AFP-L3体检应用

前10名癌症每10万人死亡数
2012中国肿瘤登记年报
慢性肝病是导致恶性肝病的罪魁祸首
慢性肝病包括： 慢性肝炎、非酒精性脂肪性肝病、酒精性脂肪性肝病、药 物性肝病、自身免疫性肝病等。
恶性肝病的危害
肝癌出现典型症状诊断不困难，但多失去治疗机会，或预后不佳
肝癌起病隐匿，多发生于中年男性，恶性度高、病情进展快，死亡率高。
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A U C = 0 .6 8 5
125 100 75 50 25 0 0 25 50 75 100 125
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S e n s itiv ity %
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1 0 0 % - S p e c ific it y %
中华实验和临床病毒学杂志，2007， 21（2）：135-137
AFP-L3: 鉴别良恶性肝病
国内外研究结果都一致表明：慢性肝病血清 AFP-L3百 分比很低, 而原发性肝癌很高, 表明AFP-L3测定非常有
助于良、恶性肝病的鉴别诊断。
应用AFP-L3鉴别良、恶性肝病应注意以下题:
(1) AFP-L3上升与血清 AFP 值无关, 只要AFP 阳性, AFP-L3 就可能高； (2) 大量研究表明血清 AFP 为 20～50ng/ml , 而AFP-L3呈阳 性，从而使肝癌得到及早诊断。因此, AFP-L3也非常适用于 AFP低浓度阳性良、恶性肝病的鉴别诊断； (3) 约有35% ～ 45% 小肝癌 (直径< 2 cm ) 病人已显示AFPL3显著升高。因此, AFP-L3对肝癌早期诊断很有价值。
20-50%的慢性 肝炎、肝硬化 也合成AFP
2010 版美国肝病研究学会(AASLD)指南已不再将 AFP作为筛查指标 但我国的HCC大多与HBV感染相关，与西方国家 HCC致病因素不同（多为HCV、酒精和代谢性因 素），结合国内随机研究(RCT) 结果和实际情况， 目前对HCC的常规监测筛查指标中继续保留AFP。
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鉴别良恶性肝病
研究一：HCC与良性肝病
AFP-L3%对HCC检 测的特异性高达 95%以上。
《日本医师会雄志》2004年第131卷第5期
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研究三：综合性能对比
%
AFP-L3%，AFP 对肝病鉴别诊断的对比 （检验科常规应用数据统计）
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A U C = 0 .8 6 7
125 100 75 50 25
超过60%的肝癌患者在初次就诊时已经进入中晚期，根治性手术切除率仅
在10%左右，手术后五年的复发率高达65%
肝癌术后1、3、5年生存率
• ≤5cm • >5cm
分别为89.9%，85%，79.8%
分别为62.5%，42.6%，27.5%
肝癌 普查
早诊 早治
提高 预后
8
恶性肝病的筛查目的
除慢性病毒性肝炎外，由其它肝病导致的肝纤维化、肝硬化早期缺乏 特异性的临床表现，而往往被忽视，许多肝纤维化不治疗或治疗不彻底 很快发展为肝硬化，还有部分肝纤维化同时伴有肝硬化。一旦发展为肝 硬化，治愈相当困难。
特异性不同的各类 HCC诊断标志物
文献:Recent Developments in the First Detection of Hepatocellular Carcinoma Joseph B. Lopez Clin Biochem Rev Vol 26, August 2005 I 65
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操作 时间 回收率 灵敏度 价格 实验模式
凝集素亲和电泳法 热景生物产品
繁琐 48小时 --5ng 高 自行检测 简单、半自动 40分钟 ≥92% 1ng 低廉 开放，配套用
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检测原理
Glycoforms of Alpha-Fetoprotein (AFP) Glycoform AFP-L1 AFP-L2 AFP-L3 Affinity for LCA* Low Intermediate High Associated with inflammatory chronic liver disease Derived from yolk sac + tumors or metastatic liver cancer Expressed by malignant hepatocytes Comment
