原料药无菌工艺模拟验证国际认证要求

原料药⽆菌⼯艺模拟验证国际认证要求
原料药⽆菌⼯艺模拟验证国际认证要求
⾼海燕1　陈军丽2　丁恩峰3
（1. ⽯药集团恩必普药业有限公司，⽯家庄　050031；2. ⽯家庄市第三医院制剂科，⽯家庄　050031；
3. 英国施达化学集团公司中国代表处，⽯家庄　050031）
在欧美药政法规体系⾥⾯，如果⽆菌制剂采⽤⽆菌原料药（API ）来制备，那么，⽆菌原料药的⽆菌性质对于制剂来说是⾄关重要的。

⽆菌原料药⼀般采⽤两种⽅法来制造：灭菌⼯艺和⽆菌⼯艺。

当原料药采⽤⽆菌⼯艺制造时，因为这种⼯艺⽆菌保证⽔平（SAL ）较低，因此，需要采⽤模拟验证来评估⽆菌⼯艺的保证能⼒。

在⽬前制药⾏业，通常采⽤⽆菌⼯艺模拟验证（也称为培养基灌装）⽅式评估⼯艺⽆菌保证能⼒。

API ；⽆菌⼯艺；模拟验证；培养基灌装；国际认证；美国注射剂协会；⽆菌保证⽔平；微⽣物数据偏差
中图分类号： R951
⽂献标识码： A
⽂章编号： 1008-455X(2011) 02-0024-08
International Certification Requirements for Simulating Validation of
Asepsis Process for Raw Material Drugs
Gao Haiyan, Chen Junli, Ding Enfeng
(1. Shijiazhuang Pharma Group EBP Pharmaceutical Co., Ltd Shijiazhuang, 050031;
2. Shiajiazhuang No. Hospital Shijiazhuang, 050031;
3. China Representative Office, Great Briton Shida Chemical Group Co. Shijiazhuang, 050031)
Abstract: In European and American pharmaceutical system, the asepsis level of asepsis raw material drugs is greatly important if asepsis agent is prepared with asepsis raw material drugs. Generally, asepsis raw material drugs are produced with two processes – sterilization process or asepsis process. If raw material drugs are produced with asepsis process, the simulation validation is needed because sterile assurance level in asepsis process is comparatively low. This is the reason that currently simulation validation is often used for asepsis process.
Keywords: asepsis process; simulation validation is; media filling, international certification; PDA; sterile assurance level; microbial data deviation
关键词
摘要
收稿⽇期：2010-12-28
作者简介：⾼海燕（1976－），⾼级⼯程师，主要从事质量检验、质量保证、质量标准的制定、新药开发、eCTD 编制、计算机系统验证和国际注册等⼯作。

Tel ：0311-********　E-mail ：z hulikou431@/doc/ff4c85ec551810a6f524864c.html
在欧美药政法规体系⾥⾯，如果⽆菌制剂采⽤⽆菌原料药（API ）来制备，那么，⽆菌原料药的⽆菌性质对于制剂来说是⾄关重要的。

