PCR法检测HBV DNA对乙肝病程的分析
HBV—DNA乙肝患者的检测结果观察与分析
HBV—DNA乙肝患者的检测结果观察与分析目的:观察并分析乙肝患者的乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)的检测结果。
方法:随机选取我院门诊及住院部在2012年2月-2013年4月收治的1000例慢性乙肝患者为研究对象,应用荧光定量-核酸扩增(PCR)检测法以及酶联免疫吸附试验(ELISA)检测所有患者血清标本的HBV-DNA含量。
结果:所有乙肝病毒血清两对半检测组合(HBVm)模式中所占比例最高的是小三阳模式449例(44.9%)和大三阳模式358例(35.8%),两种检测组合模式中HBV-DNA 陽性检出率对比具有明显差异,其中大三阳模式的HBV-DNA阳性检出率(62.3%)明显高于小三阳模式(33.4%),差异对比具有统计学意义(P<0.05),经乙肝患者的HBV-DNA含量检测结果分析,提示HBeAg阳性的病毒复制旺盛,具有较强的传染性。
结论:HBV-DNA的定量检测可直接反映乙肝病毒的复制及传染性,是诊断乙肝以及临床病情变化的重要指标。
标签:乙肝;HBV-DNA;PCR检测;检测结果;观察分析乙型肝炎是我国较为流行的一种传染性疾病,分布范围较广,该病主要是由于乙型肝炎病毒(HBV)感染所致,经体液和血液均可传播,具有HBV乙肝病毒慢性携带状态[1]。
乙型肝炎是我国发病率和感染率最高的传染性疾病,据相关数据统计[2],乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)含量可直接反映HBV的传染性以及复制程度,为进一步提高临床诊断水平,为临床治疗提供重要的科学依据,本文对我院1000例HBV-DNA慢性乙肝患者检测结果进行深入分析,具体报道如下。
1资料与方法1.1 研究对象及方法随机选取我院门诊及住院部在2012年2月-2013年4月收治的1000例慢性乙肝患者为研究对象,所有患者均符合全国第6次病毒性肝炎会议关于慢性乙型肝炎的诊断标准[3]。
1000例患者中男700例,女300例;病程均超过6个月;年龄7-65岁,平均(27.2±4.1)岁。
荧光定量PCR检测HBV—DNA与乙肝五项检测结果的相关性探讨
荧光定量PCR检测HBV—DNA与乙肝五项检测结果的相关性探讨乙型肝炎是世界上最常见的传染病之一,世界卫生组织(WHO)估计,本病每年造成100万人死亡,慢性乙型肝炎是HBV感染的一种严重后果。
HBV-DNA是直接反映乙肝病毒存在,活动性复制及具有传染性的可靠指标。
但目前我国现状HBV感染者多以其血清感染标志物(乙肝五项,HBV-M)判定,由于其组合模式复杂多样,从而导致了临床上对部分发病患者的HBV感染复制状况难以判断,有时甚至会出现漏诊的情况。
定量PCR法的应用,使得我们进行HBV-DNA的检测的同时得以对其进行相对的量化,这对于乙肝患者体内的HBV的复制以及传染性有更直接的了解,同时也更有利于对临床HBV感染的诊断、治疗方案的选择及疗效的判断。
本文采用荧光定量RCR(FQ-PCR)对307例疑假装乙肝患者标本血清的不同HBV血清学标志物组合进行了HBV-DNA检测,闭幕式对结果进行了统计学处理,以探讨 HBV-M与HBV-DNA复制水平的关系,现报告如下:1资料与方法1.1 标本来源均系2007年7月至2009年8月到我院就诊的所有同时做过乙肝五项及HBV-DNA检测的疑似乙肝的门诊和住院患者,共307例,其中女129人,男178人,年龄17~78岁,平均39岁。
1.2 检测仪器1.2.1 LightCycler定量扩增仪(德国)。
1.2.2 Alisei全自动酶标仪(德国)。
1.3 检测方法和试剂1.3.1 HBV-M检测用酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测,试剂由上海科华生物技术有限公司,并严格按说明书操作。
1.3.2 HBV-DNA定量分析采用荧光定量PCR(FQ-PCR)法检测,试剂由上海复星医学科技发展有限公司提供,严格按说明书的步骤进行操作。
1.4 统计学处理根据HBV血清标志物分为8组,将各组的HBV-DNA拷贝数进行对数变换,以指数表示(±S),定量测量范围仍用实际检测值表示;采用X2检验进行组间HBV-DNA阳性率显著性检验,采用两样本均数的t检验比较拷贝数。
光激电化学发光法检测乙肝两对半与荧光定量PCR_法检测HBV-DNA_的结果分析
医学食疗与健康 2022年10月下第20卷第30期·实验研究·光激电化学发光法检测乙肝两对半与荧光定量PCR法检测HBV-DNA的结果分析吴洁莹 胡姗姗(东莞市横沥医院检验科,广东 东莞 523460)【摘要】目的:对比分析光激电化学发光法与荧光定量PCR法在检测乙型肝炎病毒(下简称HBV)相关指标中的应用效果。
