被动凝集法检测肺炎支原体

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被动凝集法检测肺炎支原体

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被动凝集法
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被动凝集法
阳性对照：MP抗体滴度为1:320
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MP感染判断标准：
1 MP急性感染判断标准：①急性期MP IgM抗体≥1：40，且恢复期较急性期血清抗体效价上升4 倍或4 倍以上。②急性期血清抗体阴性（IgM抗体<1：40），恢复期血清抗体≥1∶80。
2 MP既往感染判断标准：双份血清抗体效价均明显增高，但恢复期较急性期血清抗体效价升高小于4 倍。
2.消除红细胞载体引起的非特异性凝集。 3.特异性、灵敏性较高。 4.血清MP抗体滴度与MP感染者病情的严重程度呈正相关。
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被动凝集法
缺点：
1.检测总抗体。 2.该试验仅用于检测MP抗体，而非直接检测MP，因而阳性结果并不能确诊是MP感染。 3.假阴性。
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2.
3.
4.
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被动凝集法
判定标准：
阳性：样品与未致敏粒子（最终稀释倍数1:20）
的反应图像判定为（-）；而与致敏粒子（最终稀释倍数1:40）的反应图像判定为（+）或（++），则结果判定为阳性。将显示出反应图像为（+）时的最终稀释倍数作为抗体滴度。阴性：不论样品与未致敏粒子呈现何种反应图像，只要与致敏粒子（最终稀释倍数1:40）的反应图像显示为（-），则结果判定为阴性。保留（-）；（±）
被动凝集法
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被动凝集法

肺炎支原体抗体三种血清学检测方法的对比分析

20192019年6月第9卷第11期·检验医学·肺炎支原体抗体三种血清学检测方法的对比分析谢文俊厦门市海沧医院检验科，福建厦门 361026[摘要] 目的比较电化学发光方法（CLIA）、间接免疫荧光抗体法（IFA）和被动凝集法（PPA）在肺炎支原体感染早期检测中的应用价值。

方法选取我院2017年6月～2018年3月可疑肺炎支原体感染的患者153例，分别采用电化学发光方法、间接免疫荧光法和被动凝集法检测患者血清中的肺炎支原体抗体，比较这三种检测方法阳性检出率的差异，以协助临床早期诊断肺炎支原体感染。

结果 PA法检测出（IgM+IgG）阳性标本和阴性标本数分别为60（39.22%）和93（60.78%）；CLIA检测出（IgM）阳性标本和阴性标本数分别为57（37.25%）和96（62.75%）；IFA检测出（IgM）阳性标本和阴性标本数分别为54（35.29%）和99（64.71%）；以上三种检测方法的阳性检出率差异均无统计学意义（P＞0.05）。

对IFA/PA、IFA/CLIA和CLIA/PA进行一致性分析，CLIA/PA组、CLIA/IFA组和IFA/PA组的Kappa值分别0.903、0.929和0.867，三种检测方法一致性好（Kappa系数均＞0.75）。

结论电化学发光方法（CLIA）、间接免疫荧光抗体法（IFA）和被动凝集法（PPA）均在检测肺炎支原体中有着较高的一致性，均可用于肺炎支原体抗体的检测，且CLIA法由于检测MP分型抗体具备精密度高、用时短、操作自动化等优势，有望替代IFA法和PA法应用于临床。

[关键词] 肺炎支原体；化学发光免疫分析法；间接免疫荧光抗体法；被动凝集法[中图分类号] R446.6 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2019）11-90-03Comparative analysis of three serological detection methods for mycoplasma pneumoniae antibodyXIE WenjunDepartment of Clinical Laboratory,Xiamen Haicang Hospital,Fujian,Xiamen 361026,China[Abstract] Objective To compare the application values of electrochemiluminescence immunoassay(CLIA),indirect immunofluorescence antibody method(IFA)and particle agglutination(PPA)in the early detection of mycoplasma pneumoniae infection. Methods 153 patients with suspected mycoplasma pneumoniae infection who were admitted to our hospital from June 2017 to March 2018 were selected and they were respectively given electrochemiluminescence immunoassay,indirect immunofluorescence antibody method and particle agglutination to detect mycoplasma pneumoniae antibody in the serum.The differences in the positive detection rates of these three methods were compared to assist the early diagnosis of mycoplasma pneumoniae infection. Results The number of positive and negative samples of IgM and IgG detected by PA method were 60(39.22%)and 93(60.78%),respectively.The number of positive and negative IgM samples detected by CLIA was 57(37.25%)and 96(62.75%),respectively.The number of positive and negative IgM samples detected by IFA was 54(35.29%)and 99(64.71%),respectively.There was no significant difference in the positive detection rate of the above three methods(all P＞0.05).Consistency analysis was conducted for IFA/PA,IFA/CLIA and CLIA/PA.The Kappa values of CLIA/PA group,CLIA/IFA group and IFA/PA group were 0.903,0.929 and 0.867 respectively.The consistency of the three detection methods was good(Kappa coefficient＞0.75). Conclusion Electrochemiluminescence immunoassay(CLIA),indirect immunofluorescence antibody method(IFA)and particle agglutination(PPA)all have high consistency in the detection of mycoplasma pneumoniae,which can be used for the detection of mycoplasma pneumoniae antibodies.In addition,CLIA method is expected to replace IFA method and PA method in clinical application because of its advantages of high precision,short time and automatic operation in the detection of MP typing antibody.[Key words]Mycoplasma pneumoniae;Electrochemiluminescence immunoassay;Indirect immunofluorescence antibody method;Particle agglutination肺炎支原体（mycoplasm apneumonia，MP）是学龄儿童和青少年呼吸道感染的主要原因，是继肺炎链球菌之后的第二大社区获得性肺炎的病原体[1-4]。