⽆菌原料药⼀般采⽤两种⽅法来制造：灭菌⼯艺和⽆菌⼯艺。

当原料药采⽤⽆菌⼯艺制造时，因为这种⼯艺⽆菌保证⽔平（SAL ）较低，因此，需要采⽤模拟验证来评估⽆菌⼯艺的保证能⼒。

在⽬前制药⾏业，通常采⽤⽆菌⼯艺模拟验证（也称为培养基灌装）⽅式评估⼯艺⽆菌保证能⼒。

⽬前制药⾏业对于⽆菌制剂的⼯艺模拟验证研
究较多，⽽对于⽆菌原料药的⼯艺模拟验证研究较少。

例如，⼯艺模拟验证实施细节问题、最后判定标准选择问题等，都存在很多模糊或者错误的认识。

1　各国GMP 法规指南对⽆菌⼯艺验证的要求
对于原料药的管理，中国药政法规和欧美药政法规是不同的。

在欧美国家，原料药不被作为药品来管理，⽽是作为活性物质（API ）来管理。

因为欧美药政法规对于原料药的⽆菌⼯艺模拟验证没有很明确的要求，⽬前法规和指南中可以找到关于⽆菌⼯艺模拟验证的要求，主要适⽤于⽆菌制剂的⼯艺模拟验证。

中国药政法规由于建设较晚，还没有很完善的体系，对于⽆菌原料药⼯艺模拟验证，也没
有针对性的要求。

下⾯列表给出了各国对于⽆菌⼯
艺模拟药政的要求。

2　⽆菌原料药⼯艺模拟验证介绍
2.1　⽆菌原料药⼯艺模拟验证⽅法学问题
在进⾏⽆菌原料药⼯艺模拟验证之前，验证⼈员必须全⾯深刻地评估⽆菌原料药制造⼯艺，并确定⽆菌⼯艺模拟验证的范围，这是⽆菌⼯艺模拟验证成功的关键。

由于⽆菌原料药⽣产⼯艺⼀般包括多个步骤，模拟验证可以采取2种⽅式：第⼀种⽅式：分别评估每部操作的⽆菌保证能⼒；第⼆种⽅式：综合评估⽆菌操作步骤组合的⽆菌保证能⼒。

下⾯介绍这2种⽅式。

2.1.1　⼀次性全部⼯艺模拟⽅法（Total Process Simulation）
分析⽐较，可以得到第⼀种⽅式的优点和缺点如下：
—这种组合模拟⽅法⽐那些分段模拟⽅法更接近实际⼯艺；
—⽐逐个单元模拟节省验证时间；
缺点：
—如果发现污染样品，监测和确定污染来源很困难；
—如果试验失败，在纠正措施制定以后，必须进⾏全部步骤的再次模拟验证，成本很⾼；
—在整个模拟过程中，⼀般要求使⽤单⼀的测试物料（全是液体物料或者全是固体物料），这可能引⼊和实际⼯艺显著不同的操作步骤。

并且污染如何产⽣的情况，也可能和实际⼯艺差距甚⼤。

2.1.2　单元操作模拟⽅法(Unit Operation Simulations)
通过分析和⽐较，可以得到第⼆种⽅式的优点和缺点如下：
优点：
—如果发现污染样品，可以把来源限制在更⼩的范围来调查；
—对特定步骤变更效果的评估可以限制在较⼩的范围；
—如果某个环节失败，在确定纠正措施以后，只需要重复那个失败的环节，这样做较节约成本；
—在某些⼯艺中，这些单元操作的组合，可能
—在不同的步骤可以使⽤不同的物料（固体或者液体），这可能更接近实际情况。

缺点：
—⽐⼀次性模拟验证浪费时间；
—可能要求不同程度的重复⼯作来评估全部⼯艺；
—评估单个单元操作的⽅法可能要求对⽆菌物料更多的处理来满⾜⼀个单独⼯艺模拟测试；
—在每个单元模拟试验中产⽣⼤量的环境监控样品，需要处理，增加验证成本。

2.2　⽆菌⼯艺模拟验证的介质选择问题
2.2.1　模拟验证介质选择原则
根据PDA技术报告 No.28《Process Simulation Testing for Sterile Bulk Pharmaceutical Chemicals》，模拟介质选择原则有两个。

第⼀个原则是，应该选择促微⽣物⽣长培养基、或者安慰剂、或者实际产品（⼀般选择辅料）、或者不使⽤任何介质。

另外，还要确定选⽤液体介质还是固体介质，例如：在结晶⼯艺中，前段⼯艺需要选择液体介质模拟，后段⼯艺需要选择固体介质来模拟验证。

第⼆个原则是，要考虑模拟介质的安全性问题；所选⽤模拟介质不能造成不可消除的潜在污染。

下⾯列表介绍4种模拟介质选择⽅式和优缺点。

—直接选⽤⽆菌的安慰剂可能会节约时间；
—选择的模拟物料不能影响⽆菌检测；
—根据设备和操作⼯艺特点，可能选择液体物料或者固体物料；
—可以选择促微⽣物⽣长物料或者惰性物料；
—在某些⼯艺模拟中，可能会使⽤多种物料；
—不论什么模拟物料，最后包装要接近真实产品。

