实时荧光定量PCR与PCR-ELISA在乙型肝炎病毒DNA定量检测中的应用比较
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[6] 宋福江 , 王玉乐 , 闫寒 , 等 . 紫外分光光度法测定灵芝孢子油中 总三萜含量 [J]. 中国医药导刊 ,2017,19(9):940-942.
（上接第 98 页）
标本编号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
COBAS Amplicor 系统 2.18×105 6.31×104 4.27×105 9.33×105 3.24×105 7.41×104 1.23×104 5.01×104 1.62×104 1.62×103 9.55×103
Light Cycler 仪器的实验结果的灵敏度要低于 COBAS Amplicor，但是在临床应用过程当中仍然可以满足人 们的需求。COBAS Amplicor 系统的 CV 较低，所以具 有较好的重复性 [5]。在与 COBAS Amplicor 对比的过 程当中也有较好的相关性，所以通过国产试剂配合进 口仪器进行实时荧光定量 PCR 的检测具有一定的临 床价值。但是在应用过程当中一定要注意，由于国产 的试剂盒不同制造批次所表现出来的质量也不同，所 以在选择的时候一定要做好相关的管理和判断。另 外还要注意的是乙性肝炎病毒的发展程度所受到的 相关因素影响比较多，例如患者自身的遗传因素、免 疫状态以及病毒变异情况等，患者在感染乙型肝炎病 毒之后整体的疾病发展是进行状态中的，所以临床的 相关医护人员也要注意 [6]。
4.0~8.5 （40±1）℃保存 1 h、2 h、3 h，恢复至室温后未出现油水分离现象
-5~-10 ℃保存 1 h、2 h、3 h，恢复至室温后未出现油水分离现象 3 000 r/min 离心，未出现油水分离现象
检查结果 1 符合 符合 符合 5.2 符合 符合 符合
检查结果 2 符合 符合 符合 5.2 符合 符合 符合
表 3 临床标本检测结果比较
Light Cycler 配合达安试剂 1.70×104 2.57×103 2.95×104 1.78×105 7.94×104 9.55×103 1.32×103 1.62×103
3.89×103 2.34×103 2.39×104
标本编号 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22
低于检测下限 低于检测下限
COBAS Amplicor 系统 2.39×107 3.43×106 9.44×105 4.25×105 6.08×104 3.25×103 4.87×102
2.2 检测方法的重复性比较 检测方法的重复性见表 2。乙型肝炎病毒是检
测乙型肝炎疾病最主要的检测标志物，在整个乙性 肝炎疾病药物治疗的过程中，对人体内乙型肝炎病
检查结果 3 符合 符合 符合 5.2 符合 符合 符合
参考文献
[1] 李森柱 , 谢意珍 , 周静文 . 灵芝孢子油主要活性成分及降血脂功 能的研究 [J]. 中国食用菌 ,2006,25(5):40-42,52.
[2] 冯翠萍 , 程红艳 , 唐兵 , 等 . 灵芝孢子粉中孢子油提取及生物活 性的研究 [J]. 食用菌学报 ,2008,15(4):63-66.
作者简介：吴晓利（1992—），女，江苏无锡人，硕士，助理实验师，研究方向：生物医学。
·98·
生物化工
2021 年
1 资料与方法
毒 DNA 定 量 检 测 是 十 分 重 要 的。 目 前，临 床上检
1.1 临床基础资料
测乙型肝炎病毒 DNA 的定量方式有很多种，其中
选择 2018 年 9 月—2020 年 9 月收治的乙型肝 COBAS Amplicor 检测 HBV-DNA 的方法已经获得了
炎患者 22 例，将患者分成 ELISA 组和 PCR 组，每组 均为 11 人。其中，ELISA 组中的男性 6 人，女性 5
国际范围的认可，所以整体的准确性和重复性都比较 高 [3]。在应用该种方法进行检测时，主要采用内对照
人，年 龄 在 25~68 岁，平 均（43.82±1.28）岁；PCR 的方式，这样可以有效地对病毒核酸的抽提以及扩
[3] 张智 , 焦春伟 , 胡惠萍 , 等 . 灵芝孢子活性成分抗皮肤衰老功效 [J]. 食用菌学报 ,2011,18(4):51-54.
