waters分离度和信躁比
waters 气相色谱仪说明
产品简介Alliance系统的核心是Waters 2695分离模块。
2695是基于2690分离模块先进的溶剂和样品管理集成结构，并针对用户的迫切需求进行了大量的设计革新。
产品详细信息【性能参数】Alliance系统主要应用扩展：自动方法开发系统(AMDS)生化分离系统氨基甲酸酯(Carbamate)分析系统自动溶出度测试系统Alliance HT 系统(High Throughput)Alliance 离子分析系统Alliance LC/MS 系统Alliance GPC 2000聚合物分析系统系统配置系统附件在使用HPLC时您会面临这些挑战吗？如何保证系统的正常运行时间？如何培训新手？如何使用数据管理软件？如何技术本身的变异性？如何遵从法规？1996年，Alliance系统突破了传统液相性能的障碍，将HPLC引向了全新的发展方向。
今天，Waters的Alliance 系统重新定义了可靠性、耐用性和现代实验室意义上的性能概念。
随着全新的Alliance系统的使用，现代实验室能够维持全年、全周、全天24小时不停顿的运转。
Alliance系统拥有超群的精度，无需担心突发故障，所有的一切，给用户强大的信心。
遵从法规、培训时间、系统可正常运行时间、结果的变异性和数据管理是多数HPLC用户关心的问题。
这也是我们对Alliance系统提出的要求。
因此你可以确信你的Allanice系统始终运转，始终工作(always on, always working)。
系统介绍最佳的系统才有最佳的结果。
Alliance系统的核心是Waters 2695分离模块。
2695是基于2690分离模块先进的溶剂和样品管理集成结构，并针对用户的迫切需求进行了大量的设计革新。
Alliance系统中的2695分离单元设计可与Empower / MassLynx 软件协同工作，还包括Symmetry和Xterra色谱柱，多种可选的检测器(包括Micromass的ZQ™和Quattro micro™质谱检测器)。
Waters Empower Software关于分离度计算
关于分离度计算
前者，曾论及未购买系统适应性选
择件的用户如何计算半峰宽法柱
效，其后多有用户问及如何计算分
离度。
由公式可知，计算分离度亦
需半峰宽之值：
其中，R 为分离度，RT为保留时
间，W为半峰宽。
本文简述无系统适应性选择件时
如何计算分离度。
1 获取半峰宽之值
1.1 建立名为半峰宽之自定义字段。
名称：半峰宽
字段类型：峰
数据类型：实数
数据来源：计算
公式：1.175*拐点处宽度
宽度：12
精度：6
1.2 启动ApexTrack积分
于处理方法之积分表中设定积分算法为ApexTrack，此时积分即可得半峰宽之值。
其中，半峰宽之单位为秒。
2 计算分离度
2.1 建立名为分离度之自定义字段
名称：分离度
字段类型：峰
数据类型：实数
数据来源：计算
宽度：12
精度：6
公式：
1.18*60*(CCompRef2[保留时间]-CCompRef1[保留时间])/(CCompRef2[半峰宽]+CCompRef1[半峰宽])
2.2 计算分离度
启动ApexTrack算法，于处理方法中指定欲计算分离度之峰对，即CCompRef1与CcompRef2。
然后积分，校正（标准样品）或定量（未知样品）即可得分离度之值。
此法系由色谱理论模型导出，故以此法计算非高斯峰之分离度或有误差，愿知者识之。
沃特世empower 培训EMP 其它 USP计算信噪比说明
Empower 3 计算USP、EP 和JP 信噪比1.计算方法2.使用空白值计算信噪比计算方法软件根据最新的美国、欧洲和日本药典计算信噪比，公式如下:s/n = 2h/h n其中：h = 与组分对应的峰高hn = 在等于半高处峰宽的至少五倍(USP) 或20 倍（EP 和JP）的距离内，观测到的最大与最小噪音值之间的差值，并且，此段距离以空白进样的目标峰区域为中心。
可以指定是否使用处理方法的“适应性”选项卡中的“计算USP、EP 和JP s/n”（以前“为计算EP s/n”）复选框计算USP、EP 和JP s/n。
也可以指定是否使用由空白进样中的峰区域计算的噪音值计算USP s/n、EP s/n 和JP s/n。
每个峰的噪音区是唯一的。
通过在各个峰的保留时间处将噪音区居中的相应空白进样来确定噪音区。
指定半高处乘子参数，从而定义噪音区。