2.2.3　选择粉末状介质的经验
—⽆菌⼲粉促⽣长培养很少被选择，因为，流动性很差，通过⽆菌处理设备很难；
—根据制药⾏业经验，主要选⽤lactose, mannitol 和pol y eth y lene gl y col；
—⼲粉培养基最常⽤dr y So y bean-Casein Digest Medium (SCDM)⼤⾖消化酪素琼脂培养基；
—被选择物料必须容易灭菌、溶解和分散，不抑制微⽣物的⽣长，⽽且容易在设备⾥⾯被处理。

2.2.4　选择液体模拟介质的经验
—促⽣长培养基容易溶解，可以被选⽤；但是使⽤后的清洁问题需要关注；
—可以选⽤的液体培养基：SCDM（TSB）和peptone broth（蛋⽩胨⾁汤培养基）；
—如果不影响促⽣长能⼒，培养基可以被稀释；
— WFI和其他溶媒可以作为模拟流体，但是溶媒不能具有抗微⽣物活性；
—液体物料⼀般通过0.22 µm⽆菌过滤系统来获得⽆菌性质。

2.3　⽆菌⼯艺模拟验证的前提条件
2.3.1　⽣产设施和设备验证情况
尽管⽆菌⼯艺模拟验证不是正式的⼯艺验证，但是，模拟验证也是针对⽆菌⼯艺本⾝的⼀次较全⾯的评估和核实。

因此，在进⾏⽆菌⼯艺模拟验证之前，⽤于⽣产⽆菌原料药的各种设备和系统，应该先验证并符合相关要求。

2.3.2　公⽤系统验证情况
⽤于⽣产⽆菌原料药的公⽤系统，例如：HV AC 系统、注射⽤⽔系统、纯化⽔系统、压缩空⽓系统、真空系统、蒸汽灭菌系统，以及⽤于空间消毒的臭氧消毒系统等，都应该在⽆菌⼯艺模拟验证之前，先进⾏验证并符合要求。

2.3.3　⽆菌检验⽅法验证情况
为了准确评估⽆菌⼯艺的保证能⼒，正确检测和评估样品的⽆菌性质，⽤于⽆菌检验的⽅法应该
采⽤⽆菌⼯艺制备的⽆菌原料药，多是对热敏感的物料，不能耐受热⼒灭菌⽅法。

在这种情况，⽆菌过滤系统是将⾮⽆菌物料转换为⽆菌物料的关键系统，应该在⽆菌⼯艺模拟验证之前先进⾏验证。

⽆菌过滤系统的验证，除了需要进⾏滤芯和过滤药液相容性研究以外，还应该研究不同过滤时间的影响、完整性测试项⽬和挑战性试验。

2.3.5　相关⽀持灭菌⼯艺验证情况
⼀种⽆菌原料药⽣产过程中，会使⽤结晶罐、溶媒罐、各种流体管道和⽓体管道、还可能会⽤到各种器具以及操作⼈员穿戴的洁净服。

这些设备和器具在⽣产前都应该进⾏灭菌，并应该保存在规定条件下。

这些⽀持系统，在⽆菌⼯艺模拟验证之前，都应该先验证完毕并符合要求。

例如：洁净服的灭菌，需要考察灭菌条件的有效性，还需要考察保留时间（holding time）的长短。

保留时间是⽆菌⼯艺模拟验证中涉及的⼀个⼲扰项⽬，应该给与重视。

2.3.6　清洁规程验证情况
⽆菌⼯艺模拟验证中，很多情况下不是使⽤真实物料进⾏⼯艺模拟，⽽是使⽤促微⽣物⽣长培养基或者安慰剂进⾏⼯艺模拟。

在这种情况下，原来起草的设备或者器具的清洁规程就失去了针对性，应该根据新的情况起草有针对性的清洁规程。

这些专门为⽆菌⼯艺模拟验证起草的清洁规程的验证安排是⼀个问题：如果提前进⾏清洁验证，会浪费很多物料；如果和⽆菌⼯艺模拟验证同时进⾏，⼀旦出现验证失败情况，会很难确定具体原因。