方法:以光激电化学发光法检测乙肝两对半,指标包括乙肝病毒表面抗原(HBsAg)、乙肝病毒表面抗体(HBsAb)、乙肝病毒e抗原(HBeAg)、乙肝病毒e抗体(HBeAb)、乙肝病毒核心抗体(HBcAb),筛选出结果为大三阳(HBsAg、HBeAg、HBcAb)30例;小三阳(HBsAg、HBeAb、HBcAb)30例;HBsAg、HBcAb二项阳性检测出30例;HBsAb、HBeAb、HBcAb三项阳性检测出30例,单独HBcAb阳性检测出30例。
标本共计150例。
随后对该150份样本采用荧光定量PCR法检测血清HBV-DNA载量,分析两种检测方法的检测结果。
结果:大三阳组中,HBV-DNA阳性率为86.67%,平均病毒载量为3.11 E+107 。
小三阳组中,HBV-DNA阳性率为53.33%,平均病毒载量为5.46 E+104。
HBsAg、HBcAb二项阳性组,HBV-DNA阳性率为26.67%,平均病毒载量为1.50 E+104。
HBsAb、HBeAb、HBcAb三项阳性组,HBV-DNA阳性率为0.00%,平均病毒载量为0。
HBcAb阳性组,HBV-DNA 阳性率为3.33%,平均病毒载量为6.57 E+103。
五组中大三阳组HBV-DNA阳性率及病毒载量最高,与其他四组比较,数据差异显著(P<0.05)。
结论:光激电化学发光法检测乙肝两对半与荧光定量PCR法检测HBV-DNA结果有关联性,两者联合检测,对乙肝肝炎的诊疗意义较大。
【关键词】光激电化学发光法;荧光定量PCR;乙肝两队半;乙肝病毒DNA【中图分类号】R512.62 R446.6 【文献标识码】A 【文章编号】2096-5249(2022)30-066-03Analysis of the results of light induced electrochemiluminescence and fluorescent quantitative PCR in detection of HBV-DNAWu jie-ying, Hu Shan-shanLaboratory, Dongguan Hengli Hospital, Dongguan 523460, Guangdong, China【Abstract】Objective: To compare the effects of photostimulated electrochemiluminescence and fluorescence quantitative PCR in the detection of hepatitis B virus(HBV). Methods: Hepatitis B virus surface antigen(HBsAg), hepatitis B virus surface antibody(HBsAb), Hepatitis B virus E antigen(HBeAg), hepatitis B virus E antibody (HBeAb), hepatitis B virus core antibody(HBcAb)were detected by photoexcited electrochemiluminescence. Thirty cases of HBsAg, HBeAg and HBcAb were screened. HBsAg, HBeAb and HBcAb in 30 cases; HBsAg and HBcAb were detected in 30 cases. 30 cases were positive for HBsAb, HBeAb and HBcAb, and 30 cases were positive for HBcAb alone. A total of 150 samples were collected. Subsequently, the 150 samples were tested for HBV DNA load by fluorescence quantitative PCR, and the results of the two detection methods were analyzed. Results: the positive rate of hbv-dna was 86.67%, and the average viral load was 3.11 E+107. The positive rate of hbv-dna was 53.33%, and the average viral load was 5.46 E+104. In HBsAg and HBcAb positive groups, the positive rate of hbv-dna was 26.67%, and the average viral load was 1.50 E+104. HBsAb, HBeAb and HBcAb positive groups, hbV-DNA positive rate was 0.00%, the average viral load was 0. In HBcAb positive group, the positive rate of hbv-dna was 3.33%, and the average 作者简介:吴洁莹(1987.04—),女,本科,主管技师,研究方向:检验医学。
