酵母菌絮凝的分型及其生理生化特性的研究_张博润

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珍极与日本酱油业巨头合资组建新公司

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402008No 20Se ria l No 197Chi n a B re w i n gResearch Report表3糖醇转化率随发酵时间的变化Table 3 Fer ment ation tm i e and transf or m ing r ate of glucose to et han o l 时间/h糖醇转化率/%不通气通气(3m i n /6h )通气(3m i n /3h)000065 176 0411 211213 8019 8320 692448 2961 2262 083057 7774 1575 883667 2682 7882 784881 0583 648450图3糖醇转化率随发酵时间的变化F i g ur e 3 Curve of f er ment a ti o n tm i e and trans f or m ing rat e of glucose t oet hano l由表3和图3可见,通气时糖醇转化率明显加快,第36h ,通气量较大时的糖醇转化率已达到了83%,通气量较小时的糖醇转化率也达到了83%,而不通气情况下的糖醇转化率却仅仅为67%,直到第48h 糖醇转化率才达到81%。

可见,糖醇转化率随时间变化的趋势与残余还原糖和酒精度随时间变化的趋势基本相同,均体现了通气对发酵的有利影响。

2 4酵母细胞数量(见表4)表4酵母细胞湿重Table 4 Wet weight t able of yeast cell项 目不通气通气试验(1)通气试验(2)酵母细胞湿重/(g L -1)333843由表4可见,当对反应醪不通气时,酵母细胞量较少,通气后酵母细胞量增加。

2 5玉米发酵醪残渣含氮量发酵的残渣烘干后,含水率为4 6%,运用Lane -Eynon 法测定其含还原糖浓度为10 25%;运用凯氏定氮方法测定其含总氮量为3 35%,即含蛋白质量为20 94%。

饲用酵母及其衍生物产品的应用现状及发展趋势

饲用酵母及其衍生物产品的应用现状及发展趋势

富含有机微量元素的酵母 (酵母铜、酵母铁、酵母锰、酵母硒、 酵母铬) 如富硒酵母细胞内的有机硒含量达90%以上,主要存在形式是蛋 氨酸硒,还有少部分硒与多糖或其它有机小分子结合。硒是生物体正 常生长和生理功能所必需重要的微量元素。硒是谷胱甘肽过氧化物酶 的主要成分,具有抗氧化作用;能影响脂肪和脂溶性维生素的吸收; 促进蛋白质合成,参与CoA和CoQ的合成,同时还是与电子转移有关的 细胞色素的组分。 硒的缺乏会损伤生物体内的细胞膜和细胞膜器,导致体内谷胱甘 肽过氧化物酶的活性显著下降,体重减轻,营养物质利用效率降低。 目前生产中硒的主要添加形式仍然是Na2SeO3,而无机硒毒性高、 添加的安全剂量比较低,加上生物体对硒的绝对需求量较低。添加过 高的无机硒具有较大的毒性,因此,有机硒作为一种更安全、更环保 的添加剂的应用会越来越广泛。
人类
农业、
酵母菌
畜牧业
环境
酵母细胞壁多糖:酵母细胞壁主要分为三层:细胞壁外层为甘露糖—蛋白质结合物, 中间为β-(1,3)-(1,6)葡聚糖,内层为几丁质。其中β-葡聚糖是最有效的免疫 刺激剂,酵母细胞壁中葡聚糖的主链为1,3-葡萄糖苷键连,支链主要以1,6-葡萄 糖苷键结,这不同于一些常见的糖类的-1,4糖苷键结的线形分子结构。特殊的空 间结构,能够为生物机体血细胞或巨噬细胞上的受体所识别,从而造就了其特殊的 免疫功能。 酵母β-葡聚糖的主要作用有以下几点: 1、提高生物体非特异性免疫指标。 2、促进淋巴细胞的增殖,促进浆细胞产生更多的抗体,提高生物体的特异性免 疫应答反应。 3、提高生物体抗病能力,降低感染率和死亡率。 4、能有效缓解生物体肝脏损伤,如降低肝脏和血液GPT,GOT的活性。 5、具有一定促生长的作用。 酵母甘露寡糖的主要作用有以下几点: 1、对病原微生物进行识别、粘附和排除;可与有害细菌的聚集素结合遮盖它的 结合部位,干扰有害细菌在肠道内定植繁殖,减少肠道细菌病的危害。 2、是有益细菌的营养物质,能促进有益细菌的繁殖。 3、可增加细胞因子的释放,而细胞因子则可以协调不同免疫细胞的活动;提高 白细胞介素的浓度,白细胞介素可使T细胞增殖和分化;增强干扰素的活性。 4、对毒素具有明显的吸附作用。