因此，在清洁验证和⽆菌⼯艺模拟验证的安排中，应该基于实际情况和风险分析结果，做出更具有针对性的安排。

2.3.7　⼈员培训和⼈员健康情况
所有参加⽆菌⼯艺模拟验证的⼈员，除了要接受相应岗位规程和知识的培训，都要统⼀参加⽆菌⼯艺模拟验证⽅案的培训。

培训完毕，需要进⾏考核；符合要求者可以参加⽆菌⼯艺模拟验证⼯作。

另外，针对参加验证⼈员的健康检查，也应该根据验证情况来核实最近⼀次⼈员的体检情况。

2.3.8　验证⽂件准备情况
除了按照下⾯第4部分准备验证⽅案和验证报告以外，⽆菌⼯艺模拟验证需要的各种表格、记录和台帐都应该准备完善，和正式⼯艺验证没有很⼤
模拟⽣产批记录是⽆菌⼯艺模拟验证的关键性⽂件，需要由⽣产部门技术⼈员单独起草。

在模拟验证过程中，由于模拟物料的引⼊，导致很多例⾏的⼯艺环节被改变或者被省略，另外，⼀些新的⼯艺环节被加⼊，因此，需要起草⼀份新的专门针对模拟⽣产的批记录。

由于模拟⽣产的产品都是⽤于培养，不会被包装和销售，因此，包装记录⼀般不需要准备。

模拟⽣产样品的检验记录需要根据实际情况专门准备。

2.4　⽆菌⼯艺模拟验证的⽂件管理问题
2.4.1　验证⽅案包含的信息
在⽆菌原料药⼯艺模拟验证之前，需要起草和审核并批准⼯艺验证⽅案。

⼯艺验证⽅案应该包括如下信息：模拟验证的⼯艺描述、⽣产进⾏的区域描述、需要评估的灌装线和设备介绍、容器和密封件类型、灌装速度选择原因、灌装样品数量、模拟验证中要包括的⼲扰和中断的数⽬和类型、参加⼈员数⽬、需要使⽤的培养基或者其他模拟介质、灌装体积、培养条件（例如：培养时间和温度等）、需要进⾏的环境监测计划和规程、批⽣产记录的复印件⼀份、各个测试项⽬的接受标准、选择最差条件的原理和考虑点、阳性样品所处位置描述、促⽣长试验结果、其他要素等。

2.4.2　验证报告包含信息
在验证结束后，应该由验证⼩组负责⼈或者指定⼈员撰写验证报告，内容应该包括如下信息：批⽣产记录是验证报告的重要组成部分，要如实、及时记录各项操作，例如：清洁情况、灭菌情况、样品传递和培养等；对于采⽤的⼲扰条件，要详细记录⼲扰的数量和类型；灌装数量、培养数量、阳性样品数量、拒绝的样品数量（破损容器等）、促⽣长试验结果、⼯艺⽆菌保证能⼒评估的结论。

2.5　⽆菌⼯艺模拟验证的实施细节问题
2.5.1　⼲预情况
为了更好的评估⽆菌⼯艺保证能⼒，在⽆菌⼯艺模拟验证过程中，可以设定⼀些⼲预措施，更好的评估和研究⽆菌⼯艺。

建议如下：
—模拟验证必须包括⽇常操作活动，例如：设备调整、容器密封件输送供应和取样等活动；
—⾮⽇常活动（突发⼲预⾏为）可以加⼊模拟验证；⼊的，例如：液体泄漏、设备停⽌再启动等；
—如果最后模拟验证顺利通过，这些⾮预期⼲预可以作为⽇常活动的⼀部分。