乙肝两对半与HBVDNA的血清学检测结果分析
乙肝两对半与HBVDNA的血清学检测结果分析摘要】目的:为进一步探讨了解乙肝两对半和HBVDNA的关联,有效的控制HBV提高依据。
方法:运用荧光定量PCR(FQ-PCR)检测乙肝患者血清中的HBVDNA,同时运用 ELISA方法检测HBsAg、抗-HBc、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe,并对结果进行相关性分析探讨。
结果:本组研究结果中,HBsAg阳性HBVM阴性与HBsAg阳性HBVM阳性HBVDNA检出率相比较两者之间有非常显著的统计学差异(P<0.01);HBsAg阳性HBVM阴性与HBsAg阴性HBVM阳性HBVDNA检出率相比较两者之间有显著的统计学差异(P<0.05)。
结论:HBsAg阳性与HBVDNA复制有密切的关系,对于临床中乙型肝炎的诊断、治疗方案的选择和其疗效考察有很大的指导意义。
【关键词】乙型肝炎;HBVDNA;血清学检测【中图分类号】R156.3【文献标识码】B【文章编号】1005-0515(2011)12-0226-02 乙型病毒性肝炎是一种严重危害人群健康的全球性传染病,对于乙型肝炎的诊断,目前临床中主要是通过血清免疫学检测及荧光定量PCR检测HBVDNA,是判断患者病程和传染性、治疗及预后的主要依据之一。
但由于两对半组合模式的复杂多样性,导致部分患者的HBV感染复制状况难以判断,另一方面HBVDNA虽是乙肝病毒感染和复制的特异性指标,能够强有力的表明其具有传染性[2],但是因为在严格限制要求的实验室条件下,无法迅速有效的检测出来。
笔者通过血清学检测对乙型肝炎患者进行两对半和HBVDNA检查,对其关联性进行分析,现将报道如下。
1资料和方法1.1标本资料:本次分析研究的对象是我院在2009年10月~2010年10月期间到我院进行体检或是住院治疗时检测出来是乙型肝炎的92例患者。
其中,男性48例,女性44例,年龄在3~70岁之间,平均年龄为34.2岁。
1.2仪器和试剂:本次研究中HBsAg定量检测所使用的仪器是由美国雅培公司生产的i2000免疫发光检测系统,诊断时所使用的试剂也均是由此公司提供的;HBVDNA检测仪是由美国Perkin Elmer公司提供的PE7000自动荧光PCR仪,FQ-PCR试剂盒的灵敏度为200copies/ml,是由中山大学提供;ELISA诊断试剂盒是由上海荣盛生物技术有限公司提供。
PCR定量检测HBV-DNA与HBV标志物关系探讨
结 果 阴性 , 有 可 能与 e系 统 检 测 的 试剂 质 量有 关 。 亦
1 2 仪 器 试 剂 和 方 法 乙 型 肝 炎 J 标 志 物 HB A 、 一 . 靓清 sg抗 HB 、 e g 抗 一 HB sHB A 、 e和 抗 一 HB , 测 采 用 酶 联 免 疫 c检 ( IS 方 法 , 剂 由 上 海 科 华 生 物 技 术 有 限 公 司 提 供 ; E A) I 试 HB V—D NA定 量 检 测 仪 器 由 R ce 司生 产 Lg t yl 荧 oh 公 ihC ce r
拷 贝数 > 10 0/ 者 有 8 . ×1。ml 5例 , 均 拷 贝数 为 1 4 ×l m ; 1 平 . 2 O/ l在 2例 HB Ag HB A s 、 e g标 志物 阳性 的
标本 中 , V D HB NA 阳性 1 1例 , 平均 拷 贝数 4 4 ×1 ml在 9 例 HB A 、 HB 、 HB 标 志 物 均 . 2 0/ ; 9 s g抗 e抗 c 阳性 的 标 本 中 , V— D A 阳性 者 为 3 HB N 9例 , 均 拷 贝数 为 9 8 0/ ; 在 2 7例 HB 平 . 9 1 ml而 x 0 V—M 标 志 物 全 阴 性 的 标 本 中 , 有 4例 检 出 HB — D 仍 V NA> 1 0 1 。ml平 均 拷 贝 数 为 9 5 . × 0/ , . 4× 1。 ml 结 0/ 。 论 在 各 种 HB 标 志 物模 式 中 , HB Ag阳性 者 的 病 毒 复 制 水 平 最 高 , 血 清 中未 检 出 HB V 以 e 而 V— M 者 【 键 词】 HB 关 V—DN 荧光 定 量 P R 酶 联 免 疫 吸 附试 验 标 志 物 A C
血清HBVDNAPCR荧光定量检测指导乙型肝炎治疗的分析
[ 刘 子 君 , 瑞 宗 , 昌茂 , 骨 肿 瘤 及 瘤 样 病 变 1 2] 夺 刘 等. 2
灭活、 植骨, 我们体会为防止复发的关键是病灶彻底刮除, 开 槽应足够大, 做到每个角落均能刮到, 特别注意开窗周边及 骨脊间的凹陷处。灭活是预防复发的进一步保障, 清除病灶
刮除后残留的肿瘤样组织。植骨是保证完全愈合的关键, 植
临 床 分 析E] 中 国矫 形 外 科 杂 志 .9 8 5 4 :2 . J. 1 9 ,( )3 9
收 稿 日期 :0 8 0 — 3 2 0 — 30
