实验一细菌的形态学检查

微免教研室
抗酸染色法
Xi’an Ｍedical University
痰标本——涂片、干燥、固定 石炭酸复红 加热，染色3-5min 3%盐酸乙醇 脱色，30秒 美蓝复染 1min
❖镜检结果：红色——抗酸菌 蓝色——非抗酸菌
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Xi’an Ｍedical University
革兰染色
1.涂片、干燥、固定 2.结晶紫 初染(1分钟、水洗) 3.碘液 媒染(1分钟、水洗) 4.95%乙醇 脱色(30秒、水洗) 5.稀释复红 复染(1分钟、水洗) 6.低倍镜对光，油镜观察 紫色——G+菌，红色——G-菌
基本形态（示教）
葡萄球菌
肠道杆菌
霍乱弧菌
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一、细菌的基本形态和特殊结构
特殊结构（示教）
伤寒沙门菌的 破伤风梭菌的 产气荚膜梭菌的
鞭毛
芽胞
荚膜
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Xi’an Ｍedical University
二、细菌涂抹标本制作及革兰染色法
材料
1、葡萄球菌、大肠杆菌混合菌液。 2、载玻片、接种环、酒精灯。 3、革兰染色液一套、吸水纸、香柏油。 4、显微镜。
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实验一 细菌的形态学检查
西安医学院 病原生物学与免疫学教研室
目的要求
Xi’an Ｍedical University
掌握细菌的基本形态与特殊结构。 掌握细菌涂片的制作及革兰染色法，并了解其 实际意义；病人痰标本直接涂片及抗酸染色法。 掌握显微镜油镜头的使用与保护。
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实验内容
Xi’an Ｍedical University
抗酸染色
1.涂片、干燥、固定 2.石炭酸复红加热，染色3-
5min 3.3%盐酸乙醇脱色，30秒 4.美蓝复染 1min 5.镜检：红色—抗酸菌
蓝色—非抗酸菌
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香柏油 折光率1.515
玻璃 折光率1.520
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油镜头的使用原理
空气 折光率1.000
一、细菌的形态结构观察 二、细菌涂抹标本片的制作及革兰染色法 三、病人痰标本直接涂片及抗酸染色法 四、油镜的使用与保护 五、活菌运动的观察——压滴法
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思考讨论
Xi’an Ｍedical University
油镜头有哪些标志这一 步掌握不好会对染色结果有何影响？ 革兰染色法的结果怎样判断？有何实际意义？ 抗酸染色过程中应注意什么问题？ 如果痰标本片未查到抗酸菌，可完全排除肺结 核吗？为什么？
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二、细菌涂抹标本制作及革兰染色法
细菌涂抹标本制涂作片、干燥、固定
革兰染色法
结晶紫 初染(1分钟、水洗)
碘液 媒染(1分钟、水洗)
95%乙醇 脱色(30秒、水洗)
稀释复红 复染(1分钟、水洗擦干)
镜检 低倍镜对光、寻找细菌，油镜观察
结果 紫色——G+菌，红色——G-菌
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实验报告
Xi’an Ｍedical University
1、绘图： 葡萄球菌、肠道杆菌、霍乱弧菌、 破伤风梭菌芽胞、伤寒杆菌鞭毛、 产气荚膜梭菌荚膜。
2、记录并分析革兰染色结果。 3、记录并分析抗酸染色结果。
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一、细菌的基本形态和特殊结构