研究一：半年及三年随访各1例
哈尔滨铁路中心医院
AFP＜400ng/ml AFP-L3%＞10％ CT阴性
AFP＜400ng/ml AFP-L3%＞10％ CT阴性
AFP＜400ng/ml AFP-L3%＞10％
AFP＜400ng/ml AFP-L3%＞10％
CT阳性
CT阳性
筛查常用标志物——甲胎蛋白（AFP）
AFP: 一种糖蛋白。正常情况下，来自胚胎的肝细胞和卵黄囊，胎儿出 生约两周后甲胎蛋白从血液中消失。正常人血清中甲胎蛋白的含量尚 不到20ug/L。 1956年发现，60年代末应用于临床，70年代用于自然人群与肝癌高危
人群普查。至今被公认为优秀的肝癌诊断标记物而广泛使用。
两者联合使用，互相补充，其特异度及灵敏度均较高， 提高了诊断的准确性
AFP-L3%的检测决定于AFP-L3的分离水平
传统异质体测定方法 对于技术的要求较高、 操作繁琐、试剂昂贵。 主要采用亲合电泳显 影技术 热景生物在科技部资 金的支持下，独家研 发出捕获AFP-L3的专 利技术 对比项目
1 0 0 % - S p e c ifi ROC曲线
数据来源：福建省福州传染病医院
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AFP-L3 是肿瘤的恶性程度指标
影像学研究发现AFP-L3%阳性的HCC通常有丰富的肝动脉血液供 给，肿瘤的倍增时间较短。
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联合检测AFP和AFP-L3，显著提高检出效率
* LCA - Lens culinaris agglutinin.
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亲和层析吸附离心 法分离AFP-L3
原理示意图
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AFP-L3%和GP73已在全国范围内快速推广应用
AFP-L3%部分临床应用单位（三甲）：解放军302医院、解放军
307医院、地坛医院、佑安医院、武警总医院、上海东方肝胆医院、上海曙光 医院、上海仁济医院、天津第一中心医院、山东省立医院、南京军区福州总 院、盛京医院、陆军总医院、福州传染病医院。。。。。
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AFP-L3可作为独立的预测肝癌发生的指标
采用AFP-L3 为指标则不受肝癌诊断标准(AFP > 400μgPL) 的限制,当AFP-L3 超过 10 %时,表明恶性肝细胞在增多,其肝恶变的概率非常大。 AFP-L3 作为指标,则具有较高的特异性； 对血清中AFP-L3 超过10 %的患者进行随访和严密的监控是很有必要的。
一般认为，AFP是HCC相对特异的肿瘤标志物，AFP持续升高是发生 HCC的危险因素。
AFP临床价值：a、目前较好的早期诊断方法，可在症状出现前6个月
以上作出诊断，可与影像相互补充。b、为反映病情动态变化和评估 疗效的敏感指标。c、可检查出根治切除术后亚临床期复发与转移
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AFP的不足
近年来有报道指出,以上述标准诊断原发性肝癌,敏感性为39-64%, 特异 性为76-91%, 对早期肝癌具有9-32%阳性预测值 有近1/3的HCC患者AFP为阴性（敏感性不足），同时20-50%的慢性肝炎、 肝硬化也合成AFP（特异性不足）, 这给HCC的诊断带来了困难。 特异性 不足
中国:AFP-L3列入肝癌诊断标准
AFP-L3已在1999年第四届全国肝癌学术会议上获得通过， 确定为原发性肝癌临床诊断标准的肝癌标记物之一。 认为是比单纯的AFP更为特异的原发性肝癌指标。
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中国： AFP-L3进入《原发性肝癌诊疗规范（2011版）》
血清AFP 及其异质体是诊断肝癌的重要指标和特异性最强 的肿瘤标记物，国内常用于肝癌的普查、早期诊断、术后 监测和随访。
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肝癌早期诊断套餐
血清指标：AFP/AFP-L3/GP73
＋
影像学诊断
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谢谢聆听
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如何使用这一指标？