[4] 熊智 , 吕辰鹏 , 何泉泉 , 等 . 灵芝在化妆品中的应用 [J]. 日用化学 品科学 ,2016,39(3):30-34.
[5] 张晴晴 , 陈先帅 , 喻明军 , 等 . 灵芝孢子粉中孢子油的提取工艺 优化 [J]. 化工管理 ,2017(6):224.
WU XiaoLi (Wuxi School of Medicine ，Jiangnan University)
Abstract: Objective: To analyze the application of real-time fluorescent quantitative PCR and PCR-ELISA in the quantitative detection of hepatitis B virus DNA. Methods: A total of 22 hepatitis B patients admitted from September 2018 to September 2020 were selected. The patients were divided into ELISA group and PCR group. Each group had 11 patients. The ELISA group mainly received COBASAmplicor test, and the PCR group received Light. Cycler instrument test, compare the measurable range, repeatability, and clinical specimen test results of the two groups of patients. Results: The sensitivity of the experimental results of the Light Cycler instrument is lower than that of the COBAS Amplicor. The test results show that the real-time fluorescent quantitative PCR technology has the characteristics of low cost and time saving, and the PCR-ELISA technology has the characteristics of high price, repeatability and high sensitivity.
清的稀释度有一致性，但是相比而言，Light Cycler 配
合达安试剂的灵敏度比较低。
表 1 两组检测方法的可测定范围比较
血清稀释倍数
原倍 10-1 10-2 10-3 10-4 10-5 10-6
Light Cycler 配合达安试剂 2.19×107 1.70×106 1.97×105 2.73×104 2.04×103
准确的反应，但是在运用的过程中仍然存在一定的 局限性。实时荧光定量 PCR 检测 HBv-DNA 含量就 可以直接体现出乙型肝炎病毒的复制情况，所以整 体的敏感性和特异性都比较高 [2]。本次研究主要针 对实时荧光定量 PCR 与 PCR-ELISA 在乙型肝炎病 毒 DNA 定量检测中的应用效果进行了对比分析。
组中的男性 7 人，女性 4 人，年龄在 26~69 岁，平均 增效果进行严格监测，同时还能够有效减少人体内
（43.86±1.31）岁，以上一般资料对比 P ＞ 0.05。
受到干扰因素的影响，所以在整个监测过程中都能
1.2 方法
够对标本的初始状态中所含有的靶核酸的含量进行
HBV-DNA 主要通过 COBAS Amplicor 系统检测， 严格控制。但是该种检测方式的实际价格十分昂贵，
第7卷 第3期 2021 年 6 月
生物化工 Biological Chemical Engineering
பைடு நூலகம்
文章编号：2096-0387（2021）03-0097-03
Vol.7 No.3 Jun. 2021
实时荧光定量 PCR 与 PCR-ELISA 在乙型肝炎病毒 DNA 定量检测中的应用比较
吴晓利
Keywords: real-time fluorescent quantitative PCR; PCR-ELISA; hepatitis B virus; DNA quantitative detection
乙型肝炎病毒（HBV）是引发乙型肝炎的主要病 原体，人体在感染乙型肝炎病毒之后的过程是一个 连续且动态的，所以需要选择一个良好的诊断方式 来进行相关的诊断 [1]。PCR-ELISA 主要是通过检 测免疫标志物，如抗一 HBe、HBsAg、HBeAg、抗一 HBs、抗一 HBc 等，能够对病毒的实际状况进行比较
1.3 观察指标
观察分析两组患者的可测定范围、重复性、临床
标本检测结果。
1.4 统计学分析 SPSS20.0 检验数据，将计数资料进行 χ2 值检验，
对 计 量 资 料 进 行 T 值 检 验，P ＜ 0.05 具 有 统 计 学
意义。
2 结果与分析
2.1 检测方法的可测定范围比较
如表 1 所示，两种检测结果差异不大，而且与血