USP s/n新的适应性峰字段USP s/n 使用“美国药典”中的信噪比(s/n) 公式计算。
USP s/n 计算公式如下：2 ╳峰高/（噪音/缩放）其中：峰高= 峰高的绝对值噪音= 峰的噪音值（峰到峰噪音）缩放= “缩放到微伏”值缺省情况下，软件将USP s/n 值报告为6 位精度，不采用科学计数法也没有单位。
用于计算USP s/n 的噪音值将根据“使用空白进样中位于峰区域内的噪音”选项的状态来确定：• 选中该选项时，软件用空白进样中所确定的峰到峰噪音计算每个峰的噪音值。
该值针对单个空白进样的相同通道中的区域进行计算。
此区域以峰保留时间为中心，宽度等于半高处峰宽乘以USP 噪音区的半高处乘子值。
软件在结果中将此噪音值报告为USP 噪音。
缺省情况下，软件将该值报告为6 位精度，不采用科学计数法，单位为“图单位”。
• 清除该选项后，软件将使用结果的峰到峰噪音值；不使用空白进样计算噪音。
在处理方法的“噪音和漂移”选项卡中，指定此区域的开始和结束时间。
在处理方法的“适应性”选项卡上，“USP s/n 噪音区的半高处乘子”字段的范围在1 到99 之间，缺省为5。
waters质谱参数
序号2：液质联用仪21.工作环境条件：1.1工作电压：230V±10%；1.2温度：15-27℃；1.3湿度：40-70%。
2.主要技术和性能规格要求：2.1液相色谱系统：2.1.1 高压二元泵溶剂输送系统2.1.1.1 流量范围：0.0001 mL/min ?3.0000 mL/min，递增率0.0001 mL/min 最大样品分析流速至少可达3.0000ml/min；2.1.1.2 流量精度：≤0.070% RSD；2.1.1.3 最大耐压：泵的耐压范围：0-18000psi,在2ml/min流速情况下，仍然可达到18000psi 的压力，全系统压力在20000psi下通过测试；2.1.1.4梯度精度：±0.15%，不随反压变化2.1.1.5梯度准确度：±0.5%,不随反压变化2.1.1.6延迟体积：延迟体积必须恒定不变化且<95?L，（包括进样器扩散体积、混合器、进样loop环在内），不随反压变化；2.1.1.7梯度模式：软件内置10种梯度曲线，包括线性梯度, 步进梯度, 凹形梯度, 凸形梯度等2.1.1.8在线脱气机：要求在线真空脱气六通道，比常规四通道增加两通道对进样清洗液脱气，保证脱气效果。
；2.1.1.9进样针双溶剂（强、弱极性）洗脱体系。
2.2 温控自动进样器2.2.1 控温范围：4～40℃；2.2.2 样品容量：样品数量：96x2ml；2.2.3 进样量：0.1-100uL；2.2.4 进样精度：<0.3% RSD；2.2.5 具有内外针自动清洗功能；2.2.6 样品交叉污染：<0.001%。
2.3 柱温箱2.3.1 控温范围：室温-90℃；2.3.2 温度精度：±0.3℃；2.3.3 温度稳定性：＜±0.1℃。
2.4三重四级杆质谱部分：质量分析器采用三重四极杆。
※2.4.1制造商应具有15年以上的串联三重四极杆液相质谱联用仪制造技术（由所投产品制造商或中国境内代表机构或指定代理出具承诺证明函原件，格式自定）；2.4.2质谱仪质量数范围: 5～1200m/z或者更宽；※2.4.3质谱灵敏度（验收指标）ESI 灵敏度：1pg利血平进样，信噪比为S/N＞50000:1或更高；APCI灵敏度：1pg利血平进样，信噪比为S/N＞50000:1或更高；2.4.4质量稳定性＜0.1amu/48小时，。
waters的各种检测器
专利的梯形狭缝设计，消除示差折光效应 同时；进一步提高灵敏度及线性范围
Waters 2487的其他特点：
双通道、高灵敏度 仪器内集成比色皿位置 多种功能，胜任更复杂的工作
MaxPlot，RatioPlot，灯优化软件等
梯形狭缝(TaperSlit )流动池
Patent applied for
Waters 464 的操作
开机后，可在SELECT MODE下用蒉键选五种模式 之一
DC 直流模式，常用于高灵敏度检测 SCAN 扫描模式，可得到样品的电位 - 电流图 PULSE 脉冲模式，可优化某些样品的相应，如分析 离子，该模式下稳定性好而 灵敏度稍低 SYSTEM 模式，对仪器进 行设置 CALIBRATION 模式，对 仪器自检或校正
示差检测器的注意事项
不能做梯度实验 最大的池耐压是 100 psi 流速范围是 0.3 - 10 ml/min.