肺炎支原体抗体检测(被动凝集法)和肺炎支原体核酸检测(实时荧光定量PCR法)在儿童肺炎支原体感染中的

肺炎支原体抗体检测（被动凝集法）和肺炎支原体核酸检测（实时荧光定量PCR法）在儿童肺炎支原体感染中的应用价值摘要目的：评估MP抗体检测与MP-DNA检测在儿童肺炎支原体感染中的应用价值。

方法：将2018年1月至12月在本院进行治疗的100 例MP 感染患儿作为研究对象，同时用被动凝集抗体检测法和实时荧光定量PCR法进行检测，对检测结果进行统计分析。

结果：对100 例MP感染的患儿进行检测，其中应用被动凝集抗体检测法检测出94例呈阳性，阳性率为94.00%，应用实时荧光定量PCR法检测出95例呈阳性，阳性率为95.00%，两种检测方法检出的4-6岁组患儿阳性率均最高，均为100%，两种方法检测阳性率在各年龄组均无显著性差异（P<0.05）。

结论：被动凝集法以及实时荧光定量PCR法在儿童肺炎支原体感染的检测中特异性强，且两种检测方法无显著性差异（P<0.05），均可以应用于临床检测。

关键词：被动凝集法；实时荧光定量PCR；儿童肺炎支原体肺炎支原体肺炎是学龄前和学龄期儿童常见的一种肺炎，婴幼儿亦常见，占住院儿童社区获得性肺炎的10%～40%，其病原体为肺炎支原体 [1-2]。

临床上感染肺炎支原体的儿童在感染初期没有很明显的临床症状，而且有很多症状不会体现在肺部，而且该类疾病的临床进展期比较长，这就致使肺炎支原体感染在临床上有较高的误诊率[3-4]。

虽然有关MP感染而死亡的儿童报道较少，但如果不对这类疾病进行及早的治疗与控制，会给患病儿童带来多种并发症，严重的并发症可能会损伤儿童脆弱的神经，影响儿童的生长发育［5-6］。

就目前临床对MP感染的了解来看，仅仅通过临床症状很难将MP于其他的病原体引起的呼吸道感染进行分辨，由于MP感染后的治疗不同于其他病原微生物，对MP进行及早的诊断，是临床减少抗生素滥用的有效手段，发现准确、快速的MP诊断方法意义重大[3-7]。

目前，在我国对MP进行临床诊断，一般采用血常规分析结合患儿临床症状以及细菌培养或MP抗体检测。

肺炎支原体抗体检测(被动凝集法)

