食品中硝酸盐和亚硝酸盐的测定-分光光度计

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紫外分光光度法测定食品里的亚硝酸盐含量

样品检测结果将市售的散装卤猪肉豆干甜面酱和咸菜按14制备的待测液进行紫外分光光度法测定食品里的亚硝酸盐含量张小梅济阳县综合检验检测中心表1亚硝酸根回收率实验结果亚硝酸根标准储备液检测含量回收率平均回收率rsd平均rsdmlgml440810200100751241203989950403100755495990010020106503100605051010066171028310106160598996760410067检测各进行3次重复以标准曲线计算亚硝酸根含量结果表明卤猪肉豆干甜面酱和咸菜的亚硝酸根含量分别为321132785112874234682140gml
结果与讨论
亚硝酸根含量标准曲线按１．３制备亚硝酸根含量标准品，以吸光度对应亚硝酸根含量做线性回归标准曲线，标准曲线为ｙ＝０．２３７３ｘ－０．００１７，Ｒ²＝０．９９９９，其拟合度较高，线性范围为０～６ μｇ／ｍＬ。
表 1 亚硝酸根回收率实验结果
亚硝酸根标准储备液（mL） 4 检测含量（μg/mL） 4.08 3.98 4.03 5 4.95 5.03 5.05 6 6.17 5.98 6.04 回收率（%） 102.00 99.50 100.75 99.00 100.60 101.00 102.83 99.67 100.67 101.06 1.60 100.20 1.06 平均回收率（%） 100.75 RSD （%） 1.24 平均 RSD （%） 1.20
Sep. 2016
CHINA FOOD SAFETY
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检测，各进行３次重复，以标准曲线计算亚硝酸根含量，结果表明卤猪肉、豆干、甜面酱和咸菜的亚硝酸根含量分别为（３２．１±１．３）、（２７８．５±１１．２）、（８７４．２±３４．６）、（８２．１±４．０）μｇ／ｍＬ。按照亚硝酸根含量 ×１．５０的系数折算成以亚硝酸钠计的国家标准，其中卤猪肉对应腌腊肉３０ｇ／ｋｇ国家标准，豆干无国家标准，以腌腊肉计，甜面酱，咸菜对应酱腌菜２０ｇ／ｋｇ国家标准，４种食物中的亚硝酸钠含量均超标，其中豆干、甜面酱严重超标，超出国家标准５倍以上。

食品安全亚硝酸盐与硝酸盐的测定-

、乙酸锌[Zn(CH3COO)2.2H2O]、硼酸钠
[Na2B4O7.10H2O]、对氨基苯磺酸[C6H7NO3S]、盐酸萘乙二胺[C12H14N2.2HCL]
氨缓冲溶液：量取 30mL 盐酸，加 100mL 水，混匀后加65mL 氨水，再加水稀释至 1000mL，混匀。调节 pH 至 9.6～9.7（用PH计）。
吸取 20mL 滤液于 50mL 烧杯中，加 5mL 氨缓冲溶液，混合后注入贮液漏斗，使流经镉柱还原，以原烧杯收集流出液。
当贮液漏斗中的样液流完后，再加 5mL 水置换柱内留存的样液。随时都要保持水平面在镉层之上，不得使镉层夹有气泡。
将全部收集液如前再经镉柱还原一次，第二次流出液收集于 100mL 容量瓶中，继以水流经镉柱洗涤三次，每次 20mL，洗液一并收集于同一容量瓶中，加水至刻度，混匀。
整块的禽肉类样品（腊肉、烤鸭等）在不同部位切取小片或截取小段四分法缩分。
（一）样品的制备
将缩分后的样品四分法分成二份，一份作留样备用（>100g），另一份切细后用捣碎机捣碎混匀供分析(>50g)。
当送样量不能满足留样要求时，全部粉碎混匀，在保证分析样用量后，全部用作留样。
（二）样品的保存
（3）亚硝酸钠总量的测定
吸取 20mL 还原后的样液于 50mL 比色管中，分别加入 2mL对氨基苯磺酸溶液，混匀，静置 3min～5min 后各加入 1mL 盐酸萘乙二胺溶液，加水至刻度，混匀，静置 15min，用 2cm 比色杯，以空白管调节零点，于波长538nm 处测吸光度。代入标准曲线计算。
亚硝酸钠、硝酸钠标准储备溶液（ 200μg/mL，以NaNO2计）应置棕色瓶中5 ℃以下冷藏保存，有效期6 个月。

实验十二食品中亚硝酸盐的测定

实验十二、食品中亚硝酸盐的测定（盐酸萘乙二胺分光光度法）一、实验目的1.明确亚硝酸盐在食品中的作用以及限量标准。

2.掌握盐酸萘乙二胺法测定食品中亚硝酸盐的原理、操作步骤、注意事项二、实验原理样品经沉淀蛋白质，除去脂肪后，在弱酸条件下硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色的染料，与标准系列比较定量。