2.5.2　持续时间
根据制药企业的经验，产品暴露时间和⽆菌合格率具有⼀定的关系。

在设计⽆菌⼯艺模拟验证⽅案时，应该考虑如下要求：
—必须保证⾜够⼯艺持续时间来展⽰⽆菌⼯艺的保证能⼒；
—最初的准备活动、设备调整、⼿动维护等应该加⼊模拟验证中；
—模拟验证还应该包括⽇常的，或者⾮典型的⼲预活动；
—作为正常操作的⼀部分，更⾐、中间休息和换班都应该包括在模拟验证中；
—原料药⽣产中和污染相关性最⼤的环节是磨粉和过筛，这些重复⼯作长期进⾏，⼈员对于产品污染影响最⼤，应该给与考虑。

2.5.3　批量选择
批量的选择和最后合格标准具有⼀定关系。

如果模拟验证⽤于⽀持研发申报⼯作，模拟验证批量可以减⼩，保持和研发阶段⽣产批量⼀致即可。

如果模拟验证⼯艺属于商业化⽣产⼯艺，需要考虑如下要求：
—模拟验证应该使⽤⾜够的物料，确保接触所有可能影响⽆菌的设备表⾯；
—批量选择要满⾜可以最⼤程度的模拟实际⼯艺操作；
—模拟验证批量和实际批量不必相同。

2.5.4　培养条件
根据PDA TR No.28和其他相关指南，样品的培养⼀般采取如下条件：
—最少培养14天，这是最低要求；
—培养温度每个公司可以采取不同的策略；
—培养温度应该有利于微⽣物的复活和恢复；这些微⽣物应该主要来⾃环境监控和产品微⽣物检验中发现的微⽣物；
—⼀般选择20 ~ 35℃来培养；更合适的建议是分段培养，就是在20 ~ 25℃范围培养7天，然后在30 ~ 35℃范围培养7天；
—培养期间温度应该持续监控。

2.5.5　操作规程
⽆菌药品的⽣产，要⾮常关注细节和⼈员的熟
操作⼈员提供⾼质量的SOP。

2.5.6　⼈员影响
因为原料药⽣产中，⼈⼯操作环节较多，影响较⼤；应该确保每个员⼯在⼀定周期内⾄少参加⼀次成功的⽆菌⼯艺模拟验证。

如果因为车间⼈员和班次较多，应该⾄少保证再验证时，要将未参加模拟验证的⼈员包括进来。

2.5.7　⽣产周期
因为原料药⽣产的特殊性，⼀些特殊情况需要采⽤特殊办法来处理。

例如：某些公司在密闭系统⾥⾯，连续⽣产多批次原料药⽽不进⾏中间的清洁状态，对于这种模式，模拟验证应该证实这种模式在开放系统⾥⾯的接受可能。

这样做的原因是，任何⼀种产品⽣产不能⼀直处于密闭系统中，在⼀定周期结束后，会进⾏⼀个密闭系统到开放系统的转换，这也是容易染菌的环节，因此，需要关注这个环节。

2.6　⽆菌⼯艺模拟验证的判断标准和结果解释
毫⽆疑问，任何⽆菌药品的⽣产都是追求0污染率。

但是在实际情况下，由于多种客观条件的限制，这个⽬标要达到是有难度的。

对于原料药，在很多环节不可避免的要引⼊很多⼈员操作活动，这些污染⼏率不可避免。

鉴于此，对于⽆菌原料药⼯艺模拟验证接受标准是有不同看法的。

PDA TR No.28提供了两种选择，供⼤家参考选⽤。

2.6.1　定性接受标准
如果原料药制药企业采⽤了⾼度⾃动化的⽣产线，⽽且⽆菌取样和⽆菌检验环节的质量保证⽔平很⾼，可以将0污染率作为⽆菌⼯艺模拟验证的接受标准。