肺炎支原体抗体检测（被动凝集法）1.目的：规范实验室肺炎支原体抗体检测操作。

2.范围： xxxx院xxxx科3.测定原理：将肺炎支原体（Mac株）的细胞膜成分致敏人工载体明胶粒子制造而成。

这种致敏粒子和样本中的肺炎支原体抗体进行反应发生凝集，由此可以检测出血清和血浆中的肺炎支原体抗体，并且用来测定抗体的效价。

4.标本：4.1采用正确医用技术收集血清/血浆样本，血浆样本推荐使用肝素钠抗凝血浆，枸橼酸钠和EDTA抗凝剂。

4.2样本中的沉淀物和悬浮物，红细胞等其它有形成分可能会影响试验结果，应离心除去，并确定样本未变质方可使用。

4.3严重溶血或脂血的样本不能用于测定。

4.4样本收集后在室温放置不可超过8小时；如果不在8小时内检测需将样本放置在2~8℃的冰箱中；若需48小时以上保存或运输，则应冻存于-20℃以下，避免反复冻融。

使用前恢复到室温，轻轻摇动混匀。

5.试剂：珠海丽珠试剂股份有限公司提供的试剂。

5.1试剂盒在2℃—10℃储存，防止冷冻，避免强光照射，有效期12个月。

5.2 试剂盒开启使用后，冷冻干燥品配好后，2℃—10℃保存可使用7日，使用前必须做对照试验。

5.3试剂组成5.3.1血清稀释液（液体）：用于稀释样品和复溶致敏粒子和未致敏粒子。

5.3.2致敏粒子（冷冻干燥）：肺炎支原体（Mac株）抗原致敏的明胶粒子。

使用时加入规定量的血清稀释液。

复溶后的试剂含有0.9%的致敏粒子。

5.3.3未致敏粒子（冷冻干燥）鞣化的明胶粒子冻干制品。

使用时加入规定量的血清稀释液。

5.3.4阳性对照血清（液体）肺炎支原体（Mac株）抗体阳性的兔血清用血清稀释液1:10稀释后的制品。

6.临床标本测定6.1试剂的准备6.1.1溶解液（液体）：按照测定操作规则使用。

6.1.2血清稀释液（液体）：按照测定操作规则使用。

6.1.3致敏粒子（冷冻干燥）：加入一定量的溶解液进行调制。

请在使用前30分钟于室温（15~30℃）下进行调制。

支原体肺炎血清学试验被动凝集法作业指导书

支原体肺炎血清学试验被动凝集法作业指导书1.原理本试剂是一种检测肺炎支原体抗体的体外诊断试验，它用肺炎支原体细胞膜成分致敏人工明胶粒子制造而成。

本试剂试验室基于如下原理：致敏粒子与人血清中存在的肺炎支原体抗体发生凝集反应。

2.标本采集2.1标本种类：血清2.2标本要求：新鲜，无溶血，无脂血。

2.3标本存放：室温﹤8小时，4℃—8℃存﹤48小时。

3.试剂组合3.1U型微量反应板：FASTEC。

3.2血清稀释液（液体）：30ml*1瓶。

3.3致敏粒子（冻干）：1.5ml*5瓶。

3.4未致敏粒子（冻干）：1.5ml*5瓶。

3.5阳性对照（液体）：0.5ml*1瓶。

4.操作方法4.1用一支校准的滴管，向第1孔加100ul，向第2-第8孔各加25ul血清稀释液。

4.2用微量移液管向第1孔中滴加25ul样品。

4.3用加样器或移液管，从第1孔至第8孔进行对倍稀释。

4.4用试剂盒中提供的一支滴管向第2孔中滴加25ul未致敏粒子，用试剂盒中提供的另一支滴管向第3孔至第8孔各滴加25ul致敏粒子。

4.5用平板混合器混合各孔中内容物约30秒，以便充分混匀。

给反应物加盖。

5.结果判断：在室温下静置3小时，然后在平板观测器上读取凝集图像。

6.操作性能：特异性，灵敏度，重复性，相关性。

7.结果处理7.1若结果失败，则重复测试，并作质控校正。

7.2若失控，则重检试剂盒。

8.方法局限性8.1溶血、脂血结果有影响。

8.2观察结果对弱阳性存在差异。

9.临床意义：肺炎支原体（MP）是引起呼吸道感染的常见病原微生物，它除可引起非典型肺炎外，常可引起呼吸道感染、气管炎、支气管炎、淋巴结炎，也可引起肺大泡、肺脓肿，另外，它还可引起其他系统并发症，如心肌炎、心包炎、脑膜炎、关节炎、胃炎、溶血性贫血等，由于MP对一般治疗肺炎的药物有耐药性，因此，及时进行检查有助于诊断及治疗。

被动凝集法和ELISA法检测肺炎支原体抗体及其IgM、IgG分型研究

Ｔ４Ｐ７条带，确定５份，为单条Ｔ４阳性。这是由于不均Ｐ７
［］张良芬．毒螺旋体４Ｄ脂蛋白的研究现状［］国外医学皮肤７梅７ｋＪ．性病学分册，０１２（）２９２１２０，７４：１－２．
值分析，以看出在ｓｃ值低时容易出现ＴＰ的阴性结可／ｏＰＡ果，合１份ＷＢ法确认阴性，次进行ＣＩ检测也为阴性结６再ＬＡ的结果，一方面说明ＣＩ在敏感性方面比ＴＰ有优势，这ＬＡＰＡ同时也说明ＣＡ检测中会由于标本处理等原因而存在假阳ｕ
［］Ｓｔ，ｒｔｍＨｉｔＤＣ，ｔａ．ａｙｉｏｒｐｎｍａ８ａｏＮＳＨｉａＨ，ｒａＲａａｅ１ＡｎｌｓｆＴｅｏｅｓ
ｐｌｄｍｅｏａｌｕｒｃｍｂｎｎｎｉｅｓ／ｒｄａｎｓｓｏｙｈｌｙｗｅｔｒｉｉａｔａｔｇｎｏｉｇｏｉｆｓｐｉｓｂｓｅｎｉ
国际检验医学杂志２１年６月第３卷第ｌ期０２３１
ＩｔａｎＬｂＭｅ，ｌ２１，ｏ３，ｏ１ＪｄＪｙ０２Ｖ１３Ｎ．１ｕ．
诊试验，试验采用的是纯化的致病性梅毒螺旋体（ｃｏｓ该Ｎｉｌｈ株）原，敏感性、异性均较高，誉为 “ 实试验 ” 但这种抗其特被证，试验并非完美无缺，可出现生物学假阳性］仍。。