荧光检测器
Excitation filter Cell
LAMP
Emission filter
Photomultiplier
Fluorescence Detector 滤光片分类∶ 滤光片分类∶
4，重新校正波长 12，显示检测器(486)的版本号 13，显示及修改IEEE地址(2-29)，缺省值及非IEEE操作是0 15，正常参比及样品池位置 16，转换参比及样品池位置，常用于制备 20，设置关灯时间 21，设置积分输出的偏置 26，设置扫描参数∶起、止波长，步宽(nm)，停留时间 27，和26号参数一起工作，完成扫描
荧光 脉冲安培
电导
固定波长紫外 可编程紫外 /可见 可编程紫外/
衡量检测器的指标
液相色谱教程(一)液相色谱基础知识B
1 3
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影响塔板数的因素
用折合速度代入,我们得到塔板数与柱长,溶剂速度,
填料颗粒度以及在流动相中的扩散速度的关系式
折合速度
N
dp v Dm
L
1 3
dp dp D m
2D m
.05 dp Dm
α是两个化合物在同一套色谱系统上
保留差异的数值表述
V1 V0 V2 V3
时间
.5
1
2
5
峰2/ 峰1的 2 - .5 3 1 - .5
5 - .5 9 1 - .5
2
k'
k' 1
V V 0 或 2 V V 1 0
峰3/峰1的
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范第姆特(Van Deemter)方程
范第姆特( Van Deemter) 方程能够推导出流动
相的线速度对给定峰的等板高度(H)的影响.
B H A μ C μ μ 线速度
其中 : A项:叫作涡流扩散项,与填料的颗粒度及其分布和填充技术相关 B项:叫作轴向(纵向)扩散项,与流速有关 C项:叫作传质阻力项,与填料颗粒度和流速有关
分离度方程: 容量因子项
若
= 1, 2, 10 或 20, R会如何变化?
1 1 R 4 1
N
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分离度与k的关系
k 值 0 1 2 3 10 20 k 项 0 1/2 2/3 3/4 10/11 20/21
WatersXevoTQS液相色谱质谱操作
Waters Xevo TQ-S液相色谱/质谱联用仪(三重串连四级杆质谱)操作指南1.适用范围：本使用规范适用于有机室所备有的Waters Xevo TQ-S液相色谱/质谱联用仪(三重串连四级杆质谱)。
2.仪器设备的主要技术指标：1) 梯度性能：保留时间标准偏差（SD）≤0.047min。
2) ESI正离子灵敏度和精密度：测试样品：磺胺二甲基哒嗪(Sulfadimethoxine)，浓度：0.1pg/μl指标要求：平均信噪比（S/N）≥3000:1；平均峰面积≥60000；峰面积相对标准偏差（%RSD）≤3.0%；保留时间标准偏差（SD）≤0.047min测试结果：信噪比（S/N）:4500psi；峰面积：120000；峰面积相对标准偏差（%RSD）：2.5%；保留时间标准偏差（SD）：0.00min，均符合指标要求。
3) ESI负离子灵敏度和精密度：测试样品：氯霉素(chloramphenicol)，浓度：0.05pg/μl指标要求：平均信噪比（S/N）≥400:1；平均峰面积≥1000；峰面积相对标准偏差（%RSD）≤3.0%；保留时间标准偏差（SD）≤0.047min测试结果：信噪比（S/N）:520psi；峰面积：1500；峰面积相对标准偏差（%RSD）：2.8%；保留时间标准偏差（SD）：0.00min，均符合指标要求。
4) 系统精密度（TUV/PDA）：峰面积相对标准偏差（%RSD）≤0.5%；峰高相对标准偏差（%RSD）≤0.9%。
5) NanoFlow正离子灵敏度指标要求：峰强（m/z =785.8）≥1×107，测试样品：Glu-Fibrinopeptide B，浓度：100fmol/μl测试结果：峰强度（m/z =785.8）：1.48×107；符合指标要求。
6) T RIZAIC正离子模式MS说明：测试样品：ADH T19, PHO T33, ENL T4, BSA T59, ENL T43, ADH T17, BSA T10, PHO T88指标要求：保留时间标准偏差：≤0.25%测试结果：ADH T19：标准偏差为0.02% (23.77min)；PHO T33：标准偏差为0.03% (25.12min)；ENL T4：标准偏差为0.02% (21.83min)；BSA T59：标准偏差为0.01% (21.58min)；ENL T43：标准偏差为0.04% (22.33min)；ADH T17：标准偏差为0.03% (23.31min)；BSA T10：标准偏差为0.02% (24.41min)；PHO T88：标准偏差为0.03% (24.81min)7) 系统性能测试一维系统精密度测试：测试样品17α-OHP。
质的飞跃-Waters最新质谱技术介绍[1]
![质的飞跃-Waters最新质谱技术介绍[1]](https://img.taocdn.com/s3/m/a71f90e9e009581b6bd9eb59.png)