在这种情况下，验证结果就是2种：通过或者失败。

2.6.2　定量接受标准
因为影响最终产品⽆菌性质的环节甚多，所以，⼤部分制药企业不会选择定性接受标准，⽽会选择定量接受标准。

定量接受标准建⽴的基础是：⽆菌制剂的⽆菌性质来⾃⽆菌原料药的⽆差别传递。

在这种情况下，可以将法规⽅对于⽆菌制剂的验证标准折算到⽆菌原料药的⼯艺模拟验证中。

根据FDA《sterile drug products produced b y ase-ptic process-current GMP》2004版指南，⽆菌制剂⼯艺模拟验证合格标准为1/10000，即：⽆菌制剂模我们将这个验证标准折算到⽆菌原料药⼯艺模拟验证中，参见下⾯例⼦。

例⼦：假设某原料药最⼩⽣产批量是200 kg，⽤这种原料药⽣产的⽆菌制剂最⼤装量是10 g，模拟验证中使⽤安慰剂60 kg，所有的模拟验证样品检测后发现2CFU。

计算和推论如下：
—每批次污染⽔平就是2CFU，表明⽣产批次也是这个污染⽔平；
—⽤这批原料药⽣产制剂最⼩单位数量计算：200000 g / 10 g = 20 000 units/batch；
—计算CFU/unit最⼤值：2/20000 = 0.0001 CFU / unit。

结论：因为0.0001CFU/unit和FDA指南推荐的接受标准相同，因此，这种⽆菌原料药⼯艺模拟验证符合要求，通过评估。

2.6.3　阳性样品的调查
⽆菌⼯艺模拟验证结束后，不管验证最后是否通过，任何污染样品都要进⾏调查。

调查要遵循如下原则和⽅法：
—详尽的取样规程和菌种鉴别规程，是调查成功的基础；
—如果⼯艺模拟验证显⽰了污染的可能来源，必须调查；
—调查记录应该保留；
—基于调查结果，污染来源可能是明确的或者是不明确的；
—污染来源可能是单⼀来源，也可能是多来源组合；
—如果来源是明确的，应该建⽴纠正预防措施并形成书⾯规程；
—纠正预防措施可能包括重复进⾏⼯艺模拟验证；
—如果原因没有发现，应该像验证新的⽆菌⼯艺那样来再验证⼀遍。

2.7　⽆菌⼯艺模拟验证的再验证问题
为了定期评估⽆菌⼯艺的保证能⼒，需要针对⼯艺或者设备、设施和⼈员的变化情况，进⾏定期或者改变后的再验证。

2.7.1　再验证的频率问题
如果发⽣影响⽆菌⼯艺保证能⼒的因素变化，应该在变更以后尽快进⾏⽆菌⼯艺模拟再验证。

例如：原料药分装岗位⼈员明显变化后，应该进⾏⽆菌⼯艺模拟再验证。

如果初次验证结束后，在⼀段
化情况，需要定期进⾏再验证。

再验证频率根据PDA TR No.28的建议，可以每年进⾏⼀次。

根据欧美官⽅的期望和经验，每年⾄少进⾏2次⽆菌⼯艺模拟验证。

2.7.2　再验证的批次问题
如果再验证情况属于没有变更发⽣的定期再验证，再验证只需要进⾏⼀批次模拟⽣产验证。

如果再验证属于变更性再验证，根据变更对象和变更程度，需要进⾏1-3批次的模拟⽣产验证。

2.7.3　再验证的批量问题
如果批量在上⼀次验证结束后没有发⽣变化，再验证批量可以和上⼀次验证时的模拟⽣产批量相同。

河北省⽯家庄某制药公司⽣产⽆菌原料药-头孢哌酮钠。

本⽂以此品种为案例，介绍逐步实施⽆菌⼯艺模拟验证的⽅法学和流程。

2.8.1　⽣产⼯艺分析
河北某制药公司⽣产的⽆菌头孢哌酮钠原料药，属于采⽤⽆菌⼯艺制造的典型⽆菌原料药。

主要⼯艺步骤包括：合成、配液、⽆菌过滤、结晶、三合⼀处理、⼲燥、分装和外包装⼯序。

在进⾏原料药⽆菌⼯艺模拟验证前，公司组织质量部、⽣产部、研发部和⼯程部对⼯艺进⾏⽆菌关键性分析。

分析结果见表3：
通过上述⼯艺分析，确定配液、⽆菌过滤、结晶、三合⼀处理、⼲燥、分装等⼯序为⽆菌原料药⼯艺模拟验证范围，需要在模拟测试中评价相关⼯序⽆菌保证能⼒。

