内生解淀粉芽胞杆菌β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因(bglS)的克隆与表达及酶学特性分析
毕赤酵母产β-1，3-1，4-葡聚糖酶发酵优化及酶学性质研究
毕赤酵母产β-1，3-1，4-葡聚糖酶发酵优化及酶学性质研究陈龙军;陈亚兰;陈济琛;林新坚【期刊名称】《安徽农学通报》【年(卷),期】2012(018)021【摘要】对毕赤酵母表达β-1，3—1，4-葡聚糖酶条件进行优化，在摇瓶水平上研究了温度、pH、甲醇流加量、诱导时间，油酸等因素对重组葡聚糖酶的影响；得优化条件为：最适温度30℃、pH6．0，最佳甲醇诱导浓度为0．5％，最佳诱导时间为84h，酶活力达27．4U／mL，比初始酶活力提高了1．9倍。
酶反应的最适pH为6．0，最适温度为50℃。
在pH3．5—8．0的范围内和温度55℃以下保存时具有较好的稳定性；其中，CaCl2对重组酶的激活效果显著，使酶活力提高达92％。
【总页数】4页(P63-66)【作者】陈龙军;陈亚兰;陈济琛;林新坚【作者单位】福建省农业科学院土壤肥料研究所,福建福州350000;厦门大学化学化工学院,福建厦门361005;福建省农业科学院土壤肥料研究所,福建福州350000;福建省农业科学院土壤肥料研究所,福建福州350000【正文语种】中文【中图分类】S18【相关文献】1.Bacillus subtilis LC-9产β-1,3-1,4-葡聚糖酶的酶学性质与催化特性研究 [J], 刘娟娟;吴斌;何冰芳2.重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶的纯化及部分酶学性质研究 [J], 谢焱;顾国贤;李崎3.碎囊毛霉产β-1,3-1,4-葡聚糖酶的分离纯化及其酶学性质 [J], 丁叶梅;贠建民;魏龙;陈芳;艾对元;张紊玮4.枯草杆菌β—1,3—1,4—葡聚糖酶基本酶学性质研究 [J], 黄兴奇;陈永青5.产琥珀酸丝状杆菌1,3-1,4-β-葡聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达 [J], 杨玉霞;张慧玲;汪艳;陈勇因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
《2024年生防萎缩芽孢杆菌β-l,3-葡聚糖酶拮抗功能的研究》范文
《生防萎缩芽孢杆菌β-l,3-葡聚糖酶拮抗功能的研究》篇一摘要本文旨在探讨生防萎缩芽孢杆菌所产β-l,3-葡聚糖酶的拮抗功能。
通过对该酶的生物特性、作用机制及与病原菌的互作关系进行深入研究，揭示其在生物防治中的潜在应用价值。
本研究不仅为农业病害的生物防治提供了新的思路，也为微生物酶在生态修复和环境治理中的广泛应用奠定了理论基础。
一、引言生防萎缩芽孢杆菌作为一种常见的生防微生物，在农业生产中具有广泛的应用前景。
其中，β-l,3-葡聚糖酶作为该菌的重要代谢产物，对于病原菌的抑制作用引起了研究者的极大兴趣。
本文将重点探讨该酶的拮抗功能及其作用机制，以期为农业病害的生物防治提供新的策略。
二、材料与方法1. 材料准备（1）菌种来源：生防萎缩芽孢杆菌及其相关病原菌；（2）培养基：选用适合菌种生长的各类培养基；（3）酶提取与纯化：按照标准操作流程提取纯化β-l,3-葡聚糖酶。
2. 方法（1）酶活性测定：采用适当的方法测定β-l,3-葡聚糖酶的活性；（2）互作实验：通过共培养实验、酶处理实验等方法，观察生防萎缩芽孢杆菌与病原菌的互作关系；（3）基因表达分析：利用分子生物学技术，分析β-l,3-葡聚糖酶相关基因的表达情况；（4）数据分析：采用统计学方法对实验数据进行处理和分析。
三、结果与分析1. 酶的生物特性及活性分析本研究提取的β-l,3-葡聚糖酶具有较高的活性，能够在较低的浓度下显著抑制病原菌的生长。
通过测定酶活性，发现其活性随温度和pH值的变化呈现一定的规律性。
2. 拮抗功能及作用机制（1）生防萎缩芽孢杆菌与病原菌的互作：共培养实验表明，生防萎缩芽孢杆菌能够通过产生β-l,3-葡聚糖酶抑制病原菌的生长和繁殖。
此外，该酶还能破坏病原菌的细胞壁，导致其失去生理活性。
（2）酶处理实验：通过将病原菌暴露于不同浓度的β-l,3-葡聚糖酶中，发现酶的浓度越高，对病原菌的抑制作用越明显。
进一步分析表明，该酶主要通过降解病原菌细胞壁中的葡聚糖成分，破坏其结构，从而达到抑制生长的目的。
菠萝泛菌β-1,4-内切葡聚糖酶基因克隆、表达与酶活性分析
菠萝泛菌β-1,4-内切葡聚糖酶基因克隆、表达与酶活性分析侯进慧;张翔;乔高翔
【期刊名称】《食品科学》
【年(卷),期】2016(037)023
【摘要】利用分子克隆的方法,对一种源于菠萝泛菌的内切葡聚糖酶(即β-1,4-内切葡聚糖酶)基因进行克隆、原核表达,利用Ni-NTA吸附柱对表达的重组内切葡聚糖酶进行纯化,分析重组酶的活性.研究结果显示,此重组内切葡聚糖酶含1个1 002 bp的开放阅读框,编码334个氨基酸序列,重组酶在大肠杆菌细胞中的表达量占可溶性蛋白的50％以上,经过纯化获得了纯度高于95％的内切葡聚糖酶蛋白,酶活力可以达到2 245 U/mL.