作者 简 介 : 全 平 (9 3 ) 男 。 西 省 怀仁 县 人 , 士 学位 , 主 任 医师 , 要从 事 骨 科 临床 工作 。 马 16一 。 山 硕 副 主
性 。结 论 ; 清 HB DN C 荧 光 定 量 检 测 可 以作 为 判 断 HB 感 染 不 同病 程 的有 效 指 标 , 指 导 乙型 肝 炎 诊 断 、 血 V AP R V 为 治 疗提供参考 。 关键词 H VD P R 荧 光 定 量 检 测 ; B NA C 乙型 肝 炎 ; 析 分 文 献 标 识 码 : B 中 图 分 类号 : 1 . R5 2 6 2
文章 编 号 : 6 1 6 1 2 0 ) 8 6 8 0 1 7 —8 3 ( 0 8 0 —0 8 — 2
血清 HB VDNAP R 荧 光定 量检 测指 导 乙型 肝炎治 疗 的分 析 C
李 钧 , 吴 虹
( 治 市人 民 医 院 , 西 长 治 长 山 060) 4 00
摘 要 目的 : 用 P R 体 外 扩增 法 定 量 检 测 乙 型 肝 炎 病 毒 D 采 C NA 的载 量 , 乙 型 肝 炎 的 治 疗 提 供 参 考 方 法 : 为 采
乙肝血清学标志物与荧光PCR检测HBV-DNA结果分析
4 3 7 份 血清标本 均来 自2 0 1 2 年1 月 至2 0 1 2 年1 0 月我院 门诊 患者 ,其
中男 [  ̄ 2 6 8 例 ,女性 1 6 9 例 ,年龄为5 - 7 0 岁。
传 染性 的直 接证 据 。 因此 ,H B V - D N A定量 测 定对 乙肝病 毒感 染 者
临床 诊疗 ,抗病毒 治疗效 果考核及 预后判 断均具 有重要意 义 。表 I 可
见 :几 种H B V m模 式 中 ,大 三 阳患者 的D NA阳性 检 出率 ( 9 4 . 4 %)
和拷 贝数 ( 4 . 1 3 ±1 . 5 7 ) ×1 0 / mL 均 比其他模 式高 ,并有显 著性 差 异 ,反 映 出病 毒复 制 活跃 ,病毒 对机 体具有 一定 的破坏 性 。传染 性
联 免疫吸 附试验 ( E L I S A) 法检 测 乙型肝 炎病 毒标 志物 ( H B V m) , 同时 用实 时 荧光 P C R 法对 乙肝 病毒 定量检 测 ,两种检 测结 果进行 相 关 性 分析 。 结 果 1 2 6例 大 三 阳 ( H B s Ag 、H B e A g 、H B c A b为 阳性 ) 标 本 中 ,检 出 H B V - D N A 阳性率 为 9 4 . 4 %,拷 贝数 为 ( 4 . 1 3 士1 . 5 7 )X 1 0 / mL 。在 1 0 7 例 小三 阳 ( H B s A g 、H B e A b 、H B c A b为 阳性 )标 本 中,检 测 出 H B V - D N A 阳性率 4 2 . 1 %,拷 贝 数 为 ( 3 . 7 6 士1 . 9 4 )X 1 0 / m L 。在 7 4例 H B s A g 、H B c A b为 阳性标 本 中 ,检 测 出 H B V - D N A 阳性率 为 3 5 . 1 %,拷 贝数 为 ( 2 . 3 9 ±1 . 7 4 )X 1 0 4 / m L 。在 4 1 例H B s Ab阳 性标 本 中 ,有 1 例标 本检 出 H B V - D N A 阳性 ,阳性率 为 2 . 4 % ,拷 贝数 为 ( 3 . 2 7 土1 . 0 3 ) ×1 0 / mL 。而 在 7 8例 全 阴标 本 中,也检 测 出 2 例 H B V - D NA 阳性 ,阳性 率 为 2 . 6 %,拷 贝数 为 ( 3 . 5 5 土1 . 4 6 ) ×1 0 / mL 。结 论 H B V - D NA 在各 种 乙肝 血 清 学标 志物 模 式 中 ,均可检 出 ,但
荧光定量PCR检测HBV-DNA与ELISA法乙肝免疫学检测的探讨
E L I S A法呈 大三 阳组 患者的 H B V — D N A阳性 率及病 毒平均 拷贝数 均高于 小三阳组 ; HB e A g( +) 组 的 阳性 率及病 毒平均 拷 贝数 高于 HB e Ag( 一) 组; HB e A b( +) 组 有较 低的 HB V— D N A阳性 率及 病毒 平均 拷贝数 。 结论 HB V — D N A的含量 与乙肝免疫学检测结 果具有相关性 。临床上应注意两者联合应用 。
DNA h a d t h e c o r r e l a t i o n wi t h i mmu n o l o g i c a l d e t e c t i o n o f h e p a t i t i s B. We s h o u l d p a y a t t e n t i o n t o t h e c o mb i n a t i o n o f t h e m i n c l i n i c a d HB V I mm u n o l o g i c a l I n d e x e s i n E L I S A me t h o d . Me t h o d s Q u a n t i t a t i v e d e t e c t i o n o f H B V — DN A a n d