被动凝集法、间接免疫荧光法和胶体金法联合检测肺炎支原体抗体对儿童肺炎支原体感染的诊断价值

应用研究被动凝集法、间接免疫荧光法和胶体金法联合检测肺炎支原体抗体对儿童肺炎支原体感染的诊断价值王居鹏1，2，朱黎娜2，马明坤2，陈慧3，郭素香3，任丽1△摘要：目的分析被动凝集法（PA）、间接免疫荧光法（IFA）和胶体金法（GICT）联合检测对儿童肺炎支原体（MP）感染的诊断价值。

方法选取进行MP抗体检测的患儿617例，以临床诊断为判断标准，分为MP感染组（345例）和非MP感染组（272例）。

所有患儿均经PA检测MP总抗体，经IFA和GICT检测MP-IgM抗体。

分析PA、IFA和GICT 这3种方法单独检测及两两联合检测与临床诊断的一致性，受试者工作特征（ROC）曲线评价其对MP感染的诊断价值，分析PA联合IFA检测2组患儿抗体情况。

结果MP感染组PA检测MP总抗体、IFA和GICT检测MP-IgM抗体的阳性率较非MP感染组高（P＜0.01）。

PA检测MP总抗体的阳性检出率高于IFA和GICT检测MP-IgM抗体的阳性检出率（P＜0.01）。

PA联合IFA与临床诊断为中度一致（Kappa值=0.41，P＜0.05）。

3种方法单独检测和两两组合检测中PA联合IFA的曲线下面积、敏感度、总符合率、阴性预测值最高，阴性似然比最低。

GICT单独检测特异度最高。

IFA单独检测阳性预测值和阳性似然比最高。

当MP-IgM抗体阳性时，MP感染组23.44%的患儿总抗体滴度＜1︰160，非MP感染组47.22%的患儿总抗体滴度≥1︰160。

当MP-IgM抗体阴性时，MP感染组91.91%的患儿MP总抗体滴度≥1︰160，非MP感染组有73.50%的患儿总抗体滴度＜1︰160。

结论PA和IFA联合检测可为临床诊断儿童MP 感染提供更客观、准确的检测结果。

关键词：肺炎支原体；儿童；胶体金；免疫球蛋白M；荧光抗体技术，间接；被动凝集法；间接免疫荧光法中图分类号：R446文献标志码：A DOI：10.11958/20212561Diagnostic value of particle agglutination,indirect immunofluorescence assay and immunecolloidal gold technique combined detection for Mycoplasma pneumoniae antibody inchildren with Mycoplasma pneumoniae infectionWANG Jupeng1,2,ZHU Lina2,MA Mingkun2,CHEN Hui3,GUO Suxiang3,REN Li1△1Department of Clinical Laboratory,Tianjin Medical University Cancer Institute and Hospital,National Clinical ResearchCenter for Cancer;Key Laboratory of Cancer Prevention and Therapy,Tianjin;Tianjin's Clinical Research Center for Cancer, Tianjin300060,China;2Department of Clinical Laboratory,3Department of Pediatrics,Second TeachingHospital of Tianjin University of Traditional Chinese Medicine△Corresponding Author E-mail:*************.cnAbstract:Objective To analyze the diagnostic value of particle agglutination(PA),indirect immunofluorescence assay(IFA)and immune colloidal gold technique(GICT)combined detection for Mycoplasma pneumoniae(MP)infection in children.Methods A total of617children were selected for MP antibody detection,and children were divided into the MP infection group(345cases)and the non-MP infection group(272cases)based on clinical diagnosis.All the children were detected MP total antibody by PA,and MP-IgM antibody by IFA and GICT.The consistency of PA,IFA and GICT detection alone or in combination with clinical diagnosis was analyzed.The diagnostic value of receiver operating characteristic(ROC) curve in the diagnosis of MP infection was evaluated,and the antibody detection of PA combined with IFA was analyzed.Results The positive rate of total MP antibody detected by PA and MP-IgM antibody detected by IFA and GICT was higher in the MP infected group than those in the non-MP infected group(P＜0.01).The positive rate of total MP antibody detected by PA was significantly higher than MP-IgM antibody detected by IFA and GICT(P＜0.01).PA combined with IFA was moderately consistent with clinical diagnosis(Kappa=0.41,P＜0.05).The area under the curve of the diagnostic value,基金项目：国家自然科学基金资助项目（81904250）；天津市教委科研计划项目（2019KJ045）作者单位：1天津医科大学肿瘤医院检验科（邮编300060），国家肿瘤临床医学研究中心；天津市“肿瘤防治”重点实验室；天津市恶性肿瘤临床医学研究中心；2天津中医药大学第二附属医院检验科，3儿科作者简介：王居鹏（1990），男，主管技师，主要从事临床免疫学相关研究。