【总页数】5页(P211-215)
【作者】侯进慧;张翔;乔高翔
【作者单位】徐州工程学院食品工程学院,江苏徐州 221111;徐州工程学院食品工程学院,江苏徐州 221111;徐州工程学院食品工程学院,江苏徐州 221111
【正文语种】中文
【中图分类】Q939.9
【相关文献】
1.β-1,3-1,4-葡聚糖酶高产菌诱变选育及基因克隆表达 [J], 陈计;高鹏;陆兆新;吕凤霞;张充;赵海珍;别小妹
2.纤维素降解菌N2-10菌株β-1,4-内切葡聚糖酶基因的克隆及表达 [J], 狄聪颖;
郭晓军;刘宏丽;郭威;朱宝成
3.假单胞菌褐藻胶裂合酶活性片段的基因克隆及重组表达条件的优化 [J], 王怀玉;古静燕;李天东;韩文君;罗英;阮期平
4.海栖热袍菌内切葡聚糖酶Cel12B与木聚糖酶XynA CBD结构域融合基因的构建、表达及融合酶性质分析 [J], 李相前;邵蔚蓝
5.冰岛硫化叶菌β-1,4-内切葡聚糖酶的同源表达、纯化与性质 [J], 朱泾;赵述淼;彭楠;梁运祥
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解淀粉芽孢杆菌IMAUB1034抗真菌活性物质的初步研究
（ ｅ ａ ｏ ａ ｒ ｆ ｎ ｕ ｔ ａ Ｆ ｒ ｎａｉｎ ｉ ｏ ｉｌｇ ， ｎｓ ｙ ｏ ｄ ｃ ｔ ｎ Ｃ ｌ ｇ ｆ ｉｔ ｈ ｏｏ ｙ Ｋ ｙＬ ｂ ｒｔ ｙ ｄ ｓ ｉ ｅｍｅ ｔ ｏ ｃ ｂｏｏ ｙ Ｍｉｉ ｒ ｆ ｕ ａ ｏ ， ｏｌ ｅ ｏｅ ｎ ｌｇ ｏ ｏＩ ｒｌ ｔ Ｍ ｒ ｔ Ｅ ｉ ｅ ｏＢ ｃ
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纤维微菌β-1,3-葡聚糖酶的克隆表达及对灵芝细胞壁的水解作用
纤维微菌β-1,3-葡聚糖酶的克隆表达及对灵芝细胞壁的水解作用杨梦莲;单逸蓝;沈微;朱新文;杨海泉;陈献忠;陈磊;夏媛媛【期刊名称】《食品与发酵工业》【年(卷),期】2023(49)1【摘要】该文旨在研究一种酶解灵芝(Ganoderma lucidum)菌丝体从而提高其胞内蛋白提取效率的方法。
通过PCR方法扩增获得纤维微菌(Cellulosimicrobium sp.)CICIM6906的β-1,3-葡聚糖酶编码基因,该基因命名为bgl6906并与表达载体连接,构建重组质粒pET28a-bgl6906,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),获得重组大肠杆菌BL21(DE3)/pET28a-bgl6906。
重组菌在TB培养基中进行诱导表达,表达产物在自身信号肽引导下大部分分泌到细胞外。
以茯苓多糖为底物时,重组酶BGL6906纯酶比酶活力为567.8 U/mg,最适pH为5.5,最适温度为50℃。
重组菌在15 L发酵罐中发酵72 h胞外酶活力达到67 U/mL。
重组酶BGL6906与果胶酶交替水解灵芝菌丝体培养物,可以有效水解细胞壁,获得部分原生质体。
进一步辅助短时超声波破碎可以大幅度提高灵芝胞内产物的释放。
【总页数】9页(P10-18)【作者】杨梦莲;单逸蓝;沈微;朱新文;杨海泉;陈献忠;陈磊;夏媛媛【作者单位】江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室;山东省东阿县农业农村局【正文语种】中文【中图分类】R28【相关文献】1.小麦根腐离蠕孢菌诱导小麦β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆及其表达2.β-1,3-1,4-葡聚糖酶高产菌诱变选育及基因克隆表达3.纤维素降解菌N2-10菌株β-1,4-内切葡聚糖酶基因的克隆及表达4.烟草β—1,3—葡聚糖酶cDNA克隆,大肠杆菌表达及植物表达载体的…5.青花菜β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆、表达分析及其植物表达载体的构建因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
解淀粉芽孢杆菌β-1
０８ｂ ９ ｌ３ ， 葡聚糖 酶基 因（ｇ ， ．ｋ 的 一 ， ｌ４一 ｂｌ 构建 了重 组表达质 粒 ｐ ６ ， Ａ） Ｑ一 ｇ 通过 电转 化的方法将 其转化入解 淀粉芽孢 杆 菌
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技
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解 淀 粉 芽孢 杆 菌 ｐ一１３—１４一葡 聚 糖酶 的高效 表 达 ， ，
陈 玉娟 ， 微 ， 沈 陈献 忠 ， 正祥 ‘ 王
（ 江南大学 生物 工程 学院生物能源与生物资源研究 中心 ， 江苏 无锡 ２４ ２ ） １ １２
摘要 ： 目的 ： 克隆解淀粉芽孢杆菌 Ｂ １３ ， 葡 聚糖 酶基 因（ｇ 使其在解 淀粉芽孢杆 菌 ＣＣＭ Ｂ０ １ 一 ，一ｌ ４一 ） ＩＩ ４８ 中高效表达 ， 并
（ ｅｔ ｒＢｏｅｏｒｅａｄＢｏｎｒｙ Ｓ ｈｏ ｏ ｉｅｈ ｏ ｇ ， ｉｎｎｎＵ ｉ ｒｔ，Ｗｕ ｉ １ １２ Ｃ ｉａ Ｃ ｎｅ ｆ ｉｒｓｕｅ ｎ ｉ ｅｇ ， ｃｏｌ ｆＢｏ ｃ ｎｌ ｙ Ｊ ｇ ａ ｎｖ ｓｙ ｒｏ ｅ ｔ ｏ ａ ｅｉ ｘ ２ ４ ２ ， ｈｎ ）
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芽孢杆菌属来源1,3-1,4-β-葡聚糖酶的热稳定性研究
芽孢杆菌属来源1,3-1,4-β-葡聚糖酶的热稳定性研究1,3-1,4-β-葡聚糖酶,以下简称β-葡聚糖酶,是一种重要的工业用酶。
β-葡聚糖酶通过专一性切割1,4-β-糖苷键可以有效降解禾本科植物细胞壁中的高分子量β-葡聚糖。
在啤酒酿造行业中,外源添加β-葡聚糖酶可以有效加快麦汁过滤速度,提高麦汁浸出率和成品啤酒的非生物稳定性。
在饲料行业中,添加外源β-葡聚糖酶可以消除β-葡聚糖的“抗营养因子”效应从而提高禽畜对麦类饲料的吸收效率,同时维护禽畜的肠道健康。
然而目前β-葡聚糖酶依然存在热稳定性差、催化效率低等问题,其在麦芽制备、麦汁糖化和颗粒饲料制备过程中完全失活。
因此,提高β-葡聚糖酶的热稳定性具有重要工业应用价值。
本论文通过表面赖氨酸改造、二硫键引入和突变热点区域分析法等理性/半理性手段成功提高了芽孢杆菌来源β-葡聚糖酶的热稳定性并在枯草芽孢杆菌WB600中实现表达,最后将高热稳定性β-葡聚糖酶在麦汁协定糖化过程中进行应用。