微生物絮凝剂产生菌的筛选及絮凝特性的研究

微生物絮凝剂产生菌的筛选及絮凝特性的研究
Ke r s Mir b a o c l n ; le u ai n r t ;S a e y wo d : co i f c u a t F o c lt ai ll o o w g
水资 源 的短缺尤 其 是 现 实 可利 用 的 淡 水 资 源 的缺 少 日 受到 重视 , 体 的污染及 各种 污水 的处 理成 为 了学 者 益 水 们关 注 的热点 , 絮凝技 术 以其 基建 投 资 少 , 处理 时 间短 的 特点 广 泛 应 用 于 水 处 理 领 域 , 其 是 各 种 污 水 的 预 处 尤 理 。微 生 物 絮 凝 剂 ( c b l l cl t B f cu Mioi o ua 或 i oc- r a fc n o l l t为通 过直 接利用 微生 物 细胞 、 提取 物或 代谢 产 物 a) n 细胞 提取 、 制而得 到 的有 絮凝 活性 的物 质 , 精 克服 了无 机 和 有 机 高分 子 絮凝剂本 身 固有 的成本 高 、 絮凝 效果 有 限及 存在 二 次污染 且对 人体 有 害的缺 陷 , 成为 了一 种 高效 、 毒 、 无 无
过 一定 时 间的发酵 培 养 , 培 养 液进 行 絮 凝试 验 , 选 出 用 筛 具 有絮凝 活性 的絮凝剂产 生菌 。 12 1 微 生 物 絮凝 剂产 生菌初 筛 在 试 管 中加 入 lm .. OL 浓度 为 4/ gL的高 岭土悬 浊液 ,% 的 CC 1 a 1溶液 10 L .m 及 絮凝 剂样 品 10 L 轻轻 振 荡 , 置 1mn 目测 絮 凝 剂样 .m , 静 0 i, 品的絮凝 活性 判断标 准 : 与不加 絮凝剂 样 品的悬 浊 液对 先 比 , 入 絮凝剂 的高 岭土悬 浊液 是否 比不加 絮凝 剂 的悬 看加 浊液 沉降 的快 , 动 试 管 , 沉 降 下来 的颗 粒 是否 凝 聚 再摇 看

微生物絮凝剂产生菌的筛选及其特性研究

微生物絮凝剂产生菌的筛选及其特性研究
的最高絮凝 率分 别为 8 . 2 ( -) 8. 3 c5 、3 1% ( 一2 。G 2菌和 C5菌产 生絮凝效果 的最 高活性 部 9 5 % G2 、27 %( 一) 8 . 8 G 1 ) 一 -
位在 菌体 中而 G 1 一 2菌则在上清液 中。
关键词 : 微生物 ; 絮凝 剂; 筛选 ; 絮凝 率
中 图分 类号 :9 3 Q 3— 3 文 献 标 识 码 : A 文章 编 号 : 9 2 5—13 ( 0 1 0 04 0 0 7 6 2 1 )5— 0 2— 5
S r e i g f r t e b o o c ln r d cn t an a d su y o t h r c e itc c e n n o h i f c u a tp o u i g sr i n t d n isc a a t rsis l
t ey h i h s a t e st so 2 a d C 5 we e i h a tr o is h rt fG一 2 s o d a t i . i l.T e h g e t ci i fG- n - r n te b ce a b de .T e b oh o 1 h we ci t v v e i vy Ke wo d :mir b a ;fo c ln ;s re i g l c u ai g r t y rs c o i l c u e t c e n n ;f c lt a e l o n
5w r 0husadG 1 a 7 . h i et oc ligati 9 5 % ( 一) 8 . 3 ( -) n 3 1% ( 一2 ,epc e 6 or n 一2w s 2h T e g s f cua n cvt i8 .2 e hh l t i ys G2 , 2 7 % C5 ad8 .8 G 1 ) rse—

影响酵母絮凝性的因素与优化途径

影响酵母絮凝性的因素与优化途径

其 中值得注意的是乳酸菌和野生酵母 ,乳酸菌 污染常会 引起 啤酒酵母的异常絮凝 ,而野生酵
母会 导致 贮酒 期悬 浮 酵母数 的增 加 。
3 改善 酵母 絮凝 性 的途径
生 产 中采用 纯种 酵 母 发 酵 ,应 保 持 酵母 的凝 聚 基 因基本 稳 定 和一 致 ,因此 调 控外 部 环 境 因素 对 改善酵 母 的絮凝 性很 重要 。 3 . 1选择 絮凝 陛好 的酵母菌株 ,并进行科学的管理
染菌 ,使 酵母 的絮凝性变差 。但接种量过大 ,
新 生 细 胞 少 ,酵 母 活 力 低 ,衰 老 的 酵母 也 会 很
低温 、干燥 、缺氧条件下保存 菌种 ;定期
对 菌 种分 离 、纯 化 和 复 壮 ;加 强 酵母 的 回收 、