P r o v i n c e , Li a n g s h a n 61 5 0 00, Chi na
荧光定量PCR检测HBV-DNA与ELISA方法测定乙肝五项指标相关性分析
【 摘要】 目的 荧光定量聚合酶链反应( Q— C ) F P R 检测 乙型肝炎患者血清中H V— N B D A的含量, 了解其与酶联
免 疫 吸 附测 定 ( LS 方 法 测 定 乙肝 五 项 指 标 的 关 系 。方 法 E IA) 采用F Q—P R技 术 和 E IA 方 法 , 别 检 测 100例 乙 C LS 分 0
临床和实验 医学杂志
20 0 9年 1月 第8卷 第 1期
・8 ・ 7
荧 光定 量 P R检 测 H V—D A与 E IA方 法 测 定 C B N LS
乙肝 五 项 指 标 相 关 性 分 析
石伍 华 王海清 许 艾 明 胡群 帆
4 10 ) 4 4 0 ( 湖北 省 宜城 市人 民 医院检验 科 湖 北 宜城
酶原 , 抑制血小板 聚集 ¨ 。研究 认 为 , 蛭 内所 含水蛭 素 与 水 血液混合 , 可阻止凝血酶作用 于纤维 蛋 白原 , 缓或阻 碍血液 淤 延 滞, 并能缓解动脉痉挛 、 降低 血液 黏滞 度。同时 , 水蛭还可分泌 一 种组织胺 样物质 , 使毛细血管扩张而增加 出血 。经水蛭治疗后 的
Байду номын сангаас为本院 20 0 7年 6月至 20 0 8年 6月住院及 门诊
0 男 0 平 识 。本文对本科室 20 0 7年 开展荧 光定 量 P R检 测 H V—D A C B N 的经 临床 确诊 的乙型肝 炎患者 10 0例 , 性 70例 , 均年龄
以来 的资料进行 回顾性分析 , 并对 100例 乙型 肝炎患者血 清标 4 0 2岁 ; 女性 3 0例 , 均年 龄 3 0 平 8岁 。乙型 肝炎诊 断标 准符 合文 志物不 同模式及荧光定量 P R检 测结果 进行 比较 , C 现将 分析 结 献 [ ] 2 。健康对照组 2 0例 , 男性 1 , 0例 平均年龄 4 ; 0岁 女性 1 0
实时荧光定量PCR检验乙肝DNA的检测结果的分析
实时荧光定量PCR检验乙肝DNA的检测结果的分析【摘要】目的利用实时荧光定量PCR针对乙肝DNA开展检测,分析为检测结果产生影响的各方面因素。
方法此次研究针对300例病例,且全部确诊为乙型肝炎病毒感染,收治开始和结束时间分别为2021年3月、2022年2月,对患者血液标本开展采集,利用实时荧光定量PCR对其进行检测,分析检测结果。
结果300例标本中,实时荧光定量PCR诊断乙肝DNA准确260例,占比86.67%;漏诊误诊40例,占比13.33%。
实时荧光定量PCR诊断准确率和临床诊断无较大差异(P<0.05)。
结论在针对乙肝DNA进行检测的过程中,使用实时荧光定量PCR可以产生较高的价值,但是可能会出现误诊等情况,所以需要进行综合预防。
【关键词】实时荧光定量PCR;乙肝DNA[Abstract] objective to detect hepatitis B DNA by real-time fluorescent quantitative PCR and analyze the factors influencing the detection results. Methods in this study, 300 cases were diagnosed as hepatitis B virus infection. The start and end time of admission were March 2021 and February 2022 respectively. Blood samples were collected, detected by real-time fluorescence quantitative PCR, and the detection results were analyzed. Results among the 300 samples, 260 cases (86.67%) of hepatitis B DNA were diagnosed accurately by real-time fluorescent quantitative PCR; 40 cases were missed and misdiagnosed, accounting for 13.33%. There was no significant difference between the diagnostic accuracy of real-time fluorescence quantitative PCR and clinical diagnosis (P < 0.05). Conclusion in the process of detecting hepatitis B DNA, real-time fluorescentquantitative PCR can produce high value, but it may be misdiagnosed,so comprehensive prevention is needed.[Key words] real time fluorescence quantitative PCR; Hepatitis B DNA乙型肝炎病毒是诱发慢性肝炎等一些疾病的主要病毒,属于一种嗜肝病毒科。