三、仪器1. 722分光光度计，提前20min打开预热2. 组织绞碎机，菜刀，砧板 1-2套3. 50mL烧杯 500mL烧杯 3L大烧杯4. 电炉 2个5. 托盘天平6. 200mL容量瓶 500mL容量瓶7. 恒温水浴锅8. 25mL具塞比色管9. 滴管，漏斗，滤纸，吸小球10. 玻璃棒，温度计，标记笔，标签纸四、试剂（所用试剂，除另有规定外，均为分析纯试剂。

）1、亚铁氰化钾溶液：称取106.0g亚铁氰化钾[K4Fe6(CN)·3H2O]，用水溶解后，稀释至1000mL。

2、乙酸锌溶液：称取22.0g乙酸锌[Zn(CH3C00)2·2H20]，加3 mL冰乙酸溶于水，并稀释至100mL。

3、饱和硼砂溶液：称取5.0g硼酸钠(Na2B07·10H20)，溶于100 mL热水中，冷却后备用。

4、对氨基苯磺酸溶液(4g/L)：称取0.4 g对氨基苯磺酸，溶于100 mL 20％的盐酸中，置棕色瓶中混匀，避光保分装。

5、盐酸萘乙二胺溶液（2g/L）：称取0.2克盐酸萘乙二胺，溶于100毫升水中，避光保存。

有致癌作用6、亚硝酸钠标准溶液（0.2g/L）：精密称取0.1000g于硅胶干燥器中干燥24h的亚硝酸钠，加水溶解移入500ml容量瓶中，并稀释至刻度。

此溶液每ml相当于200µg亚硝酸钠。

7、亚硝酸钠标准使用液（0.2µg/mL）：临用前，吸取亚硝酸钠标准溶液5.00毫升，置于200毫升容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于5微克亚硝酸钠。

盐酸萘乙二胺分光光度法测定食品中的亚硝酸盐

盐酸萘乙二胺分光光度法测定食品中的亚硝酸盐摘要：本文综合分析了亚硝酸盐的中毒机理；亚硝酸盐中毒的症状；亚硝酸盐中毒应采取的救治措施和如何预防亚硝酸盐中毒。

用盐酸萘乙二胺分光光度法测定亚硝酸盐的含量。

该方法具有应用广泛、灵敏度高、选择性好、准确度高、分析成本低、操作简便、快速的特点。

关键词：亚硝酸盐；中毒机理；中毒原因；盐酸萘乙二胺；分光光度法Abstract: This paper analyzes the mechanism of nitrite poisoning; nitrite poisoning symptoms; nitrite poisoning treatment measures to be taken and how to prevent nitrite poisoning. Naphthyl-ethylenediamine hydrochloride Determination of nitrite levels.This method has a wide range of applications, high sensitivity, good selectivity and high accuracy analysis of low-cost, simple operation, rapid.Keywords:nitrite ; poisoning mechanidm ; cause of poisoning ; hydrochloride naphthylethylenediamine ; spectrophotometry.亚硝酸盐俗称“硝盐”，是含氮化合物的一类。

