不同麻醉剂麻醉小鼠后对晶状体影响的比较

不同麻醉剂麻醉小鼠后对晶状体影响的比较作者：曹妍群郭兴易志勇
来源：《医学信息》2014年第17期
摘要：目的探讨各种麻醉剂对小鼠晶状体透明度的影响。

方法将环境温度控制为
（24±1）℃，分别用10%水合氯醛（400 mg/kg）、2%戊巴比妥钠（40mg/kg）及25%乌拉坦（1000mg/kg）腹腔注射麻醉C57/BL6小鼠，扩瞳后于10、20、30、45、60min裂隙灯观察晶状体浑浊情况。

结果乌拉坦、水合氯醛麻醉组与戊巴比妥钠麻醉组相比，麻醉持续时间较长，晶状体出现浑浊的时间较早，浑浊程度较重；24h后裂隙灯检测显示各麻醉组晶状体恢复透明状态。

结论不同麻醉剂诱导小鼠晶状体出现突发性浑浊的程度不同，使用小鼠进行晶状体等眼球相关实验时，要注意麻醉剂的选择，减少对实验结果的影响。

关键词：麻醉；小鼠；晶状体在研究晶状体病变或者视网膜病变等眼科相关疾病时，
C57/BL6小鼠已成为常见的实验动物，麻醉是动物实验中重要的步骤，麻醉后晶状体是否透明在进行ERG、VEP、OCT等眼科仪器检测时是至关重要的因素[1]。

有研究指出，用甲苯噻嗪/氯胺酮、水合氯醛在进行常规麻醉时，会诱导小鼠晶状体出现突发性可逆性浑浊，并干扰眼科仪器的检查，影响实验结果[2,3]，并指出麻醉后实验动物出现晶状体浑浊与温度有关[2,4]。

在前期研究中，我们也已经证实了低温会诱导麻醉后C57/BL6小鼠晶状体出现浑浊，因此，本实验将温度恒定在（24±1）℃，拟探讨各种麻醉剂对小鼠晶状体透明度的影响，为进行眼科动物实验麻醉提供研究基础。

1资料与方法
1.1实验材料、试剂及主要仪器
1.1.1动物健康雄性C57/BL6小鼠36只，2个月龄，体重19～24g。

由中南大学湘雅医学院实验动物中心提供。

所有小鼠实验前托吡卡胺眼液扩瞳后经裂隙灯检测，晶状体均透明正常。

1.1.2试剂及主要仪器麻醉剂水合氯醛、戊巴比妥钠、乌拉坦（国药集团化学试剂有限公司）；托吡卡胺扩瞳眼液（武汉五景药业有限公司）；主要仪器为HS900BQ裂隙灯（瑞士）。

1.2方法
1.2.1实验动物分组及处理将小鼠随机分为4组：包括未经任何处置的正常对照组，其余三组分别用2%戊巴比妥钠（40mg/kg）、25%乌拉坦（1000mg/kg）及10%水合氯醛
（400mg/kg）腹腔注射麻醉，各麻醉组先后进行2次麻醉，间隔时间为24h。

实验期间，所有实验小鼠饲养于室温（24±1）℃、相对湿度50％～60％的环境，给予12h/12h光暗周期节律。

1.2.2裂隙灯检查第1次麻醉后，卡托吡胺眼液扩瞳，分别于10、20、30、45、60min用裂隙灯观察晶状体浑浊情况，24h后，卡托吡胺眼液扩瞳，裂隙灯检测晶状体状态，再行第2次麻醉，同样于10、20、30、45、60min用裂隙灯观察晶状体浑浊情况。

在裂隙灯下视野中，晶状体浑浊程度分为4个等级：无浑浊；轻度浑浊(晶状体浑浊区域≤1/2)；中度浑浊(晶状体浑浊区域>1/2)；重度浑浊(晶状体全部浑浊)。

见图1。

图1裂隙灯下晶状体四种浑浊等级：0:无浑浊；1:轻度混浊；2:中度浑浊；3:重度浑浊。

2结果
2.1麻醉状况各麻醉组麻醉状况良好，角膜反射消失，呼吸心跳有所减慢，体温稍有下降。

水合氯醛麻醉组及乌拉坦麻醉组麻醉持续时间较长，可长达为90～150min,戊巴比妥钠麻醉组麻醉持续时间为60～90min。

24h后，进行第2次麻醉，发现各麻醉组麻醉的持续时间与第1次相比略微缩短。

2.2麻醉后对晶状体的影响水合氯醛及乌拉坦麻醉小鼠后，出现明显的眼球外突，眼睑不能闭合，角膜干燥，而戊巴比妥钠麻醉小鼠后眼睑自然下垂，无明显眼球外突及角膜干燥。

三种麻醉剂麻醉小鼠后均呈现不同程度的晶状体浑浊，主要表现为晶状体皮质性浑浊，多开始于晶状体的周边部，逐步向中心发展，浑浊可表现为细小颗粒状和囊泡状。

第1次麻醉中，乌拉坦、水合氯醛麻醉后晶状体出现浑浊的时间早于戊巴比妥钠麻醉组，20min后即出现晶状体浑浊，麻醉后60min表现为中度及重度浑浊；戊巴比妥钠麻醉后45min才出现小鼠晶状体浑浊，裂隙灯观察晶状体仅轻度浑浊。