被动凝集法

被动凝集法
被动凝集法是一种用于检测抗体或抗原的间接凝集反应，此方法中，可溶性抗原（或抗体）被吸附在载体微粒的表面，然后与相应的抗体（或抗原）发生作用，在适宜的电解质存在的条件下，出现特异性的凝集现象。

以肺炎支原体MP的检测为例，被动凝集法主要用于检测肺炎支原体感染。

灵敏度很高，而且简便、快捷、价格便宜，它用于临床常规的检测和筛查。

目前的正常值是1:40，如果大于1:40就存在弱阳性，如果大于1:80，就是肺炎支原体抗体检测阳性。

但请注意，如果肺炎支原体检测是阳性的，并不能说明就是肺炎支原体的急性感染。

因为肺炎支原体抗体感染一般是7-10天就可以出现，20天左右就能出现长期的抗体，而7-10天出现的是短期的IgM 抗体。

这种IgM抗体最长可以持续一年，甚至有达到两年的记录。

因此，我们判断这个患者是不是有肺炎支原体急性的感染，要根据他的临床症状来加以分析和判断。

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样本保存
将采集的样本放入无菌试管中，加入适量的运输培养基或生理盐水，密封后冷藏保存。
样本处理
将采集的样本在实验室内进行离心、分离、稀释等处理，以备后续实验使用。
实验操作步骤及判读结果
实验操作步骤 1. 将处理后的样本与特异性抗体致敏的载体颗粒混合。
2. 在适宜温度下孵育一定时间，使抗体与抗原充分反应。
05
被动凝集法检测肺炎支原体的实验结果分析
实验结果的判读与分析方法
定量结果分析
根据被动凝集法测得的OD值进行定量结果分析，判断肺炎支原体抗体滴度。
阳性判断标准
根据OD值和阳性判断标准，确定血清中是否含有肺炎支原体抗体。
抗体滴度与感染程度关系
根据抗体滴度判断感染程度，并确定相应的治疗措施。
实验结果异常情况的处理与解释
被动凝集法是血清学检测中的一种方法，具有快速、简便、灵敏
度高等优点。
02
被动凝集法检测肺炎支原体原理
被动凝集法的定义和原理
被动凝集法是一种基于抗原抗体结合的检测方法，通过将特异性抗体与可溶性抗原结合，形成可见的凝集反应，从而实现对目标病原体的检测。
在被动凝集法中，使用已知的特异性抗体与可溶性抗原进行反应，如果存在目标病原体，抗体将与抗原结合并形成可见的凝集反应。
根据凝集反应结果，可以判断是否存在肺炎支原体感染。
如果出现凝集反应阳性，提示可能存在肺炎支原体感染，需要进一步进行其他实验室检查以确诊。
被动凝集法检测肺炎支原体具有快速、简便、灵敏度高等优点，是临床常用的诊断方法之一。
03
被动凝集法检测肺炎支原体的应用
在临床上的应一种快速、简便的检测肺炎支原体的方法，常用于临床诊断和疗效监测。

被动颗粒凝集法检测1890例儿童肺炎支原体抗体分析

５３７０００广西壮族自治区玉林市妇幼保健院ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００７ —６１４ｘ．２０１３．
０７．２２１
释液。用微量移液管向第１孔中滴加
２５样品。用加佯器或微量移液管，从
】８９０例儿童肺炎支原体检测阳性
５４９例，阳性率为２９．０５％。其中，男童检
测１１９５例，阳性３０１例，阳性率２５．１９％；女童检测６９５例，阳性２４８例，阳性率３５．
末致敏粒子（最终稀释倍数１：２０）的反应图像判定为（一），而与致敏粒子（最终稀释倍数１：４０）的反应图像判定为（＋）或（＋＋），则结果判定为阳性。将显示出反应图像为（＋）时的最终稀释倍数作
体方法简便，特异性强，是检测儿童肺炎
年青霉素第一个应用于在临床，在临床取得较好或显著的疗效，随着抗菌素的广泛使用，耐药性口渐突出，引起医学界的关注，支原体的治疗使用抗菌药物治疗，治疗前要进行诊断，支原体检测有多种方法，各种检测都有其局限性，从选择药物方面来考虑，有条件的应做支原体培养及药敏，以便选择有效抗生素以提高治疗效果，但榆测时问长、复杂、病情不等
６８％。见表１。