常见的亚硝酸盐有亚硝酸钾和亚硝酸钠，为白色或淡黄色结晶或颗粒状粉末，味微咸，易溶于水，多成白色晶体，密度大于水，硬度较大，十分易碎，外观极似食盐。

并广泛存在于自然环境中尤其是在气态水、地表水和地下水中以及动植物体与食品内。

亚硝酸盐的检测实施步骤

亚硝酸盐的检测实施步骤引言亚硝酸盐（NO2-）是一种常见的化学物质，在环境和食品安全监测中起到重要的作用。

检测亚硝酸盐的含量可以帮助我们了解水体、食品等样品的质量和安全性。

本文将介绍亚硝酸盐的检测实施步骤，包括样品准备、试剂配制、实验操作等内容。

样品准备1.选择代表性的样品：根据实际需求，选择适当数量的样品进行检测。

例如，如果是水体样品，可以选择源头水、自来水等不同来源的样品。

2.样品收集：使用合适的容器收集样品，在收集过程中要防止样品污染和氧化。

例如，可以使用玻璃瓶进行样品收集。

3.样品储存：将收集好的样品密封储存，在低温（4℃）条件下保存，以防止亚硝酸盐的分解和其他化学反应发生。

试剂配制1.亚硝酸钠标准溶液的配制：称取适量的亚硝酸钠固体，溶解于去离子水中，制备一定浓度的亚硝酸钠标准溶液。

标准溶液的浓度应根据实验需要选择合适的浓度。

2.硫酸试剂的配制：将浓硫酸缓慢倒入去离子水中，配制稀硫酸溶液。

在配制过程中要注意加入硫酸时要缓慢操作，并在安全条件下进行。

3.碘化钾试剂的配制：和稀硫酸一样，将碘化钾固体缓慢加入去离子水中，制备一定浓度的碘化钾试剂溶液。

实验操作1.样品处理：根据实验需要，对样品进行必要的预处理。

例如，如果是水体样品，可以通过滤纸过滤或离心处理来去除杂质。

2.样品分析：使用分光光度计等仪器对样品进行测定。

详细的操作步骤如下：–首先，取一定量的样品溶液，加入适量的稀硫酸溶液，混合均匀。

–然后，加入适量的碘化钾试剂溶液，混合均匀。

–接着，将试管或比色皿放入分光光度计中，设置合适的检测波长。

–最后，记录读数并计算亚硝酸盐的含量。

根据实验需求，可以进行多次测定以提高测定结果的准确性。

结果分析1.数据处理：根据实验记录的读数，可以计算亚硝酸盐的含量。

根据实验需求，可以使用不同的计算方法，如质量分数计算、浓度计算等。

2.结果评估：根据亚硝酸盐的含量，和相应的标准进行对比，并评估样品的质量和安全性。

食品中亚硝酸盐的测定

食品中亚硝酸盐的测定分光光度法1、提取：称取5g（精确至0.01g）制成匀浆的试样置于50ml烧杯中，加12.5饱和硼砂溶液，搅拌均匀，以70℃左右的水约300ml将试样洗入500 ml容量瓶中，于沸水浴加热15min，取出置冷水浴中冷却，并放置至室温。

2、提取液净化：在振荡上述提取液时加入5ml亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入5ml乙酸锌溶液，以沉淀蛋白质。

加水至刻度，摇匀，放置30min，除去上层脂肪，上清液用滤纸过滤，弃去初滤液30ml，滤液备用。

3、测定：吸取上述40.0ml上述滤液于50ml带塞比色管中，另取0.00 ml，0.20 ml，O.40 ml，0.60 ml，0.80 ml，1.00 ml，1.50 ml，2.00 ml，2.50 ml亚硝酸钠标准使用液分别置于50 ml带塞比色管中。

于标准管与试样管中分别加入 2 ml对氨基苯磺酸溶液，混匀，静置3～5min后各加入 1 ml盐酸萘乙二胺溶液，加水至刻度，摇匀，静置15min，用2cm比色杯，以零管调节零点，于波长538nm处测吸光度，绘制标准曲线比较。

同时做试剂空白。

4、计算：式中：X：—试样中亚硝酸钠的含量(mg/Kg)A：—测定用样液中亚硝酸钠的质量（μg）m：—试样质量（g）V2：—测定用样液体积（ml）V1：—试样处理液总体积（ml）结果保留两位有效数字。

此方法的最低检出限为1mg/kgx =A×1000m× V2/ V1×1000食品中亚硫酸盐盐酸副玫瑰苯胺法1试剂1.1 四氯汞钠吸收液：称取13.6g氯化高汞及6.0g氯化钠，溶于水中并稀释至1000mL，放置过夜，过滤后备用。

1.2 氨基磺酸铵溶液(12g/L)。

1.3 甲醛溶液(2g/L)：吸取0.55mL无聚合沉淀的甲醛(36%)，加水稀释至100mL，混匀。

1.4 淀粉指示液：称取1g可溶性淀粉，用少许水调成糊状，缓缓倾入100mL沸水中，随加随搅拌，煮沸，放冷备用，此溶液临用时现配。

亚硝酸盐的测定分光光度法

亚硝酸盐的测定分光光度法1. 引言哎呀，提到亚硝酸盐，咱们可得认真对待。

你说这玩意儿是个啥？简单来说，亚硝酸盐是一种化学物质，通常用于食品保鲜、调味，但如果摄入过多，那可就不妙了，健康可要受损的！所以，今天咱们就来聊聊如何用分光光度法来测定亚硝酸盐的含量，确保我们的饮食安全。