5 0・
雪穗镌t
影响酵母 絮凝性 的
韩 龙
华润 雪 花啤酒 ( 安庆 )
[ 摘 要] 文中阐述 了酵母絮凝性对啤酒酿造和质量的影响,重点分析 了原料 、麦汁质量、充氧
及 酵母 添加 量等 因素 对酵母 絮凝 性 的影 响 , 同时也从 工 艺等 方 面简单 阐述 了酵母 絮凝 性 的控 制 途径 。 [ 关键 词 ] 酵母 絮凝 性 P YF因子 麦 汁质 量 发 酵工 艺
1 . 2影 响啤酒 的发酵速 度 和发酵 度
受大麦品种和质量 、制麦工艺及微生物污染等 因素 的影响。麦芽溶解不 良、糖化后麦 汁组分
不 宜 ,不 利 于 酵 母 的 生长 繁 殖 和 发 酵 ,由此 也 会 造成 酵母 过早 絮凝甚 至沉 降 。
2 - 3麦 汁 中糖 组 分和浓 度
絮 凝 性 强 的 酵母 ,过早 沉 降 ,啤酒 中悬 浮 酵 母 细 胞 数 低 ,导 致 降 糖慢 ,发 酵 度 偏 低 ,双 乙酰

微生物絮凝剂产生菌的筛选及其絮凝特性研究

微生物絮凝剂产生菌的筛选及其絮凝特性研究

微生物絮凝剂产生菌的筛选及其絮凝特性研究
微生物絮凝剂产生菌的筛选及其絮凝特性研究
从活性污泥中分离得到6株产絮凝剂的菌株,经复筛,有3株絮凝活性保持在80%以上.研究了其中一株生长能力强、絮凝活性高的M08菌株的絮凝特性,该菌种产絮凝剂的最佳条件为碳源为甘油、氮源为酵母膏、磷酸盐为K2HPO4·3H2O(5g/L)、C/N比为15、起始pH值为6、接种量为3%(v/v)、发酵温度为30℃.在此条件下以120 r/min摇床培养72h,其发酵液对高岭土悬浊液的絮凝率高于90%.活性分布表明,该菌的絮凝有效成分主要为分泌到胞外的代谢产物.
作者:张建龙慕钰文孔维宝刘雄雄马海玲作者单位:张建龙,慕钰文,刘雄雄,马海玲(西北师范大学,甘肃,兰州,730070) 孔维宝(西北师范大学,甘肃,兰州,730070;中国科学院兰州化学物理研究所羰基合成与选择氧化国家重点实验室,甘肃,兰州,730000) 刊名:甘肃农业英文刊名:GANSU NONGYE 年,卷(期):2009 ""(11) 分类号:X7 关键词:微生物絮凝剂筛选培养条件絮凝特性。

一种啤酒酵母工程菌及其制备方法与应用[发明专利]

一种啤酒酵母工程菌及其制备方法与应用[发明专利]

专利名称:一种啤酒酵母工程菌及其制备方法与应用专利类型:发明专利
发明人:张博润,王肇悦,何秀萍,刘楠,傅秀辉
申请号:CN200610113740.1
申请日:20061013
公开号:CN1948462A
公开日:
20070418
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:本发明公开了一种啤酒酵母工程菌及其制备方法与应用。

该啤酒酵母工程菌,是将酿酒酵母中的PEP4基因破坏,并导入酿酒酵母的谷胱甘肽合成酶基因,得到的不产生蛋白酶A且谷胱甘肽产量比所述酿酒酵母高的菌株。

所述啤酒酵母工程菌优选为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)ZWYT-5 CGMCC №.1787。

本发明的啤酒酵母工程菌与普通的啤酒酵母菌(受体菌)相比,泡沫稳定性升高,谷胱甘肽含量增加,而其生理、生化特性无明显差异。

申请人:中国科学院微生物研究所
地址:100080 北京市海淀区中关村北一条13号
国籍:CN
代理机构:北京纪凯知识产权代理有限公司
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酵母新絮凝特性的研究进展及应用展望

酵母新絮凝特性的研究进展及应用展望

酵母新絮凝特性的研究进展及应用展望
刘楠;王冬立;何秀萍;张博润
【期刊名称】《食品与发酵工业》
【年(卷),期】2007(033)001
【摘要】酵母絮凝是指酵母细胞之间相互作用形成絮状物的可逆过程.在发酵工业中,絮凝是酵母菌株最重要性质之一.酵母无性絮凝分为Flo型和NewFlo型,在发酵后期表达的NewFlo型絮凝对细胞与发酵液的分离及产品的质量有重要的意义.文中对酵母新絮凝的研究进展进行了综述,并展望了新絮凝特性在工业中的应用前景.【总页数】3页(P89-91)
【作者】刘楠;王冬立;何秀萍;张博润
【作者单位】中国科学院微生物研究所,北京,100080;中国科学院微生物研究所,北京,100080;中国科学院微生物研究所,北京,100080;中国科学院微生物研究所,北京,100080
【正文语种】中文
【中图分类】TS2
【相关文献】
1.啤酒废酵母生产酵母浸粉及其应用的研究进展 [J], 耿鹏飞;蒋世云;傅凤鸣
2.巴斯德毕赤酵母表达系统的研究进展和前景展望 [J], 娄瑞娟;罗利龙;张霞;张瑞刚;宋水山
3.酵母表达系统研究进展与展望 [J], 董清华;沈元月
4.94安琪酒酵母应用技术发展方向研讨会论文选刊之一:酒用活性干酵母的开发
与展望 [J], 肖冬光;邹海晏
5.活性干酵母及酵母培养物在反刍动物中的研究进展与应用 [J], 张弦;章亭洲;瞿明仁
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酵母菌合成的高效生物絮凝剂特性研究