“质”的飞跃 质 的飞跃 的飞跃-Waters最新质谱技术介绍 最新质谱技术介绍沃特世UPLC家族最新成员发布会 家族最新成员发布会 沃特世 全球巡讲——广州站 全球巡讲 广州站 2011年10月17日 年 月 日 中国 广州蔡麒 市场发展部经理 Waters China©2011 Waters Corporation1概述最新串联四极杆 UPLC MSMS 产品 Xevo TQ-S 主要性能及应用介绍 (New Product in 2010 ASMS) 最新高分辨质谱Synapt G2-S主要性能及应用介绍 (New Product in 2011ASMS)©2011 Waters Corporation2什么是 Xevo TQ-S目标化合物定量的超高灵敏度 + 丰富的定性支持数据©2011 Waters Corporation3Xevo TQ-S优势 优势超高灵敏度信息丰富更多的实验选择性更容易使用©2011 Waters Corporation4超高灵敏度给您带来更多选择- 可以检测复杂基质中更低含量的物质 可以稀释样品, - 可以稀释样品,减少基质效应 - 可以减少进样体积沃特世Xevo TQ-S串联质谱仪意味着对于目标化合物定量的UPLC/多反 应监测(MRM)的分析能力上升到一个新的台阶。
该质谱系统可以对复杂 样品中fg级或更低浓度水平的目标化合物进行准确定量©2011 Waters Corporation5Xevo TQ-S 1pg 利血平 UPLC/MRM©2011 Waters Corporation60.01ng/mL猪肝基质中氯霉素定量离子对 猪肝基质中氯霉素定量离子对 ）、定性离子对 （321›152）、定性离子对（321›257）信噪比 ）、定性离子对（ ））©2011 Waters Corporation7Xevo TQ-S分析环境水中 种抗生素 分析环境水中11种抗生素 分析环境水中©2011 Waters Corporation8多肽生物标记物 治疗性多肽灵敏度高, 耐用性好, 符合法规Amyloid β 0.1 ng/mL Oasis (MCX -elution), UPLC, Xevo TQ-SDesmopressin 1 pg/mL Oasis, UPLC, Xevo TQ-S符合不断发 展的分析需 要©2011 Waters Corporation9如何获得超高灵敏度Xevo TQ-S创新的 创新的StepWave 离轴离子源设计，提供业内领先的 离轴离子源设计， 创新的 UPLC/MSMS灵敏度，可以对最复杂样品中更低浓度的痕量组分进 灵敏度， 灵敏度 行定量和确证分析. 行定量和确证分析.©2011 Waters Corporation10生物样品再分析 (ISR)were mples t sa anel of Patien r the p d fo rugs assaye ssant d pr e antide ne and triptyli Ami tyline Nortrip rmed s perfo ISR wa oposed met pr ples All sam teria ISR criAmitriptyline MW 277.4 pKa = 9.4Nortriptyline MW 263.3 pKa = 9.7©2011 Waters Corporation 11标配自动定量工具包Plot trends in results Process, qualify & report results Monitor data pro-actively Create LC/MS/MS methods Setup instrumentationTrendPlot TargetLynx QCMonitor Quanpedia IntelliStart©2011 Waters Corporation12Xevo TQ-SInformation rich qualitative supporting data©2011 Waters Corporation13RADAR(揭开样品的神秘面纱) 揭开样品的神秘面纱)RADAR功能：一种信息富集式采集方法，可使您采集关于目标化合物具有 功能：一种信息富集式采集方法， 功能 高度特异性的定量数据，同时又可直观显示样品基质中其他组分的信息。
Waters液相色谱教程3
液相色谱检测模式
响应类型
RI 折射率
通用型
UV/VIS FLUOR 紫外/可见 荧光
选择性 选择性
ECD 电化学
选择性
COND ELSD 电导 蒸发光散射
选择性 半通用
灵敏度
µg
ng
pg
pg
pg
ng
线性范围 104
105
103
106
105
103
流速敏感 Yes
– 两个压力传感器感应并 调整柱塞内压力，柱塞 间交换平稳
– 没有出口阀，减少故障 率
©2004 Waters Corporation
2695溶剂输送系统的特点
独立的柱塞杆驱动马达
– 双压力传感器，监视系统及柱塞腔压力 – 软件根据传感器的反馈，控制所有功能 – 完全没有压力的脉动 – 只有两个进口阀，没有出口阀，可靠性极高
的工作
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2695 样品管理系统:特点
全电子设计,除电源外,
不需其它任何动力
极佳的线性范围及进样
重现性
交差污染极小（全自动
进样针内、外清洗装置）
低维护成本