你可得好好听，毕竟这可不是小事一桩。

2. 分光光度法基础2.1 什么是分光光度法？先来个大概念，分光光度法其实就是用光来“看”东西。

简单点说，就是把光照射到样品上，看它吸收了多少光，这样咱们就能知道里面的某种成分含量。

想象一下，像是在酒吧里，灯光闪烁，调酒师正忙着调制鸡尾酒，你想知道酒里加了多少种酒精，就可以通过观察颜色来判断。

这个原理在化学实验里也是如此，分光光度法就是个“色彩侦探”。

2.2 亚硝酸盐的特性那么，亚硝酸盐又是什么样的“色彩”呢？它在特定条件下会产生一种紫红色的溶液，这就是它的“标志性风格”。

用分光光度法时，咱们可以通过测量这种紫红色的强度来判断亚硝酸盐的浓度。

颜色越深，浓度越高，就像过年时，红红火火的热闹气氛，浓得化不开。

3. 测定步骤3.1 样品准备好，接下来就是实际操作的步骤。

首先，得准备样品。

无论是蔬菜、水果，还是肉类，都可能含有亚硝酸盐。

你得把它们搞成均匀的样品，像搅拌咖啡一样，确保每一口都是“标准味”。

接着，使用适当的溶剂（比如水）稀释样品，让亚硝酸盐“溶入”其中，形成一杯“亚硝酸盐鸡尾酒”。

3.2 进行测定然后，把样品倒入分光光度计，调节好波长，一般是在540纳米左右。

此时，你得屏住呼吸，仿佛在等待着揭晓的那一刻。

光穿过样品，设备会记录下光的吸收程度，哇，这时你就能看到那个紫红色在闪烁，简直像是电影里的特效场景。

最后，根据吸光度和标准曲线，就能计算出样品中亚硝酸盐的浓度啦，感觉像是做了一场“化学魔法”。

4. 注意事项4.1 操作细节不过，做实验可不是儿戏，咱们得小心翼翼，尤其是在操作细节上。

光线、温度、样品的处理，都可能影响最终结果，稍微马虎，就会前功尽弃。

分光光度法测定肉制品中亚硝酸盐含量的分析

分光光度法测定肉制品中亚硝酸盐含量的分析目的：探讨肉制品中亚硝酸盐的测试方法。

方法：采用分光光度法，对肉制品中亚硝酸盐进行测试。

结果：检出限其检测限为 3.68x10-3g/ml。

结论：测定亚硝酸根含量是肉制食品中重要的分析项目之一，分光光度法是其测定的行之有效的方法。

标签：分光光度法；亚硝酸盐；肉制品；分析亚硝酸盐(N023作为食品防腐剂和发色剂，能改善食品的色泽和口感，有发色、防腐双重功效，是国家列入允许使用的食品添加剂之一。

但亚硝酸盐能与胺类化合物作用生成致癌性很强的N-亚硝基化合物，长期摄入可导致消化道癌症，影响人体健康。

还可使血红蛋白变性，使其失去携氧功能。

尽管亚硝酸盐对人体不利，但目前无更好的物质所替代，所以仍在使用。

作为防范亚硝酸盐危害，向消费者提供安全食品的最后屏障，测定亚硝酸根含量是肉制食品中重要的分析项目之一。

目前关于亚硝酸盐测量较好的方法有导数紫外光度法，离子色谱紫外光度法，气体分子吸收光度法等。

利用重氮化反应测定NO，由于测定时多使用如Ot-萘胺和N-(1一萘基)乙二胺等毒性很大的试剂，且线性范围窄(0-0.2 mg／L)，所用试剂较复杂，不宜用于肉制品的测定；氧化还原光度法也因干扰因素较多不常被使用。

为此，尝试探索一种既不会对测定人员身体造成伤害，又保证较高灵敏度且适用于此样品的简易快速测定的方法，十分必要。

本法采用分光光度法来测定肉制品中亚硝酸盐含量，收到良好效果，现将结果报道如下：1材料与方法1.1材料试验仪器为WFZ800-D分光光度计，分析天平、组织捣碎机。

试验药剂为亚硝酸钠标准溶液(0.5g／L)、依文思蓝但vansBlue，Fluka试剂，进口分装)溶液0.1 mol／L、磷酸1.0mol／L、氯化钠溶液l mol／L、蒸馏水(二蒸液)。

试验药品均为分析纯。

1.2方法1.2.1样品制备①亚硝酸钠标准溶液(0.5g/L)：准确称取亚硝酸钠粉末0500 0 g于烧杯中，加少量水溶解后，转入1000 ml容量瓶中，用水稀释至刻度定容，瓶身用黑纸包裹。

食品中亚硝酸盐含量测定操作规程

食品中亚硝酸盐含量测定操作规程1 目的对公司泡菜类亚硝酸盐含量测定制定标准操作规程，检验室操作人员按本规程操作，保证公司亚硝酸盐含量检测结果准确。

2 范围适用于所有泡菜类亚硝酸盐含量的测定3 依据GB 5009.33-2016《食品安全国家标准食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定》第二法分光光度法4 实验原理试样经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料，外标法测定亚硝酸盐含量。