2.8.2　验证准备⼯作
根据公司关于验证的管理制度，布置相关⼯作给质量部、⽣产部、QA 、QC 、⼯程部和物料部。

这些⼯作涉及⽆菌车间HV AC 系统和⼯艺⽤⽔验证状态核实、验证包材和培养基选择采购、验证检验试剂的采购等。

2.8.3　⽂件起草和⼈员培训⼯作
由公司⽣产部负责⽆菌⼯艺模拟验证⽅案的起草，同时，负责模拟验证批记录的起草⼯作。

待草案确定后，按照⽂件审核规程，由质量部牵头，组成验证⼩组，专门开会审核验证⽅案和相关记录。

在验证⽅案审核结束后，安排要参加模拟验证的⼈员参加了验证⽅案和批记录的培训⼯作。

2.8.4　模拟物料的选择
因为头孢哌酮钠在⽣产过程中，物料状态存在⼀个转换过程：固体-液体-固体；因此在配液、结晶和三合⼀⼯序采⽤蛋⽩胨⾁汤培养基作为模拟物料，⽽在后续的⼲燥、分装⼯序采⽤流动性和密度都和头孢哌酮钠性质接近的PEG6000来作为模拟物料。

2.8.5　⽆菌⼯艺模拟验证实施过程
在⽆菌⼯艺模拟验证⽅案确定和培训之后，根据⽣产计划，选择⽣产间隙，安排了⽆菌⼯艺模拟验证，连续进⾏了3个批次模拟验证，批量⽐真实产品正常批量减少，为150kg 。

验证结束后，对相关设备进⾏了彻底清洁并灭菌。

表3　对⼯艺的⽆菌关键性分析结果
因为原料药⼯艺模拟验证后，需要培养的样品很多，⼀般的培养箱不能满⾜要求；因此，公司专门建设了具有温湿度控制功能的培养室。

培养室在启⽤之前经过验证⽽且结果合格，在培养样品期间，⼀直有温湿度记录装置在线监控温湿度。

根据指南，选择分段培养条件：在20 ~ 25℃范围培养7天，然后在30 ~ 35℃范围培养7天。

样品培养后，在⼲燥⼯序和分装⼯序样品各发现⼀个阳性样品。

2.8.7　验证结果分析和评价
验证结果计算⽐较如下：头孢哌酮钠⽣产批量是350kg ，在SFDA 数据库查询⽤头孢哌酮钠⽣产的⽆菌制剂最⼤装量是3g ，模拟验证中使⽤安慰剂150kg ，所有的模拟验证样品检测后发现2CFU 。

— 每批次污染⽔平就是2CFU ，表明实际⽣产批次也是这个污染⽔平；
— ⽤这批原料药⽣产制剂最⼩单位数量计算：350000 g/3 g = 116667 units/batch ；
— 计算CFU/unit 最⼤值：2/116667 = 0.000017 CFU/unit 。