主要结论如下:(1)对芽孢杆菌来源β-葡聚糖酶表面赖氨酸在其热稳定性中作用进行分析。
首先采用亚硝酸对β-葡聚糖酶表面赖氨酸进行化学修饰,发现赖氨酸ε-氨基基团的修饰有效提高了酶热稳定性。
和野生酶相比,修饰酶的T50值提高了2.5℃,在50℃和60℃的半衰期分别提高了56%和76.8%。
基于化学修饰研究,将特基拉芽孢杆菌来源β-葡聚糖酶表面赖氨酸选择性突变为丝氨酸。
以蛋白质总能量值、氢键数量和比活力值为标准对热稳定性有利突变进行筛选,发现突变酶K20S、K117S和K165S的热稳定性优于野生酶。
经过组合突变,组合突变酶K20S/K117S/K165S的最适温度和T50值和野生酶相比分别提高了15℃和14℃,而其在50℃和60℃的半衰期分别延长了170.9%和81.5%。
与此同时,组合突变酶的催化性质优于野生酶。
蛋白质结构分析发现在组合突变酶中形成了更多有序二级结构及更多氢键,这可能是赖氨酸突变后β-葡聚糖酶热稳定性提高的原因。
解淀粉芽孢杆菌中性植酸酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达
钙 ， 放 出肌 醇 、 机 磷 和 被植 酸螯 合 的 一些 微 量 元 素 ， 加 机 体 的正 常 代 谢从 而提 高 饲 料 的 营养 价 释 无 参 值 Ｊ 目前 ， 。 真菌来 源 的酸 性植 酸 酶 已经在 饲 料 中广 泛应 用 ， 催化 反应 的有效 ｐ 酶 Ｈ值 在 ４ ５～６ ０之 ． ． 间， 但这 种酶不 适合 消化 道呈 中性 的鲤鱼科 鱼 类 ， 限制 了酸 性 植 酸酶 的应 用范 围 。研 究 表 明 ： 源 来
第 ３ 卷 第 ２期 １
２１ ０ ０年 ４月
河 南 科 技 大 学 学 报 ：自 然 科 学 版
Ｊ ｕ ｎ ｌｏ ｎ ｎ Ｕａｕ ａ ｃｅ ｃ ｏ ｒ ａ ｆＨｅ ａ ｉｅ ｓ ｙ ｏ ｃｅ ｃ ｎ ｅ ｈ ｏｏ ｙ： ｔ ｒ ｌＳ ｉｎ ｅ ｔ
宿 主细胞 Ｇ １ ５实现 了分 泌性 表达 ， Ｓ１ 为利 用异 源表 达系统 进 行 中性 植 酸酶 的大 规模 发 酵生 产 进行 了有
益 的探索 。
１ 材 料 与 方 法
１ １ 材 料 ． 一
（） １ 质粒 与菌株 。大肠杆 菌 （ ｓ ｅ ｃ ｉ ｃｌ Ｄ ５ 由本 实 验 室保 存 ， 赤 酵母 Ｇ １５和 表 达载 体 Ｅｃ ｎ ｈａ ｏｉ Ｈ ａ ｈ ） 毕 Ｓ１ ｐ Ｉ９ ＰＣ Ｋ为 Ｉｖｔ ｇｎ公 司产 品 。解 淀 粉芽孢 杆菌 Ｂ １ ｎ ｉｏｅ ｒ Ａ １由本 实验室 保存 。
Ｖｏ ． Ｎｏ． １ ３１ ２
Ａｐ ． ｒ ２０１ ０
文章编 号 ：６ ２— ８ １ ２ １ ）２— ０ ９— ４ １７ ６ ７ （０ ０ ０ ０ ６ ０
解 淀 粉 芽 孢杆 菌 中性植 酸酶 基 因 的 克 隆及 其在 毕 赤酵 母 中的表 达
解淀粉芽孢杆菌BamHI甲基转移酶基因克隆、功能鉴定与序列分析
解淀粉芽孢杆菌BamHI甲基转移酶基因克隆、功能鉴定与序列分析刘洋;沈微;石贵阳;王正祥【期刊名称】《生物技术通报》【年(卷),期】2009(000)011【摘要】从解淀粉芽孢杆菌Baillus amyloliquefaciens CICIM B2125中克隆了BamHI甲基转移酶基因(bamHIM),并在大肠杆菌JM109中得到了成功表达.该基因含有1 271 bp的开放阅读框(ORF),编码423个氨基酸,成熟蛋白分子量为49 kD.该基因在自身启动子引导下,表达了具有活性的BamHI甲基转移酶(M.BamHI).该酶可以将BamHI位点的碱基甲基化.氨基酸序列分析表明该酶存在有NADB_Rossmann结构域.%A gene encoding for BamHI methyltransferase(bamHIM )was cloned from Baillus amyloliquefaciens CICIM B2125. The bamHIM was expressed under its own promoter in E. coli JM109. The gene contained an opening reading frame ( ORF) of 1 271 bp, which coded for 423 amino acid residues. The molecular weight of mature protein was 49 kD. The BamHl site could be methylased by the enzyme M.BamHI. The amino acid sequence analysis revealed that the enzyme contained a domain of Rossmann-fold NAD(P) ( + ) -binding proteins.【总页数】4页(P65-68)【作者】刘洋;沈微;石贵阳;王正祥【作者单位】江南大学生物工程学院,工业生物技术教育部重点实验室,无锡,214122;江南大学生物工程学院生物资源与生物能源研究中心,无锡,214122;江南大学生物工程学院,工业生物技术教育部重点实验室,无锡,214122;江南大学生物工程学院生物资源与生物能源研究中心,无锡,214122;江南大学生物工程学院,工业生物技术教育部重点实验室,无锡,214122;江南大学生物工程学院生物资源与生物能源研究中心,无锡,214122;江南大学生物工程学院,工业生物技术教育部重点实验室,无锡,214122;江南大学生物工程学院生物资源与生物能源研究中心,无锡,214122【正文语种】中文【中图分类】Q5【相关文献】1.天然无咖啡碱茶叶N-甲基转移酶基因克隆与序列分析 [J], 陈丽萍;陈忠正;李斌;周英;黎秋华;杨飞芸2.地衣芽孢杆菌α-淀粉酶基因的克隆和及其启动子功能鉴定 [J], 牛丹丹;徐敏;马骏双;王正祥3.地衣芽孢杆菌α-淀粉酶基因的克隆和及其启动子功能鉴定 [J], 牛丹丹;徐敏;马骏双;王正祥4.解淀粉芽孢杆菌淀粉酶催化活力改良及其在枯草芽孢杆菌中的高效表达 [J], 邱锦; 黄火清; 姚斌; 罗会颖5.一株乳源蜡样芽孢杆菌肠毒素基因克隆与序列分析 [J], 陈玉娟;赵瑶;马鲜平;高丽旭;姚婷;刘倩如;谢远兵;易华山因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
短小芽孢杆菌β-1,4-葡聚糖内切酶基因的克隆及在大肠杆菌中的分泌表达