5 仪器和设备5.1 比色管5.2 电子天平：感量为0.1mg。

5.5 紫外分光光度计6 试剂除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的二级水或去离子水。

6.1亚铁氰化钾溶液（106g/L）：称取106.0g亚铁氰化钾，用水溶解，并稀释至1000mL。

6.2乙酸锌溶液（220g/L）：称取220.0g乙酸锌，加30mL冰乙酸溶解，并用水稀释至1000mL。

6.3饱和硼酸钠溶液（50g/L）：称取5.0g硼酸钠，溶于100mL热水中，冷却后备用。

6.4对氨基苯磺酸钠溶液（4g/L）：称取0.4g对氨基苯磺酸，溶于100mL20%（V/V）盐酸中，置于棕色瓶中混匀，避光保存。

6.5盐酸萘乙二胺溶液（2g/L）：称取0.2g盐酸萘乙二胺，溶于100mL水中，混匀后，置于棕色瓶中，避光保存。

6.6亚硝酸钠标准溶液：准确称取0.1000g于110-120℃干燥恒重的亚硝酸钠，加水溶解移入500mL容量瓶中，加水至刻度，混匀。

此溶液每毫升相当于200ug的亚硝酸钠。

6.7亚硝酸钠标准使用液：吸取亚硝酸钠标准溶液5.00mL，置于200mL容量瓶中，加水至刻度，此溶液每毫升相当于5.0ug亚硝酸钠。

7 实验步骤7.1 样品制备取有代表性样品用粉碎机粉碎或用研钵研细，不易研磨的样品应尽可能切碎。

7.2 操作步骤标准曲线的绘制：分别吸取亚硝酸钠标准使用液0.00、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00、1.50、2.00、2.50mL 于50mL 带塞比色管中，（相当于0、1、2、3、4、5、7.5、10、12.5ug 亚硝酸钠），分别置于50mL 带塞比色管中。

gb5009.33-2016亚硝酸盐检测计算

gb5009.33-2016亚硝酸盐检测计算GB5009.33-2016是中国国家标准，是一种食品安全检测标准，具体名称为《食品安全国家标准食品中亚硝酸盐的测定》。

在该标准中，亚硝酸盐的测定采用了分光光度法。

具体测定步骤如下：
1. 取样：将待测样品称取一定量，加入一定量的硫酸，进行加热，使亚硝酸盐完全释放。

2. 过滤：将样品过滤，使其除去杂质和沉淀。

3. 反应：将过滤后的样品加入磷酸二氢钾，与硫酸铁离子反应，生成氨氮。

4. 测定：通过分光光度计测定样品中氨氮的吸光度，并通过标准曲线计算出样品中的亚硝酸盐含量。

亚硝酸盐的计算公式为：亚硝酸盐含量（mg/kg）=（A-B）×V×1000/m，其中A为待测样品的吸光度值，B为空白样品的吸光度值，V为待测样品的总体积，单位为mL，m为样品的质量，单位为g。

通过以上步骤可以计算出待测样品中的亚硝酸盐含量，根据国家标准的规定，食品中亚硝酸盐的限量标准为50mg/kg。

若检测结果超过该限量标准，则需要对食品进行处理或者禁止销售，以保证人们的食品安全。

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食品中亚硝酸盐含量的测定

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二、仪器与试剂
1.仪器
①小型绞肉机 ②分光光度计
2.试剂
①亚铁氰化钾溶液：称取106g亚铁氰化钾溶于水，
并定容至1000ml。
②醋酸锌溶液：称取220g醋酸锌，加30ml冰醋酸，
溶于水并定容至1000m冷却后备用。
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④0.4%对氨基苯磺酸溶液：称取0.4g对氨基苯磺酸，溶于100 ml 20%的盐酸中，避光保存。 ⑤0.2%盐酸萘乙二胺溶液：称取0.2g盐酸萘乙二胺, 溶于100 ml水中，避光保存。 ⑥亚硝酸钠标准溶液：精密称取0.1000g于硅胶干燥器中干燥24小时亚硝酸钠，加水溶解移入500 ml容量瓶中，并稀释至刻度。此溶液每ml相当于200ug亚硝酸钠。 ⑦亚硝酸钠标准使用溶液：临用前，吸取亚硝酸钠标准溶液5.00 ml, 臵于100 ml容量瓶中，加水稀释至刻度。此溶液每ml相当于10ug亚硝酸钠。
2.测定
吸取上述滤液40ml于50ml容量瓶中，同时吸取0.0、
0.1、0.2、0.3、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0ml亚硝酸钠标准使用液（相当于0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、 8.0、12.0、16.0、20.0ug的亚硝酸钠）分别臵于 50ml容量瓶中，各加水至25ml处。在样品管及标准管中分别加入0.4%对氨基苯磺酸溶液4ml，混匀后静臵 3～5分钟，然后又在各管及标准管中分别加入0.2%盐酸萘乙二胺溶液2ml，加水至刻度，摇匀，静臵15分钟后，用1cm的比色皿，以零管调节零点，于波长 538nm处，测吸光度，绘制标准曲线并查出待测液的亚硝酸盐含量。 11
四、结果计算
A 1000 X= 40 m 1000 1000 250
式中：X—样品中亚硝酸盐的含量，g/kg； A—样品溶液中亚硝酸盐的含量，ug； m—样品的质量，g。

紫外分光光度法测定亚硝酸盐

紫外分光光度法测定食品中的亚硝酸盐试样的预处理称取约5.0 g经绞碎混匀的试样，置于50 mL烧杯中，加12.5 mL硼酸钠饱和溶液，搅拌均匀，以70℃左右的水将试样洗入250 mL容量瓶中，于沸水浴中加热15 min，取出后冷至室温，然后一边转动，一边加入5 mL亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入5 mL乙酸锌溶液，以沉淀蛋白质。