被动凝集法检测肺炎支原体

抗体处理
抗体稀释
将抗体稀释液加入不同试管中，加入适量抗体，充分摇匀。
抗体反应
将处理好的咽拭子和血液样本分别加入不同试管中，充分摇匀，放置一段时间。
反应条件与结果观察
反应条件
将反应试管置于37℃恒温环境中，放置一段时间。
结果观察
观察反应试管中的凝集现象，记录结果。
04
结果解读与判定
结果解读
与ELISA法比较
被动凝集法检测肺炎支原体与ELISA法相比，操作简便、快速、成本低，但灵敏度和特异性略低。
与PCR法比较
被动凝集法检测肺炎支原体与PCR法相比，操作简便、快速、成本低，但灵敏度和特异性略低。
感谢您的观看
THANKS
根据红细胞凝集程度判断抗体滴度，进而判定是否感染肺炎支原体。
结果记录与分析
对阳性结果进行分析，结合临床其他检查结果，判断是否确诊为肺炎支原体感染。
对临界值结果进行分析，结合临床其他检查结果，判断是否存在肺炎支原体感染的可能性。
01
02
记录每份血清的检测结果，包括滴度值和凝集程度。
03
04
凝集反应的原理
当抗体与抗原结合后，会使原本分散的抗原发生凝集，形成肉眼可见的颗粒，通过观察这些颗粒可以判断是否存在抗原抗体结合
被动凝集法检测肺炎支原体的步骤
样本采集
采集患者的血清样本，用于检测肺炎支原体抗体
抗体处理
将血清样本与肺炎支原体的抗原进行反应，使抗体与抗原结合
凝集反应
在适当的条件下，发生凝集反应，形成肉眼可见的颗粒
阳性
若血清中支原体抗体滴度≥1:40，则可判定为阳性，提示可能存在肺炎支原体感染。

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数据统计与分析
对实验数据进行统计和分析，以评估实验结果的可靠性和准确性。
重复实验
对于关键实验结果，应进行重复实验以验证结果的稳定性。
方法学评价
定期对实验方法进行评价，以发现潜在问题并不断完善实验方法。
避免误差和干扰因素
减少操作误差
通过培训和实践提高实验人员的操作技能，减少操作误差。
控制环境因素
该方法操作简便，结果易于判断，适用于临床快速检测。
灵敏度和特异性
被动凝集法具有较高的灵敏度和特异性，能够准确检测肺炎支原体感染。
02
实验准备
实验材料准备
血清样本
来自待检患者，需分离血清，避免溶血、污染和脂血等干扰因素。
阳性对照血清
来自已确诊肺炎支原体感染的患者，用于验证实验的准确性和可靠性。
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目录
• 引言 • 实验准备 • 实验步骤与操作 • 结果判定与解读 • 临床意义与应用价值 • 注意事项与质量控制
01
引言
肺炎支原体概述
01
02
03
肺炎支原体
一种常见的呼吸道病原体，可引起肺炎等呼吸道感染疾病。
传染途径
主要通过飞沫传播，也可通过接触传播。
临床症状
包括咳嗽、发热、头痛、乏力等。
检测方法及原理
检测方法
常用的检测方法包括培养法、 PCR法、血清学方法等。
原理
通过检测肺炎支原体的特异性抗原或抗体，判断是否感染肺炎支原体。
被动凝集法简介
被动凝集法
一种血清学检测方法，利用特异性抗体与肺炎支原体抗原结合形成凝集物的原理进行检测。

日本富士试剂盒被动凝集法检测肺炎支原体讲义课件

指导用药
实验结果可以帮助医生选择合适的抗生素，指导用药。
实验中遇到的问题
06
及解决方案
实验失败的原因及解决方法
原因一
实验操作不当。解决方法：仔细阅读实验操作步骤，确保每一步
都正确无误。
原因二
试剂盒过期或失效。解决方法：检查试剂盒的生产日期和保质期，确保试剂盒在有效期内使用。
原因三
样本采集不规范。解决方法：确保样本采集严格按照规定进行，
结果观察
观察反应过程中溶液的颜色变化和沉淀情况，根据说明书判断结果。
实验结果分析
04
结果判读及注意事项
实验结果判读
根据试剂盒的说明书，结合肺炎支原体的特异性抗体滴度，判断实验结果是否阳性或阴性。
VS
注意事项
实验过程中需注意试剂盒的有效期、储存条件、操作方法等，确保实验结果的准确性。
阳性结果的确认及处理
样本的处理和加样
样本收集
按照试剂盒说明书的要求收集样本，如血清、血浆等。
样本处理
将样本进行离心、分离等处理，以去除杂质和干扰因素。
加样
将处理后的样本加入试剂盒中的相应孔位，加入适量的试剂，并轻轻摇动混匀。
孵育和结果观察
孵育
将加样后的试剂盒放置在适宜的温度下孵育一定时间，以促进反应进行。
如果复查结果仍为阴性，则可排除肺炎支原体感染的可能性。医生应根据患者的病情进行对症治疗。
实验结论及数据分
05
析
数据记录及处理
记录每组实验数据
包括阴性和阳性对照孔的数据，以及待测样本孔的数据。
处理数据
计算出阴性和阳性对照孔的平均值，再根据公式计算出待测样本孔的OD值。