酵母菌合成的高效生物絮凝剂特性研究

酵母菌合成的高效生物絮凝剂特性研究作者:镇达周荣华蔡凤娇廖先清陈茂彬来源:《湖北农业科学》2011年第06期摘要:采用白酒废水为碳源从土壤、垃圾、废水、污泥中分离大量菌株中,筛选到一株能够在简单废水和硫酸铵培养基上合成广谱高效絮凝剂的酵母菌株ZC1。

运用单因素法考察了模拟悬浊性废水pH值、絮凝剂用量、助凝剂种类及其浓度对絮凝效果的影响,分别在处理时间为0.5h,pH值中性,Al2(SO4)3浓度0.01g/L,絮凝剂用量为15mL/L的条件下,对模拟废水絮凝率达到95%。

同时发现该絮凝剂对中性到偏酸性(pH值3~7)废水均有较高的处理效果,废水中适量Ca2+、Fe3+的存在对絮凝都有促进作用,该菌株及其产生的絮凝剂对发酵废水处理及回收利用有较大潜力。

关键词:微生物絮凝剂;絮凝率;絮凝条件中图分类号:X172文献标识码:A文章编号:0439-8114(2011)06-1146-03CharacteristicofHigh-efficiencyBiologicalFlocculantProducedbyaYeastStrainZHENDa1,ZHOURong-hua2,CAIFeng-jiao1,LIAOXian-qing2,CHENMao-bin1(1.KeyLaboratoryofFermentationEngineering,MinistryofEducation;CollegeofBioengineering,HubeiUniversityofTechnology,Wuhan430068,China;2.HubeiBiopesticideEngineeringResearchCenter / TheBranchCenterofBiopesticide,HubeiAgriculturalScienceInnovationCenter,Wuhan430064,China)Abstract:Microbeswereisolatedfromenvironmentalsamplesofsoils,vegetablerubbishes,wastewaterandsludgewithspiritindustrialwastewaterascarbonsourceandsulfateammoniumasnitrogensource. A high-efficiencyflocculantyeaststrainZC1wasobtained.SimplefactormethodwasusedtochecktheinfluenceofpHvalue,flocculantdosage,auxiliaryspeciesanddosageontheflocculationofkaolinclaysuspensions.TheresultsshowedthatatcentralpH,with0.01g/LAl2(SO4)3,15mL/Lbrothinthesystem,theflocculantratereached95%in0.5hperiod.Inthemeantime,strainZC1provedtohaveabroadpHactiverange(pH3~7),andappropriateCa2+,Fe3+inthemixturealsopromotetheflocculanteffect,whichshowedthatthisstrainandtheflocculantsitproducedhaveagreatapplicationprospect.Keywords:microbialflocculant;flocculationrate;flocculantconditions絮凝是废水处理的一个主要方法,用于去除水中细小悬浮物、胶体污染物质和部分可溶性物质。

微生物絮凝剂评价体系实验研究

微生物絮凝剂评价体系实验研究

微生物絮凝剂评价体系实验研究
张永奎;周礼;董丹;陈晓;姚英杰
【期刊名称】《水资源保护》
【年(卷),期】2007(023)002
【摘要】研究了PO3-4与Ca2+对现有的微生物絮凝剂高岭土评价体系的影响.采用传统的烧杯实验,在未加入微生物絮凝剂情况下,仅投加PO3-4与Ca2+进行实验.实验发现絮凝率随这两种无机离子的浓度和pH值的增加而增加.当pH值超过7.0,PO3-4浓度为0.043mmol/L,Ca2+浓度为4.0mmol/L时,絮凝率超过80%;pH值达到8.0时,絮凝率最高达到91%.实验表明,培养基中PO3-4浓度较高时,现有的微生物絮凝剂高岭土评价体系会受到PO3-4与Ca2+的影响,不能真实地表示微生物絮凝剂的絮凝效果,需要对现有评价体系进行修改.
【总页数】3页(P81-83)
【作者】张永奎;周礼;董丹;陈晓;姚英杰
【作者单位】四川大学化工学院,四川,成都,610065;四川大学化工学院,四川,成都,610065;四川大学化工学院,四川,成都,610065;四川大学化工学院,四川,成
都,610065;四川大学化工学院,四川,成都,610065
【正文语种】中文
【中图分类】X17
【相关文献】
1.微生物絮凝剂产生菌的筛选及其絮凝性能的实验研究 [J], 秦芳玲
2.微生物絮凝剂在处理煤化工废水中的实验研究 [J], 王少青;侯炜;李发旺;乔子荣
3.利用酱油废水制备微生物絮凝剂实验研究 [J], 刘艳娟;程磊
4.混凝好氧颗粒污泥絮凝剂微生物毒理实验研究 [J], 易诚;龙九妹;刘最;彭钢
5.微生物絮凝剂综合实验研究 [J], 张迎明;赵继红;刘永德
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酵母菌絮凝的分型及其生理生化特性的研究_张博润