短小芽孢杆菌β-1,4-葡聚糖内切酶基因的克隆及在大肠杆菌中的分泌表达郭成栓;欧阳蒲月;崔堂兵;郭勇【期刊名称】《化学与生物工程》【年(卷),期】2010(27)12【摘要】从一株产碱性纤维素酶的短小芽孢杆菌H12中克隆了编码β-1,4-葡聚糖内切酶的基因,对其基因序列及其酶的结构域进行了分析预测,同时将该酶的基因构建于大肠杆菌表达载体pET20b中,获得重组表达载体pET20b-EglA,将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)菌株中进行表达.结果表明,该基因大小为1980 bp,共编码659个氨基酸;对β-1,4-葡聚糖内切酶结构域分析表明,该酶由两个不连续的结构域组成,其一为N-端催化结构域,由糖基水解酶家族9组成,其二为C-端底物结合结构域,由碳水化合物绑定结构域家族3组成;平板实验结果表明,β-1,4-葡聚糖内切酶基因在重组大肠杆菌中得到了良好的分泌表达;SDS-PAGE电泳图谱表明该酶的分子大小约为73 kDa.【总页数】4页(P53-55,68)【作者】郭成栓;欧阳蒲月;崔堂兵;郭勇【作者单位】广东食品药品职业学院中药和生物系,广东,广州,510520;广东食品药品职业学院中药和生物系,广东,广州,510520;华南理工大学生物科学与工程学院,广东,广州,510640;华南理工大学生物科学与工程学院,广东,广州,510640【正文语种】中文【中图分类】Q78【相关文献】1.短小芽孢杆菌β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因克隆、表达及其酶特性研究 [J], 吕文平;许梓荣;孙建义;李卫芬;杜文理2.β-1,4-葡聚糖内切酶基因在大肠杆菌中分泌表达 [J], 李湘玉;刘秦华;李君风;白晰;T.Desta;王思然;董志浩;白云峰;邵涛3.短小芽孢杆菌C-9葡聚糖内切酶基因的克隆及其在酿酒酵母中的表达 [J], 杨金莹;吕建仁;党宏月4.β-1,4-葡聚糖内切酶egl3基因在乳酸乳球菌中分泌表达的研究 [J], 刘秦华;邵涛;董志浩;李湘玉5.β-1,4-葡聚糖内切酶egl3基因在乳酸乳球菌中分泌表达的研究 [J], 刘秦华邵涛董志浩李湘玉;因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
解淀粉芽孢杆菌β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶基因的克隆表达及其酶学表征
解淀粉芽孢杆菌β-N -乙酰氨基葡萄糖苷酶基因的克隆表达及其酶学表征陈宝莉，秦 臻，赵黎明*（华东理工大学生物工程学院，发酵工业分离提取技术研发中心，生物反应器工程国家重点实验室，上海 200237）摘 要：从解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens YX-01）中克隆得到一个新型β-N -乙酰氨基葡萄糖苷酶基因（BaNagase ），并成功在大肠杆菌中异源表达。
BaNagase 编码616 个氨基酸，与B. subtilis 来源的β-N -乙酰氨基葡萄糖苷酶（AIY91451.1）氨基酸序列相似性最高，为76.97%。
通过对比分析，BaNagase 属于糖苷水解酶3家族。
纯化获得的BaNagase 比活力为16.42 U /mg ，最适温度65 ℃，最适pH 6.0，且在低于55 ℃条件下能保持高于70%的酶活力。
BaNagase 展现出高的热稳定性和严格的底物特异性，为其高效制备N -乙酰氨基葡萄糖提供了理论支持。
关键词：β-N -乙酰氨基葡萄糖苷酶；解淀粉芽孢杆菌；克隆；酶学性质；糖苷水解酶3家族Gene Cloning, Expression and Characterization of β-N -Acetylglucosaminidase from Bacillus amyloliquefaciensCHEN Baoli, QIN Zhen, ZHAO Liming *(State Key Laboratory of Bioreactor Engineering, R&D Center of Separation and Extraction Technology in Fermentation Industry,School of Biotechnology, East China University of Science and Technology, Shanghai 200237, China)Abstract: In this study, a novel β-N -acetylglucosaminidase gene was cloned from Bacillus amyloliquefaciens YX-01 and successfully expressed in Escherichia coli BL21. The recombinant protein (defined as BaNagase) was purified by Ni-IDA affinity chromatography and analyzed. The results showed that it encoded 616 amino acids, with the highest similarity (76.97%) to the sequence of β-N -acetylglucosidase (AIY91451.1) from B. subtilis . According to the phylogenetic analysis and multiple sequence alignments, BaNagase belonged to glycoside hydrolase (GH) family 3. The recombinant BaNagase showed specific activity of 16.42 U /mg toward the substrate pNP-GlcNAc. Its optimal pH value was 6.0 and the optimal reaction temperature was 65 ℃. BaNagase showed good stability below 55 ℃ at which more than 70% of initial activity was still retained. BaNagase exhibited strong thermostability and strict substrate specificity. This study provides a theoretical basis for efficient preparation of N -acetylglucosamine.Keywords: β-N -acetylglucosaminidase; Bacillus amyloliquefaciens ; cloning; characterization; glycoside hydrolase family 3DOI:10.7506/spkx1002-6630-20190221-132中图分类号：Q814 文献标志码：A 文章编号：1002-6630（2020）08-0123-07引文格式：陈宝莉, 秦臻, 赵黎明. 