结论：因为验证结果（0.000017 CFU/unit ）⽐
头孢哌酮钠⽆菌⼯艺模拟验证符合要求，通过验证。

2.8.8　验证过程中的偏差分析
经过详细调查和收集数据，在连续3批的⽆菌⼯艺模拟验证中，没有发⽣偏差情况，因此，没有涉及偏差处理问题。

尽管验证过程中没有发⽣操作偏差，但是最后样品培养结果显⽰有2个阳性样品，因此，公司按照MDD 调查程序进⾏了调查，并针对调查后的原因进⾏了制度完善⼯作。

参考⽂献：
[1] FDA guidance for industr y ：sterile drug products produced b y
aseptic process-current GMP. September 2004.[2] PIC validation of aseptic process. 2010.
[3] EU GMP anne x 1：manufacture of sterile medicinal products ，
2008.
[4] PDA TR No.22 process simulation testing for asepticall y filled
products.
[5] PDA TR No.28 Process Simulation Testing for Sterile Bulk
Pharmaceutical Chemicals.
[6] SFDA 《药品⽣产质量管理规范》草案（2010年修订）.
的试验相⽐，针对⽣物仿制药开展临床试验的深度和⼴度通常要⼩得多。

然⽽，EMA 并没有提到抗体⽣物仿制药是否可以替代原研药。

⽬前正在进⾏抗体产品开发的MedImmune 称：“我们不⽀持原研⽣物制品与⽣物仿制药产品之间的替换使⽤。

”⽽管理部门对于⼩分⼦仿制药与原研产品未经医师准许的情况下在药房中替换使⽤是允许的。

2010年11⽉，FDA 就2009年制定的⽣物制品价格竞争与创新（BPCI ）法案举⾏听证会。

BPCI 法案的制定有助于缩短FDA 批准具有⾼度相似性或者可替换使⽤的⽣物制品的批准时间。

然⽽，类似替换使⽤的标准仍旧是抗体药物⾯临的⼀⼤挑战。

就在此次听证会上，美国药品研究和⽣产商协会（PHRMA ）的⼀些专利药⽣产者对FDA 表⽰，⽣物仿制药与原研⽣物制品的替换使⽤⽬前还缺乏科学性。

R ituxan 处于⼗字路⼝
到2015年，美国、欧洲和⽇本的⽣物仿制药的市场将超过20亿美元，抗体⽣物仿制药的快速增长主要受原研药专利期满、低成本药物需求增加、慢性病与并发症⽣物药物需求增加等因素影响。

据分析师预测，Ritu x an 将会成为⽣物仿制药开发者的⾸批⽬标。

Ritu x an 在欧洲上市主要是⽤于治疗复发、难治低度
或滤泡性CD20+⾮霍奇⾦淋巴瘤。

今年1⽉，⼭德⼠宣称开始对Ritu x an ⽣物仿制药治疗类风湿性关节炎进⾏Ⅱ期试验。

⼭德⼠还表⽰将在奥地利Schaftenau 建⽴产量很⾼⼤规模的⽣物仿制药⽣产线。

最⼤的仿制药⽣产商以⾊列梯⽡制药与瑞⼠的合同组织Lon z a 建⽴了⽣物仿制药合作伙伴关系，⽬前梯⽡正在开发的TL011是Ritu x imab 的⽣物仿制药，⽽且也在进⾏类风湿性关节炎和⾮霍奇⾦淋巴瘤的临床试验。

另外，今年1⽉6⽇，Spectrum 称公司也计划与加拿⼤的合作伙伴Viropro ⼀起开发Ritu x an ⽣物仿制药。

成本和投资收益
把抗体⽣物仿制药推向市场将会花费巨额资⾦，只有部分公司能够承担得起。

据美国投资公司CollinsSte w art 估计，开发⼀种适应症的单克隆抗体⽣物仿制药将会花费1亿美元，新的治疗性抗体的开发将花8～16年和5亿～10亿美元。

另外，⽣物仿制药尤其是抗体⽣物仿制药并不如⼩分⼦或较简单的⽣物制品节约成本。

据欧洲仿制药协会预测，仿制药每年将会为欧盟节约200亿欧元，不过⽣物制品并⽆仿制药。

据分析师预测，与⼩分⼦药物的仿制药价格平均下降90%相⽐，⽣物仿制药价格将会导致下降20%～30%。

不过⽣物仿制药开发者将会在开发和⽣产投资中寻找最⼤的回报率，如通过缩短临床前和临床试验等。

（上接第23页）。