国华电器有限公司;RE-52 型旋转蒸发仪 上海博 通经贸有限公司;SHZ-IIIB 型循环水真空泵 上海华琦 科学仪器有限公司;玻璃层析柱(1cm × 30cm) 上海青 浦沪西仪器厂;DZF-6050 型真空干燥箱 上海精宏仪器 设备有限公司;电子分析天平 北京赛多利斯仪器系统 有限公司;电热鼓风干燥箱 天津实验仪器厂。 1.2 方法
收稿日期:2009-11-10 基金项目:渤海大学博士启动基金资助项目(KYC-BSQD2008015);辽宁省教育厅重点实验室项目(LS2010003) 作者简介:李颖畅(1973 —),女,副教授,博士,研究方向为天然产物的功效成分。E-mail:liyingchangsy@
※基础研究
Key words:flavonoids from blueberry leaves;qualitative analysis;antioxidati类号:TS255.1
文献标识码:A
文章编号:1002-6630(2010)13-0096-04
油脂在氧化过程中会形成大量的自由基,进一步分 解生成醛、酮、醌、游离脂肪酸等有害物质,产生 酸败,从而降低其营养价值。油脂含量高的食品需添 加抗氧化剂来防止脂肪氧化,目前常用的抗氧化剂均为 人工合成,如 BHA(丁基羟基茴香醚)、BHT(二丁基羟 基甲苯)和 PG(没食子酸丙酯),实验证明人工合成抗氧 化剂对人体有一定的毒副作用[1-3],近年来上述化学合成 抗氧化剂被发现有不同程度的累积致癌作用,目前 BHT 在美国和日本已被禁止使用,BHA 在日本也已经
色基本褪去,由此说明蓝莓叶提取物中含有酚基。酚
禁用,以天然抗氧化剂取代合成抗氧化剂是食品添加剂 的发展趋势。
蓝莓,又称越橘,属杜鹃花科( E r i c a c e a e ) 越橘属 (Vaccinium spp.)多年生落叶或常绿灌木[4]。蓝莓作为一 种药用植物,以叶入药,性温、味苦,有利尿、消 炎、解毒之功效,并可用于风湿、痛风[ 5 ] 。蓝莓叶中 含有丰富的黄酮类化合物,大量研究证明黄酮类化合物 具有抗氧化、清除自由基、抗癌、抗菌、抗病毒、 抗炎症等广泛的生物活性[6-10]。我国有着丰富的蓝莓资
蓝莓叶总黄酮与其他物质的协同抗氧化作用:选用 抗坏血酸(VC)、柠檬酸为协同增效剂,与蓝莓叶总黄酮 在猪油中进行协同抗氧化实验。
1.2.3 蓝莓叶总黄酮抗脂质过氧化能力的测定[15-16]
1.2.3.1 试液的配制 脂质体 PBS(磷酸缓冲液)分散系:300mg 卵磷脂溶
解于 30mL 10mmol/L pH7.4 PBS(磷酸缓冲液),用超声波 处理一定时间,周围以冰水冷却,制得人工脂质体。
Qualitative Analysis of Total Flavonoids from Blueberry Leaves and Their Protecting Effect against Lipid Oxidation
LI Ying-chang1,SUN Jian-hua1,MENG Xian-jun2 (1. College of Biology and Food Science, Bohai University, Jinzhou 121000, China ; 2. College of Food Science, Shenyang Agricultural University, Shenyang 110161, China)
96 2010, Vol. 31, No. 13
食品科学
※基础研究
蓝莓叶总黄酮提取物的定性分析和抗油脂氧化
李颖畅 1,孙建华 1,孟宪军 2
(1.渤海大学生物与食品科学学院,辽宁 锦州 121000;2.沈阳农业大学食品学院,辽宁 沈阳
110161)
摘 要:目的:以 80% 乙醇为溶剂从蓝莓叶中提取黄酮类化合物,对其进行定性分析和抗油脂氧化能力的研究。 方法:以显色反应和紫外 - 可见吸收光谱对其定性分析,以猪油和大豆卵磷脂制备的脂质体为对象研究蓝莓叶总黄 酮的抗氧化活性。结果:蓝莓叶提取物属于黄酮类,蓝莓叶总黄酮对猪油具有较强的抗氧化作用,且具有剂量效 应关系,以添加质量分数 0.4% 精制蓝莓叶总黄酮抗氧化效果最佳,略次于 0.02%BHT;另外抗坏血酸和柠檬酸对 蓝莓叶总黄酮具有明显的协同抗氧化作用。蓝莓叶总黄酮对脂质体过氧化有显著的抑制作用,并且高于抗坏血酸对 脂质体过氧化的抑制作用,蓝莓叶精制总黄酮的 IC50 为 67.46μg/mL,蓝莓叶粗总黄酮的 IC50 为 121.65μg/mL。结 论:蓝莓叶总黄酮是较好的天然抗氧化剂。 关键词:蓝莓叶黄酮;定性分析;抗氧化;猪油;脂质体
三氯乙酸(TCA)- 硫代巴比妥酸(TBA)- 盐酸(HCl)混合液: 15g TCA、0.37g TBA、2.1mL 浓盐酸依次放入 100mL 水中。
1.2.3.2 测定步骤 分别于样品管中依次加入 1mL 脂质体分散系、1mL
0.4mmol/L 硫酸亚铁、1mL 样品,混匀。避光于 37℃ 水浴 60min,加入 2mL TCA-TBA-HCl 混合液,90~100℃ 水浴 15min,迅速冷却,以 3000r/min 离心 l0min,取 上清液在波长 535nm 处测定吸光度(As)。对照管以 1mL 重蒸水代替 1m L 样品,操作方法同样品管,可测得对 照管的吸光度(Ac),参比管中以 1mL 重蒸水代替 1mL 卵 磷脂,抗坏血酸为阳性对照。
1 材料与方法
1.1 材料、试剂与仪器 蓝莓叶总黄酮提取物:将蓝莓叶( 沈阳农业科技开
发院蓝莓种植基地提供) 50℃烘干,粉碎后过 40 目筛, 用体积分数 80% 乙醇溶液按 1:20(m/V) 50℃浸提 2h 后抽滤, 收集滤液,浓缩,石油醚脱脂,AB -8 大孔树脂纯化, 40℃减压浓缩,真空干燥得到黄色粉末,纯度为 78.04%[13]。
1.2.2 蓝莓叶总黄酮抗猪油氧化性能研究
不同添加量蓝莓叶总黄酮的抗猪油氧化性能研究: 准确称取一定量蓝莓叶精制总黄酮、BHT,分别加入到 50g 猪油中,搅拌均匀。同时以不加添加物的猪油作空 白。将所有样品放置于(60 ± 1)℃的干燥箱中,每隔一 定时间搅拌一次,并交换它们在干燥箱中的位置。按 照 GB 5538 — 2005《油脂过氧化值测定方法》测定过氧 化值(POV),以 POV 大小表示油脂的氧化速度,POV 值 以每千克样品中活性氧的毫摩尔数表示,进而衡量抗氧 化剂的活性。