酵母菌絮凝的分型及其生理生化特性的研究_张博润

39卷 6期1999年12月微生物学报Acta Microbiologica Sinica Vol .39December No .61999收稿日期:1998-03-02,修回日期:1998-05-27酵母菌絮凝的分型及其生理生化特性的研究张博润 陈 蔚 铁翠娟 何秀萍 谭华荣(中国科学院微生物研究所 北京 100080)摘 要 通过对410余株酵母菌进行絮凝测定,从中筛选到5株强絮凝菌。

依据不同糖对其絮凝水平的抑制,将5株强絮凝菌分为F lo 1型和N ew Flo 型。

对这两种絮凝型菌株的相关生理生化特性进行了研究。

结果表明,Flo 1型菌絮凝只受甘露糖抑制,它对高温(70℃)、蛋白酶E 、胰蛋白酶敏感,而对蛋白酶K 、糜蛋白酶、Ca 2+、pH 有一定耐受性。

N ew Flo 型菌絮凝受甘露糖等多种糖抑制,它对高温(70℃)、各种蛋白酶、Ca 2+、pH 均较敏感。

这两种类型菌株絮凝的最适Ca 2+浓度为10mmo l /L ~1mol /L ,最适pH 为3.0~4.5。

关键词 酵母菌,絮凝,分型,生理生化特性分类号 Q939.5 文献标识码A 文章编号 0001-6209(1999)06-0527-32 酵母菌絮凝通常指酵母菌在生长期间发生的细胞间的无性凝集。

在发酵工业中,酵母菌细胞的絮凝能力是评价菌种优劣的一个重要指标。

若细胞絮凝性强,在发酵后期,分散于发酵液中的细胞相互聚集形成絮凝颗粒并沉降,从而有利于细胞同发酵液的有效分离,可大大简化后处理工艺,降低成本。

然而絮凝是一个极复杂的现象,不仅受遗传因子的控制,而且受环境、生理等多方面的影响。

目前,对酵母菌絮凝机理还不太清楚,主要有两种假说[1]:一种假说认为酵母菌细胞絮凝是由细胞壁上类外源凝集素的糖蛋白和甘露聚糖相互作用形成;而另一种假说认为酵母菌细胞絮凝是细胞壁上蛋白和甘露聚糖间以钙离子桥连接而成。

近年来,国外有关学者对酵母菌絮凝机理及其分子遗传学进行了较广泛的研究[2~4],而国内未见类似报道。

酵母菌的分类鉴定

酵母菌的分类鉴定

双 糖:蔗糖,麦芽糖,纤维二糖(cellobiose),海藻糖(trehalose),乳糖,密二糖(melibiose);
三 糖:棉子糖,松三糖(melezitose);
多 糖:可溶性淀粉;
醇 类:赤藓糖醇(erythritol),核糖醇(ribitol),D-甘露醇(mannitol),肌醇(inositol),甘油(glycerol),
整理课件
21
V. 分子分类和分子系统学
DNA碱基组成(DNA Base Composition) 属内差异多在10%以内 种内差异1.0-1.5%(浮力密度法)或2.0-2.5%(热变性法)
DNA-DNA同源性 (DNA-DNA Homology) 一对菌株的变性总DNA之间杂交复性的程度和稳定性, 通常以相对结合百分率表示
整理课件
4
Basidiomycetous Yeasts(担子菌酵母)
Teleomorphic taxa
I. With “simple” septal pores
A. Basidia cylindric, transversely septate
Ustilaginales
Sporidiales
Platygloeales
念珠菌(Candida)等酵母菌
的分类和鉴定
整理课件
1
什么是酵母菌?
Yeasts are fungi with vegetative states that predominantly reproduce by budding or fission, resulting in growth that is comprised mainly of single cells, and with sexual states that are not enclosed in fruiting bodies.

微生物絮凝剂的提纯及絮凝条件研究

微生物絮凝剂的提纯及絮凝条件研究

微生物絮凝剂的提纯及絮凝条件研究
张云峰
【期刊名称】《淮阴师范学院学报(自然科学版)》
【年(卷),期】2005(4)4
【摘要】絮凝剂生产菌(Pseudomonas sp.F-8)的发酵液经离心沉淀后,其上清液经丙酮萃取,乙醚洗涤和冷冻干燥后即得到絮凝剂干制品.通过实验,确定该絮凝剂适宜的投加量为4mL(浓度为0.1%),助凝剂CaO(浓度为1%)适宜投加量为2mL,絮凝作用的最适pH为8.0,最适温度为40℃,搅拌速度为200r/min.废水处理实验表明,对几种实际废水具有良好的净化效果.
【总页数】4页(P331-334)
【作者】张云峰
【作者单位】淮阴师范学院,生物系,江苏,淮安,223300
【正文语种】中文
【中图分类】X703
【相关文献】
1.微生物絮凝剂的提纯及絮凝能力的应用研究 [J], 王辉;贾建波
2.微生物絮凝剂的提纯及应用研究 [J], 柴晓利;陈洁;王猛;沈志松
3.一株微生物絮凝剂产生菌产絮凝剂的条件及其发酵生理研究 [J], 黄玉柳;马光庭
4.微生物絮凝剂的提纯及絮凝条件的优化 [J], 智芳芳;罗平
5.微生物絮凝剂产生菌群的培养条件及絮凝特性初步研究 [J], 陈亚飞;俞晓雯;林华颖;董新姣
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含α-乙酰乳酸脱羧酶基因的啤酒酵母工程菌的构建

