驱动蛋白Kif5b对人脐静脉内皮细胞血管形成的作用
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第46卷第-期2221年1月
贵州医科大学学报
Voi.44 No.l
JOURNAL OF GUIZHOU MEDICAL UNIVERSITY
2221. l
驱动蛋白Kf5b 对人脐静脉内皮细胞血管形成的 作用*
*•[基金项目]贵州省卫健委科学技术基金项目(owaj2013 - 1 -020);贵州省科技创新团队项目[黔科合人才团队(2015)4225];贵州省科技厅省校合作联合
基金项目[黔科合LH 字(2212)72/5];贵州省髙层次创新型人才百层次人才项目[贵州省科技厅黔科合人才(2212)4027];贵州省教育厅自然科学基金优秀 人才计划[黔教合KY 字(2013)043]
• *通信作者 E-mxl : 5ezUaug@ gmc. cdu. cn
罗语思2肖美兰2陈妍4,张科6…
(0贵州医科大学附属医院急诊科,贵州贵阳550004; 41贵州医科大学药学院贵州省高等学校天然药物药理与成药性评价重点实验
室,贵州贵阳550025 ; 8.贵州医科大学基础医学院现代病原生物学特色重点实验室&基础医学院寄生虫学教研室&药学院天然药物
资源优效利用重点实验室,贵州贵阳550025)
[摘 要]目的探讨驱动蛋白Kh5b 对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)血管形成的作用。方法以人KZ5基
因序列为模板设计小发夹RNA(shRNA )序列,同时设阴性对照shRNA,均以P LL3. 7慢病毒包装系统包装
shRNA,随后感染HUVECs 敲减Kh5b 蛋白,最后将Kh5b 敲减的HUVECs 作为Kh5b 实验组,阴性对照组作为
Kh5b 对照组;采用Western blot 实验检测9组HUVECs 中Kh5b 的表达,采用细胞成管实验和细胞划痕实验分别
检测9组HUVECs 的细胞成管率和细胞迁移速度。结果 Kh5b 实验组HUVECs 的Kh5b 表达较Kh5b 对照组 下降,差异有统计学意义(P <0 25) ;Kh5b 实验组HUVECs 细胞成管率明显低于Kh5b 对照组,差异有高度统计 学意义(P <2. 002 1) ;Kh5b 实验组HUVECs 细胞迁移速度明显低于Kh5b 对照组,差异有高度统计学意义(P <
0 002 1)o 结论 在体外实验中,驱动蛋白Kh5b 能够正向调控HUVECs 血管形成。
[关键词]驱动蛋白;Kh5b 蛋白;人脐静脉内皮细胞;小发夹RNA ;细胞成管率;细胞迁移速度;血管形成
[中图分类号]R732. 7 [文献标识码]A [文章编号]2096-8333(2091 )21-523636
DOI : 12. I9367/p chdi, 0096-8333.0021.01.026
EffecSs stedy of a kinesin Kif5b on the angiogeoesis of HUVECs
LUO Yusi 1, XILO Meilax 1, CHEN Yau 2, ZHANG Ko 7
(7. Departmenr f Emergeaco , mp AfiOmd Hospital of Guizhou Medical University , Guiyang 550004, Guizhou , China ;
2. K, Laloratorg U OptimaO Utilizatiou U NaturaO Medicine Resources ‘ScOd U Poarmaceiuical Ociencet , Guizhou MedicaO University , Guiyang 555025, Guizhou , Coina ;
3. K oo an,n Characteristie Laboratorg cf
MoUera Patyoued Bioloua & Parasitoloua Divisiou , Basie Medical Colle po & Key aag Characteristie
Laboratorg U U p Higo Ejficaco Applicatiou U Natural Medicinal Resources , S c O oo I U PharmacelUical
SOenes, Guizhou Medicai University , Guiyang 555055, Guizhou , China )
[Abshuch ] Objective To investigate the e/ect of a kin/in , Kif5b on the xig/go/is of human
umbi/chi vein eudothelial cells ( HUVECs ). Methods The smal l hai/in RNA ( shRNA ) was
designed with human KlfSO gov sepueuco as template , and nepaUve cootml shRNA was also d/ign/O. shRNAs were pbchageP with pLL3. 7 leutivi/s pbchabing system , they infect the HUVECs cells to knoch down its Kihb protein - And they set HUVECs with Kihb knoched down as Ki/b test gmop , the negative cootml gmop as Ki/b coot/l gmop. The Ki/b expression level of two gmops was
measured by western b/h And the rate of tuUv foknatiox and cel l migration of two gmops was tested by the tuUv feknatioo xsay and scratch xsay. Restlts
Compared with cootml gmop , immunod/tting
results shows that the Ki/b expression -eve- in pLL3.2-shKi/b HUVECs decreased 31X111/01110- And
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