CL—2000i全自动免疫发光分析FT3、FT4、TSH参考区间验证

CL—2000i全自动免疫发光分析FT3、FT4、TSH参考区间验证目的验证厂家提供的FT3、FT4、TSH参考区间是否适用于该地区，建立
该地区的甲状腺功能三项指标的生物学参考区间，为该地区筛查及诊断甲状腺疾病提供依据。

方法参照美国临检实验室标准化委员（NccLs）C28-A2文件中涉及到的有关参考定义，调查，验证的描述，采用迈瑞全自动化学发光仪及其配套试剂、校准品、质控品，对3 172名健康人群的甲状腺功能三项指标进行检测，检测结果按性别差异进行统计学分析处理。

所得结果与试剂说明书提供参考区间，《全国临床检验操作规程》第4版提供的FT3、FT4、TSH参考区间比较。

结果该次验证不包括50岁以上人群，留取男性2273例进行数据分析，得出男性TSH：0.64～5.56 μIU/mL，16～30岁，FT3：3.53～5.65 pmol/L、FT4：7.06～15.38 pmol/L，31～50岁，FT3：3.58～5.78 pmol/L、FT4：6.69～14.81 pmol/L，女性899名得出：TSH：0.9～6.74 μIU/mL，16～30岁，FT3：3.14～5.43 pmol/L、FT4：5.72～14.22 pmol/L，31～50岁，FT3：3.03～5.23 pmol/L、FT4：5.51～13.93 pmol/L，研究结果分别与试剂说明书和《全国临床检验操作规程》第4版提供的FT3、FT4、TSH参考区间进行χ2 检验，为差异有统计学意义（P＜0.05）。

结论试剂说明书和《全国临床检验操作规程》第4版提供的FT3、FT4、TSH参考区间均不适用于该地区该实验室，建议使用该研究结果作为该地区实验室参考区间。

标签：FT3；FT4；TSH；健康；生物参考区间
生物参考区间是检验结果常用的一项评价指标，为患者疾病的诊断、治疗、预后和筛查提供信息。

游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）、游离甲状腺激素（FT4）、促甲状腺激素（TSH）是反映甲状腺功能最常用的检测指标，常称为“甲状腺功能三项”。

FT3、FT4、TSH以往主要采用放射免疫法和酶联免疫法测定技术。

目前实验室大多采用免疫标记的方法直接测定血清中的激素浓度。

随着免疫测定技术的发展，竞争性荧光免疫分析法、化学发光免疫法和电化学发光免疫法已能灵敏、特异、快速和准确地用于临床血清激素的测定。

许多实验室一般参照试剂说明书或者全国临床检验操作规程设定参考区间，在实际工作中，发现这些参考区间并不适合临床应用，其生物参考区间是解释检验结果分析检验信息是一个基本尺度和依据，实验室只有给临床检验项目提供可靠的生物参考区间，才能使临床医生对患者或健康体检者的诊断治疗有明确的指引[2]。

虽然不同厂家的检测系统提供了各自参考区间，但由于地域、人群等因素的差异，为了更好地服务于临床，提高这些指标对甲状腺疾病符合率，有必要对厂家提供的生物参考区间进行验证或进一步重新设定，这也ISO015189《医学实验室质量和能力认可提准则》及医院等级评审中所要求的内容之一。

按照CLSI文件C28-P3 《医学实验室参考区间的定义、建立和确认》中的推荐方法，参考IS015189：2003（E）《医学实验室一质量和能力的专用要求》条款要求，根据参考区间正确、科学的确定方法，按照建立参考区间的具体操作程序，保证参考区间的可靠、适用。

该研究通过2015—2016年调查该地区3 172名体检者，现报道如下。

1 资料与方法
1.1 一般资料
选取到该院健康体检者3 172名，年龄16～78岁，年龄：（32.02±8.99）岁；其中：男性2 273名，年龄：（32.65±8.98）岁；女性899名，年龄：（30.42±8.47）岁。