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2695:样品管理系统
样品瓶数目: 120, 分装于5个样品盘(24瓶/盘) 进样次数: 每瓶可进1 到99次 标准样品瓶: 2 mL 样品室温控: 4 到40℃ ,增量 1℃ 进样体积: 标准配置:0.1 到100 uL 定量环选件: 0.1到2000 uL 最小样品量: 10 uL, 用低体积的内插式小瓶 (Insert) 最小进样量: 0.1 uL
Waters Xevo TQS液相色谱质谱操作
Waters Xevo TQ-S液相色谱/质谱联用仪(三重串连四级杆质谱)操作指南1.适用范围：本使用规范适用于有机室所备有的Waters Xevo TQ-S液相色谱/质谱联用仪(三重串连四级杆质谱)。
2.仪器设备的主要技术指标：1) 梯度性能：保留时间标准偏差（SD）≤0.047min。
2) ESI正离子灵敏度和精密度：测试样品：磺胺二甲基哒嗪(Sulfadimethoxine)，浓度：0.1pg/μl指标要求：平均信噪比（S/N）≥3000:1；平均峰面积≥60000；峰面积相对标准偏差（%RSD）≤3.0%；保留时间标准偏差（SD）≤0.047min测试结果：信噪比（S/N）:4500psi；峰面积：；峰面积相对标准偏差（%RSD）：2.5%；保留时间标准偏差（SD）：0.00min，均符合指标要求。
3) ESI负离子灵敏度和精密度：测试样品：氯霉素(chloramphenicol)，浓度：0.05pg/μl指标要求：平均信噪比（S/N）≥400:1；平均峰面积≥1000；峰面积相对标准偏差（%RSD）≤3.0%；保留时间标准偏差（SD）≤0.047min测试结果：信噪比（S/N）:520psi；峰面积：1500；峰面积相对标准偏差（%RSD）：2.8%；保留时间标准偏差（SD）：0.00min，均符合指标要求。
4) 系统精密度（TUV/PDA）：峰面积相对标准偏差（%RSD）≤0.5%；峰高相对标准偏差（%RSD）≤0.9%。
5) NanoFlow正离子灵敏度指标要求：峰强（m/z =785.8）≥1×107，测试样品：Glu-Fibrinopeptide B，浓度：100fmol/μl测试结果：峰强度（m/z =785.8）：1.48×107；符合指标要求。
6) T RIZAIC正离子模式MS说明：测试样品：ADH T19, PHO T33, ENL T4, BSA T59, ENL T43, ADH T17, BSA T10, PHO T88指标要求：保留时间标准偏差：≤0.25%测试结果：ADH T19：标准偏差为0.02% (23.77min)；PHO T33：标准偏差为0.03% (25.12min)；ENL T4：标准偏差为0.02% (21.83min)；BSA T59：标准偏差为0.01% (21.58min)；ENL T43：标准偏差为0.04% (22.33min)；ADH T17：标准偏差为0.03% (23.31min)；BSA T10：标准偏差为0.02% (24.41min)；PHO T88：标准偏差为0.03% (24.81min)7) 系统性能测试一维系统精密度测试：测试样品17α-OHP。
waters与安捷伦
一．使用方面Waters1.Waters的色谱功能、处理能力、数据保护等方面都具有独到的优势。
2.Waters的峰更窄更小，信噪比更高，峰容量更大，运行时间更短，有效地提高实验室的工作效率。
3.独有初级、基础、专业、网络四个操作界面选项，适合不同层次实验任务和不同水平的操作人员使用。
4.Waters液相的精密度是最高的，这基于两个重要专利，一个是泵的非圆齿轮专利，柱塞杆的推进和拉回全程“硬”力而不象其他的收杆的时候靠弹簧弹回；另外一个是紫外检测器的梯形比色池专利，提高了检测器的灵敏度。
检测器灵敏度高了还需要模数转换精度提高，Waters检测器里的模数转换电路是32位高精度的。
5.Waters的液相的制造精度、材料的质量和维修售后服务也是相当出色。
适用于分析检测的样板实验室，研发分析实验室。
6.死体积小。
死体积小意味着分析速度会缩短。
7.最好的认证体系。
在国外特别是美国，每台液相都需要经过认证其数据才能被FDA承认，认证包括数据的真实性、来源可追溯性等，甚至经过认证的液相需进行联网以便随时接受抽查。
Waters的液相在需要进行国际认证的时候Waters能够让认证工作变得更加简单。
安捷伦安捷伦的液相噪音比较大，重现性及分离度明显比Waters差，在牺牲分离度的情况下利用高温来达到快速。
体积巨大，但是同时可安装的进样口和检测器却很少。
换柱子不方便，如果不给每根柱子都配一对铜帽的话，那每上下一次就要废掉一段柱子和一对石墨垫。
安捷伦工作站有很多设计问题，不人性化，而且启动速度慢，操作复杂，功能少。
进样口设计不合理，不便于更换衬管。
每次工作站会保存上一次的仪器条件，当在新的测定工作中启动工作站，工作站会自动把上次的仪器参数传给仪器，这对于经常更换色谱柱，改换仪器条件的人来说，非常不习惯。
二．安装环境的要求：Waters中英文均可，要求不算高。
安捷伦对计算机的硬件要求较高。
三．通讯方式：1.Waters是IEEE标准的通讯卡，最简单，串行口。
色谱仪器参数