肺支被动凝集法的检测原理

肺支被动凝集法的检测原理
肺支被动凝集法是一种常用的免疫学检测方法，用于检测肺部疾病和呼吸道感染。

该方法基于抗原与抗体之间的特异性反应，通过观察抗原与抗体反应后的凝集现象来判断是否存在某种病原体感染或炎症反应。

肺支被动凝集法的原理是：将人体感染或炎症过程中产生的抗原与特异性的抗体相结合，形成可见的凝集现象。

这种凝集是由于抗体与抗原互相结合形成复合物，复合物受到重力作用和静电相互作用而发生凝集。

具体步骤如下：
1. 准备试验材料：包括抗原、抗体和凝集试剂。

2. 加入抗原：将待检测的标本（如病人的血清或呼吸道分泌物）与抗原混合。

这些抗原是高度纯化的病原体特定抗原，可与相应的抗体发生特异性反应。

3. 添加抗体：将辣根过氧化物酶（HRP）标记的抗体加入混合物中。

这些抗体可以识别和结合抗原，形成抗原-抗体复合物。

4. 加入凝集试剂：将聚丙烯酰胺凝胶加入试剂中，通过重力作用使试剂与复合物结合。

5. 观察凝集现象：在适当的条件下，观察试剂中是否出现可见的聚集现象。

如果存在抗原与抗体的特异性结合，就会出现明显的凝结或沉积。

肺支被动凝集法的优点是操作简单、快速，结果直观可见。

它适用于常见的肺部疾病如结核病、肺炎、支气管炎等的早期诊断和病原体感染监测。

然而，它也存在一些不足之处，如对特异性抗原的需求高、有时会出现假阳性或假阴性结果。

总之，肺支被动凝集法是一种基于抗原与抗体特异性反应的免疫学检测方法。

它通过观察抗原与抗体结合后形成的可见凝集现象来判断是否存在肺部疾病或呼吸道感染，并在临床诊断中起到重要作用。

1200例肺炎支原体抗体检测结果分析

1200例肺炎支原体抗体检测结果分析目的：探讨被动凝集法检测肺炎支原体（Mycopasma pneumonia，MP）的临床意义。

方法：收集我院2013年7月～12月检查的1200例疑似肺炎支原体感染患者血清标本，检测试剂选择选择珠海丽珠试剂，应用被动凝集法进行检测。

结果：1200例患者，共检出肺炎支原体抗体阳性785例，阳性检出率为65.4%，其中男性检出阳性458例，占男性比例为58.3%（458/750），女性检出阳性327例，占女性比例为72.7%（327/450），女性阳性检出率明显高于男性检出率（P ＜0.05）。

本组5个月～2岁患者380例，检查阳性282例，占74.2%，3～12岁643例，检查阳性402例，占62.5%，13～20岁共65例，检出阳性33例，占50.8%，20岁以上共112例，检查阳性68例，占58.0%。

结论：肺炎支原体抗体阳性率女性高于男性，5个月～2岁患者的检出率最高。

标签：肺炎支原体；被动凝集法；检测结果肺炎支原体（Mycopasma pneumonia，MP）是婴幼儿、青少年急性呼吸道感染的主要病原体之一[1-2]，常引起咽炎、气管炎、肺炎等，近年来，肺炎支原体感染率明显上升[3]。

肺炎支原体抗体检测是检查肺炎支原体感染的重要方法，被动凝集法检测是实验室常用的检验方法，为总结经验，本文收集我院2013年7月～12月检查的1200例疑似肺炎支原体感染患者血清标本，进行应用被动凝集法进行MP检测，现报道如下。

1资料和方法1.1标本来源：收集我院2013年7月～12月检查的1200例疑似肺炎支原体感染患者血清标本，其中男750例，女450例，年龄5个月～56岁，平均年龄32.6岁。

1.2方法：MP检测试剂选择选择珠海丽珠试剂，应用被动凝集法进行检测，检测步骤：①向“U”型微量板第1孔滴加100UI，向第2～8孔各滴加25UI血清稀释液；②向第1孔滴加25UI样品，从1至8（或更多）进行对倍稀释；③向第2孔加25UI未致敏粒子，第3～8孔各加25UI致敏粒子（试验同时设立阳性血清）；④混匀30S，室温暗置3h；⑤根据说明书判断观察结果。