含α-乙酰乳酸脱羧酶基因的啤酒酵母工程菌的构建

含α-乙酰乳酸脱羧酶基因的啤酒酵母工程菌的构建
张沛;张博润
【期刊名称】《酿酒》
【年(卷),期】2004(031)003
【摘要】利用基因工程手段将食品级醋化醋杆菌的α-乙酰乳酸脱羧酶基因引入啤酒酵母中,使啤酒酵母获得编码此酶的基因并表达,检测到α-乙酰乳酸脱羧酶的活性,获得一株性能优良的啤酒酵母工程菌.经测试,构建的工程菌与出发菌在生理、生化、发酵特性等方面无差异,但发酵液中双乙酰的峰值及还原时间较出发菌降低1/3左右.
【总页数】3页(P97-99)
【作者】张沛;张博润
【作者单位】江南大学,江苏,无锡,214036;中国科学院微生物研究所,北京,100080【正文语种】中文
【中图分类】TS262.5;TS261.11
【相关文献】
1.采用自克隆技术构建高SOD、低双乙酰的啤酒酵母工程菌 [J], 母茜;蔡勇;王肇悦;张博润;任正隆
2.乙酰短杆菌α-乙酰乳酸脱羧酶基因的克隆及其表达 [J], 沈亮
3.具有α-淀粉酶分泌活性以及低双乙酰产量的啤酒酵母工程菌的构建 [J], 张峰;王肇悦;刘楠;何秀萍;张博润
4.低双乙酰抗老化啤酒酵母工程菌的构建 [J], 张吉娜;何秀萍;郭雪娜;刘楠;张博润
5.枯草芽孢杆菌α-乙酰乳酸脱羧酶基因在啤酒酵母工业菌株中的表达 [J], 郭文洁;何秀萍;铁翠娟;张博润
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微生物絮凝剂产生菌的筛选及其絮凝特性

微生物絮凝剂产生菌的筛选及其絮凝特性

微生物絮凝剂产生菌的筛选及其絮凝特性
史艳丹;刘永军
【期刊名称】《中国科技论文》
【年(卷),期】2010(005)009
【摘要】为了得到高效产微生物絮凝剂的菌种,采用常规的微生物分离方法从活性污泥中分离到31株不同微生物菌株,经过初筛和复筛,共得到6株具有絮凝活性的微生物菌株.以高岭土悬浊液为模拟废水,通过测定菌株对高岭土悬浊液的絮凝率确定出编号为ND-2的菌株絮凝效果最优.取几种不同的污废水检测ND-2菌种的絮凝活性,结果发现,该菌种对高岭土悬浊液以及泥浆水有非常好的絮凝效果,通过测定该菌株在微生物生长各个阶段的絮凝率,可知该菌株达到最大絮凝活性是在微生物生长的稳定期.离心ND-2的发酵液,测定该菌株的发酵液、上清液、菌悬液以及培养基的絮凝活性,结果显示发酵液和菌悬液的絮凝活性较好,由此推断出该菌株起絮凝作用的是微生物细胞本身.
【总页数】4页(P722-725)
【作者】史艳丹;刘永军
【作者单位】西安建筑科技大学环境与市政工程学院,西安710055;西安建筑科技大学环境与市政工程学院,西安710055
【正文语种】中文
【中图分类】X172
【相关文献】
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39卷 6期1999年12月微生物学报Acta Microbiologica Sinica Vol .39December No .61999收稿日期:1998-03-02,修回日期:1998-05-27酵母菌絮凝的分型及其生理生化特性的研究张博润 陈 蔚 铁翠娟 何秀萍 谭华荣(中国科学院微生物研究所 北京 100080)摘 要 通过对410余株酵母菌进行絮凝测定,从中筛选到5株强絮凝菌。

依据不同糖对其絮凝水平的抑制,将5株强絮凝菌分为F lo 1型和N ew Flo 型。

对这两种絮凝型菌株的相关生理生化特性进行了研究。

结果表明,Flo 1型菌絮凝只受甘露糖抑制,它对高温(70℃)、蛋白酶E 、胰蛋白酶敏感,而对蛋白酶K 、糜蛋白酶、Ca 2+、pH 有一定耐受性。

N ew Flo 型菌絮凝受甘露糖等多种糖抑制,它对高温(70℃)、各种蛋白酶、Ca 2+、pH 均较敏感。

这两种类型菌株絮凝的最适Ca 2+浓度为10mmo l /L ~1mol /L ,最适pH 为3.0~4.5。

关键词 酵母菌,絮凝,分型,生理生化特性分类号 Q939.5 文献标识码A 文章编号 0001-6209(1999)06-0527-32 酵母菌絮凝通常指酵母菌在生长期间发生的细胞间的无性凝集。