其它名称：ACQUITY UPLC超高效液相色谱仪,超高效液相色谱仪,ACQUITY UPLC制造商：Waters公司参数：流速范围：0.010～2.000mL/min，增量0.001mL/min 溶剂输送精度：0.075%RSD或0.02minSD 最大操作压力：15000 psi（1mL/min）延迟体积：<140μL，与系统反压无关。
交叉污染：0.005%或2nL超高速度小颗粒填料色谱柱能超乎寻常地提高分析速度而不降低分离度显著增加样品的通量，提高工作效率，降低分析成本节省以往一向耗时的方法开发与认证的时间超高灵敏度小颗粒技术和整体化的仪器设计，UPLCTM能在改善分离度的同时提高...UPLC超高效液相色谱（Ultra Performance Liquid Chromatography，UPLC）色谱理论认为提高色谱柱的效能（efficiency）就能增加仪器的解析度（resolution），而运用粒径低于2μm的小颗粒无疑是增加效能的好方法。
但减小固定相的粒度以增加色谱柱效能一直是色谱仪器科学的瓶颈，因为小颗粒不仅要求系统能承受高于目前极限压力（比如6000psi/400bar），需要更小的系统体积（死体积），并且需要能适应可能只有几秒峰宽的高速检测器。
Waters公司在传统HPLC系统基础上开发的超高效液相色谱（ACQUITY Ultra PerformanceLC）系统突破了色谱科学的瓶颈，充分利用了传统HPLC望尘莫及的小粒度色谱柱的优势，使色谱分离的解析度达到新的高度。
与传统的高效液相色谱（HPLC）相比，UPLC具有以下优势：1.高分离度（ultra resolution）根据液相色谱分离的解析度方程，解析度正比于柱效能的平方根而根据范迪姆特（Van Deemter）色谱理论，柱效反比于系统固定相粒度大小。
UPLC系统运用的固定相粒度能达到1.7μm，根据上述方程，该系统达到的效能将比5μm粒度系统高70%，而比3.5μm高40%。
Waters ACQUITY UPC^2(超高效合相色谱)(ACQUITY UPC2)
无与伦比的分离效果与峰形： 与传统SFC相比， UPC 2系统帮助您获得更多的样品信 息。 同时， 您还可以进行手性和非手性分离， UPC 2充分满足了手性/非手性分离对 选择性、 分离度以及保留时间重现性的高要求。 更高的样品通量和分析效率， 帮助您及时做出正确的决策： 使用UPC 2， 色谱柱平衡 更快， 分析周期大大缩短， 因此您每天能分析更多的样品。 强大的互补技术： UPC 2是与传统LC和GC 技术互补的最强有力的分析技术。 现在， 我们为实验室提供了应对各种分析挑战的工具， 帮助科学家进行包括天然产物、 中药/民族药、 化学药、 食品添加剂或污染物、 农药、 表面活性剂、 聚合物添加剂以 及生物燃料等的分析。
7.00
8.00
Minutes
目前的分析技术。
GC
■■ ■■ ■■ ■■
GC Compounds that can vaporize GC
■ ■ ■
进样器 进样器 进样器
Change without column degradation GC
without degradation Compounds that can vaporize Change temperature column Compounds that can vaporize
LC
GC
科学探索和分析成功的潜力无限大
为什么要选择ACQUITY UPC2? 因为， 这是一套完整的系统解决方案， 来自沃特世， 由沃特世全力支持。
ACQUITY UPC2系统以沃特世成熟的UPLC平台为基础， 具有沃特世品牌一贯的耐用、 可 靠和容易使用的特点， 即使是分离挑战性非常大的样品。 这是一套完整的系统解决方 案， 将沃特世在仪器系统、 色谱柱、 行业领先的信息学和软件与覆盖全球的强有力支 持和服务有机结合起来， 能够为您的实验室带来：
(2021年整理)waters故障指南(中文版)
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1 色谱柱使用寿命问:我的色谱柱进样大概100针后峰形变差了，踏板数很低，怎么回事？答：100针确实很少，一般情况下使用时间会长很多的。
首先我们要确认你的使用条件是不是导致色谱柱寿命下降的原因。
两种基本情况：1 在相同实验中以前使用的色谱柱寿命长很多2 在本实验中用过的所有的色谱柱在使用相同次数后全部损坏如果是第一种情况,应该检查一下实验是否保持一致。
样品的组成改变了吗？样品中强吸收的污染物会破坏色谱柱的柱效。
或者管路的密封圈是否完好？脱落的密封圈会堵塞色谱柱过滤器和填料的顶层，从而影响样品的分布.如果可以确认色谱条件没有变化，那么可以推测是柱床松动的原因.在实验室和运输过程中色谱柱剧烈的震动都会导致柱床松动.(色谱柱有没有掉到地上？)或者也有可能使生产商的问题。
而且这种问题标准色谱柱检测中心是检测不出来的，只有在用过一段时间后才会显露出来.这种情况生产商会免费替换色谱柱。
问：那些生产商真好，但是我的情况不是这样的。
我的色谱柱总是用不了多长时间。
有时候100针，有时候200针。
200针还可以忍受,但是100针太差了。
色谱柱开销太大了，我该怎么办？答：我完全同意你所说的.我们必须要找到原因然后看看我们能做些什么.最大可能是样品中的成分吸附在色谱柱的顶端。
可能是在流动相中不溶的沉淀物或者是强吸收的物质。
随着进样的增加这些污染物在色谱柱顶端累积，阻止样品正常吸附和扩散.从而导致峰形变差。