乙肝dna检测方法
乙肝dna检测方法
乙肝DNA检测方法主要有两种:核酸杂交法和聚合酶链反应(PCR)法。
1. 核酸杂交法:该方法通过将乙肝病毒DNA片段与标记有放射性核素或荧光染料的探针结合,一旦存在乙肝病毒DNA,则产生特定的核酸杂交信号。
这种方法可以用于检测乙肝病毒的DNA含量、基因型、药物抗性等信息。
2. 聚合酶链反应(PCR)法:PCR是一种体外扩增DNA的技术,可以高度敏感地检测乙肝病毒DNA。
它通过复制乙肝病毒DNA的特定片段,使其达到可检测的水平。
PCR法可以快速、准确地检测乙肝病毒DNA,对乙肝的早期诊断和病毒载量监测具有重要意义。
这两种方法都是常用的乙肝DNA检测技术,具有高度敏感性和特异性,能够辅助乙肝的诊断和治疗。
但是,具体使用哪种方法还需根据医生的建议和实际情况来确定。
乙肝病毒荧光定量PCR检验分析
乙肝病毒荧光定量 PCR检验分析摘要:目的:通过分析乙肝病毒荧光定量PCR检验结果,为乙肝诊治提供依据。
方法:研究时间:2020年5月1日-31日,研究对象为100例乙型肝炎患者,患者均实施荧光定量PCR检验以及实验室血清学检查,分析检验结果。
结果:乙型肝炎病毒血清学标志物(HBV-M)表达模式中大三阳阳性率最高,同时对应乙型肝炎病毒含量水平最高,较其它模式相比均有统计学意义(P<0.05)。
结论:荧光定量PCR检验乙肝病毒可作为乙肝诊断的重要依据,为乙肝的治疗提供数据支持。
关键词:乙肝;乙肝病毒;荧光定量PCR;酶联免疫吸附测定方法乙肝是由乙肝型肝炎病毒感染所引起的一种常见传染性疾病,确诊患者应积极规范治疗,抑制乙肝病毒的复制,减少乙肝病毒对肝脏造成的损伤,降低乙肝并发肝硬化、肝癌等发病风险[1]。
血清学检验是进行乙肝患者检查的常用方法,但是操作期间影响因素多,检验人员容易出现职业暴露问题,只能够定性分析,无法做出定量分析[2]。
近年来,荧光定量PCR技术能够实现对不同病毒水平的定量分析,便于了解不同患者体内相关病毒复制水平,为病毒性疾病的治疗效果评价提供依据,本文对100例乙肝患者乙肝病毒荧光定量PCR检验结果予以分析,详细如下。
1、资料与方法1.1一般资料研究时间:2020年5月1日-31日,研究对象为100例乙型肝炎患者,男性54例,女性46例,年龄:23-76岁,平均年龄(42.60±4.25)岁,患者均明确诊断为乙肝,且检验前3个月内未实施抗病毒治疗,不同患者同意研究,且各项检查资料均有记录。
1.2方法患者均通过酶联免疫吸附测定(ELISA)进行血清学检查与PCR病毒定量分析,主要仪器试剂有ELISA试剂(上海科华公司),HBV-DNA检测试剂(深圳凯杰生物工程有限公司),Roche Light Cycler 480基因扩增分析仪。
血清学检查:HBV免疫学检测按照HBV-M模式,主要指标有乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗体(HBsAb)、e抗原(HBeAg)、e抗体(HBeAb)、核心抗体(HBcAb),空腹抽取5ml静脉血液,离心处理,具体操作严格按照试剂盒操作说明书完成。
HBV DNA荧光定量PCR检测及临床意义
HBV DNA荧光定量PCR检测及临床意义血清HBV-DNA浓度与乙型肝炎病毒感染的严重程度和传染性有关,可用于判断病情和预后,以及观察抗病毒药物的治疗效果。
通常血清 HBV-DNA持续阳性超过6个月会转为慢性肝炎。
抗-HBc阳性患者血清HBV-DNA持续阳性常提示肝受损严重,50%以上抗-HBc阳性慢性活动性肝炎患者,经平均4.5年发展为肝硬化,常与HBV-DNA持续阳性有关。
因此,采用荧光定量PCR检测方法,对乙肝早期诊断、准确判断乙肝患者的带毒状态及药物治疗观察就显得及其重要。
1 资料与方法1.1 一般资料选取 2008年10月~2009年10月,就诊患者检查200例HBVm全阴者血清样本。
1.2 血清标本的采集采用灭菌的一次性带盖塑料管,清晨空腹抽取静脉血5ml,离心分离血清,-20℃冻存备用,集中检测。
1.3 方法荧光定量PCR法检测HBV-DNA,检测仪器为Roche LightˉCycle荧光PCR检测仪,按照试剂盒说明书操作程序对上述血清标本进行检测。
HBV-DNA提取: 血清100μl加DNA提取液1100μl,13000r/min离心10min→弃上清→再加提取液Ⅱ 25 μl,振摇10 s→100 ℃10min→13000 r/min离心10min,上清液备用。
扩增取上清液2 μl,加入盛有扩增反应液38μl(含引物,dNTPs,Taq酶及PCR缓冲液)的PCR反应管中,扩增40个循环,循环参数为37 ℃5min;95 ℃ 1min;60 ℃ 30s。