关键词：实时荧光定量 PCR；PCR-ELISA；乙型肝炎病毒；DNA 定量检测 中图分类号：R446.5 文献标识码：A
Application Comparison of Real-time Fluorescence Quantitative PCR and PCR-ELISA in Quantitative Detection of Hepatitis B Virus DNA
3 结语
实时荧光定量 PCR 技术具有费用低、省时等特点， PCR-ELISA 技术具有价格昂贵、重复性和灵敏度高
（下转第 101 页）
第3期
丁梦祥等：灵芝孢子油制备护手霜工艺研究
·101·
考察类别 色泽 香气 膏体 pH 耐热性 耐寒性 离心
表 2 灵芝孢子油护手霜的质量考察
考察指标 乳白色
符合规定香型要求 细腻、均匀一致
其中试剂盒由上海复星科技有限公司提供，所有的检 很难在临床以及相关实验中广泛应用。相比 COBAS
测操作都严格按照相关的规定进行（ELISA 组）。乙 Amplicor，通过荧光定量 PCR 检测具有费用低、省时
型肝炎病毒免疫标志物采用 Light Cycler 配合达安试 省力等优势，所以目前该种方法在临床上的应用也比 剂检测，试剂盒主要由厦门新创公司提供（PCR 组）。 较常见 [4]。
表 2 检测方法的重复性比较
组别 Light Cycler 配合达安试剂
COBAS Amplicor 系统
次数 测定结果 S CV 10 7.89×104 0.36 7.3 10 3.27×105 0.21 3.8
2.3 临床标本检测结果比较 具 体 标 本 检 测 结 果 详 情 见 表 3。 相 比 而 言，
（江南大学无锡医学院，江苏无锡 214122）
摘 要：目的：分析实时荧光定量 PCR 与 PCR-ELISA 在乙型肝炎病毒 DNA 定量检测中的应用情况。方法：选择 2018 年 9 月—2020 年 9 月收治的乙型肝炎患者 22 例，将患者分成 ELISA 组和 PCR 组，每组患者均为 11 人，其中 ELISA 组主要接 受 COBASAmplicor 检测，PCR 组接受 Light Cycler 仪器检测，对比两组患者的可测定范围、重复性、临床标本检测结果。结果： Light Cycler 仪器的实验结果的灵敏度要低于 COBAS Amplicor。 检测结果表明，实时荧光定量 PCR 技术具有费用低、省时等特 点，PCR-ELISA 技术具有价格昂贵、重复性和灵敏度高等特点。
（上接第 98 页）
标本编号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
COBAS Amplicor 系统 2.18×105 6.31×104 4.27×105 9.33×105 3.24×105 7.41×104 1.23×104 5.01×104 1.62×104 1.62×103 9.55×103
Light Cycler 仪器的实验结果的灵敏度要低于 COBAS Amplicor，但是在临床应用过程当中仍然可以满足人 们的需求。COBAS Amplicor 系统的 CV 较低，所以具 有较好的重复性 [5]。在与 COBAS Amplicor 对比的过 程当中也有较好的相关性，所以通过国产试剂配合进 口仪器进行实时荧光定量 PCR 的检测具有一定的临 床价值。但是在应用过程当中一定要注意，由于国产 的试剂盒不同制造批次所表现出来的质量也不同，所 以在选择的时候一定要做好相关的管理和判断。另 外还要注意的是乙性肝炎病毒的发展程度所受到的 相关因素影响比较多，例如患者自身的遗传因素、免 疫状态以及病毒变异情况等，患者在感染乙型肝炎病 毒之后整体的疾病发展是进行状态中的，所以临床的 相关医护人员也要注意 [6]。
4.0~8.5 （40±1）℃保存 1 h、2 h、3 h，恢复至室温后未出现油水分离现象
-5~-10 ℃保存 1 h、2 h、3 h，恢复至室温后未出现油水分离现象 3 000 r/min 离心，未出现油水分离现象
检查结果 1 符合 符合 符合 5.2 符合 符合 符合
检查结果 2 符合 符合 符合 5.2 符合 符合 符合
表 3 临床标本检测结果比较
Light Cycler 配合达安试剂 1.70×104 2.57×103 2.95×104 1.78×105 7.94×104 9.55×103 1.32×103 1.62×103
3.89×103 2.34×103 2.39×104
标本编号 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22
低于检测下限 低于检测下限
COBAS Amplicor 系统 2.39×107 3.43×106 9.44×105 4.25×105 6.08×104 3.25×103 4.87×102
2.2 检测方法的重复性比较 检测方法的重复性见表 2。乙型肝炎病毒是检
测乙型肝炎疾病最主要的检测标志物，在整个乙性 肝炎疾病药物治疗的过程中，对人体内乙型肝炎病
检查结果 3 符合 符合 符合 5.2 符合 符合 符合
参考文献
[1] 李森柱 , 谢意珍 , 周静文 . 灵芝孢子油主要活性成分及降血脂功 能的研究 [J]. 中国食用菌 ,2006,25(5):40-42,52.