两种方法检测肺炎支原体的对比分析

两种方法检测肺炎支原体的对比分析杨双赋;张莉辉【摘要】目的对比两种方法检测肺炎支原体的应用价值.方法随机选取所在医院2016年4-10月96例肺炎支原体感染患儿,对其临床就诊资料进行回顾性分析,所有患儿均分别接受酶联免疫检测(ELISA)和被动凝集法(PPA),对2种方法MP-IgM 阳性检出情况进行比较.结果 ELISA法MP-IgM阳性检出率为34.37%,PPA法MP-IgM阳性检出率为35.42%,2种检测方法阳性检出率无显著差异(P>0.05).结论两种方法检验肺炎支原体,均有一定临床使用价值,探索联合检验,可提高肺炎支原体感染早期检出率.【期刊名称】《中国继续医学教育》【年(卷),期】2017(009)004【总页数】2页(P83-84)【关键词】肺炎支原体;酶联免疫检测;被动凝集法【作者】杨双赋;张莉辉【作者单位】云南省红河州蒙自市人民医院检验科,云南蒙自 661199;云南省红河州蒙自市人民医院检验科,云南蒙自 661199【正文语种】中文【中图分类】G642;R173肺炎支原体感染是小儿常见感染性疾病，肺炎支原体属微生物范畴，但是其介于病毒和细菌间，且能够自行大量繁殖。

支原体能够依附在呼吸道上皮细胞中，从而损伤细胞膜，对患儿身心健康及生活质量均有明显影响。

现阶段，临床检验肺炎支原体的方法有很多，正确选择检验方法，能够明确患儿病情。

本研究选取96例小儿肺炎支原体感染患儿进行分析，对其检验情况做出总结。

1.1 一般资料选取96例肺炎支原体感染患儿，所选病例均满足肺炎支原体感染相关诊疗标准[1-2]，男性44例，女性52例，年龄2～10岁，平均年龄（5.56±1.41）岁，病程3～17 d，平均病程（10.47±2.36）d。

本组患儿家属对临床检验相关情况知情同意，且病例收集满足伦理委员会相关标准，排除合并器质性病变及具有明显诊疗风险者，同时排除：（1）多种因素致治疗中断者；（2）合并先天性疾病者；（3）合并明显诊疗风险者；（4）合并肝肾功能、心肺功能严重损伤者；（5）无陪护家属及法定监护人者。

血清抗MP-IgM检测法和被动凝集法对小儿肺炎支原体感染检验的准确性分析

血清抗MP-IgM检测法和被动凝集法对小儿肺炎支原体感染检验的准确性分析发布时间：2023-06-07T11:11:42.163Z 来源：《医师在线》2023年2月3期作者：张倩云[导读]血清抗MP-IgM检测法和被动凝集法对小儿肺炎支原体感染检验的准确性分析张倩云（常州市儿童医院；江苏常州213000）【摘要】目的：对比分析小儿肺炎患儿在支原体感染检验中使用血清抗MP-IgM检测法、被动凝集法的准确性。

方法：选择60例小儿肺炎患儿，存在支原体感染，选择病例的时间是2022年1-12月，随机数字表法分组后，每组患者例数相同，在观察组30例患儿的支原体感染检验中使用被动凝集法，而对照组患儿30例使用血清抗MP-IgM检测法，对比两组患儿的组间数据，主要是阳性率。

结果：在观察组患儿中，男女阳性率的差异性不大，无统计学意义P＞0.05；对比6岁以上患儿，3岁以内、3-6岁患儿的阳性率均明显更低，有统计学意义（P＜0.05）。

对比对照组患儿，观察组患儿的阳性率明显更高，有统计学意义，P＜0.05。

结论：小儿肺炎患儿在支原体感染检验中使用血清抗MP-IgM检测法、被动凝集法的准确性不同，后者明显更高，临床应用价值明显更高，患儿可以及时获得对症治疗，避免对病情治疗造成延误。

【关键词】血清抗MP-IgM检测法；被动凝集法；小儿肺炎；支原体感染检验；准确性临床常见小儿肺炎患儿，为了有效提升患儿的治疗效果，应对如何检验患儿的支原体感染进行探讨。

目前来说，临床在支原体感染检验中使用血清抗MP-IgM检测法、被动凝集法[1]。

本组实验选择60例患儿，对比分析小儿肺炎患儿在支原体感染检验中使用血清抗MP-IgM检测法、被动凝集法的准确性。

1 资料和方法1.1资料从我院选择60例小儿肺炎患儿进行数据研究，选择病例的时间是2022年1-12月，随机数字表法分组后，n=30，在观察组患儿中，男女是16/14，年龄11个月到8岁，均（5.2±1.4）岁，其中3岁以内、3-6岁、6岁以上患儿的例数是14例、12例、4例，在对照组患儿中，男女是15/15，年龄10个月到7岁，均（5.1±1.3）岁，其中3岁以内、3-6岁、6岁以上患儿的例数是13例、11例、6例。