解淀粉芽孢杆菌β-N -乙酰氨基葡萄糖苷酶基因的克隆表达及其酶学表征[J]. 食品科学, 2020, 41(8): 123-129. DOI:10.7506/spkx1002-6630-20190221-132. CHEN Baoli, QIN Zhen, ZHAO Liming. Gene cloning, expression and characterization of β-N -acetylglucosaminidase from Bacillus amyloliquefaciens [J]. Food Science, 2020, 41(8): 123-129. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/spkx1002-6630-20190221-132. 收稿日期：2019-02-21基金项目：上海市教育委员会和上海市教育发展基金会“曙光计划”项目（15SG28）；高等学校学科创新引智计划项目（B18022）第一作者简介：陈宝莉（1993—）（ORCID: 0000-0001-9311-3976），女，硕士研究生，研究方向为食品药品与材料工程。
解淀粉芽孢杆菌中脂肽的生物合成、抑菌机理及应用的研究进展
罗晓娇，孙静，陆颖健. 解淀粉芽孢杆菌中脂肽的生物合成、抑菌机理及应用的研究进展[J]. 食品工业科技，2022，43（19）：462−470. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2021100259LUO Xiaojiao, SUN Jing, LU Yingjian. Research Progress in the Biosynthesis, Antimicrobial Mechanism, and Application of Lipopeptides in Bacillus amyloliquefaciens [J]. Science and Technology of Food Industry, 2022, 43(19): 462−470. (in Chinese with English abstract). doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2021100259· 专题综述 ·解淀粉芽孢杆菌中脂肽的生物合成、抑菌机理及应用的研究进展罗晓娇，孙 静，陆颖健*（南京财经大学食品科学与工程学院，江苏南京 210023）摘 要：解淀粉芽孢杆菌常作为有益菌广泛应用于食品的生物防治，其中主要的抗菌物质为脂肽类。
这些抗菌脂肽具有抗菌、抗肿瘤、抗病毒等生物活性，同时具有安全、广谱、高效、无毒、在体内易分解等优点。
因此，解淀粉芽孢杆菌及其脂肽类代谢产物可广泛应用于农作物的生物防治、瓜果蔬菜的保鲜防腐以及采后的微生物防治等，具有巨大的开发应用前景。
本文主要从解淀粉芽孢杆菌中脂肽类物质的类型、生物合成、抑菌机制及其应用前景等方面进行论述。
关键词：解淀粉芽孢杆菌，脂肽，生物合成，抑菌机理本文网刊:中图分类号：TS201.3 文献标识码：A 文章编号：1002−0306（2022）19−0462−09DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2021100259Research Progress in the Biosynthesis, Antimicrobial Mechanism, andApplication of Lipopeptides in Bacillus amyloliquefaciensLUO Xiaojiao ，SUN Jing ，LU Yingjian *（College of Food Science and Engineering, Nanjing University of Finance and Economics, Nanjing 210023, China ）Abstract ：Bacillus amyloliquefaciens (B. amyloliquefaciens ) is widely used as beneficial bacteria for biological control, and the main antimicrobial substances are lipopeptides. These lipopeptides have antimicrobial, anti-tumor, antiviral activities and other biological activities, and they are safe, broad-spectrum, efficient, non-toxic, and easily decomposed in the body.Therefore, B. amyloliquefaciens and its lipopeptide metabolites can be widely used in the biological control of crops,freshness and preservation of fruits and vegetables, as well as post-harvest microbial control, which have great prospects for development and application. This paper focuses on the types and biosynthesis of lipopeptides in B. amyloliquefaciens , the mechanism of microbial inhibition and their application prospects.Key words ：Bacillus amyloliquefaciens ；lipopeptides ；biosynthesis ；antimicrobial mechanism农作物在生长过程中容易受到多种病原菌的侵害，导致其产品品质和产量下降。