加水至刻度，摇匀，放置0.5 h，除去上层脂肪，清液用滤纸过滤，弃去初滤液20 mL，滤液备用。

1实验部分1.1仪器与试剂722型分光光度计；小型绞肉机等。

硼砂、亚铁氰化钾、乙酸锌、对氨基苯磺酸、盐酸萘乙二氨、盐酸、NaNO2均为分析纯试剂。

1.2试剂的配制1.2.1亚铁氰化钾溶液称取106.0 g亚铁氰化钾，用水溶解，并稀释至1 000 mL。

1.2.2乙酸锌溶液称取220.0 g乙酸锌，加30 mL冰乙酸溶于水并稀释至1 000 mL。

1.2.3饱和硼砂溶液称取5.0 g硼酸钠，溶于100 mL热水中，冷却后备用。

1.2.4对氨基苯磺酸溶液（4 g/L）称取0.4 g对氨基苯磺酸，溶于100 mL 20%盐酸中，置棕色瓶中，混匀，避光保存。

1.2.5盐酸萘乙二胺溶液（2 g/L）称取0.2 g盐酸萘乙二胺，溶解于100 mL水中，混匀后，置棕色瓶中，避光保存。

1.2.6亚硝酸钠标准溶液准确称取0.100 0 g于硅胶干燥器中干燥24 h的亚硝酸钠，加水溶解，移入500 mL容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀。

此溶液为每毫升相当于200μg的亚硝酸钠。

1.2.7亚硝酸钠标准使用液临用前，吸取亚硝酸钠标准溶液5.00 mL，置于200 mL容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液为每毫升相当于5.0μg的亚硝酸钠。

1.3测定1.3.1标准曲线的绘制准确移取NaNO2操作液(5μg/mL)0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL分别置于25 mL带塞比色管中,于标准管中分别加入4.5 mL氯化铵缓冲液，加2.5 mL60%醋酸后立即加入5.0 mL显色剂，加水至刻度，混匀，在暗处静置25 min，用1 cm比色皿，以试剂为参比，于波长550 nm处测吸光度，绘制标准曲线。

食品中亚硝酸盐的测定

实验二食品中亚硝酸盐的测定一、实验目的与要求掌握盐酸萘乙二胺法测定食品中亚硝酸盐的原理、操作步骤、注意事项二、实验原理样品在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色的染料，于最大吸收波长538 nm下测吸光度值A, 与标准系列比较定量。

三、实验仪器及试剂1.仪器：分析天平、722分光光度计2. 亚铁氰化钾溶液：称取106.0 g亚铁氰化钾（[K4Fe6(CN)·3H2O]），用水溶解后，稀释至1000 mL。

3．乙酸锌溶液：称取22.0 g乙酸锌（[Zn(CH3C00)2·2H20]），加3 mL冰乙酸溶于水，并稀释至100 mL。

4．饱和硼砂溶液：称取5.0 g硼酸钠(Na2B07·10H20)，溶于100 mL热水中，冷却后备用。

5．对氨基苯磺酸溶液(4 g/L)：称取0.4 g对氨基苯磺酸，溶于100 mL 20％的盐酸中，置棕色瓶中混匀，避光保存。

6．盐酸萘乙二胺溶液（2 g/L）：称取0.2 g盐酸萘乙二胺，溶于100 mL水中，避光保存。

7．亚硝酸钠标准溶液（0.2 g/L）：精密称取0.1000 g于硅胶干燥器中干燥24 h的亚硝酸钠，加水溶解移入500 mL容量瓶中，并稀释至刻度。

8．亚硝酸钠标准使用液（20 µg/mL）：临用前，吸取10 m L 0.2 g/L亚硝酸钠标准溶液，置于100 m L容量瓶中，加水稀释至刻度。

.四、实验步骤（1）样品前处理1. 取样：准确称取5.0 g经绞碎、混匀的样品，置于50mL烧杯中。

2. 沉淀蛋白质：加12.5 mL硼砂饱和溶液，搅拌均匀，以70℃左右的水约300 mL将样品洗入500 mL容量瓶中，置沸水浴中加热15 min，取出后冷却至室温；一面转动一面加入5 mL亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入5 mL乙酸锌溶液，以沉淀蛋白质。