[2] 冯翠萍 , 程红艳 , 唐兵 , 等 . 灵芝孢子粉中孢子油提取及生物活 性的研究 [J]. 食用菌学报 ,2008,15(4):63-66.
作者简介：吴晓利（1992—），女，江苏无锡人，硕士，助理实验师，研究方向：生物医学。
·98·
生物化工
2021 年
1 资料与方法
毒 DNA 定 量 检 测 是 十 分 重 要 的。 目 前，临 床上检
1.1 临床基础资料
测乙型肝炎病毒 DNA 的定量方式有很多种，其中
选择 2018 年 9 月—2020 年 9 月收治的乙型肝 COBAS Amplicor 检测 HBV-DNA 的方法已经获得了
炎患者 22 例，将患者分成 ELISA 组和 PCR 组，每组 均为 11 人。其中，ELISA 组中的男性 6 人，女性 5
国际范围的认可，所以整体的准确性和重复性都比较 高 [3]。在应用该种方法进行检测时，主要采用内对照
人，年 龄 在 25~68 岁，平 均（43.82±1.28）岁；PCR 的方式，这样可以有效地对病毒核酸的抽提以及扩
[3] 张智 , 焦春伟 , 胡惠萍 , 等 . 灵芝孢子活性成分抗皮肤衰老功效 [J]. 食用菌学报 ,2011,18(4):51-54.
[4] 熊智 , 吕辰鹏 , 何泉泉 , 等 . 灵芝在化妆品中的应用 [J]. 日用化学 品科学 ,2016,39(3):30-34.
[5] 张晴晴 , 陈先帅 , 喻明军 , 等 . 灵芝孢子粉中孢子油的提取工艺 优化 [J]. 化工管理 ,2017(6):224.
WU XiaoLi (Wuxi School of Medicine ，Jiangnan University)
Abstract: Objective: To analyze the application of real-time fluorescent quantitative PCR and PCR-ELISA in the quantitative detection of hepatitis B virus DNA. Methods: A total of 22 hepatitis B patients admitted from September 2018 to September 2020 were selected. The patients were divided into ELISA group and PCR group. Each group had 11 patients. The ELISA group mainly received COBASAmplicor test, and the PCR group received Light. Cycler instrument test, compare the measurable range, repeatability, and clinical specimen test results of the two groups of patients. Results: The sensitivity of the experimental results of the Light Cycler instrument is lower than that of the COBAS Amplicor. The test results show that the real-time fluorescent quantitative PCR technology has the characteristics of low cost and time saving, and the PCR-ELISA technology has the characteristics of high price, repeatability and high sensitivity.