按年龄分为3组：①Ⅰ组：16～30岁；②Ⅱ组31～50岁；③Ⅲ组：51～78岁。

入选标准：①没有任何影响检测结果的生理特征；②未服用任何药物并空腹；发育精神正常，无心血管、肺、肾等器质性疾患；③3个月内无输血史和手术史；
④妇女不在月经期、妊娠期、哺乳期；无酗酒史，并按不同年龄段及性别比例；
⑤排除高血压、肝病、胃病、肾病、糖尿病等影响血清FT3、FT4、TSH浓度的疾病，人群职业分布包括学生、公务员、工人、服务人员、高退休人员等合格标本。

入选者均填写“知情同意书”和“健康参考个体资料调查表”。

最终3 127名纳入标准。

晨起空抽腹抽取静脉血3 mL，3 500 r/min离心分离血清，排除溶血、脂血标本。

采用迈瑞（化学发光免疫分析法）试剂（FT3、FT4、TSH），按照说明书设置参数在迈瑞CL-2000i全自动化学发光仪2 h内完成测定，每日开机后先使用配套质控物进行室内质控，室内质控在控后，选择参考个体，建立参考区间计划进行参数数据分析。

1.2 仪器与试剂
迈瑞CL-2000i全自动化学发光免疫分析仪；迈瑞原装FT3、FT4、TSH配套试剂。

迈瑞免疫定值质空控品（水平1批品：IA2638，水平2批号：IA2639）。

1.3 方法
2 h内离心标本取血清上机检测，采用迈瑞（化学发光免疫分析法）试剂，按照说明书设置参数在迈瑞CL-2000i全自动化學发光免疫分析仪上2 h内完成测定，选择参考个体，建立参考区间计划，进行参考数据分析，确定参考数据是否需要继续分组参照NCCLS C28-A2文件。

1.4 统计方法
应用SPSS 17.0 统计学软件进行数据分析，计数资料以率或构成比表示，采用χ2 检验；计量资料以（x±s）表示，采用t 检验。

P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果
该研究通过统计调查建立该地区化学发光免疫法测定FT3、FT4、TSH参考区间，现将结果报道如下。

2.1 不同性别间的比较
FT3（poml/L）：男性（4.82±0.59）、女性（4.23±0.58）（t=25.14，P=0.000）；FT4（poml/L）：男性（10.99±2.13）、女性（9.88±2.19）（t=13.05，P=0.000）；TSH （μIU/mL）：男性（2.46±1.58）、女性（2.92±1.95）（t=-6.93，P=0.000）。

2.2 不同年龄组的比较
FT3（poml/L）：I组（4.74±0.36）、Ⅱ组（4.54±0.64）、Ⅲ组（4.34±0.96）（P=0.000）；FT4（poml/L）：I组（10.83±2.21）、Ⅱ组（10.49±2.14）、Ⅲ组10.23±2.64（P=0.000）；TSH （μIU/mL）：I组（2.16±1.64）、Ⅱ组（2.56±1.79）、Ⅲ组（2.75±1.77）（P=0.000）由此可以得出：男女之间FT3、FT4、TSH结果差异有统计学意义（P＜0.01），不同年龄分组组间结果差异有统计学意义（P＜0.01），进一步做不同性别年龄结果分析如下。

由表1可以得出：不同性别不同年龄组间两两比较结果差异有统计学意义（P ＜0.01），从而按照不同性别、不同年龄段分别建立参考区间如下。

3 讨论
目前临床上对甲亢或甲减患者仍采用经验性治疗的原则，对治疗过程中用药的剂量及周期没有一个明确、统一的标准和界定，在加上个体差异的影响，稍有不慎及易将甲亢治疗成甲减、甲减治疗成甲亢，从而给患者带来巨大的经济负担和心理压力，由于该疾病的发生没有固定的年龄段，在诊断方面，除了一些有明显体征的患者，甲状腺功能检测得结果是临床诊断与鉴别诊断的重要依据，因此，设置准确的生物参考区间是病情分级及制定治疗计划的前提。