《生防萎缩芽孢杆菌β-l,3-葡聚糖酶拮抗功能的研究》范文
《生防萎缩芽孢杆菌β-l,3-葡聚糖酶拮抗功能的研究》篇一一、引言随着现代农业的快速发展，植物病害问题日益突出，对农作物的产量和品质造成了严重影响。
生防萎缩芽孢杆菌作为一种具有重要生物防治作用的微生物，其产生的β-l,3-葡聚糖酶在植物病害防控中发挥了关键作用。
本文旨在研究生防萎缩芽孢杆菌β-l,3-葡聚糖酶的拮抗功能，探讨其在植物病害防治中的应用价值和作用机制。
二、材料与方法1. 材料（1）菌种：生防萎缩芽孢杆菌及其他相关菌种。
（2）酶：β-l,3-葡聚糖酶。
（3）植物材料：不同种类的植物样品。
2. 方法（1）酶的提取与纯化：采用适当的方法提取生防萎缩芽孢杆菌中的β-l,3-葡聚糖酶，并进行纯化。
（2）拮抗功能实验：通过体外实验和室内盆栽实验，研究β-l,3-葡聚糖酶对植物病原菌的拮抗作用。
（3）作用机制研究：通过分子生物学技术，研究β-l,3-葡聚糖酶的作用机制。
三、实验结果与分析1. 酶的提取与纯化通过适当的提取和纯化方法，成功获得了纯度较高的β-l,3-葡聚糖酶。
2. 拮抗功能实验（1）体外实验：在体外实验中，我们发现β-l,3-葡聚糖酶对多种植物病原菌具有显著的拮抗作用，能够抑制病原菌的生长和繁殖。
（2）室内盆栽实验：在室内盆栽实验中，我们发现施加β-l,3-葡聚糖酶的植物样品对植物病害的抗性明显增强，病斑数量和面积明显减少。
3. 作用机制研究通过分子生物学技术，我们发现β-l,3-葡聚糖酶能够破坏植物病原菌的细胞壁，从而抑制其生长和繁殖。
此外，β-l,3-葡聚糖酶还能够诱导植物产生抗病性，提高植物的自身免疫力。
四、讨论与结论本研究表明，生防萎缩芽孢杆菌产生的β-l,3-葡聚糖酶具有显著的拮抗功能，能够有效地抑制植物病原菌的生长和繁殖，提高植物的抗病性。
这一发现为植物病害的生物防治提供了新的思路和方法。
进一步的研究可以探讨如何提高β-l,3-葡聚糖酶的产量和纯度，以及如何将其应用于实际生产中。
β-1,3-1,4-葡聚糖酶研究进展
β-1,3-1,4-葡聚糖酶研究进展
夏许寒;朱成林;李诚
【期刊名称】《食品科学》
【年(卷),期】2016(037)019
【摘要】β-1,3-1,4-葡聚糖酶（EC 3.2.1.73）是一类内切型糖苷水解酶，广泛存
在于各类微生物及植物中，对谷物β-1,3-1,4-葡聚糖的水解具有重要作用。
在食品工业及饲料工业有着广阔的应用前景。
目前已有GH16、GH17及GH263个糖苷水解酶家族的β-1,3-1,4-葡聚糖酶结构得到解析。
本文针对β-1,3-1,4-葡聚糖酶的来源、性质、结构、功能及应用的国内外研究现状进行综述。
【总页数】7页(P289-295)
【作者】夏许寒;朱成林;李诚
【作者单位】四川农业大学食品学院，四川雅安625014;四川农业大学食品学院，四川雅安 625014;四川农业大学食品学院，四川雅安 625014
【正文语种】中文
【中图分类】Q814.4
【相关文献】
1.1,3-1,4-β-葡聚糖酶基因克隆表达及其耐热性研究进展 [J], 孙军涛;王洪新;吕文平;马朝阳;戴易兴
2.β-1,3-1,4葡聚糖酶基因克隆表达及其抗菌活性与机理研究进展 [J], 文凤云;林
健荣;廖富蘋;董淑丽;钟杨生
3.泡盛曲霉β-1,3-1,4-葡聚糖酶的纯化、性质及其用于制备β-葡寡糖 [J], 陈子贤;
刘学强;张彬;闫巧娟;江正强
4.黄曲霉产胞外β-1,3-1,4-葡聚糖酶的发酵条件优化 [J], 刘璐;陈洲;陈瑶瑶;刘杨柳;李思霆;贾英民;
5.细菌产β-1,3-1,4-葡聚糖酶的结构、功能及应用的研究进展 [J], 王圆;张朝晖;王蓓;朱海东;芦国营
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几丁质酶基因和β-1,3-葡聚糖酶基因克隆微生物表达和抑菌效果研究
几丁质酶基因和β-1,3-葡聚糖酶基因克隆微生物表达和抑菌效果研究刘玲玲;张金文;王旺田;陈正华【期刊名称】《甘肃农业大学学报》【年(卷),期】2004(039)003【摘要】采用PCR扩增的方法,扩增获得几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶的基因,分别将其基因克隆到原核表达载体pET28a(+)上,构建了原核表达载体pETChi和pETGlu.经IPTG诱导后几丁质酶基因和β-1,3-葡聚糖酶基因在大肠杆菌BL21中得到高效表达.通过对连孢(Alternaria alternate)的抑菌实验表明,这两基因的表达产物对此真菌有较强的抵抗能力.【总页数】5页(P261-265)【作者】刘玲玲;张金文;王旺田;陈正华【作者单位】甘肃省作物改良与种质创新重点实验室,甘肃农业大学,甘肃,兰州,730070;甘肃省作物改良与种质创新重点实验室,甘肃农业大学,甘肃,兰州,730070;中国科学院西北高原生物研究所,青海,西宁,810080;甘肃亚盛集团博士后科研工作站,甘肃,兰州,730035;甘肃省作物改良与种质创新重点实验室,甘肃农业大学,甘肃,兰州,730070;甘肃亚盛集团博士后科研工作站,甘肃,兰州,730035【正文语种】中文【中图分类】Q786【相关文献】1.短小芽孢杆菌β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因克隆、表达及其酶特性研究 [J], 吕文平;许梓荣;孙建义;李卫芬;杜文理2.1,3-1,4-β-葡聚糖酶基因克隆表达及其耐热性研究进展 [J], 孙军涛;王洪新;吕文平;马朝阳;戴易兴3.β-1，3-葡聚糖酶基因克隆、表达及抗菌活性的研究 [J], 李镇刚;赵爱春;王茜龄;金筱耘;李军;余茂德4.β-1,3-1,4葡聚糖酶基因克隆表达及其抗菌活性与机理研究进展 [J], 文凤云;林健荣;廖富蘋;董淑丽;钟杨生5.表达β-1,3-葡聚糖酶及几丁质酶基因的转基因烟草及其抗真菌病的研究 [J], 蓝海燕;张丽华;王兰岚;陈正华;田颖川;陈正华;王长海因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
内生解淀粉芽孢杆菌TB2内切β-1,4-葡聚糖酶基因的克隆和原核表达分析