3．过滤：加水定容，放置0.5 h，除去上层脂肪，清液用滤纸过滤，弃去初滤液30 mL，滤液备用。

亚硝酸盐测定分光光度法

亚硝酸盐测定分光光度法引言：亚硝酸盐是一种常见的无机化合物，广泛应用于食品加工、水处理和医药等领域。

准确测定亚硝酸盐的含量对于确保产品质量和保护环境具有重要意义。

分光光度法是一种常用的测定亚硝酸盐含量的方法，本文将介绍亚硝酸盐测定分光光度法的原理、操作步骤以及应用范围。

一、原理：亚硝酸盐在紫外光下可以与苯酚类化合物（如萘酚）发生偶联反应生成偶氮化合物，其最大吸收波长位于430-540nm的黄色区域。

根据比尔-朗伯定律，偶氮化合物的吸光度与其浓度成正比关系。

因此，通过测定偶氮化合物的吸光度，可以间接测定亚硝酸盐的含量。

二、操作步骤：1. 样品制备：将待测样品中的亚硝酸盐与酸性条件下的苯酚类化合物进行偶联反应，生成偶氮化合物。

根据样品的特性，选择合适的萘酚类化合物和酸性条件，并进行样品的预处理。

确保样品中没有干扰物质的存在。

2. 建立标准曲线：根据所选用的萘酚类化合物，在一定浓度范围内制备一系列标准溶液。

使用分光光度计测定每个标准溶液的吸光度，并绘制标准曲线。

标准曲线应包括至少5个点，覆盖待测样品的浓3. 测定样品吸光度：根据样品的特性，选择合适的测定波长。

将样品溶液置于分光光度计的测量池中，读取吸光度值。

4. 计算亚硝酸盐含量：根据标准曲线，将测得的样品吸光度值转化为亚硝酸盐的浓度值。

根据样品的稀释倍数和酸性条件，进行相应的浓度修正。

三、应用范围：亚硝酸盐测定分光光度法广泛应用于食品、环境和医药等领域。

以下列举几个常见的应用案例：1. 食品安全检测：亚硝酸盐是一种潜在的致癌物质，在食品中的含量受到严格限制。

通过分光光度法测定食品中亚硝酸盐的含量，可以确保食品的安全性。

2. 水质监测：亚硝酸盐是水体中常见的污染物之一，其含量的高低直接影响水质的安全性。

利用分光光度法对水样中的亚硝酸盐含量进行测定，可以及时监测水质的变化。

3. 药物分析：亚硝酸盐在某些药物中作为反应中间体存在，其含量的测定对于药物的质量控制至关重要。

食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定1

食品中亚硝酸盐的测定（分光光度法）实验原理：试样经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，生成重氮化合物，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料，在538nm 波长下测定其吸光度，用外标法测得亚硝酸盐含量。

该方法最低检出限为0.0001g ∕kg 。

澄清剂：乙酸锌和亚铁氰化钾溶液：利用乙酸锌[Zn(CH3COO)2·2H2O]与亚铁氰化钾反应生成的氰亚铁酸锌沉淀来挟走或吸附干扰物质。

除蛋白质能力强，但脱色能力差，适用于色泽较浅，蛋白质含量较高的样液的澄清，如乳制品、豆制品等。

硼砂的作用：硼砂溶入水中，即被水解为等量的硼酸与硼酸二氢钠，起缓冲溶液作用。

溶液pH 约为9.18，即碱性。

在碱性下处理样品有几方面作用，一是锌盐沉淀蛋白质时，要求在碱性。

二是碱性下处理肉制品，脂肪被皂化，减少样品被脂肪包裹，使亚硝基根更易提取到水溶液中，三是溶液在碱性下亚硝基根以离子存在，易溶且稳定，如溶液偏酸性，则形成亚硝酸，在加热下容易挥发，也易分解，造成损失。

另外加热15分钟是使亚硝酸提取完全。

食品中亚硝酸盐的限量卫生标准为：西式蒸煮、烟熏火腿及罐头≤70 mg/kg ，其他肉类罐头≤50 mg/kg ，肉制品、火腿肠≤30 mg/kg ，香肠（腊肠）香肚、酱腌菜≤20 mg/kg ，婴儿配方乳粉≤5 mg/kg ，蔬菜≤4 mg/kg ，鲜肉类、鲜鱼类≤3 mg/kg 。

样品预处理：1. 肉类、蛋、水产及其制品：用四分法取适量或取全部，用食物粉碎机制成匀浆备用。

2. 腌鱼类、腌肉类及其它腌制品：称取试样匀浆2 g （精确至0.01 g ），以80 mL 水洗入100 mL 容量瓶中，超声提取30 min ，每5 min 振摇一次，保持固相完全分散。