定量结果采用计算对数平均值的方法来计算HBV-DNA平均拷贝数,遇有阴性结果,不参加平均值的统计。
2 结果200例乙肝标本中有91例HBsAg、HBeAg、抗-HBc阳性的标本中,FQ-PCR检测HBV-DNA全部阳性,阳性率100%,平均HBV-DNA拷贝数为2.8×106/ml。
3 讨论乙肝病毒血清标志物检测是目前诊断乙型肝炎最常用的指标,主要反映人体对乙肝病毒的免疫反应状态,不同血清标志模式反映不同的临床意义。
HBV-DNA乙肝患者的检测结果观察与分析
H V D A 剂 由中 山大 学达安 基 因股份 有 限公 B- N试
司提 供 , 用核 酸扩 增(C ) 采 P R荧光 定量检 测技 术 , 操作 及结 果 判断 均严格按 试 剂说 明 书进 行 。 果 表 1 结 结果显示 大三 阳模 式 中H V D A B - N
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hbv 分型检测内容
hbv 分型检测内容
HBV分型检测是基因扩增检测实验室(PCR实验室)进行的一项检查,通过取自患者血液及其他体液、细胞中提取的HBV DNA进行检测的技术。
具体检测内容如下:
1. 全面型别分析:提取出来的HBVDNA经过扩增基因信息后,通过特定设备对乙肝患者细胞中的HBVDNA分字进行分子信息检测,分析它所含有各种基因型的情况。
2. 分型针对性治疗:为乙肝患者诊断、抗病毒用药治疗、预后提供了重要的指导依据。
HBV分型检测可以诊断识别常见的A-H乙肝HBV基因具体分型。
其中,A型易于转为慢性乙型肝炎,B型通常病程轻微,C型易发重症肝病,D型则表现为急性自限型乙型肝炎。
如果需要进行HBV分型检测,请在专业医师指导下进行,切勿自行诊断。
超敏荧光定量PCR法核酸检测与乙肝两对半联用在乙肝防控中的临床应用
超敏荧光定量PCR法核酸检测与乙肝两对半联用在乙肝防控中的临床应用摘要目的探讨超敏荧光定量聚合酶链反应(PCR)法核酸检测与乙型肝炎(乙肝)两对半联用在乙肝防控中的臨床应用。
方法155例乙肝患者分别采集血清样本,利用化学发光法和基于磁珠法自动化核酸提取的超敏荧光定量PCR法分别进行乙肝两对半和乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)检测。
结果155例样本中乙肝两对半共检出12种血清类型,其中小三阳占58.06%,大三阳占20.00%。
155例样本超敏荧光定量PCR总阳性率为62.58%,检测下限低至10 IU/ml,其中小三阳阳性率为66.67%,HBV-DNA平均含量(6.17±0.91)lgIU/ml;大三阳阳性率为90.32%,HBV-DNA平均含量(6.98±1.02)lgIU/ml。
小三阳和大三阳组超敏荧光定量PCR阳性率及HBV-DNA平均含量比较差异均有统计学意义(P<0.05)。
结论基于磁珠法自动化核酸提取的超敏荧光定量PCR 法可准确测定病毒载量,检测下限低至10 IU/ml,与传统乙肝两对半联用有助于乙肝的临床诊断、用药指导及疗效监测。
关键词乙型肝炎病毒;磁珠法;核酸提取;超敏;荧光定量;聚合酶链反应乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)是一种嗜肝DNA病毒,可引起急性肝炎、慢性肝炎、重症肝炎等,部分患者可演变成肝硬化或肝癌。
乙肝已成为世界性公共卫生问题,我国为乙肝高发区,人群表面抗原携带率高达7.18%,慢性乙肝患者约2000万[1]。
乙肝流行形势严峻,及时并准确检测HBV对防控乙肝尤为重要。
目前临床多采用免疫学方法检测HBV血清标志物,包括乙肝表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎表面抗体(HBsAb)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝e抗体(HBeAb)和乙肝核心抗体(HBcAb),即乙肝五项或乙肝两对半,可反映机体感染后的免疫状态,但不能直接反映病毒在体内的复制状况,且对空窗期或者隐匿性乙肝患者易漏检[2]。
荧光定量PCR_检测HBV-DNA_与化学发光法乙肝免疫学检测的探讨
荧光定量PCR检测HBV-DNA与化学发光法乙肝免疫学检测的探讨高振霞(南京市六合区人民医院检验科,江苏 南京 211500)【摘要】目的:探讨采用荧光定量PCR检测HBV-DNA与化学发光法乙肝免疫学检测的效果。
方法:选择来我院感染科门诊就诊40例HBV感染患者,乙肝免疫学检测采用化学发光法,HBV-DNA检测采用荧光定量PCR法,对结果进行分析。
结果:大三阳患者对比小三阳患者,血清HBV-DNA检出率明显更高,平均拷贝数明显更低,P<0.05。
结论:HBV-DNA复制密切相关HBeAg阳性以及HBsAg阳性,防治乙肝过程中,重要手段是荧光定量PCR检测HBV-DNA与化学发光法乙肝免疫学检测。
【关键词】荧光定量PCR检测;HBV-DNA;化学发光法;乙肝免疫学检测【中图分类号】R512.62 【文献标识码】A 【文章编号】2096-5249(2023)04-0077-04乙型肝炎患者发病后,生活质量降低,情况严重的患者会发生原发性肝癌、肝硬化。