清的稀释度有一致性，但是相比而言，Light Cycler 配
合达安试剂的灵敏度比较低。
表 1 两组检测方法的可测定范围比较
血清稀释倍数
原倍 10-1 10-2 10-3 10-4 10-5 10-6
Light Cycler 配合达安试剂 2.19×107 1.70×106 1.97×105 2.73×104 2.04×103
准确的反应，但是在运用的过程中仍然存在一定的 局限性。实时荧光定量 PCR 检测 HBv-DNA 含量就 可以直接体现出乙型肝炎病毒的复制情况，所以整 体的敏感性和特异性都比较高 [2]。本次研究主要针 对实时荧光定量 PCR 与 PCR-ELISA 在乙型肝炎病 毒 DNA 定量检测中的应用效果进行了对比分析。
组中的男性 7 人，女性 4 人，年龄在 26~69 岁，平均 增效果进行严格监测，同时还能够有效减少人体内
（43.86±1.31）岁，以上一般资料对比 P ＞ 0.05。
受到干扰因素的影响，所以在整个监测过程中都能
1.2 方法
够对标本的初始状态中所含有的靶核酸的含量进行
HBV-DNA 主要通过 COBAS Amplicor 系统检测， 严格控制。但是该种检测方式的实际价格十分昂贵，
第7卷 第3期 2021 年 6 月
生物化工 Biological Chemical Engineering
பைடு நூலகம்
文章编号：2096-0387（2021）03-0097-03
Vol.7 No.3 Jun. 2021
实时荧光定量 PCR 与 PCR-ELISA 在乙型肝炎病毒 DNA 定量检测中的应用比较
吴晓利
Keywords: real-time fluorescent quantitative PCR; PCR-ELISA; hepatitis B virus; DNA quantitative detection
乙型肝炎病毒（HBV）是引发乙型肝炎的主要病 原体，人体在感染乙型肝炎病毒之后的过程是一个 连续且动态的，所以需要选择一个良好的诊断方式 来进行相关的诊断 [1]。PCR-ELISA 主要是通过检 测免疫标志物，如抗一 HBe、HBsAg、HBeAg、抗一 HBs、抗一 HBc 等，能够对病毒的实际状况进行比较
1.3 观察指标
观察分析两组患者的可测定范围、重复性、临床
标本检测结果。
1.4 统计学分析 SPSS20.0 检验数据，将计数资料进行 χ2 值检验，
对 计 量 资 料 进 行 T 值 检 验，P ＜ 0.05 具 有 统 计 学
意义。
2 结果与分析
2.1 检测方法的可测定范围比较
如表 1 所示，两种检测结果差异不大，而且与血
关键词：实时荧光定量 PCR；PCR-ELISA；乙型肝炎病毒；DNA 定量检测 中图分类号：R446.5 文献标识码：A
Application Comparison of Real-time Fluorescence Quantitative PCR and PCR-ELISA in Quantitative Detection of Hepatitis B Virus DNA
3 结语
实时荧光定量 PCR 技术具有费用低、省时等特点， PCR-ELISA 技术具有价格昂贵、重复性和灵敏度高
（下转第 101 页）
第3期
丁梦祥等：灵芝孢子油制备护手霜工艺研究
·101·
考察类别 色泽 香气 膏体 pH 耐热性 耐寒性 离心
表 2 灵芝孢子油护手霜的质量考察
考察指标 乳白色
符合规定香型要求 细腻、均匀一致
其中试剂盒由上海复星科技有限公司提供，所有的检 很难在临床以及相关实验中广泛应用。相比 COBAS
测操作都严格按照相关的规定进行（ELISA 组）。乙 Amplicor，通过荧光定量 PCR 检测具有费用低、省时
型肝炎病毒免疫标志物采用 Light Cycler 配合达安试 省力等优势，所以目前该种方法在临床上的应用也比 剂检测，试剂盒主要由厦门新创公司提供（PCR 组）。 较常见 [4]。
表 2 检测方法的重复性比较
组别 Light Cycler 配合达安试剂
COBAS Amplicor 系统
次数 测定结果 S CV 10 7.89×104 0.36 7.3 10 3.27×105 0.21 3.8
2.3 临床标本检测结果比较 具 体 标 本 检 测 结 果 详 情 见 表 3。 相 比 而 言，
（江南大学无锡医学院，江苏无锡 214122）
摘 要：目的：分析实时荧光定量 PCR 与 PCR-ELISA 在乙型肝炎病毒 DNA 定量检测中的应用情况。方法：选择 2018 年 9 月—2020 年 9 月收治的乙型肝炎患者 22 例，将患者分成 ELISA 组和 PCR 组，每组患者均为 11 人，其中 ELISA 组主要接 受 COBASAmplicor 检测，PCR 组接受 Light Cycler 仪器检测，对比两组患者的可测定范围、重复性、临床标本检测结果。结果： Light Cycler 仪器的实验结果的灵敏度要低于 COBAS Amplicor。 检测结果表明，实时荧光定量 PCR 技术具有费用低、省时等特 点，PCR-ELISA 技术具有价格昂贵、重复性和灵敏度高等特点。