在发酵工业中,酵母菌细胞的絮凝能力是评价菌种优劣的一个重要指标。

若细胞絮凝性强,在发酵后期,分散于发酵液中的细胞相互聚集形成絮凝颗粒并沉降,从而有利于细胞同发酵液的有效分离,可大大简化后处理工艺,降低成本。

然而絮凝是一个极复杂的现象,不仅受遗传因子的控制,而且受环境、生理等多方面的影响。

目前,对酵母菌絮凝机理还不太清楚,主要有两种假说[1]:一种假说认为酵母菌细胞絮凝是由细胞壁上类外源凝集素的糖蛋白和甘露聚糖相互作用形成;而另一种假说认为酵母菌细胞絮凝是细胞壁上蛋白和甘露聚糖间以钙离子桥连接而成。

近年来,国外有关学者对酵母菌絮凝机理及其分子遗传学进行了较广泛的研究[2~4],而国内未见类似报道。

本文报道了强絮凝酵母菌的筛选、分型及其生理生化特性的研究结果。

1 材料和方法1.1 材料1.1.1 菌株:从本组保藏的酵母菌中挑选出不同种属的410余株菌作为筛选强絮凝菌的出发菌株,编号为FL -1~FL -410。

标准Flo 1型絮凝菌株ABXL -1D (MAT a ,FLO1),BX24-2B (M AT α,FLO1),ABXR -11A (MAT α,FLO5),STX347-2C (MAT a ,FLO5)由美国的Rebecca Contopoulou 教授赠送。

标准NewFlo 型絮凝菌株NCYC1190,NCYC1195由英国的J .R .Johnston 教授赠送。

1.1.2 培养基:YEPD 培养基,YNB 培养基,麦芽汁培养基[5]。

1.1.3 酶、试剂及溶液:各种蛋白酶均为国产。

所用化学试剂为分析纯。

絮凝缓冲液为0.1mol /L 柠檬酸钠缓冲液(pH4.0,含10mmol /L CaCl 2))。

蛋白酶的缓冲液为0.1mol /LDOI :10.13343/j .cn ki .wsxb .1999.06.008528微 生 物 学 报39卷 磷酸钠缓冲液(pH7.5)。

1.2 培养条件和测定方法1.2.1 培养条件:实验菌株于25℃活化后接一环于液体YEPD中,25℃,200r/min培养48h。

1.2.2 絮凝水平测定:按文献[6]的方法略有改进。

目测法:将待测菌接种于装有3m L YEPD液体培养基的试管中,28℃静置培养48h后,剧烈振荡1min,室温静置,观察絮凝形成速度及絮凝物大小,确定菌株的絮凝水平。

分光光度法:取48h培养物离心收集菌体,用250mmol/L EDTA溶液及无菌水各洗两次,离心收集菌体并悬于絮凝缓冲液中,立刻在600nm处测OD值;然后细胞悬液移至三角瓶中,25℃,120r/min振荡2h至絮凝完成,室温静置30min,取上清在600nm处测OD值。

以振荡处理后测定的OD值除以振荡处理前测定的OD值,再乘以100%(即自由细胞浓度)表示絮凝水平。

1.3 不同因素对菌株絮凝水平的影响1.3.1 不同糖对絮凝水平的影响[6]:将不同浓度的各种糖溶于絮凝缓冲液中,测定絮凝水平,为避免代谢旺盛的酵母细胞消耗糖而降低其浓度,可于250mmol/L EDTA洗细胞时,在60℃处理5min以杀死细胞(该处理不影响细胞的絮凝),然后测定絮凝水平。

1.3.2 Ca2+浓度对絮凝水平的影响[7]:改变絮凝缓冲液中Ca2+的浓度,测定絮凝水平。

1.3.3 pH值对絮凝水平的影响:改变絮凝缓冲液的pH值,测定絮凝水平。

1.3.4 高温对絮凝水平的影响:将用EDTA及蒸馏水洗过的酵母细胞重新悬于絮凝缓冲液中,70℃保温,在不同时间取样,测定絮凝水平。

1.3.5 蛋白酶对絮凝水平的影响:将用EDTA及蒸馏水洗过的酵母细胞重新悬于加有各种蛋白酶的0.1mol/L磷酸钠缓冲液(ph7.5)中,30℃保温,在不同时间取样,测定絮凝水平。