内生解淀粉芽孢杆菌TB2内切β-1,4-葡聚糖酶基因的克隆和原核表达分析范晓静;邱思鑫;胡方平【期刊名称】《热带作物学报》【年(卷),期】2008(029)004【摘要】以内生解淀粉芽孢杆菌TB2菌株基因组为模板,克隆了该菌的β-1,4-内切葡聚糖酶基因的ORF.测序结果表明该ORF全长1 500 bp,编码499个氨基酸,分子量为55．07ku,等电点为7．83.Blast同源性分析结果表明,该序列与GenBank 登录的1株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis M28332)纤维素酶核苷酸序列的同源性最高(98％),其氨基酸同源性也达98％,已被GenBank收录(Accession number).用BamH I和Xho I双酶切目的片段和表达载体pET-29a(+)后相连接,构建重组表达载体pET-glu,并导入BL21细菌中表达.酶学特性表明:SDS-PAGE电泳在59 ku 左右有融合蛋白带,该酶的最适反应温度为50℃,最适反应pH为6．4,为中性纤维素酶.实验结果为进一步研究内生解淀粉芽孢杆菌TB2纤维素酶的功能和应用打下了基础.【总页数】7页(P443-449)【作者】范晓静;邱思鑫;胡方平【作者单位】福建农林大学生物农药与化学生物学教育部重点实验室,福州,350002;福建农林大学生命科学学院,福州,350002;福建省农科院蔬菜研究中心,福州,350013;福建农林大学植物保护学院,福州,350002【正文语种】中文【中图分类】Q936;Q785【相关文献】1.砂梨2个内切-β-1,4-葡聚糖酶基因cDNA的克隆及其在果实贮藏过程中的表达分析 [J], 丛郁;李慧;颜志梅;俞明亮;常有宏2.内生芽孢杆菌BS2的β-1,4-内切葡聚糖酶基因与定殖相关性 [J], 范晓静;杨瑞先;邱思鑫;胡方平3.内生解淀粉芽胞杆菌β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因(bglS)的克隆与表达及酶学特性分析 [J], 邱思鑫;范晓静;胡方平;关雄4.解淀粉芽孢杆菌草酸脱羧酶基因的克隆、原核表达与活力测定 [J],5.淀粉液化芽孢杆菌β-1,3-1,4葡聚糖酶基因的克隆和表达 [J], 吕文平;许梓荣;李卫芬;孙建义;韩晋辉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
β-1,3-葡聚糖酶在枯草芽孢杆菌中的表达与性质
β-1,3-葡聚糖酶在枯草芽孢杆菌中的表达与性质张佳妮;徐岩;喻晓蔚【期刊名称】《食品与生物技术学报》【年(卷),期】2022(41)2【摘要】藤黄节杆菌(Athrobacter luteu)β-1,3-葡聚糖酶(βglⅠ)能够特异性的作用于β-葡聚糖中的β-1,3-糖苷键,在酵母裂解活性上具有突出优势,但是βglⅠ在生产上存在表达低、生产成本高的问题。
作者利用无缝克隆技术构建表达载体,实现了βglⅠ在枯草芽孢杆菌中的分泌表达,并通过比较不同Tat类型和Sec类型信号肽、RBS、5′UTR等表达元件来提高βglⅠ的胞外产量。
结果表明,信号肽SPLipA 使得βglⅠ表达水平提高了0.4倍,在此信号肽基础上继续比较各RBS和5′UTR序列,其中cry3A 5′UTR使βglⅠ产量高出出发菌株1.2倍。
此外,利用Ni2+亲和层析柱纯化βglⅠ并对其酶学性质进行研究,结果表明该酶的最适反应温度为50℃,最适反应pH为6.0,在0~45℃、pH 4.0~9.0的范围内稳定性较好,比活为973U/mg。
【总页数】8页(P29-36)【作者】张佳妮;徐岩;喻晓蔚【作者单位】江南大学工业生物技术教育部重点实验室;江南大学生物工程学院【正文语种】中文【中图分类】Q814.4【相关文献】1.枯草芽孢杆菌C36内切葡聚糖酶基因的克隆及其在大肠杆菌中融合表达2.长野芽孢杆菌普鲁兰酶基因在枯草芽孢杆菌中的表达及酶学性质研究3.内切葡聚糖酶基因在巨大芽孢杆菌中的表达及其酶学性质研究4.枯草芽孢杆菌壳聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达及酶学性质5.脂肪酶基因在枯草芽孢杆菌中的表达及表达产物性质的研究因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
β-1,3-1,4葡聚糖酶基因克隆表达及其抗菌活性与机理研究进展
β-1,3-1,4葡聚糖酶基因克隆表达及其抗菌活性与机理研究进展文凤云;林健荣;廖富蘋;董淑丽;钟杨生【期刊名称】《生物技术通报》【年(卷),期】2007(000)002【摘要】β-1,3-1,4-葡聚糖酶是一类能水解β-1,3-糖苷键和β-1,4-糖苷键的酶,因其主要分解大麦中的β-1,3-1,4-葡聚糖和细菌地衣多糖,所以又称地衣多糖酶.综述了β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因的克隆表达及其抗菌活性与机理最新研究进展.【总页数】3页(P58-60)【作者】文凤云;林健荣;廖富蘋;董淑丽;钟杨生【作者单位】华南农业大学动物科学学院,广州,510642;河南科技大学动物科技学院,洛阳,471003;华南农业大学动物科学学院,广州,510642;华南农业大学动物科学学院,广州,510642;河南科技大学动物科技学院,洛阳,471003;华南农业大学动物科学学院,广州,510642【正文语种】中文【中图分类】Q93【相关文献】1.1,3-1,4-β-葡聚糖酶基因克隆表达及其耐热性研究进展 [J], 孙军涛;王洪新;吕文平;马朝阳;戴易兴2.β1,3-1,4-葡聚糖酶基因的克隆与序列分析 [J], 孙军涛;王洪新;吕文平;马朝阳;戴易兴;姚红3.β-1,3-1,4-葡聚糖酶高产菌诱变选育及基因克隆表达 [J], 陈计;高鹏;陆兆新;吕凤霞;张充;赵海珍;别小妹4.海洋细菌Bacillus mojavensis 1 A00437β-1，3-1，4-葡聚糖酶基因的克隆、表达及功能研究 [J], 左怀雨;王茂淋;邵宗泽;李光玉;徐柳;喻子牛;张吉斌5.产琥珀酸丝状杆菌1,3-1,4-β-葡聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达 [J], 杨玉霞;张慧玲;汪艳;陈勇因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
1,3-1,4-β-葡聚糖酶基因克隆表达及其耐热性研究进展