液相色谱基础知识(waters)
寿命 (小时)
Xterra: 快梯度分析
AU
0.00
0.10
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Minutes
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1.00
1.20
1.40
1.60
1.80
2.00
2.20
2.40
Waters特殊应用的色谱柱(1)
糖及其它碳水化合物的分析 离子交换柱(钙基/Ca) 用于单糖、双糖及糖醇等低分子量的糖、及乙醇等的分析。主要用于药厂维生素C的原料分析(sorbitol/mannitol-山梨醇/甘露醇)，酒厂(葡萄酒、啤酒等)的糖及乙醇含量的分析。 柱温~90℃，要求有柱温箱。对流动相(水)的要求较高，要求用户另置超纯水系统。 氨基类型柱 分析单糖、双糖及三糖等多糖的分析，最大到DP10。用途较为广泛，主要用于食品中糖的分析。 反相类型柱 硅胶类型柱 体积排除(凝胶/GPC)类型柱
色谱柱的联接
各种锥箍和管路接头长度示意图:
色谱柱的联接
Stop_depth长度不合适造成柱前死体积
色谱柱的联接
锥箍锥度不合适造成渗漏:
Waters色谱柱的联接
Waters及Phase Separations锥箍及螺母相同，但锥箍前露出的不锈钢管长度不同 其长度被称为：“stop-depth” Waters除Spherisorb以外的各种品牌的色谱柱用的是“Waters”标准，其stop-depth的长度为0.130英寸 Spherisorb品牌的色谱柱及Phase Separations公司的其他品牌色谱柱用的是“Parker-style”标准，其stop-depth为0.090英寸
测柱效-良好的色谱实验习惯
液相色谱基础知识(waters)
色谱柱的联接
各种锥箍和管路接头长度示意图:
色谱柱的联接
在同样情况下保留行为也有差异
因此：
需要对色谱化学品(色谱柱)有更多的了解 需要不同品牌，即各个因素有较大差异的色
谱柱，以得到更多种选择性
Waters拥有众多不同品牌的色谱柱，目的 就是：供不同应用的要求
用不同品牌的色谱柱时，色谱方法有时可 能需要重新开发
Waters各种硅胶基质的色谱柱
C1 C4 C6 C8 C18 Phenyl CN NH2
mBandaPak
Resolve
Nova-Pak
Delta-Pak
Symmetry
Spherisorb
Waters不同品牌的色谱柱
m-BondaPak
文献背景强, 是工业标准 平均孔径125Å，10mm高活性、无定形硅胶 中等疏水性表面，端基封口。有独特选择性
对HPLC柱填料的了解（二）
平均孔径/孔体积 孔径/孔体积分布
大的孔径可分析高分 子量的分子
对HPLC柱填料的了解（三）
键合相化学
影响化合物的分离度：a
不同键合相对不同种类的化合物分离不同 可能导致色谱的分离机理不同 如：C18、C8、CN
硅胶表面及键合相
H 3 C
H 3 C
注意在用文献方法时转换流速,即:降低流速,以 保持线速度相同。
waters高效液相色技术参数
在撰写高质量、深度和广度兼具的中文文章时，我们首先来探讨一下关于"高效液相色谱技术参数"这一主题的重要性和意义。
高效液相色谱技术（HPLC）是一种常见的化学分析方法，广泛应用于医药、化工、食品、环境等领域。
而对于HPLC技术参数的深入了解，则是进行有效分析和实验的基础。
我们需要了解HPLC技术参数的基本概念。
HPLC技术参数包括但不限于流动相、固定相、柱温、检测器类型、流速、护色剂类型和浓度等。
这些参数对于色谱分离的效果、分析结果的准确性以及实验效率都有着至关重要的作用。
在HPLC技术参数的选择和优化上，需要考虑的因素也是多方面的。
选择合适的流动相和固定相可以有效提高分离效果和分析速度；合理设定柱温和流速可以影响分离的选择性和分离时间；检测器类型的选择则直接关系到分析结果的灵敏度和准确性。
当然，针对不同的分析需求和样品特性，HPLC技术参数的设置也需要有所调整。
在进行蛋白质分析时，可能需要采用不同的固定相和流动相；而在进行药物代谢产物的分析时，可能需要选择不同类型的检测器和优化柱温等参数。
在实际操作中，对于HPLC技术参数的选择和优化并非一蹴而就的事情，需要通过大量的实验和经验总结。
而一旦掌握了有效的HPLC技术参数，就能够大大提高分析的准确性和效率，为实验结果的可靠性提供有力保障。
从整体来看，深入了解和熟练掌握HPLC技术参数是化学分析领域中至关重要的一环。
只有在充分了解技术参数的基础上，合理选择和优化参数，才能够提高分析效果，保证实验结果的准确性和可靠性。
基于以上研究和思考，我们可以得出结论：HPLC技术参数对于化学分析至关重要，只有深入理解和熟练掌握技术参数的作用，才能够在实验中取得准确和可靠的分析结果。
在进行HPLC分析时，需要对技术参数进行充分的了解和合理的选择，以提高实验效率和结果的可靠性。
我们在进行HPLC分析时，务必充分了解和掌握技术参数的作用和优化方法，以确保分析结果的准确性和可靠性。
waters质谱基础知识介绍
Today there are ~20 MS enterprises in Manchester… …Waters Micromass is the largest & most successful
什么是质谱(MS)?