蛋白酶浓度分别为:蛋白酶E0.1mg/mL,蛋白酶K1mg/mL,胰蛋白酶1mg/mL,糜蛋白酶0.5mg/m L。

1.3.6 培养基对絮凝水平的影响:将酵母菌分别接种于YEPD培养基、YNB培养基、麦芽汁培养基中,25℃,200r/min培养48h,测定絮凝水平。

1.3.7 培养时间对絮凝水平的影响:将酵母菌接种于YEPD培养基后,每隔8h取样测定絮凝水平。

2 结果和分析2.1 强絮凝菌株的筛选通过目测法从酵母菌FL1~FL410中筛选到5株强絮凝菌株,即FL-186、FL-187、FL-189、FL-190、FL-191,均为啤酒酵母(Saccharomyces c erevisiae)。

用这5株菌进行后续实验。

2.2 絮凝菌株的分型Stratford等人将酵母菌絮凝表型分为两型:Flo1型和New Flo型,Flo1型菌絮凝只受甘露糖抑制,而New Flo型菌絮凝受甘露糖等多种糖抑制。

本文检测了1mol/L不同糖(甘露糖、麦芽糖、葡萄糖)对5株强絮凝菌的絮凝水平抑制情况,并以标准絮凝菌株作对照。

结果表明FL-189、FL-190、FL-191的絮凝仅受甘露糖抑制,而不受其它糖的影响,与标准Flo 1型菌株的表型一致,该特性表明这3株菌属于Flo 1型。

而FL -186、FL -187的絮凝则受以上3种糖不同程度的抑制,与标准NewFlo 型菌株的表型一致,证明这两株菌属于New Flo 型。

据文献[7]报道,Flo 1型菌可能同基因FLO1、FLO5、FLO8、Cy c8、Tup1有关。

分型结果见表1。

表1 絮凝菌株的分型Table 1 Distinction of yeast flocculent phenotypes菌株Strains对照絮凝水平Control 甘露糖M annose 葡萄糖Glucose 麦芽糖M altose 分型Phenotypes ABXL -1D+++++++FLO1BX24-2B+++++++FLO1FL -189++++++++++++FLO1FL -190+++++++++++FLO1FL -191+++++++++++FLO1NCYC1190++-+-New Flo FL -186+++---New Flo FL -187+++---New Flo 注:“-”不絮凝;“+”弱絮凝;“++”中度絮凝;“+++”强絮凝“-”No floccul ation ;“+”Poor flocculation ;“++”medial flocculation ;“+++”S trong fl occulation .图1 糖浓度对絮凝的影响Fig .1Effect of sugar concentration on the floccu lation of yeast cells ○:M annose ;△:M altose ;□:Glucose ;—:FL -186;--:FL -191.2.3 不同因素对菌株絮凝水平的影响2.3.1 糖浓度对絮凝水平的影响:结果如图1所示。

不同浓度的糖对New Flo 型菌的絮凝均有抑制作用,且随糖浓度增高,抑制作用加强。

其中麦芽糖的抑制作用最强,浓度仅为100mmol /L 时就几乎完全抑制絮凝;葡萄糖的抑制作用最弱,当浓度升高至1mol /L 时才能完全抑制絮凝。

Flo 1型菌的絮凝则只受甘露糖抑制,抑制作用随糖浓度增加而缓慢增强。

2.3.2 Ca 2+对絮凝水平的影响:结果如图2所示,可以看出,Flo 1型和New Flo 型菌株的絮凝都依赖Ca 2+。

最适Ca 2+浓度为10mmol /L ~1.0mol /L ,且New Flo 型菌对Ca 2+浓度变化较Flo1型菌敏感,当Ca 2+浓度低于10mmol /L 或高于2.0mol /L 时即表现出较明显的絮凝抑制。

2.3.3 pH 对絮凝水平的影响:实验结果表明Flo 1型和New Flo 型菌株的絮凝都依赖pH (图3)。

最适pH 为3.0~4.5。

同Ca 2+对絮凝的影响相似,NewFlo 型菌对不同pH 值都较Flo 1型菌敏感。

2.3.4 高温对絮凝水平的影响:实验结果表明Flo 1型和New Flo 型菌株的絮凝均受高温(70℃)抑制(图4),且温育时间越长,对细胞絮凝抑制越明显。

这可能是由于参与絮凝形成的细胞壁表面蛋白在高温时失活,空间结构发生改变,从而使絮凝受抑制。

529 6期张博润等:酵母菌絮凝的分型及其生理生化特性的研究图2 Ca 2+对絮凝的影响Fig .2 Effect of calcium ch l orid e concentration on the fl occulation of yeat cells□:FL -186;△:FL -187;◆:FL -191;■:FL -189.图3 pH 对絮凝的影响Fig .3 Effect of pH val ue on the floccul ationof yeast cells□:FL -186;△FL -187;◆:FL -190;■:FL -189.图4 高温(70℃)对絮凝的影响Fig .4 Effect of high temperation on the flocculation of yeast cells □:FL -186;△FL -187;◆:FL -190;■:FL -189.2.3.5 不同蛋白酶对絮凝水平的影响:如图5所示,New Flo 型菌对蛋白酶E 、蛋白酶K 、胰蛋白酶相当敏感,仅作用10min 就几乎完全丧失絮凝性。

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