慢性病乙型肝炎,是一种肝脏炎性疾病,发病原因是因为患者感染乙型肝炎病毒,严重危害患者身体健康,属于病毒性肝炎类型。
我国是乙肝大国,感染的个体中,约10%会成为慢性携带者,其中一部分乙肝携带者会罹患慢性肝炎[1],应为这一类患者实施病毒治疗。
为指导乙肝防治工作,检验科分析了化学发光法乙肝免疫学检测与荧光定量PCR检测HBV-DNA之间的关系,用于临床诊断及治疗。
随着各种检测手段技术的提高,在临床筛查工作开展期间,针对乙肝患者取得了不错效果,有助于认识乙肝血清学标记物的意义。
现阶段中,在乙肝筛查以及诊疗期间,常用乙肝免疫学指标检测,例如乙肝两对半检测,可以用化学发光法对患者机体内的乙肝病毒免疫反应状态进行有效反映。
缺点是该法不能对HBV核酸复制情况进行直接表达,这就需要借助其他方法对核酸进行监测。
而HBV-DNA检测法具有监测作用,该法可以对HBV复制传染性以及活跃度进行反映。
荧光定量PCR 检测HBV-DNA 与ELISA 法乙肝免疫学检测的探讨
World Latest Medicne Information (Electronic Version) 2021 Vo1.21 No.14260投稿邮箱:zuixinyixue@·医学检验·荧光定量PCR 检测HBV-DNA 与ELISA 法乙肝免疫学检测的探讨周晓莹,林珠,胡塔,邝炎波(通信作者)(广东省妇幼保健院 检验科,广东 广州 510010)0 引言乙型肝炎病毒是流行最广,危害最严重的病毒性肝炎,在我国,HBV 感染人群可达到60%以上,其中乙肝个体中10%可导致慢性携带状态,其中一部分会发展成慢性肝炎,需接受抗病毒治疗。
临床表现为恶心、食欲减退、腹部不适和肝区疼痛等症状。
有些患者还可出现黄疸发热和肝功能损害,若未进行有效的治疗和病情控制,可发展成肝硬化,甚或是肝癌[1]。
因此,对乙肝病毒的检测和诊断就非常重要了。
乙肝逐渐成为世界性慢性疾病,在乙肝患者的诊断中,实时荧光定量PCR 可通过敏感反应HBV 病毒水平,ELISA 法能够对病型进行分型[2]。
为了进一步探讨HBV-DNA 和乙肝免疫学检测的关系,指导临床乙肝防治工作,现将乙型肝炎的两种检测结果进行分析,现报告如下。
1 资料及方法1.1 一般资料。
研究对象是我院2018年4月至2020年4月在我院检测的172份HBsAg 反应性的血液样本,所有样本均行ELISA 法乙肝免疫学指标检测和荧光定量PCR 检测HBV-DNA 。
在这些标本所属的患者中,包括男性112例、女性60例,年龄:年龄18~66岁、平均(44.23±4.27)岁,所有患者的HBsAg 均为阳性。
根据化学发光酶联免疫检测方法(ECLIA )检验结果的阴阳性进行分组,大三阳组58例[HBsAg (+)HBcAb (+) HBeAg (+)]、小三阳组32例[HBsAg (+)HBcAb (+) HBeAb (+)]、A 组38例[HBsAg (+)HBeAg (+)]、B 组21例[HBsAg (+)HBeAg (-)]、C 组23例[HBsAg (+)HBcAb (+)]。
乙肝病毒DNA荧光定量PCR检测对临床诊断的意义
乙肝病毒DNA荧光定量PCR检测对临床诊断的意义发表时间:2017-02-27T14:48:38.107Z 来源:《健康世界》2017年第1期作者:许建助[导读] 荧光定量PCR测定 HBV DNA在多种模式的乙肝病毒标志阳性血清或阴性血清都可查出。
云南省腾冲市妇幼保健计划生育服务中心云南腾冲 679100摘要:目的分析乙肝病毒DNA(HBV-DNA)的荧光定量PCR(FQ-PCR)检测对临床诊断的意义方法对我院2015年3月到2016年3月收治的420名乙肝患者作为研究对象,抽取420名患者的临床血清标本通过ELISA法进行定性检测,根据乙肝两对半定性结果进行分组,最后采用荧光定量PCR技术进行定量检查。
结果 95份乙肝病毒标志物HBsAg、HBeAg、HBcAb标本中有89份 HBV-DNA为阳性,阳性率为93.7%,荧光定量PCR拷贝数为(4.19±1.16)×10 7 /ml;130份乙肝病毒标志物 HBsAg、HBeAb、HBcAb标本有92份HBV-DNA阳性,阳性率达到71.7%,荧光定量PCR拷贝数为(4.73±2.49)×10 5/ml;38份乙肝病毒标志物HBsAg、HBcAb标本中有13份 HBV-DNA为阳性,阳性率为34.2%,荧光定量PCR拷贝数为(2.13±1.37)×10 4/ml;75份乙肝病毒标志物 HBsAb的标本HBV-DNA阳性23例,阳性率为3.1%,荧光定量PCR拷贝数为(6.07±0.86)×10 3;82份乙肝病毒标志物全阴性的标本 HBV-DNA阳性11例,阳性率为1.3%,荧光定量PCR拷贝数(2.77±0.79)×10 4 /ml.结论荧光定量PCR测定 HBV DNA在多种模式的乙肝病毒标志阳性血清或阴性血清都可查出,能较真实反映体内HBV感染、复制和病毒载量情况,具有一定的临床早期诊断的价值。