a.分别测定样本中总AFP浓度及其异质体AFP-L3的浓度 b.计算AFP-L3占总AFP比率（AFP-L3/AFP）
以下简写成AFP-L3%，简称异质体比率)
c.以 10% 为Cutoff确认结果
阳性： AFP-L3%≥10% 阴性： AFP-L3%＜10%
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美国：AFP-L3已获得FDA批准
甲胎蛋白异质体（AFP-L3）在体 检中的价值 —防治肝癌，早期体检是关键
北京·热景生物
目 录
恶性肝病筛查的意义 AFP-L3用于筛查的价值
1、恶性肝病筛查的意义
3
筛查的意义
我国乙肝、丙肝发病率呈下降趋势，但生活水平的提高脂 肪性肝病的发病率大幅上升，成为继病毒性肝炎后导致肝 损伤的第二大病因，也是导致恶性肝病发病率上升的主要
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研究三：临床随访实例
解放军第302医院
AFP阳性、 AFP阳性、
临床主诊断
AFP-L3% 阳性
初次诊断非肝癌 21
AFP-L3% 阴性
62
6个月后肝癌
肝癌发生率
12
57.1%
3
4.8%
危险率增加倍数
12倍
该研究揭示AFP-L3与AFP值无相关性，可以作为一个独立肝细胞癌诊断因素。 AFP-L3%对于AFP阳性时良、恶性肝病的鉴别及肝癌的早期预警诊断具有重要意义
?超过60的肝癌患者在初次就诊时已经进入中晚期根治性手术切除率仅在10左右手术后五年的复发率高达65?肝癌术后135年生存率?5cm分别为89985798?5cm分别为625426275肝癌普查早诊早治提高预后恶性肝病的筛查目的除慢性病毒性肝炎外由其它肝病导致的肝纤维化肝硬化早期缺乏特异性的临床表现而往往被忽视许多肝纤维化丌治疗戒治疗丌彻底很快发展为肝硬化还有部分肝纤维化同时伴有肝硬化
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新标志物
基于目前用于肝癌诊断的AFP和影像学的不足，需要敏 感性及特异性更高的新肿瘤标志物辅助肝癌诊断 研究显示，AFP-L3成为新标志物的一线候选。 热景生物在国内首先研发成功上述指标的诊断试剂产品 并通过SFDA注册审批。
12
2、甲胎蛋白异质体AFP-L3
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甲胎蛋白异质体：AFP-L3
变时, 对 AFP 低浓度阳性病例进行AFP-L3检测可
以早期预警肝癌发生［3］。
［1］Chin Med SciJ , 1992, 7 ( 4) : 191- 195 ［2］N Engl J Med, 1993, 328( 25) : 1802-1806 ［3］Hepatology,1995, 22 ( 3 ) :802- 807. 19
54人
肺癌 肝癌 胃癌 食管癌 结直肠癌 17人 14人 26人 26人
46人
乳腺癌
胰腺癌 淋巴癌 膀胱癌 甲状腺癌
胰腺癌
乳腺癌 白血癌 脑癌 淋巴癌
50 60
7人 5人
4人 4人 4人
7人
7人 7人 7人
0 10 20 30 40 前10名癌症每10万人发病数
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40
45
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原因。
患病人数（亿）
乙型肝炎 丙型肝炎 非酒精性脂肪性肝病 酒精性脂肪性肝病
发展为肝硬化比率 12-20%
1.2 我国肝病发病状况 0.4 1.5 0.5
1.5-8%
肝癌的发病率和死亡率
肝癌的发病率仅次于肺癌和胃癌，居第三位。其死亡率 仅次于肺癌。
肺癌 胃癌 结直肠癌 肝癌 食管癌 22人 21人 29人 29人 36人
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AFP-L3: 比AFP更优秀的早期预警指标
AFP-L3随肝细胞癌变在血中升高。研究发现AFP-
L3升高较影像学检查阳性早出现 3～28个月, AFPL3阳性预测肝癌发生的正确率为 94%［1］。 AFP-L3升高的肝硬化病人大多数在 3 ～ 18 个月内 被诊断为肝癌［2］； 另外，在影像学检查尚未发现肝癌特征性占位性病
AFP是糖蛋白，其蛋白上含有不同糖链 依据不同糖链与小扁豆凝集素LCA亲和力，可将总AFP分为 AFP-L1、AFP-L2、AFP-L3，其中：
AFP-L1来源于良性肝病细胞（LCA非结合型） AFP-L2来源于孕妇（LCA弱结合型）
AFP-L3来源于癌变肝细胞（LCA强结合型）