1,3-1,4-β-葡聚糖酶基因克隆表达及其耐热性研究进展孙军涛;王洪新;吕文平;马朝阳;戴易兴【摘要】1,3-1,4-β-葡聚糖酶(E.C.3.2.1.73)是一类降解β-葡聚糖中与β-1,3糖苷键相邻的β-1,4糖苷键的酶,因其主要分解大麦中的1,3-1,4-β-葡聚糖和细菌地衣多糖(又称地衣多糖酶),广泛应用于发酵和饲料工业.但其高温条件下酶活较低,构建高温下活性高的1,3-1,4-β-葡聚糖酶成为近年来研究的热点.文中介绍了1,3-1,4-β-葡聚糖酶的生化特性,综述了1,3-1,4-β-葡聚糖酶基因的克隆表达、耐热性及其应用方面的研究进展,并对其研究前景进行了展望.【期刊名称】《食品与发酵工业》【年(卷),期】2010(036)006【总页数】6页(P107-111,117)【关键词】1,3-1,4-β-葡聚糖酶;基因克隆;基因表达;耐热性【作者】孙军涛;王洪新;吕文平;马朝阳;戴易兴【作者单位】江南大学食品学院,食品科学与技术国家重点实验室,江苏,无锡,214122;江南大学食品学院,食品科学与技术国家重点实验室,江苏,无锡,214122;江南大学食品学院,食品科学与技术国家重点实验室,江苏,无锡,214122;江南大学食品学院,食品科学与技术国家重点实验室,江苏,无锡,214122;江南大学食品学院,食品科学与技术国家重点实验室,江苏,无锡,214122【正文语种】中文1,3-1,4-β-葡聚糖是禾本科高等植物(谷物类)细胞壁的多糖组分,是由1200个以上的β-D-葡萄糖残基通过β-1,3和β-1,4糖苷键连接而成的线性分子,在大麦、燕麦、高粱、大米和小麦等谷物胚乳细胞壁中的含量尤为丰富,不同谷物β-葡聚糖中2种糖苷键键型的比例和寡糖单元的长度有所不同,如大麦,90%以上的水溶性β-葡聚糖是由单一的β-1,3糖苷键连接纤维三糖和纤维四糖所组成;谷物中1,3-1,4-β-葡聚糖在萌发初期主要被其内源性葡萄糖水解酶所降解,其中活性最强的内源性葡聚糖水解酶是1,3-1,4-β-葡聚糖酶(1,3-1,4-β-D-glucan 4-glucanohydrolase,1,3-1,4-glucanase,E.C.3.2.1.73,简称β-葡聚糖酶或地衣多糖酶),它是只降解β-葡聚糖中与β-1,3糖苷键相邻的β-1,4糖苷键的酶,其降解产物主要是纤维三糖和纤维四糖(见图1)[1]。
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６ ９ 其 Ｏ Ｆ序 列 已登录 Ｇ ｎ ａｋ（ ｃｅｓ ｎＮ ． Ｕ３８２） Ｂａｔ ．， Ｒ ８ ｅＢ ｎ Ａ ｃｓｏ ｏ Ｅ ６２４。 ｌ 同源性 分析 结果表 明 ， ｉ ｓ 该基 因的 ＯＲ Ｆ序 列与植物 互作 生防解 淀粉 芽胞杆菌 ． ｍ ｌ ｉ ｅａｉｎ Ｆ Ｂ ２ＧｅＢ ｎ ｃｅｓ ｎＮ ． Ｐ ０ ５０ ａ ｙｏｑ ｆｅｅｓ Ｚ ４ ， ｎ ａｋＡ ｃｓｉ ｏ Ｃ ００６ ）的 ６１ ｌｕ ｏ ．， ３１ ． ．， 葡聚糖 酶基 因核 苷酸序列 的一致 性达 ９ ． 氨基 酸序列 的一致 性达 ９．％。 Ｂ１ —， ４ ７ ％， ３ ７１ 将 一， １ 一内切葡聚 糖 ３ ４
Ｃ ｒ ｓｏ ｄｎ ｕｈ ｒｎｕ＠ｑ ｕｅｕｃ ｏｒ ｐ ｎ ｉｇａｔｏ， ｆ ａ ． ． ｅ ｄ ｎ
该酶 的最适 反应 温度 为 ５ ￣ ５ Ｃ，在 ５ ℃ 以下 保温 ６ ｎ后残 余 ８ ％以上酶 活 ；最适 反应 ｐ 为 ６２ ０ ０ｍｉ ０ Ｈ ．，在 ｐ Ｈ
４ ～ ．４Ｃ 温 ３ ｎ残余 ８％以上 的酶 活 ； ａ ． ６８ ￣保 ４ ０ ｍｉ ５ Ｃ 和 Ｆ 可提 高 Ｂ１ ．， 葡聚糖 酶 的活性 ，而 Ｃ Ｚ ２ ｅ ．， １ ． ３ ４ ｕ 、ｎ＋ 、 Ｍ 和 Ｉｎ Ｖ 斗对 其 活性 具 有显 著 的抑 制作 用 。实验 结 果 为进 一 步研 究植 物 内生解 淀 粉 芽胞 杆菌 Ｔ ２Ｂ１ ｌ Ｂ ．，
Ｃｈａ ａ ｔｒｓｉ ｓｏ ｚ ｍｅ ｒ ｃｅ ｉｔｃ ｆ ｈｅＥｎ ｙ ｔ
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３１ ． ，， 葡聚糖 酶的功 能和应用打 下 了基础 。 ４
关键词 内生解淀粉 芽胞杆菌 ，—， １ ．内切葡 聚糖酶基 因（ ｆ１ ．， ３ ３ ４ ６ ， 隆， 达 克 表
Ｃｏ ｉｇ ａｄ Ｅ ｐｅｓ ｎ ｏ ｎ ｌ １ —， ｇ ｃｎ ｓ ｅ ｅ （ ）ｆ ｍ ｌ ｎ ｎ ｘ ｒｓｉ ｆＡ —， １ 一ｌ ａ ａｅ Ｇ ｎ ｎ ｏ ３ ３ ４ ｕ ｂ ｇｓ ｒ ｏ Ｅ ｄｐ ｙｉ Ｂ ｃｌ ｓａ ｙ ｌ ｕ ａｉ ｓＳｒｉ Ｔ ２ｉ ｓｈｒ ｈａｃｌ ａｄ ｎ ｏ ｈ ｔ ａｉｕ ｍ ｌ ｉ ｅ ｃ ｎ ｔ ｎ Ｂ Ｅ ｃ ｅｉ ｉ ｏ ｎ ｃ ｌ ｏｑ ｆ ｅ ａ ｎ ｃ ｉ
菌（ａｉｕ ｍ ｌｉｕ ａｉ ｓ Ｂ Ｂ ｃｌｓ ｙ ｌ ｅ ｃ ｎ） ２菌株 基 因组 为模板 ， 隆了 １１ ．， ｌ ａ ｏｑ ｆ ｅ Ｔ 克 ３ ， １ ．内切葡 聚糖 酶基 因（ ｓ。测序 结果 ．３ ４ ６ ） Ｉ
表明， 该基 因 的 Ｏ Ｆ全 长 ７ ２ｂ ， Ｒ ３ ｐ 编码 一 条 ２ ３个氨 基 酸 的 蛋 白 ， 论 分 子 量约 为 ２ ． Ｄ， 电 点约 为 ４ 理 ７ ３ｋ 等 ３
酶基 因全长 克隆至 ｐ Ｃ１ Ｕ ８载体 上 ，利 用基 因 自身 的启动 子构 建重 组表达 载体 ｐ － ｓ ＵＣ ＠ｔ ，并 导入大 肠杆 菌
（ｓｈｒ ｈａｃｌ Ｂ ２ 菌株 中表 达 。Ｓ ＳＰ Ｇ Ｅｃｅｃｉ ｏｉ Ｌ １ ｉ ） Ｄ ．Ａ Ｅ分析表 明， Ｌ １： ． Ｂ ２ ：ＵＣｂ ｐ ｇＳ菌株表达 了 ２ Ｄ 左 右的 蛋 白； ７ｋ
关雄
１ 福建省农业科学院作物研究所蔬菜研究中心 ，福州 ３ ０ １ ； 福建农林大学植物保护学 院， ５ ０ ３２ 福州 ３ ０ ０ ； 福建农林大学生物农药与化学生 ５０２３
摘
要
３ ，１． １ １ ．， 内切葡 聚糖酶普 遍存 在于植 物 内生 芽胞杆 菌 中 ， 了探 讨其 功能 ， 内生解 淀 粉芽胞 杆 ．３ ４ 为 以
农业 生物 技术 学报 ，０ ０ ， １ 卷 ， ６期 ， １ ７～ １ １ ２１年 第 ８ 第 第 １３ １８ 页
Ｊ ｕ ｎ ｌ ｆ ｒ ｕ ｔｒ ｌ ｏ ｅ ｈ ｏ ｏ ｙ ２ １ ， １１ ， ． ， ７ ～ｌ ８ ｏ ｒ ａ Ａｇ ｉ ｌ ａ ｔ ｃ ｎ ｌｇ ， ０ ０ Ｖｏ ． ８ Ｎｏ ６ １ ３ １ ｏ ｃ ｕ Ｂｉ １ １
研 究报 告
Ａ ｔｅ Ｌｅｔｒ
内生解 淀粉 芽胞杆 菌Ｉ １ —， 葡 聚糖 酶基 因Ｏ ） ３ ，１． ３ ４ ｇｓ 的克 隆与表 达及 酶 学特 性分 析
邱 思鑫 范晓静 胡方平
物学教育部重 点实验 室， 福州 ３ ０ ０ ５０２
通讯 作 者 ， ｆ ａ． ｕｃ Ｈｕ＠０ ｕｅ ． ｄ ｎ