细菌总数与大肠菌群的测定.ppt

3
2,890
271 60
2.2 27，100 27，000或2.7×104
4
不可计 4，650 513
— 513，000 510，000或5.1 ×105
5
27 11 5 —
270
270或2.7 ×102
6
不可计 305 12
— 30，500 31，000或3.1 ×104
7
不可计 不可计 不可计 —
稀释度选择及细菌总数报告方法
平均 菌落
稀释
数 倍数
例次
稀释液及菌落数 两稀释度 细菌总数
10-1
10-2 10-3 菌落数之比 (个/g或个/ml)
报告方式 (个/g或个/ml)
1
1,365 164
20 — 16，400 16，000或1.6×104
2
2,760
295 46
1.6 37，750 38，000或3.8 ×104
（ 注明水样的稀释倍数）
稀释度的选择：
1. 应选择平均菌落数在30-300之间的稀释度，乘以稀释倍数报告之（见表 例1）。
2. 若有两个稀释度其生长之菌落数均在30-300，则应视二者之比如何来决定， 若其比值小于2，应报告平均数。 若其比值大于2则报告其中较小的数字（见表例3）。
3. 若所有平均菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍 数报告之（见表例4）。
10-3无法计数
菌落计数的报告:
菌落数
报告结果
1、 30~300 之间
平均菌落数 X 稀释倍数
2、 (若有两个稀释度) 在30~300之间
求比值 > 2 取较小稀释倍数 < 2 取平均数
3、 > 300 最高稀释度平均菌落数 X 最高稀释倍数
4、 < 30 最低稀释菌度平均落数 X 最低稀释倍数
5、 > 300 < 30
：
无菌平皿 12个 / 桌
1ml无菌吸管6支 / 桌
500ml量筒1个
3、方法：
1.先将营养琼脂粉加蒸馏水300ml，高压灭菌15镑20`。
2.以1ml无菌吸管吸取样品1ml加入9ml 无菌生理盐水， 使样品成 1：10 和1：100 两个稀释度。
3.分别在无菌平皿内加入1：100、1：10、原样的样品各1ml，每个 稀释度均做两个平行样。注意 ：先加浓度低的样品，再加浓度高 的样品。（2人一组） 4.将冷却45℃的营养琼脂倾注于平皿中，摇匀，置37 ℃培养24小时。
取最接近的 X 稀释倍数
6、 无法计数
报告无法计数
2.大肠菌群的检测 示教 检品
胆盐乳糖发酵管 伊红美兰平板
大肠杆菌菌落纯培养 乳糖复发酵管（-） 乳糖复发酵管（⊕）
饮用水、乳、冷饮食品卫生标准的细菌指标
指
标
品种
细菌总数
大肠菌群
wenku.baidu.com
饮用水
＜ 100个/ml
＜3个/L
消毒牛奶
≤ 30，000个/ml ≤40个/100ml
.
4、菌落计数：
1、平皿分4部分点数（见图） 2、求同一稀释度的平均菌落数 如： A1数 + A2数
2
5. 菌落计数的报告：
1）平板菌落数的选择 2）稀释度的选择 3）菌落数的报告
菌落数＜100
按实有数报告
菌落数＞100 采用两位有效数，后面数
值 四舍五入（也可用10的指数表示）
无法计数
无法计数报告
瓶装汽水、果味水 及果汁类饮料
≤ 100个/ml
≤5个/100ml
实验八
细菌总数与大肠菌群的测定
一、细菌总数测定法 （操作，2人/组）
二、大肠菌群的检测 示教
1、细菌总数测定法 （操作，2人/组）
1.原理：
用营养琼脂倾注平板，测定被检物在单位重量或体 积（g或ml）内所含有的活细菌数量，以判明被检物被 细菌污染的程度。
细菌学检验程序
细菌总数
水样稀释或不稀释
倾注平板培养 37 ℃ 24小时
样品
大肠菌群
水样稀释或不稀释
第一步------ 初步发酵试验 （乳糖发酵）
37℃ 24小时
菌落计数 （取平均数报告）
第二步------ 平板分离培养 （转种鉴别培养基） 37℃ 24小时 革兰染色镜检
第三步------- 乳糖复发酵试验
报告结果
2、材料： 9ml无菌生理盐水 4支/桌
营养琼脂粉 + 蒸馏水300ml
4. 若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落数 乘以稀释倍数报告之（见表例5）。
5. 若所有稀释度的平均菌落数均不在30-300之间，其中一 部分大于300或小 于30时，则以最接近30或300的平均菌 落数乘以稀释倍数报告之 （见表例6）。
6. 若所有稀释度的菌落数均不可计数，则以最高稀释倍数无法计数 报告之 （见表例7）。