24h后裂隙灯检测，晶状体均恢复透明。

再次麻醉小鼠后，与第1次麻醉相比，各组小鼠晶状体均出现浑浊提前，浑浊加重，水合氯醛麻醉组第2次麻醉45min后即已出现晶状体重度浑浊，麻醉60min后，乌拉坦表现为重度浑浊，而戊巴比妥钠麻醉组表现为中度浑浊。

见表1。

3讨论
麻醉是动物实验中非常重要的步骤，目前，已有研究指出，用甲苯噻嗪/氯胺酮、水合氯醛在进行常规麻醉时，会诱导小鼠晶状体出现突发性可逆性浑浊，并干扰眼科仪器的检查，影响实验结果[2,4]。

在我们的实验中，用水合氯醛、乌拉坦、戊巴比妥钠三种麻醉剂在常规剂量下对C57/BL6小鼠进行腹腔注射麻醉，均能达到有效的麻醉效果，但同时也发现麻醉小鼠后均出现了晶状体突发性浑浊，阻碍了进一步的实验进展，由于晶状体的浑浊，导致用OCT检测小鼠视网膜时无法成像。

但是，在实验过程中，我们发现了不同麻醉剂对小鼠晶状体浑浊的发生发展是有差异的。

从先后两次麻醉情况而言，乌拉坦、水合氯醛麻醉组与戊巴比妥钠麻醉组相比，晶状体出现浑浊的时间较早，浑浊程度较重，在第1次麻醉24h后检测晶状体,发现
晶状体恢复了透明状态，提示麻醉诱导的小鼠晶状体浑浊有可能是短暂的并且可逆的，但多次反复麻醉后，小鼠晶状体是否还能恢复透明状态还有待进一步研究。

目前，尽管已有研究者发现药物、低温、紫外线辐射等因素会导致晶状体出现浑浊，但是却缺乏麻醉剂对晶状体的毒理研究。

在此实验中，为了避免温度对实验的影响，已经将温度恒定在24℃左右。

托吡卡胺眼液是目前常用的扩瞳药物，Hubert等人在3000只小鼠使用托吡卡胺眼液后发现有19%的晶状体出现浑浊[5],本试验中，所有小鼠在麻醉前托吡卡胺眼液扩瞳后经裂隙灯检查晶状体均是透明正常的，可以排除托吡卡胺眼液对晶状体的影响。

有学者认为，氯胺酮/甲苯噻嗪、水合氯醛常规麻醉后能诱导晶状体突发性可逆性浑浊，认为与麻醉剂后导致的眼球外突，角膜干燥及眼睑不能闭合有关[6,7]，在本实验中，戊巴比妥钠麻醉组无明显的眼球外突，角膜干燥，眼睑自然闭合，但仍发生了轻度的晶状体浑浊，此外，我们在实验过程中也曾尝试使用羟甲基纤维素滴眼液改善角膜干燥，发现仍然阻止不了晶状体浑浊。

因此，我们认为麻醉剂的副作用不仅仅是晶状体突发性浑浊的主要因素，与不同麻醉剂的选择有一定关系。

使用小鼠进行晶状体等眼球相关实验时，要注意麻醉剂的选择，减少因麻醉诱导的晶状体浑浊对实验结果的干扰。

参考文献：
[1]MacLaren RE,Pearson RA, MacNeil A, et al.Retinal repair by transplantation of photoreceptor precursors[J]. Nature, 2006,444(7116):203-207.
[2]Fengju Zhang,Stefan L?fgren,Per G. S?derberg.Interaction of anaesthetic drugs and UV-B irradiation in the anterior segment of the rat eye[J]. Acta Ophthalmologica
Scandinavica,2007,85(7):745-752.
[3]Cai-Rui Li,Shu-Guang Sun,Ireni Ali Rahman et al. Acute reversible lens opacity affects retinal HRA+OCT imaging in mice.Int J Ophthalmo.2010,l0(1):21-22.
[4]Maria A, Bermudez, Ana F. Vicente, et al. Time course of cold cataract development in Anesthetized Mice[J].Current Eye Research. 2011;36(3),278-284.
[5]Hubert MF, Gerin G, Durand-Cavagna G. Spontaneous oph-thalmic lesions in young Swiss mice[J]. Lab Anim Sci,1999,49(3):232-240.
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