©2005 Waters Corporation
LC/MS 系统构成
©2005 Waters Corporation
前级泵原理示意图
©2005 Waters Corporation
初级泵外观
©2005 Waters Corporation
涡轮分子泵原理示意图
©2005 Waters Corporation
涡轮分子泵
©2005 Waters Corporation
液质联用的接口技术
©2005 Waters Corporation
相色谱
Ultra Performance Liquid Chromatography-超高
效液相色谱
– 液质联用的前提和基础=进样+分离 – 根据化合物的化学特性分离样品(比如极性化合物，非极性化合 物，酸性化合物，碱性化合物等等)
•分离技术 •分离效率高 •流动相参与分离 •连续流出，峰宽有限 •有时需要使用缓冲盐提高分离度 •高压环境工作(> 1000 psi)
LC/MS中的质谱
©2005 Waters Corporation
Mass Spectrometry-质谱
质量是物质固有特征之一，不同的物质有不同的质量谱 分析物被转化为气相离子而被分析 这些离子按其质荷比 (m/z)被分离而被检测 质谱图即是相关的离子流对m/z的图
•灵敏度高 •定性/定量本领高 •脉冲扫描采集数据 •高真空环境工作 •溶剂参与反应(API电离源)
HPLC - 液相色谱入门-Waters
HPLC - 液相色谱入门什么是液相色谱?历史概述和定义液相色谱的定义是二十世纪早期由俄罗斯植物学家Mikhail S. 茨维特提出的。
他最先尝试在装满颗粒的柱子上使用溶剂来分离从植物中提取的化合物[树叶色素]。
茨维特用颗粒填满开口的玻璃柱。
他发现两种特殊的材料，粉笔末(碳酸钙)和氧化铝很有用。
他将样品[混匀植物叶的溶剂提取物]倒入柱中，并让样品流过颗、粒床。
随后加入纯溶剂。
随着样品由于重力自上而下流过柱子，可看到不同颜色的谱带被分开，因为有些组分比另外一些移动得快。
他将这些分开的不同颜色的谱带与样品中原有的不同化合物相关联。
他还根据每一种化合物对填料的化学亲和性强弱，提出了分析这些化合物的分离规律。
与颗粒填料有较强亲和性的化合物移动慢，与溶剂有较强亲和性的化合物移动快。
这个过程可这样描述:样品中的化合物在流动的溶剂(流动相)与固体颗粒(固定相)间的分布不一样。
这样使每一种化合物以不同的速度移动，从而产生了化合物之间的分离。
茨维特使用色谱法chromatography [来自希腊字，chroma 意思是颜色，graphy 意思是记录-直译为颜色记录]来描述他的彩色试验。
[令人好奇的是,俄罗斯名字茨维特意思是颜色。
]今天，液相色谱法,以各种形式，已成为分析化学中最有力的工具之一。
技术1. 样品被点在固定在玻璃板上的薄层色谱颗粒[固定相]上，并流过薄层[图B]。
玻璃板的底端放置在溶剂中。
由毛细作用产生的流动使溶剂[流动相]扩散到干燥的颗粒层并沿玻璃板向上移动。
这种技术被称为薄层色谱法或TLC。
技术 2.在图C 中, 样品被点在纸上[固定相]。
溶剂[流动相] 加在样品点的中心以产生向周围的辐射流动。
这是纸层析的一种方式。
[传统的纸层析色谱和直线流动的薄层色谱是类似的操作方式。
]上图中，相同的黑色FD 和 C 染料被点在纸上。
图C: 纸层析法当和薄层色谱板比较的时候，请注意这种特殊纸张分离能力的区别。
绿色圆环表示这张纸无法分离黄色和蓝色染料，但它可以将红色染料分离开来。