因此，我们认为调查该地区甲状腺功能三项指标的正常的生物参考区间是十分重要和必要的。

FT4和FT3的临床意义与TT4和TT3相同，但因不受血清TBG影响，而代表具有生物活性的甲状腺激素的含量，因而具有更重要的临床价值，甲状腺功能亢进对于诊断甲亢来说，FT4、FT3均较灵敏，甲亢时FT3、FT4升高但TSH减低，FT4 FT3的价值更大，甲状腺功能减退大多数口服T4治疗的患者，在服药后1～6 h血中FT4浓度达到高峰，其升高程度与服药剂量有关。

FT4时甲状腺素替代性治疗时很好的检测指标。

妊娠孕妇的血中TBG明显增加，因此，FT4 FT3的检测较TT4 TT3更为准确[3]。

该研究所得男性FT3：3.66～5.98 pmol/L、FT4：6.82～15.16 pmol/L、TSH：0.64～5.56 μIU/mL，女性：FT3：3.10～5.37 pmol/L、FT4：5.59～14.17 pmol/L、TSH：0.90～6.74 uIU/mL，经统计学分析男女间具有差异性，FT3、FT4男性明显高于女性，TSH女性高于男性，该研究与四川地区部分健康人群血清甲状腺激素参考区间的调查[4]FT3、FT4男性明显高于女性，TSH女性高于男性，结果相一致。

结果与迈瑞厂家提供的说明书参考区间不一致，该研究用的试剂是广东地区医院350名健康人血清样本检测分析，统计得出男性与女性95%参考区间为FT3：2.3～4.0 pg/mL、FT4：0.6～1.2 ng/dL、TSH：0.5～7.3 μIU/mL，可能是地域与人群的不同，所致参考区间的差异性[5]。

该次研究结果与第4版《全国临床检验操作规程》比较[6]，具有差异性，
第4版《全国临床检验操作规程》参考区间FT3：1.71～3.70 ng/L、FT4：0.70～1.48 ng/L、TSH：0.2～7.0 μIU/mL，可能使用仪器与检测方法学法的不一致所导致，该研究使用的深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司提供的试剂与第4版《全国临床检验操作规程》用的方法都是化学发光法，但深圳迈瑞厂家用的是碱性磷酸酶来标记T3、T4、TSH，《全国临床检验操作规程》第四版中用的则是吖叮脂标记T3、T4、TSH，可能导致参考区间具有差异性。

综上所述，生物参考区间是诊断疾病的参考依据准确的参考区间是临床诊疗的关键由于性别、年龄、环境、生活习慣、实验室检测系统、方法学等方面的差异，各地区的生物参考区间会有所不同，因此建议该地区的各实验室有必要验证并建立自己的生物参考区间[7]，同时要加强与临床沟通，做好定期比对审核及生物参考区间的验证，从而为甲状腺功能相关疾病的准确诊断和治疗提供依据。

[参考文献]
[1] 王琴，赵小爱.130例中年非甲状腺疾病患者血清FT3、FT4和TSH测定结果分析[J].甘肃医药，2016，35（5）：330-332.
[2] 李小佩，王建新，施秀英，等.BOOtstrap方法建立参考区间的研究[J].检验医学与临床，2016，13（9）：1161-1163.
[3] 刘观昌，马少宁.生物化学检验[M].4版.北京：人民卫生出版社，2015：311-316.
[4] 杨仕良，唐振林.四川地区部分健康人群血清甲状腺激素参考区间的调查[J].检验医学与临床，2016，13（6）：760-762.
[5] 清珍，张向东，王黎红，等.全民食言加碘10年后山东省加碘地区碘缺乏病病调查[J].中国地方病学杂志2007，26（3）：295-396.
[6] 尚红，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程[M].北京：人民卫生出版社，2015.
[7] 陈桂山，杨有业，梁锦胜，等.临床医学实验室生物参考区间的建立[J].检验医学，2008，23（4）：421-424.
（收稿日期：2017-06-09）。