于75 ℃水浴中放置5 min ，取出放置至室温，加水稀释至刻度。

溶液经滤纸过滤后，取部分溶液于10 000 转/分钟离心15 min ，上清液备用。

食糖中亚硝酸盐的测定

食糖中亚硝酸盐的测定
食糖中亚硝酸盐的测定一般采用重量法、分光光度法或电化学法。

1. 重量法：首先将食糖样品溶于适量的水中，加入溶剂至定容，摇匀，待亚硝酸盐与盐酸反应生成的亚硝酸达饱和状态。

然后将溶液过滤，将結果溶液加入硫酸亚铁溶液，用硝酸亚铁溶液滴定至终点，计算亚硝酸盐含量。

2. 分光光度法：利用亚硝酸盐与铁离子反应生成具有特定吸收峰的络合物，通过测定该络合物的吸光度来确定亚硝酸盐的含量。

该方法可以使用分光光度计进行测定。

3. 电化学法：亚硝酸盐可以在电极表面被还原为氮气，通过测量还原过程中产生的电流来确定亚硝酸盐的含量。

常用的电化学方法有循环伏安法和安培法等。

以上是常用的几种方法，具体选择哪种方法应根据实际需要和条件进行评估和选择。

分光光度法测定食品中亚硝酸盐不确定度评估

doi:10.16736/41-1434/ts.2021.03.052分光光度法测定食品中亚硝酸盐不确定度评估Evaluation of Uncertainty in Determination of Nitrite in Food by Spectrophotometry◎ 陈银珊（广东产品质量监督检验研究院，广东　广州　510670）CHEN Yinshan(Guangdong Testing Institute of Product Quality Supervision, Guangzhou　510670, China)摘　要：本文根据《测量不确定度评定与表示》（JJF 1059.1—2012）和《食品安全国家标准食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定》（GB 5009.33—2016），利用分光光度法对食品中亚硝酸盐的含量进行测定，建立数学模型对亚硝酸盐含量测定的不确定度来源分量进行计算、分析，食品中亚硝酸盐的测定结果可以表示为X=（11.2±0.70）mg·kg-1，k=2，为评价试验测量结果的真确性提供科学依据。

关键词：亚硝酸盐；不确定度；食品；分光光度法Abstract：According to JJF 1059.1—2012 and GB 5009.33—2016, the content of nitrite in food is measured by spectrophotometry. Determine, establish a mathematical model to calculate and analyze the source of uncertainty in the determination of nitrite content. The determination result of nitrite in food can be expressed as X=（11.2±0.70）mg·kg-1, k=2, provide a scientific basis for evaluating the authenticity of the test measurement results.Keywords：nitrite; uncertainty; food; spectrophotometry中图分类号：O657.3在日常生活中，由亚硝酸盐引发的食物中毒事件及诱发致癌的报道常见诸于报端[1]。

紫外可见分光光度计测定食品中亚硝酸盐含量的不确定度评定

仪器设备。电子天平 BS 210s 量程：（0～210）g最小分度值：0.0001g；分光光度计 Cary 50比色皿：1cm 波长：538nm
结果与分析
数学模型：
式中: m0 为从工作曲线上查得试剂空白
N
O
－ 2
的
含
量
，
µ
g
；
m
1为
从
工
作
曲
线
上
查
得
样
品测试中的NO2－，µg；m为称样量，g；V1为分
1.81 0.34 7.32
1.83 0.36 7.34
具体计算过程：重复测量的平均值；
本次测量的标准差s(xi)为
s(xi)=
= 0.1527 ；
的标准差
；u1的自由
度u1= ×
=4.83×10-2
天平称量时引入的不确定度u2的计算。天
平检定证书给出校准值的扩展不确定度为
U95=0.4mg，则有u2(k)=0.4mg=0.0004g（k=3）
T12806－2011），按均匀分布，取因子k= ，
半宽a=0.01mL.
；u611(k)的
Vi，有不同的不确定度值，将Vi=2mL的不确定度分量作为整个标准系列溶液的不确定度，则有m3=Vi×c=2mL×5.0µg/mL=10µg；10mL吸量管的容量允差为 0.02mL(A级，据GB/T 12806－ 2011)。按均匀分布，取因子k= ,半宽a =0.02mL；其不确定度分量为u63(k)= =0.01mL
分析检测
紫外 / 可见分光光度计测定食品中亚硝酸盐含量的不确定度评定
郑冬妮｜广东省佛山市顺德区农业综合技术中心
测量不确定度是“根据所用到的信息，表征赋予被测量值分散性的非负参数。” 一个完整的测量结果，除了应给出被测量的最佳估值之外，还应同时给出测量结果的不确定度。所以食品检测中给出检测结果外同时给出检测结果的不确定度是很有必要的。

食品中亚硝酸盐的测定

食品中亚硝酸盐的测定
1.样品处理：将每种被检样品分别用离心机将悬浮液稀释成容转移2倍以下，滤过慢滤纸，然后将得到的滤液进行2次相同比例稀释，比如用蒸馏水稀释2倍；
2.试剂准备：用液体硫酸，甲酸钠，甲基橙等试剂，配制一定比例的滴定液；
3.试验条件：将滴定液加入溶液中，按一定的体积加入样品，置于37℃的水浴中，在pH6.0-6.8正负0.1的范围内搅拌2min；
4.实验测定：将搅拌好的溶液迅速用pH仪测量溶液的pH值，根据pH值和浓度值，使用分光光度计测量亚硝酸盐含量；
5.数据记录：将检测结果按规定格式记录在检验报告中。

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